本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及一種迎春花提取物，該提取物的制備方法及醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)：
：藥材迎春花為木犀科植物迎春花的花。2～4月收采，烘干。別名金腰帶(《群芳譜》)，金梅(《滇志》)，黃梅(《植物學(xué)大辭典》)，清明花(《貴州民間藥物》)。原植物迎春花為落葉灌木，高達(dá)5米。枝細(xì)長，直立或成拱形，小枝平滑無毛，有四棱。復(fù)葉對(duì)生；小葉3片，卵形或長橢圓狀卵形，長1～3厘米，先端尖，邊緣有細(xì)毛，下面無毛；葉柄長5～10毫米?；ǖS色，先葉開花，著生于去年的枝條上，單生或腋生；花梗長約6毫米，被有狹長綠色的小苞；萼鐘狀，裂片6，線狀，綠色，與萼簡同長或較長；花冠管高腳碟形，徑約2厘米，裂片6，長6毫米，筒部長12毫米；雄蕊2，著生于花筒內(nèi)；子房2室?；ㄆ?～4月。分布山東、陜西、遼寧、江蘇、浙江、貴州等地。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種迎春花提取物，該提取物的制備方法和液相分析方法，含有該提取物的藥物制劑及利用該提取物制備抗抑郁的藥物的用途。本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：一種迎春花提取物，該提取物由以下方法制備：(a)以重量計(jì)，每100份藥材包含干燥的迎春花80～90份和干燥的黨參10～20份，混合粉碎；(b)用乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液；(c)對(duì)步驟(b)濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(d)正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用20～30％乙醇沖洗7～9個(gè)柱體積除去多糖，再用55～65％乙醇洗脫9～11個(gè)柱體積，收集55～65％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。進(jìn)一步地，步驟(d)中所述大孔樹脂為AB-8型大孔樹脂。進(jìn)一步地，步驟(b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為65～75％。進(jìn)一步地，步驟(b)中所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為70％。進(jìn)一步地，步驟(d)為用正丁醇萃取物用大孔樹脂富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積除去多糖，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集60％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥。為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次藥材制備的迎春花提取物批間差異，所述提取物的液相分析方法為：色譜柱：AgilentZorbaxSBC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：A為乙腈，B為0.1％磷酸水溶液；梯度洗脫程序：0.01～15min，A25％～35％；15～25min，A35％～50％；25～32min，A50％；32～35min，A50％～25％；35～40min，A25％；流動(dòng)相流速：1.0mL·min-1；檢測(cè)波長：273nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。藥物制劑，含有治療有效量的所述迎春花提取物和藥學(xué)上可接受的載體。所述的迎春花提取物在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。所述的藥物制劑在制備抗抑郁的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提取物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明迎春花提取物，其余為藥物學(xué)上可接受的、對(duì)人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過對(duì)迎春花進(jìn)行提取、除雜、富集處理，能得到抗抑郁的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋圖譜，用于控制不同批次藥材制備的提取物的批間差異。附圖說明圖1為迎春花提取物HPLC液相圖譜。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。實(shí)施例1：迎春花提取物制備藥材來源：迎春花和黨參購自安徽毫州中藥材市場(chǎng)。主要試劑：食品級(jí)乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級(jí)AB-8大孔樹脂購自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級(jí)，購于TEDIA；85％磷酸為HPLC級(jí)，購于TEDIA；色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。