專利名稱：一種復(fù)合型生物套管的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型屬于醫(yī)用生物材料技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種復(fù)合型生物套管。更具體地，涉及一種適用于周圍神經(jīng)小間隙套接縫合且能夠在損傷局部為受損神經(jīng)提供持續(xù)的促神經(jīng)生長物質(zhì)的復(fù)合型生物套管。
背景技術(shù)：
臨床上對周圍神經(jīng)離斷傷的常規(guī)治療方法是神經(jīng)外膜縫合或神經(jīng)束膜縫合術(shù)。Cajal等人證明近斷端神經(jīng)纖維是選擇性地長入神經(jīng)遠斷端，而不會長入其它組織，這就是周圍神經(jīng)再生的趨向性(也稱為選擇性再生理論)?；谝陨侠碚撚腥颂岢鲂碌男迯?fù)周圍神經(jīng)方法小間隙套接縫合技術(shù)。即用管型材料將離斷的近遠端周圍神經(jīng)套接縫合，套接縫合時在兩神經(jīng)斷端之間形成相對封閉的神經(jīng)再生室，有利于內(nèi)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子發(fā)揮作用，為神經(jīng)再生提供有利的微環(huán)境，促進神·經(jīng)軸突的生長，提高神經(jīng)再生的效率，減少神經(jīng)軸突逃逸，降低縫合口處神經(jīng)瘤的形成。例如專利文獻CN01134542. X和CN011363314. 2報道了以甲殼胺或海藻酸鈉為主要原料制成的人工生物套管；專利文獻US4534349A采用聚乳酸、聚乙醇酸、聚(乙交酯-丙交酯)、聚酯酰胺等合成聚合物及其共聚、共混物制備神經(jīng)修復(fù)導(dǎo)管；專利文獻W09844020A1和W09844021A1報道了含磷酸酯基團的合成聚合物用于制作神經(jīng)生長的導(dǎo)管。但是，由于缺乏有效的促神經(jīng)生長藥物支持，諸如上述神經(jīng)導(dǎo)管的神經(jīng)縫合技術(shù)雖然有了很大的提高，但臨床周圍神經(jīng)修復(fù)效果仍不能讓人滿意。此外，有些上述公開的神經(jīng)導(dǎo)管存在制備困難、或者在可吸收性和組織相容性方面存在缺陷，從而為未能在臨床上取得實際應(yīng)用。目前采用手術(shù)中損傷點局部噴灑促神經(jīng)生長藥物、術(shù)后口服促神經(jīng)生長藥物的方式。前者雖為局部給藥，但藥物短期內(nèi)即代謝，難以發(fā)揮促神經(jīng)生長效果；后者全身口服給藥，局部濃度較低，并容易引起不良反應(yīng)和并發(fā)癥。局部緩釋給藥是周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的較理想給藥方式。有研究應(yīng)用微量泵向損傷局部泵入促神經(jīng)生長藥物，但是這項技術(shù)需要特制微量泵植入損傷局部，操作復(fù)雜、費用較高，很難達到普及應(yīng)用。此外，專利文獻CN03134541. 7報道了一種用于修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的組織工程化周圍神經(jīng)，其中生物導(dǎo)管內(nèi)添加了神經(jīng)膠質(zhì)細胞或可向神經(jīng)膠質(zhì)細胞分化的肝細胞作為種子細胞、和緩釋促神經(jīng)生長物質(zhì)等。但是，該發(fā)明主要用于周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)，而不是用于周圍神經(jīng)小間隙套接縫合。而且該專利在神經(jīng)導(dǎo)管中注入神經(jīng)膠質(zhì)細胞和多種神經(jīng)營養(yǎng)因子，其目的是為套接缺損提供支架材料、營養(yǎng)因子和細胞學(xué)支撐，由于充填多種物質(zhì)，該修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的組織工程化周圍神經(jīng)構(gòu)造復(fù)雜，而且由于其制造和保存的條件要求嚴格，使得其至今未能批量用于臨床應(yīng)用。此外，相關(guān)實驗也證實這種應(yīng)用于神經(jīng)缺損的人工神經(jīng)仍不能很好的解決再生神經(jīng)軸突有效通過神經(jīng)缺損的問題，故目前仍無法達到自體神經(jīng)移植的修復(fù)效果，故臨床極少應(yīng)用。
