專利名稱：一種丹參、三七復方的納米混懸劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及含有機有效成分的醫(yī)藥配制品，具體涉及與碳環(huán)化合物相連的含有通過配糖鍵與非糖化合物連接的糖基的化合物的醫(yī)藥配制品。
背景技術：
現代 藥理研究表明，脂溶性的二萜醌類化合物(丹參酮類)和水溶性的酚酸類成分(丹酚酸類)都是丹參的有效成分，其中代表性成分分別是丹參酮IIa和丹酚酸B，《中國藥典》將其作為檢測的法定項目。三七總皂苷是三七的有效成分，根據其苷元結構的不同，可分為以人參皂苷Rbl為代表的20⑶-原人參二醇型和以人參皂苷Rgl為代表的20⑶-原人參三醇型，而三七皂苷R1為三七總皂苷中具代表性的特征化合物，是其區(qū)別于人參皂苷的活性成分。丹參和三七是最常用的活血化瘀中藥之一，常作為中藥藥對配伍于多種中藥方齊U，兩者相輔相成，使活血散瘀、通經止痛之功倍增，臨床常用于治療心腦血管疾病如腦中風等。但體內試驗發(fā)現，丹參酮IIA和丹酚酸B在體內代謝迅速，半衰期短且生物利用度低，體內代謝消除快，且丹參酮IIA水溶性差，限制了其在疾病治療中的應用；三七總皂苷膜滲透性差，且易被胃腸道分泌的酸和酶降解，生物利用度低，這些也都影響了二者復方療效的充分發(fā)揮。傳統(tǒng)的有關丹參和三七的劑型有片劑、顆粒劑、滴丸等，以上傳統(tǒng)劑型均存在一定缺點，或生物利用度差，或服用量大、易潮解、易霉，或工藝條件不易控制等缺點。因此，為了增加丹參、三七復方在治療心腦血管系統(tǒng)疾病方面的作用，目前急需新的藥物劑型。公開號為CN101214275專利申請公開了一種復方丹參緩釋制劑，該緩釋制劑是先用天然峰蠟將冰片包埋起來，再將所制得的包埋物與丹參、三七提取物和緩釋劑一起制成丸劑，最后噴霧包衣液制成，雖然具有一定的緩釋效果，但是仍然存在上述現有口服制劑的不足。注射劑不僅藥效迅速，作用可靠，而且克服了口服制劑存在首過效應的缺點，尤其是注射劑還可以穴位注射發(fā)揮特有的療效。因此，采用丹參、三七研制治療心腦血管疾病(如中風)的復方注射劑成為本領域技術人員的研究熱點。如公開號為CN1583131的專利申請公開了一種復方丹參凍干粉針劑，它由丹參、三七水溶性有效部位和冰片羥丙基β_環(huán)糊精包合物組成。公開號為CN1586492的專利申請公開了一種以丹參素為主要有效成分的丹參提取物、以三七總皂苷為主要有效部位的三七提取物和冰片的羥丙基β —環(huán)糊精包合物以及藥用輔料組成的復方丹參凍干粉針劑。公開號為CN101084997的專利申請公開了一種丹參提取物、三七提取物，冰片的β -環(huán)糊精包合組成的凍干粉針劑。上述申請專利雖然可彌補口服制劑所存在的不足，但根據現代醫(yī)學研究可知，丹參、三七復方中的有效成分丹酚酸B (丹參素)和三七總皂苷都是水溶性成分，且三七皂苷的分子量較大，較難透過體內生物屏障如血腦屏障發(fā)揮藥效；丹參酮雖是脂溶性成分，比較容易透過血腦屏障，但這種單一成分的過量攝入有副作用，甚至導致藥物中毒。因此，丹參、三七中的有效成分如果不進行適當的處理，就不能發(fā)揮復方成分在治療中風等心腦血管疾病方面的協(xié)同作用，從而降低藥物的療效。綜上，尋求一種理想的方式，將丹參和三七的有效成分制成便于人體吸收、容易透過體內生物屏障的制劑，對于提高藥物的生物利用度及療效具有重要意義。

發(fā)明內容
本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種丹參、三七復方的納米混懸劑，該納米混懸劑中的有效成分能透過體內生物屏障，顯著提高藥物的生物利用度，充分發(fā)揮治療作用。本發(fā)明解決上述問題的技術方案如下:一種治療中風的丹參、三七復方的納米混懸劑，該納米混懸劑由有效成分和輔料組成，其特征在于，所述的有效成分的用量為0.28 2.65w%，且由丹酚酸B8 27w%、丹參酮IIA5 15w%和三七總皂苷58 84w%組成；其中所述的三七總皂苷中含有，三七皂苷Rj 27w%，人參皂苷RgfO 50w%，人參皂苷Rb^O 40w% ；所述的 輔料的用量為97.35 99.72w%，且由復合乳化劑0.47 0.8w%、聚乳酸-羥基乙酸共聚物0.6 2.85w%、聚乙烯醇1.1 1.9w%和水94.5 97.8w%組成；所述的納米混懸劑采用W/0/W復乳法制成，所述的W/0/W復乳中，油相由丹酚酸B、丹參酮IIA、聚乳酸-羥基乙酸共聚物和復合乳化劑混合組成，內水相由三七總皂苷溶于水形成，外水相由聚乙烯醇溶于水形成；所述的復合乳化劑由質量比為油酸聚乙二醇甘油酯:司盤-80=5:1 1: 2的油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80組成。