專利名稱：治療注意力不足過動癥的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，可用于注意力不足過動癥(attention deficithyperactivity disorder)的治療。
背景技術(shù)：
注意不足過動癥(ADHD)為兒童期最常見的神經(jīng)行為性疾病之一，并在4-10%的兒童中觀察到了該疾病。在被診斷患有ADHD的兒童中，大約50%具有持續(xù)至成年的癥狀。情緒躁動、沖動行為和想法、注意力缺乏、不能專注和集中、說話過度以及心不在焉(absent-mindedness)等是 ADHD 的一些癥狀。已知含有抗腦特異性S-100蛋白抗血清的親神經(jīng)性藥物(RU2156621C1，A61K39/395，9/27/2000)。然而，對于治療包括注意力不足過動癥在內(nèi)的神經(jīng)行為性疾病而言，這些藥劑并未提供足夠的治療效力。因此，對在注意力不足過動癥治療中具有期望治療效力的新藥產(chǎn)品存在持續(xù)需求。本專利申請的發(fā)明人Dr.0leg 1.Epshtein已發(fā)現(xiàn)了經(jīng)順勢療法技術(shù)強(qiáng)化的極度稀釋形式(或極低形式)抗體(活性強(qiáng)化形式)的治療效果。美國專利號7，582，294公開了通過給予抗前列腺特異性抗原(PSA)的、順勢療法活性形式的抗體來治療良性前列腺增生癥(Benign Prostatic Hyperplasia)或前列腺炎(prostatitis)的藥劑。美國專利號7，700, 096公開了順勢療法強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。S-100蛋白是主要在腦灰質(zhì)中(主要在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和施旺細(xì)胞中)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞質(zhì)酸性鈣結(jié)合蛋白。所述蛋白質(zhì)以由兩種免疫學(xué)上不同的亞基(a和￠)組成的多種均二聚體或異二聚體異構(gòu)體存在。已經(jīng)提出將S-100蛋白用作診斷的輔助，并用于對腦病變和由于腦損傷(如中風(fēng))而造成的神經(jīng)傷害進(jìn)行評價。Yardan等,Usefulness of S100B Proteinin Neurological Diso rders, J Pak Med Assoc Vol.61, N0.3, 2011 年 3 月，以引用的方式將其內(nèi)容并入本文。已證明極低劑量的抗S-100蛋白抗體具有抗焦慮(anxiolytic)、抗衰弱(ant1-asthenic)、抗攻擊(ant1-aggressive)、應(yīng)激保護(hù)(stress-protective)、抗缺氧(ant1-hypoxic)、抗局部缺血(ant1-1schemic)、神經(jīng)保護(hù)(neuroprotective)和促智(nootropic)活性。參見 Castagne V.等，Antibodies to SlOOproteins haveanxiolytic-1 ike activity at ultra-low doses in the adult rat, J PharmPharmacol.,2008,60(3):309-16 ；Epstein 0.1., Antibodies to calcium-binding S100Bprotein block the conditioning of long-term sensitization in the terrestrialsnail, Pharmacol Biochem Behav.,2009,94(1):37-42 ；Voronina T.A.等，第 8 章，Antibodies to S-1OOprotein in anxiety-depressive disorders in experimentaland clinical conditions, In “Animal models in biological psychiatry”， KalueffA.V.N-Y 著，“Nova Science Publishers, Inc.”，2006，第 137-152 頁，以引用的方式將上述文獻(xiàn)內(nèi)容全部并入本文。
