胸腺五肽peg化衍生物為活性成分的腸釋藥制劑及用途
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種以胸腺五肽的PEG化衍生物為活性成分的腸釋藥制劑及用途。胸腺五肽的PEG化衍生物口服制劑采用腸溶形式，避免胃蛋白酶對藥物的降解。連接了聚乙二醇的胸腺五肽，分子量增加，降低腎清除率，增加體內(nèi)保留時間。連接了聚乙二醇的胸腺五肽，降低被體內(nèi)蛋白酶和氨肽酶的降解速度，增加在血液中的保留時間，從而增加治療效果。由注射改口服或栓劑，增加病人的依從性，也可以降低治療成本。胸腺五肽的聚乙二醇衍生物的用作免疫調(diào)節(jié)劑。
【專利說明】胸腺五肽PEG化衍生物為活性成分的腸釋藥制劑及用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及胸腺五肽的PEG化衍生物作為藥物的使用方法及作用。
【背景技術(shù)】
[0002]胸腺五肽(TP5)是人工合成的五肽，其氨基酸順序和結(jié)構(gòu)與胸腺生成素(TP)的32-36位氨基酸組成相同，是TP重要的功能活性部分，具有與TP相似的生物活性。TP5能促進(jìn)胸腺和外周T細(xì)胞的分化和發(fā)育，對機(jī)體的免疫功能具有雙向調(diào)節(jié)作用，能使過高或過低的免疫反應(yīng)趨向正常。動物實驗和臨床研究證明TP5對免疫功能低下和自身免疫病患者的免疫功能具有重要的調(diào)節(jié)作用。
[0003]胸腺生成素(Thymopoietin，TP)是從人胸腺組織中分離出的一種49個氨基酸的多肽，具有促進(jìn)胸腺細(xì)胞和外周T細(xì)胞及B細(xì)胞分化發(fā)育，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能等生物活性。TP的32-36位氨基酸是TP重要的功能活性部分。人工合成的胸腺五肽(Thymopertin,TP5)、與TP的32-36位氨基酸殘基順序相同，即Arg-Lys-Asp-Val-Tyr、。胸腺五肽與TP具有相似的生物學(xué)活性，特別是胸腺五肽能雙向調(diào)節(jié)機(jī)體失衡的免疫功能，具有獨特的生物學(xué)作用，是一種重要的免疫調(diào)節(jié)劑。
[0004]胸腺五肽的藥理學(xué)作用。胸腺五肽是一種免疫調(diào)節(jié)劑，對機(jī)體免疫功能具有雙向調(diào)節(jié)作用，能使過強(qiáng)或受到抑制的免疫反應(yīng)趨向正常。胸腺五肽的另一個顯著特點是其半衰期很短，在體內(nèi)只有I分鐘左右，卻能引起較長時間的免疫調(diào)節(jié)效果，停藥后數(shù)月還能阻止皰疹復(fù)發(fā)。這種特點可能是由于胸腺五肽作用于體內(nèi)，產(chǎn)生了一種特殊的生物效應(yīng)，使機(jī)體不需要保持高的胸腺五肽血漿濃度就能起作用。但胸腺五肽這種特殊免疫調(diào)節(jié)作用的確切機(jī)理尚不清楚，有可能與胸腺五肽對未成熟的淋巴細(xì)胞作用有關(guān)。
[0005]胸腺五肽對胸腺的調(diào)節(jié)作用。年齡和各種應(yīng)激損傷能引起胸腺萎縮，胸腺產(chǎn)生的胸腺激素(胸腺素、TP等)和細(xì)胞因子減少。而T細(xì)胞在胸腺中的分化和發(fā)育需要TP等胸腺激素參與，因此胸腺激素的減少使胸腺萎縮進(jìn)一步加重，功能更加低下。胸腺五肽是TP的功能活性部分，能使機(jī)體失衡的免疫功能正常化，促進(jìn)胸腺細(xì)胞的生長和分化，因此，可應(yīng)用胸腺五肽調(diào)節(jié)減退的胸腺功能。有人證實，化學(xué)致癌劑DMBA造成的胸腺損傷與因年齡關(guān)系形成的胸腺變化十分相似，表現(xiàn)為T細(xì)胞白細(xì)胞介素2 (IL-2)受體表達(dá)下降，胸腺細(xì)胞和脾細(xì)胞對T-依賴性絲裂原反應(yīng)減弱；細(xì)胞免疫和體液免疫受到抑制；胸腺CD4+CD8+、CD4+CD8—淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量下降，胸腺體積縮小，尤以胸腺皮質(zhì)萎縮最明顯，胸腺微環(huán)境遭到破壞。