對相關(guān)申請的交叉引用

本專利申請要求2014年9月19日提交的美國申請流水號(hào)62/052,987的優(yōu)先權(quán)權(quán)益，通過提及將該申請收入本文。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑用于治療癌癥的用途。

發(fā)明背景

染色質(zhì)是構(gòu)成染色體的dna和蛋白質(zhì)的復(fù)雜組合。它在真核細(xì)胞的核內(nèi)部找到，并且分成異染色質(zhì)(濃縮)和常染色質(zhì)(延伸)形式。染色質(zhì)的主要成分是dna和蛋白質(zhì)。組蛋白是染色質(zhì)的主要蛋白質(zhì)組分，起dna纏繞的線軸作用。染色質(zhì)的功能是將dna包裝成更小的體積以適應(yīng)細(xì)胞，加強(qiáng)dna以允許有絲分裂和減數(shù)分裂，并且充當(dāng)控制表達(dá)和dna復(fù)制的機(jī)制。染色質(zhì)結(jié)構(gòu)受到對組蛋白蛋白(特別是組蛋白h3和h4)的一系列翻譯后修飾控制，并且最常見在延伸超出核心核小體結(jié)構(gòu)的“組蛋白尾部”內(nèi)。組蛋白尾部趨于對于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用是自由的，并且也是組蛋白中最易于翻譯后修飾的部分。這些修飾包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化、sumo化。這些表遺傳標(biāo)記由特定的酶寫入和消除，所述酶將標(biāo)簽置于組蛋白尾部內(nèi)的特定殘基上，從而形成表遺傳密碼，然后其由細(xì)胞解讀以允許染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的基因特異性調(diào)節(jié)，從而允許轉(zhuǎn)錄。

在所有類別的蛋白質(zhì)中，組蛋白是對翻譯后修飾最易感者之一。組蛋白修飾是動(dòng)態(tài)的，因?yàn)榭梢皂憫?yīng)特定的刺激添加或除去它們，并且這些修飾指導(dǎo)對染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化和基因轉(zhuǎn)錄的改變兩者。獨(dú)特類別的酶，即組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(hat)和組蛋白脫乙酰酶(hdac)使特定的組蛋白賴氨酸殘基乙酰化或脫乙?；?struhlk.,genesdev.,1989,12,5,599-606)。

組蛋白的共價(jià)修飾是控制基因表達(dá)的一種基本機(jī)制，以及真核細(xì)胞中起作用的主要表遺傳機(jī)制之一(kouzarides,cell,128,693-705(2007))。由于獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)限定了基本的細(xì)胞過程，諸如細(xì)胞類型規(guī)范、譜系定向、細(xì)胞活化和細(xì)胞死亡，其異常調(diào)節(jié)是一批疾病的核心(medzhitovetal.,nat.rev.immunol.,9,692-703(2009)；portelaetal.,nat.biotech.,28,1057-1068(2010))?；虮磉_(dá)的表遺傳控制的一種基本組分是通過蛋白質(zhì)解讀組蛋白修飾，所述蛋白質(zhì)含有結(jié)合此類修飾的專門的基序。在它們中，布羅莫結(jié)構(gòu)域(bromodomain)已經(jīng)演變?yōu)榻Y(jié)合乙?；M蛋白，并且通過這樣做，它們代表了染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與基因轉(zhuǎn)錄之間的基本聯(lián)系(fillipakoppoulosetal.,cell,149,214-231(2012))。

在大量的染色質(zhì)相關(guān)蛋白中找到了長大約110個(gè)氨基酸的布羅莫結(jié)構(gòu)域，并且已經(jīng)在大約70種人蛋白質(zhì)中鑒定，通常與其它蛋白質(zhì)基序相鄰(jeanmouginf.,etal.,trendsbiochem.sci.,1997,22,5,151-153；及tamkunj.w.,etal.,cell,1992,7,3,561-572)。布羅莫結(jié)構(gòu)域和經(jīng)修飾的組蛋白之間的相互作用可能是染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化和基因調(diào)控根本的一種重要機(jī)制，含有布羅莫結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)已經(jīng)牽涉疾病過程，包括癌癥、炎癥和病毒復(fù)制。見例如prinjhaetal.,trendspharm.sci.,33(3):146-153(2012)；mulleretal.,expertrev.,13(29):1-20(september2011)；及wyceetal.,oncotarget,4(12):2419-2429(2013)。

細(xì)胞類型特異性和適當(dāng)?shù)慕M織功能性需要嚴(yán)格控制受其環(huán)境緊密影響的獨(dú)特轉(zhuǎn)錄程序。對此轉(zhuǎn)錄穩(wěn)態(tài)的改變與許多疾病狀態(tài)，最特別地癌癥、免疫炎癥、神經(jīng)病癥和代謝疾病直接相關(guān)。布羅莫結(jié)構(gòu)域駐留于用來控制獨(dú)特的疾病相關(guān)轉(zhuǎn)錄途徑的關(guān)鍵染色質(zhì)修飾復(fù)合體內(nèi)。這得到下述觀察結(jié)果突出顯示，即含有布羅莫結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)中的突變與癌癥、以及免疫和神經(jīng)功能障礙相關(guān)。因此，在家族間對布羅莫結(jié)構(gòu)域的選擇性抑制創(chuàng)建了作為人功能障礙中的新治療劑的改變的機(jī)會(huì)。

需要用于癌癥和其它布羅莫結(jié)構(gòu)域相關(guān)疾病的治療。

發(fā)明概述

本發(fā)明的一個(gè)方面提供了一種用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括對所述個(gè)體施用有效量的cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，伴隨施用所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，共配制所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，分開施用所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，序貫施用所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，同時(shí)施用所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，對所述個(gè)體施用所述bet抑制劑，隨后施用所述cbp/ep300抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，對所述個(gè)體施用所述cbp/ep300抑制劑，隨后施用所述bet抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑和所述bet抑制劑的施用減緩癌細(xì)胞的生長的程度比單獨(dú)任一抑制劑的施用要大。

本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了一種在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其中所述癌癥對bet抑制劑有抗性，所述方法包括對所述個(gè)體施用有效量的cbp/ep300抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥選自聽神經(jīng)瘤、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、急性t細(xì)胞白血病、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱癌、腦癌、乳腺癌、支氣管原癌、宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性髓性白血病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊腺癌、彌漫性大b細(xì)胞淋巴瘤、異常增殖變化、胚胎性癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮肉瘤、室管膜瘤、上皮癌、紅白血病、食管癌、雌激素受體陽性乳腺癌、自發(fā)性血小板增多、尤因氏腫瘤、纖維肉瘤、濾泡性淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、重鏈病、頭和頸癌、成血管細(xì)胞瘤、肝瘤、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列腺癌、平滑肌肉瘤、白血病、脂肪肉瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、t細(xì)胞或b細(xì)胞起源的淋巴樣惡性、髓樣癌、髓母細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、髓性白血病、骨髓瘤、粘液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、nut中線癌(nmc)、非小細(xì)胞肺癌(nsclc)、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口癌、成骨性肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、松果體瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、肉瘤、皮脂腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、實(shí)體瘤(癌瘤和肉瘤)、小細(xì)胞肺癌、胃癌、鱗狀細(xì)胞癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥、睪丸腫瘤、子宮癌、和維爾姆斯氏瘤。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是b細(xì)胞增殖性癌癥。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是白血病或淋巴瘤。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是白血病。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是乳腺癌。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是骨髓瘤。

在某些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人。

在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑是hat域抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑是布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。

在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑抑制cbp。

在某些實(shí)施方案中，所述ep300抑制劑抑制ep300。

本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了一種cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑組合，其用于在醫(yī)學(xué)治療或診斷，包括療法和/或治療癌癥中使用。

本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了一種cbp/ep300抑制劑，其用于在醫(yī)學(xué)治療或診斷，包括療法和/或治療癌癥中使用，其中所述癌癥對bet抑制劑有抗性。

在某些實(shí)施方案中，所述癌癥選自聽神經(jīng)瘤、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、急性t細(xì)胞白血病、b細(xì)胞增殖性癌癥、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱癌、腦癌、乳腺癌、支氣管原癌、宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性髓性白血病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊腺癌、彌漫性大b細(xì)胞淋巴瘤、異常增殖變化、胚胎性癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮肉瘤、室管膜瘤、上皮癌、紅白血病、食管癌、雌激素受體陽性乳腺癌、自發(fā)性血小板增多、尤因氏腫瘤、纖維肉瘤、濾泡性淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、重鏈病、頭和頸癌、成血管細(xì)胞瘤、肝瘤、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列腺癌、平滑肌肉瘤、白血病、脂肪肉瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤、t細(xì)胞或b細(xì)胞起源的淋巴樣惡性、髓樣癌、髓母細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、髓性白血病、骨髓瘤、粘液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、nut中線癌(nmc)、非小細(xì)胞肺癌(nsclc)、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口癌、成骨性肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、松果體瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、肉瘤、皮脂腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、實(shí)體瘤(癌瘤和肉瘤)、小細(xì)胞肺癌、胃癌、鱗狀細(xì)胞癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥、睪丸腫瘤、子宮癌、和維爾姆斯氏瘤。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是b細(xì)胞增殖性癌癥。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是白血病或淋巴瘤。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是白血病。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是骨髓瘤。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是乳腺癌。

在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑抑制cbp。在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑抑制ep300。在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑抑制布羅莫結(jié)構(gòu)域。在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑抑制組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶域(hat域)。在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp和/或ep300的hat域。在某些實(shí)施方案中，所述cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp和/或ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域。

在任何方法的某些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人，例如女性或男性。

本發(fā)明的一個(gè)方面是一種cbp/ep300抑制劑，其用于在醫(yī)學(xué)治療或診斷，包括療法和/或治療癌癥中使用，

附圖簡述

圖1：在白血病細(xì)胞系中cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑的協(xié)同效果。

圖2：在乳腺癌細(xì)胞系中cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑的協(xié)同效果。

圖3：bet抑制劑抗性細(xì)胞的產(chǎn)生。

圖4：在bet抑制劑抗性細(xì)胞中的功能障礙性凋亡。

圖5：bet抑制劑抗性細(xì)胞維持myc表達(dá)。

圖6：cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域是bet抑制劑抗性細(xì)胞中的myc表達(dá)需要的。

圖7：cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑阻抑myc并且抑制生長。

圖8：cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制具有獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄影響。a，用sgc-cbp30(2.5μm)或cpi203(0.25μm)將lp-1細(xì)胞處理6小時(shí)，并且使用rna測序測量mrna表達(dá)。相對于配對的dmso對照標(biāo)準(zhǔn)化重復(fù)化合物處理樣品的表達(dá)值以獲得log2倍數(shù)變化值。b，經(jīng)sgc-cbp30處理的lp-1細(xì)胞的gsea的示例富集圖。c，顯示了sgc-cbp30或cpi203處理的顯著富集的基因集的排序列表(按nes計(jì))中，c2數(shù)據(jù)集(msigdb)中與myc或多發(fā)性骨髓瘤+irf4相關(guān)的的基因集的例子。d，irf4靶向與sgc-cbp30，而非cpi203差異表達(dá)(最小值1.5倍，p<0.05)的基因。e，在lp-1中用sgc-cbp30對irf4mrna表達(dá)的劑量依賴性抑制。用化合物將細(xì)胞處理6小時(shí)，并且用q-rtpcr評(píng)估m(xù)rna表達(dá)，并且相對于gapdh標(biāo)準(zhǔn)化。數(shù)值代表n＝3的均值，±sem。f，bet抑制不直接調(diào)節(jié)irf4表達(dá)。用cpi203的滴定系列將lp-1細(xì)胞處理6小時(shí)，并且通過q-rtpcr測定irf4表達(dá)，并且相對于gapdh標(biāo)準(zhǔn)化。數(shù)值代表n＝2的均值，±sem。

圖9：cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制增強(qiáng)低劑量bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制的表型影響。在存在dmso或cpi-529552(3.33μm或10μm)的情況下用cpi-267203的滴定系列處理指定的細(xì)胞系。在cpi-529552的每種濃度，通過對活細(xì)胞計(jì)數(shù)并且相對于在dmso處理?xiàng)l件下的細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化獲得％生長圖(頂部)。通過對具有小于g1dna含量的細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得％subg1圖。

圖10：cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的組合增強(qiáng)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系中的凋亡。用dmso、低劑量cbpi(1.2μmcpi778)、高劑量cbpi(6μmcpi778)、低劑量beti(0.05μmcpi203)、高劑量beti(0.25μmcpi203)、或低劑量cbpi+低劑量beti處理amo-1細(xì)胞。在指定的時(shí)間點(diǎn)時(shí)固定細(xì)胞，并且分析活細(xì)胞數(shù)目(頂部)或％subg1(底部)。

