專利名稱：一種生物堿類化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物堿類化合物，尤其是涉及一種生物堿類化合物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
吲哚生物堿類化合物是生物堿類化合物的最大的家族，可治療呼吸、消化、心血管、中樞神經(jīng)和腫瘤等廣泛疾病。目前主要從植物中提取獲得，很少從細菌中發(fā)現(xiàn)。本發(fā)明人研究得知，海洋細菌Pseudoalteromonas rubra. QD1-2(保藏于國家海洋局第三海洋研究所，保藏編號為=CGMCC No. Ik00044)液體發(fā)酵產(chǎn)物經(jīng)乙酸乙酯提取，提取物有很好的細胞增殖抑制活性，于是對其活性成分進行了研究。目前尚未見該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及細胞增殖抑制活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關(guān)的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有抑制腫瘤細胞增殖，具有抗腫瘤活性的生物堿類化合物及其制備方法和用途。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為一種生物堿類化合物，該生物堿類化合物的結(jié)構(gòu)式如下所示，
權(quán)利要求
1.一種生物堿類化合物，其特征在于該生物堿類化合物的結(jié)構(gòu)式如下所示，
2.一種根據(jù)權(quán)利要求I所述的生物堿類化合物的制備方法，其特征在于具體包括如下步驟 (1)發(fā)酵生產(chǎn) 將假交替單胞菌(Pseudoalteromonas rubra. QD1-2)保藏號為CGMCCNo. 6555劃線接種到Zobell2216E固體斜面培養(yǎng)基上，于30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)I天后；將斜面培養(yǎng)獲得的菌落接種I個菌落到400ml EM培養(yǎng)基中，于30°C，轉(zhuǎn)速150rpm的條件下?lián)u床培養(yǎng)7天，獲得發(fā)酵產(chǎn)物； (2)浸膏的獲得 將發(fā)酵產(chǎn)物用離心機離心去除菌體，獲得發(fā)酵液，取發(fā)酵液加入等體積的乙酸乙酯充分萃取I次，收集萃取液，再取萃余液加入等體積的乙酸乙酯重復(fù)萃取I次，收集萃取液，再將獲得的萃余液加入等體積的乙酸乙酯重復(fù)萃取I次，合并三次萃取所得萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙酸乙酯去除，獲得粗浸膏； (3)化合物的分離精制 將粗浸膏用甲醇溶解后，用半制備反相高效液相色譜進行分離純化得到生物堿類化合物，其結(jié)構(gòu)如下所示
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種生物堿類化合物的制備方法，其特征在于所述的Zobell2216E培養(yǎng)基的配制方法如下蛋白胨5.0g，酵母膏l(xiāng).Og，磷酸鐵O. Olg，瓊脂16. Og,陳海水 1000ml，調(diào) pH 至 7. 6-7. 8。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種生物堿類化合物的制備方法，其特征在于所述的EM培養(yǎng)基的配制方法如下蛋白胨lg，酵母粉2g,葡萄糖O. Ig,天然海水1000ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種生物堿類化合物的制備方法，其特征在于所述的半制備反相高效液相色譜的洗脫液為甲醇與水按體積55:45的比例混合而成。
6.一種根據(jù)權(quán)利要求I所述的生物堿類化合物的應(yīng)用，其特征在于所述的生物堿類化合物具有抑制腫瘤作用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種生物堿類化合物及其制備方法和應(yīng)用，特點是該生物堿類化合物的結(jié)構(gòu)如(I)所示，制備方法包括將假交替單胞菌保藏號為CGMCC No.6555劃線接種到固體斜面培養(yǎng)基上，于30℃，培養(yǎng)1天后，接種1個菌落到EM培養(yǎng)基中，于30℃，150rpm下?lián)u床培養(yǎng)7天，獲得發(fā)酵產(chǎn)物的步驟；將發(fā)酵產(chǎn)物去除菌體，獲得發(fā)酵液，取發(fā)酵液加入等體積的乙酸乙酯充分萃取3次，合并萃取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙酸乙酯去除，獲得粗浸膏的步驟；最后將粗浸膏用甲醇溶解后，用半制備反相高效液相色譜進行分離純化得到生物堿類化合物的步驟，優(yōu)點是該生物堿類化合物具有抑制細胞活性，抗腫瘤作用。
文檔編號A61K31/4045GK102942516SQ20121043713
公開日2013年2月27日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月5日
發(fā)明者何山, 嚴小軍, 丁立建 申請人:寧波大學(xué)