專利名稱:一種復(fù)方中藥制劑及其抗氧化活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種復(fù)方中藥制劑及其抗氧化活性。
背景技術(shù):
無梗五力口 Acanthopanax sessilif lorus (Rupr. et Maxim. ) Seem.為五力口禾斗五力口屬植物,分布于東北、華北、陜西等地,在山地、溪流兩岸、丘陵坡地、林緣及灌木叢中也有生長。性溫,味辛,無毒,藥理研究表明無梗五加葉具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、祛風(fēng)除濕等功效?,F(xiàn)在人們用無梗五加制劑治療白細(xì)胞減少癥、眩暈癥及婦女更年期綜合征。隨著對無梗五加的進(jìn)一步開發(fā)和利用,市場上已開發(fā)出無梗五加苦茶,具有減肥、降血糖、鎮(zhèn)靜安神之功效。然而對無梗五加葉的抗氧化作用鮮有報(bào)道。豬牙花(Erythronium japonicum Decne.)為百合科(Liliaceae)豬牙花屬 (Erythronium)多年生草本植物,生于林下濕地。分布于我國東北地區(qū),朝鮮、日本也有分布。人體在生命活動的氧化代謝過程中會不斷產(chǎn)生各種自由基,體內(nèi)過多自由基對生物大分子造成損傷,導(dǎo)致細(xì)胞和組織的結(jié)構(gòu)和功能減退,并對機(jī)體的衰老過程產(chǎn)生影響,最終導(dǎo)致疾病的發(fā)生。而人工合成的抗氧化劑具有一定的毒性和致癌作用。所以評價和篩選具有強(qiáng)抗氧化活性的天然植物已成為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和食品科學(xué)研究的新趨勢。采用典型的體外抗氧化體系,以抗壞血酸為對照,評價無梗五加葉提取物和豬牙花全草提取物的抗氧化活性,為更好的開發(fā)利用無梗五加葉和豬牙花全草資源為抗氧化活性產(chǎn)品。提供理論依據(jù)。DPPH 法DPPH 為 1,1_ 二苯基 _2_ 三硝基苯胼(1,l-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical2, 2-Diphenyl-l-(2,4,6-trinitrophenyl) hydrazyl) DPPH 法于 1958 年被提出,廣泛用于測定食品的抗氧化能力。此法是根據(jù)DPPH自由基有單電子,在517nm處有一強(qiáng)吸收, 其醇溶液呈紫色的特性。當(dāng)有自由基清除劑存在時,由于與其單電子配對而使其吸收逐漸消失,其褪色程度與其接受的電子數(shù)量成定量關(guān)系,因而可用分光光度計(jì)進(jìn)行快速定量分析。
發(fā)明內(nèi)容
1. 一種具有抗氧化作用復(fù)方中藥制劑的制法,其特征在于包括以下過程(1)原料藥的重量配比為無梗五加葉60g_70g、豬牙花全草30g_40g ;(2)將無梗五加葉和豬牙花全草加入8-10倍量70%乙醇室溫下浸提8_10h,再密封超聲30min,溫度為30°C,功率為80W,然后用紗布過濾,濾渣再分別用6倍量與4倍量 70%的乙醇重復(fù)提取各一次,過濾,得濾液;(3)將⑵中的濾液合并,回收乙醇,得到復(fù)方中藥制劑。2.將復(fù)方中藥制劑進(jìn)行試驗(yàn),該制劑具有抗氧化作用。
根據(jù)本發(fā)明,本發(fā)明中的“ %,,是重量百分比。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明所述的涉及一種復(fù)方中藥制劑及其抗氧化活性包括以下實(shí)施例,下面的實(shí)施例可進(jìn)一步說明本發(fā)明,但不以任何方式限制本發(fā)明。實(shí)施例1 1. 一種具有抗氧化作用復(fù)方中藥制劑的制法,其特征在于包括以下過程(1)原料藥的重量配比為無梗五加葉60g、豬牙花全草40g ;(2)將無梗五加葉和豬牙花全草加入8倍量70%乙醇室溫下浸提8,再密封超聲 30min,溫度為30°C,功率為80W,然后用紗布過濾,濾渣再分別用6倍量與4倍量70%的乙醇重復(fù)提取各一次,過濾,得濾液;(3)將O)中的濾液合并,回收乙醇,得到復(fù)方中藥制劑。2.將復(fù)方中藥制劑進(jìn)行試驗(yàn),該制劑具有抗氧化作用。實(shí)施例2:1. 一種具有抗氧化作用復(fù)方中藥制劑的制法,其特征在于包括以下過程(1)原料藥的重量配比為無梗五加葉70g、豬牙花全草30g ;(2)將無梗五加葉和豬牙花全草加入10倍量70%乙醇室溫下浸提10h,再密封超聲30min,溫度為30°C,功率為80W,然后用紗布過濾,濾渣再分別用6倍量與4倍量70%的乙醇重復(fù)提取各一次,過濾,得濾液;(3)將⑵中的濾液合并,回收乙醇,得到復(fù)方中藥制劑。2.將復(fù)方中藥制劑進(jìn)行試驗(yàn),該制劑具有抗氧化作用。一種復(fù)方中藥制劑的抗氧化試驗(yàn)1復(fù)方中藥制劑對DPPH清除率的測定1.1 DPPH溶液的制備精密稱定DPPH樣品0. Olg,加入無水乙醇定容至250ml容量瓶中,得到DPPH溶液, 濃度為 0. (Mmg/ml。