實用新型內(nèi)容鑒于現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本實用新型通過將小間隙套接縫合技術(shù)與藥物緩釋技術(shù)有效結(jié)合，即在套接縫合所形成的小間隙內(nèi)添加促神經(jīng)生長緩釋物質(zhì)，由此既可以完成周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)，同時其中的局部緩釋系統(tǒng)又可以為神經(jīng)再生提供長期的刺激因子和營養(yǎng)物質(zhì)，極大地提高了周圍神經(jīng)的修復(fù)效果。因此，本實用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種既可用于周圍神經(jīng)小間隙套接縫合，同時又可實現(xiàn)促神經(jīng)生長物質(zhì)局部長期持久釋放的復(fù)合型生物套管。為了解決上述技術(shù)問題，本實用新型提供如下的技術(shù)方案根據(jù)本實用新型的一種實施方式，提供一種復(fù)合型生物套管，其包括中空的生物導(dǎo)管和在所述中空的生物導(dǎo)管內(nèi)壁上存在的緩釋微囊層。優(yōu)選地，所述復(fù)合型生物套管的內(nèi)徑為O. 5mm 10mm。優(yōu)選地，所述復(fù)合型生物套管的長度大于或等于3mm。優(yōu)選地，所述復(fù)合型生物套管的管壁厚度O. I 2_。優(yōu)選地，所述緩釋微囊層為含有促進神經(jīng)生長物質(zhì)的緩釋微囊層。優(yōu)選地，所述促進神經(jīng)生長物質(zhì)是選自神經(jīng)生長因子和腦源性神經(jīng)生長因子中的至少一種。優(yōu)選地，所述中空的生物導(dǎo)管為由生物可降解材料制成的中空的生物導(dǎo)管。優(yōu)選地，所述中空的生物導(dǎo)管為甲殼胺制備得到的中空的生物導(dǎo)管。根據(jù)本實用新型另一個實施方式，提供一種由包括如下步驟的方法來制備上述復(fù)合型生物套管將生物可降解材料溶解于溶劑中，形成生物可降解材料的無泡紡絲原液；從中空噴絲孔中擠出該紡絲原液，獲得中空的生物導(dǎo)管；通過復(fù)乳法制備包含神經(jīng)生長因子的緩釋微球的液體；以及將包含上述緩釋微球的液體注入到所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)腔，且干燥，獲得在所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上具有微囊層的復(fù)合型生物套管。優(yōu)選地，所述緩釋微球為含有促進神經(jīng)生長物質(zhì)的緩釋微球。根據(jù)本實用新型的復(fù)合型生物套管在中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上具有緩釋微囊層，當(dāng)將此復(fù)合型生物套管應(yīng)用于小間隙套接修復(fù)周圍神經(jīng)的時，術(shù)后套管內(nèi)壁緩釋微囊還能為受損神經(jīng)長期提供促神經(jīng)生長物質(zhì)，有利于提高周圍神經(jīng)損傷修復(fù)效果。

圖I是根據(jù)本實用新型的一種實施方式的復(fù)合型生物套管的截面示意圖；圖2是根據(jù)本實用新型的實施方式所制備的緩釋微球的掃描電鏡圖；圖3是根據(jù)本實用新型的實施方式的緩釋微球的累積釋放曲線圖；附圖符號說明I-復(fù)合型生物套管2-中空的生物導(dǎo)管3-緩釋微囊層具體實施方式
為了更好地了解本實用新型實施方式的優(yōu)點，下文將結(jié)合優(yōu)選的實施方式以及實施例對本實用新型的技術(shù)方案進行說明，但是本實用新型的保護范圍并不受這些具體實施方式
