專利名稱：滇南羊耳菊提取物及其制備與在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物，具體涉及滇南羊耳菊有效成分的提取分離方法與用途；尤其涉及滇南羊耳菊提取物吉瑪烷型倍半萜內(nèi)酯的提取分離方法以及在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤已成為一個全球公共健康問題。近30年來，惡性腫瘤發(fā)病數(shù)以年均3%-5%的速度遞增，3/4新增病例發(fā)生在新興工業(yè)國家及發(fā)展中國家，惡性腫瘤已成為人類第一位死因。目前在中國，惡性腫瘤已經(jīng)成為主要死亡原因之一。隨著經(jīng)濟、社會、環(huán)境和生活方式發(fā)生快速變化，人口結(jié)構(gòu)快速向老齡化轉(zhuǎn)變，中國癌譜呈現(xiàn)特征性變化。鄭榮壽等(鄭榮壽，張思維，吳 良有，李光琳，趙平，赫捷，陳萬青，中國腫瘤登記地區(qū)2008年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]，中國腫瘤，2012，21 (I):1-12)對我國腫瘤登記地區(qū)癌癥發(fā)病和死亡分析表明:無論城市還是農(nóng)村，惡性腫瘤發(fā)病占前幾位的主要是肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌、食管癌、胰腺癌、腦瘤、淋巴瘤、女性乳腺癌和宮頸癌等，占全部惡性腫瘤發(fā)病的75%左右；惡性腫瘤死亡前幾位的主要是肺癌、胃癌、肝癌、食管癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、乳腺癌、腦瘤、白血病和淋巴瘤,約占全部惡性腫瘤死亡的80%左右。目前，化療已經(jīng)成為治療腫瘤的主要手段之一。常用的抗腫瘤藥物通?？煞譃橥榛瘎?、抗代謝藥、抗生素、植物來源作用于微管和蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)藥、金屬絡(luò)合物類、和其它抗腫瘤藥。這些藥物有效地延長了患者的生命或者提高了患者的生活質(zhì)量，但其明顯的毒副作用限制了其療效的發(fā)揮。當今醫(yī)學對于腫瘤的防治依然處于初級階段。中藥有幾千年的人體毒性實驗基礎(chǔ)，從天然產(chǎn)物中，尋找高效低毒的抗腫瘤活性的先導化合物，一直是新藥研究的熱點。漠南羊耳菊(Inula wissmanniana Hand.-Mazz.),云南地區(qū)俗稱“火把?！?，為中國特有的菊科旋覆花屬植物，產(chǎn)云南南部(元江、屏邊)，生于低山開曠坡地，海拔1200 1650米。有10多種旋覆花屬植物具有藥用記載。國內(nèi)外學者(Zhao YM, Zhang ML, ShiQWj Kiyota H.Chemical constituents of plants from the genus Inula.Chemistry &Biodiversity 2006;3:371-383)先后從該屬植物中分離得到黃酮、倍半職內(nèi)酯、職類等結(jié)構(gòu)類型的化合物，倍半萜內(nèi)酯是本屬植物的特征性成分；倍半萜內(nèi)酯具有很重要的生物活性，具有抗炎、抗腫瘤、抗病毒、驅(qū)蟲殺蟲、免疫抑制等多種作用。倍半萜內(nèi)酯還因為其結(jié)構(gòu)簡單，并且具有多種結(jié)構(gòu)形式，可作為研發(fā)藥物的先導化合物。目前，尚無相關(guān)滇南羊耳菊化學成分及其藥理活性的文獻報道，也未見與本發(fā)明中的滇南羊耳菊提取物制備方法、用途有關(guān)的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題的目的在于克服上述不足之處，研究設(shè)計滇南羊耳菊提取物及其提取分離方法和用途。
本發(fā)明提供了一種滇南羊耳菊提取物，所述提取物主要為吉瑪烷型倍半萜滇南羊
耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊或羊耳菊內(nèi)酯，它們的結(jié)構(gòu)式和絕對構(gòu)型分別如下:
權(quán)利要求
1.滇南羊耳菊提取物，其特征在于，所述提取物為滇南羊耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊和羊耳菊內(nèi)酯，它們的結(jié)構(gòu)式和絕對構(gòu)型分別如下:
2.制備如權(quán)利要求1所述滇南羊耳菊提取物的方法，其特征在于， 該方法包括下列步驟: (1)將滇南羊耳菊全草干燥，粉碎，以廣10倍量80 95%乙醇室溫浸泡提取3 4次，每次12 24小時，合并得提取液； (2)減壓濃縮提取液至無醇味，得水混懸流浸膏，加I 3倍水稀釋，依次用2 6倍石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取，減壓回收各萃取部分，得無水浸膏； (3)將上述二氯甲烷部位應(yīng)用硅膠柱色譜，以體積比為100:0 2:1的二氯甲烷/甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，薄層色譜檢測，分別收集含有滇南羊耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊及羊耳菊內(nèi)酯的流分，再經(jīng)葡聚糖凝膠柱色譜，以體積比為1:1的二氯甲烷/甲醇洗脫，最后經(jīng)液相色譜制備，得滇南羊耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊及羊耳菊內(nèi)酯。`
3.如權(quán)利要求1所述的滇南羊耳菊提取物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊提取物作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
5.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
6.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯甲作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
7.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯乙作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
8.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯丙作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
9.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯丁作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
10.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為由滇南羊耳菊內(nèi)酯戊作為活性成分與藥用輔料組成的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種滇南羊耳菊植物提取物及其制備與在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述提取物為吉瑪烷型倍半萜內(nèi)酯滇南羊耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊或羊耳菊內(nèi)酯，它們的化學結(jié)構(gòu)式及絕對構(gòu)型如下通過滇南羊耳菊內(nèi)酯甲、乙、丙、丁、戊及羊耳菊內(nèi)酯對人肝癌細胞HepG2、人前列腺癌細胞PC-3、人胃癌細胞MGC-803、人白血病細胞K562、人鼻咽癌細胞KB及正常人肝細胞LO2的毒性殺傷作用實驗，結(jié)果顯示上述吉瑪烷型倍半萜內(nèi)酯具有強烈的殺傷腫瘤細胞作用，能抑制腫瘤細胞的增殖，導致腫瘤細胞的死亡。動物體內(nèi)實驗表明滇南羊耳菊植物提取物及單體化合物均具有抗腫瘤作用，可作為活性成分用于制備抗腫瘤藥物。本發(fā)明為臨床提供了新的治療癌癥藥物，有較大的臨床應(yīng)用價值和社會效益。
文檔編號A61P35/02GK103102336SQ20131001491
公開日2013年5月15日 申請日期2013年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月15日
發(fā)明者張衛(wèi)東, 金慧子, 成向榮, 王春輝, 管斌, 欒鑫, 嚴詩楷, 單磊, 蘇娟 申請人:上海交通大學