由于胸腺功能低下，免疫監(jiān)視功能削弱，DMBA能誘導(dǎo)60%~70%的大鼠形成乳腺癌。但如在DMBA灌胃前I周開始皮下注射胸腺五肽，則能明顯改善DMBA造成的免疫功能低下，使胸腺細(xì)胞和脾細(xì)胞對伴刀豆球蛋白A (ConA)和植物血凝素(PHA)刺激的增殖反應(yīng)加強(qiáng)，胸腺⑶4+⑶8+和⑶4+⑶8—細(xì)胞亞群數(shù)量及脾細(xì)胞IL-2受體表達(dá)量增加。胸腺五肽可阻止DMBA引起的胸腺萎縮，并能明顯抑制腫瘤生長?？梢娦叵傥咫膶σ蚰挲g和其他因素造成的胸腺萎縮及功能減退具有重要的調(diào)節(jié)作用。
[0006]胸腺五肽對機(jī)體免疫功能低下的調(diào)節(jié)。體外實驗證實，盡管胸腺五肽對正常幼年及成年鼠的Thl、Th2細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子無影響，但卻能明顯促進(jìn)老年鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IL-2、Y干擾素(IFN-Y)和α腫瘤壞死因子(TNF-α )。體內(nèi)實驗也證實，皮下注射胸腺五肽能明顯促進(jìn)老年鼠產(chǎn)生IL-2、IFN-Y和TNF-a，同時降低老年鼠的IL-4水平。已經(jīng)證實，IFN-Y能抑制Th2細(xì)胞生長，但對Thl細(xì)胞的生長無抑制作用，因而胸腺五肽促進(jìn)老年鼠Thl細(xì)胞分泌IL-2和IFN- Y，可間接調(diào)節(jié)Th2細(xì)胞生物學(xué)活性，IL-4的免疫調(diào)節(jié)作用。給老年鼠注射胸腺五肽，由于Thl細(xì)胞功能的提高，Th2細(xì)胞功能的抑制，提高了機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，從而增強(qiáng)了老年鼠對利什曼原蟲感染的抵抗力。此外發(fā)現(xiàn)，實驗性損傷鼠應(yīng)用胸腺五肽后，也由于提高IL-2水平和降低IL-4水平，增強(qiáng)了對細(xì)菌的抵抗力，從而使死亡率下降，而急性應(yīng)激時，應(yīng)用胸腺五肽則通過提高血中超氧化物歧化酶(SOD)的水平和增強(qiáng)多形核白細(xì)胞的作用使機(jī)體適應(yīng)應(yīng)激變化。
在臨床上，用逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑疊氮胸苷(ZDV)治療無癥狀HIV感染者時，隨著治療時間的延長，RT基因可出現(xiàn)變異，使HIV對ZDV具有抗藥性。如果同時加用胸腺五肽則能顯著延緩HIV對ZDV的抗藥性產(chǎn)生，同時能提高循環(huán)血中DC4+T細(xì)胞數(shù)和降低HIV RNA拷貝數(shù)，從而延緩或阻止無癥狀HIV攜帶者發(fā)展為艾滋病。胸腺五肽對機(jī)體受損細(xì)胞免疫功能的提高，也使其對復(fù)發(fā)性單純皰疹、帶狀皰疹以及人類乳頭瘤病毒感染具有治療作用，并能使這些病毒的再感染間期顯著延長。胸腺五肽還可能通過提高⑶4+和⑶45R0+腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞數(shù)及其分泌 的細(xì)胞因子使腫瘤細(xì)胞凋亡及壞死，從而達(dá)到抗皮下轉(zhuǎn)移性黑素瘤的作用，并能減輕化療藥物的毒副作用。此外，胸腺五肽對放射治療、手術(shù)創(chuàng)傷、手術(shù)感染等應(yīng)激情況引起的機(jī)體免疫功能下降，具有明顯的保護(hù)作用。胸腺五肽還能預(yù)防復(fù)發(fā)性尿路感染和呼吸道感染。
