本發(fā)明涉及生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及菊粉山藥多糖組合物在制備具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群功效的保健食品中的用途。
背景技術(shù)：
：人們的飲食習(xí)慣多偏好于高脂高糖高熱量飲食，隨著物質(zhì)生活水平的提高，人們對于高脂飲食的需求也在增加。而高脂飲食也是肥胖、糖尿病等疾病的重要誘因之一。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，一些富含多糖的食品藥品在降糖、降脂方面有較好地效果。研究顯示腸道菌群可以控制脂肪代謝、引發(fā)全身性的慢性低度炎癥，誘發(fā)肥胖和胰島素抵抗。飲食結(jié)構(gòu)是決定腸道菌群組成的重要因素。保持腸道微生態(tài)平衡是維持人體健康所必需的。現(xiàn)有的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑多是雙歧桿菌、乳桿菌等活菌制劑，但是活菌制劑存在活菌數(shù)量難以保證、穩(wěn)定性差等問題。近年來研究發(fā)現(xiàn)，一些中草藥具有扶植正常菌群生長的作用，起到益生元的效果，是理想的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑。而中藥微生態(tài)調(diào)節(jié)劑與益生菌相比有許多優(yōu)越性，如不存在保存活菌的技術(shù)難題，其穩(wěn)定性強、有效期長和價格較低等。尤其是中藥不僅扶植正常菌群生長，而且還可以提高機體的免疫功能，從而達到調(diào)整陰陽、扶正祛邪的目的。菊粉(Inulin或Alantin)是植物中儲備性多糖，主要來源于植物，已發(fā)現(xiàn)有36000多種，包括雙子葉植物中的菊科、桔?？啤埬懣频?1個科及單子葉植物中的百合科、禾木科。菊粉分子約由31個β-D-呋喃果糖和1～2個吡喃菊糖殘基聚合而成，果糖殘基之間能通過β-2,1-鍵連接。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)菊粉能夠降低血糖，控制血脂，促進礦物質(zhì)吸收，調(diào)節(jié)腸道的作用。山藥(yam或Chineseyam)又稱薯蕷、土薯、山薯蕷、懷山藥、淮山、白山藥，是《中華本草》收載的草藥，有滋養(yǎng)強壯，助消化，斂虛汗，止瀉之功效。山藥在食品業(yè)和加工業(yè)上大有發(fā)展前途，山藥多糖是山藥的主要成分。但未有菊粉和山藥多糖對腸道菌群中能夠調(diào)節(jié)的具體哪些有益有害菌的宏基因組學(xué)研究報道。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供菊粉山藥多糖組合物在制備具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群功效的保健食品中的用途。該組合物能夠調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內(nèi)失衡的腸道菌群趨于正常，進而調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂所導(dǎo)致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：本發(fā)明提供了一種組合物，包括菊粉和山藥多糖。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述組合物中所述菊粉與所述山藥多糖的質(zhì)量比為1:3～3:1。在本發(fā)明的另一些具體實施方案中，所述組合物中所述菊粉與所述山藥多糖的質(zhì)量比為1:1。本發(fā)明還提供了所述組合物在制備調(diào)節(jié)腸道菌群紊亂的藥物和/或食品中的應(yīng)用。在本發(fā)明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統(tǒng)既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發(fā)明中的食品為可供人類食用或飲用的物質(zhì)，包括加工食品，半成品和未加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質(zhì)。本發(fā)明中所述食品包括但不限于保健食品。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。在本發(fā)明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調(diào)節(jié)人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的保健食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述應(yīng)用中所述調(diào)節(jié)腸道菌群紊亂包括提高有益菌豐度和/或降低有害菌豐度。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述應(yīng)用中所述有益菌包括Bifidobacteriumbreve，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Lactobacillusreuteri，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus；所述有害菌包括Clostridiumaceticum，Coriobacteriumglomerans，Clostridiumchauvoei，Clostridiumalcaliphilum，Porphyromonascircumdentaria，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis，Anaerotruncuscolihominis。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)，優(yōu)選為100mg/(kg·d)。本發(fā)明還提供了所述組合物在制備預(yù)防和/或治療腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的藥物或食品中的應(yīng)用。在本發(fā)明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統(tǒng)既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發(fā)明中的食品為可供人類食用或飲用的物質(zhì)，包括加工食品，半成品和未加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質(zhì)。本發(fā)明中所述食品包括但不限于保健食品。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。