圖11：cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的組合增強(qiáng)對乳腺癌細(xì)胞系的軟瓊脂集落形成的抑制。在軟瓊脂中鋪板指定的細(xì)胞系，并且用dmso、高劑量beti(0.25μmcpi203)、高劑量cbpi(0.175μmcpi821)、低劑量beti(0.04μmcpi203)、低劑量cbpi(0.09μmcpi821)、或低劑量cbpi+低劑量beti處理。在3周后，用mtt將集落染色過夜并且成像。

圖12：cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制的組合對轉(zhuǎn)錄響應(yīng)的幅度具有協(xié)同效應(yīng)。a，熱圖，其顯示了在amo-1細(xì)胞中處理6小時(shí)后通過低劑量cbpi(1.2μmcpi778)、低劑量beti(0.05μmcpi203)、或低劑量cbpi+低劑量beti以至少2倍調(diào)控的基因。b，通過來自a的指定處理上調(diào)或下調(diào)至少2倍的基因的數(shù)目。

圖13：組合的cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑處理具有獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄影響。a，通過與圖5a中一樣，或者用高劑量cbpi(6μmcpi778)或高劑量beti(0.25μmcpi203)處理以至少兩倍調(diào)控的基因的熱圖。b，通過指定處理下調(diào)(頂部)或上調(diào)(底部)的基因的維恩(venn)圖。c，通過用低cbpi+低beti處理上或下調(diào)的基因也通過高劑量beti或高劑量cbpi調(diào)節(jié)的百分比。

圖14：a，基因表，所述基因顯示在用低劑量cbpi和低劑量beti處理后的協(xié)同表達(dá)變化，如圖5中描述的。b，圖，其顯示了指定處理后mycmrna的相對表達(dá)。c，在用低劑量cbpi+低劑量beti處理后以至少1.5倍調(diào)節(jié)，并且通過用高劑量cbpi或高劑量beti處理沒有顯著差異表達(dá)的基因。

圖15：a，凋亡的協(xié)同誘導(dǎo)，如通過在用beti(cpi203,0.05μm)和cbpi(cpi778,1.2μm)處理6天的nci-h929細(xì)胞中sub-g1dna含量的流式細(xì)胞測定測量的。b，在體內(nèi)經(jīng)由cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域的組合抑制增強(qiáng)的效力。將nci-h929細(xì)胞皮下接種入雌性nod-scid小鼠中。在腫瘤可觸知后，用媒介(甲基纖維素)、0.3mpkpocpi821bid(cbpi)、0.5mpkpocpi456bid(beti)、或0.5mpkpocpi456bid+0.3mpkpocpi821bid(beti+cbpi)將小鼠處理19天。以給藥開始時(shí)腫瘤大小的百分比表示腫瘤生長。c，在19天時(shí)量化腫瘤生長。通過雙尾未配對t檢驗(yàn)計(jì)算p值。d，經(jīng)由對cbp/ep300和bet布羅莫結(jié)構(gòu)域的組合抑制增強(qiáng)的對腫瘤中mycmrna的抑制。在b中描述的實(shí)驗(yàn)的最后一劑后4小時(shí)收集腫瘤樣品，并且分離總mrna，并且用于針對myc的q-rtpcr。使用gapdh標(biāo)準(zhǔn)化。數(shù)值是每個(gè)分組中顯示的4只小鼠的均值和sem。通過雙尾未配對t檢驗(yàn)計(jì)算p值。

發(fā)明詳述

本發(fā)明關(guān)注通過藥理學(xué)干擾下列蛋白質(zhì)cbp和/或ep300(本文中也稱為cbp/ep300)中的一種或多種，以及藥理學(xué)干擾bet蛋白來治療癌癥和/或延緩癌癥進(jìn)展的方法。因此，本發(fā)明的某些實(shí)施方案提供cbp/ep300抑制劑與bet抑制劑的組合，用于在預(yù)防或治療性處理癌癥中使用。

定義

如本文中使用的，術(shù)語“cbp/ep300抑制劑”指結(jié)合cbp和/或ep300并抑制和/或降低cbp和/或ep300的生物學(xué)活性的化合物。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑實(shí)質(zhì)性或完全抑制cbp和/或ep300的生物學(xué)活性。在一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是cbp和/或ep300與染色質(zhì)(例如與dna締和的組蛋白)和/或另一種乙?；鞍踪|(zhì)的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是通過cbp和/或ep300的組蛋白乙酰化。在某些實(shí)施方案中，抑制劑具有小于約50μm、小于約1μm、小于約500nm、小于約100nm、或小于約10nm的ic50或結(jié)合常數(shù)。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合并抑制cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或cbphat域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合并抑制ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300hat域。

如本文中使用的，術(shù)語“cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑”指結(jié)合cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域并且抑制和/或降低cbp和/或ep300的生物學(xué)活性的化合物。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑主要(例如僅)經(jīng)由與cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑經(jīng)由cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域以及別的cbp和/或ep300殘基和/或域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑實(shí)質(zhì)性或完全抑制cbp和/或ep300的生物學(xué)活性。在一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是cbp和/或ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)(例如與dna締和的組蛋白)和/或另一種乙?；鞍踪|(zhì)的結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，抑制劑具有小于約50μm、小于約1μm、小于約500nm、小于約100nm、或小于約10nm的ic50或結(jié)合常數(shù)。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑阻斷cbp/ep300活性，從而自對抗原刺激的功能障礙性狀態(tài)恢復(fù)由t細(xì)胞的功能應(yīng)答(例如增殖、細(xì)胞因子生成、靶細(xì)胞殺傷)。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑結(jié)合并且抑制cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑結(jié)合并且抑制ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域。

如本文中使用的，術(shù)語“cbp/ep300組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(hat)抑制劑”或“cbp/ep300hat抑制劑”指結(jié)合cbphat域和/或ep300hat域并且抑制和/或降低cbp和/或ep300的生物學(xué)活性的化合物。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300hat抑制劑主要(例如僅)經(jīng)由與cbphat域和/或ep300hat域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300hat抑制劑經(jīng)由cbphat域和/或ep300hat域以及別的cbp和/或ep300殘基和/或域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300hat域抑制劑實(shí)質(zhì)性或完全抑制cbp和/或ep300的生物學(xué)活性。在一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是cbp和/或ep300的hat域與染色質(zhì)(例如與dna締和的組蛋白)和/或另一種乙?；鞍踪|(zhì)的結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，抑制劑具有小于約50μm、小于約1μm、小于約500nm、小于約100nm、或小于約10nm的ic50或結(jié)合常數(shù)。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300hat域抑制劑結(jié)合并且抑制cbphat域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑結(jié)合并且抑制ep300hat域。

如本文中使用的，術(shù)語“cbp”和“creb結(jié)合蛋白”指來自任何脊椎動(dòng)物來源，包括哺乳動(dòng)物，諸如靈長類(例如人)和嚙齒類(例如小鼠和大鼠)的任何天然cbp，除非另外指明。該術(shù)語涵蓋“全長”、未加工的cbp以及源自細(xì)胞中的加工的cbp的任何形式。該術(shù)語還涵蓋cbp的天然存在的變體，例如剪接變體或等位變體。在一些實(shí)施方案中，一種例示性人cbp的氨基酸序列是uniprotq92793-1。在一些實(shí)施方案中，一種例示性人cbp的氨基酸序列是uniprotq92793-2。在一些實(shí)施方案中，seqidno:1中顯示了一種例示性人cbp的氨基酸序列。

如本文中使用的，術(shù)語“ep300”和“e1a結(jié)合蛋白p300”指來自任何脊椎動(dòng)物來源，包括哺乳動(dòng)物，諸如靈長類(例如人)和嚙齒類(例如小鼠和大鼠)的任何天然ep300，除非另外指明。該術(shù)語涵蓋“全長”、未加工的ep300以及源自細(xì)胞中的加工的ep300的任何形式。該術(shù)語還涵蓋ep300的天然存在的變體，例如剪接變體或等位變體。在一些實(shí)施方案中，一種例示性人ep300的氨基酸序列是uniprotq09472。在一些實(shí)施方案中，seqidno:2中顯示了一種例示性人ep300的氨基酸序列。

如本文中使用的，術(shù)語“bet抑制劑”指結(jié)合bet并抑制和/或降低bet的生物學(xué)活性的化合物。在一些實(shí)施方案中，bet抑制劑實(shí)質(zhì)性或完全抑制bet的生物學(xué)活性。在一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是bet與染色質(zhì)(例如，與dna締和的組蛋白)和/或另一種乙?；鞍踪|(zhì)的結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，bet抑制劑具有小于約50μm、小于約1μm、小于約500nm、小于約100nm、或小于約10nm的ic50或結(jié)合常數(shù)。在一些實(shí)施方案中，bet抑制劑抑制brd2、brd3、brd4和brdt中的一種或多種。

如本文中使用的，術(shù)語“布羅莫結(jié)構(gòu)域和額外末端域”或“bet”指來自任何脊椎動(dòng)物來源，包括哺乳動(dòng)物，諸如靈長類(例如人)和嚙齒類(例如小鼠和大鼠)的任何天然bet，除非另外指明。術(shù)語“bet”指bet家族的成員，包括brd2、brd3、brd4和brdt。該術(shù)語涵蓋“全長”、未加工的bet以及源自細(xì)胞中的加工的bet的任何形式。該術(shù)語還涵蓋bet的天然存在的變體，例如剪接變體或等位變體。

如本文中使用的，術(shù)語“可測量的親和力”和“可測量地抑制”指(i)包含cbp/ep300抑制劑或其組合物的樣品，和(ii)在缺乏所述化合物或其組合物的情況下的等同樣品之間布羅莫結(jié)構(gòu)域的活性的可測量的降低。

“藥學(xué)可接受鹽”包括酸和堿加成鹽兩者。應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)本文中的化合物或?qū)嵗蕴囟}顯示時(shí)，涵蓋相應(yīng)的游離堿以及相應(yīng)的游離堿的其它鹽(包括相應(yīng)的游離堿的藥學(xué)可接受鹽)。

“藥學(xué)可接受酸加成鹽”指那些保留游離堿的生物學(xué)效力和特性且不是在生物學(xué)或其它方面不想要的，用無機(jī)酸和有機(jī)酸形成的鹽，無機(jī)酸諸如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等等，而有機(jī)酸可選自脂肪族、脂環(huán)族、芳香族、芳脂族(araliphatic)、雜環(huán)、羧基、和磺酸類有機(jī)酸，諸如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、馬來酸、丙二酸(maloneicacid)、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、天冬氨酸、抗壞血酸、谷氨酸、氨茴酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、撲酸(embonicacid)、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸(salicyclicacid)等等。

“藥學(xué)可接受堿加成鹽”包括那些由無機(jī)堿衍生的鹽，諸如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁鹽等等。特別地，堿加成鹽是銨、鉀、鈉、鈣和鎂鹽。由藥學(xué)可接受有機(jī)無毒堿衍生的鹽包括伯、仲、和叔胺、取代胺，包括天然存在取代胺、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙氨基乙醇、氨丁三醇、二環(huán)己基胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、海巴明(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可堿、嘌呤類、哌嗪(piperizine)、哌啶、n-乙基哌啶、聚胺樹脂等等。具體的有機(jī)無毒堿是異丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨丁三醇、二環(huán)己基胺、膽堿、和咖啡因。

“溶劑合物”指一個(gè)或多個(gè)溶劑分子與本發(fā)明化合物的締和物或復(fù)合物。溶劑的例子包括水，異丙醇，乙醇，甲醇，dmso，乙酸乙酯，乙酸，和乙醇胺。術(shù)語“水合物”指其中的溶劑分子是水的復(fù)合物。

術(shù)語“藥學(xué)可接受載劑、佐劑或媒介”指不破壞與其一起配制的化合物的藥理學(xué)活性的無毒性載劑、佐劑或媒介。可以在本發(fā)明的組合物中使用的藥學(xué)可接受載劑、佐劑或媒介包括但不限于離子交換劑，礬土，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白質(zhì)，諸如人血清白蛋白，緩沖物質(zhì)，諸如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，諸如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠體硅土，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，基于纖維素的物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蠟，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物，聚乙二醇和羊毛脂。