將8.5kg干燥的迎春花和1.5kg干燥黨參混合粉碎，用70％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(6L)；對(duì)濃縮液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水飽和的正丁醇(6L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積(12L)，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積(15L)，收集60％洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得迎春花提取物浸膏粉約155g。實(shí)施例2：迎春花提取物②制備(80份迎春花，20份黨參)制備方法：將8.0kg干燥的迎春花和2.0kg干燥黨參混合粉碎，用70％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(6L)；對(duì)濃縮液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水飽和的正丁醇(6L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積(12L)，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積(15L)，收集60％洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得迎春花提取物浸膏粉約155g。實(shí)施例3：迎春花提取物③制備(90份迎春花，10份黨參)制備方法：將9.0kg干燥的迎春花和1.0kg干燥黨參混合粉碎，用70％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(6L)；對(duì)濃縮液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水飽和的正丁醇(6L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積(12L)，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積(15L)，收集60％洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得迎春花提取物浸膏粉約155g。實(shí)施例4：迎春花提取物④制備(75份迎春花，25份黨參)制備方法：將7.5kg干燥的迎春花和2.5kg干燥黨參混合粉碎，用70％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(6L)；對(duì)濃縮液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水飽和的正丁醇(6L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積(12L)，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積(15L)，收集60％洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得迎春花提取物浸膏粉約155g。實(shí)施例5：迎春花提取物⑤制備(95份迎春花，5份黨參)制備方法：將9.5kg干燥的迎春花和0.5kg干燥黨參混合粉碎，用70％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味得到濃縮液(6L)；對(duì)濃縮液依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水飽和的正丁醇(6L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸餾水溶解后用AB-8大孔樹脂(2kg，柱體積1.5L)富集，先用25％乙醇沖洗8個(gè)柱體積(12L)，再用60％乙醇洗脫10個(gè)柱體積(15L)，收集60％洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥得迎春花提取物浸膏粉約155g。實(shí)施例6：液相色譜分析供試品溶液配制：取實(shí)施例1方法制得的提取物浸膏粉5mg至50mL棕色容量瓶中，加30mL25％乙腈水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加25％乙腈水溶液定容。分析方法：高效液相色譜儀：Agilent1100，二元泵；色譜柱：AgilentZorbaxSBC18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：A為乙腈，B為0.1％磷酸水溶液；梯度洗脫程序：0.01～15min，A25％～35％；15～25min，A35％～50％；25～32min，A50％；32～35min，A50％～25％；35～40min，A25％；流動(dòng)相流速：1.0mL·min-4；檢測(cè)波長：273nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。對(duì)用10批不同產(chǎn)地、批次迎春花制備的提取物進(jìn)行分析，建立指紋圖譜進(jìn)行匹配，結(jié)果1～11號(hào)峰在10批樣品色譜圖中均出現(xiàn)。因此標(biāo)定11個(gè)峰為共有指紋峰，據(jù)此建立該提取物的HPLC指紋圖譜，結(jié)果見圖1。實(shí)施例7：迎春花提取物藥理試驗(yàn)一、材料與儀器1、動(dòng)物：SD雄性大鼠，體質(zhì)量240-260g，由北京維通利華公司提供，合格證號(hào)：SCXK(京)2007-0001。