專利名稱：一種plga納米纖維支架的制備及其在組織工程中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于組織工程領(lǐng)域，涉及一種組織工程支架，特別涉及一種PLGA納米纖維支架的制備方法及其在組織工程中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
組織工程學(xué)是目前修復(fù)人體器官和組織缺損的常用方法，其核心是構(gòu)建細胞和支架結(jié)合而成的復(fù)合體。將組織細胞在由生物材料制備的與所修復(fù)的組織或器官具有相同構(gòu)形的支架上進行體外培養(yǎng)，然后再植入體內(nèi)的病損區(qū)域，使之繼續(xù)增殖分化，最終達到組織或器官的修復(fù)、重建和功能恢復(fù)。因此，由生物材料制備而成的支架，在組織工程中起著至關(guān)重要的作用。組織工程支架不僅為細胞的增殖分化提供了營養(yǎng)環(huán)境、氣體交換和排除廢物的三維空間場所，更重要的是，三維多孔細胞支架具有生物降解性，且適當?shù)慕到馑俣饶?和細胞、組織的生長速度相匹配，其降解產(chǎn)物同時也不會對細胞的增長和繁殖產(chǎn)生不利的影響，最終引導(dǎo)細胞分化和形成為具有與病損器官大小和形狀相同的新生組織和器官。因此，簡而言之，組織工程用的細胞支架必須具備有一定的三維空間結(jié)構(gòu)，良好的生物相容性，良好的細胞親和性，可降解性，適當?shù)慕到馑俣龋欢ǖ牧W(xué)性能和可消毒性等幾個重要的要求。目前通常在制備組織工程用細胞支架的過程中，常采用的有冷凍干燥法、溶液澆鑄法、熱塑成型法、溶劑揮發(fā)法、靜電噴涂法、致孔劑法等。采用這些方法制備了多種組織工程支架，用于組織修復(fù)取得了一定的效果。但是目前組織工程支架普遍存在細胞支架孔徑分布不均勻，大部分細胞支架的孔徑太小，在體外培養(yǎng)細胞過程中，細胞無法滲透進入支架的內(nèi)部，難以實現(xiàn)真正的貫穿三維支架誘導(dǎo)的細胞分化，從而限制了支架/細胞的體內(nèi)修復(fù)效果。因此，組織工程中制備孔徑稍大的細胞支架以及實現(xiàn)細胞在三維支架中的均勻接種對于組織工程細胞的分化繁殖和最終實現(xiàn)病損器官修復(fù)具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點與不足，利用靜電紡絲納米纖維制備技術(shù)，提供一種PLGA (聚乳酸-羥基乙酸共聚物)納米纖維支架的制備方法。本發(fā)明的另一目的在于提供通過上述制備方法制備得到的PLGA納米纖維支架。本發(fā)明的再一目的在于提供上述PLGA納米纖維支架在組織工程中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)一種PLGA納米纖維支架的制備方法，包括如下步驟(I)配制質(zhì)量濃度為5% 20%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)溶液和質(zhì)量濃度為5% 20%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，攪拌后備用。(2)分別用注射器吸取O. 5 15mL上述兩種溶液,安裝于兩個注射泵中；裁剪一塊錫紙，將其固定于靜電紡絲接收靶的滾筒中；調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為20 lOOr/min、電壓強度為15 25KV、PLGA溶液的注射速度為O. 5 15mL/h、PVP溶液的注射速度為O. 5 15mL/h，然后進行靜電紡絲混紡，紡絲沉積在滾筒中的錫紙上，即得到含PLGA和PVP的網(wǎng)絡(luò)
結(jié)構(gòu)纖維膜。(3)將上述纖維膜從錫紙上取下置于水中，浸泡10 30min，得到具有一定微結(jié)構(gòu)的PLGA納米纖維支架。步驟(I)中所述的聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶液優(yōu)選為以六氟異丙醇為溶劑進行配制，配制好后再加入5 IOppm羅丹明B溶液。步驟(I)中所述的聚乙烯吡咯烷酮溶液優(yōu)選為以乙醇為溶劑進行配制，所述的乙醇優(yōu)選為無水乙醇。步驟(I)中所述的攪拌優(yōu)選為通過磁力攪拌器充分攪拌。
步驟(2)中所述的注射器為無菌注射器，優(yōu)選為醫(yī)用注射器。步驟(2)中所述的錫紙為矩形錫紙，錫紙能夠完全覆蓋滾筒內(nèi)壁。一種PLGA納米纖維支架通過上述制備方法制備得到。上述PLGA納米纖維支架在組織工程中的應(yīng)用，包括如下步驟將種子細胞種植到PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)3 7天，待細胞充分粘附、鋪展后，將薄膜狀的細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合物進行折疊，得到細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體；將細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體采用轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方式繼續(xù)培養(yǎng)7 14天，得到細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)可作為具有特定組織修復(fù)功能的組織工程材料。所述的種子細胞為人來源的成纖維細胞、軟骨細胞、成骨細胞或骨髓間充質(zhì)干細胞等。