和實施例的限制。根據(jù)本實用新型的一個實施方式，提供一種復(fù)合型生物套管，其包括中空的生物導(dǎo)管和在該中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上存在的緩釋微囊層。通過在根據(jù)本實用新型的復(fù)合型生物套管的中空的生物導(dǎo)管內(nèi)壁上存在緩釋微囊層，當(dāng)將此復(fù)合型生物套管應(yīng)用于小間隙套接修復(fù)周圍神經(jīng)時，術(shù)后套管內(nèi)壁上的緩釋微囊能夠為受損神經(jīng)長期提供促神經(jīng)生長物質(zhì)，有利于提高周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)效果?！じ鶕?jù)本實用新型的優(yōu)選實施方式，所述復(fù)合型生物套管的內(nèi)徑為O. 5mm 10mm。進一步優(yōu)選為Imm 8m,甚至優(yōu)選為I. 5mm 7mm。例如,所述復(fù)合型生物套管的內(nèi)徑可以為 2mm、3mm、4mm、5mm 或 6mm。根據(jù)本實用新型的述復(fù)合型生物套管的長度是根據(jù)實際使用的需要來確定的。一般優(yōu)選所述復(fù)合型生物套管的長度為3_ 20cm。例如，所述復(fù)合型生物套管的長度可以選擇為 3. 5mm、4mm、5mm、6mm、7mm、8mm、9mm、10mm、2cm、5cm、7cm、10cm、15cm、18cm 或者 20cmo根據(jù)本實用新型的另一個優(yōu)選實施方式，所述復(fù)合型生物套管的管壁厚度小于等于2mm。進一步優(yōu)選其管壁厚度為O. I 2mm。甚至優(yōu)選其管壁厚度為O. 15 I. 5mm ;更優(yōu)選其管壁厚度為O. 15 I. Omm ;最優(yōu)選其管壁厚度為O. 15 O. 85mm。根據(jù)本實用新型的優(yōu)選實施方式，所述復(fù)合型生物套管中的緩釋微囊層是含有促進神經(jīng)生長物質(zhì)的緩釋微囊層。優(yōu)選地，所述促進神經(jīng)生長的物質(zhì)是選自神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)生長因子、睫狀神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)素-3、胰島素樣生長因子、膠狀細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子中的至少一種。根據(jù)本實用新型的另一個優(yōu)選實施方式，所述中空的生物導(dǎo)管為由生物降解材料制成的中空的生物導(dǎo)管。優(yōu)選地，所述生物降解材料是選自甲殼胺、幾丁質(zhì)、膠原、殼聚糖、聚乳酸、聚羥基乙酸中的至少一種。甚至優(yōu)選地，所述中空的生物導(dǎo)管為甲殼胺制備得到的中空的生物導(dǎo)管。最優(yōu)選地，由甲殼胺制備的中空的生物導(dǎo)管的脫乙酰度為27%，在O. 9%的氯化鈉水溶液中無溶解，在濕態(tài)下穿針無脆裂。根據(jù)本實用新型的另一個實施方式，提供一種由包括如下步驟的方法制備上述復(fù)合型生物套管將生物可降解材料溶解于溶劑中，形成生物可降解材料的無泡紡絲原液；從中空噴絲孔中擠出該紡絲原液，獲得中空的生物導(dǎo)管；通過復(fù)乳法制備包含神經(jīng)生長因子的緩釋微球的液體；以及將包含上述緩釋微球的液體注入到所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)腔，且在真空低溫下干燥，獲得在所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上具有微囊層的復(fù)合型生物套管。根據(jù)本實用新型的優(yōu)選實施方式，所述促進神經(jīng)生長的物質(zhì)是選自神經(jīng)生長因子、腦源性神經(jīng)生長因子、睫狀神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)素_3、胰島素樣生長因子、膠狀細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子等中的至少一種。