用于治療鈣吸收不良和骨代謝紊亂的無定形碳酸鈣的制作方法
【專利摘要】提供了利用施用包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣的組合物，用于治療鈣吸收不良和與鈣吸收不良相關的狀況的方法。還提供了利用與骨再吸收抑制劑組合施用所述組合物，用于在骨代謝相關的紊亂、疾病或狀況中增加骨礦物質密度的方法。
【專利說明】用于治療鈣吸收不良和骨代謝紊亂的無定形碳酸鈣 發(fā)明領域
[0001] 本發(fā)明涉及天然的和合成的無定形碳酸鈣的組合物，用于治療鈣吸收不良和吸收 不良相關的紊亂、疾病和狀況，以及用于在鈣吸收不良和骨代謝相關的紊亂中增加骨礦物 質密度。
[0002] 置量
[0003] 鈣被認為是在人體中最重要的礦物質之一。需要鈣來維持骨礦物質密度，鈣對神 經遞質的胞吐作用至關重要，鈣參與肌細胞的收縮，鈣取代鈉作為心臟的去極化礦物，并參 與許多其他生理功能。鈣的胃腸道吸收，不僅取決于膳食鈣的可用性，還取決于腸道的吸 收能力，腸道的吸收能力受生理因素諸如鈣儲備、激素調節(jié)或以前膳食鈣供給的影響。鈣 鹽（例如碳酸鈣）在胃中的溶解是鈣作為鈣離子（Ca (2+))在近端小腸內的適當的主動和 被動吸收的一個步驟。胃酸顯著增加難溶性鈣鹽的溶解和電離。如果不適當分泌酸，鈣鹽 微溶（離子化），并隨后可不被適當和有效地吸收。萎縮性胃炎，胃手術，和大劑量、長期 使用抗分泌藥物顯著降低胃酸分泌，并因此，可處于飲食和補充鈣的吸收不良的風險狀況 中，并由此長期可增加骨質疏松癥的風險（Sipponen等人，Scand J Gastroenterol. 2010; 45(2) :133-8)。
[0004] 鈣的胃腸吸收還可在減肥手術后的患者、患有甲狀旁腺功能減退癥、克羅恩氏病 (Crohn's disease)、囊性纖維化、炎性腸病或乳糜瀉（celiac disease)的患者中減少。攝 入另外類型的藥物，諸如質子泵抑制劑、抗驚厥藥、及長期皮質類固醇的個體，也可發(fā)生鈣 吸收不良。
[0005] 鈣的生物利用度取決于其胃腸道吸收和將吸收的鈣摻入到骨中。關于腸道吸收， 生理因素，特別是激素，在鈣摻入到骨中起主要作用。因此鈣的生物利用度可被定義為由 腸道潛在可吸收的并可被用于生理機能，特別是骨礦化，或以限制骨損失的膳食鈣的比例 (Gueguen 等人，J Am Coll Nutr，2000 卷 19 號 suppl 2 119S-136S)。
[0006] 骨礦物質密度的損失與多種代謝性骨疾病，諸如：骨質減少、骨軟化癥、佝僂病、囊 性纖維性骨炎、和骨質疏松癥相關。有研究表明，膳食鈣的攝入量不足可誘發(fā)許多骨相關疾 病，諸如骨質疏松癥。
[0007] 用于預防和治療某些類型的骨質損失（包括骨質疏松癥）的標準藥物是抗再吸收 齊IJ?？乖傥談┑囊粋€非限制性實例是雙膦酸/鹽/酯，例如雙膦酸/鹽/酯阿侖膦酸/ 鹽/酯（ALN)。ALN的施用減弱骨礦物質密度（BMD)的下降，因為ALN具有骨再吸收抑制效 應。然而，ALN還抑制骨形成且其的施用與不良癥狀的風險相關是公認的問題。組合使用 幾種藥物已被建議用于改善患者的順應性和治療效果。
[0008] 如今補充劑中所使用的鈣，無論獲自天然來源或合成的沉淀物，可包括有機鈣鹽 和無機鈣鹽兩者。在鈣的胃腸道吸收有限的特定條件下，可用補充劑的標準攝入不足以促 進吸收，導致需要增加攝入的劑量。吸收不良相關狀況中攝入更高鈣劑量的需求導致像便 秘、腎結石、血管問題和隨后降低的順應性的不良作用。此外，大多數鈣補充劑要求低胃pH 以有效地溶解并通過腸道吸收，并因此其生物利用度在禁食狀態(tài)中較好。
[0009] 在過去的20年中，出現了對碳酸鈣的熱力學不穩(wěn)定的無定形多形體，命名為無定 形碳酸鈣（ACC)的迅速增加的科學興趣。在自然界中，ACC由少數的生物體，主要是發(fā)展了 用于在瞬時礦物沉積部位中穩(wěn)定ACC能力的甲殼類動物和其他無脊椎動物來利用。這些生 物體需要用于鈣的周期性松動、吸收和沉淀的特殊有效礦物源。在某些甲殼類動物，諸如淡 水螯蝦中，ACC以大量存儲于稱為胃石的特化的瞬時貯藏器官中。
[0010] 近年來，本發(fā)明的一些發(fā)明人已公開了，將胃石器官磨碎作為藥物和營養(yǎng)藥物 鈣組合物中有用的細粉的用途（W0 05/115414)。公開了，包含胃石組分的組合物的每日 口服攝入顯著改善一系列的狀況，諸如骨紊亂、骨折、和癌癥（W0 2008/041236)。用于 治療各種紊亂和狀況的包含ACC和磷酸化的肽或氨基酸的藥物和營養(yǎng)藥物組合物在W0 2009/053967 中公開。
[0011] 對于鈣吸收不良、鈣吸收不良相關的骨密度損失和骨代謝相關疾病的有效治療存 在未滿足的需要。
[0012] 發(fā)明概沭
[0013] 本發(fā)明提供了使用包括合成的或天然的穩(wěn)定ACC的組合物用于治療鈣吸收不良 的方法。本文中第一次公開了，ACC可克服其他類型的鈣補充劑的缺陷，甚至在患有鈣吸收 不良的患者中的缺陷。
[0014] 此外鈣吸收不良的治療可預防或減少或延緩鈣缺乏相關的紊亂、疾病的發(fā)作。根 據一些實施方案，與鈣缺乏相關的狀況包括減肥手術或胃手術后的患者，患有甲狀旁腺功 能減退癥、維生素 D缺乏、腎小管疾病、腎衰竭、胰腺炎、低蛋白血癥和高磷血癥的患者。根 據另外實施方案，涉及鈣吸收不良的疾病包括克羅恩氏病、囊性纖維化、炎性腸病、乳糜瀉、 和特應性胃炎。根據另外的實施方案，鈣吸收不良可包括具有增強的骨形成的受試者和攝 入皮質類固醇、質子泵抑制劑、抗驚厥藥、利福平和類似的抗生素、螯合劑、和抗分泌藥的個 體。
[0015] 與其他鈣補充劑相比，穩(wěn)定的ACC的增強的鈣胃腸吸收可延緩或最小化包括絕經 后女性和圍絕經期女性、老年男性、兒童、青少年、孕婦和哺乳期女性的其他人群中起因于 鈣缺乏的狀況和紊亂。