如本文中使用的，短語“實(shí)質(zhì)性相似”指兩個(gè)數(shù)值(通常一個(gè)與分子有關(guān)，而另一個(gè)與參照/比較分子有關(guān))之間足夠高程度的相似性，使得本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)為兩個(gè)值之間的差異在由所述值(例如kd值)測量的生物學(xué)特征的背景內(nèi)不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。作為參照/比較值的函數(shù)，所述兩個(gè)值之間的差異可以是例如小于約20％、小于約10％和/或小于約5％。短語“基本上正?！笔侵笇?shí)質(zhì)性與參照(例如正常參照)相似。

短語“實(shí)質(zhì)性不同”指兩個(gè)數(shù)值(通常一個(gè)與分子有關(guān)，而另一個(gè)與參照/比較分子有關(guān))之間的足夠高程度的差異，使得本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)為兩個(gè)值之間的差異在由所述值(例如kd值)測量的生物學(xué)特征的背景內(nèi)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。作為參照/比較分子值的函數(shù)，所述兩個(gè)值之間的差異可以是例如大于約10％、大于約20％、大于約30％、大于約40％和/或大于約50％。

藥劑(例如藥物配制劑)的“有效量”指以必要的劑量和時(shí)間段有效實(shí)現(xiàn)期望的治療或防范結(jié)果的量。在一些實(shí)施方案中，有效量指cbp/ep300和/或bet抑制劑的如下量，其(i)治療本文所述特定疾病，狀況，或病癥，(ii)減輕，改善，或消除特定疾病，狀況，或病癥的一種或多種癥狀，或(iii)預(yù)防或延遲特定疾病，狀況，或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)作。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300和/或bet抑制劑的有效量可減少癌細(xì)胞數(shù)；縮小腫瘤體積；抑制(即一定程度的減緩，優(yōu)選停止)癌細(xì)胞浸潤到周圍器官中；抑制(即一定程度的減緩，優(yōu)選停止)腫瘤轉(zhuǎn)移；一定程度的抑制腫瘤生長；和/或一定程度的減輕與癌癥有關(guān)的一種或多種癥狀。對于癌癥療法，可以通過評(píng)價(jià)距疾病進(jìn)展的時(shí)間(ttp)和/或測定響應(yīng)率(rr)來測量功效。在一些實(shí)施方案中，有效量是足以顯著降低藥物耐受性或藥物耐受性持續(xù)性癌細(xì)胞的活性或數(shù)目的本文中描述的化學(xué)實(shí)體的量。

“治療”(及變化形式，諸如“處理”或“處置”)指試圖改變所治療個(gè)體或細(xì)胞的自然進(jìn)程的臨床干預(yù)，可以是為了預(yù)防或在臨床病理學(xué)的進(jìn)程中進(jìn)行。治療的期望效果包括下列一項(xiàng)或多項(xiàng)：預(yù)防疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)、緩解癥狀、削弱疾病的任何直接或間接病理學(xué)后果、疾病的穩(wěn)定化(即不惡化)狀態(tài)、預(yù)防轉(zhuǎn)移、減緩疾病進(jìn)展的速率、改善或減輕疾病狀態(tài)、與不接受治療時(shí)預(yù)期的存活相比延長存活及消退或改善預(yù)后。在某些實(shí)施方案中，使用cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑來延遲疾病或病癥的發(fā)生，或減緩疾病或病癥的進(jìn)展。需要治療的那些個(gè)體包括那些已經(jīng)具有狀況或病癥的個(gè)體以及那些易于具有狀況或病癥的個(gè)體(例如經(jīng)由遺傳突變或基因或蛋白質(zhì)的異常表達(dá))或那些要預(yù)防狀況或病癥的個(gè)體。

如本文中使用的，“延遲疾病的進(jìn)展”意指延遲、阻礙、減緩、妨礙、穩(wěn)定化、和/或推遲疾病(諸如癌癥)的形成。此延遲可以是不同時(shí)間長度的，這取決于疾病史和/或所治療的個(gè)體。如對于本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯的，足夠或顯著的延遲可以實(shí)際上涵蓋預(yù)防，因?yàn)閭€(gè)體不形成疾病。例如，可以延遲晚期階段癌癥，諸如轉(zhuǎn)移的形成。

如本文中使用的，術(shù)語“患者”或“個(gè)體”指動(dòng)物，諸如哺乳動(dòng)物，諸如人。在一些實(shí)施方案中，患者或個(gè)體指人。

如本文中使用的，術(shù)語“細(xì)胞毒劑”指抑制或阻止細(xì)胞功能和/或引起細(xì)胞死亡或破壞的物質(zhì)。細(xì)胞毒劑包括但不限于放射性同位素(例如at²¹¹、i¹³¹、i¹²⁵、y⁹⁰、re¹⁸⁶、re¹⁸⁸、sm¹⁵³、bi²¹²、p³²、pb²¹和lu的放射性同位素)；化療劑；生長抑制劑；酶及其片段，諸如核水解酶；和毒素，諸如小分子毒素或細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物起源的酶活性毒素，包括其片段和/或變體。例示性的細(xì)胞毒劑可以選自抗微管劑、鉑配位復(fù)合物、烷化劑、抗生劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶i抑制劑、激素和激素類似物、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑、非受體酪氨酸激酶血管發(fā)生抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑、ldh-a抑制劑；脂肪酸生物合成抑制劑；細(xì)胞周期信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑；hdac抑制劑、蛋白酶體抑制劑；和癌癥代謝抑制劑。

在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑選自抗微管劑、鉑配位復(fù)合物、烷化劑、抗生劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶ii抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶i抑制劑、激素和激素類似物、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑抑制劑、非受體酪氨酸激酶血管發(fā)生抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑、ldh-a抑制劑、脂肪酸生物合成抑制劑、細(xì)胞周期信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、hdac抑制劑、蛋白酶體抑制劑、和癌癥代謝抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑是紫杉烷。在一個(gè)實(shí)施方案中，紫杉烷是帕利他賽(paclitaxel)或多西他賽(docetaxel)。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑是鉑劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑是egfr拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，egfr拮抗劑是n-(3-乙炔基苯基)-6,7-二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(例如厄洛替尼(erlotinib))。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑是raf抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，raf抑制劑是braf和/或craf抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，raf抑制劑是威羅菲尼(vemurafenib)。在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒劑是pi3k抑制劑。

“化療劑”包括在治療癌癥中有用的化學(xué)化合物?；焺┑睦影ǘ蚵逄婺?erlotinib)(genentech/osipharm.)，硼替佐米(bortezomib)(millenniumpharm.)，雙硫侖(disulfiram)，沒食子酸表沒食子兒茶精(epigallocatechingallate)，salinosporamidea，carfilzomib，17-aag(格爾德霉素(geldanamycin))，根赤殼菌素(radicicol)，乳酸脫氫酶a(ldh-a)，氟維司群(fulvestrant)(astrazeneca)，舒尼替尼(sunitib)(pfizer/sugen)，來曲唑(letrozole)(novartis)，甲磺酸伊馬替尼(imatinibmesylate)(novartis)，finasunate(novartis)，奧沙利鉑(oxaliplatin)(sanofi)，5-fu(5-氟尿嘧啶)，甲酰四氫葉酸(leucovorin)，雷帕霉素(rapamycin)(西羅莫司(sirolimus)，wyeth)，拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016，glaxosmithkline)，lonafamib(sch66336)，索拉非尼(sorafenib)(bayerlabs)，吉非替尼(gefitinib)(astrazeneca)，ag1478，烷化劑類(alkylatingagents)，諸如塞替派(thiotepa)和環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)；磺酸烷基酯類(alkylsulfonates)，諸如白消安(busulfan)，英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶類(aziridines)，諸如苯佐替派(benzodopa)，卡波醌(carboquone)，美妥替派(meturedopa)，和烏瑞替派(uredopa)；乙撐亞胺類(ethylenimines)和甲基蜜胺類(methylamelamines)，包括六甲蜜胺(altretamine)，三乙撐蜜胺(triethylenemelamine)，三乙撐磷酰胺(triethylenephosphoramide)，三乙撐硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羥甲蜜胺(trimethylomelamine)；番荔枝內(nèi)酯類(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；喜樹堿(camptothecin)(包括托泊替康(topotecan)和伊立替康(irinotecan))；苔蘚抑素(bryostatin)；callystatin；cc-1065(包括其阿多來新(adozelesin)，卡折來新(carzelesin)和比折來新(bizelesin)合成類似物)；隱藻素類(cryptophycins)(特別是隱藻素1和隱藻素8)；腎上腺皮質(zhì)類固醇類(adrenocorticosteroids)，包括潑尼松(prednisone)和潑尼松龍(prednisolone)；醋酸環(huán)丙孕酮(cyproteroneacetate)；5α-還原酶，包括非那雄胺(finasteride)和度他雄胺(dutasteride)；vorinostat,romidepsin,panobinostat,丙戊酸(valproicacid),mocetinostat多拉司他汀(dolastatin)；阿地白介素(aldesleukin),滑石(talc)duocarmycin(包括合成類似物，kw-2189和cb1-tm1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；海綿抑素(spongistatin)；氮芥類(nitrogenmustards)，諸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)，萘氮芥(chlomaphazine)，膽磷酰胺(chlorophosphamide)，雌莫司汀(estramustine)，異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)，雙氯乙基甲胺(mechlorethamine)，鹽酸氧氮芥(mechlorethamineoxidehydrochloride)，美法侖(melphalan)，新氮芥(novembichin)，苯芥膽甾醇(phenesterine)，潑尼莫司汀(prednimustine)，曲磷胺(trofosfamide)，尿嘧啶氮芥(uracilmustard)；亞硝脲類(nitrosoureas)，諸如卡莫司汀(carmustine)，氯脲菌素(chlorozotocin)，福莫司汀(fotemustine)，洛莫司汀(lomustine)，尼莫司汀(nimustine)，和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素類，諸如烯二炔類抗生素(例如加利車霉素(calicheamicin)，尤其是加利車霉素γ1i和加利車霉素ω1i(angewchem.intl.ed.engl.1994,33:183-186)；蒽環(huán)類抗生素(dynemicin)，包括dynemicina；二膦酸鹽類(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)；埃斯波霉素(esperamicin)；以及新制癌素(neocarzinostatin)發(fā)色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔類抗生素發(fā)色團(tuán))，阿克拉霉素(aclacinomysins)，放線菌素(actinomycin)，氨茴霉素(authramycin)，偶氮絲氨酸(azaserine)，博來霉素(bleomycin)，放線菌素c(cactinomycin)，carabicin，洋紅霉素(caminomycin)，嗜癌霉素(carzinophilin)，色霉素(chromomycinis)，放線菌素d(dactinomycin)，柔紅霉素(daunorubicin)，地托比星(detorubicin)，6-二氮-5-氧-l-正亮氨酸，(多柔比星(doxorubicin))，嗎啉代多柔比星，氰基嗎啉代多柔比星，2-吡咯代多柔比星和脫氧多柔比星)，表柔比星(epirubicin)，依索比星(esorubicin)，伊達(dá)比星(idarubicin)，麻西羅霉素(marcellomycin)，絲裂霉素(mitomycin)諸如絲裂霉素c，霉酚酸(mycophenolicacid)，諾拉霉素(nogalamycin)，橄欖霉素(olivomycin)，培洛霉素(peplomycin)，泊非霉素(porfiromycin)，嘌呤霉素(puromycin)，三鐵阿霉素(quelamycin)，羅多比星(rodorubicin)，鏈黑菌素(streptonigrin)，鏈佐星(streptozocin)，殺結(jié)核菌素(tubercidin)，烏苯美司(ubenimex)，凈司他丁(zinostatin)，佐柔比星(zorubicin)；抗代謝物類，諸如甲氨蝶呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(fluorouracil)(5-fu)；葉酸類似物，諸如二甲葉酸(denopterin)，甲氨蝶呤，蝶酰三谷氨酸(pteropterin)，三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤類似物，諸如氟達(dá)拉濱(fludarabine)，6-巰基嘌呤(mercaptopurine)，硫咪嘌呤(thiamiprine)，硫鳥嘌呤(thioguanine)；嘧啶類似物，諸如安西他濱(ancitabine)，阿扎胞苷(azacitidine)，6-氮尿苷，卡莫氟(carmofur)，阿糖胞苷(cytarabine)，雙脫氧尿苷(dideoxyuridine)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，依諾他濱(enocitabine)，氟尿苷(floxuridine)；雄激素類，諸如卡魯睪酮(calusterone)，丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)，表硫雄醇(epitiostanol)，美雄烷(mepitiostane)，睪內(nèi)酯(testolactone)；抗腎上腺類，諸如氨魯米特(aminoglutethimide)，米托坦(mitotane)，曲洛司坦(trilostane)；葉酸補(bǔ)充劑，諸如亞葉酸(frolinicacid)；醋葡醛內(nèi)酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamideglycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinicacid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依達(dá)曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfomithine；依利醋銨(elliptiniumacetate)；epothilone；依托格魯(etoglucid)；硝酸鎵；羥脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼達(dá)明(lonidainine)；美登木素生物堿類(maytansinoids)，諸如美登素(maytansine)和安絲菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌達(dá)醇(mopidamnol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；噴司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinicacid)；2-乙基酰肼(ethylhydrazide)；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖復(fù)合物(jhsnaturalproducts,eugene,oreg.)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西索菲蘭(sizofuran)；螺旋鍺(spirogermanium)；細(xì)交鏈孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亞胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；單端孢菌素類(trichothecenes)(尤其是t-2毒素，疣孢菌素(verracurin)a，桿孢菌素(roridin)a和蛇行菌素(anguidine))；烏拉坦(urethan)；長春地辛(vindesine)；達(dá)卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴衛(wèi)矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“ara-c”)；環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)；塞替派(thiotepa)；類紫杉醇(taxoids)，例如泰素(taxol)(帕利他賽(paclitaxel)；bristol-myerssquibboncology,princeton,n.j.)，(無克列莫佛(cremophor)的)，帕利他賽的清蛋白改造的納米顆粒劑型(americanpharmaceuticalpartners,schaumberg,ill.)和泰索帝(多西他賽(docetaxel，doxetaxel)；sanofi-aventis)；苯丁酸氮芥(chloranmbucil)；(吉西他濱(gemcitabine))；6-硫鳥嘌呤(thioguanine)；巰基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤(methotrexate)；鉑類似物，諸如順鉑(cisplatin)和卡鉑(carboplatin)；長春堿(vinblastine)；依托泊苷(etoposide)(vp-16)；異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；長春新堿(vincristine)；(長春瑞濱(vinorelbine))；能滅瘤(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依達(dá)曲沙(edatrexate)；道諾霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；卡培他濱(capecitabine)伊本膦酸鹽(ibandronate)；cpt-11；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑rfs2000；二氟甲基鳥氨酸(dmfo)；類視黃酸(retinoids)，諸如視黃酸(retinoicacid)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物。