—氧化氮(NO)是已顯示出在不同生物學(xué)過程的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用的氣態(tài)分子。內(nèi)皮衍生的NO是調(diào)節(jié)血管張カ(vascular tone)的關(guān)鍵分子,其與血管病的聯(lián)系早已被認(rèn)視到。NO對許多已知參與動脈粥樣硬化斑塊(atherosclerotic plaque)形成的過程起抑制作用，所述過程包括單核細(xì)胞粘著、血小板凝聚以及血管平滑肌細(xì)胞増殖。內(nèi)皮NO的另一重要作用是保護(hù)血管壁免受由其自身代謝產(chǎn)物及脂類和脂蛋白的氧化產(chǎn)物誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激(oxidative stress).內(nèi)皮功能障礙在動脈粥樣硬化的很早階段發(fā)生。因此，局部NO利用度不足可能是促進(jìn)人類動脈粥樣化形成的最終共路(final common pathway)。除了在血管內(nèi)皮中的作用以外，NO利用度還顯示出了對脂蛋白代謝的調(diào)節(jié)作用。NO代謝產(chǎn)物的血漿濃度與血漿總膽固醇水平和低密度脂蛋白(LDL)膽固醇水平的負(fù)相關(guān)性已有報道，而高密度脂蛋白(HDL)在高膽固醇血癥患者中改善血管功能。NO缺失對疾病發(fā)展具有相當(dāng)重要的影響。糖尿病與主要由動脈粥樣硬化疾病發(fā)展加快導(dǎo)致的發(fā)病率和死亡率上升有夫。并且，報告顯示糖尿病患者的肺功能削弱。有人提出胰島素抵抗可導(dǎo)致氣道炎癥。Habib等，Nitric Oxide Measurement From Blood To Lungs,Is There A Link Pak J Physiol2007 ；3 (I)。一氧化氮由內(nèi)皮通過ー氧化氮合酶(NO合酶)從L-精氨酸合成的。NO合酶以不同亞型出現(xiàn)，包括組成型(cNOS)和誘導(dǎo)型(iNOS)。組成型NO合酶存在于正常內(nèi)皮細(xì)胞、ネ申經(jīng)元和其它某些組織中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明致力于針對提高對注意力不足過動癥(ADHD)以及注意力不足癥(ADD)的治療效カ。在ー個方面，本發(fā)明提供了用于對注意力不足過動癥進(jìn)行治療的復(fù)合藥物組合物，所述藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及作為附加強(qiáng)化組分(additional strengthening component)的活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。在另一方面，本發(fā)明 提供了用于對治療注意力不足癥進(jìn)行治療的復(fù)合藥物組合物，所述藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及作為附加強(qiáng)化組分的活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。在一個變型中，本發(fā)明提供了復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性s-100蛋白抗體、以及活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體，其中，所述抗體針對的是整個S-100蛋白或其片段。在一個變型中，本發(fā)明提供了復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性s-100蛋白抗體、以及活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體，其中所述抗體針對的是整個NO合酶或其片段。在一個變型中，本發(fā)明這一方面的復(fù)合藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗S-100蛋白抗體，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗s-100蛋白抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的(C12、C30及C50)或(C12、C30及C200)順勢療法稀釋液的混合物形式?