[0016] ACC的增強的鈣生物利用度還可延緩或最小化患有鈣吸收不良的受試者中的骨密 度損失。本發(fā)明提供了包括合成的或天然的穩(wěn)定ACC的組合物用于在代謝性骨紊亂、疾病 和狀況的受試者中增加骨礦物質密度的用途。本發(fā)明的組合物還被用于所述紊亂、疾病或 狀況，包括骨軟化癥、骨佩吉特氏病（Paget's disease of bone)、骨質減少、囊性纖維性骨 炎、佝僂病、骨質疏松癥和急性酒精攝入的延緩發(fā)生和治療。
[0017] 在一個方面，本發(fā)明提供了在需要治療鈣吸收不良的受試者中治療鈣吸收不良的 方法，包括向所述受試者施用有效量的包含至少一種穩(wěn)定劑的穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)。 根據一些實施方案，ACC是合成來源的。根據其他實施方案，ACC是天然來源的。
[0018] 根據一些實施方案，穩(wěn)定劑選自由以下組成的組：有機酸、磷酸羥基羧酸酯、或硫 酸羥基羧酸酯、帶有羥基的有機化合物，及其組合。每個可能性代表了本發(fā)明的獨立實施方 案。在一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑包含選自以下的至少一種組分：磷酸羥基羧酸酯或硫 酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。在一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑包含選自以下的 至少一種組分：磷酸化的氨基酸和多元醇。所述氨基酸可以以氨基酸衍生物或寡肽或多肽 存在，且所述多元醇可包括醇或糖類。每個可能性代表了本發(fā)明的獨立實施方案。根據一 些實施方案，磷酸化的氨基酸選自磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸。根據一些實施方案，所述穩(wěn)定 劑包括選自單糖類、二糖類、寡糖類和多糖類的至少一種糖。根據一些實施方案，所述穩(wěn)定 劑包括與至少一種堿金屬氫氧化物進一步組合的帶有羥基的有機化合物。根據一些實施方 案，穩(wěn)定劑是羧酸、優(yōu)選朽 1檬酸、酒石酸或蘋果酸。在一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑包括選自 以下的至少一種化合物：磷酸化的氨基酸、磷酸化的肽、連同至少一種肽的甲殼質、和連同 堿性氫氧化物的多元醇。根據一些示例性實施方案，所述ACC獲自分離的甲殼類動物胃石。 根據一個實施方案，所述天然ACC由甲殼質和多肽來穩(wěn)定。根據另一個實施方案，ACC是合 成的，其中所述合成的ACC由選自磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸的磷酸化的氨基酸來穩(wěn)定。根 據另一個實施方案，所述合成的ACC由磷酸絲氨酸與檸檬酸組合來穩(wěn)定。根據還另一個實 施方案，所述合成的ACC由朽 1檬酸來穩(wěn)定。根據又另一個實施方案，所述ACC由鹿糖與氫氧 化鈉組合來穩(wěn)定。
[0019] 根據一些實施方案，受試者患有與血漿鈣濃度降低至8. 8mg/dL以下相關的鈣代 謝的紊亂。根據一些實施方案，需要治療的受試者選自由以下組成的組：患有甲狀旁腺功 能減退癥、維生素 D缺乏、腎小管疾病、腎衰竭、胰腺炎、低蛋白血癥、克羅恩氏病、囊性纖維 化、炎性腸病、乳糜瀉、高磷血癥、特應性胃炎的患者，肥胖手術或胃手術后的患者，具有增 強的骨形成的受試者，以及獲得選自包含以下的組的藥物的受試者：皮質類固醇、質子泵抑 制劑、抗驚厥藥、利福平和類似抗生素、螯合劑、和抗分泌藥。根據一些實施方案，受試者選 自絕經后或圍絕經期女性。根據一些實施方案，所述受試者容易發(fā)生骨礦物質密度損失相 關的紊亂、疾病和狀況。需要鈣吸收不良治療的受試者中與骨密度損失相關的紊亂可以是 骨質疏松癥。
[0020] 在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的藥物組合 物，所述穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)包含選自由以下組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、 磷酸羥基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物，所述藥物組合物用于治療 鈣吸收不良。根據本發(fā)明的藥物組合物還可包含載體、佐劑、稀釋劑或賦形劑。
[0021] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及無定形碳酸鈣用于治療鈣吸收不良的用途，所 述無定形碳酸鈣包含選自由以下組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、磷酸羥基羧酸酯、或 硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。
[0022] 在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及無定形碳酸鈣在制備用于治療鈣吸收不良的藥 劑中的用途，所述無定形碳酸鈣包含選自由以下組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、磷酸 羥基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。