所述的種子細胞種植的方法為直接接種法或負壓吸引接種法。所述的轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方式的方法優(yōu)選為將細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體用針懸掛在IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的培養(yǎng)基，使培養(yǎng)基浸沒細胞_材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min,于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基。所述的特定組織為皮膚、軟骨或骨等。本發(fā)明提供的聚乳酸納米纖維支架，其突出特點是以PLGA和PVP為原料，采用靜電紡絲混紡技術(shù)，制備PLGA/PVP纖維膜。PVP無細胞毒性，對支架材料無不良影響，PVP在混紡纖維膜中去除后，得到只含目標材料的納米纖維支架，孔隙率大，孔徑大，分布均勻。通過改變PVP的濃度和注射速度，可以得到具有特定微結(jié)構(gòu)(孔徑、孔隙率等)的PLGA納米纖維多孔支架。本發(fā)明將聚乳酸納米纖維支架用于制備組織工程材料，計出了一種“先接種、后成型”的組織工程支架/細胞復(fù)合基質(zhì)的構(gòu)建方式，完全不同于之前常用的細胞支架“先成型、后接種”的方式；因而克服了由于支架材料成型工藝條件所涉及的苛刻環(huán)境，如高溫、高壓、低溫、紫外線等，對于種子細胞的不利影響以及先成型、后接種模式導(dǎo)致細胞在支架上分布不均勻以及細胞無法深入支架內(nèi)部造成養(yǎng)分及代謝物難以輸送等問題。通過改變培養(yǎng)過程中的各種條件，如種子細胞種類，種植方法，折疊次數(shù)，可以有效控制所得到多孔支架的功能。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及效果(I)本發(fā)明提供的PLGA納米纖維支架孔隙率大、孔徑大、分布均勻，細胞在支架內(nèi)可以均勻分布，充分粘附、增殖、分化。(2)本發(fā)明利用聚乳酸納米纖維支架制備組織工程材料采用“先接種、后成型”的構(gòu)建方式，對支架材料成型工藝條件沒有苛刻要求，對種子細胞沒有不利影響。(3)通過改變培養(yǎng)過程中的各種條件，如種子細胞種類，種植方法，折疊次數(shù)，可以有效控制所得到多孔支架的功能。(4)通過聚乳酸納米纖維支架制備的組織 工程材料可以廣泛地應(yīng)用于皮膚、軟骨、骨等多種組織或器官的重建與再生。


圖I是PLGA/PVP靜電紡絲混紡支架SEM圖。圖2是PVP去除后的PLGA納米纖維支架SEM圖。圖3是體外培養(yǎng)3天后骨髓間充質(zhì)干細胞/PLGA復(fù)合基質(zhì)的CLSM圖。圖4是體外培養(yǎng)7天后骨髓間充質(zhì)干細胞/PLGA復(fù)合基質(zhì)折疊后的CLSM圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例及附圖對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。實施例I以六氟異丙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為5%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA，LA/GA=75/25,Mv=5000,山東醫(yī)療器械研究所)溶液，加入5ppm羅丹明B溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；以無水乙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為5%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；分別用25mL注射器吸取O. 5mL PLGA溶液和15mL PVP溶液，安裝于兩個注射泵中；根據(jù)靜電紡絲接收靶的滾筒裁剪一塊錫紙，將其固定于滾筒中；開啟滾筒，使之轉(zhuǎn)動，調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為20r/min ;開啟高壓電，調(diào)節(jié)電壓強度為15KV，分別調(diào)節(jié)PVP溶液的注射速度為15mL/h，PLGA溶液的注射速度為O. 5mL/h，使得兩者分別在靜電場中噴射出細絲，沉積在滾動的滾筒接收靶中；經(jīng)靜電紡絲得到含PVP和PLGA交錯纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的纖維膜(SEM圖如圖I所示);輕輕地將沉積在錫紙上的纖維膜取下，用剪刀剪成寬度約為1cm，長度為IOcm的長條狀；將此長條狀纖維膜片置于盛有水的培養(yǎng)皿中浸泡lOmin，至PVP纖維溶于水后，輕輕地將長條狀纖維膜揭起，即得到PLGA納米纖維支架。從小兒包皮的真皮層分離得到成纖維細胞，并進行傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)基為含有10%(V/V) FBS (胎牛血清)的DMEM。構(gòu)建人工皮膚的細胞采用第6 15代人成纖維細胞。