化療劑還包括(i)起調(diào)節(jié)或抑制激素對腫瘤作用的作用的抗激素劑，諸如抗雌激素類和選擇性雌激素受體調(diào)控物類(serm)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括檸檬酸他莫昔芬)，雷洛昔芬(raloxifene)，屈洛昔芬(droloxifene)，iodoxyfene，4-羥基他莫昔芬，曲沃昔芬(trioxifene)，那洛昔芬(keoxifene)，ly117018，奧那司酮(onapristone)，和(檸檬酸托瑞米芬(toremifinecitrate))；(ii)抑制在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素生成的芳香酶的芳香酶抑制劑，諸如例如4(5)-咪唑，氨魯米特(aminoglutethimide)，(醋酸甲地孕酮(megestrolacetate))，(依西美坦(exemestane)；pfizer)，福美坦(formestanie)，法倔唑(fadrozole)，(伏羅唑(vorozole))，(來曲唑(letrozole)；novartis)，和(阿那曲唑(anastrozole)；astrazeneca)；(iii)抗雄激素類，諸如氟他米特(flutamide)，尼魯米特(nilutamide)，比卡米特(bicalutamide)，亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；布舍瑞林(buserelin)，曲普瑞林(tripterelin)，醋酸甲羥孕酮(medroxyprogesteroneacetate)，己烯雌酚(diethylstilbestrol)，倍美力(premarin)，氟甲睪酮(fluoxymesterone)，全反式視黃酸，芬維a胺(fenretinide)，以及曲沙他濱(troxacitabine)(1,3-二氧戊環(huán)核苷胞嘧啶類似物)；(iv)蛋白質(zhì)激酶抑制劑；(v)脂質(zhì)激酶抑制劑；(vi)反義寡核苷酸，特別是抑制牽涉異常細(xì)胞增殖的信號(hào)傳導(dǎo)途經(jīng)中的基因表達(dá)的反義寡核苷酸，諸如例如pkc-α，ralf和h-ras；(vii)核酶，諸如vegf表達(dá)抑制劑(例如)和her2表達(dá)抑制劑；(viii)疫苗，諸如基因療法疫苗，例如和ril-2；拓?fù)洚悩?gòu)酶1抑制劑，諸如rmrh；和(ix)及任何上述藥劑的藥學(xué)可接受鹽，酸和衍生物。

化療劑還包括抗體，諸如阿侖珠單抗(alemtuzumab)(campath)，貝伐珠單抗(bevacizumab)(genentech)，西妥昔單抗(cetuximab)(imclone)；帕尼單抗(panitumumab)(amgen)，利妥昔單抗(rituximab)(genentech/biogenidec)，帕妥珠單抗(pertuzumab)(2c4，genentech)，曲妥珠單抗(genentech)，托西莫單抗(tositumomab)(bexxar，corixia)，和抗體藥物綴合物，吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumabozogamicin)(wyeth)。具有作為與本發(fā)明化合物組合的藥劑的治療潛力的別的人源化單克隆抗體包括：阿泊珠單抗(apolizumab)，阿塞珠單抗(aselizumab)，atlizumab，巴匹珠單抗(bapineuzumab)，bivatuzumabmertansine，莫坎妥珠單抗(cantuzumabmertansine)，西利珠單抗(cedelizumab)，培舍珠單抗(certolizumabpegol)，cidfusituzumab，cidtuzumab，達(dá)克珠單抗(daclizumab)，依庫珠單抗(eculizumab)，依法珠單抗(efalizumab)，依帕珠單抗(epratuzumab)，厄利珠單抗(erlizumab)，非維珠單抗(felvizumab)，芳妥珠單抗(fontolizumab)，吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumabozogamicin)，英妥珠單抗奧佐米星(inotuzumabozogamicin)，伊匹木單抗(ipilimumab)，拉貝珠單抗(labetuzumab)，林妥珠單抗(lintuzumab)，馬妥珠單抗(matuzumab)，美泊利單抗(mepolizumab)，莫維珠單抗(motavizumab)，motovizumab，那他珠單抗(natalizumab)，尼妥珠單抗(nimotuzumab)，nolovizumab，numavizumab，ocrelizumab，奧馬珠單抗(omalizumab)，帕利珠單抗(palivizumab)，帕考珠單抗(pascolizumab)，pecfusituzumab，pectuzumab，培克珠單抗(pexelizumab)，ralivizumab，雷珠單抗(ranibizumab)，reslivizumab，瑞利珠單抗(reslizumab)，resyvizumab，羅維珠單抗(rovelizumab)，盧利珠單抗(ruplizumab)，西羅珠單抗(sibrotuzumab)，西利珠單抗(siplizumab)，索土珠單抗(sontuzumab)，tacatuzumabtetraxetan，tadocizumab，他利珠單抗(talizumab)，特非珠單抗(tefibazumab)，托珠單抗(tocilizumab)，托利珠單抗(toralizumab)，tucotuzumab西莫白介素(celmoleukin)，tucusituzumab，umavizumab，烏珠單抗(urtoxazumab)，優(yōu)特克單抗(ustekinumab)，維西珠單抗(visilizumab)，和抗白介素-12(abt-874/j695，wyethresearchandabbottlaboratories)，其為經(jīng)遺傳修飾以識(shí)別白介素-12p40蛋白的重組專有人序列全長igg1λ抗體。

化療劑還包括“egfr抑制劑”，其指結(jié)合egfr或以其它方式直接與egfr相互作用并阻止或降低其信號(hào)傳導(dǎo)活性的化合物，其另外還稱作“egfr拮抗劑”。此類藥劑的例子包括結(jié)合egfr的抗體和小分子。結(jié)合egfr的抗體的例子包括mab579(atcccrlhb8506)，mab455(atcccrlhb8507)，mab225(atcccrl8508)，mab528(atcccrl8509)(參見美國專利no.4,943,533，mendelsohn等人)及其變體，諸如嵌合化的225(c225或西妥昔單抗；)和重構(gòu)的人225(h225)(參見wo96/40210，imclonesystermsinc.)；imc-11f8，一種完全人的egfr靶向抗體(imclone)；結(jié)合ii型突變體egfr的抗體(美國專利no.5,212,290)；結(jié)合egfr的人源化和嵌合抗體，如美國專利no.5,891,996中所述；和結(jié)合egfr的人抗體，諸如abx-egf或帕尼單抗(panitumumab)(參見wo98/50433，abgenix/amgen)；emd55900(stragliottoetal.,eur.j.cancer32a:636-640(1996))；emd7200(matuzumab)，一種針對egfr且與egf和tgf-α二者競爭egfr結(jié)合的人源化egfr抗體(emd/merck)；人egfr抗體，humax-egfr(genmab)；稱作e1.1，e2.4，e2.5，e6.2，e6.4，e2.11，e6.3和e7.6.3且描述在us6,235,883中的完全人抗體；mdx-447(medarexinc)；和mab806或人源化mab806(johnsetal.,j.biol.chem.279(29):30375-30384(2004))?？筫gfr抗體可與細(xì)胞毒劑綴合，由此產(chǎn)生免疫綴合物(參見例如ep659,439a2，merckpatentgmbh)。egfr拮抗劑包括小分子，諸如美國專利no.5,616,582，5,457,105，5,475,001，5,654,307，5,679,683，6,084,095，6,265,410，6,455,534，6,521,620，6,596,726，6,713,484，5,770,599，6,140,332，5,866,572，6,399,602，6,344,459，6,602,863，6,391,874，6,344,455，5,760,041，6,002,008，和5,747,498，以及pct公開文本wo98/14451，wo98/50038，wo99/09016，和wo99/24037中描述的化合物。具體的小分子egfr拮抗劑包括osi-774(cp-358774，厄洛替尼(erlotinib)，genentech/osipharmaceuticals)；pd183805(ci1033，2-丙烯酰胺，n-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-，二氫氯化物，pfizerinc.)；zd1839，吉非替尼(gefitinib)4-(3’-氯-4’-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基)喹唑啉，astrazeneca)；zm105180((6-氨基-4-(3-甲基苯基-氨基)-喹唑啉，zeneca)；bibx-1382(n8-(3-氯-4-氟-苯基)-n2-(1-甲基-哌啶-4-基)-嘧啶并[5,4-d]嘧啶-2,8-二胺，boehringeringelheim)；pki-166((r)-4-[4-[(1-苯基乙基)氨基]-1h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚)；(r)-6-(4-羥基苯基)-4-[(1-苯基乙基)氨基]-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶)；cl-387785(n-[4-[(3-溴苯基)氨基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔酰胺)；ekb-569(n-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺)(wyeth)；ag1478(pfizer)；ag1571(su5271；pfizer)；雙重egfr/her2酪氨酸激酶抑制劑，諸如拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016或n-[3-氯4-[(3氟苯基)甲氧基]苯基]-6[5[[[2甲基磺?；?乙基]氨基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺)。

