專利名稱：一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取及含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥藥用物質(zhì)提取及含量檢測(cè)，具體涉及到一種超聲輔助提取藤黃中藤黃總酸的方法，以及該藤黃總酸的含量測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
藤黃系藤黃科(Gittiferae)植物(GarciniahanburyiHook · f ·)所分泌的干燥樹脂，呈圓柱狀或不規(guī)則塊狀物，黃棕色，質(zhì)脆易碎。據(jù)我國(guó)古代醫(yī)書記載，藤黃味酸澀、有毒、具有攻毒蝕瘡、破血散結(jié)等功效，主治癰疽、腫毒、頑癬、惡瘡，酸性成分為藤黃樹脂中主要活性成分。中藥藤黃提取物體對(duì)小鼠腹水型肝癌、艾氏腹水癌、肉瘤S180、S37、 Walk256、MA-737、人肝癌Bel - 7402、SMMC - 7721、宮頸癌U14 ,Hela細(xì)胞株等有顯著抑殺作用，能通過多種機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用，試用于臨床上治療乳腺癌77例皮膚癌13例，獲一定療效。提取藤黃總酸的方法主要有浸潰法、加熱回流法、超臨界C02萃取法等。申請(qǐng)?zhí)枮?2128822.4的中國(guó)發(fā)明專利公開了三種總藤黃酸的制備方法，方法中分別使用こ醚、石油醚和吡啶作為提取溶劑，回流提取了總藤黃酸，方法中反復(fù)使用多種有機(jī)溶劑進(jìn)行處理，操作復(fù)雜，提取時(shí)間長(zhǎng)，生產(chǎn)效率低，易造成環(huán)境污染，超臨界C02萃取法提取藤黃總酸對(duì)儀器設(shè)備要求高，成本高，同時(shí)也浪費(fèi)生藥資源。目前藤黃酸類化合物的分析方法主要有比色法、波層色譜法、高效液相色譜法等?！吨袊?guó)藥師》2002，5 (12) =731-732報(bào)道了采用ニ氯氧鋯(ZrOCl2)顯色后比色法測(cè)定藤黃總酸含量，然而采用該法時(shí)顯色反應(yīng)易受溫度和光照等諸多因素影響，從而造成重現(xiàn)性不理想(藥學(xué)進(jìn)展，2011，35 (8):337-344)。薄層色譜法和高效液相色譜法在測(cè)定藤黃總酸時(shí)往往只能針對(duì)ー種或幾種指標(biāo)性成分定量，不能反映藤黃總酸的含量，須有相應(yīng)對(duì)照品，且設(shè)備昂貴，不容易普及。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取及含量測(cè)定方法，以解決背景技術(shù)中的問題。一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法，包括以下步驟
(I )、原料的制備取藤黃藥材所分泌出的干燥樹脂，粉碎，過40目篩，得原料粗粉待
用；
(2)、提取在室溫下，將步驟(I)細(xì)粉加入5-20倍量的50%-100%こ醇溶液進(jìn)行混合，將混合液在水浴下超聲強(qiáng)化提取，提取頻率為20-70khz，提取溫度為20-60°C，超聲提取時(shí)間為5-20分鐘；
(3)、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末。一種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測(cè)定方法，包括以下步驟(I )、精密稱取一定量藤黃藥材或藤黃提取物，置容量瓶中，加入一定量こ醇溶液，超聲溶解，定容置刻度，搖勻，稀釋至一定倍數(shù)，即得樣品溶液；
(2)、精密取藤黃酸對(duì)照品，用こ醇超聲溶解并定容，用こ醇稀釋至刻度，搖勻，即得藤黃酸對(duì)照品溶液；
(3)、取步驟(I)中供試品液，步驟(2)作為對(duì)照品液，在紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品中藤黃總酸含量。在本發(fā)明中，紫外分光光度法檢測(cè)藤黃總酸所用的溶劑可為甲醇、こ醇、こ腈、堿性水溶液一種或幾種，檢測(cè)波長(zhǎng)可在250nm±5nm或360nm±5nm處。有益效果
本發(fā)明有以下優(yōu)點(diǎn)
1、提取方法克服了常規(guī)溶劑提取時(shí)間長(zhǎng)，溶劑消耗量大等缺點(diǎn)，具有提取時(shí)間短、產(chǎn)率高等優(yōu)點(diǎn)；而且超聲提取是ー個(gè)物理過程，其間無化學(xué)反應(yīng)，減少了生物活性物質(zhì)的改變，節(jié)省能源，所用提取溶劑對(duì)環(huán)境友好；
2、采用紫外檢測(cè)總藤黃酸含量結(jié)果準(zhǔn)確，針對(duì)性強(qiáng)，加樣回收試驗(yàn)表明，本檢測(cè)方法平均回收率達(dá)98. 2%, RSD為I. 58% ；
3、精密度良好。精密稱取ー批藤黃藥材粉末高、中、低量分別于容量瓶中，加こ醇定容，稀釋至一定濃度后，分別測(cè)藤黃藥材及藤黃對(duì)照品的低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度溶液吸光度， 各自連續(xù)測(cè)三次，結(jié)果表明精密度小于O. 39%，精密度良好；