根據(jù)本實用新型進一步優(yōu)選的實施方式，所述生物降解材料是選自甲殼胺、幾丁質(zhì)、膠原、殼聚糖、聚乳酸、聚羥基乙酸中的至少一種。更優(yōu)選地，所述生物可降解材料是甲殼胺。優(yōu)選所述溶劑是稀醋酸水溶液，例如醋酸重量含量為2% 10%的稀醋酸水溶液，例如優(yōu)選為2重量％、4重量％和5重量％的稀醋酸水溶液。根據(jù)本實用新型進一步優(yōu)選的實施方式，根據(jù)本實用新型方法制備的復(fù)合型生物套管的內(nèi)徑為O. 5mm IOmm,長度為3mm 20cm,以及管壁厚度為O. I 2mm。根據(jù)本實用新型進一步優(yōu)選的實施方式，所述干燥步驟是在4 10°C條件下，真空冷凍干燥機上冷凍干燥。通過根據(jù)上述的方法可以制備出本實用新型的復(fù)合型生物套管。該制備方法通過簡單的擠出紡絲溶液來獲得中空的生物導(dǎo)管，以及灌注包含上述緩釋微球的液體到所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)腔且干燥等工藝步驟，即可得到本實用新型的復(fù)合型生物套管。該制備方法工藝簡單、成本低廉，易于推廣臨床應(yīng)用。此外，根據(jù)上述方法制備的復(fù)合型生物套管 可以應(yīng)用于小間隙套接修復(fù)周圍神經(jīng)，手術(shù)后套管內(nèi)壁緩釋微囊還能為受損神經(jīng)長期提供促神經(jīng)生長物質(zhì)，有利于提高周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)效果。
以下結(jié)合附圖來進一步說明本實用新型的復(fù)合型生物套管的結(jié)構(gòu)。如圖I所示，圖I是本實用新型的一種復(fù)合型生物套管的截面示意圖。圖中，I代表復(fù)合型生物套管；2代表中空的生物導(dǎo)管；3代表緩釋微囊層。復(fù)合型生物套管I包括中空的生物導(dǎo)管2和緩釋微囊層3。當(dāng)將此復(fù)合型生物套管I應(yīng)用于小間隙套接修復(fù)周圍神經(jīng)的時，術(shù)后套管內(nèi)壁緩釋微囊還能為受損神經(jīng)長期提供促神經(jīng)生長物質(zhì)，有利于提高周圍神經(jīng)損傷修復(fù)效果。復(fù)合型生物套管I的形狀為管狀，優(yōu)選為規(guī)則的圓柱形管狀，由于一般的復(fù)合型生物套管I均為較為柔軟的材料制成，因此，即使圓柱形管狀的有些變形也是可以接受的。下面結(jié)合具體的實施例來描述本實用新型的復(fù)合型生物套管及其具體的制備方法。實施例I :復(fù)合型生物套管的制備I.制備中空的生物導(dǎo)管將市售脫乙酰度為82%、重均分子量為37. 7萬的甲殼胺(購買自上海佳和生物科技有限公司)按4%濃度(W/W，重量比)溶解于2% (重量比)的稀醋酸水溶液中，得到高粘度溶液。抽真空脫泡12小時得到無泡紡絲原液。將紡絲原液以O(shè). 6MPa(兆帕)的空氣壓力從釜中壓出，經(jīng)紡絲計量泵計量，從中空噴絲孔的皮層擠出，與此同時，以O(shè). 2MPa的空氣壓力將5% NaOH(W/W)水溶液(作為凝固劑)從中空噴絲孔的芯層擠出。紡絲原液擠出后直接進入5% NaOH(W/W)水溶液凝固浴，在外界和芯層凝固劑的同時作用下甲殼胺得以析出凝固。然后，經(jīng)導(dǎo)輥引出后牽伸I. 25倍，得到連續(xù)的甲殼胺中空管，管內(nèi)徑O. 95mm，管壁厚度O. 15mm。將甲殼胺中空管用水洗滌至pH = 7，用甲醇脫水后置于40°C、5 %醋酸酐-甲醇溶液(V/V，體積比)中，50分鐘后取出，用甲醇洗滌。然后置于1%稀醋酸水溶液中浸洗，風(fēng)干，再以75%乙醇洗滌，洗滌后浸泡于75%乙醇中消毒備用。其中，所得甲殼質(zhì)中空導(dǎo)管的脫乙酰度為27%，在生理鹽水(質(zhì)量分數(shù)為O. 9%的NaCl水溶液)中無溶解，濕態(tài)下穿針無脆裂。2.制備緩釋微球及其性能測試2. I復(fù)乳法制備對照PLGA微球采用W/0/W復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備緩釋微球。