專利名稱：一種胖大海的抗炎活性部位及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從中藥胖大海的乙醇提取物中發(fā)現(xiàn)的一種抗炎活性部位及制備該活性部位的方法。
背景技術(shù)：
胖大海又名大洞果，是梧桐科蘋婆屬植物燈籽蘋婆Sterculia IychnophoraHance的干燥成熟種子,主產(chǎn)地位于越南、泰國(guó)、馬來西亞和印度等國(guó)。目前，中國(guó)南方有引種，但是我國(guó)現(xiàn)在使用的大部分胖大海藥材靠從上述國(guó)家進(jìn)口。中醫(yī)認(rèn)為胖大海具有清熱潤(rùn)肺、利咽解毒、潤(rùn)腸通便的功效。其主要藥理作用為抗炎、抗菌、抗病毒等(杜力軍，等·中藥材，1995，18 (8) :409-410 ;曲本欽，等.中華醫(yī)學(xué)雜志，1954，(5) :337-340)。目前報(bào)道的胖大海中的化學(xué)成分主要包括糖類、黃酮類、生物堿類和脂肪酸類(陳建民，等.中 藥材，1995，18 (11) :567-569 ;陳建民，等.中國(guó)中藥雜志，1996，21 (I) :39-41 ;Wang RF，etal. Phytochemistry, 2003,63 (4) :475-478)。已有報(bào)道稱胖大海的抗炎活性成分主要為多糖類，但是多糖在口服和局部外用時(shí)抗炎活性不明顯(杜力軍，等.中藥材，1995，18 (8)409-410 ;陳建民，等.中藥材，1994，17 (8) :32-34)。鑒于胖大海的傳統(tǒng)給藥方式為溫水浸泡后口服給藥，我們認(rèn)為胖大海的抗炎活性成分不能僅歸因于多糖，可能另有其他成分，應(yīng)該是多成分構(gòu)成的活性部位。為此，我們對(duì)胖大海的抗炎活性部位進(jìn)行了研究，并探討了其活性部位的制備方法，為進(jìn)一步開發(fā)和利用胖大海奠定基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的為提供一種胖大海的抗炎活性部位及其制備方法。其特征為將胖大海提取物依次用環(huán)己烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，萃取后的水溶液部分干燥后即為抗炎活性部位(圖I)。采用二甲苯所致的小鼠耳腫脹模型和醋酸所致的腹腔滲出模型對(duì)該活性部位進(jìn)行抗炎活性研究?；钚匝芯拷Y(jié)果證明，在同等劑量下，該抗炎活性部位對(duì)炎癥的抑制作用明顯強(qiáng)于空白對(duì)照和胖大海95%乙醇提取物。


圖I胖大海抗炎活性部位的制備流程參見圖1，將胖大海藥材粉碎，過10目篩。所得粉末加4倍量的95%乙醇浸泡半小時(shí)后，加熱回流提取3次，提取時(shí)間分別為2h、2h和lh。所得提取液減壓濃縮得到95%乙醇提取物。將95%提取物混懸于等體積的(重量體積)的甲醇中，再加入等體積的環(huán)己烷進(jìn)行萃取5次。然后，將甲醇層減壓回收至無甲醇?xì)埩簦尤?倍體積的蒸餾水混懸，依次用與水溶液等體積的乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取。將萃取后的水溶液部分進(jìn)行冷凍干燥后，即得胖大海的抗炎活性部位。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例I.胖大?？寡谆钚圆课坏闹苽渑执蠛?. 7kg，粉碎后過10目篩。粗粉用4倍量的95%乙醇加熱回流提取3次，時(shí)間分別為2h、2h和lh。提取液減壓濃縮得醇提浸膏3240g。取浸膏300g，用300ml甲醇混懸，混懸液再加等體積環(huán)己烷萃取。環(huán)己烷萃取完全后，將甲醇層減壓回收至無甲醇?xì)埩?。再?00ml蒸餾水混懸，依次用與水溶液等量的乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取?；厥崭鞑糠秩苊胶蟮铆h(huán)己烷萃取部分98. 0g、乙酸乙酯萃取部分12. 7g、正丁醇萃取部分28. Sg和萃取后水溶部分131g。該萃取后水溶部分即為胖大海的活性部位。2.胖大?？寡谆钚圆课坏目寡谆钚匝芯?