；钚詮?qiáng)化形式的抗NO合酶抗體處于可隨后浸潰至固態(tài)載體上的(C12、C30及C50)或(C12、C30及C200)順勢療法稀釋液的混合物形式。在一個變型中，本發(fā)明這一方面的復(fù)合藥物組合物包含活性強(qiáng)化形式的抗NO合酶抗體，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗NO合酶抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的(C12、C30及C50)或(C12、C30及C200)順勢療法稀釋液的混合物形式。活性強(qiáng)化形式的抗S-1OO蛋白抗體處于可隨后浸潰至固態(tài)載體上的(C12、C30及C50)或(C12、C30及C200)順勢療法稀釋液的混合物形式。優(yōu)選地，活性強(qiáng)化形式的抗S-100蛋白抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體，更優(yōu)選為多克隆抗體。在本發(fā)明這一方面的一個變型中，活性強(qiáng)化形式的抗s-100蛋白抗體通過連續(xù)的百倍稀釋(successive centesimal dilutions)、且姆次稀釋時均伴以振蕩而制備。特別在考慮之列的是豎直振蕩(vertical shaking)。優(yōu)選地，活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體，更優(yōu)選為多克隆抗體。在本發(fā)明這一方面的一個變型中，活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體通過連續(xù)的百倍稀釋、且每次稀釋時均伴以振蕩而制備。特別在考慮之列的是豎直振蕩。在另一方面，本發(fā)明提供了對注意力不足過動癥進(jìn)行治療的方法，所述方法包括向有需要的受試者給予復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含a)活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體和b)活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。在本發(fā)明的一個變型中，提供了如下方案:給予1-2單位劑型的活性強(qiáng)化形式的抗s-100蛋白抗體以及1-2單位劑型的活性強(qiáng)化形式的抗NO合酶抗體；各劑型以毎日1-4次進(jìn)行給予。優(yōu)選所述1-2單位劑型的各活性強(qiáng)化形式抗體以每日2次進(jìn)行給予。


圖1示出了與基線值相比，在治療2周、4周、6周、8周和12周時ADHD癥狀跡象減弱(ADHDRS-1V-家庭版量表的總得分)。
具體實施例方式參考所附的權(quán)利要求書對本發(fā)明進(jìn)行限定?？紤]到權(quán)利要求書，下述術(shù)語匯編提供了有關(guān)定義。本文所使用的術(shù)語“抗體”意味著特異性地結(jié)合至另一分子的特定空間和極性結(jié)構(gòu)、并因此被定義為與另一分子的特定空間和極性結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的免疫球蛋白。權(quán)利要求書中所列舉的抗體可包括完整的免疫球蛋白或其片段，可為天然抗體、多克隆抗體或單克隆抗體，并可包括多個類及同種型，例如IgA, IgD, IgE, IgGU IgG2a、IgG2b和IgG3、IgM等。免疫球蛋白的片段可包括Fab、Fv和F(ab’)2以及Fab’等。單數(shù)“抗體(antibody)”包括復(fù)數(shù)“抗體(antibodies)”。相對于本文所列舉的抗體，術(shù)語“活性強(qiáng)化形式”或“強(qiáng)化形式”分別用于表示任意的抗體初始溶液的順勢療法強(qiáng)化產(chǎn)物?！绊槃莜煼◤?qiáng)化”表示利用順勢療法的方法對有關(guān)物質(zhì)的初始溶液賦予順勢療法效カ(potency)。盡管不限于此，但是“順勢療法強(qiáng)化”可包括例如結(jié)合外部處理、尤其 是豎直(機(jī)械)振蕩的重復(fù)的連續(xù)稀釋。