專利名稱：用于藥物釋放支架的涂層劑制品及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于藥物釋放支架的涂層劑制品及其制造方法，更特別的是涉及用于藥物釋放支架的涂層劑的制造方法，其能夠使應(yīng)用在支架上的藥物釋放率最大化，從而表現(xiàn)出抗癌功效，本發(fā)明還涉及用于藥物釋放支架的涂層劑制品。
背景技術(shù)：
通常，在外科治療或與外科治療相關(guān)的侵入性藥物治療中，廣泛使用支架(人造金屬絲網(wǎng))在血管或管腔內(nèi)提供支撐物或假體以防止狹窄復(fù)發(fā)。此外，為了促進(jìn)治療或恢復(fù)，可將支架插入或擴(kuò)大食道、呼吸道、血管、泌尿器官或其它難以進(jìn)入的管腔，這被視為一般性治療。支架，開發(fā)于20世紀(jì)90年代后期，當(dāng)給罹患大腸癌的患者手術(shù)時(shí)，可應(yīng)用支架代替制造人工肛門，但也可能存在根據(jù)患者的情況而不能使用這種支架的情況。支架植入術(shù)不用于治療癌癥，但用于暫時(shí)解決由于癌癥導(dǎo)致部分腸子變窄的問題。支架以細(xì)金屬管的形式插入由于癌癥引起的大腸變窄的部分并使其擴(kuò)大以保持阻塞部分處于開放狀態(tài)。雖然已經(jīng)提出很多合適用于例如大腸癌的支架類型，但鎳和鈦的合金(其被稱為“鎳鈦諾”)是特別有用的。最近，為了改進(jìn)使用支架的治療效果，研究人員已經(jīng)嘗試開發(fā)了許多用于遞送藥物的移植支架，所述藥物諸如溶解血栓劑或抗增殖劑。例如，美國專利號(hào)5，092，877公開了可與和藥物釋放相關(guān)的涂料一起使用的聚合支架，且國際專利公開號(hào)W096/032907公開了藥物釋放涂覆支架。懷著用藥物涂覆支架以長時(shí)間傳遞這種生物活性治療材料的目的，制定了方法，其包括將生物活性治療材料加入聚合物溶液，從而獲得混合物，然后將其施用干支架，隨后去除溶劑，因此支架上形成了含有生物活性治療材料的聚合物層。使用特定生物活性治療材料，尤其是地塞米松的情況下，要考慮到其中溶劑或使用的聚合物的可混合性或溶解度，且釋放速率應(yīng)當(dāng)是適當(dāng)?shù)摹ｍn國專利號(hào)10-439156公開了用于混合生物活性材料與聚合物材料的技術(shù)及用該混合物涂覆支架的技術(shù)，所述生物活性材料選自由地塞米松、紫杉醇、絲裂霉素與布洛芬組成的組中，聚合物材料含有O. 01 30 wt%的水溶性聚合物共沉淀與70 99.99 wt%的交聯(lián)聚合物溶液。韓國專利號(hào)10-511618公開了用于可控制藥物釋放的支架的多層涂層及其制造方法，所述多層涂層包含由聚(こ烯-醋酸こ烯酷)共聚物或苯こ烯橡膠聚合物組成的基礎(chǔ)層，使用生物相容性聚合物與藥物成分在基礎(chǔ)層上形成的第二涂層，及使用不同于第二涂層的藥物成分在第二涂層上形成的第三涂層。生物相容性聚合物的實(shí)例包括聚こ烯醇、聚こニ醇、聚交酷、聚こ醇酸交酷、聚交酯共聚物、聚環(huán)氧こ烷、聚ニ氧六環(huán)酮、聚已酸內(nèi)酷、聚磷腈、聚酸酐、聚氨基酸、醋酸丁酸纖維素、三醋酸纖維素、聚丙烯酸酷、聚丙烯酰胺、聚氨酷、聚硅氧烷、聚こ烯吡咯烷酮(PVP)及其共聚物，第二涂層的藥物成分的實(shí)例包括西洛他唑(6-[4-(I-環(huán)己基-IH-四唑-5-基)丁氧基]-3，4-ニ氫-2 (IH)-喹啉酮，分子式C2tlH27N5O2，分子量369. 47)，含有抗血小板藥物、抗血栓劑、抗增殖劑、生長因子、抗氧化劑和放射性化合物。另ー方面，本發(fā)明的發(fā)明人申請并注冊了名稱為“用于藥物釋放支架的涂層劑及其制造方法”，專利號(hào)0916750的韓國專利。上述專利具體針對含有400 mg聚氨酯(PU)、21 ml四氫呋喃(THF)、5%、10%、20%及30%普朗尼克F-127與5%生物活性紫杉醇的用于藥物釋放支架的涂層劑。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明已牢記相關(guān)領(lǐng)域出現(xiàn)的上述問題，且本發(fā)明的目的在于提供用于藥 物釋放支架的涂層劑制品及其制造方法，其中制備了含有吉西他濱作為抗癌劑的藥物，從而將制備的藥物應(yīng)用于支架以使應(yīng)用干支架上的藥物釋放速率連續(xù)地最大化以提高抗癌功效。為了完成上述目的，本發(fā)明提供了用于藥物釋放支架的涂層劑的制造方法。該方法包括(I)在四氫呋喃中溶解聚氨酯，從而獲得第一溶液；(2)在四氫呋喃中溶解普朗尼克F-127，從而獲得第二溶液；(3)在こ醇中溶解吉西他濱化合物，從而獲得第三溶液；(4)混合(I)到(3)中獲得的第一溶液、第二溶液和第三溶液，從而制備溶液混合物；(5)在涂覆有聚四氟こ烯薄膜的支架上施用(4)中獲得的溶液混合物；(6)在預(yù)定時(shí)間內(nèi)干燥(5)中獲得的支架，然后將支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中；以及(7)從聚氨酯溶液中移開浸泡在出)中的支架，然后干燥支架。在(I)中，四氫呋喃使用的量可以為7 9 ml。在(2)中，普朗尼克F-127的量可以設(shè)定為8 22 wt%。在(3)中，吉西他濱化合物可以是吉西他濱鹽酸鹽(HCl)，并且こ醇可以是I ml的 75% こ醇(H2O 中，v/v)。在⑷中，可以使用超聲波進(jìn)行混合。在(6)和(7)中，干燥可以進(jìn)行4 6小吋。在(6)中，所述支架可以浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中一次。