胸腺五肽對自身免疫病的調(diào)節(jié)作用。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)等自身免疫病患者體內(nèi)Ts細(xì)胞過少，或關(guān)節(jié)局部的Ts細(xì)胞過少，不足以控制Th細(xì)胞的功能，使得巨噬細(xì)胞產(chǎn)生過量的IL-1及B細(xì)胞過度產(chǎn)生抗體，最終導(dǎo)致組織損傷，軟骨破壞。現(xiàn)有的治療RA的藥物大多有較大的毒副作用，且效果不理想。給RA患者靜脈注射胸腺五肽，能降低血中T4/T8細(xì)胞的比例。關(guān)節(jié)內(nèi)直接注射胸腺五肽也能升高循環(huán)中Ts細(xì)胞的比例，尤其能升高滑膜液內(nèi)Ts細(xì)胞的比例，從而Th細(xì)胞功能提高，使得IL-1水平下降，B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體減少，進(jìn)而緩解RA的關(guān)節(jié)癥狀，保護(hù)關(guān)節(jié)功能。加之胸腺五肽極少毒副作用，因而有理由認(rèn)為胸腺五肽是治療RA的理想藥物。體外實驗還證實，胸腺五肽能使變應(yīng)性皮炎(AD)患者外周血單核細(xì)胞分泌IFN- Y水平上升，IL-4水下降，使得IL-4刺激的IgE合成也減少，從而減輕AD患者的臨床癥狀。Hsieh等則認(rèn)為胸腺五肽對AD的治療作用主要是通過降低血中組胺釋放因子，使多形核白細(xì)胞分泌的炎性因子組胺減少所致。另外，胸腺五肽對系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性硬化等與自身免疫有關(guān)的疾病也具有治療價值。
[0007]胸腺五肽是肽類藥物，易被胃酸降解，且在人血液中很快被蛋白酶和氨肽酶降解為氨基酸，半衰期約為30秒。胸腺五肽易被腎小球過濾清除，排入尿液。胸腺五肽注射用藥劑量大，頻率高，周期長，使病人難以忍受，依從性差。
[0008]聚乙二醇(PEG)是一種高分子聚合物，無毒，無免疫原性，很容易經(jīng)腎排出體外。藥物的聚乙二醇修飾，即PEG化是將活化的聚乙二醇通過化學(xué)方法偶聯(lián)到蛋白質(zhì)、多肽、小分子有機(jī)藥物和脂質(zhì)體上，從而提高藥物在血漿中的穩(wěn)定性，減少藥物的酶解，降低藥物的免疫原性，使母體藥物在輸送、療效和體內(nèi)半衰期等方面都有顯著改善，從而提高其臨床價值和商業(yè)價值。
[0009]目前在世界范圍內(nèi)已上市的PEG化蛋白質(zhì)類制劑有先靈葆雅的Rebetron (PEG化干擾素a-2a+利巴韋林)；PEG-1NTR0N (PEG化干擾素a-2a) ;Pegasys (PEG化干擾素a-2b);英國PolyTherics公司的Thera PEG (長效干擾素制劑)；美國Cell Tech生物公司的PEG化腫瘤壞死因子以及可治療慢性結(jié)腸炎的PEG化新藥Lenkine (PEG化單克隆抗體);Human Genome公司的Albuferon (人血白蛋白+PEG化干擾素注射劑,可用于治療丙型肝炎)；Intarcia公司研制的DUROS植入式長效ω -干擾素制劑(據(jù)介紹其藥效可長達(dá)3個月之久)等幾十個產(chǎn)品，均有良好的臨床效果。
多肽和蛋白質(zhì)藥物的PEG化通過下面三個作用達(dá)到延長半衰期的目的:1、防止腎小球濾過。2、減少免疫原性。3、阻止蛋白酶降解。
[0010]胸腺五肽進(jìn)行PEG修飾后，采用腸道釋放給藥，可以避免胃蛋白酶對藥物的破壞。連接PEG后，由于分子量加大，降低腎清除率，增加體內(nèi)保留時間。聚乙二醇鏈保護(hù)胸腺五肽不易被體內(nèi)蛋白酶水解，增加體內(nèi)存留時間，延長藥物的半衰期，達(dá)到長效制劑作用。由注射改口服，增加病人的依從性，方便患者，降低醫(yī)療成本。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]本發(fā)明的目的是提供一種胸腺五肽PEG化衍生物的腸釋藥制劑。改變了胸腺五肽的給藥途徑,為病人免去了注射痛苦,增加病人的耐受性，降低治療成本。
[0012]本發(fā)明提供一種胸腺五肽PEG化衍生物的腸釋藥制劑。該衍生物的結(jié)構(gòu)為在胸腺五肽的N-端氨基、C-端羧 基或側(cè)鏈的氨基或羧基偶聯(lián)上含有一個或一個以上的聚乙二醇衍生物基團(tuán)。該基團(tuán)中聚乙二醇部分的分子量在50-200000道爾頓。