換句話說，根據(jù)順勢療法技術(shù)，對抗體的初始溶液進(jìn)行連續(xù)的重復(fù)稀釋并對每次獲得的溶液進(jìn)行多次豎直振蕩?？贵w處于溶劑(優(yōu)選水或水-こ醇混合物)中的初始溶液的優(yōu)選濃度范圍為約0.5mg/ml至約5.0mg/ml。制備各組分(即抗體溶液)的優(yōu)選過程為:使用抗體初級基質(zhì)溶液(primarymatrix solution)(原始ET劑，mother tincture)分別被稀釋 10012、1003° 和 1002°° 倍的 3種水稀釋液或水-醇稀釋液的混合物，相當(dāng)于百倍順勢療法稀釋液(C12、C30和C200);或者使用抗體初級基質(zhì)溶液分別被稀釋10012、1003°和1005°倍的3種水稀釋液或水-醇稀釋液的混合物，相當(dāng)于百倍順勢療法稀釋液(C12、C30和C50)。在美國專利號7，572，441和7，582，294中描述了順勢療法強(qiáng)化的實例，以引用的方式將其內(nèi)容整體并入本文并用于所述目的。同時，術(shù)語“活性強(qiáng)化形式”用在權(quán)利要求書中，術(shù)語“極低劑量”用在實施例中。術(shù)語“極低劑量”在通過研究和使用順勢療法稀釋和強(qiáng)化形式的物質(zhì)而產(chǎn)生的領(lǐng)域中成為行業(yè)術(shù)語。術(shù)語“極低劑量”意味著完全支持并與權(quán)利要求書中所使用的術(shù)語“活性強(qiáng)化”形式基本上同義。換句話說，當(dāng)存在三個因素時，抗體處于“活性強(qiáng)化”或“強(qiáng)化”形式。首先，“活性強(qiáng)化”形式的抗體為順勢療法領(lǐng)域廣泛接受的制備方法的產(chǎn)品。其次，“活性強(qiáng)化”形式的抗體必須具備通過現(xiàn)代藥物學(xué)廣泛接受的方法確定的生物活性。第三，“活性強(qiáng)化”形式的抗體所表現(xiàn)出的生物活性不能由順勢療法方法終產(chǎn)物中的分子形式抗體的存在加以解釋。例如，活性強(qiáng)化形式的抗體可通過使處于分子形式的初始獨(dú)立抗體經(jīng)受伴以外部作用(如機(jī)械振蕩)的連續(xù)多重稀釋而制備。濃度降低過程中的外部處理還可通過例如暴露至超聲、電磁或其它物理因素來完成。V.Schwabe, “Homeopathic medicines”, M., 1967,美國專利號7，229，648和4， 311，897 (以引用的方式將其內(nèi)容整體并入本文并用于所述目的)描述了順勢療法領(lǐng)域中廣泛接受的順勢療法強(qiáng)化方法。這ー過程使得初始分子形式抗體的分子濃度均勻降低。重復(fù)這ー過程直至獲得期望的順勢療法效力。對于單獨(dú)的抗體，可通過將中間稀釋液在期望的藥理學(xué)模型中進(jìn)行生物測試來確定所需的順勢療法效力。盡管不限于此，但是“順勢療法強(qiáng)化”可包括例如與外部處理、尤其是(機(jī)械)振蕩相結(jié)合的重復(fù)的連續(xù)稀釋。換句話說，根據(jù)順勢療法技術(shù)，對抗體的初始溶液(initial solution)進(jìn)行連續(xù)的重復(fù)稀釋并對每次獲得的溶液進(jìn)行多次豎直振蕩?？贵w處于溶劑(優(yōu)選水或水-こ醇混合物)中的初始溶液的優(yōu)選濃度范圍為約0.5mg/ml至約5.0mg/ml。制備各組分(即抗體溶液)的優(yōu)選過程為:使用抗體初級基質(zhì)溶液(原始酊劑)分別被稀釋10012、1003°和1002°°倍的3種水稀釋液或水-醇稀釋液的混合物，相當(dāng)于百倍順勢療法稀釋液C12、C30和C200 ；或者使用抗體初級基質(zhì)溶液(原始酊劑)分別被稀釋10012、1003°和1005°倍的3種水稀釋液或水-醇稀釋液的混合物，相當(dāng)于百倍順勢療法稀釋液C12、C30和C50。例如在美國專利號7，229，648和4，311，897中，也提供了如何獲得期望效カ的實例，以引用方式將其并入本文用于所述目的。在下文將更加詳細(xì)地描述適用于本文所述的“活性強(qiáng)化”形式抗體的過程。關(guān)于用順勢療法對人類受試者進(jìn)行治療已有許多爭議。雖然本發(fā)明依靠已接受的順勢療法方法來獲得“活性強(qiáng)化”形式的抗體，但是其并不僅僅依賴于在人類受試者中進(jìn)行順勢療法來證明其活性。