通過與附圖結(jié)合的下面的詳細(xì)描述更清楚地認(rèn)識(shí)本發(fā)明的以上及其他目的、特點(diǎn)與優(yōu)勢，其中
圖I闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑的制造過程流程圖2和3闡明了釋放試驗(yàn)的結(jié)果圖表；
圖4闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑根據(jù)時(shí)間(周)的TNF-a基因的表達(dá)；
圖5闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑根據(jù)時(shí)間(周)的IL-Ib基因的表達(dá)；
圖6闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑根據(jù)時(shí)間(周)的IL-12基因的表達(dá)；
圖7闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑根據(jù)時(shí)間(周)的p38促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)的活化(磷酸化)；及
圖8闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑根據(jù)時(shí)間(周)釋放藥物殺死癌細(xì)胞的效果。
具體實(shí)施例方式在下文中，參考附圖將更清楚地理解本發(fā)明的實(shí)施方式。圖I闡明了根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑的制造過程流程圖。如圖I中所示，根據(jù)本發(fā)明的用于藥物釋放支架的涂層劑的制造方法包括在四氫呋喃中溶解聚氨酷，從而獲得第一溶液(SI),在四氫呋喃中溶解普朗尼克F-127，從而獲 得第二溶液(S2)，在こ醇中溶解吉西他濱化合物，從而獲得第三溶液(S3)，混合SI到S3中獲得的第一溶液、第二溶液和第三溶液，從而制備溶液混合物(S4)，在涂覆有聚四氟こ烯薄膜的支架上施用S4中獲得的溶液混合物(S5)，在預(yù)定時(shí)間內(nèi)干燥S5中獲得的支架，然后將支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中(S6)，從聚氨酯溶液中移開浸泡S6中的支架,然后干燥支架(S7)。在SI中，聚氨酯溶解在7 9 ml的四氫呋喃(THF)中，確切地8. 5 ml THF。在S2中，將普朗尼克F-127溶解于I ml THF中，普朗尼克F-127的量設(shè)定為8
22 Wt%o更精確地，可以使用0%、8%、10%、12%、15%及22%的普朗尼克。在S3中，吉西他濱化合物是吉西他濱鹽酸鹽(HCl)，且溶解于I ml 75%こ醇(H2O中，v/v)中。在S4中，使用超聲波進(jìn)行所述溶液的混合。在S6和S7中，干燥進(jìn)行4 6小時(shí)，確切地為5小時(shí)。在S6中，所述支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中一次。通過上述步驟制造的用于藥物釋放支架的涂層劑由聚氨酯、四氫呋喃、普朗尼克F-127、吉西他濱鹽酸鹽及こ醇組成，其混合在一起，并施用于聚四氟こ烯薄膜，并干燥，從而完成試驗(yàn)樣品，然后將其用于以下試驗(yàn)以評估抗癌功效。[試驗(yàn)實(shí)施例I]
該試驗(yàn)實(shí)施例涉及根據(jù)本發(fā)明的藥物釋放涂層劑的釋放。(a)將涂覆有藥物釋放涂層劑的聚四氟こ烯薄膜浸入到2 ml PBS中。(b)最初的6小時(shí)后，更換PBS。(c)隨后，每隔24小時(shí)更換PBS。(d)每當(dāng)更換PBS吋，使用分光光度計(jì)在266 nm處測定獲得的PBS。圖2和圖3是闡明上述釋放試驗(yàn)結(jié)果的圖表。具體地，圖2示出了來自聚四氟こ烯薄膜的吉西他濱鹽酸鹽的釋放，并且圖3示出了來自膨脹膜(bulk film)的吉西他濱鹽酸鹽的釋放。聚四氟こ烯薄膜含有的吉西他濱鹽酸鹽的平均量為7.78 土 0.05 mg/cm2。從釋放數(shù)據(jù)可以明顯地看出，取決于混合物中的普朗尼克濃度，其中使用聚氨酯固定最終聚合物濃度，在樣品中含有12%普朗尼克的情況下，每時(shí)間釋放的吉西他濱鹽酸鹽的量較高。然而，0%普朗尼克、8%普朗尼克和10%普朗尼克每時(shí)間釋放更小的量，并且含有15%普朗尼克和22%普朗尼克的聚四氟こ烯薄膜導(dǎo)致非常大的初始釋放量，因此它們的釋放曲線不能被認(rèn)為是理想的。與膜的釋放模式(圖3)相比，其中作為該試驗(yàn)的初始測試，在不使用聚四氟こ烯薄膜的情況下應(yīng)用相同的聚合物混合比例，含有的吉西他濱鹽酸鹽的平均量是12. 47 mg/cm2，上述釋放趨勢在12%普朗尼克中示出。因此，可以計(jì)算出12%普朗尼克更能有效地釋放藥物。[試驗(yàn)實(shí)施例2]