[0023] 在另一個方面，本發(fā)明涉及用于治療鈣吸收不良相關的紊亂、疾病和狀況的包含 穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的組合物，所述穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)包含至少一種穩(wěn)定 劑。
[0024] 本發(fā)明還涵蓋包含穩(wěn)定無定形碳酸鈣（ACC)的組合物在制備用于在鈣吸收不良 相關紊亂、疾病和狀況中治療（在進食或禁食狀態(tài)）鈣吸收不良的藥劑中的用途，其中將 ACC與至少一種穩(wěn)定劑精細混合。在一個實施方案中，當在進食狀態(tài)施用時，包含穩(wěn)定ACC 的組合物具有優(yōu)良的胃腸吸收。在另一個實施方案中，當在禁食狀態(tài)施用時，包含穩(wěn)定ACC 的組合物具有優(yōu)良的胃腸吸收。
[0025] 在另一個方面，本發(fā)明提供了用于在骨代謝相關的紊亂、疾病或狀況中增強骨礦 物質密度的方法，包括向哺乳類動物受試者施用有效量的包含包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣 (ACC)和至少一種穩(wěn)定劑的組合物。根據一些實施方案，ACC是合成來源的。根據其他實施 方案，ACC是天然來源的。根據一些實施方案，穩(wěn)定劑選自由以下組成的組：有機酸、磷酸羥 基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯、帶有羥基的有機化合物，及其組合。每個可能性代表了本發(fā) 明的獨立實施方案。在一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑包含選自以下的至少一種組分：磷酸羥 基羧酸酯或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。在一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑包 含選自以下的至少一種組分：磷酸化的氨基酸和多元醇。所述氨基酸可以以氨基酸衍生物 或寡肽或多肽存在，且所述多元醇可包括醇或糖類。每個可能性代表了本發(fā)明的獨立實施 方案。根據一些實施方案，磷酸化的氨基酸選自磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸。根據一些實施方 案，所述穩(wěn)定劑包括選自單糖類、二糖類、寡糖類和多糖類的至少一種糖。根據一些實施方 案，所述穩(wěn)定劑包括與至少一種堿金屬氫氧化物進一步組合的帶有羥基的有機化合物。根 據一些實施方案，穩(wěn)定劑是羧酸、優(yōu)選梓檬酸、酒石酸或蘋果酸。在一些實施方案中，所述穩(wěn) 定劑包括選自以下的至少一種化合物：磷酸化的氨基酸、磷酸化的肽、連同至少一種肽的甲 殼質、和連同堿性氫氧化物的多兀醇。根據一些不例性實施方案，所述ACC獲自分離的甲殼 類動物胃石。
[0026] 根據一些實施方案，用于增強骨礦物質密度的方法包括施用包含與骨再吸收抑制 劑組合的穩(wěn)定的ACC的組合物。根據一些實施方案，骨再吸收抑制劑是雙膦酸/鹽/酯 (bisphosphonate)。根據一些實施方案,雙膦酸/鹽/酯選自阿侖膦酸/鹽/酯、利塞膦酸 /鹽/酯、替魯膦酸/鹽/酯、伊班膦酸/鹽/酯、唑來膦酸/鹽/酯、帕米膦酸/鹽/酯、依 替膦酸/鹽/酯、及其鹽和酯。根據一個實施方案，雙膦酸/鹽/酯是阿侖膦酸/鹽/酯。 根據一些實施方案，與沒有鈣補充劑或以穩(wěn)定的ACC補充劑以外的鈣補充劑需要的劑量相 t匕，組合物與較低治療劑量的雙膦酸/鹽/酯阿侖膦酸/鹽/酯組合施用。根據一些實施方 案，本發(fā)明提供了用于在選自以下的骨代謝相關紊亂、疾病或狀況中增強骨礦物質密度的 方法：骨質疏松癥、骨軟化癥、骨佩吉特氏病、骨質減少、囊性纖維性骨炎和佝僂病。在一個 特定的實施方案中，本發(fā)明提供了用于在骨質疏松癥中增強骨礦物質密度的方法。根據一 些實施方案，本發(fā)明提供了用于在選自以下的骨代謝相關紊亂、疾病或狀況中增強骨礦物 質密度的方法：骨軟化癥、骨佩吉特氏病、骨質減少、囊性纖維性骨炎、佝僂病、骨質疏松癥 和急性酒精攝入，該方法包括與骨再吸收抑制劑組合施用所述組合物。在一個特定的實施 方案中，本發(fā)明提供了用于在骨質疏松癥中增強骨礦物質密度的方法，該方法包括與雙膦 酸/鹽/酯阿侖膦酸/鹽/酯組合施用所述組合物。根據本發(fā)明的方法，向選自以下的哺 乳動物類受試者施用組合物：絕經后女性、老年男性、兒童、青少年、孕婦和哺乳期女性。根 據一些實施方案，用于增強骨礦物質密度的方法包括施用包含穩(wěn)定的ACC的組合物，其中 所述受試者選自患有鈣吸收不良和鈣吸收不良相關紊亂、疾病和狀況的患者。
[0027] 本發(fā)明還提供了包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的組合物在制備用于在骨代謝 相關紊亂、疾病或狀況中增強骨礦物質密度的藥劑中的用途，所述穩(wěn)定的無定形碳酸鈣 (ACC)包含選自由以下組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、磷酸羥基羧酸酯、或硫酸羥基 羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。根據本發(fā)明的藥物組合物還可包含載體、佐劑、稀釋劑或 賦形劑。