在本發(fā)明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調(diào)節(jié)人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的保健食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述應(yīng)用中所述疾病為肥胖、胰島素抵抗、結(jié)腸功能紊亂、腸炎或代謝綜合征。本發(fā)明中所述代謝綜合征是指人體的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等物質(zhì)發(fā)生代謝紊亂的病理狀態(tài)，是一組復(fù)雜的代謝紊亂癥候群，是導(dǎo)致糖尿病心腦血管疾病的危險因素。其具有以下特點：①多種代謝紊亂集于一身，包括肥胖、高血糖、高血壓、血脂異常、高血黏、高尿酸、高脂肪肝發(fā)生率和高胰島素血癥，這些代謝紊亂是心、腦血管病變以及糖尿病的病理基礎(chǔ)。可見糖尿病不是一個孤立的病，而是代謝綜合征的組成部分之一。②有共同的病理基礎(chǔ)，目前多認為它們的共同原因就是肥胖尤其是中心性肥胖所造成的胰島素抵抗和高胰島素血癥。③可造成多種疾病增加，如高血壓、冠心病、腦卒中、甚至某些癌癥，包括與性激素有關(guān)的乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌，以及消化系統(tǒng)的胰腺癌、肝膽癌、結(jié)腸癌等。④有共同的預(yù)防及治療措施，防治住一種代謝紊亂，也就有利于其他代謝紊亂的防治。臨床表現(xiàn)為：1.腹部肥胖或超重；2.脂代謝異常；3.高血壓；4.糖尿病、胰島素抵抗及/或葡萄糖耐量異常。本發(fā)明還提供了所述應(yīng)用中預(yù)防和/或治療腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的食品，其選自固體制品、乳制品、溶液制品、粉末制品或懸浮液制品。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述食品的劑型為軟膠囊、硬膠囊、片劑、蜜膏、露劑、散劑、鮮汁、茶飲、酒劑、口服液、顆粒劑中的一種或多種。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述食品的劑型選自膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液或散劑。在本發(fā)明中，所述食品指各種供人食用或者飲用的成品和原料以及按照傳統(tǒng)既是食品又是藥品的物品，但是不包括以治療為目的的物品。具體的，本發(fā)明中的食品為可供人類食用或飲用的物質(zhì)，包括加工食品，半成品和未加工食品，還包括保健食品，不包括煙草或只作藥品用的物質(zhì)。本發(fā)明中所述食品包括但不限于保健食品。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。在本發(fā)明中，保健食品是食品的一個種類，具有一般食品的共性，能調(diào)節(jié)人體的機能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的。凡是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠接受的保健食品形式，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不做限定。本發(fā)明還提供了所述應(yīng)用中預(yù)防和/或治療腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的藥物，其劑型選自片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑、口服液、糖漿劑、沖劑、滴丸劑或湯劑。在本發(fā)明的一些具體實施方案中，所述組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)，優(yōu)選為100mg/(kg·d)。本發(fā)明提供了一種菊粉山藥多糖組合物在制備治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的藥物、保健食品及食品中的用途。本發(fā)明通過高脂飼料誘導(dǎo)小鼠肥胖二型糖尿病模型，觀察菊粉山藥多糖組合物通過腸道菌群對小鼠脂代謝的影響，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物能夠調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內(nèi)失衡的腸道菌群趨于正常，進而調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂所導(dǎo)致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。蛋白質(zhì)芯片測定炎癥因子的結(jié)果顯示，與模型組比較，組合物組的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低57％、24％、23％、11％、77％、18％、21％、19％。組合物組能夠顯著的降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導(dǎo)腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)，增加了病菌的數(shù)量，減少了保護腸屏障細菌的數(shù)量，影響腸上皮細胞基因表達，導(dǎo)致腸道通透性增加，使得進入血液的內(nèi)毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關(guān)，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。通過宏基因組學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)在腸道內(nèi)菌群中哪些是有益菌，哪些是有害菌，其中富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集在病人里面的就是有害菌，而菊粉山藥多糖組合物能夠提高富集在健康人腸道內(nèi)菌群中有益菌的量，并能降低富集在肥胖和胰島素抵抗的病人中有害菌的量。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。圖1示本發(fā)明實施例4中不同分組樣品的OTU數(shù)量boxplot圖；圖2示本發(fā)明實施例4中不同分組樣品OTU數(shù)量的shannonindexboxplot圖；圖3示本發(fā)明實施例4中展示樣品間物種多樣性差異的JSD距離圖；圖4示本發(fā)明實施例4中展示樣品間物種多樣性差異的基于weightunifac的距離圖；圖5示本發(fā)明實施例4中所述菊粉山藥多糖組合物的藥理實驗第12周不同組別小鼠糞便樣品中菌群的基于effectsize的熱圖。具體實施方式本發(fā)明公開了菊粉山藥多糖組合物在制備具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群功效的保健食品中的用途，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。