通過培養(yǎng)人肝管癌細(xì)胞，即Sk-CHA-Ι，進(jìn)行分子細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)。(I)方法A.細(xì)胞系
在 10% C02/90% O2 下，含有20%胎牛血清(GIBRO-BRL, Grand Island, NY, USA)和抗生素(100 U/ml青霉素和100 g/ml鏈霉素)的Dulbecco改良的伊格爾培養(yǎng)基(Sigma,St. Louis)中培養(yǎng) Sk-CHA-I 細(xì)胞。隨著時(shí)間推移(周)，從膜中釋放的吉西他濱(GEM)加入到細(xì)胞系中，并且接受刺激，從各個(gè)細(xì)胞系中提取總的RNA，然后合成c-DNA。通過吉西他濱表達(dá)的使用作為目標(biāo)細(xì)胞因子基因是腫瘤壞死因子_a、白細(xì)胞介素-Ib和白細(xì)胞介素-12。使用引物進(jìn)行RT-PCR，從而測定特異性基因表達(dá)。 p38-激酶的活化(磷酸化)已知是作為蛋白樣品的MAPK，其通過蛋白質(zhì)印跡評估各個(gè)裂解的細(xì)胞系。B.基因分析
使用的PCR引物的基因序列如下
權(quán)利要求
1.一種用于藥物釋放支架的涂層劑的制備方法，包括 (1)在四氫呋喃中溶解聚氨酯，從而獲得第一溶液； (2)在四氫呋喃中溶解普朗尼克F-127，從而獲得第二溶液； (3)在乙醇中溶解吉西他濱化合物，從而獲得第三溶液； (4)混合(I)到(3)中獲得的第一溶液、第二溶液和第三溶液，從而制備溶液混合物； (5)在涂覆有聚四氟乙烯薄膜的支架上施用(4)中獲得的溶液混合物； (6)干燥(5)中獲得的支架預(yù)定時(shí)間，然后將支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中；以及 (7)從聚氨酯溶液中移開浸泡在(；6)中的支架，然后干燥支架。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(I)中，四氫呋喃使用的量為7 9ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(2)中，普朗尼克F-127的量設(shè)定為8 22Wt%。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(3)中，所述吉西他濱化合物是吉西他濱鹽酸鹽(HCl)，并且乙醇是I ml的75%乙醇(H2O中，v/v)。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(4)中，使用超聲波進(jìn)行所述混合。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(6)和(7)中，干燥進(jìn)行4飛小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中，在(6)中，所述支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中一次。
8.一種用于藥物釋放支架的涂層劑，使用根據(jù)權(quán)利要求I到7中任一項(xiàng)所述的方法制備。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于藥物釋放支架的涂層劑制品及其制造方法。該方法包括(1)在四氫呋喃中溶解聚氨酯，以獲得第一溶液；(2)在四氫呋喃中溶解普朗尼克F-127，以獲得第二溶液；(3)在乙醇中溶解吉西他濱化合物，以獲得第三溶液；(4)混合(1)到(3)中獲得的第一溶液、第二溶液和第三溶液，從而制備溶液混合物；(5)在涂覆有聚四氟乙烯薄膜的支架上施用(4)中獲得的溶液混合物；(6)干燥(5)中獲得的支架一預(yù)定時(shí)段，然后將支架浸入到四氫呋喃中的聚氨酯溶液中；以及(7)從聚氨酯溶液中移開浸泡在(6)中的支架，然后干燥支架，從而應(yīng)用于支架上的抗癌藥物的釋放速率可以使連續(xù)地并能最大程度地改進(jìn)，從而使抗癌功效最大化。
文檔編號(hào)A61L31/16GK102813968SQ20121018435
公開日2012年12月12日 申請日期2012年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月7日
發(fā)明者辛卿珉, 羅建 申請人:太雄醫(yī)療器株式會(huì)社, 辛卿珉