化療劑還包括“酪氨酸激酶抑制劑”，包括前一段中提到的egfr靶向藥物；小分子her2酪氨酸激酶抑制劑，諸如可從takeda獲得的tak165；cp-724,714，一種口服erbb2受體酪氨酸激酶選擇性抑制劑(pfizer和osi)；優(yōu)先結(jié)合egfr但抑制her2和egfr過表達(dá)細(xì)胞二者的雙重her抑制劑，諸如ekb-569(可從wyeth獲得)；拉帕替尼(lapatinib)(gsk572016；可從glaxo-smithkline獲得)，一種口服her2和egfr酪氨酸激酶抑制劑；pki-166(可從novartis獲得)；泛her抑制劑，諸如卡奈替尼(canertinib)(ci-1033；pharmacia)；raf-1抑制劑，諸如可從isispharmaceuticals獲得的，抑制raf-1信號(hào)傳導(dǎo)的反義藥劑isis-5132；非her靶向tk抑制劑，諸如甲磺酸伊馬替尼(可得自glaxosmithkline)；多靶向酪氨酸激酶抑制劑，諸如舒尼替尼(sunitinib)(可從pfizer獲得)；vegf受體酪氨酸激酶抑制劑，諸如瓦他拉尼(vatalanib)(ptk787/zk222584，可從novartis/scheringag獲得)；mapk胞外調(diào)控激酶i抑制劑ci-1040(可從pharmacia獲得)；喹唑啉類，諸如pd153035，4-(3-氯苯胺基)喹唑啉；吡啶并嘧啶類；嘧啶并嘧啶類；吡咯并嘧啶類，諸如cgp59326，cgp60261和cgp62706；吡唑并嘧啶類，4-(苯基氨基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶類；姜黃素(二阿魏酰甲烷，4,5-雙(4-氟苯胺基)-酞酰亞胺)；含有硝基噻吩模塊的tyrphostine；pd-0183805(warner-lamber)；反義分子(例如那些與編碼her的核酸結(jié)合的反義分子)；喹喔啉類(美國專利no.5,804,396)；tryphostins(美國專利no.5,804,396)；zd6474(astrazeneca)；ptk-787(novartis/scheringag)；泛her抑制劑，諸如ci-1033(pfizer)；affinitac(isis3521；isis/lilly)；甲磺酸伊馬替尼pki166(novartis)；gw2016(glaxosmithkline)；ci-1033(pfizer)；ekb-569(wyeth)；semaxinib(pfizer)；zd6474(astrazeneca)；ptk-787(novartis/scheringag)；inc-1c11(imclone)，雷帕霉素(西羅莫司，)；或任何下列專利公開文本中描述的：美國專利no.5,804,396；wo1999/09016(americancyanamid)；wo1998/43960(americancyanamid)；wo1997/38983(warnerlambert)；wo1999/06378(warnerlambert)；wo1999/06396(warnerlambert)；wo1996/30347(pfizer,inc)；wo1996/33978(zeneca)；wo1996/3397(zeneca)和wo1996/33980(zeneca)。

化療劑還包括地塞米松(dexamethasone)，干擾素，秋水仙素(colchicine)，氯苯氨啶(metoprine)，環(huán)孢霉素(cyclosporine)，兩性霉素(amphotericin)，甲硝唑(metronidazole)，阿侖單抗(alemtuzumab)，阿利維a酸(alitretinoin)，別嘌醇(allopurinol)，氨磷汀(amifostine)，三氧化二砷(arsenictrioxide)，天冬酰胺酶(asparaginase)，活的bcg，貝伐珠單抗(bevacuzimab)，貝沙羅汀(bexarotene)，克拉屈濱(cladribine)，里本靈(clofarabine)，darbepoetinalfa，地尼白介素(denileukin)，右雷佐生(dexrazoxane)，阿法依伯汀(epoetinalfa)，厄洛替尼(elotinib)，非格司亭(filgrastim)，醋酸組氨瑞林(histrelinacetate)，ibritumomab，干擾素α-2a，干擾素α-2b，lenalidomide，左旋咪唑(levamisole)，美司鈉(mesna)，甲氧沙林(methoxsalen)，諾龍(nandrolone)，奈拉濱(nelarabine)，諾非單抗(nofetumomab)，奧普瑞白介素(oprelvekin)，palifermin，帕米膦酸鹽(pamidronate)，培加酶(pegademase)，培門冬酶(pegaspargase)，peg非格司亭(pegfilgrastim)，培美曲塞二鈉(pemetrexeddisodium)，普卡霉素(plicamycin)，卟吩姆鈉(porfimersodium)，喹納克林(quinacrine)，拉布立酶(rasburicase)，沙格司亭(sargramostim)，替莫唑胺(temozolomide)，vm-26，6-tg，托瑞米芬(toremifene)，tretinoin，atra，戊柔比星(valrubicin)，唑來膦酸鹽(zoledronate)，和唑來膦酸(zoledronicacid)，及其藥學(xué)可接受鹽。

化療劑還包括氫化可的松(hydrocortisone)，醋酸氫化可的松(hydrocortisoneacetate)，醋酸可的松(cortisoneacetate)，替可的松匹伐酯(tixocortolpivalate)，曲安奈德(triamcinoloneacetonide)，曲安西龍醇(triamcinolonealcohol)，莫米松(mometasone)，安西奈德(amcinonide)，布地奈德(budesonide)，地奈德(desonide)，fluocinonide，fluocinoloneacetonide，倍他米松(betamethasone)，倍他米松磷酸鈉(betamethasonesodiumphosphate)，地塞米松(dexamethasone)，地塞米松磷酸鈉(dexamethasonesodiumphosphate)，氟可龍(fluocortolone)，氫化可的松-17-丁酸鹽(hydrocortisone-17-butyrate)，氫化可的松-17-戊酸鹽(hydrocortisone-17-valerate)，aclometasonedipropionate，戊酸倍他米松(betamethasonevalerate)，二丙酸倍他米松(betamethasonedipropionate)，潑尼卡酯(prednicarbate)，氯倍他松-17-丁酸鹽(clobetasone-17-butyrate)，氯倍他松-17-丙酸鹽(clobetasol-17-propionate)，己酸氟考龍(fluocortolonecaproate)，特戊酸氟考龍(fluocortolonepivalate)和醋酸氟甲叉龍(fluprednideneacetate)；免疫選擇性抗炎肽(imsaid)，諸如苯丙氨酸-谷氨酰胺-甘氨酸(feg)及其d-異構(gòu)體形式(feg)(imulanbiotherapeutics,llc)；抗風(fēng)濕藥物，諸如硫唑嘌呤(azathioprine)，環(huán)孢素(ciclosporin)(環(huán)孢霉素(cyclosporine)a)，d-青霉胺，金鹽，羥氯喹，來氟米特(leflunomide)米諾環(huán)素(minocycline)，柳氮磺吡啶(sulfasalazine)，腫瘤壞死因子α(tnfα)阻斷劑，諸如依那西普(etanercept)(enbrel)，英夫利昔單抗(infliximab)(remicade)，阿達(dá)木單抗(adalimumab)(humira)，certolizumabpegol(cimzia)，golimumab(simponi)，白介素-1(il-1)阻斷劑，諸如阿那白滯素(anakinra)(kineret)，t細(xì)胞共刺激阻斷劑，諸如abatacept(orencia)，白介素-6(il-6)阻斷劑，諸如tocilizumab白介素-13(il-13)阻斷劑，諸如lebrikizumab；干擾素α(ifn)阻斷劑，諸如rontalizumab；β7-整聯(lián)蛋白阻斷劑，諸如rhumabbeta7；ige途徑阻斷劑，諸如抗m1prime；分泌型同三聚lta3和膜結(jié)合型異三聚lta1/β2阻斷劑，諸如抗淋巴毒素α(lta)；放射性同位素，例如at²¹¹，i¹³¹，i¹²⁵，y⁹⁰，re¹⁸⁶，re¹⁸⁸，sm¹⁵³，bi²¹²，p³²，pb²¹²和lu放射性同位素；混雜調(diào)查性藥劑，諸如thioplatin，ps-341，丁酸苯酯，et-18-och3，或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(l-739749，l-744832；多酚，諸如槲皮素(quercetin)，白藜蘆醇(resveratrol)，piceatannol，沒食子酸表沒食子兒茶精(epigallocatechinegallate)，茶黃素(theaflavin)，黃烷醇(flavanol)，原花青素(procyanidins)，白樺脂酸(betulinicacid)及其衍生物；自噬抑制劑，諸如氯喹；δ-9-四氫大麻酚(tetrahydrocannabinol)(屈大麻酚(dronabinol)，)；β-拉帕醌(lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙素類(colchicines)；白樺脂酸(betulinicacid)；乙酰喜樹堿，東莨菪亭(scopolectin)，和9-氨基喜樹堿)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；替加氟(tegafur)貝沙羅汀(bexarotene)二膦酸鹽類(bisphosphonates)，諸如氯膦酸鹽(clodronate)(例如或)，依替膦酸鈉(etidronate)ne-58095，唑來膦酸/唑來膦酸鹽(zoledronicacid/zoledronate)阿倫膦酸鹽(alendronate)帕米膦酸鹽(pamidronate)替魯膦酸鹽(tiludronate)或利塞膦酸鹽(risedronate)和表皮生長因子受體(egf-r)；疫苗，諸如疫苗；哌立福辛(perifosine)，cox-2抑制劑(例如塞來考昔(celecoxib)或艾托考昔(etoricoxib))，蛋白體抑制劑(例如ps341)；cci-779；tipifarnib(r11577)；orafenib，abt510；bcl-2抑制劑，諸如oblimersensodiumpixantrone；法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，諸如lonafarnib(sch6636,sarasar^tm)；及任何上述各項(xiàng)的藥學(xué)可接受鹽，酸或衍生物；以及兩種或更多種上述各項(xiàng)的組合，諸如chop(環(huán)磷酰胺，多柔比星，長春新堿，和潑尼松龍聯(lián)合療法的縮寫)和folfox(奧沙利鉑(eloxatin^tm)聯(lián)合5-fu和亞葉酸的治療方案的縮寫)。

化療劑還包括具有止痛，退熱和消炎效果的非類固醇消炎藥。nsaid包括酶環(huán)氧合酶的非選擇性抑制劑。nsaid的具體例子包括阿司匹林(aspirin)，丙酸衍生物諸如布洛芬(ibuprofen)，非諾洛芬(fenoprofen)，酮洛芬(ketoprofen)，氟比洛芬(flurbiprofen)，奧沙普秦(oxaprozin)和荼普生(naproxen)，乙酸衍生物諸如吲哚美辛(indomethacin)，舒林酸(sulindac)，依托度酸(etodolac)，雙氯芬酸(diclofenac)，烯醇酸衍生物諸如吡羅昔康(piroxicam)，美洛昔康(meloxicam)，替諾昔康(tenoxicam)，屈惡昔康(droxicam)，氯諾昔康(lornoxicam)和伊索昔康(isoxicam)，滅酸衍生物諸如甲滅酸(mefenamicacid)，甲氯芬那酸(meclofenamicacid)，氟芬那酸(flufenamicacid)，托芬那酸(tolfenamicacid)，和cox-2抑制劑諸如塞來考昔(celecoxib)，依托考昔(etoricoxib)，羅美考昔(lumiracoxib)，帕瑞考昔(parecoxib)，羅非考昔(rofecoxib)，羅非昔布(rofecoxib)，和伐地考昔(valdecoxib)。nsaid可被指示用于諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，炎性關(guān)節(jié)病，強(qiáng)直性脊柱炎，銀屑病關(guān)節(jié)炎，萊特爾氏綜合征，急性痛風(fēng)，痛經(jīng)，骨轉(zhuǎn)移疼痛，頭痛和偏頭痛，手術(shù)后疼痛，由于炎癥和組織損傷引起的輕至中度疼痛，發(fā)熱，腸梗阻，和腎絞痛等疾患的癥狀緩解。

如本領(lǐng)域技術(shù)人員理解的，本文中提及“約”數(shù)值或參數(shù)包括(并且描述)涉及所述數(shù)值或參數(shù)本身的實(shí)施方案。例如，提及“約x”的描述包括“x”的描述。

在描述本發(fā)明的實(shí)施方案的上下文中使用術(shù)語“一個(gè)”和“一種”和“所述/該”以及類似術(shù)語應(yīng)解釋為覆蓋單數(shù)和復(fù)數(shù)兩者，除非本文中另有指示或根據(jù)上下文明顯矛盾。術(shù)語“包含”、“具有”、“包括”和“含有”應(yīng)當(dāng)解釋為開放式術(shù)語(即意為“包括但不限于”)，除非另有說明。應(yīng)當(dāng)理解，本文中描述的本發(fā)明的方面和實(shí)施方案包括“由……組成”和/或“基本上由……組成”的方面和實(shí)施方案。

本文中數(shù)值范圍的敘述僅僅意圖充當(dāng)個(gè)別提及落入范圍內(nèi)的每個(gè)不同數(shù)值的縮寫方法，除非本文中另有指示，并且將每個(gè)不同數(shù)值收入說明書中，就像本文中個(gè)別敘述它一樣。

cbp/ep300和bet抑制劑的用途

本文中提供了(在體外或在體內(nèi))使用cbp/ep300抑制劑來抑制cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或cbp/ep300hat域及使用bet抑制劑來抑制bet的方法。例如，本文中提供了用于在個(gè)體中治療cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的、cbp/ep300hat域介導(dǎo)的、和/或bet介導(dǎo)的病癥的方法，其包括與bet抑制劑組合對個(gè)體施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，布羅莫結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的、hat域介導(dǎo)的病癥、和/或bet介導(dǎo)的病癥是癌癥。