[0028] 在還另一個方面，本發(fā)明提供了在患有鈣吸收不良的受試者中增強鈣胃腸吸收的 方法，包括向所述受試者施用有效量的包含至少一種穩(wěn)定劑的ACC。根據一些實施方案，向 選自處于禁食狀態(tài)和處于進食狀態(tài)的受試者的所述受試者進行施用。
[0029] 本發(fā)明的所有上述和其他特征和優(yōu)點將通過其實施方案的以下說明性和非限制 性描述，并參考附圖來進一步理解。
[0030] 附圖簡沭
[0031] 圖1 :與結晶碳酸鈣比較，向大鼠施用無定形碳酸鈣（ACC)后提高了鈣水平
[0032] 結果是平均值土SEM。學生 t_ 檢驗（Student，s t-test) :*ρ〈0· 05
[0033] 圖2 :在進食的絕經后女性中，與結晶碳酸鈣（CCC)比較，無定形碳酸鈣（ACC)施 用后的鈣吸收比例增加了 2. 1倍/女性
[0034] 配對 t-檢驗：ρ〈0·01
[0035] 圖3 :在進食的絕經后女性中，當分析兩個分離的組時，與結晶碳酸鈣（CCC)比較， 無定形碳酸鈣（ACC)施用后的鈣吸收比例增加了 1.9倍
[0036] 結果是平均值土 SEM。學生t-檢驗：*p〈0. 05
[0037] 圖4 :在一個禁食的絕經后女性中，與結晶碳酸鈣（CCC)比較，無定形碳酸鈣（ACC) 施用后的鈣吸收比例增加了 4. 6倍
[0038] 圖5A-5E :來自每個處理組的代表性股骨遠端和第4椎骨橫截面的三維重建。
[0039] 用于以下的結節(jié)狀骨區(qū)（Tubercular bone region):假處理（Sham)(圖5A);結 晶碳酸鈣（CCC)(圖5B);無定形碳酸鈣（ACC)(圖5C) ;CCC+阿侖膦酸鹽（ALN)(圖ro);和 ACC+ALN (圖5E)。比例尺表示1. 5mm距離。
[0040] 圖6A-6D :由μ CT得到的各組的小梁骨礦物質密度（Tb. BMD)和來自總骨組織體 積的骨體積（BV/TV)。
[0041] 圖6A :股骨遠端的Tb. BMD。
[0042] 圖 6B :第 4 腰椎的 Tb. BMD。
[0043] 圖6C :股骨遠端的BV/TV。
[0044] 圖 6D :第 4 腰椎的 BV/TV。
[0045] 百分比表示從CCC處理的組（對照）的增加。
[0046] 圖7A-7E :來自每個處理組的代表性股骨遠端和第4脊椎橫截面的三維重建。
[0047] 用于以下的結節(jié)狀骨區(qū)：假處理（圖7A);對照（圖7B);胃石（Gast)(圖7C);無 定形碳酸鈣（ACC)(圖7D);和檸檬酸鹽（圖7E)。比例尺表示1. 5mm距離。
[0048] 圖8A-8B :由μ CT得到的各組的小梁骨礦物質密度（Tr. BMD)。
[0049] 圖8A :股骨遠端的Tr. BMD。
[0050] 圖 8B :第 4 腰椎的 Tr. BMD。
[0051] 單因素 AN0VA:p〈0. 001。字母表示Fishers LSD事后比較。
[0052] 圖9A-9B :由μ CT得到的各處理組的來自總骨組織的小梁骨體積（BV/TV)。
[0053] 圖9Α :股骨遠端的BV/TV。
[0054] 圖 9Β :第 4 腰椎的 BV/TV。
[0055] 單因素 AN0VA:p〈0. 001。字母表示Fishers LSD事后比較。
[0056] 圖10A-10G :腰椎的力學微結構性質。
[0057] 極限承載力（圖10A);極限承載力的能量（UF)(圖10B);韌性（圖10C);屈服能量 (Energy to yield)(圖 10D);骨小梁模式因子（TBPf) (Trabecular Bone Pattern factor) (圖10E);結構模型指數（SMI)(圖10F);各向異性度（DA)(圖10G)。
[0058] 單因素 AN0VA:p〈0. 01。字母表示Fishers LSD事后比較。棒表示SEM。
[0059] 發(fā)明詳沭
[0060] 本發(fā)明公開了包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的組合物的以前未知的用途。發(fā) 現，相比于通常市售的鈣補充劑，根據本發(fā)明的基于無定形碳酸鈣的組合物是優(yōu)良鈣源?，F 已發(fā)現，包含ACC的組合物具有令人驚奇地高的鈣生物利用度，包括在胃腸道和骨中更高 的吸收能力。因此，ACC的使用有益于鈣吸收不良相關的紊亂、疾病和狀況（進食和禁食狀 態(tài)兩者，甚至在禁食狀態(tài)下更大的優(yōu)勢）和骨損失相關的紊亂和狀況。
[0061] 如本文所用的術語"治療"，是指施用ACC并增強鈣在胃腸道和骨中的吸收。
[0062] 如本文所用的術語"延緩發(fā)生"或"預防"是指延緩骨疾病的發(fā)展，延緩癥狀的發(fā) 展和/或降低將要或預期發(fā)展的此類癥狀的嚴重程度。
[0063] 術語"穩(wěn)定的ACC"在本文中用以指示碳酸鈣長時間段被保持在無定形狀態(tài)，例如， 從數周至數年，經所述時間段不超過5%轉化成結晶形式。根據本發(fā)明，ACC的結晶通過添 加選自以下的一種或更多種穩(wěn)定劑來抑制：有機或無機成分，諸如磷酸化的氨基酸，其他有 機酸、肽類、鹽類、糖類、或脂類。所述鹽可包括，例如，選自鎂、鉀、鍶、和鈉的陽離子，和選自 碳酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、氯化物、溴化物、氟化物、檸檬酸鹽、延胡索酸鹽、蘋果酸鹽或其他 有機陰離子的陰離子；術語陰離子和陽離子被用于僅僅描述鹽的組成，并不暗示有關所述 分子的溶解度或pH的任何事。
[0064] 如本文所用的術語"穩(wěn)定劑（stabilizer) "或"穩(wěn)定劑（stabilizing agent) "可 互換使用，并且是指保持碳酸鈣在無定形狀態(tài)的任何物質。