本發(fā)明的目的在于提供一種菊粉山藥多糖組合物的用途，具體來說是所述菊粉山藥多糖組合物在調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群中具體的有益菌有害菌比例的用途。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的第一方面提供了一種菊粉山藥多糖組合物在制備提高腸道內(nèi)菌群中有益菌豐度，并且降低有害菌豐度的保健食品中的用途，所述菊粉山藥多糖組合物包含菊粉和山藥多糖，所述菊粉和山藥多糖的重量比為1：3至3：1，優(yōu)選1：1，所述組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)，優(yōu)選為100mg/(kg·d)。特別地，所述腸道內(nèi)的有益菌為Bifidobacteriumbreve(短雙歧桿菌)，Lactobacillusplantarum(植物乳桿菌)，Lactobacillusacidophilus(嗜酸乳桿菌)，Lactobacillusreuteri(羅伊氏乳桿菌)，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus(鼠李糖乳桿菌)，所述有害菌為Clostridiumaceticum(醋酸梭菌)，Coriobacteriumglomerans(科里氏桿菌)，Clostridiumchauvoei(肖氏梭菌)，Clostridiumalcaliphilum(嗜堿梭菌)，Porphyromonascircumdentaria(齒周卟啉單胞菌)，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis(狗口腔卟啉單胞菌)，Anaerotruncuscolihominis。本發(fā)明還提供了一種調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群中有益菌與有害菌比例的食品組合物，所述食品組合物包含菊粉山藥多糖組合物，所述菊粉山藥多糖組合物中，菊粉和山藥多糖的重量比為1：3至3：1。優(yōu)選地，所述食品組合物的劑型為固體、乳品、溶液制品、粉末制品和懸浮液制品中的一種。本發(fā)明還提供了一種調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群中有益菌與有害菌比例的保健食品組合物，所述保健食品組合物包含菊粉山藥多糖組合物，所述菊粉山藥多糖組合物中，菊粉和山藥多糖的重量比為1：3至3：1。優(yōu)選地，所述保健食品組合物的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液和散劑中的一種。本發(fā)明的另一方面提供了菊粉山藥多糖組合物在制備治療或預(yù)防由腸道內(nèi)菌群有益有害菌比例失調(diào)導(dǎo)致的疾病保健食品中的用途。特別地，所述疾病為由飲食引起的腸道菌群紊亂所導(dǎo)致的肥胖、胰島素抵抗、結(jié)腸功 能紊亂、腸炎或代謝綜合征。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提供了一種菊粉山藥多糖組合物在制備治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的藥物、保健食品及食品中的用途。本發(fā)明申請人通過高脂飼料誘導(dǎo)小鼠肥胖二型糖尿病模型，觀察菊粉山藥多糖組合物通過腸道菌群對小鼠脂代謝的影響，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物能夠調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂，可明顯改變腸道菌群的組成，使體內(nèi)失衡的腸道菌群趨于正常，進而調(diào)節(jié)由飲食引起的腸道菌群紊亂所導(dǎo)致的肥胖的血脂和血糖指標，可明顯降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量。通過宏基因組學(xué)的研究，發(fā)現(xiàn)在腸道內(nèi)菌群中哪些是有益菌，哪些是有害菌，其中富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集在病人里面的就是有害菌，而菊粉山藥多糖組合物能夠提高富集在健康人腸道內(nèi)菌群中有益菌的量，并能降低富集在肥胖和胰島素抵抗的病人中有害菌的量。本發(fā)明提供的組合物及其應(yīng)用、含有該組合物的食品或藥物中所用原料及試劑均可由市場購得。具體的，本發(fā)明所述菊粉和山藥可以在市場上購得，其中菊粉購自上海亨代勞生物科技有限公司，產(chǎn)品型號為CAS號:9005-80-5。所述山藥多糖通過以下制備方法制備獲得：將山藥粉碎后，按照山藥∶水＝1g∶5mL的比例加水，在75℃下加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時間繼續(xù)提取兩次，合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮液∶95％乙醇＝1∶9的體積比將9倍體積95％乙醇加入到澄清濃縮液中，混勻后于4℃下過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即獲得山藥多糖。下面結(jié)合實施例，進一步闡述本發(fā)明：實施例1組合物的制備本實施中的菊粉山藥多糖組合物包含菊粉和山藥多糖，其中菊粉和山藥多糖重量比為1:1，菊粉山藥多糖組合物可以單獨或與其他中草藥或食品添加劑及保健食品或藥品上可接受的輔料制成用于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的疾病的藥物、保健食品或食品組合物；其中，藥物和保健食品組合物的劑型為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液和散劑等，食品組合物的劑型為固體、乳品、溶液制品、粉末制品和懸浮液制品等。本發(fā)明所述菊粉和山藥可以在市場上購得，其中菊粉購自上海亨代勞生物科技有限公司，產(chǎn)品型號為CAS號:9005-80-5。所述山藥多糖通過以下制備方法制備獲得：將山藥粉碎后，按照山藥∶水＝1g∶5mL的比例加水，在75℃下加熱攪拌提取3h，過濾獲得的濾渣按照上述料液比、溫度和時間繼續(xù)提取兩次，合并三次提取液，經(jīng)過減壓濃縮和離心獲得澄清濃縮液，按照澄清濃縮液∶95％乙醇＝1∶9的體積比將9倍體積95％乙醇加入到澄清濃縮液中，混勻后于4℃下過夜靜置沉淀，離心收集沉淀，經(jīng)過真空冷凍干燥即獲得山藥多糖。實施例2同實施例1中的菊粉山藥多糖組合物，其中菊粉山藥多糖重量比為1:3。實施例3同實施例1中的菊粉山藥多糖組合物，其中菊粉山藥多糖重量比為3:1。實施例4本發(fā)明申請人使用上述實施例1所制得的菊粉山藥多糖組合物進行了藥理學(xué)實驗，實驗結(jié)果如下：1、實驗材料1.1、實驗儀器Thermo全波長酶標儀：賽默飛世爾科技中國，1510；JA1203N型分析天平：上海精密儀器有限公司產(chǎn)品；電子天平：常熟市雙杰測試儀器廠，T1000。