將50 μ L的表面活性劑聚乙二醇400溶于100 μ L的去離子水中得到內(nèi)水相(Wl);將50mg的PLGA(poly (lactic-co-glycolicacid，聚乳酸-羥基乙酸共聚物)溶于3mL 二氯甲烷中得到油相(O);外水相(W2)為1.5%的聚乙烯醇溶液30ml ;將Wl倒入O中，超聲處理30秒得到初乳(W1/0)，將初乳倒入W2中，在懸臂式攪拌機上以1000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌6分鐘，得到W1/0/W2復(fù)乳。將復(fù)乳在室溫( 25V )下于懸臂式攪拌機以500轉(zhuǎn)/分鐘攪拌4小時揮發(fā)殘余有機溶劑，通過13800轉(zhuǎn)/分鐘離心收集微球，并用 去離子水洗滌3次，密封放在零下20°C冰箱中，真空冷凍干燥機上冷凍干燥，得到空白緩釋微球，置于4°C下保存。2. 2復(fù)乳法制備NGF- β -PLGA緩釋微球采用W/0/W復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備緩釋微球。將10 μ g的NGF-β、5mg的牛血清白蛋白以及50 μ L的表面活性劑聚乙二醇400溶于100 μ的去離子水中得到內(nèi)水相(Wl) ； IOOmg的PLGA溶于4mL 二氯甲烷中得到油相(O);外水相(W2)為I. 5%的聚乙烯醇溶液；將評1倒入O中，超聲處理30秒得到初乳(W1/0)，將初乳倒入W2中，在懸臂式攪拌機上以1000轉(zhuǎn)/分鐘攪拌6分鐘，得到W1/0/W2復(fù)乳，將復(fù)乳倒入400mL的10%去離子水氯化鈉溶液中，室溫下磁力攪拌機上攪拌4小時揮發(fā)殘余有機溶劑，通過13800轉(zhuǎn)/分鐘離心收集微球，并用去離子水洗滌5次，真空冷凍干燥機上冷凍干燥48小時，得到NGF- β -PLGA緩釋微球，置于4°C的溫度下保存。2. 3緩釋微球的性能測試2. 3. I緩釋微球的形態(tài)和粒徑取少量制備的NGF- β -PLGA緩釋微球，在掃描電子顯微鏡中觀察緩釋微球微觀結(jié)構(gòu)，具體參見說明書附圖2。2. 3. 2緩釋微球的載藥量和包封率NGF- β -PLGA緩釋微球的載藥量和包封率的測量取IOmg NGF-^-PLGA緩釋微球溶于O. 5mL的乙酸乙酯中，然后加入2mL的去離子水，在振蕩器上充分混勻，靜置，取下清液，萃取乙酸乙酯中的NGF-β，重復(fù)3次，用ELISA法在490nm波長下測定所得NGF-β溶液的吸光度，以空白微球降解液作為空白對照，代入標準曲線，計算NGF-β的含量。多次重復(fù)測量結(jié)果顯示本實例制備的緩釋微球中NGF-β的平均含量為
O.0047 %，包封率均值為18.2%。2. 3. 3緩釋微球的體外釋放的測定準確稱取20mg緩釋微球置于透析袋中，密閉封口，然后置于60mL作為降解介質(zhì)的PBS緩沖液(pH 7. 4)，放入37°C的恒溫振蕩水浴搖床中，以150轉(zhuǎn)/分鐘的速度進行振搖，分別在2、4、8、12、24小時及2、4、7、10、14、21和28天時，分別取出2mL放入_20°C冰箱冷凍保存，其余補充等量的新鮮PBS液后放回緩釋裝置中。最后采用ELISA法測定NGF-β質(zhì)量濃度，計算每次取樣時釋放的NGF-β總量，并繪制微球累積釋放曲線。微球累積釋放曲線參見說明書附圖3。本實用新型中NGF-β釋放周期在2周左右，這與小間隙套接縫合技術(shù)修復(fù)周圍神經(jīng)再生規(guī)律相符合，能夠長期為神經(jīng)再生提供良好的營養(yǎng)物質(zhì)支持。 2. 3.4微球中NGF- β活性的檢測 通過對PCI2細胞突起的計數(shù)來檢測NGF的活性。將生長良好的PCI2細胞接種于預(yù)先經(jīng)鼠尾膠原包被的6孔培養(yǎng)板中，接種密度為2 X IOVcm2，每孔加入2mL含體積分數(shù)為10%馬血清和體積分數(shù)為5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，在37°C、體積分數(shù)為5% CO2及飽和濕度條件下培養(yǎng)3h后隨機分組，分為NGF組(陽性對照組)、不含NGF的空白微球組(陰性對照組)、含NGF緩釋微球組(實驗組)，分別以50pg/L的NGF、空白微球的緩釋液、含NGF緩釋微球組的緩釋液(所有微球緩釋液均用O. 