[0065] 如本文所用的術語"鈣吸收不良"是指膳食鈣跨胃腸道的吸收異常。如本文所用 的術語"骨損失"是指在受試者中骨細胞或組織的任何減少、骨量的減少、骨礦物質的減少、 或骨礦物質密度的減少。
[0066] 如本文所用的術語"有效量"是指包含穩(wěn)定的ACC的組合物以治療鈣吸收不良、鈣 吸收不良和礦物質骨密度相關的疾病、紊亂和狀況，并以適用于任何醫(yī)學或營養(yǎng)治療的合 理利益/風險比率提高礦物質骨密度的足夠量。
[0067] 在一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含穩(wěn)定的ACC和足以維持ACC在無定形狀態(tài) 的量的穩(wěn)定劑的合成的（人工的）組合物。穩(wěn)定劑選自，但不限于，有機酸、磷酸羥基羧酸 酯、或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。根據一些實施方案，所述穩(wěn)定劑包含選自 以下的至少一種組分：磷酸羥基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯，諸如磷酸烯醇丙酮酸、磷酸絲 氨酸、磷酸蘇氨酸、硫酸絲氨酸（sulfoserine)或硫酸蘇氨酸（sulfothreonine)和選自單 糖類、二糖類、三糖類、寡糖類和多糖類，例如蔗糖、甘露糖、葡萄糖的帶有羥基的有機化合 物。包含帶有羥基的有機化合物的穩(wěn)定劑可還包含至少一種堿金屬氫氧化物，諸如氫氧化 鈉、氫氧化鉀和類似的氫氧化物。在本發(fā)明的一些實施方案中，所述穩(wěn)定劑選自磷酸化的氨 基酸和多元醇。磷酸化的酸可以以寡肽和多肽存在。在本發(fā)明的其他實施方案中，穩(wěn)定劑 是有機酸、優(yōu)選羧酸。羧酸優(yōu)選地選自檸檬酸、酒石酸或蘋果酸。
[0068] 在本發(fā)明的一個實施方案中，ACC由磷酸絲氨酸（P-Ser)或磷酸蘇氨酸（P-Thr)來 穩(wěn)定。在另一個實施方案中，穩(wěn)定的ACC包括鹿糖和氫氧化鈉的組合。在本發(fā)明的還另一 個實施方案中，ACC由檸檬酸來穩(wěn)定。在本發(fā)明的又另一個實施方案中，ACC由磷酸絲氨酸 和朽1檬酸的組合來穩(wěn)定。在本發(fā)明的優(yōu)選的實施方案中，將包含包含痕量的一種或更多種 穩(wěn)定劑的穩(wěn)定的ACC的人工組合物施用至需要增加或改進鈣吸收的人。
[0069] 在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了包含以分離的螯蝦胃石存在的穩(wěn)定的ACC的 天然組合物。磨碎的胃石包括ACC、主要由甲殼質和多肽組成的有機物質、和鹽。有機物質 中存在的組分穩(wěn)定ACC并阻止其結晶。
[0070] 在一個方面，本發(fā)明提出的高鈣生物利用度與穩(wěn)定分子不相關。在另一個方面，本 發(fā)明要求保護，高鈣生物利用度僅與碳酸鈣的無定形狀態(tài)相關。
[0071] 在另一個方面，本發(fā)明提供了用于治療患有鈣吸收不良和鈣吸收不良相關的紊 舌U疾病和狀況的患者中的鈣吸收不良的組合物，所述組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定的 ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。在另一個方面，提供了用于在患有鈣吸收不良的受試者中增強鈣 胃腸吸收的方法，所述方法包括向所述受試者施用有效量的包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣的組 合物，所述穩(wěn)定的無定形碳酸鈣包含至少一種穩(wěn)定劑。
[0072] 根據一些實施方案，與鈣缺乏相關的狀況包括肥胖手術或胃手術后的患者，患有 甲狀旁腺功能減退癥、維生素 D缺乏、腎小管疾病、腎衰竭、胰腺炎、低蛋白血癥、和高磷血 癥的患者。根據另外的實施方案，涉及鈣吸收不良的疾病包括克羅恩氏病、囊性纖維化、炎 性腸病、乳糜瀉、和特應性胃炎。根據另外的實施方案，鈣吸收不良可包含具有增強的骨形 成的受試者和攝入皮質類固醇、質子泵抑制劑、抗驚厥藥、利福平和類似的抗生素、螯合劑、 和抗分泌藥物的個體。
[0073] 降低的鈣胃腸吸收還可導致骨礦物質密度損失。在另一個方面，本發(fā)明提供了用 于在患有鈣吸收不良相關的紊亂、疾病和狀況的患者中增加礦物質骨密度的組合物，所述 組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。本發(fā)明還提供了用于在患 有鈣吸收不良的受試者中治療骨密度損失的組合物，所述組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定 的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。與其他鈣補充劑相比，穩(wěn)定的ACC的增強的鈣胃腸吸收可在 包括絕經后女性和圍絕經期女性、老年男性、兒童、青少年、孕婦和哺乳期女性的人群中延 緩或最小化起因于鈣缺乏的狀況和紊亂。
