專利名稱：一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法及用途。
背景技術(shù)：
人體在氧化代謝的過程中會(huì)產(chǎn)生了大量含氧自由基，自由基通過細(xì)胞運(yùn)輸過程會(huì)破壞其他分子的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞受損，使人體各預(yù)防細(xì)胞機(jī)能下降、衰老，可誘發(fā)癌癥、糖尿病、心血管疾病、腎臟病、動(dòng)脈硬化、缺血性心臟病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、眼睛疾病等百余種疾病。研究表明，通過補(bǔ)充抗氧化物質(zhì)能夠保持機(jī)體自由基的產(chǎn)生與消除的平衡，從而防止自由基對細(xì)胞和組織的損傷，是預(yù)防各疾病的有效措施之一，通過食用功能性的抗氧化食品也是一種即方便又有效的補(bǔ)充抗氧化劑的方法。青龍衣，即胡桃科植物胡桃楸Juglans mandshurica Maxim.的新鮮未成熟果皮，主要含有黃酮類化合物、萘醌類化合物、二芳基庚烷類化合物，同時(shí)還含有留體、萜類、脂肪酸等成分。青龍衣在中醫(yī)臨床上主要用于治療皮膚病、子宮脫垂、白細(xì)胞減少等癥?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)青龍衣具有細(xì)胞毒性、抑菌抗炎、鎮(zhèn)痛作用以及顯著的抗癌活性，而其抗氧化活性目前還未見報(bào)道，因此現(xiàn)在沒有方法可以制備青龍衣抗氧化提取物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要提供一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法及用途。本發(fā)明一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟:
一、取青龍衣藥材，加10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇，浸泡72h，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡48h，過濾，分別收集固相物B和液相物B，將固相物B加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95 %乙醇中浸泡24h，過濾，收集液相物C，然后將液相物A、B和C混合，得到浸提液；二、將浸提液減壓濃縮至相對密度為1.10 1.14，得到濃縮液，再將濃縮液和水按體積比1:1混合，然后用質(zhì)量百分含量為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，得到稀釋后的濃縮液；三、用與稀釋后的濃縮液等體積的乙酸乙酯溶液對稀釋后的濃縮液進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次，然后合并有機(jī)相，再減壓濃縮至干，得到干燥的固體即為青龍衣抗氧化活性提取物。本發(fā)明一種青龍衣抗氧化活性提取物的用途，是指青龍衣抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧化食品中的用途。本發(fā)明制備的青龍衣抗氧化活性提取物，通過對DPPH自由基清除試驗(yàn)，證明了該提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，可與藥物賦形劑制成適合于臨床使用的抗氧化藥物或添加到食品中作為抗氧化食品添加劑使用。本發(fā)明的制備方法只有提取和萃取兩個(gè)步驟，操作簡便，適合大規(guī)模生產(chǎn)。并且由于采用冷浸法對青龍衣抗氧化提取物進(jìn)行制備，既避免了加熱回流提取對活性成分的破壞，又使操作簡便，更加安全，具有可行性。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
一:本實(shí)施方式一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟:一、取青龍衣藥材，加10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇，浸泡72h，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡48h，過濾，分別收集固相物B和液相物B，將固相物B加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95 %乙醇中浸泡24h，過濾，收集液相物C，然后將液相物A、B和C混合，得到浸提液；二、將浸提液減壓濃縮至相對密度為1.10 1.14，得到濃縮液，再將濃縮液和水按體積比1:1混合，然后用質(zhì)量百分含量為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，得到稀釋后的濃縮液；三、用與稀釋后的濃縮液等體積的乙酸乙酯溶液對稀釋后的濃縮液進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次，然后合并有機(jī)相，再減壓濃縮至干，得到干燥的固體即為青龍衣抗氧化活性提取物。本實(shí)施方式步驟三中所述的重復(fù)萃取2次所加入的乙酸乙酯溶液是與稀釋后的濃縮液等體積的。本實(shí)施方式的制備方法只有提取和萃取兩個(gè)步驟，操作簡便，適合大規(guī)模生產(chǎn)。并且由于采用冷浸法對青龍衣抗氧化提取物進(jìn)行制備，既避免了加熱回流提取對活性成分的破壞，又使操作簡便，更加安全，具有可行性。
具體實(shí)施方式
二:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是:步驟二中的相對密度是在溫度為50°C的條件下測定的。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三:本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或二不同的是:步驟三中減壓濃縮至干的溫度為40°C。其它與具體實(shí)施方式
一或二不同。
具體實(shí)施方式