所有動(dòng)物提前1周購入，常規(guī)飼養(yǎng)。2、藥物：受試藥物迎春花提取物，制備方法見實(shí)施例1～5，依次得到迎春花提取物①～⑤。陽性藥鹽酸氟西汀(Fluoxetine，Prozac百憂解)，禮來蘇州制藥有限公司，批號(hào)：A333341。3、試劑：蔗糖(北京國華化學(xué)試劑廠)，去甲腎上腺素(NE)(Serva公司)，多巴胺(DA)(Fluka公司)，腎上腺素(E)、5-羥色胺(5-HT)、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、3，4-二羥基苯乙酸(DOPAC)、3，4-二羥芐胺(DHBA)(均為Sigma公司)，二正丁胺(上海化學(xué)試劑采購站分裝)，B-8離子對(duì)試劑(天津化學(xué)試劑廠)，甲醇(優(yōu)級(jí)純，北京化工廠)。4、器材：烘箱，大鼠固定籠，止血鉗，水桶，溫度計(jì)，1/100秒表，大鼠行為觀察敞箱，大鼠跳臺(tái)反應(yīng)箱，Waters高效液相色譜儀廠家(美國Waters公司)。二、方法1、分組和給藥：正常SD大鼠216只，24h禁水不禁食后，給予1％蔗糖水，測(cè)定1h內(nèi)的消耗量。根據(jù)蔗糖水消耗量隨機(jī)分成18個(gè)組，每組12只，也就是分為空白組、模型組、陽性藥鹽酸氟西汀組(2.5mg·kg-1·d-1)、迎春花提取物①～⑤均分別設(shè)置高(70mg·kg-1·d-1)、中(35mg·kg-1·d-1)、低(17.5mg·kg-1·d-1)劑量組。造模同時(shí)給藥，每日1次，連續(xù)給藥21d。各組均按1.0mL/100g灌胃給藥，每周稱1次體質(zhì)量?？瞻捉M給予去離子水。2、造模：參照文獻(xiàn)方法，4℃冰水游泳(5min)、45℃熱烘(5min)、夾尾(1min)、潮濕飼養(yǎng)(潮濕墊料)、晝夜顛倒(24h)，禁食(24h)，禁水(24h)等刺激隨機(jī)安排到21d內(nèi)，每日給予1種刺激，除空白組外其余動(dòng)物均采取單籠飼養(yǎng)，自由飲食。室溫(244±1)℃，相對(duì)濕度(60±10)％。3、行為學(xué)觀察：(1)蔗糖水消耗量：每次禁水后，測(cè)定每組動(dòng)物1h內(nèi)的1％蔗糖水消耗量。(2)敞箱實(shí)驗(yàn)：敞箱高40cm，長和寬均為80cm，無蓋，周壁和箱底均為黑色，底面劃分為面積相等的25塊方格。以動(dòng)物穿越方格數(shù)作為水平活動(dòng)得分，以直立次數(shù)為垂直活動(dòng)得分(兩前肢離地1cm以上)。每只動(dòng)物進(jìn)行1次測(cè)定，每次3min。(3)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)裝置為1個(gè)30cm×30cm×30cm的有機(jī)玻璃箱，底面是銅柵，間距為0.8cm，可以通電，電壓由1變壓器控制。箱子左后角置于1高5cm、直徑為8cm的木頭平臺(tái)。將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境3min，然后立即通36V交流電，動(dòng)物受到電擊，正常反應(yīng)是跳上平臺(tái)以躲避傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能會(huì)再次或多次跳至銅柵上，受到電擊后又迅速跳回平臺(tái)，如此訓(xùn)練5min，大鼠受到電擊的次數(shù)為錯(cuò)誤次數(shù)。24h后重做測(cè)驗(yàn)，將大鼠置于平臺(tái)上，通電并記時(shí)，記錄5min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)。(4)大腦皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的測(cè)定：各組大鼠在實(shí)驗(yàn)第22d跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)完成后，動(dòng)物斷頭處死，迅速在冰上剝離大腦，取前額皮質(zhì)，稱重后置組織冷凍管中用液氮快速冷凍后，放入-70℃冰箱保存至測(cè)定。根據(jù)腦組織的重量，加入預(yù)冷的0.1mol/L過氯酸(內(nèi)含0.3mMEDTA二鈉和0.5mM亞硫酸鈉)，2μg/mLDHBA，超聲勻漿，11000r/min離心10min，上清液用于神經(jīng)遞質(zhì)測(cè)定。采用高效液相色譜-電化學(xué)檢測(cè)器系統(tǒng)(HPLC-ECD)進(jìn)行測(cè)定，色譜條件為：色譜柱為4mm×150mm，Nova-pakC18，5μm(大連色譜中心填裝)；流動(dòng)相為50mmol檸檬酸-乙酸鈉緩沖液pH3.5(內(nèi)含1.0mmoLB-8離子對(duì)試劑，1.8mmoL二正丁胺，0.3mmoLEDTA二鈉，4％甲醇)，流速1.0mL/min，玻璃碳工作電極，檢測(cè)池電壓為+0.75V；3，4-二羥芐胺DHBA為內(nèi)標(biāo)物，樣品中各主要組分用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量。4、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所測(cè)定指標(biāo)均采用表示，使用SPSS13.0軟件中的方差分析(ANOVA)進(jìn)行檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有顯著性意義。