將人成纖維細胞采用直接接種法種植于PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)3天后，用鑷子操作將長條狀纖維支架折疊成長寬約為1cm，厚約為2mm的成纖維細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體，將該復(fù)合體用針懸掛在IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的含有10% (V/V) FBS的DMEM培養(yǎng)基，使培養(yǎng)基浸沒細胞-材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min，于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基，培養(yǎng)7天，得到成纖維細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該復(fù)合基質(zhì)可以作為組織工程皮膚用于缺損創(chuàng)面的修復(fù)。實施例2以六氟異丙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為20%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA，LA/GA=75/25,Mv=5000,山東醫(yī)療器械研究所)溶液，加入8ppm羅丹明B溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；以無水乙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為20%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；分別用25mL注射器吸取15mL PLGA溶液和O. 5 mL PVP溶液，安裝于兩個注射泵中；根據(jù)靜電紡絲接收靶的滾筒裁剪一塊錫紙，將其固定于滾筒中；開啟滾筒，使之轉(zhuǎn)動，調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為100r/min。開啟高壓電，調(diào)節(jié)電壓強度為20KV，調(diào)節(jié)PVP溶液和PLGA溶液的注射速度分別為15mL/h和O. 5mL/h,使得兩者分別在靜電場中噴射出細絲,沉積在滾動的滾筒接收靶中；經(jīng)靜電紡絲得到含PVP和PLGA交錯纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的纖維膜；輕輕地將沉積在錫紙上的纖維膜取下，用剪刀剪成寬度約為1cm，長度為IOcm的長條狀，將此長條狀纖維膜片置于盛有水的培養(yǎng)皿中浸泡30min ;待PVP纖維溶于水后，輕輕地將長條狀纖維膜揭起，即得到PLGA納米纖維支架(SEM圖如圖2所示)。以手術(shù)中獲得的人關(guān)節(jié)軟骨為材料，通過改良二步酶消化法進行人關(guān)節(jié)軟骨細胞的提取，采用含10% (V/V)新生牛血清的高糖型DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。將第3代人軟骨細胞采用直接接種法種植于PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)7天后，用鑷子操作將長條狀纖維支架折疊成長寬約為1cm，厚約為6mm的軟骨細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體，將該復(fù)合體用針懸掛在IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的含10% (V/V)新生牛血清的高糖型DMEM培養(yǎng)基， 使培養(yǎng)基浸沒細胞-材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min，于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基，培養(yǎng)7天，得到軟骨細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該復(fù)合基質(zhì)可以用于軟骨缺損的修復(fù)。實施例3以六氟異丙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為10%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)(PLGA, LA/GA=75/25, Mv=5000,山東醫(yī)療器械研究所)溶液，加入IOppm羅丹明B溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；以無水乙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為15%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；分別用25mL注射器吸取15mL PLGA溶液和3mL PVP溶液，安裝于兩個注射泵中；根據(jù)靜電紡絲接收靶的滾筒裁剪一塊錫紙，將其固定于滾筒中；開啟滾筒，使之轉(zhuǎn)動，調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為50r/min ;開啟高壓電，調(diào)節(jié)電壓強度為25KV，調(diào)節(jié)PVP溶液和PLGA溶液的注射速度均為10mL/h，使得兩者分別在靜電場中噴射出細絲，沉積在滾動的滾筒接收靶中；經(jīng)靜電紡絲得到含PVP和PLGA交錯纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的纖維膜；輕輕地將沉積在錫紙上的纖維膜取下，用剪刀剪成寬度約為1cm，長度為IOcm的長條狀，將此長條狀纖維膜片置于盛有水的培養(yǎng)皿中浸泡20min ;PVP纖維溶于水后，輕輕地將長條狀纖維膜揭起，即得到PLGA納米纖維支架。