1.2、實驗試劑葡萄糖測定試劑盒：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，20131207147；總膽固醇測定試劑盒：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，20131105146；甘油三酯測定試劑盒：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，20131105121；低密度脂蛋白測定試劑盒：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，20140302124；游離脂肪酸定量檢測試劑盒：和光純藥工業(yè)株式會社，AME6194。1.3、實驗動物與飼料C57BL/6小鼠30只，SPF級，18～22g，50～60天，雄性：廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心SCXK(粵)2013-0002；大小鼠維持飼料：廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心SCXK(粵)2013-0002；高脂純化飼料MD45％：江蘇美迪森生物醫(yī)藥有限公司。表1不同脂肪含量的飼料主要成分及能量構(gòu)成1.4、實驗藥物表2動物實驗原料清單2、實驗方法受試動物進入廣州中醫(yī)藥大學(xué)大學(xué)城實驗動物中心后，3～4只/盒，20～25℃，RH40～70％，12h：12h晝夜間斷照明；自由進食飲水，飲用水為實驗動物中心制備的蒸餾水。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，不禁食眼底靜脈叢麻醉采血，測量生化指標；根據(jù)體重(BW)， 血糖(GLU)，膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)，隨機均勻分組：正常組(n＝8)，模型組(n＝12)，菊粉山藥多糖組合物組1(或簡稱組合物組1，n＝9)，菊粉山藥多糖組合物組2(或簡稱組合物組2，n＝9)，菊粉山藥多糖組合物組3(或簡稱組合物組3，n＝9)，菊粉組(n＝10)，山藥多糖組(n＝11)，陽性對照組(n＝10)。實驗開始后，正常組給予維持飼料，其余各組均給予高脂純化飼料，并同時開始灌胃給藥，正常組與模型組給予蒸餾水，其余各組給予對應(yīng)藥物，灌胃體積為0.1ml/10g，持續(xù)14weeks。每日觀察小鼠毛色，體重，精神狀態(tài)，記錄進食量，每周記錄一次小鼠體重，第12周采集一次小鼠新鮮糞便。給藥8周后，禁食14h，眼底靜脈叢采血測量GLU、TC、TG、低密度脂蛋白(LDL-C)。給藥11周后，禁食14h，進行口服糖耐量實驗(OGTT)：禁食后，按2g/kg灌胃給予葡萄糖溶液后，分別麻醉取灌胃后0min，20min，60min，120min時間點血測量血糖并繪制曲線求曲線下面積(AUC)，同時測量TG,TC,LDL-C。給藥13周后，禁食14h，眼底靜脈叢采血測量TG,TC,LDL-C，游離脂肪酸(NEFA)。給藥14周后，不禁食眼底靜脈叢采血后，脫頸椎處死小鼠，解剖取組織臟器(肝、胰腺、腎、肌肉、小腸、小腸內(nèi)容物、結(jié)腸、結(jié)腸內(nèi)容物、盲腸、盲腸內(nèi)容物、棕色脂肪、皮下脂肪、腎周脂肪、附睪周圍脂肪)根據(jù)需要放置于中性甲醛固定或速凍于液氮后轉(zhuǎn)移保存于-80℃冰箱。另外還利用蛋白質(zhì)芯片技術(shù)測定了小鼠炎癥因子，蛋白質(zhì)芯片的檢測原理主要是基于抗原抗體特異性非共價結(jié)合。本實驗采用雙抗體夾心法。夾心法抗體芯片是將捕獲抗體預(yù)先固定在固相載體上，生物樣品加入到芯片上一起孵育反應(yīng)后，其特異性的抗原與捕獲抗體結(jié)合，然后加入生物素標記的檢測抗體一起孵育，最后通過HRP-鏈霉親和素與化學(xué)發(fā)光底物、或者熒光染色劑-鏈霉親和素結(jié)合作為信號檢測。膠片顯影、定影后用quantityone軟件分析膜上斑點的灰度值。一張膜上附有39種細胞因子的抗體，一組樣本在一張膜上檢測。以模型組的灰度值為單位1作為對照，其余各組與模型組比較分析。3、統(tǒng)計學(xué)分析：本實驗所有數(shù)據(jù)均采用均值±標準差(X±s)表示，組間差異性分析采用statview軟件進行單因素方差分析和t檢驗，以P<0.05作為統(tǒng)計學(xué)差異參考標準。4、實驗結(jié)果給藥8周后，各組血糖無顯著性差異；第八周禁食小鼠血液生化指標顯示，模型組甘油三酯、膽固醇與低密度脂蛋白均高于正常組(P<0.05)，而菊粉山藥多糖組合物組低密度脂蛋白則低于模型組(P<0.05)；可見小鼠在進食高脂飼料8周后，血脂含量明顯增高。給藥十三周后，第十三周禁食小鼠血液生化指標結(jié)果顯示，模型組甘油三酯明顯高于正常組(P<0.01)，其余各組甘油三酯均低于模型組(P<0.05)，模型組膽固醇與低密度脂蛋白也高于正常組(P<0.05)；小鼠進食高脂飼料十三周后，各項血脂指標進一步升高，血糖也有升高的趨勢，菊粉山藥多糖組合物體現(xiàn)出了良好的降低甘油三酯的效果，但對膽固醇與低密度脂蛋白無顯著影響。表3第十三周禁食小鼠血液生化指標從表3實驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。此外，從表3試驗結(jié)果可以看出，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物在劑量減少的情況下，能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，顯著(P＜0.05)降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果，因此，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。表4蛋白芯片測炎癥因子結(jié)果蛋白質(zhì)芯片測定炎癥因子的結(jié)果(見表4)顯示，與模型組比較，組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低59％、29％、29％、19％、79％、20％、18％、22％。組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低37％、13％、10％、7％、45％、9％、19％、10％。組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低57％、24％、23％、11％、77％、18％、21％、19％。上述試驗數(shù)據(jù)表明，組合物組能夠顯著的降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導(dǎo)腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)，增加了病菌的數(shù)量，減少了保護腸屏障細菌的數(shù)量，影響腸上皮細胞基因表達，導(dǎo)致腸道通透性增加，使得進入血液的內(nèi)毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關(guān)，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。