采用二甲苯所致的小鼠耳腫脹模型和醋酸所致的腹腔滲出模型對(duì)胖大海95%乙醇提取物和萃取后水溶部分進(jìn)行抗炎活性比較。(I)小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)取小鼠33只，隨機(jī)分為3組(分組及給藥劑量見表I)。ig給藥，劑量為O. 2mL/10g,每日給藥2次，連續(xù)給藥5次。末次給藥Ih后，將二甲苯40 μ I均勻涂于左耳前后兩面。30min后沿耳廓基線剪下兩耳，用8_直徑的打孔器在兩耳同一部位打孔，稱圓耳片重量。按下式計(jì)算鼠耳腫脹度和腫脹抑制率。腫脹度(W)=左耳片重量-右耳片重量腫脹抑制率(％ ) = (W對(duì)照-W給藥)/W對(duì)照X 100 %各組數(shù)據(jù)用MeaniSD表示，組間分析用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表I。表I.胖大海95%乙醇提取物和萃取后水溶部分對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響
組別劑量(g/kg) 動(dòng)物數(shù)Cn) 腫脹度Cmgj抑制率C%)
空白對(duì)照- 6.76±2.66
95% 乙醇提取物3.6114.93±3.2827.2
萃取后水溶部分3.6102.40±1.79**64.5注萃取后水溶性部分組的I只動(dòng)物在給藥過程中意外死亡。與空白對(duì)照組相比，**P < O. 01。(2)小鼠腹腔滲出實(shí)驗(yàn)取小鼠36只，分組及給藥同小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)。末次給藥Ih后，尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)生理鹽水液O. lmL/10g,并立即腹腔注射O. 6%乙酸O. 2mL。20min后將小鼠脫頸椎處死，腹腔注入8mL生理鹽水，輕揉30sec，剪開腹壁，吸取腹腔清洗液于試管中，3000rpm離心lOmin，上清液于分光光度計(jì)590nm處測(cè)吸光度(OD)。以下式計(jì)算腹腔滲出抑制率滲出抑制率=(OD對(duì)照-OD給藥)/OD對(duì)照X 100 %計(jì)算結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，見表2。表2.胖大海95%乙醇提取物和萃取后水溶部分對(duì)醋酸致小鼠腹腔滲出的影響
權(quán)利要求
1.胖大海的一種抗炎活性部位及其在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗炎活性部位及其應(yīng)用，其中之應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、食品和保健品領(lǐng)域。
3.根據(jù)權(quán)利要求I和2所述的抗炎活性部位及其應(yīng)用，其中之應(yīng)用是指在生產(chǎn)抗炎藥物和抗炎保健品中的應(yīng)用。
4.一種胖大?？寡谆钚圆课坏闹苽浞椒ǎㄒ韵虏襟E將胖大海提取物依次用環(huán)己烷，乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，萃取后的水溶液部分干燥后即為抗炎活性部位。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，包括以下步驟將胖大海提取物用甲醇混懸，混懸液用環(huán)己烷萃取后，將甲醇層回收至無甲醇?xì)埩?，再加水混懸，依次用乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，萃取后的水溶液部分干燥后即為抗炎活性部位。
6.根據(jù)權(quán)利要求4和5所述的制備方法，其中胖大海提取物為乙醇提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求4和5所述的制備方法，其中胖大海提取物為95%乙醇提取物。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，包括以下步驟將胖大海藥材粉末用4倍量的95%乙醇浸泡半小時(shí)后，加熱回流提取3次，提取時(shí)間分別為2h、2h和lh，所得提取液減壓濃縮得到95%乙醇提取物，將95%提取物混懸于等體積的甲醇中，再加入等體積的環(huán)己烷進(jìn)行萃取5次，然后，將甲醇層減壓回收至無甲醇?xì)埩?，加?倍體積的蒸餾水混懸，依次用與水溶液等體積的乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，將萃取后的水溶液部分進(jìn)行冷凍干燥后，即得胖大海的抗炎活性部位。
全文摘要
本發(fā)明涉及從中藥胖大海提取物中發(fā)現(xiàn)的一種抗炎活性部位及制備該活性部位的方法。其中包括將胖大海提取物依次用環(huán)己烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，萃取后的水溶液部分干燥后即為抗炎活性部位。采用二甲苯所致的小鼠耳腫脹模型和醋酸所致的腹腔滲出模型進(jìn)行的抗炎活性實(shí)驗(yàn)證明，該部位具有明顯的抗炎活性。
文檔編號(hào)A61K36/185GK102861113SQ20121038248
公開日2013年1月9日 申請(qǐng)日期2012年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月11日
發(fā)明者王如峰, 袁銘 申請(qǐng)人:王如峰