以人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)中切下的股骨頭和膝關(guān)節(jié)置換術(shù)中切下的股骨髁的松質(zhì)骨作為成骨細胞來源，分離培養(yǎng)和鑒定。將第3代人成骨細胞采用負壓吸引種植技術(shù)種植于PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)3天后，用鑷子操作將長條狀纖維支架折疊成長寬約為Icm,厚約為的5mm成骨細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體，將該復(fù)合體用針懸掛在IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為含10% (V/V)胎牛血清的DMEM與F12按I: I比例配制的混合培養(yǎng)基)，使培養(yǎng)基浸沒細胞-材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min，于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基，培養(yǎng)14天，得到成骨細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該復(fù)合基質(zhì)可用于骨缺損的修復(fù)。實施例4
以六氟異丙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為10%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)(PLGA，LA/GA=75/25,Mv=5000,山東醫(yī)療器械研究所)溶液，加入幾滴羅丹明加入5ppm羅丹明B溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；以無水乙醇為溶劑配制質(zhì)量分數(shù)為15%的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，置于磁力攪拌器中攪拌均勻；分別用25mL注射器吸取O. 8mL PLGA溶液和2mL PVP溶液，安裝于兩個注射泵中；根據(jù)靜電紡絲接收靶的滾筒裁剪一塊錫紙，將其固定于滾筒中；開啟滾筒，使之轉(zhuǎn)動，調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為50r/min ;開啟高壓電，調(diào)節(jié)電壓強度為25KV，調(diào)節(jié)PVP溶液和PLGA溶液的注射速度均為10mL/h，使得兩者分別在靜電場中噴射出細絲，沉積在滾動的滾筒接收靶中；經(jīng)靜電紡絲得到含PVP和PLGA交錯纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的纖維膜；輕輕地將沉積在錫紙上的纖維膜取下，用剪刀剪成寬度約為1cm，長度為IOcm的長條狀，將此長條狀纖維膜片置于盛有水的培養(yǎng)皿中浸泡15min ；PVP纖維溶于水后，輕輕地將長條狀纖維膜揭起，即得到PLGA納米纖維支架。用單純的貼壁培養(yǎng)法與密度梯度離心法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法分離純化成年人骨髓間充質(zhì)干細胞，將第3代骨髓間充質(zhì)干細胞采用負壓吸引種植技術(shù)種植于PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)3天后，用鑷子操作將長條狀纖維支架折疊成長寬約為I. 5cm，厚約為的4mm骨髓間充質(zhì)干細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體(CLSM圖如圖3所示)，將該復(fù)合體用針懸掛在 IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為含10%(V/V)胎牛血清的低糖DMEM中加10_8地塞米松、2. 16g/L β-磷酸甘油、10_8mol/L維生素D3)，使培養(yǎng)基浸沒細胞-材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min，于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基，培養(yǎng)7天，得到骨髓間充質(zhì)干細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)(CLSM圖如圖4所示)，該復(fù)合基質(zhì)可作為修復(fù)骨組織的材料。上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種PLGA納米纖維支架的制備方法，其特征在于包括如下步驟 (1)配制質(zhì)量濃度為5% 20%的聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶液和質(zhì)量濃度為5% 20%的聚乙烯吡咯烷酮溶液，攪拌后備用； (2)分別用注射器吸取0.5 15mL上述兩種溶液，安裝于兩個注射泵中；裁剪一塊錫紙，將其固定于靜電紡絲接收靶的滾筒中；調(diào)節(jié)滾筒的轉(zhuǎn)動速度為20 lOOr/min、電壓強度為15 25KV、聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶液的注射速度為O. 