此外，與菊粉組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低63％、34％、35％、25％、84％、25％、23％、27％，本發(fā)明提供的組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低45％、17％、14％、13％、55％、13％、25％、15％，本發(fā)明提供的組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低60％、26％、26％、17％、80％、20％、23％、21％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。與山藥多糖組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低65％、37％、38％、29％、86％、27％、25％、29％，本發(fā)明提供的組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低32％、10％、8％、5％、39％、7％、10％、9％，本發(fā)明提供的組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低55％、19％、14％、 13％、56％、13％、25％、15％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。采集應(yīng)用實施例1中小鼠實驗第12周的小鼠新鮮糞便，將不同組別之間的腸道菌落進行宏基因組學(xué)差異分析。本實驗中采用的宏基因組學(xué)方法參見文獻：KoyelMitra1etal.Integrativeapproachesforfindingmodularstructureinbiologicalnetworks.NatureGenetics2013.其中OTU(操作分類單位operationaltaxonomicunits)是指系統(tǒng)發(fā)生分析中的一個外部節(jié)點，是一個假定的分類單元；分類單位可能是菌株、種或?qū)伲y(tǒng)稱每個分類單位為一個操作分類單位。很多場合下，OTU是指菌株。參見英文文獻：DefiningoperationaltaxonomicunitsusingDNAbarcodedata.圖1和表5中F1、正常組，F(xiàn)2、模型組，F(xiàn)4、菊粉山藥多糖組合物組1，F(xiàn)5、菊粉山藥多糖組合物組2，F(xiàn)6、菊粉山藥多糖組合物組3，F(xiàn)7、菊粉組，F(xiàn)8、山藥多糖組，F(xiàn)9、陽性對照組。圖1和表5中“菊粉山藥多糖組合物組”簡寫為“組合物”。1、樣品Alpha多樣性比較圖1是不同分組樣品的OTU數(shù)量boxplot圖，從圖1和表5中可以看出，模型組的OTU數(shù)量比正常組的要多，F(xiàn)4菊粉山藥多糖組合物組1、F5菊粉山藥多糖組合物組2、F6菊粉山藥多糖組合物組3有提高OTU數(shù)量的作用。請補充本發(fā)明提供的組合物與陽性對照組、菊粉組、山藥多糖組的比較分析內(nèi)容。表5不同組別之間OTU數(shù)量差異比較圖2是不同分組樣品的shannonindexboxplot圖，從圖2和表6可以看出，模型組的多樣性要高于正常組，組合物組的多樣性跟模型組差不多。綜上，本發(fā)明提供的組合物組與菊粉組、山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)；本發(fā)明提供的組合物組與陽性對照組相比，雖然效果不及陽性對照組，但是無顯著差異(P＞0.05)。表6不同組別shannonalpha多樣性比較2、樣品Beta多樣性比較為了進一步展示樣品間物種多樣性差異，使用主坐標分析(Principalcoordinatesanalysis，PCoA)的方法展示各個樣品間的差異大小。圖中一共展示了2中距離，一種是基于樣品OTUprofile計算的JSD距離，如圖3；另一種距離是基于weightunifac距離的，見圖4。圖4中，如果兩個樣品距離較近，則表示這兩個樣品的物種組成較相似。3、樣品組間顯著性差異分析我們最關(guān)心的是F2模型組和F1正常組有差異的菌是否用藥后得到調(diào)節(jié)，做出了圖5。圖5中挑選的OTU是在F1正常組和F2模型組有差異的OTU(effectsize>1.96)，然后這些OTU同樣在其他組和F2模型組之間檢驗，得出的effectsize畫出上面的熱圖。OTU之間的差異還是很顯著的，F(xiàn)1正常組的豐度要比F2模型組的低，而組合物組的豐度更低了，因為這些OTU是富集在F2模型組上的。表7展示了菊粉山藥多糖組合物組對于腸道菌群中的各種有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用，通過宏基因組學(xué)的手段分析比對各組第12周的小鼠新鮮糞便中的菌落，可知小鼠腸道中的有益菌為Bifidobacteriumbreve，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Lactobacillusreuteri，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus，所述有害菌為Clostridiumaceticum，Coriobacteriumglomerans，Clostridiumchauvoei，Clostridiumalcaliphilum，Porphyromonascircumdentaria，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis，Anaerotruncuscolihominis。本發(fā)明實施例中的菊粉山藥多糖組合物對上述有益菌的豐度有提高作用，對上述有害菌的豐度有降低作用。根據(jù)宏基因組學(xué)研究的方法和原理(參見Lietal.InnateimmunityandintestinalmicrobiotainthedevelopmentofType1diabetesNature455,1109-1113,23rd，October2008)，將上述有益菌和有害菌在人腸道中的菊粉山藥多糖組合物(100mg/(kg·d))調(diào)節(jié)結(jié)果進行測序鑒定，得到菊粉山藥多糖組合物能夠提高腸道內(nèi)菌群中有益菌Bifidobacteriumbreve，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Lactobacillusreuteri，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus的豐度，降低有害菌Clostridiumaceticum，Coriobacteriumglomerans，Clostridiumchauvoei，Clostridiumalcaliphilum，Porphyromonascircumdentaria，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis，Anaerotruncuscolihominis的豐度。可見菊粉山藥多糖組合物能使有益菌的豐度增加，使有害菌的豐度明顯降低，呈現(xiàn)出 明顯地改善腸道菌群紊亂的作用(通過宏基因組學(xué)的研究，富集在健康人里面的菌就是有益菌，富集在病患者里面的就是有害菌)。