本發(fā)明所述的納米混懸劑中，所述的復合乳化劑最佳方案由質量比為油酸聚乙二醇甘油酯:司盤-80=1: I的油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80組成。上述納米混懸劑的制備方法包括以下步驟:(A)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中混均制得油相；將三七皂總苷溶于水制得內水相；將聚乙烯醇溶于水制得外水相；其中所述的有機溶劑由二氯甲烷60 90v%和乙酸乙酯10 40v%組成；(B)先將所述的內水相加入油相制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相制成W/0/W型復乳，然后揮去有機溶劑，即得。為了更利于所述納米混懸劑的制備，上述制備方法的改進方案還包括稀釋的步驟，即所述的步驟(B)在揮去有機溶劑前先將所得的W/0/W型復乳轉移至另配的質量濃度為1%的聚乙烯醇水溶液中稀釋。為了去除所述納米混懸劑中析出的脂溶性成分，提高藥物的安全性，上述納米混懸劑的制備方法的進一步改進方案還包括離心純化步驟，即，所述的步驟(B)在揮去有機溶劑后，1000 10000r/min離心分層,取上層即得所述納米混懸劑。本發(fā)明所述的納米混懸劑可按常規(guī)的方法采用微孔濾膜過濾除菌后制成注射液，也可以按常規(guī)的方法進行冷凍干燥制成粉針劑。本發(fā)明所述納米混懸劑所含的丹參酮IIA、丹酚酸B、三七皂苷R1、人參皂苷Rgl、人參皂苷Rbl等多種藥物成分，理化性質各不相同。其中，丹參酮IIA為水難溶性成分，置于油相有利于藥物分散在油中并被外水相保護；丹酚酸B雖為水溶性成分，實驗發(fā)現若將其置于內水相，藥物將很快擴散進入外水相，包封率低，故將其放入油相，在所述乙酸乙酯和二氯甲烷比例中，丹酚酸B能較好分散，且不易擴散進入外水相，包封率高；三七皂苷類為水溶性成分，將其置于內水相有利于其分散在內水相中而被油相保護，從而形成的納米混懸劑將性質各異的各類藥物成分裝載，不僅能充分發(fā)揮復方多成分的配伍協(xié)同作用，而且能促進藥物穿過體內生物屏障(血腦屏障)，提高其局部生物利用度，具有顯著的治療優(yōu)越性。此外，本發(fā)明所述的復合乳化劑特異性地選擇油酸聚乙二醇甘油酯與司盤-80復配，顯著提高了包封率，從而更進一步改善了藥物的生物利用度。


圖1為一個具體實施例所制得的本發(fā)明所述納米混懸劑的透射電鏡照片。圖2為一個具體實施例所制得的本發(fā)明所述納米混懸劑的粒徑分布圖。
具體實施方式
下述實施例1 3所用丹酚酸B和丹參酮IIA購自深圳美荷生物有限公司，其中，所述丹酚酸B的純度> 95%，所述丹參酮IIA的純度> 98%。下述實施例1所用三七總皂苷購自成都曼思特生物科技有限公司，生產批號為080823，其中含，三七皂苷RP6.1%，人參皂苷Rgl36.5%，人參皂苷RbJl.8% ;下述實施例2所用三七總皂苷購自昆明駿興科技開發(fā)有限公司，生產批號為091017，其中含，三七皂苷Rj.2%，人參皂苷Rgl20.1%，人參皂苷RbJl 6% ；下述實施例3所用三七總皂苷購自四川杰象藥材原料有限公司，生產批號為100311，其中含,三七皂苷R1I0.1%，人參皂苷1^49.6%，人參皂苷Rbf0.2%。例I1、處方(I)有效成分:取丹酚酸B18mg，丹參酮IIAlOmg，三七總皂苷40mg。(2)輔料:油酸聚乙二醇甘油酯 50mg，司盤-8050mg，PLGA(LA/GA=50:50) 125mg,PVA4-88229mg，水 20ml。2、制備方法(I)制備復合乳化劑取油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80渦旋混勻，即可。(2)納米混懸劑(2.1)將制備的復合乳化劑加入由二氯甲烷0.7ml和乙酸乙酯0.3ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)另取PVA169mg溶于16.9ml水中，制成質量濃度為1%的PVA水溶液；(2.3)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.1ml水制得內水相；將PVA60mg溶于3ml水制得外水相；(2.4)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成W/0/W型復乳，然后，將所制得的W/0/W型復乳轉移至步驟(2.2)另配的PVA水溶液中稀釋，揮去有機溶劑后，8000r/min離心分層，取上層即得納米混懸劑。例21、處方(I)有效成分:取丹酚酸B5mg，丹參酮IIA5mg，三七總皂苷50mg。