5 15mL/h、聚乙烯吡咯烷酮溶液的注射速度為O. 5 15mL/h，然后進行靜電紡絲混紡，紡絲沉積在滾筒中的錫紙上，即得到含聚乳酸-羥基乙酸共聚物和聚乙烯吡咯烷酮的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)纖維膜； (3)將上述纖維膜從錫紙上取下置于水中，浸泡10 30min，得到PLGA納米纖維支架。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的PLGA納米纖維支架的制備方法，其特征在于 步驟(I)中所述的聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶液以六氟異丙醇為溶劑進行配制，配制好后再加入5 IOppm羅丹明溶液； 步驟(I)中所述的聚乙烯吡咯烷酮溶液以乙醇為溶劑進行配制； 步驟(I)中所述的攪拌為通過磁力攪拌器充分攪拌。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的PLGA納米纖維支架的制備方法，其特征在于所述的乙醇為無水乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的PLGA納米纖維支架的制備方法，其特征在于 步驟(2)中所述的注射器為無菌注射器； 步驟(2)中所述的錫紙為矩形錫紙，錫紙能夠完全覆蓋滾筒內(nèi)壁。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的PLGA納米纖維支架的制備方法，其特征在于所述的注射器為醫(yī)用注射器。
6.一種PLGA納米纖維支架，其特征在于由權(quán)利要求I 5任一項所述的制備方法得到。
7.權(quán)利要求6所述的PLGA納米纖維支架在組織工程中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的PLGA納米纖維支架在組織工程中的應(yīng)用，其特征在于包括如下步驟將種子細胞種植到PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)3 7天，待細胞充分粘附、鋪展后，將薄膜狀的細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合物進行折疊，得到細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體；將細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體采用轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方式繼續(xù)培養(yǎng)7 14天，得到細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)可作為具有特定組織修復(fù)功能的組織工程材料。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的PLGA納米纖維支架在組織工程中的應(yīng)用，其特征在于 所述的種子細胞為人來源的成纖維細胞、軟骨細胞、成骨細胞或骨髓間充質(zhì)干細胞； 所述的種子細胞種植的方法為直接接種法或負壓吸引接種法； 所述的轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方式的方法為將細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合體用針懸掛在IOOmL轉(zhuǎn)瓶中，加入80mL的培養(yǎng)基，使培養(yǎng)基浸沒細胞-材料復(fù)合物。設(shè)定轉(zhuǎn)速為40r/min，于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每3天更換培養(yǎng)基。
所述的特定組織為皮膚、軟骨或骨。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種PLGA納米纖維支架的制備及其在組織工程中的應(yīng)用，屬于組織工程領(lǐng)域。該方法以聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為原料，采用靜電紡絲混紡制備含兩種材料的纖維薄膜，在水溶液中將PVP溶解去除，獲得具有一定微結(jié)構(gòu)的PLGA納米纖維支架。將種子細胞接種PLGA納米纖維支架上，體外培養(yǎng)，將細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合物進行折疊，再采用轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)方式培養(yǎng)7～14天，得到細胞/PLGA納米纖維支架復(fù)合基質(zhì)，該復(fù)合基質(zhì)可作為具有特定組織修復(fù)功能的組織工程材料植入動物模型。本發(fā)明所制備工藝簡單可行，重復(fù)性好，可廣泛地應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域。
文檔編號A61L27/16GK102886068SQ20121035602
公開日2013年1月23日 申請日期2012年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月21日
發(fā)明者謝德明, 郭瑞 申請人:暨南大學(xué)