表7相比病患組對于有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用結(jié)果取所述菊粉山藥組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)時的任意組合物配比，進行上述多項試驗，試驗結(jié)果相比模型組均具有良好的調(diào)節(jié)作用，顯著差異(P<0.05)，在實驗組組合物1的100mg/(kg·d)的劑量時功效最優(yōu)。實施例5本發(fā)明申請人使用上述實施例2所制得的菊粉山藥多糖組合物按照同實施例4的試驗方法進行檢測，結(jié)果如下。表8動物實驗原料清單表9第十三周禁食小鼠血液生化指標從表9實驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。此外，從表9試驗結(jié)果可以看出，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物在劑量減少的情況下，能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，顯著(P＜0.05)降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果，因此，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。表10蛋白芯片測炎癥因子結(jié)果蛋白質(zhì)芯片測定炎癥因子的結(jié)果(見表10)顯示，與模型組比較，組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低60％、27％、24％、17％、67％、17％、25％、20％。組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低32％、7％、8％、17％、37％、6％、6％、11％。組合物組3 的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低43％、15％、14％、9％、51％、9％、15％、20％。上述試驗數(shù)據(jù)表明，組合物組能夠顯著的降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導(dǎo)腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)，增加了病菌的數(shù)量，減少了保護腸屏障細菌的數(shù)量，影響腸上皮細胞基因表達，導(dǎo)致腸道通透性增加，使得進入血液的內(nèi)毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關(guān)，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。此外，與菊粉組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低63％、31％、27％、21％、45％、21％、37％、26％，本發(fā)明提供的組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低38％、15％、14％、25％、39％、7％、9％、13％，本發(fā)明提供的組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低50％、27％、21％、17％、62％、13％、21％、25％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。與山藥多糖組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低65％、38％、27％、123％、47％、21％、39％、28％，本發(fā)明提供的組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低39％、19％、17％、25％、46％、13％、13％、16％，本發(fā)明提供的組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低60％、29％、24％、19％、67％、17％、25％、29％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。采集應(yīng)用實施例1中小鼠實驗第12周的小鼠新鮮糞便，將不同組別之間的腸道菌落進行宏基因組學(xué)差異分析。本實驗中采用的宏基因組學(xué)方法參見文獻：KoyelMitra1etal.Integrativeapproachesforfindingmodularstructureinbiologicalnetworks.NatureGenetics2013.其中OTU(操作分類單位operationaltaxonomicunits)是指系統(tǒng)發(fā)生分析中的一個外部節(jié)點，是一個假定的分類單元；分類單位可能是菌株、種或?qū)伲y(tǒng)稱每個分類單位為一個操作分類單位。很多場合下，OTU是指菌株。參見英文文獻：DefiningoperationaltaxonomicunitsusingDNAbarcodedata.表11中F1、正常組，F(xiàn)2、模型組，F(xiàn)4、菊粉山藥多糖組合物組1，F(xiàn)5、菊粉山藥多糖組合物組2，F(xiàn)6、菊粉山藥多糖組合物組3，F(xiàn)7、菊粉組，F(xiàn)8、山藥多糖組，F(xiàn)9、陽性對照組。表11中“菊粉山藥多糖組合物組”簡寫為“組合物”。1、樣品Alpha多樣性比較從表11中可以看出，模型組的OTU數(shù)量比正常組的要多，F(xiàn)4菊粉山藥多糖組合物組1、F5菊粉山藥多糖組合物組2、F6菊粉山藥多糖組合物組3有提高OTU數(shù)量的作用。綜上，本發(fā)明提供的組合物組與菊粉組、山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)；本發(fā)明提供的組合物組與陽性對照組相比，雖然效果不及陽性對照組，但是無顯著差異(P＞0.05)。表11不同組別之間OTU數(shù)量差異比較圖2是不同分組樣品的shannonindexboxplot圖，從圖2和表12可以看出，模型組的多樣性要高于正常組，組合物組的多樣性跟模型組差不多。綜上，本發(fā)明提供的組合物組與菊粉組、山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)；本發(fā)明提供的組合物組與陽性對照組相比，雖然效果不及陽性對照組，但是無顯著差異(P＞0.05)。表12不同組別shannonalpha多樣性比較2、樣品Beta多樣性比較為了進一步展示樣品間物種多樣性差異，使用主坐標分析(Principalcoordinatesanalysis，PCoA)的方法展示各個樣品間的差異大小。3、樣品組間顯著性差異分析我們最關(guān)心的是F2模型組和F1正常組有差異的菌是否用藥后得到調(diào)節(jié)。挑選的OTU是在F1正常組和F2模型組有差異的OTU(effectsize>1.96)，然后這些OTU同樣在其他組和F2模型組之間做檢驗，得出的effectsize畫出上面的熱圖。