本文中提供了用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括與bet抑制劑組合對個(gè)體施用有效量的cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp/ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合氨基酸序列kkifkpeelrqalmptlealyrqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivknpmdlstikrkldtgqyqepwqyvddvwlmfnnawlynrktsrvykfcsklaevfeqeidpvmqslg(uniprotno.q92793的氨基酸殘基1082-1197(seqidno:5))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合氨基酸序列rqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivknpmdlstikrkldtgqyqepwqyvddvwlmfnnawlynrktsrvy(uniprotno.q92793的氨基酸殘基1103-1175(seqidno:3))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合氨基酸序列apgqskkkifkpeelrqalmptlealyrqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivkspmdlstikrkldtgqyqepwqyvddiwlmfnnawlynrktsrvykycsklsevfeqeidpvmqslg(uniprotno.q09472的氨基酸殘基1040-1161(seqidno:6))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合氨基酸序列rqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivkspmdlstikrkldtgqyqepwqyvddiwlmfnnawlynrktsrvy(uniprotno.q09472的氨基酸殘基1067-1139(seqidno:4))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域和cbp的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:5和seqidno:6。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:3和seqidno:4。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑抑制和/或降低cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)的結(jié)合。

在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp/ep300的hat域。

i.cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑的組合

另一個(gè)實(shí)施方案包括在個(gè)體中治療癌癥的方法，其包括對個(gè)體施用(a)cbp/ep300抑制劑和(b)bet抑制劑。本文中進(jìn)一步提供了在具有癌癥的個(gè)體中延長響應(yīng)持續(xù)時(shí)間的方法，其包括對個(gè)體施用(a)有效量的cbp/ep300抑制劑和(b)有效量的bet抑制劑。在一些實(shí)施方案中，伴隨施用cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑。在某些實(shí)施方案中，在bet抑制劑前和/或伴隨施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，共施用cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑。在一些實(shí)施方案中，共配制cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑。在一些實(shí)施方案中，與bet抑制劑分開施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，與bet抑制劑序貫施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，與bet抑制劑同時(shí)施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，對個(gè)體施用bet抑制劑，并且隨后施用cbp/ep300抑制劑。在一些實(shí)施方案中，對個(gè)體施用cbp/ep300抑制劑，并且隨后施用bet抑制劑。

在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑的施用延遲抗性的形成。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑的施用提供更長的響應(yīng)持續(xù)時(shí)間。例如，可以將響應(yīng)持續(xù)時(shí)間延長1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、或10倍。

ii.cbp/ep300抑制劑在bet抑制劑抗性癌癥的治療中的用途

在一些實(shí)施方案中，使用cbp/ep300抑制劑治療癌癥，其中癌癥對bet抑制劑有抗性。在一些實(shí)施方案中，bet抗性細(xì)胞展現(xiàn)半最大生長抑制的bet抑制劑濃度比親本細(xì)胞展現(xiàn)半最大生長抑制的bet抑制劑濃度的10倍要大。在一些實(shí)施方案中，用bet抑制劑處理的親本細(xì)胞經(jīng)歷凋亡，一種與myc和抗凋亡基因bcl2的強(qiáng)烈阻抑相關(guān)的現(xiàn)象。在一些實(shí)施方案中，bet抑制劑抗性細(xì)胞中的myc和bcl2轉(zhuǎn)錄在存在bet抑制劑的情況中維持，并且凋亡效果嚴(yán)重減弱。在一些實(shí)施方案中，從抗性細(xì)胞撤除bet抑制劑觸發(fā)凋亡。在一些實(shí)施方案中，bet抑制劑抗性細(xì)胞中的myc轉(zhuǎn)錄仍然依賴于cbp/ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域和乙酰基賴氨酸信號(hào)傳導(dǎo)。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑使骨髓瘤和白血病衍生的細(xì)胞系中的myc表達(dá)在轉(zhuǎn)錄上沉默。

iii.病癥

cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的、cbp/ep300hat域介導(dǎo)的、和/或bet介導(dǎo)的病癥的例子包括癌癥，包括但不限于聽神經(jīng)瘤、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病(單核細(xì)胞性、成髓細(xì)胞性、腺癌、血管肉瘤、星形細(xì)胞瘤、髓單核細(xì)胞性和前髓細(xì)胞性)、急性t細(xì)胞白血病、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱癌、腦癌、乳腺癌、支氣管原癌、宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性(粒細(xì)胞性)白血病、慢性髓性白血病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊腺癌、彌漫性大b細(xì)胞淋巴瘤、異常增殖變化(發(fā)育異常和化生)、胚胎性癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮肉瘤、室管膜瘤、上皮癌、紅白血病、食管癌、雌激素受體陽性乳腺癌、自發(fā)性血小板增多、尤因氏腫瘤、纖維肉瘤、濾泡性淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)肉瘤、重鏈病、成血管細(xì)胞瘤、肝瘤、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列腺癌、平滑肌肉瘤、白血病、脂肪肉瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞性白血病、淋巴瘤(何杰金(hodgkin)氏和非何杰金氏)、膀胱、乳腺、結(jié)腸、肺、卵巢、胰腺、前列腺、皮膚和子宮的惡性和過度增殖性病癥、t細(xì)胞或b細(xì)胞起源的淋巴樣惡性、白血病、淋巴瘤、髓樣癌、髓母細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、髓性白血病、骨髓瘤、粘液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、nut中線癌(nmc)、非小細(xì)胞肺癌、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口癌、成骨性肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、松果體瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、肉瘤、皮脂腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、實(shí)體瘤(癌瘤和肉瘤)、小細(xì)胞肺癌、胃癌、鱗狀細(xì)胞癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥、睪丸腫瘤、子宮癌和維爾姆斯氏瘤。

在某些實(shí)施方案中，癌癥是b細(xì)胞增殖性癌癥。在某些實(shí)施方案中，癌癥是白血病或淋巴瘤。在某些實(shí)施方案中，癌癥是白血病。在某些實(shí)施方案中，癌癥是骨髓瘤。在某些實(shí)施方案中，癌癥是乳腺癌。

可以與載劑材料組合以生成單一劑量形式或分開劑量形式的cbp/ep300抑制劑或其鹽和bet抑制劑兩者(在那些包含如上文描述的別的治療劑的組合物中)的量會(huì)隨治療的宿主和具體的施用模式而變化。在某些實(shí)施方案中，配制本發(fā)明的組合物，使得可以施用0.01-100mg/kg體重/天劑量的cbp/ep300抑制劑和/或bet抑制劑。

cbp/ep300和bet抑制劑可以協(xié)同起作用。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300和bet抑制劑的組合可以相對于單獨(dú)的任一抑制劑的施用將癌細(xì)胞的生長減緩5倍、10倍、50倍或100倍。因此，此類組合物中的一種治療劑的量可以小于僅利用所述治療劑的單一療法中需要的量，或者鑒于使用更低的劑量，患者可能有更少的副作用。在某些實(shí)施方案中，在此類組合物中，可以施用0.01–1,000μg/kg體重/天劑量的別的治療劑。

cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了某些化合物是特異性結(jié)合cbp和/或ep300中一種或多種中含有的布羅莫結(jié)構(gòu)域基序的cbp/ep300抑制劑，并且其它某些化合物是特異性結(jié)合cbp和/或ep300中一種或多種中含有的hat域基序的cbp/ep300抑制劑。

在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:5的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:3的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:6的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:4的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合ep300的布羅莫結(jié)構(gòu)域和cbp的布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:5和seqidno:6。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合seqidno:3和seqidno:4。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合下述cbp殘基中的至少一(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13)個(gè)：leu1109、pro1110、phe1111、val1115、leu1120、ile1122、tyr1125、ala1164、tyr1167、asn1168、arg1173、val1174或phe1177。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合下述ep300殘基中的至少一(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13)個(gè)：leu1073、pro1074、phe1075、val1079、leu1084、ile1086、tyr1089、ala1128、tyr1131、asn1132、arg1137、val1138或tyr1141。

在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑干擾cbp和/或ep300與組蛋白，特別是組蛋白中的乙?；嚢彼岬木喓汀Ｔ谝恍?shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑抑制cbp和/或ep300與染色質(zhì)(例如組蛋白締和的dna)的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑抑制和/或降低cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)(例如組蛋白締和的dna)的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑不影響cbp和/或ep300的其它域與染色體的締和。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑主要(例如僅)經(jīng)由與cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑經(jīng)由與cbp布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域以及別的cbp和/或ep300殘基和/或域的接觸和/或相互作用結(jié)合cbp和/或ep300。測定與染色質(zhì)的締和的方法是本領(lǐng)域中已知的，并且包括但不限于染色質(zhì)分級(jí)、bret測定法(promega)、frap測定法、染色質(zhì)免疫沉淀(chip)、生物物理結(jié)合測定法、和/或組蛋白締和測定法。見例如dasetal.,biotechniques37:961-969(2004)。

在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp和/或ep300的hat域。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑結(jié)合cbp和/或ep300的hat域，如在delvecchioetal.,nat.struct.&mol.biol.20:1040-1046(2013)(通過提及將其完整收錄)中鑒定的。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300抑制劑實(shí)質(zhì)性結(jié)合氨基酸序列enkfsakrlqttrlgnhledrvnkflrrqnhpeagevfvrvvassdktvevkpgmksrfvdsgemsesfpyrtkalfafeeidgvdvcffgmhvqeygsdcpppntrrvyisyldsihffrprclrtavyheiligyleyvkklgyvtghiwacppsegddyifhchppdqkipkpkrlqewykkmldkafaeriihdykdifkqatedrltsakelpyfegdfwpnvleesikeleqeeeerkkeestaasettegsqgdsknakkknnkktnknkssisrankkkpsmpnvsndlsqklyatmekhkevffvihlhagpvintlppivdpdpllscdlmdgrdafltlardkhwefsslrrskwstlcmlvelhtqgqd(uniprotno.q92793的氨基酸殘基1321-1701(seqidno:8))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑實(shí)質(zhì)性結(jié)合氨基酸序列enkfsakrlpstrlgtflenrvndflrrqnhpesgevtvrvvhasdktvevkpgmkarfvdsgemaesfpyrtkalfafeeidgvdlcffgmhvqeygsdcpppnqrrvyisyldsvhffrpkclrtavyheiligyleyvkklgyttghiwacppsegddyifhchppdqkipkpkrlqewykkmldkavserivhdykdifkqatedrltsakelpyfegdfwpnvleesikeleqeeeerkreentsnestdvtkgdsknakkknnkktsknksslsrgnkkkpgmpnvsndlsqklyatmekhkevffvirliagpaanslppivdpdplipcdlmdgrdafltlardkhlefsslrraqwstmcmlvelhtqsqd(uniprotno.q09472的氨基酸殘基1285-1664(seqidno:7))的一個(gè)或多個(gè)殘基。在一些實(shí)施方案中，cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制cbp和/或ep300的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(hat)催化活性。

cbp和ep300(也稱為p300)的描述可以參見例如chriviaetal.,nature,365,855(1993)和teufeletal.,pnas,104,7009(2007)?？梢宰鳛閏bp/ep300抑制劑使用的某些化合物包括以下化合物：

藥物組合物和施用方法

本文中進(jìn)一步提供了包含cbp/ep300抑制劑或其鹽的藥物組合物、包含bet抑制劑或其鹽的藥物組合物、或包含共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的藥物組合物，用于在本文中描述的方法中使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)可接受載劑、佐劑、或媒介。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物進(jìn)一步包含對于可測量地抑制cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域、cbp/ep300hat域、和/或bet有效的量的化合物。在某些實(shí)施方案中，配制組合物以對有此需要的患者施用。

可以口服、腸胃外、通過吸入噴霧、表面、經(jīng)皮、直腸、鼻、含服、舌下、陰道、腹膜內(nèi)、肺內(nèi)、皮內(nèi)、硬膜外或經(jīng)由植入的儲(chǔ)庫施用包含cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的組合物。如本文中使用的，術(shù)語“腸胃外”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損傷內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，將包含cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的組合物配制為用于口服施用的固體劑量形式。用于口服施用的固體劑量形式包括膠囊劑、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在某些實(shí)施方案中，包含cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的固體口服劑量形式還包含下列一種或多種：(i)惰性的藥學(xué)可接受的賦形劑或載劑，諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，和(ii)填充劑或增量劑，諸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇或硅酸，(iii)粘合劑，諸如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖或阿拉伯膠，(iv)濕潤劑，諸如甘油，(v)崩解劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽或碳酸鈉，(vi)溶液阻滯劑，諸如石蠟，(vii)吸收促進(jìn)劑，諸如季銨鹽，(viii)潤濕劑，諸如鯨蠟醇或單硬脂酸甘油酯，(ix)吸收劑，諸如高嶺土或膨潤土粘土，和(x)潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、聚乙二醇或月桂基硫酸鈉。在某些實(shí)施方案中，將固體口服劑量形式配制成膠囊劑、片劑或丸劑。在某些實(shí)施方案中，固體口服劑量形式進(jìn)一步包含緩沖劑。在某些實(shí)施方案中，可以將用于固體口服劑量形式的此類組合物配制為包含一種或多種賦形劑，諸如乳糖或奶糖、聚乙二醇等的軟和硬填充明膠膠囊中的填充物。