[0074] 在又另一個方面，本發(fā)明提供了用于在骨代謝相關的紊亂、疾病和狀況中增強骨 礦物質密度的組合物，所述組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。 根據本發(fā)明的一個實施方案，骨代謝相關的紊亂、疾病和狀況選自：骨軟化癥、骨佩吉特氏 病、骨質減少、囊性纖維性骨炎、佝僂病、骨質疏松癥和急性酒精攝入。根據一些實施方案， 所述組合物可與用于預防和治療骨損失的其他藥劑組合施用。預防和治療骨損失的藥劑選 自骨再吸收抑制劑，包括雙膦酸/鹽/酯（雙膦酸的鹽）、雌激素受體調節(jié)劑、雄激素受體 調節(jié)劑、降鈣素制品、α -降鈣素基因相關肽制品、依普黃酮制品、促蛋白合成類固醇制品、 抗RANKL(NF- κ Β配體的受體活化劑）抗體以及類似物。用于預防或治療骨礦物質密度損 失的雙膦酸/鹽/酯的一個非限制性實例是雙膦酸/鹽/酯阿侖膦酸/鹽/酯。包含ACC 的組合物與骨再吸收抑制劑的組合使用提供了對增加骨礦物質密度的累加效應。不希望受 任何特定理論的束縛，由ACC提供的累加效應可歸因于高生物利用度及其誘導骨形成的效 應。與ALN與結晶碳酸鈣組合施用相比，由于觀察到的累加效應，ACC與骨再吸收抑制劑組 合施用允許降低骨再吸收抑制劑的治療劑量。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了用于在骨 代謝相關的紊亂中增強骨礦物質密度的方法，包括施用與雙膦酸/鹽/酯組合的包含穩(wěn)定 的ACC的組合物，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。在本發(fā)明的上下文中，術語組合治 療包括以單一劑量形式或單獨的劑量形式施用兩種或更多種活性成分。單獨的劑量形式可 同時地或順序地或完全獨立地用單獨的治療方案來施用。例如，ACC可每日施用，而雙膦酸 /鹽/酯可較不頻繁地施用。
[0075] 在一些實施方案中，與沒有鈣補充劑或以穩(wěn)定的ACC補充劑以外的鈣補充劑需要 的劑量相比，所述組合物與較低治療劑量的雙膦酸/鹽/酯組合施用。在一些實施方案中， 雙膦酸/鹽/酯是阿侖膦酸/鹽/酯。在一些實施方案中，與沒有鈣補充劑或以穩(wěn)定的ACC 補充劑以外的鈣補充劑需要的劑量相比，所述組合物與較低治療劑量的阿侖膦酸/鹽/酯 組合施用。在一些實施方案中，與ALN組合的所述組合物被用于在骨質疏松癥中增強骨礦 物質密度。
[0076] 在又另一個方面，本發(fā)明提供了用于治療骨礦物質密度損失相關的紊亂的組合 物，所述組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。根據本發(fā)明的一個 實施方案，骨礦物質密度損失相關的紊亂、疾病和狀況選自骨軟化癥、骨質減少、囊性纖維 性骨炎、佝僂病、骨質疏松癥和急性酒精攝入。
[0077] 在還另一個方面，本發(fā)明提供了用于骨礦物質密度損失相關的紊亂的延緩發(fā)生或 預防的組合物，所述組合物包含穩(wěn)定的ACC，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn)定劑。根據 本發(fā)明的一個實施方案，骨礦物質密度損失相關的紊亂、疾病和狀況選自骨軟化癥、骨質減 少、囊性纖維性骨炎、佝僂病、骨質疏松癥和急性酒精攝入。
[0078] 根據本發(fā)明的方法，包含穩(wěn)定的ACC的組合物用于在易感骨礦物質密度減少或發(fā) 生骨代謝相關紊亂的受試者，諸如絕經后女性和老年男性中的使用是特別有利的。在另一 個方面，本發(fā)明的組合物向需要攝入高水平鈣的受試者諸如兒童、青少年及在懷孕和哺乳 期的女性施用。在又一個方面，本發(fā)明的組合物向患有鈣吸收不良的受試者施用。
[0079] 在一個方面，本發(fā)明涉及包含穩(wěn)定的ACC的組合物在制備用于在患有鈣吸收不良 相關的紊亂、疾病和狀況的患者中治療鈣吸收不良的藥劑中的用途，所述穩(wěn)定的ACC包含 至少一種穩(wěn)定劑。
[0080] 在還另外的方面，本發(fā)明涉及包含穩(wěn)定的ACC的組合物在制備用于在骨代謝相關 紊亂、疾病或狀況中增強骨礦物質密度的藥劑中的用途，所述穩(wěn)定的ACC包含至少一種穩(wěn) 定劑。在一些實施方案中，所述藥劑與骨再吸收抑制劑組合使用。在又另外的方面，所述組 合物用于制備用于治療骨礦物質密度損失相關的疾病、紊亂和狀況的藥劑。在還另外的方 面，本發(fā)明涉及包含ACC的組合物在制備用于預防骨礦物質密度損失相關疾病、紊亂和狀 況和鈣吸收不良相關的狀況的藥劑中的用途。在還另外的方面，本發(fā)明的組合物被用于在 容易發(fā)生代謝性骨紊亂、疾病和狀況的人群中增加鈣吸收。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及 口服施用包含穩(wěn)定的ACC的組合物，所述組合物當在進食狀態(tài)下施用時，具有優(yōu)良胃腸生 物利用度。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及在禁食狀態(tài)下口服施用包含穩(wěn)定ACC的組合 物，以達到更有效的胃腸生物利用度。
[0081] 已提供支持以下概念的證據：作為ACC施用時，不管穩(wěn)定分子或機制，無定形碳酸 鈣單獨促進鈣的較高生物利用度。在本發(fā)明的一個重要的實施方案中，當在進食狀態(tài)下施 用時，合成的ACC具有優(yōu)良的胃腸生物利用度。在本發(fā)明的另一個重要的實施方案中，當在 禁食狀態(tài)下施用時，合成的ACC具有優(yōu)良的胃生物利用度。在本發(fā)明的還其他重要的實施 方案中，當在進食狀態(tài)下施用時，來自天然來源的ACC具有優(yōu)良的胃生物利用度。在本發(fā)明 的另外重要的實施方案中，當在禁食狀態(tài)下施用時，來自天然來源的ACC具有優(yōu)良的胃生 物利用度。根據一些實施方案，無論受試者是否處于禁食狀態(tài)或進食狀態(tài)下，向需要此治療 的受試者進行施用包含至少一種穩(wěn)定劑的穩(wěn)定ACC。