三、結(jié)果1、迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠體質(zhì)量的影響結(jié)果表明，與空白組比，實(shí)驗(yàn)第14、21d模型組大鼠體質(zhì)量顯著降低(P＜0.01)；與模型組比較，迎春花提取物①～③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠體質(zhì)量均顯著增加(P＜0.01)，迎春花提取物④～⑤低、中、高劑量組與模型組比較均無顯著差異，見表1。表1迎春花提取物①～⑤對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠體質(zhì)量的影響(n＝12，g)注：與模型組同期比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白組同期比較，ΔΔP＜0.01.2、迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠蔗糖水消耗量的影響結(jié)果表明，與空白組比較，實(shí)驗(yàn)第14、21d，模型組大鼠蔗糖水消耗量顯著降低(P＜0.01)；與模型組相比，迎春花提取物①～③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠蔗糖水消耗量顯著增加(P＜0.01)，迎春花提取物④～⑤低、中、高劑量組大鼠蔗糖水消耗量均無明顯差異，見表2。表2迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠蔗糖水消耗量的影響(n＝12，mL)注：與模型組同期比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白組同期比較，ΔΔP＜0.01。3、迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠敞箱活動(dòng)的影響結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠水平運(yùn)動(dòng)得分、垂直運(yùn)動(dòng)得分顯著降低(P＜0.05)；與模型組比較，迎春花提取物①～③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)得分顯著增加(P＜0.05)，迎春花提取物④～⑤低、中、高劑量組大鼠水平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)得分均無明顯差異，見表3。表3迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠敞箱活動(dòng)行為的影響(n＝12)注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白組比較，ΔP＜0.05。4、迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)的影響結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠訓(xùn)練期錯(cuò)誤次數(shù)和測(cè)試期錯(cuò)誤次數(shù)顯著增加(P＜0.05)；與模型組比較，迎春花提取物①～③中、高劑量組及鹽酸氟西汀組大鼠訓(xùn)練期錯(cuò)誤次數(shù)和測(cè)試期錯(cuò)誤次數(shù)顯著降低(P＜0.05)，迎春花提取物④～⑤低、中、高劑量組大鼠訓(xùn)練期錯(cuò)誤次數(shù)和測(cè)試期錯(cuò)誤次數(shù)均無明顯差異，見表4。表4迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)的影響(n＝12)組別劑量(mg/kg)訓(xùn)練期錯(cuò)誤次數(shù)測(cè)試期錯(cuò)誤次數(shù)空白組-1.83±1.11**0.58±0.67*模型組-5.08±1.83ΔΔ3.16±1.95鹽酸氟西汀組2.52.09±1.22**0.72±1.19*提取物①低劑量組17.53.25±1.422.08±1.31提取物①中劑量組35.02.33±1.37**0.83±0.94*提取物①高劑量組70.02.33±1.23**0.67±0.78*提取物②低劑量組17.53.28±1.542.11±1.43提取物②中劑量組35.02.35±1.41**0.85±0.87*提取物②高劑量組70.02.33±1.36**0.72±0.64*提取物③低劑量組17.53.26±1.492.10±1.27提取物③中劑量組35.02.36±1.54**0.85±0.91*提取物③高劑量組70.02.34±1.43**0.71±0.81*提取物④低劑量組17.54.47±1.512.83±1.29提取物④中劑量組35.04.11±1.342.08±1.23提取物④高劑量組70.04.05±1.312.05±1.17提取物⑤低劑量組17.54.32±1.472.94±1.36提取物⑤中劑量組35.04.19±1.382.08±1.05提取物⑤高劑量組70.04.05±1.292.04±1.11注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白組比較，ΔΔP＜0.01。5、迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠大腦皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響結(jié)果表明，與空白組比較，模型組大鼠皮質(zhì)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT含量明顯降低(P＜0.05)；與模型組比較，迎春花提取物①～③中、高劑量組和鹽酸氟西汀組大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT含量明顯升高(P＜0.05)，迎春花提取物④～⑤低、中、高劑量組大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)NE、5-HT含量均無明顯差異，見表5。