本申請的發(fā)明人出乎預(yù)料地發(fā)現(xiàn)、并在已接受的藥理學(xué)模型中充分證明，由起始分子形式的抗體進(jìn)行連續(xù)多次稀釋而最終得到的溶液具有明確的活性，且與痕量分子形式抗體在目標(biāo)稀釋液中的存在無關(guān)。將本文所提供的“活性強(qiáng)化”形式的抗體在廣泛接受的藥理學(xué)活性模型中(在適當(dāng)?shù)捏w外實驗中或于合適的動物模型中在體內(nèi))測試其生物活性。下文進(jìn)ー步提供的實驗提供了在此類模型中的生物活性的證據(jù)。人類臨床研究也提供了如下證據(jù):在動物模型中觀察到的活性被很好地轉(zhuǎn)換至人類治療。人類研究還提供了如下證據(jù):本文所述的“活性強(qiáng)化”形式可用于對在醫(yī)學(xué)科學(xué)中作為病理癥狀而廣泛接受的具體人類疾病或紊亂進(jìn)行治療。同樣，所要求保護(hù)的“活性強(qiáng)化”形式的抗體僅涵蓋溶液或固體制劑，所述溶液或固體制劑的生物活性不能由初始、起始溶液(starting solution)中余留的分子形式抗體的存在進(jìn)行解釋。換句話說，雖然“活性強(qiáng)化”形式的抗體可包含痕量的初始分子形式抗體也在考慮之列，但是由于連續(xù)稀釋后余留的分子形式抗體的濃度極低，因此本領(lǐng)域技術(shù)人員不能以任何程度的合理性將在已接受的藥理學(xué)模型中觀察到的生物活性歸因于余留的分子形式抗體。雖然本發(fā)明并不受任何具體理論的限制，但是本發(fā)明的“活性強(qiáng)化”形式抗體的生物活性并不歸因于初始分子形式抗體。優(yōu)選所述“活性強(qiáng)化”形式抗體處于液體形式或固體形式，其中，初始分子形式抗體的濃度低于所接受的分析技術(shù)(如毛細(xì)管電泳和高效液相色譜)的檢測限。特別優(yōu)選“活性強(qiáng)化”形式的抗體處于液體形式或固體形式，其中，初始分子形式抗體的濃度低于阿伏伽德羅常數(shù)。在分子形式治療物質(zhì)的藥物學(xué)中，通常制作劑量-響應(yīng)曲線，在該曲線中，以藥理學(xué)響應(yīng)水平對給予受試者或在體外進(jìn)行測試的活性藥物的濃度作圖。產(chǎn)生任何可檢測響應(yīng)的藥物最低水平被稱為閾劑量(threshold dose)。特別在考慮之列并優(yōu)選的是，“活性強(qiáng)化”形式的抗體以低于所給定生物學(xué)模型中的分子形式抗體的閾劑量的濃度包含分子抗體(如果有的話)。ADHD評定量表-1V是指用于診斷ADHD并對因治療而得到的改善進(jìn)行測量的工具(DuPaul G.等，1998)。該量表包含18個項目，使用4分Likert型嚴(yán)重程度量表(0=無，1=輕度，2=中度，以及3=重度)對癥狀進(jìn)行評定。該量表基于用于ADHD的DSM-1V (精神紊亂的診斷和統(tǒng)計學(xué)參考)標(biāo)準(zhǔn)。該量表含有9項對缺乏注意力癥狀進(jìn)行評價的項目，以及9項過動和沖動癥狀進(jìn)行評價的項目。樣例評定問題包括“逃避需要持續(xù)的精神努力的任務(wù)(如學(xué)校作業(yè)和家庭作業(yè))”以及“講話過度”。ADHS評定量表已被開發(fā)并標(biāo)準(zhǔn)化作為用于兒童的評定量表。然而，可對臨床醫(yī)師-評定人員進(jìn)行訓(xùn)練以成功地將這ー量表用于成年人。根據(jù)DSM-1V，ADHD可分為3個亞型:缺乏注意力主導(dǎo)型、過動-沖動主導(dǎo)型、以及混合型；對于混合型，患者必須完全滿足其它兩種亞型的標(biāo)準(zhǔn)。缺乏注意力的癥狀包括無法密切注意細(xì)節(jié)、難以保持注意力、對其講話時不聽、無法始終堅持指示或完成任務(wù)、缺乏組織能力、不愿參加需要持續(xù)精神努力的活動、經(jīng)常遺失物品、容易分心以及經(jīng)常健忘。患者必須具有這9項癥狀中的至少6項，才會被認(rèn)為具有缺乏注意力亞型。ADHD評定量表可通過GuiIford出版社得到。 術(shù)語“CG1-ADHD-嚴(yán)重程度問卷”是指在對患有精神紊亂的患者進(jìn)行的治療研究中常用于測量癥狀嚴(yán)重程度、治療應(yīng)答以及治療效カ的臨床總體印象評定量表(ClinicalGlobal Impression rating scales) (Guy,W., 1976)。臨床總體印象嚴(yán)重程度量表為 7 分制量表，要求臨床醫(yī)師在進(jìn)行評價時，根據(jù)其過去對具有相同診斷患者的經(jīng)驗對患者疾病的嚴(yán)重程度進(jìn)行評定?？