4、重復(fù)性好。精密稱取6組藤黃藥材粉末，精密稱定。制備樣品溶液，測(cè)定吸光度，計(jì)算藤黃總酸含量，得出RSD%=1. 6%..說明該方法重復(fù)性好；
5、穩(wěn)定性良好，精密量取樣品溶液，每隔ー個(gè)小時(shí)測(cè)定其吸光度，總共測(cè)6次，結(jié)果表明，樣品在6小時(shí)內(nèi)吸光度基本沒有變化，RSD=L 1%，說明該方法穩(wěn)定性良好；
6、本發(fā)明采用超聲技術(shù)提取藤黃總酸，エ藝流程簡(jiǎn)單，操作容易控制，有效縮短提取時(shí)間；采用紫外分光光度法檢測(cè)藤黃總酸含量可用于藤黃藥材或提取物的質(zhì)量控制。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、工作流程、使用方法達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)ー步闡述本發(fā)明。具體步驟為
I、精密稱取取藤黃藥材細(xì)粉50g，加入5-20倍重量的濃度為50%-100%こ醇水 溶液進(jìn)行混合。2、將混合液在水浴下超聲強(qiáng)化提取，提取頻率為20_70khz，提取溫度為20_60°C， 超聲提取時(shí)間為5-20分鐘。3、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥 得到藤黃總酸粉末。以上步驟即為提取藤黃中藤黃總酸的步驟。4、用紫外分光光度法測(cè)定藤黃原料藥、提取物中藤黃總酸的含量。其中紫外分光光度法測(cè)定藤黃總酸含量的具體步驟為精密稱取一定量藤黃 藥材或藤黃提取物15mg，置50ml容量瓶中，加入一定量こ醇溶液定容至刻度，
超聲溶解，定容置刻度，搖勻，精密取I. Oml溶液置IOml容量瓶中，加こ醇至刻度作為供試品溶液。精密稱取藤黃酸對(duì)照品6.63mg，置于25mL容量瓶中，加甲醇定容，精密移取IOmL至IOOmL容量瓶中，加甲醇定容，制成濃度為26. 52 μ g/ml對(duì)照品溶液。精密移取上去對(duì)照品溶液2、4、6、8ml分別于IOml容量瓶中，加こ醇定容。以こ醇溶液為空白對(duì)照，在360nm處測(cè)定對(duì)照品溶液的吸光度，以藤黃酸的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程。表I對(duì)照品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)值表
權(quán)利要求
1.一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法，其特征在于，包括以下步驟 (I )、原料的制備取藤黃藥材所分泌出的干燥樹脂，粉碎，過40目篩，得原料粗粉待用； (2)、提取在室溫下，將步驟(I)細(xì)粉加入5-20倍量的50%-100%こ醇溶液進(jìn)行混合，將混合液在水浴下超聲強(qiáng)化提取，提取頻率為20-70khz，提取溫度為20-60°C，超聲提取時(shí)間為5-20分鐘； (3)、收集步驟2提取液，過濾，取濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末。
2.一種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)、精密稱取一定量藤黃藥材或藤黃提取物，置容量瓶中，加入一定量こ醇溶液，超聲溶解，定容置刻度，搖勻，稀釋至一定倍數(shù)，即得樣品溶液； (2)、精密取藤黃酸對(duì)照品，用こ醇超聲溶解并定容，用こ醇稀釋至刻度，搖勻，即得藤黃酸對(duì)照品溶液； (3)、取步驟(I)中供試品液，步驟(2)作為對(duì)照品液，在紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品中藤黃總酸含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種藤黃藥材中藤黃總酸的含量測(cè)定方法，其特征在于，紫外分光光度法檢測(cè)藤黃總酸所用的溶劑可為甲醇、こ醇、こ腈、堿性水溶液ー種或幾種，檢測(cè)波長(zhǎng)可在250nm±5nm或360nm±5nm處。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種藤黃藥材中藤黃總酸的超聲提取方法及含量測(cè)定方法，將藤黃藥材烘干，粉碎后過40目篩，稱取粗粉，與50%-100%乙醇溶液按液料比為5:1~20:1進(jìn)行混合，在溫度為20~60℃、提取頻率為20-70kHz下提取5~20分鐘得到藤黃總酸提取液，過濾，濾液減壓回收溶劑，濃縮至浸膏狀，減壓干燥得到藤黃總酸粉末；采用紫外分光光度法檢測(cè)藤黃藥材及提取物中藤黃總酸含量。本發(fā)明提取工藝流程簡(jiǎn)單，操作容易控制，有效縮短提取時(shí)間；紫外分光光度法檢測(cè)重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高，可用于藤黃藥材或提取物的質(zhì)量控制。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102688268SQ20121020272
公開日2012年9月26日 申請(qǐng)日期2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月19日
發(fā)明者周安, 彭代銀, 李慶林, 李翔, 王效山, 胡海霞 申請(qǐng)人:彭代銀