表5迎春花提取物對(duì)慢性應(yīng)激模型大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響(n＝12，ng/g)組別劑量(mg/kg)NE5-HT空白組-398.47±111.11*340.11±75.88*模型組-159.20±49.31Δ158.27±90.34Δ鹽酸氟西汀組2.5440.88±152.58*272.19±93.42*提取物①低劑量組17.5174.59±70.35188.43±167.91提取物①中劑量組35.0271.48±102.50*258.86±87.55*提取物①高劑量組70.0345.19±133.43*270.77±96.43*提取物②低劑量組17.5171.87±71.21186.75±166.30提取物②中劑量組35.0270.52±101.89*255.48±88.31*提取物②高劑量組70.0342.87±134.25*270.18±95.98*提取物③低劑量組17.5172.16±69.24186.76±165.70提取物③中劑量組35.0270.88±100.37*256.19±88.07*提取物③高劑量組70.0344.03±130.78*268.91±97.46*提取物④低劑量組17.5165.76±71.39171.35±166.81提取物④中劑量組35.0198.25±83.76181.43±81.91提取物④高劑量組70.0207.30±100.85193.31±90.74提取物⑤低劑量組17.5162.98±70.74175.24±168.05提取物⑤中劑量組35.0196.34±80.88184.85±82.10提取物⑤高劑量組70.0203.11±108.13195.71±87.34注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與空白組比較，ΔP＜0.05。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激和孤養(yǎng)兩種經(jīng)典方法，建立大鼠抑郁癥模型，經(jīng)糖水消耗測(cè)定、行為學(xué)評(píng)分，證實(shí)該模型基本模擬了抑郁癥患者的快感缺乏、興趣缺失、精神運(yùn)動(dòng)遲滯、學(xué)習(xí)記憶能力下降等抑郁表現(xiàn)。迎春花提取物①～③在糖水消耗、水平、垂直運(yùn)動(dòng)及跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)方面均較模型組有明顯改善(P＜0.05)，證明迎春花提取物①～③有良好的抗抑郁作用。本實(shí)驗(yàn)研究中，造模后大鼠體質(zhì)量增長顯著減慢甚至下降，而陽性藥及迎春花提取物①～③可改善其體質(zhì)量下降。當(dāng)前國外許多學(xué)者對(duì)慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激(CUMS)大鼠模型體質(zhì)量增長或減少的變化意見不一。在實(shí)際生活中抑郁癥患者有的厭食、體質(zhì)量下降，有的貪食、體質(zhì)量增加，因此兩種結(jié)論在理論上并不矛盾。在抑郁癥的發(fā)病機(jī)制研究中，腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)，如去甲腎上腺素、5-HT和多巴胺等功能不足，早已得到普遍公認(rèn)。額葉皮質(zhì)、杏仁核、海馬和下丘腦等4個(gè)關(guān)鍵大腦結(jié)構(gòu)的功能與人類情感活動(dòng)關(guān)系密切，本實(shí)驗(yàn)研究顯示慢性應(yīng)激大鼠前額皮質(zhì)內(nèi)5-HT、NE含量明顯降低，迎春花提取物①～③能提高皮質(zhì)5-HT、NE的含量(P＜0.05)。表明迎春花提取物①～③對(duì)前額皮質(zhì)的單胺神經(jīng)遞質(zhì)具有調(diào)節(jié)作用，是其抗抑郁作用的機(jī)制之一。迎春花提取物在大鼠慢性應(yīng)激抑郁癥動(dòng)物模型上表現(xiàn)出的有效性，以及對(duì)腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用，與迎春花和添加物黨參的比例有關(guān)，二者比例過高或過低均不能實(shí)現(xiàn)抗抑郁的效果。實(shí)施例8：片劑的制備按實(shí)施例1方法先制得提取物，按其與賦形劑重量比為1∶8的比例加入賦形劑，制粒壓片。實(shí)施例9：口服液的制備按實(shí)施例1方法先制得提取物，按常規(guī)口服液制法制成口服液。實(shí)施例10：膠囊劑或顆粒劑的制備按實(shí)施例1方法先制得提取物，按其與賦形劑重量比為1∶9的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑。實(shí)施例11：注射液的制備按實(shí)施例1方法制得提取物，加注射用水，精濾，灌封滅菌制成注射液。實(shí)施例12：無菌粉針的制備按實(shí)施例1方法先制得提取物，溶于無菌注射用水中，攪拌使溶，用無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿，低溫冷凍干燥后無菌熔封得粉針劑。上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3