22 μ m濾器過濾除菌)各2mL替換原細胞培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)48小時后，在顯微鏡上隨機選取視野，計數(shù)100個細胞，并計算每組中細胞最長突起長度大于胞體直徑的細胞(即陽性細胞)的比例，陽性細胞比例(％)=陽性細胞數(shù)/計數(shù)細胞數(shù)，每組實驗重復(fù)3次。·[0073]培養(yǎng)結(jié)果顯示NGF組(陽性對照組)和含NGF緩釋微球組(實驗組)細胞生長情況類似，較不含NGF的空白微球組(陰性對照組)，培養(yǎng)的細胞密度較大、數(shù)量較多，細胞突起長度較長。NGF組(陽性對照組)、不含NGF的空白微球組(陰性對照組)、含NGF緩釋微球組(實驗組)陽性細胞比率分別為57. 3%、29.6%、54.2%。結(jié)果表明緩釋微球能夠達到充分釋放功能，并能保證NGF的生物學(xué)活性。3.復(fù)合型生物套管的制備將上述新鮮制備的緩釋微球置于去離子水中(緩釋微球與去離子水重量比為I 100)，制成緩釋微球混懸液，將配制好的混懸液注入到所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)腔，然后將此導(dǎo)管置于真空冷凍干燥機上冷凍干燥24小時，使得微球貼于中空管內(nèi)壁，從而獲得在所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上具有微囊層的復(fù)合型生物套管。實施例2 :復(fù)合型生物套管小間隙套接修復(fù)動物周圍神經(jīng)缺損選用SPF級健康雄性SD大鼠30只(220 250g)，隨機分為A、B、C、D、E組，采用戊巴比妥鈉(2ml/kg(毫升/千克)，腹腔注射)麻醉，無菌條件下暴露右側(cè)坐骨神經(jīng)。A組在坐骨神經(jīng)分叉處下IOmm處切斷脛神經(jīng)，用10_0顯微縫線膜縫合；B組在坐骨神經(jīng)分叉處下IOmm處切斷脛神經(jīng)，用10_0尼龍線2針外膜縫合?？p合后縫合點局部噴灑含神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子混合液2ml ；C組在坐骨神經(jīng)分叉處下IOmm處切斷脛神經(jīng)，用10_0尼龍線2針單純套管小間
隙套接縫合；D組在坐骨神經(jīng)分叉處下IOmm處切斷脛神經(jīng)，用10_0尼龍線2針單純套管小間隙套接縫合，用微量注射器向套接間隙內(nèi)注入含神經(jīng)生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子混合液50ul (微升)；E組在坐骨神經(jīng)分叉處下IOmm處切斷脛神經(jīng)，用10_0尼龍線2針復(fù)合套管小間
隙套接縫合。觀察項目及檢測方法I) 一般情況觀察大鼠一般情況、手術(shù)側(cè)患肢活動情況及潰瘍情況。2)術(shù)后12周分別進行a.大鼠脛神經(jīng)功能評分應(yīng)用墨跡法測量大鼠脛神經(jīng)功能評分。評分公式為脛神經(jīng)功能指數(shù)=-37. 2X足印長度因子+104. 4足印寬度因子+中間足趾寬度因子。b.電生理測量；結(jié)果采用spssll. O軟件進行單因素方差分析，進行組間比較。[0090]c.雙側(cè)神經(jīng)取材，鋨酸染色，有髓神經(jīng)纖維組織學(xué)觀察及計數(shù)。結(jié)果統(tǒng)計處理單位視野有髓神經(jīng)纖維計數(shù)結(jié)果采用SPSS11. O進行單因素方差分析，進行組間比較。d.脛神經(jīng)支配肌肉組織學(xué)觀察。觀察以及檢測的實驗結(jié)果如下I) 一般情況所有實驗大鼠均手術(shù)順利，無一只死亡，所有大鼠患肢均無出現(xiàn)足部潰瘍。2)大鼠脛神經(jīng)功能評分平均值E組> C組> D組> B組> A組(值越高代表功能恢復(fù)越好)其中A、B、C、D組之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異，E組與其他四組均有統(tǒng)計學(xué)差異。