[0013]本發(fā)明在于把胸腺五肽PEG化衍生物作成口服型腸溶制劑，如腸溶膠囊，腸溶片，也可以是脂質(zhì)體或微球包裹型的腸釋藥制劑。進(jìn)行口服給藥，方便患者服用。
[0014]本發(fā)明在于把胸腺五肽PEG化衍生物作成肛門栓型腸釋藥制劑，方便給藥，避免注射帶來的痛苦。
[0015]胸腺五肽被PEG修飾后，采用腸溶給藥，可以避免胃蛋白酶對藥物的破壞。在腸道吸收，由于分子量加大，降低腎清除率，增加體內(nèi)保留時間。聚乙二醇鏈保護(hù)胸腺五肽不易被體內(nèi)蛋白酶水解，增加體內(nèi)存留時間，延長藥物的半衰期，達(dá)到長效制劑作用。
[0016]胸腺五肽被PEG修飾后，腸溶釋藥用于治療(I)慢性乙型肝炎；(2)各種原發(fā)性或繼發(fā)性T細(xì)胞缺陷病(如兒童先天性免疫缺陷病)；(3)某些自身免疫性疾病(如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，兒童支氣管哮喘和哮喘性支氣管炎等)；(4)各種細(xì)胞免疫功能低下的疾病(如病毒性肝炎，預(yù)防上呼吸道感染，頑固性口腔潰瘍等)；(5)腫瘤的輔助治療。
具體實施方案
[0017]實施例1
PEG化胸腺五肽腸溶膠囊:將PEG化胸腺五肽與微晶纖維素、淀粉、甘露醇、聚維酮和微粉硅膠等輔料，過篩、混合制粒，整粒，灌入腸溶膠囊殼中。
[0018]實施例2
PEG化胸腺五肽腸溶片:將PEG化胸腺五肽與微晶纖維素、淀粉、枸櫞酸鈉、聚維酮和硬脂酸鎂等輔料，過篩、混合制粒，整粒，壓片，包腸溶衣。
[0019]實施例3
PEG化胸腺五肽腸溶微球:將PEG化胸腺五肽與乙交酯丙交酯混合制成微球，裝入腸溶膠囊殼中。
[0020]實施例4
PEG化胸腺五肽腸釋藥脂質(zhì)體:將PEG化胸腺五肽與豆油、卵磷脂混合制成脂質(zhì)體包含體，注入腸溶軟膠囊中。
[0021]實施例5
PEG化胸腺五 肽肛門栓劑:將PEG化胸腺五肽與聚乙烯醇6000、甘油、泊洛沙姆等輔料混合制成栓劑。
【權(quán)利要求】
1.一種以胸腺五肽的PEG化衍生物為活性成分的腸釋藥制劑，單位劑量以胸腺五肽計為 0.01-1OOOmg0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制劑是口服腸溶型制劑，包括腸溶膠囊和腸溶片劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述制劑是肛門栓型腸釋藥制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述制劑是脂質(zhì)體、微球包裹在腸道釋藥型。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述胸腺五肽的PEG化衍生物，其特征是:在胸腺五肽的C-端羧基、N-端氨基、側(cè)鏈的羧基、氨基和羥基等活性基團(tuán)上引入一個或一個以上的PEG化衍生物基團(tuán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述引入的PEG化衍生物基團(tuán)，其特征是:聚乙二醇部分的分子量在50-200000道爾頓。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述制劑的適應(yīng)癥是:(1)慢性乙型肝炎；(2)各種原發(fā)性或繼發(fā)性T細(xì)胞缺陷病(如兒童先天性免疫缺陷病);(3)某些自身免疫性疾病(如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，兒童支氣管哮喘和哮喘性支氣管炎等)；(4)各種細(xì)胞免疫功能低下的疾病(如病毒性肝炎，預(yù)防上呼吸道感染，頑固 性口腔潰瘍等)；(5)腫瘤的輔助治療。
【文檔編號】A61K47/48GK103920136SQ201310015798
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2013年1月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月16日
【發(fā)明者】張保格, 曹秀格, 張翕 申請人:張保格