[0082] 本發(fā)明的組合物可以優(yōu)選地以各種口服形式口服施用，所述口服形式包括，但不 限于，片劑、膠囊、丸劑、粉劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、混懸劑、糖漿劑、乳劑和凝膠形式。
[0083] 在口服施用是以片劑或膠囊的形式的情況下，組合物組分可與無毒的藥學上可接 受的惰性載體或賦形劑諸如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、改性的糖、改性淀粉、甲基纖維素及 其衍生物、甘露糖醇、山梨糖醇、和其他還原性和非還原性糖、硬脂酸鎂、硬脂酸、硬脂酰富 馬酸鈉、山崳酸甘油酯、無定形硅膠或其他干燥劑材料以及類似物組合。
[0084] 本發(fā)明的組合物可以以從0. 5g至約5g的每日劑量施用。根據另外的實施方案， 本發(fā)明的組合物可以以從1. 5g至約20g的每日劑量施用。本發(fā)明的組合物可以以包含從 0. 15g至約1. 5g的范圍的元素鈣的每日劑量施用。根據另外的實施方案，本發(fā)明的組合物 可以通常以包含從0. 5g至約6g的范圍的元素鈣的每日劑量施用。
[0085] 對于以液體形式口服施用，組合物組分可以與無毒的藥學上可接受的惰性載體諸 如乙醇、甘油、水以及類似物組合。當希望或需要時，還可將適合的粘合劑、潤滑劑、崩解劑 和著色劑和調味劑摻入至混合物中。
[0086] 根據本發(fā)明的組合物的特殊益處是其被證實對于口服施用的低毒性和高安全性。 因此，在本發(fā)明的其他方面，本發(fā)明的組合物有利地用作醫(yī)療食品。
[0087] 本發(fā)明人進行了旨在評估包含穩(wěn)定的ACC的鈣源的生物利用度的實驗。來自ACC 的鈣的生物利用度，以鈣胃腸吸收和對骨礦化過程的鈣可用性（骨吸收性）兩種方式來評 估。評估了一般健康人群和患有或易患鈣吸收不良的人群中的鈣胃腸吸收。降低的鈣胃腸 吸收是骨密度損失的原因之一。因此，還評估了患有鈣吸收不良的人群中的鈣骨吸收性。使 用穩(wěn)定的ACC可有益于在患有或易患鈣吸收不良的受試者中提高鈣胃腸吸收和增加骨礦 物質密度。還評估了在易患骨損失相關的紊亂和狀況的人群，例如絕經后的女性中的鈣胃 腸吸收。
[0088] 發(fā)現對骨礦化過程的增強的鈣可用性增加骨礦物質密度并積極影響其他骨參數。 如下文例證，評估了包含不同穩(wěn)定劑的穩(wěn)定的ACC對各種骨參數的效應。還評估了骨質疏 松大鼠模型中ACC對骨礦物質密度和其他骨參數的效應?；跓o定形碳酸鈣的組合物還與 骨抗再吸收的藥劑，諸如阿侖膦酸/鹽/酯雙膦酸/鹽/酯組合，并評價了它們對骨比例 (bone fraction)參數的相互效應。
[0089] 生物利用度測量包括基于用于評估各種藥物和補充劑的廣泛報道的生物利用度 模型，通過血清和尿取樣評估胃腸道中來自穩(wěn)定的ACC源的鈣吸收，并基于用于評估各種 藥物和補充劑的廣泛報道的骨質疏松預防和治療模型，評估來自穩(wěn)定的ACC源的鈣對骨礦 物質密度和其他骨參數的效應。在患有吸收不良的患者，例如患有甲狀旁腺功能減退癥的 患者和攝入皮質類固醇的個體以及患有骨礦物質密度相關紊亂的人群中評估了穩(wěn)定的ACC 的生物利用度。來自ACC源的鈣的增強的生物利用度允許單獨或與用于治療骨損失的標準 藥劑組合使用ACC用于治療和預防各種鈣吸收不良和代謝性骨相關的疾病、病患和狀況。 現已一般性地描述了本發(fā)明，通過參考通過說明來提供并非意在限制本發(fā)明的以下實施例 將更容易地理解本發(fā)明。 實施例
[0090] 試駘1 :來自ACC源的鈣的胃腸吸收。
[0091] 本實驗的目的是在大鼠放射性同位素標記模型中評價包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣 (ACC)的鈣源的胃腸吸收。
[0092] 使二十六只2月齡雄性Wistar大鼠，體重240±15g，口服施用包含本質上以45Ca 標記的ACC(無定形碳酸鈣）或CCC(結晶碳酸鈣）的單一明膠膠囊，隨后測量血清中的鈣 吸收比例以及鈣排泄。
[0093] 圖1呈現血清鈣濃度的變化，如通過對施用的劑量標準化放射性讀數來計算的。 接受ACC的大鼠中的C max值比CCC組中的那些Cmax值顯著更高（高達40%)(圖1和表1)。 [0094] 表1 : 口服施用放射性碳酸鈣制劑后血清中鈣的藥代動力學參數
[0095]
【權利要求】
1. 一種在需要治療鈣吸收不良的受試者中治療鈣吸收不良的方法，所述方法包括向所 述受試者施用有效量的包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的組合物，所述穩(wěn)定的無定形碳酸 鈣（ACC)包含至少一種穩(wěn)定劑。
2. 根據權利要求1所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑選自由以下組成的組：有機酸、磷酸羥 基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。
3. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑包含選自以下的至少一種組分：磷酸 羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。
4. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑包含選自以下的至少一種組分：磷酸 化的氨基酸和多元醇。
5. 根據權利要求4所述的方法，其中所述磷酸化的氨基酸以寡肽或多肽存在。