四:本實(shí)施方式一種青龍衣抗氧化活性提取物的用途，其特征在于青龍衣抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧化食品中的用途。本實(shí)施方式制備的青龍衣抗氧化活性提取物，通過對DPPH自由基清除試驗(yàn)，證明了該提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，可與藥物賦形劑制成適合于臨床使用的抗氧化藥物或添加到食品中作為抗氧化食品添加劑使用。通過以下試驗(yàn)驗(yàn)證本發(fā)明的有益效果:試驗(yàn)1、本試驗(yàn)收集11組不同產(chǎn)地的青龍衣進(jìn)行提取分離；本試驗(yàn)青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，包括如下步驟:一、取250g青龍衣藥材，加10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇，浸泡72h，過濾，收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡48h，過濾，收集固相物B和液相物B，將固相物B加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡24h，過濾，收集液相物C，然后將液相物A、B和C混合，得到浸提液；二、將浸提液減壓濃縮至相對密度為1.10 1.14，得到濃縮液，再將濃縮液和水按體積比1:1混合，然后用質(zhì)量百分含量為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，得到稀釋后的濃縮液；三、用與稀釋后的濃縮液等體積的乙酸乙酯溶液對稀釋后的濃縮液進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次，然后合并有機(jī)相，再減壓濃縮至干，得到干燥的固體為青龍衣抗氧化活性提取物，即完成青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法。本試驗(yàn)步驟二中的相對密度是在溫度為50°C的條件下測定的；步驟三中所述的重復(fù)萃取2次所加入的乙酸乙酯溶液是與稀釋后的濃縮液等體積的。將步驟三中萃取過程中水相進(jìn)行減壓濃縮至干，得到水提取物。用質(zhì)量百分含量為95%的乙醇溶液分別將11組的水提取物和青龍衣抗氧化活性提取物溶解成濃度為lmg/mL的溶液，用0.22 μ m的微孔濾膜過濾，將所得的續(xù)濾液用于DPPH自由基清除法測定抗氧化活性。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，根據(jù)抑制率(％) = [1-(A1-A2)/AO] X 100%計(jì)算；A0為不含提取物的對照吸光度；A1為含提取物的吸光度；A2是不含DPPH的吸光度，試驗(yàn)結(jié)果如表I所示。從表I中可知，青龍衣抗氧化活性提取物對DPPH自由基的抑制作用明顯高于水提取物，且組間比較結(jié)果顯示兩者具有顯著性差異，因此確定青龍衣抗氧化活性提取物為青龍衣抗氧化活性提取物。本試驗(yàn)制備的青龍衣抗氧化活性提取物具有優(yōu)良的抗氧化活性，可與藥物賦形劑制成適合于臨床使用的抗氧化藥物或添加到食品中作為抗氧化食品添加劑使用。其中本試驗(yàn)的DPPH溶液的制備方法:稱取8mg的DPPH粉末，用質(zhì)量百分含量為95%乙醇定容至IOOmL,得初始濃度為2X10_4mOl/L的DPPH溶液，放置于4°C下冷藏備用。表I 11組青龍衣不同提取物的抑制率
權(quán)利要求
1.一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，其特征在于青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法包括如下步驟: 一、取青龍衣藥材,加10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇，浸泡72h，過濾，分別收集固相物A和液相物A，將固相物A加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡48h，過濾,分別收集固相物B和液相物B，將固相物B加入10倍質(zhì)量的質(zhì)量百分含量為95%乙醇中浸泡24h，過濾，收集液相物C，然后將液相物A、B和C混合，得到浸提液； 二、將浸提液減壓濃縮至相對密度為1.10 1.14，得到濃縮液，再將濃縮液和水按體積比1:1混合，然后用質(zhì)量百分含量為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，得到稀釋后的濃縮液； 三、用與稀釋后的濃縮液等體積的乙酸乙酯溶液對稀釋后的濃縮液進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次，然后合并有機(jī)相，再減壓濃縮至干，得到干燥的固體為青龍衣抗氧化活性提取物，即完成青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，其特征在于步驟二中的相對密度是在溫度為50°C的條件下測定的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法，其特征在于步驟三中減壓濃縮至干的溫度為40°C。
4.一種青龍衣抗氧化活性提取物的用途，其特征在于青龍衣抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧化 食品中的用途。
全文摘要
一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法及用途，它涉及一種青龍衣抗氧化活性提取物的制備方法及用途。本發(fā)明的制備方法為一、制備浸提液；二、制備稀釋后的濃縮液；三、用與稀釋后的濃縮液等體積的乙酸乙酯溶液對稀釋后的濃縮液進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次，然后合并有機(jī)相，再減壓濃縮至干，得到干燥的固體即為青龍衣抗氧化活性提取物。本發(fā)明一種青龍衣抗氧化活性提取物的用途，是指青龍衣抗氧化活性提取物在制備抗氧化藥物和抗氧化食品中的用途。本發(fā)明應(yīng)用于醫(yī)藥和食品領(lǐng)域。
文檔編號A61P39/06GK103142686SQ20131009279
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月21日
發(fā)明者劉麗娟, 王艷秋 申請人:黑龍江大學(xué)