在某些實(shí)施方案中，包含cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的組合物的片劑、錠劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑任選地包括涂層或殼體諸如腸溶涂層。它們可以任選地包含遮光劑，并且還可以是下述組合物的，使得它們以延遲的方式僅僅或優(yōu)先在腸道的某個(gè)部分中釋放活性成分。包埋組合物的例子包括聚合物質(zhì)和蠟，其也可以作為軟和硬填充的明膠膠囊中的填充物采用，所述膠囊使用諸如乳糖或奶糖等賦形劑以及高分子量聚乙二醇等。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含微囊化的cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽，并任選地進(jìn)一步包含一種或多種賦形劑。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物包含用于口服施用的含有cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的液體劑量配制劑，并且任選地進(jìn)一步包含藥學(xué)可接受乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿劑和酏劑中的一種或多種。在某些實(shí)施方案中，液體劑量形式任選地進(jìn)一步包含惰性稀釋劑，諸如水或其它溶劑，增溶劑，和乳化劑，諸如乙醇，異丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸芐酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油(特別是棉籽，花生，玉米，胚芽，橄欖，蓖麻和芝麻油)，甘油，四氫糠醇，聚乙二醇或山梨聚糖的脂肪酸酯，及其混合物中的一種或多種。在某些實(shí)施方案中，液體口服組合物任選地進(jìn)一步包含一種或多種佐劑，諸如潤濕劑，懸浮劑，甜味劑，芳香劑和增香劑。

可以依照已知技術(shù)使用合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑配制可注射的制劑，例如無菌可注射水性或油性懸浮液。無菌可注射制劑也可以是無毒性腸胃外可接受稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、懸浮液或乳液(例如作為1,3-丁二醇中的溶液)?？梢圆捎玫目山邮艿拿浇楹腿軇┲杏兴?、林格氏溶液，u.s.p.和等張氯化鈉溶液。另外，常規(guī)采用無菌不揮發(fā)性油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，可以采用任何溫和的不揮發(fā)性油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。另外，在制備注射劑中使用脂肪酸諸如油酸。

可以對可注射配制劑滅菌，例如過濾流過細(xì)菌保持濾器，或者在無菌固體組合物形式中摻入滅菌劑，所述無菌固體組合物可以在使用前在無菌水或其它無菌可注射介質(zhì)中溶解或分散。

為了延長cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的效果，通常期望減慢自皮下或肌內(nèi)注射吸收化合物。這可以通過使用具有較差水溶性的結(jié)晶或無定形材料的液體懸浮液來實(shí)現(xiàn)。然后，化合物的吸收速率取決于其溶解速率，其繼而可取決于晶體尺寸和結(jié)晶形式。或者，通過將化合物溶解或懸浮在油性媒介中來實(shí)現(xiàn)腸胃外施用的化合物形式的延遲吸收?？勺⑸涞膬?chǔ)庫形式通過在可生物降解的聚合物諸如聚丙交酯-聚乙交酯中形成化合物的微膠囊基質(zhì)來制備。根據(jù)化合物與聚合物的比率和采用的特定聚合物的性質(zhì)，可以控制化合物釋放的速率。其它可生物降解的聚合物的例子包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。也通過將化合物封裝在與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳液中來制備儲(chǔ)庫可注射配制劑。

在某些實(shí)施方案中，將用于直腸或陰道施用的組合物配制為栓劑，其可以通過混合cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑劑或其鹽與合適的非刺激性賦形劑或載劑，諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟(例如在環(huán)境溫度時(shí)是固體但在體溫時(shí)是液體并因此在直腸或陰道腔中融化并且釋放cbp/ep300抑制劑和/或bet抑制劑的那些)來制備。

cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的表面或經(jīng)皮施用的示例劑量形式包括軟膏劑、糊劑、霜?jiǎng)⑾磩?、凝膠、粉末、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼片。在無菌條件下將cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽與藥學(xué)可接受的載劑，和任選地防腐劑或緩沖劑混合。其它配制劑例子包括眼用配制劑、滴耳劑、滴眼劑、經(jīng)皮貼片?？梢酝ㄟ^在介質(zhì)(例如乙醇或二甲亞砜)中溶解或分散cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽來制備經(jīng)皮劑量形式。也可以使用吸收增強(qiáng)劑來增加化合物穿過皮膚的通量?？梢酝ㄟ^提供速率控制膜或通過在聚合物基質(zhì)或凝膠中分散化合物來控制速率。

可以采用芐醇或其它合適的防腐劑、增強(qiáng)生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或其它常規(guī)的增溶劑或分散劑將cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的鼻氣霧劑或吸入配制劑制備為鹽水中的溶液。

在某些實(shí)施方案中，可以與或不與食物一起施用藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，不與食物一起施用藥學(xué)可接受組合物。在某些實(shí)施方案中，與食物一起施用本發(fā)明的藥學(xué)可接受組合物。

任何特定患者的具體劑量和治療方案會(huì)取決于多種因素，包括年齡、體重、一般健康、性別、飲食、施用時(shí)間、排泄速率、藥物組合、治療內(nèi)科醫(yī)師的判斷、和所治療的具體疾病的嚴(yán)重程度。組合物中提供的cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽的量也會(huì)取決于組合物中的具體化合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，每劑腸胃外施用的本發(fā)明化合物的有效量會(huì)在每天約0.01-100mg/kg，或者約0.1至20mg/kg患者體重的范圍內(nèi)，化合物的典型初始范圍為0.3至15mg/kg/天。在另一個(gè)實(shí)施方案中，口服單位劑量形式，諸如片劑和膠囊劑含有約5至約100mg的本發(fā)明化合物。

一種示例片劑口服劑量形式包含約2mg、5mg、25mg、50mg、100mg、250mg或500mgcbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽，并且進(jìn)一步包含約5-30mg無水乳糖、約5-40mg交聯(lián)羧甲纖維素鈉、約5-30mg聚乙烯吡咯烷酮(pvp)k30和約1-10mg硬脂酸鎂。配制片劑的方法包括將粉末狀成分混合在一起并進(jìn)一步與pvp溶液混合?？梢愿稍锏玫降慕M合物，?；⑶遗c硬脂酸鎂混合，并且用常規(guī)設(shè)備壓成片劑?？梢酝ㄟ^在合適的緩沖溶液，例如磷酸鹽緩沖液中溶解約2-500mg的式i化合物或其鹽，并且添加張力劑，例如鹽諸如氯化鈉(如果需要的話)來制備氣溶膠配制劑的一個(gè)例子。例如，可以使用0.2微米濾器過濾溶液，以除去雜質(zhì)和污染物。

可以單獨(dú)或與其它藥劑組合采用cbp/ep300抑制劑、bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽。例如，藥物組合配制劑或給藥方案的第二藥劑可以具有與cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑互補(bǔ)的活性，使得它們不會(huì)彼此不利地影響?？梢栽趩我凰幬锝M合物中一起或分開施用化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，可以與細(xì)胞毒劑共施用化合物或藥學(xué)可接受鹽以治療增殖性疾病和癌癥。

術(shù)語“共施用”指cbp/ep300抑制劑或bet抑制劑或共配制的cbp/ep300和bet抑制劑或其鹽，以及一種或多種別的活性藥物成分，包括細(xì)胞毒劑、化療劑和/或放射治療的同時(shí)施用或任何方式的分開序貫施用。如果施用不是同時(shí)的，那么化合物在彼此接近的時(shí)間內(nèi)施用。此外，化合物是否以相同的劑量形式施用無關(guān)緊要，例如可以表面施用一種化合物，并且可以口服施用另一種化合物。

通常，可以共施用具有針對所治療的疾病或病癥的活性的任何藥劑。這些藥劑的例子可以參見cancerprinciplesandpracticeofoncologybyv.t.devitaands.hellman(editors),6^thedition(february15,2001),lippincottwilliams&wilkinspublishers。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)能夠基于藥物的特定特征和牽涉的疾病辨別哪些藥劑組合會(huì)是有用的。

實(shí)施例

以下是本發(fā)明的方法和組合物的實(shí)施例。應(yīng)當(dāng)理解，鑒于上文提供的一般描述，可以實(shí)施各種其它實(shí)施方案。

實(shí)施例1：cbp/ep300抑制劑和bet抑制劑在白血病和乳腺癌細(xì)胞系的6天存活力測定法中

將白血病(mv-4-11和hl-60)和乳腺癌(mcf7和bt474)細(xì)胞系分配入具有含有10％fbs(胎牛血清)的rpmi培養(yǎng)基的384孔板中，并允許于37℃溫育24小時(shí)。在dmso中溶解cbp/ep300抑制劑(g272)和bet抑制劑(jq1)，并且以cbp抑制劑(g272)為0至20μm和對于jq1為0至1μm的濃度梯度添加至細(xì)胞，并且于37℃溫育細(xì)胞6天。在處理6天后，通過celltiter-glo測定細(xì)胞存活力百分比和ec50。圖1中顯示了白血病細(xì)胞系的結(jié)果。圖2中顯示了乳腺癌細(xì)胞系的結(jié)果。通過bliss評(píng)分監(jiān)測協(xié)同。

實(shí)施例2：bet抑制劑抗性細(xì)胞的產(chǎn)生

a.每8-10周在存在增加濃度的bet抑制劑(cpi203)的情況中傳代nomo-1細(xì)胞。b.用增加濃度的bet抑制劑(cpi203)處理細(xì)胞，并且在4天后通過刃天青染色測定存活力。用graphpadprism計(jì)算gi50值。c.熱圖，其描繪了相對于基礎(chǔ)表達(dá)(親本，dmso；抗性，0.18μmcpi203)用高劑量cpi203(2μm)攻擊24小時(shí)時(shí)，具有表達(dá)的≥2倍變化的基因。c.與在(b)中一樣處理細(xì)胞，并且維恩圖描繪了相對于基礎(chǔ)水平具有表達(dá)的≥2倍變化的基因的數(shù)目。e.用2μm每種抑制劑處理細(xì)胞，并且在4天后通過刃天青染色測量存活力。圖3中顯示了結(jié)果。

實(shí)施例3：bet抑制劑抗性細(xì)胞中的功能障礙性凋亡

a.用增加濃度的bet抑制劑(cpi203)處理細(xì)胞，并且在4天后通過流式細(xì)胞術(shù)測量％sub-g1(％凋亡)。b-c.用指定濃度的bet抑制劑(cpi203)處理細(xì)胞24小時(shí)，并且通過qrt-pcr量化bcl2(b)或bclxl(c)mrna。c.通過qrt-pcr量化bim和bcl2轉(zhuǎn)錄物，相對于dmso對照標(biāo)準(zhǔn)化，隨后計(jì)算bim/bcl2的比率。圖4中顯示了結(jié)果。

實(shí)施例4：bet抑制劑抗性細(xì)胞維持myc表達(dá)

a.對24小時(shí)用0.18μmbet抑制劑(cpi203)處理的抗性細(xì)胞和用dmso或0.18μmbet抑制劑(cpi203)處理的親本細(xì)胞進(jìn)行rna測序。繪制基因表達(dá)的log2倍數(shù)變化。右下象限標(biāo)示親本細(xì)胞中由bet抑制劑(cpi203)下調(diào)≥4x，但是與親本相比在抗性細(xì)胞中不變或上調(diào)的基因。b.用增加濃度的bet抑制劑(cpi203)處理細(xì)胞，并且通過qrt-pcr量化mycmrna。c.用0.25μm每種抑制劑處理細(xì)胞4小時(shí)，隨后通過qrt-pcr分析mycmrna水平。圖5中顯示了結(jié)果。