6. 根據權利要求5所述的方法，其中磷酸化的氨基酸選自磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸。
7. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑是選自單糖類、二糖類、三糖類、寡糖 類和多糖類的帶有羥基的有機化合物。
8. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑包括與至少一種堿金屬氫氧化物進一 步組合的帶有羥基的有機化合物。
9. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑是羧酸，優(yōu)選檸檬酸、酒石酸或蘋果 酸。
10. 根據權利要求2所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑包括選自由以下組成的組的至少一 種化合物：磷酸化的氨基酸、磷酸化的肽、連同至少一種肽的甲殼質、和連同堿性氫氧化物 的多元醇。
11. 根據權利要求1所述的方法，其中所述ACC獲自分離的甲殼類動物胃石。
12. 根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者患有與血漿鈣濃度降低至8. 8mg/dL 以下相關的鈣代謝的紊亂。
13. 根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者選自由以下組成的組：患有甲狀旁腺 功能減退癥、維生素 D缺乏、腎小管疾病、腎衰竭、胰腺炎、低蛋白血癥、克羅恩氏病、囊性纖 維化、炎性腸病、乳糜瀉、高磷血癥、萎縮性胃炎的患者，肥胖手術或胃手術后的患者，具有 增強的骨形成的受試者，以及獲得選自包含以下的組的藥物的受試者：皮質類固醇、質子泵 抑制劑、抗驚厥藥、利福平和類似抗生素、螯合劑、和抗分泌藥。
14. 根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者容易發(fā)生骨礦物質密度損失相關的 紊亂、疾病和狀況。
15. 根據權利要求1所述的方法，其中所述受試者選自絕經后或圍絕經期女性。
16. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)和選自由以下 組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、磷酸羥基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯、和帶有羥基的 有機化合物，所述藥物組合物用于治療鈣吸收不良。
17. 根據權利要求16所述的藥物組合物，還包括載體、佐劑、稀釋劑或賦形劑。
18. -種用于在骨代謝相關的紊亂、疾病或狀況中增強骨礦物質密度的方法，包括向哺 乳類動物受試者施用有效量的包含包含至少一種穩(wěn)定劑的穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的 組合物。
19. 根據權利要求18所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑選自由以下組成的組：有機酸、磷酸 羥基羧酸酯、或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物。
20. 根據權利要求18所述的方法，其中所述ACC獲自分離的甲殼類動物胃石。
21. 根據權利要求18所述的方法，其中所述組合物與骨再吸收抑制劑組合施用。
22. 根據權利要求21所述的方法，其中所述骨再吸收抑制劑是雙膦酸/鹽/酯。
23. 根據權利要求22所述的方法，其中所述雙膦酸/鹽/酯選自阿侖膦酸/鹽/酯、 利塞膦酸/鹽/酯、替魯膦酸/鹽/酯、伊班膦酸/鹽/酯、唑來膦酸/鹽/酯、帕米膦酸/ 鹽/酯、依替膦酸/鹽/酯、及其鹽和酯。
24. 根據權利要求23所述的方法，其中所述雙膦酸/鹽/酯是阿侖膦酸/鹽/酯。
25. 根據權利要求18和21的任一項所述的方法，其中所述骨代謝相關的紊亂、疾病和 狀況選自骨軟化癥、骨佩吉特氏病、骨質減少、囊性纖維性骨炎、佝僂病、骨質疏松癥和急性 酒精攝入。
26. 根據權利要求25所述的方法，其中所述疾病是骨質疏松癥。
27. 根據權利要求25所述的方法，其中所述所述受試者選自絕經后女性、老年男性、兒 童、青少年、孕婦和哺乳期女性。
28. 根據權利要求18所述的方法，其中所述受試者選自患有鈣吸收不良的患者。
29. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)，所述穩(wěn)定的無 定形碳酸鈣（ACC)包含選自由以下組成的組的至少一種穩(wěn)定劑：有機酸、磷酸羥基羧酸酯、 或硫酸羥基羧酸酯和帶有羥基的有機化合物，所述藥物組合物用于在骨代謝相關的紊亂、 疾病和狀況中增強骨礦物質密度。
30. 根據權利要求29所述的藥物組合物，所述藥物組合物用于與骨再吸收抑制劑組合 使用。
31. -種用于在患有鈣吸收不良的受試者中增加鈣胃腸吸收的方法，包括向所述受 試者施用有效量的包含穩(wěn)定的無定形碳酸鈣（ACC)的組合物，所述穩(wěn)定的無定形碳酸鈣 (ACC)包含至少一種穩(wěn)定劑。
32. 根據權利要求31所述的方法，其中所述受試者選自處于禁食狀態(tài)和處于進食狀態(tài) 的受試者。
【文檔編號】A61K33/06GK104114179SQ201280069595
【公開日】2014年10月22日 申請日期:2012年12月13日 優(yōu)先權日:2011年12月13日
【發(fā)明者】阿米爾·薩希, 阿薩夫·瑟爾特, 蓋利特·薛泰爾-高德, 麥克·丹尼利, 歐爾文·梅倫 申請人:艾瑪菲克有限公司