1. 2樣品溶液的制備精密稱取復(fù)方中藥制劑0. 4g置于50ml具塞容量瓶中,加入適量的蒸餾水,密封超聲30min,待其溶解完全后,再加入蒸餾水定容至50ml,得到樣品母溶液,濃度為8mg/ml,備用。在樣品母溶液中,用移液槍精密移取體積為0. 003125,0. 00625,0. 0125,0. 025,0. 05, 0. 1,0. 2,0.細(xì)1的樣品母液,用蒸餾水定容于IOml容量瓶中得到濃度為0. 0025,0. 005, 0. 01,0. 02,0. 04,0. 08,0. 16,0. 32mg/ml 的樣品溶液。 1. 3樣品對DPPH的清除作用準(zhǔn)確移取不同濃度的樣品溶液分別與DPPH溶液和無水乙醇溶液等體積混合于不同試管中,搖勻,在黑暗中放置30min,在515nm下測定其吸光度值分別為AjPAj。另取蒸餾水與DPPH溶液等體積混合于試管中,測得吸光度值為A。其中以蒸餾水和無水乙醇混合為空白對照試驗(yàn)。并按下面公式計(jì)算清除率。清除率=(A-Ai+AJ)/AX100%2復(fù)方中藥制劑對羥自由基清除率的測定
2. 1樣品溶液的制備精密稱取復(fù)方中藥制劑0. 25g置于50ml具塞容量瓶中,加入適量的蒸餾水,密封超聲30min,待其溶解完全后,定容至刻度,得到樣品母溶液,備用。在樣品母溶液中,用移液槍精密移取體積為 5 μ 1,10 μ 1,20 μ 1,40 μ 1,80 μ 1,160 μ 1,320 μ 1,640 μ 1 的樣品母液, 用蒸餾水定容于IOml容量瓶中得到濃度為0. 0025,0. 005,0. 01,0. 02,0. 04,0. 08,0. 16, 0. 32mg/ml的樣品溶液。2. 2試劑的制備稱取0. 2032g甲基紫用去離子水定容于IOOml容量瓶中,備用。用鹽酸調(diào)Tris緩沖溶液PH為5,備用。取30%的H2A溶液1. OmL,用去離子水定容于IOOmL容量瓶中,備用。 稱取0. 0695gFeS04 · 7H20用水定容于50mL容量瓶中,備用(現(xiàn)用現(xiàn)配)。2. 3羥自由基· OH的產(chǎn)生及測定取配制好的甲基紫溶液2mL,Tris緩沖液lmL,按順序放入IOmL的刻度管中。并
用去離子水定容至刻度,搖勻靜置三十分鐘,記為A578。取配制好的甲基紫溶液2mL,Tris緩沖液lmL,F(xiàn)e2+溶液lmL,H2O2溶液ImL按順序放入IOmL的刻度管中。并用去離子水定容至刻度,搖勻靜置三十分鐘,記為A00取配制好的甲基紫溶液2mL,Tris緩沖液lmL,不同濃度梯度的待測液2mL,F(xiàn)e2+溶液lmL,H2O2溶液ImL按順序放入IOmL的刻度管中。并用去離子水定容至刻度,搖勻靜置三十分鐘。平行三次,記為As。以去離子水做空白實(shí)驗(yàn),用721紫外分光光度計(jì)在578的波長下測定其吸光度。2. 4羥自由基· OH清除率的計(jì)算利用公式清除率<% = (As-A0)/(A578-A0) X100%,得出樣品提取液對羥自由基的清除率。3復(fù)方中藥制劑的抗氧化結(jié)果3. 1復(fù)方中藥制劑對DPPH和羥自由基的清除率見表1。表1復(fù)方中藥制劑對DPPH和羥自由基的清除率結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種具有抗氧化作用復(fù)方中藥制劑的制法,其特征在于包括以下過程(1)原料藥的重量配比為無梗五加葉60g-70g、豬牙花全草30g-40g;(2)將無梗五加葉和豬牙花全草加入8-10倍量70%乙醇室溫下浸提8-10h,再密封超聲30min,溫度為30°C,功率為80W,然后用紗布過濾,濾渣再分別用6倍量與4倍量70%的乙醇重復(fù)提取各一次,過濾,得濾液;(3)將O)中的濾液合并,回收乙醇,得到復(fù)方中藥制劑。
2.如權(quán)利要求1中所述的一種復(fù)方中藥制劑的用途,其特征在于制備抗氧化作用藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明所屬醫(yī)藥產(chǎn)品研究開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種復(fù)方中藥制劑及其抗氧化活性。取無梗五加葉60g-70g、豬牙花全草30g-40g;將無梗五加葉和豬牙花全草加入8-10倍量70%乙醇室溫下浸提8-10h,再密封超聲30min,溫度為30℃,功率為80W,然后用紗布過濾,濾渣再分別用6倍量與4倍量70%的乙醇重復(fù)提取各一次,過濾,得濾液;將濾液合并,回收乙醇,得到復(fù)方中藥制劑。本發(fā)明產(chǎn)品具有抗氧化作用。
文檔編號A61P39/06GK102512571SQ201210009939
公開日2012年6月27日 申請日期2012年1月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月1日
發(fā)明者侯欣池, 張崇禧, 張成城, 鄭友蘭 申請人:山東大學(xué)威海分校