黃腐酸鹽在制備促血管新生藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了黃腐酸鹽在制備促血管新生藥物中的應(yīng)用，經(jīng)臨床研究表明，血管新生為缺血性血管疾病的血運重建開辟了新的治療途徑。實驗結(jié)果顯示，本發(fā)明所述的黃腐酸鹽具有臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖促進活性及雞胚尿囊膜血管新生促進活性，可用于缺血性血管疾?。ɡ纾和庵軇用}缺血性血管疾病、血管閉塞性脈管炎及糖尿病足病等）的促血管新生治療。
【專利說明】黃腐酸鹽在制備促血管新生藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及黃腐酸鹽的新用途，具體是涉及黃腐酸鹽在制備促血管新生藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]缺血性血管疾病如外周動脈缺血性血管疾病、血管閉塞性脈管炎、糖尿病足病等已經(jīng)成為威脅人類健康的重大疾病。目前對其主要的治療措施包括常規(guī)的活血化瘀、血運重建等。然而有相當一部分患者藥物治療難以見效，也不適于常規(guī)血運重建術(shù)處理或手術(shù)預后較差，因此必須開辟新的治療途徑。
[0003]近年來，促血管新生已成為缺血性血管疾病的治療新方向，是當前研究的熱點之一。血管新生主要涉及基底膜的降解、內(nèi)皮細胞遷移、增殖和血管形成等過程，其中內(nèi)皮細胞的增殖是血管新生的最主要指標之一。因此臨床上希望發(fā)現(xiàn)能夠調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞功能，促進血管新生的藥物。
[0004]促血管新生研究中最常見的是外源性促血管生長因子，如內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)等，但將其作為藥物治療存在基因表達是否可靠，全身給藥是否會發(fā)生其它部位的血管異常生長，甚至發(fā)生腫瘤的可能。而外源性促血管生長因子蛋白還存在半衰期短、生物利用率低，要反復給藥，易出現(xiàn)副作用等問題。中醫(yī)學講究，謹察陰陽所在而調(diào)之，以平為期，中病即止，非常注重整體辨證論治，而不是僅僅依靠外源補充大量促血管生長因子來打破機體的平衡。
[0005]黃腐酸是由動植物的殘骸，經(jīng)過微生物的分解和轉(zhuǎn)化，以及地球物理化學的一系列過程形成和積累起來的一類有機物質(zhì)。含有多種活性基團，如羧基、酚羥基、醇羥基、醌基、羰基等，具有多種生物活性，在中醫(yī)中藥方面的應(yīng)用歷史悠久。國內(nèi)外大量實驗研究和臨床療效表明其有活血化瘀、消炎、抗菌等顯著功效，但其促血管新生作用目前尚未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種黃腐酸鹽的新醫(yī)藥用途，即黃腐酸鹽在制備促血管新生藥物中的應(yīng)用，其促進血管新生是通過促進內(nèi)皮細胞增殖實現(xiàn)的。
[0007]本發(fā)明中所述黃腐酸鹽為黃腐酸鈉或黃腐酸鉀。
[0008]本發(fā)明所述的黃腐酸鈉或黃腐酸鉀是可通過公司或企業(yè)購得的質(zhì)量標準符合要求的黃腐酸鈉或黃腐酸鉀，或著由黃腐酸，及H2O2催化氧化降解法制得的黃腐酸(例如--參照申請?zhí)?00810233669.X “褐煤氧化降解生產(chǎn)腐植酸及其鹽的方法)經(jīng)堿調(diào)PH至7-8所得到的原料。
[0009]本發(fā)明所述促血管新生藥物的成分或有效成分是黃腐酸鈉/鉀鹽，還可加入一種或多種藥物上可接受的輔料，以改善藥物吸收效果或便于服用，制成粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑等醫(yī)學上認可的任何一種劑型。[0010]本發(fā)明所述的輔料包括藥學領(lǐng)域常規(guī)的填充劑、稀釋劑、粘合劑、賦形劑、吸收促進劑、表面活性劑和穩(wěn)定劑等，必要時還可加入香味劑、色素和甜味劑等。