OTU之間的差異還是很顯著的，F(xiàn)1正常組的豐度要比F2模型組的低，而組合物組的豐度更低了，因為這些OTU是富集在F2模型組上的。表13展示了菊粉山藥多糖組合物組對于腸道菌群中的各種有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用，通過宏基因組學(xué)的手段分析比對各組第12周的小鼠新鮮糞便中的菌落，可知小鼠腸道中的有益菌為Bifidobacteriumbreve，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Lactobacillusreuteri，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus，所述有害菌為Clostridiumaceticum，Coriobacteriumglomerans，Clostridiumchauvoei，Clostridiumalcaliphilum，Porphyromonascircumdentaria，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis，Anaerotruncuscolihominis。本發(fā)明實施例中的菊粉山藥多糖組合物對上述有益菌的豐度有提高作用，對上述有害菌的豐度有降低作用。表13相比病患組對于有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用結(jié)果實驗結(jié)果顯示，實施例2制得的菊粉山藥多糖組合物功效與實施例1制得的菌粉山藥多糖組合物的效果相近，無顯著差異(P＞0.05)，具有實施例1組合物產(chǎn)生效果的90％以上，能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。并且所述菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，提高腸道內(nèi)菌群中上述有益菌豐度，并且降低上述有害菌豐度，從而顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。取所述菊粉山藥組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)時的任意組合物配比，進行上述多項試驗，試驗結(jié)果相比模型組均具有良好的調(diào)節(jié)作用，顯著差異(P<0.05)，在實驗組組合物1的100mg/(kg·d)的劑量時功效最優(yōu)。實施例6本發(fā)明申請人使用上述實施例3所制得的菊粉山藥多糖組合物按照同實施例4的試驗方法進行檢測，結(jié)果如下。表14動物實驗原料清單表15第十三周禁食小鼠血液生化指標從表15實驗結(jié)果可以看出，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。此外，從表15試驗結(jié)果可以看出，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明所述菊粉山藥多糖組合物在劑量減少的情況下，能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，顯著(P＜0.05)降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果，因此，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。表16蛋白芯片測炎癥因子結(jié)果蛋白質(zhì)芯片測定炎癥因子的結(jié)果(見表16)顯示，與模型組比較，組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低60％、27％、24％、17％、67％、17％、25％、20％。組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低31％、9％、10％、5％、36％、5％、9％、11％。組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低43％、15％、14％、9％、51％、9％、15％、20％。上述試驗數(shù)據(jù)表明，組合物組能夠顯著的降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎。這是因為高脂或高能量飲食誘導(dǎo)腸道菌群結(jié)構(gòu)失調(diào)，增加了病菌的數(shù)量，減少了保護腸屏障細菌的數(shù)量，影響腸上皮細胞基因表達，導(dǎo)致腸道通透性增加，使得進入血液的內(nèi)毒素增加，肌肉、肝臟和脂肪組織中多種炎性因子的表達量增加有關(guān)，如IL-1、TNF-α、MCP-1和IL-6等。而菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。此外，與菊粉組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低63％、35％、34％、19％、69％、19％、27％、25％。組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低33％、12％、13％、11％、39％、15％、13％、15％。組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低54％、25％、20％、14％、63％、14％、23％、21％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。此外，與山藥多糖組比較，本發(fā)明提供的組合物組1的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低65％、38％、37％、21％、70％、21％、27％、28％，本發(fā)明提供的組合物組2的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低36％、19％、16％、15％、42％、17％、19％、17％，本發(fā)明提供的組合物組3的IL-6、IL-1β、IL-2、MCP-1、IFN-γ、IL-10、TNF-α、Leptin分別表現(xiàn)為降低60％、27％、24％、17％、67％、17％、25％、20％。本發(fā)明提供的組合物組分別與菊粉組和山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)。因此，本發(fā)明提供的組合物組能夠顯著(P＜0.05)降低炎性反應(yīng)，進而改善腸炎，相比于菊粉組和山藥多糖組，本發(fā)明提供的組合物取得了增效作用。采集應(yīng)用實施例3中小鼠實驗第12周的小鼠新鮮糞便，將不同組別之間的腸道菌落進行宏基因組學(xué)差異分析。本實驗中采用的宏基因組學(xué)方法參見文獻：KoyelMitra1etal.Integrativeapproachesforfindingmodularstructureinbiologicalnetworks.NatureGenetics 2013.