(2)輔料:油酸聚乙二醇甘油酯 83mg，司盤-8017mg，PLGA(LA/GA=75:25) 150mg,PVA5-88380mg，水 20ml。2、制備方法(I)制備復合乳化劑取油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80渦旋混勻，即可。(2)納米混懸劑(2.1)將制備的復合乳化劑加入由二氯甲烷0.9ml和乙酸乙酯0.1ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.5ml水制得內水相；將PVA380mg溶于19.5ml水制得外水相；(2.3)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成W/0/W型復乳，揮去有機溶劑后，2000r/min離心分層，取上層即得納米混懸劑。例31、處方(I)有效成分:取丹酚酸B40mg，丹參酮IIA20mg，三七總皂苷280mg。

(2)輔料:油酸聚乙二醇甘油酯 35mg，司盤-8065mg，PLGA(LA/GA=80:20) 360mg,PVA17-88226mg，水 12ml。2、制備方法(I)制備復合乳化劑取油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80渦旋混勻，即可。(2)納米混懸劑(2.1)將制備的復合乳化劑加入由二氯甲烷0.6ml和乙酸乙酯0.4ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.7ml水制得內水相；將PVA226mg溶于11.3ml水制得外水相；(2.3)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成w/0/w型復乳，揮去有機溶劑后，即得納米混懸劑。例4 (乳化劑對包封率影響的研究)1、實驗樣品實驗組I為實施例1所制得的納米混懸劑。實驗組2為實施例2所制得的納米混懸劑。實驗組3為實施例3所制得的納米混懸劑。對照組I為下述方法所制得的納米混懸劑:1.1、處方(I)有效成分:取丹酚酸B18mg，丹參酮IIAlOmg，三七總皂苷40mg。(2)輔料:油酸甘油酯 50mg，司盤 _8050mg，PLGA(LA/GA=50:50) 125mg,PVA4-88229mg，水 20ml。1.2、制備方法(I)制備復合乳化劑取油酸甘油酯和司盤-80渦旋混勻，即可。(2)納米混懸劑(2.1)將制備的復合乳化劑加入由二氯甲烷0.7ml和乙酸乙酯0.3ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)另取PVA169mg溶于16.9ml水中，制成質量濃度為1%的PVA水溶液；(2.3)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.1ml水制得內水相；將PVA60mg溶于3ml水制得外水相；(2.4)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成W/0/W型復乳，然后，將所制得的W/0/W型復乳轉移至步驟(2.2)另配的PVA水溶液中稀釋，揮去有機溶劑后，8000r/min離心分層，取上層即得納米混懸劑。對照組2為下述方法所制得的納米混懸劑:
1.1、處方(I)有效成分:取丹酚酸B5mg，丹參酮IIA5mg，三七總皂苷50mg。(2)輔料:油酸聚乙二醇甘油酯 100mg，PLGA(LA/GA=75:25) 150mg, PVA5-88380mg,水 20ml。1.2、制備方法(2.1)將油酸聚乙二醇甘油酯加入由二氯甲烷0.9ml和乙酸乙酯0.1ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.5ml水制得內水相；將PVA380mg溶于19.5ml水制得外水相；(2.3)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成W/0/W型復乳，揮去有機溶劑后，2000r/min離心分層，取上層即得納米混懸劑。對照組3為下述方法所制得的納米混懸劑:1.1、處方(I)有效成分:取丹酚酸B40mg，丹參酮IIA20mg，三七總皂苷280mg。(2)輔料:司盤-80100mg，PLGA(LA/GA=80:20) 360mg, PVA17_88226mg，水 12ml。