[0011]本發(fā)明利用人臍靜脈內(nèi)皮細胞株(HUVECs )，通過MTT實驗，檢測黃腐酸鈉/鉀鹽對臍靜脈內(nèi)皮細胞的影響。實驗結(jié)果顯示，黃腐酸鈉/鉀鹽濃度在100mg/L、200mg/L時能夠有效促進臍靜脈內(nèi)皮細胞的增殖。
[0012]本發(fā)明利用雞胚尿囊膜實驗模型，通過雞胚尿囊膜上血管的生長情況，測試黃腐酸鈉/鉀鹽對血管新生的影響。實驗結(jié)果顯示，黃腐酸鈉/鉀鹽能夠有效促進雞胚尿囊膜血管的生長，在給藥濃度為200 mg/L、400 mg/L時，可以顯著促進血管新生，作用與陽性藥物相似，顯示出較強的促血管新生活性。
[0013]由于黃腐酸鹽在制備促進血管新生藥物中的應(yīng)用屬于首次發(fā)現(xiàn)，因此，無論是黃腐酸鹽單獨使用為活性成分制成的藥劑，還是利用黃腐酸鹽與其他活性成分配合使用制成的藥劑，均在本申請的保護范圍之內(nèi)。本發(fā)明的藥物具有以下優(yōu)點:(1)療效顯著；(2)安全性高；(3)價格低廉，可以減輕病人的經(jīng)濟負擔。
[0014]【專利附圖】

【附圖說明】
圖1是本發(fā)明中不同濃度的黃腐酸鈉鹽作用于雞胚尿囊膜，促進血管新生的血管形態(tài)
圖；
圖2是本發(fā)明中不同濃度的黃腐酸鈉鹽作用于雞胚尿囊膜，對雞胚尿囊膜血管新生促進作用的結(jié)果數(shù)據(jù)經(jīng)IPP軟件處理后血管面積比較柱狀圖，圖中:n=6 ;與空白對照組相比，**P ( 0.01, *P ( 0.05 (P ( 0.05表示差異顯著；P ( 0.01表示差異非常顯著)。
【具體實施方式】
[0015]下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明，但本發(fā)明保護范圍并不局限于所述內(nèi)容，本實施例中所用試劑如無特殊說明均為常規(guī)市售試劑或按常規(guī)方法制備的試劑，使用的方法如無特殊說明均為常規(guī)方法。
[0016]實施例1:黃腐酸鈉/鉀鹽對人臍靜脈內(nèi)皮細胞株(HUVECs)增殖的影響實驗(MTT法)
本實施例研究黃腐酸鈉/鉀鹽對人臍靜脈內(nèi)皮細胞株(HUVECs)增殖的影響，實驗方法如下:
將人臍靜脈內(nèi)皮細胞株(HUVECs，購自美國ATCC公司)在37°C，5%C02條件下培養(yǎng)，待長至對數(shù)期后將其按照每孔3000個細胞的密度接種至96孔板中。在上述條件下再培養(yǎng)24h后，將黃腐酸鈉/鉀鹽配制成濃度為50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L、400mg/L的溶液加至96孔板中，繼續(xù)培養(yǎng)48h，48h后加入MTT (3-(4，5- 二甲基噻唑-2)-2，5- 二苯基四氮唑溴鹽)每孔20 μ L繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄上清液，每孔加入150 μ LDMSO,震蕩lOmin，于酶標儀490 nm處測吸光度OD值。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，單因素方差分析或student-t檢驗統(tǒng)計分析實驗結(jié)果，以_±s表示。
[0017]實驗結(jié)果如表1-2所示，當黃腐酸鈉/鉀鹽濃度為100mg/L、200 mg/L時，細胞的增殖活性顯著增加，促進率明顯。
[0018]表1:黃腐酸鈉對HUVECs細胞增殖的影響(MTT法)(n=8，i ±s)
【權(quán)利要求】
1.黃腐酸鹽在制備促進血管新生藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃腐酸鹽在制備促進血管新生藥物中的應(yīng)用，其特征在于:黃腐酸鹽為黃腐酸鈉或 黃腐酸鉀。
【文檔編號】A61K35/02GK103830273SQ201410097114
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月17日
【發(fā)明者】何靜, 楊靜, 陳紹軍, 李寶才, 丁亞芳, 王美玲 申請人:昆明理工大學