實(shí)施例5：在bet抑制劑抗性細(xì)胞中myc表達(dá)需要cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域

a.用2μmcpi203(beti)、1μmflavopiridol(cdk9i)、或2μmsaha(hdaci)處理親本或抗性(+0.18μmcpi203)細(xì)胞24小時(shí)，并通過qrt-pcr測量mycmrna。b.與在(a)中一樣；cbpi，20μmsgc-cbp30。c.用增加濃度的sgc-cbp30處理細(xì)胞，并且在4天后通過刃天青染色測量存活力。d.sgc-cbp30和i-cbp112的細(xì)胞效力和選擇性。用高含量成像監(jiān)測在存在化合物的情況中染色質(zhì)結(jié)合的zsgreen-布羅莫結(jié)構(gòu)域融合蛋白的釋放。每條曲線代表指定的化合物和指定的融合蛋白(brd4或cbp)。核焦點(diǎn)的數(shù)目隨化合物靶標(biāo)結(jié)合而增加(數(shù)值是兩個(gè)技術(shù)重復(fù)的每孔四個(gè)視野的均值，±sem)。計(jì)算的ec50值是1.1μm(sgc-cbp30/cbp)、21.5μm(sgc-cbp30/brd4)、2.6μm(i-cbp112/cbp)、>20μm(i-cbp112/brd4)、0.08μm(cpi203/brd4)、1.8μm(cpi203/cbp)。e.在指定測定法(sgc-cbp30，5μm；i-cbp112，5μm；cpi203，0.31μm)中顯示核焦點(diǎn)的代表性核。圖6中顯示了結(jié)果。

實(shí)施例6：cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑阻抑myc并且抑制生長

a.在指定的細(xì)胞系中sgc-cbp30和i-cbp112的生長抑制效果。將細(xì)胞與化合物的滴定系列一起溫育6天，并且用刃天青測量存活力。b.用化合物濃度除以(a)中測定的ec50值以控制化合物效力的變化。在6天(cbpi)或4天(beti)溫育后用刃天青測量存活力。c-d.用指定的shrna慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)lp-1細(xì)胞，并且在3天后測量相對于rplp0標(biāo)準(zhǔn)化的相對mycmrna。固定細(xì)胞的等分試樣，并且在感染后3天、4天、7天和9天時(shí)評(píng)估活細(xì)胞數(shù)目。e.異位myc表達(dá)消除由cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制誘導(dǎo)的g0/g1阻滯。在無/有多西環(huán)素的情況中將lp-1/myc細(xì)胞溫育3天。添加dmso或sgc-cbp30(2.5μm)達(dá)24小時(shí)，并且固定細(xì)胞用于細(xì)胞周期分析。圖7中顯示了結(jié)果。

在本文中詳述的次序以外，還可以以任何合適的次序進(jìn)行本文中描述的方法，除非本文中另有指示或根據(jù)上下文明顯矛盾。本文中提供的任何和所有例子或例示性語言(例如，“諸如”)的使用僅旨在更好地例示本發(fā)明的實(shí)施方案，并且不一定對本發(fā)明的范圍施加限制，除非在權(quán)利要求書中另有明確敘述。說明書中的任何語言不應(yīng)解釋為指示任何非要求保護(hù)的要素對于本發(fā)明的實(shí)踐是必需的。

通過提及收錄本文中引用的所有文件。

雖然已經(jīng)描述了許多實(shí)施方案，但是可以改變這些實(shí)施例以提供利用本文中描述的化合物和方法的其它實(shí)施方案。因此，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求書而不是由已經(jīng)作為例子呈現(xiàn)的具體實(shí)施方案限定。

seqidno:1>sp|q92793|cbp_人creb結(jié)合蛋白

os＝人gn＝crebbppe＝1sv＝3

maenlldgppnpkraklsspgfsandstdfgslfdlendlpdelipnggelgllnsgnlvpdaaskhkqlsellrggsgssinpgignvsasspvqqglggqaqgqpnsanmaslsamgksplsqgdssapslpkqaastsgptpaasqalnpqaqkqvglatsspatsqtgpgicmnanfnqthpgllnsnsghslinqasqgqaqvmngslgaagrgrgagmpyptpamqgasssvlaetltqvspqmtghaglntaqaggmakmgitgntspfgqpfsqaggqpmgatgvnpqlaskqsmvnslptfptdikntsvtnvpnmsqmqtsvgivptqaiatgptadpekrkliqqqlvlllhahkcqrreqangevracslphcrtmknvlnhmthcqagkacqvahcassrqiishwknctrhdcpvclplknasdkrnqqtilgspasgiqntigsvgtgqqnatslsnpnpidpssmqrayaalglpymnqpqtqlqpqvpgqqpaqpqthqqmrtlnplgnnpmnipaggittdqqppnlisesalptslgatnplmndgsnsgnigtlstiptaappsstgvrkgwhehvtqdlrshlvhklvqaifptpdpaalkdrrmenlvayakkvegdmyesansrdeyyhllaekiykiqkeleekrrsrlhkqgilgnqpalpapgaqppvipqaqpvrppngplslpvnrmqvsqgmnsfnpmslgnvqlpqapmgpraaspmnhsvqmnsmgsvpgmaispsrmpqppnmmgahtnnmmaqapaqsqflpqnqfpsssgamsvgmgqppaqtgvsqgqvpgaalpnplnmlgpqasqlpcppvtqsplhptpppastaagmpslqhttppgmtppqpaaptqpstpvsssgqtptptpgsvpsatqtqstptvqaaaqaqvtpqpqtpvqppsvatpqssqqqptpvhaqppgtplsqaaasidnrvptpssvasaetnsqqpgpdvpvlemktetqaedtepdpgeskgeprsemmeedlqgasqvkeetdiaeqksepmevdekkpevkvevkeeeesssngtasqstspsqprkkifkpeelrqalmptlealyrqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivknpmdlstikrkldtgqyqepwqyvddvwlmfnnawlynrktsrvykfcsklaevfeqeidpvmqslgyccgrkyefspqtlccygkqlctiprdaayysyqnryhfcekcfteiqgenvtlgddpsqpqttiskdqfekkkndtldpepfvdckecgrkmhqicvlhydiiwpsgfvcdnclkktgrprkenkfsakrlqttrlgnhledrvnkflrrqnhpeagevfvrvvassdktvevkpgmksrfvdsgemsesfpyrtkalfafeeidgvdvcffgmhvqeygsdcpppntrrvyisyldsihffrprclrtavyheiligyleyvkklgyvtghiwacppsegddyifhchppdqkipkpkrlqewykkmldkafaeriihdykdifkqatedrltsakelpyfegdfwpnvleesikeleqeeeerkkeestaasettegsqgdsknakkknnkktnknkssisrankkkpsmpnvsndlsqklyatmekhkevffvihlhagpvintlppivdpdpllscdlmdgrdafltlardkhwefsslrrskwstlcmlvelhtqgqdrfvytcneckhhvetrwhctvcedydlcincyntkshahkmvkwglglddegssqgepqskspqesrrlsiqrciqslvhacqcrnancslpscqkmkrvvqhtkgckrktnggcpvckqlialccyhakhcqenkcpvpfclnikhklrqqqiqhrlqqaqlmrrrmatmntrnvpqqslpsptsappgtptqqpstpqtpqppaqpqpspvsmspagfpsvartqppttvstgkptsqvpappppaqpppaaveaarqiereaqqqqhlyrvninnsmppgrtgmgtpgsqmapvslnvprpnqvsgpvmpsmppgqwqqaplpqqqpmpglprpvismqaqaavagprmpsvqpprsispsalqdllrtlkspsspqqqqqvlnilksnpqlmaafikqrtakyvanqpgmqpqpglqsqpgmqpqpgmhqqpslqnlnamqagvprpgvppqqqamgglnpqgqalnimnpghnpnmasmnpqyremlrrqllqqqqqqqqqqqqqqqqqqgsagmaggmaghgqfqqpqgpggyppamqqqqrmqqhlplqgssmgqmaaqmgqlgqmgqpglgadstpniqqalqqrilqqqqmkqqigspgqpnpmspqqhmlsgqpqashlpgqqiatslsnqvrspapvqsprpqsqpphsspspriqpqpsphhvspqtgsphpglavtmassidqghlgnpeqsamlpqlntpsrsalsselslvgdttgdtlekfvegl

seqidno:2>sp|q09472|ep300_人組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶p300

os＝人gn＝ep300pe＝1sv＝2

maenvvepgppsakrpklsspalsasasdgtdfgslfdlehdlpdelinstelgltnggdinqlqtslgmvqdaaskhkqlsellrsgsspnlnmgvggpgqvmasqaqqsspglglinsmvkspmtqagltspnmgmgtsgpnqgptqstgmmnspvnqpamgmntgmnagmnpgmlaagngqgimpnqvmngsigagrgrqnmqypnpgmgsagnllteplqqgspqmggqtglrgpqplkmgmmnnpnpygspytqnpgqqigasglglqiqtktvlsnnlspfamdkkavpgggmpnmgqqpapqvqqpglvtpvaqgmgsgahtadpekrkliqqqlvlllhahkcqrreqangevrqcnlphcrtmknvlnhmthcqsgkscqvahcassrqiishwknctrhdcpvclplknagdkrnqqpiltgapvglgnpsslgvgqqsapnlstvsqidpssierayaalglpyqvnqmptqpqvqaknqqnqqpgqspqgmrpmsnmsaspmgvnggvgvqtpsllsdsmlhsainsqnpmmsenasvpslgpmptaaqpsttgirkqwheditqdlrnhlvhklvqaifptpdpaalkdrrmenlvayarkvegdmyesannraeyyhllaekiykiqkeleekrrtrlqkqnmlpnaagmvpvsmnpgpnmgqpqpgmtsngplpdpsmirgsvpnqmmpritpqsglnqfgqmsmaqppivprqtpplqhhgqlaqpgalnppmgygprmqqpsnqgqflpqtqfpsqgmnvtniplapssgqapvsqaqmsssscpvnspimppgsqgshihcpqlpqpalhqnspspvpsrtptphhtppsigaqqppattipapvptppamppgpqsqalhppprqtptppttqlpqqvqpslpaapsadqpqqqprsqqstaasvptptapllppqpatplsqpavsiegqvsnppstsstevnsqaiaekqpsqevkmeakmevdqpepadtqpediseskvedckmesteteerstelkteikeeedqpstsatqsspapgqskkkifkpeelrqalmptlealyrqdpeslpfrqpvdpqllgipdyfdivkspmdlstikrkldtgqyqepwqyvddiwlmfnnawlynrktsrvykycsklsevfeqeidpvmqslgyccgrklefspqtlccygkqlctiprdatyysyqnryhfcekcfneiqgesvslgddpsqpqttinkeqfskrkndtldpelfvectecgrkmhqicvlhheiiwpagfvcdgclkksartrkenkfsakrlpstrlgtflenrvndflrrqnhpesgevtvrvvhasdktvevkpgmkarfvdsgemaesfpyrtkalfafeeidgvdlcffgmhvqeygsdcpppnqrrvyisyldsvhffrpkclrtavyheiligyleyvkklgyttghiwacppsegddyifhchppdqkipkpkrlqewykkmldkavserivhdykdifkqatedrltsakelpyfegdfwpnvleesikeleqeeeerkreentsnestdvtkgdsknakkknnkktsknksslsrgnkkkpgmpnvsndlsqklyatmekhkevffvirliagpaanslppivdpdplipcdlmdgrdafltlardkhlefsslrraqwstmcmlvelhtqsqdrfvytcneckhhvetrwhctvcedydlcitcyntknhdhkmeklglglddesnnqqaaatqspgdsrrlsiqrciqslvhacqcrnancslpscqkmkrvvqhtkgckrktnggcpickqlialccyhakhcqenkcpvpfclnikqklrqqqlqhrlqqaqmlrrrmasmqrtgvvgqqqglpsptpatpttptgqqpttpqtpqptsqpqptppnsmppylprtqaagpvsqgkaagqvtpptppqtaqpplpgpppaavemamqiqraaetqrqmahvqifqrpiqhqmppmtpmapmgmnpppmtrgpsghlepgmgptgmqqqppwsqgglpqpqqlqsgmprpammsvaqhgqplnmapqpglgqvgisplkpgtvsqqalqnllrtlrspssplqqqqvlsilhanpqllaafikqraakyansnpqpipgqpgmpqgqpglqpptmpgqqgvhsnpamqnmnpmqagvqraglpqqqpqqqlqppmggmspqaqqmnmnhntmpsqfrdilrrqqmmqqqqqqgagpgigpgmanhnqfqqpqgvgyppqqqqrmqhhmqqmqqgnmgqigqlpqalgaeagaslqayqqrllqqqmgspvqpnpmspqqhmlpnqaqsphlqgqqipnslsnqvrspqpvpsprpqsqpphsspsprmqpqpsphhvspqtssphpglvaaqanpmeqghfaspdqnsmlsqlasnpgmanlhgasatdlglstdnsdlnsnlsqstldih