其中OTU(操作分類單位operationaltaxonomicunits)是指系統(tǒng)發(fā)生分析中的一個外部節(jié)點，是一個假定的分類單元；分類單位可能是菌株、種或?qū)伲y(tǒng)稱每個分類單位為一個操作分類單位。很多場合下，OTU是指菌株。參見英文文獻：DefiningoperationaltaxonomicunitsusingDNAbarcodedata.表17中F1、正常組，F(xiàn)2、模型組，F(xiàn)4、菊粉山藥多糖組合物組1，F(xiàn)5、菊粉山藥多糖組合物組2，F(xiàn)6、菊粉山藥多糖組合物組3，F(xiàn)7、菊粉組，F(xiàn)8、山藥多糖組，F(xiàn)9、陽性對照組。表17中“菊粉山藥多糖組合物組”簡寫為“組合物”。1、樣品Alpha多樣性比較從表17中可以看出，模型組的OTU數(shù)量比正常組的要多，F(xiàn)4菊粉山藥多糖組合物組1、F5菊粉山藥多糖組合物組2、F6菊粉山藥多糖組合物組3有提高OTU數(shù)量的作用。綜上，本發(fā)明提供的組合物組與菊粉組、山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)；本發(fā)明提供的組合物組與陽性對照組相比，雖然效果不及陽性對照組，但是無顯著差異(P＞0.05)。表17不同組別之間OTU數(shù)量差異比較從表18可以看出，模型組的多樣性要高于正常組，組合物組的多樣性跟模型組差不多。綜上，本發(fā)明提供的組合物組與菊粉組、山藥多糖組比較，具有顯著差異(P＜0.05)；本發(fā)明提供的組合物組與陽性對照組相比，雖然效果不及陽性對照組，但是無顯著差異(P＞0.05)。表18不同組別shannonalpha多樣性比較2、樣品Beta多樣性比較為了進一步展示樣品間物種多樣性差異，使用主坐標分析(Principalcoordinates analysis，PCoA)的方法展示各個樣品間的差異大小。3、樣品組間顯著性差異分析挑選的OTU是在F1正常組和F2模型組有差異的OTU(effectsize>1.96)，然后這些OTU同樣在其他組和F2模型組之間檢驗，得出的effectsize畫出上面的熱圖。OTU之間的差異還是很顯著的，F(xiàn)1正常組的豐度要比F2模型組的低，而組合物組的豐度更低了，因為這些OTU是富集在F2模型組上的。表19展示了菊粉山藥多糖組合物組對于腸道菌群中的各種有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用，通過宏基因組學(xué)的手段分析比對各組第12周的小鼠新鮮糞便中的菌落，可知小鼠腸道中的有益菌為Bifidobacteriumbreve，Lactobacillusplantarum，Lactobacillusacidophilus，Lactobacillusreuteri，Acetitomaculumruminis，Lactobacillusrhamnosus，所述有害菌為Clostridiumaceticum，Coriobacteriumglomerans，Clostridiumchauvoei，Clostridiumalcaliphilum，Porphyromonascircumdentaria，Sporobactertermitidis，Porphyromonascrevioricanis，Anaerotruncuscolihominis。本發(fā)明實施例中的菊粉山藥多糖組合物對上述有益菌的豐度有提高作用，對上述有害菌的豐度有降低作用。表19相比病患組對于有益菌與有害菌的調(diào)節(jié)作用結(jié)果實驗結(jié)果顯示，實施例3制得的菊粉山藥多糖組合物功效與實施例1制得的菌粉山藥多糖組合物的效果相近，無顯著差異(P＞0.05)，具有實施例1組合物產(chǎn)生效果的90％以上，能顯著(P＜0.05)改善二型糖尿病肥胖的血脂和血糖指標，可顯著(P＜0.05)降低血漿甘油三脂的含量，可以降低膽固醇、低密度脂蛋白和游離脂肪酸的含量，對于治療或預(yù)防由腸道菌群紊亂導(dǎo)致的肥胖或胰島素抵抗有很好的有益效果。并且所述菊粉山藥多糖調(diào)節(jié)菌群比例，提高腸道內(nèi)菌群中上述有益菌豐度，并且降低上述有害菌豐度，從而顯著地降低炎癥因子水平，從而改善結(jié)腸功能紊亂，腸炎，代謝紊亂癥等疾病。取所述菊粉山藥組合物的劑量為10mg/(kg·d)至200mg/(kg·d)時的任意組合物配比，進行上述多項試驗，試驗結(jié)果相比模型組均具有良好的調(diào)節(jié)作用，顯著差異(P<0.05)，在實驗組組合物1的100mg/(kg·d)的劑量時功效最優(yōu)。實施例7保健食品的制備取本發(fā)明實施例1至實施例3提供的組合物，添加食品中允許的輔料，按照常規(guī)方法制得食品。制得的食品可以為固體制品、乳制品、溶液制品、粉末制品或懸浮液制品。其中，保健食品的劑型可以為膠囊劑、片劑、顆粒劑、口服液或散劑。實施例8藥物的制備取本發(fā)明實施例1至實施例3提供的組合物，添加藥學(xué)上可接受的輔料，按照常規(guī)方法制得藥物。制得的藥物的劑型可以為片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑、丸劑、口服液、糖漿劑、沖劑、滴丸劑或湯劑。實施例9制得保健食品的檢驗取本發(fā)明實施例6制得的保健食品，按照中華人民共和國國家標準GB16740-2014《食品安全國家標準保健食品》進行檢測，結(jié)果如下：3.1原料和輔料原料和輔料符合相應(yīng)食品標準和有關(guān)規(guī)定。3.2感官要求感官要求符合表20的規(guī)定。表20感官要求3.3理化指標理化指標符合相應(yīng)類屬食品的食品安全國家標準的規(guī)定。3.4污染物限量污染物限量符合GB2762中相應(yīng)類屬食品的規(guī)定，無相應(yīng)類屬食品的符合表21的規(guī)定。表21污染物限量項目指標檢驗方法鉛a(Pb)/(mg/kg)2.0GB5009.12總砷b(As)/(mg/kg)1.0GB/T5009.11總汞c(Hg)/(mg/kg)0.3GB/T5009.17a袋泡茶劑的鉛≤5.0mg/kg；液態(tài)產(chǎn)品的鉛≤0.5mg/kg；嬰幼兒固態(tài)或半固態(tài)保健食品的鉛≤0.3mg/kg；嬰幼兒液態(tài)保健食品的鉛≤0.02mg/kg。b液態(tài)產(chǎn)品的總砷≤0.3mg/kg；嬰幼兒保健食品的總砷≤0.3mg/kg。c液態(tài)產(chǎn)品(嬰幼兒保健食品除外)不測總汞；嬰幼兒保健食品的總汞≤0.02mg/kg。3.5真菌毒素限量真菌毒素限量符合GB2761中相應(yīng)類屬食品的規(guī)定和(或)有關(guān)規(guī)定。3.6微生物限量微生物限量符合GB29921中相應(yīng)類屬食品和相應(yīng)類屬食品的食品安全國家標準的規(guī)定，無相應(yīng)類屬食品規(guī)定的符合表22的規(guī)定。表22微生物限量3.7食品添加劑和營養(yǎng)強化劑3.7.1食品添加劑的使用符合GB2760的規(guī)定。3.7.2營養(yǎng)強化劑的使用符合GB14880和(或)有關(guān)規(guī)定。綜合上述檢測結(jié)果，本發(fā)明制得的保健食品符合中華人民共和國國家標準GB16740-2014《食品安全國家標準保健食品》的規(guī)定。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3