3)電生理結(jié)果E組神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯高于其他A、B、C、D 4組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，其他四組之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。4)鋨酸染色E組有髓神經(jīng)纖維較其他四組均一，且髓鞘厚度也較厚，其他四組之間無明顯差異。有髓神經(jīng)纖維計數(shù)E組明顯高于其他四組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。5)肌肉組織學(xué)觀察，各組傷側(cè)肌肉均較健側(cè)肌肉有一定程度的萎縮，肌纖維直徑均一度也較正常差，但各組之間無明顯差異。 利用本實用新型的復(fù)合型生物套管應(yīng)用于小間隙套接修復(fù)周圍神經(jīng)的時，不會出現(xiàn)潰瘍，電生理結(jié)構(gòu)優(yōu)異，并且有髓神經(jīng)纖維較均一，且髓鞘厚度也較厚，有髓神經(jīng)纖維計數(shù)高。
權(quán)利要求1.一種復(fù)合型生物套管，其特征在于，包括中空的生物導(dǎo)管和在所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上的緩釋微囊層，所述緩釋微囊層為含有促進神經(jīng)生長的物質(zhì)的緩釋微囊層。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述復(fù)合型生物套管的內(nèi)徑為 O. 5mm 10mnin
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述復(fù)合型生物套管的長度 3mm 20cm。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述復(fù)合型生物套管的管壁厚度為O. I 2mm。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述復(fù)合型生物套管的管壁厚度為O. I 2_。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述緩釋微囊層的厚度為10 100 μ mD
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述中空的生物導(dǎo)管的橫截面為圓形、橢圓形或者方形。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的復(fù)合型生物套管，其特征在于，所述中空的生物導(dǎo)管為由生物降解材料制成的中空的生物導(dǎo)管。
專利摘要本實用新型提供一種復(fù)合型生物套管。該復(fù)合型生物套管包括中空的生物導(dǎo)管和在所述生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上的緩釋微囊層。通過將甲殼胺的紡絲原液從中空噴絲孔的皮層擠出來制備所述中空的生物導(dǎo)管，然后將包含有緩釋微囊的液體注入到所述中空的生物導(dǎo)管的內(nèi)腔、干燥，即可得到在所述生物導(dǎo)管的內(nèi)壁上存在緩釋微囊層的復(fù)合型生物套管。本實用新型的復(fù)合型生物套管適用于周圍神經(jīng)小間隙套接縫合，套管內(nèi)壁緩釋微囊為受損神經(jīng)持續(xù)提供促神經(jīng)生長物質(zhì)，有利于提高周圍神經(jīng)損傷的修復(fù)效果。
文檔編號A61B17/00GK202699192SQ20122015372
公開日2013年1月30日 申請日期2012年4月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月12日
發(fā)明者魏世成, 任曉帥, 成艷 申請人:北京匯?？滇t(yī)療技術(shù)有限公司