1.2、制備方法(2.1)將司盤-80加入由二氯甲烷0.6ml和乙酸乙酯0.4ml組成的有機溶劑中，渦旋混勻；(2.2)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中超聲作用混均制得油相；將三七皂總苷溶于0.7ml水制得內水相；將PVA226mg溶于11.3ml水制得外水相；(2.3)先將所述的內水相加入油相，超聲作用制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相，超聲作用制成w/0/w型復乳，揮去有機溶劑后，即得納米混懸劑。2、實驗方法分別取上述三個實驗組和三個對照組的納米混懸劑，采用反透析法按下述步驟測定包封率:(I)將納米混懸劑用等量0.2%SDS的生理鹽水稀釋作為重建液；(2)取透析袋，分別取重建液25mL置于透析袋外，制備濃度為0.2%的SDS生理鹽水2mL置于透析袋內，平衡12小時，取透析袋內溶液過濾后，高效液相進樣測定游離藥物濃
i G游離；(3)另取ImL重建液，加適量乙腈溶解，再用適量甲醇稀釋定容至5mL，高效液相進樣測定重建液中藥物總濃度C & ；( 4 )采用下式計算包封率:
權利要求
1.一種治療中風的丹參、三七復方的納米混懸劑，該納米混懸劑由有效成分和輔料組成，其特征在于， 所述的有效成分的用量為0.28 2.65w%，且由丹酚酸B8 27w%、丹參酮IIA5 15w%和三七總皂苷58 84w%組成；其中所述的三七總皂苷中含有，三七皂苷Rj 27w%，人參皂苷RgfO 50w%，人參皂苷RbfO 40w% ； 所述的輔料的用量為97.35 99.72w%，且由復合乳化劑0.47 0.8w%、聚乳酸-羥基乙酸共聚物0.6 2.85w%、聚乙烯醇1.1 1.9w%和水94.5 97.8w%組成； 所述的納 米混懸劑采用W/0/W復乳法制成，所述的W/0/W復乳中，油相由丹酚酸B、丹參酮IIA、聚乳酸-羥基乙酸共聚物和乳化劑混合組成，內水相由三七總皂苷溶于水形成，外水相由聚乙烯醇溶于水形成；所述的復合乳化劑由質量比為油酸聚乙二醇甘油酯:司盤-80=5:1 1: 2的油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80組成。
2.根據權利要求1所述的治療中風的丹參、三七復方的納米混懸劑，其特征在于，所述的復合乳化劑由質量比為油酸聚乙二醇甘油酯:司盤-80=1: I的油酸聚乙二醇甘油酯和司盤-80組成。
3.一種制備權利要求1或2所述的納米混懸劑的方法，該方法包括以下步驟: (A)分別，將丹酚酸B、丹參酮IIA和聚乳酸-羥基乙酸共聚物加入到用有機溶劑溶解的復合乳化劑中混均制得油相；將三七皂總苷溶于水制得內水相；將聚乙烯醇溶于水制得外水相；其中所述的有機溶劑由二氯甲烷60 90v%和乙酸乙酯10 40v%組成； (B)先將所述的內水相加入油相制成W/0型初乳，再將初乳加入外水相制成W/0/W型復乳，然后揮去有機溶劑，即得。
4.根據權利要求3所述的一種制備權利要求1或2所述的納米混懸劑的方法，其特征在于，還包括稀釋的步驟，即，所述的步驟(B)在揮去有機溶劑前先將所得的W/0/W型復乳轉移至另配的質量濃度為1%的聚乙烯醇水溶液中稀釋。
5.根據權利要求3所述的一種制備權利要求1或2所述的納米混懸劑的方法，其特征在于，還包括離心純化步驟，即，所述的步驟(B)在揮去有機溶劑后，1000 10000r/min離心分層，取上層即得所述納米混懸劑。
6.根據權利要求4所述的一種制備權利要求1或2所述的納米混懸劑的方法，其特征在于，還包括離心純化步驟，即，所述的步驟(B)在揮去有機溶劑后，1000 10000r/min離心分層，取上層即得所述納米混懸劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療中風的丹參、三七復方的納米混懸劑，其特征在于，所述的有效成分的用量為0.28～2.65w%，且由丹酚酸B8～27w%、丹參酮IIA5～15w%和三七總皂苷58～84w%組成；其中所述的三七總皂苷中含有，三七皂苷R15～27w%，人參皂苷Rg120～50w%，人參皂苷Rb120～40w%；所述的輔料的用量為97.35～99.72w%，且由復合乳化劑0.47～0.8w%、聚乳酸-羥基乙酸共聚物0.6～2.85w%、聚乙烯醇1.1～1.9w%和水94.5～97.8w%組成；所述的納米混懸劑采用W/O/W復乳法制成，所述的W/O/W復乳中，油相由丹酚酸B、丹參酮IIA、聚乳酸-羥基乙酸共聚物和復合乳化劑混合組成，內水相由三七總皂苷溶于水形成，外水相由聚乙烯醇溶于水形成。本發(fā)明所述的納米混懸劑具有生物利用度高、療效顯著的優(yōu)點。
文檔編號A61K36/258GK103070898SQ20131003487
公開日2013年5月1日 申請日期2013年1月29日 優(yōu)先權日2013年1月29日
發(fā)明者陳鋼, 溫露, 李霞, 張曉 , 龍偉 申請人:廣東藥學院