紤]到總的臨床經(jīng)驗，在進(jìn)行評定時，將患者精神疾病的嚴(yán)重程度評價為:1=正常，完全無??；2，心理疾病的臨界線；3，輕度患??；4，中度患?。?，明顯患病；6，重度患?。换?，極重度患病。在ー個方面，本發(fā)明提供了對注意力不足過動癥進(jìn)行治療的方法，所述方法包括向有需要的受試者給予復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含a)活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體和b)活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體。如上文所述，所述復(fù)合物的各單獨(dú)組分由于其各自的醫(yī)學(xué)用途而為大家所熟知。然而，本申請的發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，給予所述復(fù)合物明顯可用來對注意力不足過動癥進(jìn)行治療。優(yōu)選地，為了治療目的，將所述復(fù)合藥物組合物每日給予1-4次，毎次給予包含1-2單位劑型的復(fù)合物。用于治療注意力不足過動癥的目的的本申請藥物組合物包含主要以1:1的體積比計的活性組分。出于對注意力不足過動癥進(jìn)行治療的目的，所述藥物組合物的組分可単獨(dú)給予。然而，優(yōu)選同時給予I種溶液和/或固體劑型(片劑)形式的復(fù)合組分，所述劑型形式包含活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性s-100蛋白抗體，以及相應(yīng)的活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。此外，在對注意力不足過動癥進(jìn)行治療期間，単獨(dú)應(yīng)用與同時應(yīng)用(攝入至生物體內(nèi))所聲明的藥物組合物都是可能的，所述藥物組合物處于兩種單獨(dú)制備的藥物的形式，所述兩種単獨(dú)制備的藥物均處于溶液和固體劑型(片劑)形式、各自包含活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體或活性強(qiáng)化形式的抗S-100蛋白抗體。所述醫(yī)藥產(chǎn)品主要按如下所述進(jìn)行制備。根據(jù)本發(fā)明的復(fù)合藥物組合物可處于液態(tài)或固態(tài)形式。藥物組合物中所含的各活性強(qiáng)化形式抗體由初始分子形式的抗體通過順勢療法領(lǐng)域所接受的方法制備。起始抗體可為根據(jù)已知方法制備的單克隆抗體或多克隆抗體，所述已知方法例如Immunotechniques,G.Frimel, M., “Meditsyna”，1987,第 9-33 頁；“Hum.Antibodies.Monoclonal andrecombinant antibodies, 30years after，', Laffly E., Sodoyer R.著，2005, Vol.14.,Nl-2.，第33-55頁中所述，以引用的方式將其內(nèi)容并入本文。單克隆抗體可通過如雜交瘤技術(shù)獲得。所述方法的初始步驟包括基于已在多克隆抗血清制備過程中開發(fā)出的原則進(jìn)行免疫`。工作的進(jìn)ー步步驟包括制備出產(chǎn)生具有相同特異性的抗體克隆的雜交細(xì)胞。其各自的分離使用與多克隆抗血清制備情況中相同的方法進(jìn)行。多克隆抗體可通過動物的主動免疫獲得。為了這一目的，例如使合適的動物(如兔)接受適當(dāng)抗原(腦特異性s-100蛋白和內(nèi)皮NO合酶)的一系列注射。動物的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，以已知方法從動物中進(jìn)行收集。這ー過程使得能夠制備富含單特異性抗體的血清。如果需要的話，包含抗體的血清例如可通過使用親和色譜、鹽沉淀分級分離或離子交換色譜進(jìn)行純化。可將所得到的經(jīng)純化的、富含抗體的血清用作制備活性強(qiáng)化形式抗體的起始材料。所得到的處于溶劑(優(yōu)選水或水-こ醇混合物)中的初始抗體溶液的優(yōu)選濃度范圍為約0.5mg/ml至約5.0mg/ml。制備各組分的優(yōu)選過程為:使用抗體初級基質(zhì)溶液分別被稀釋10012、1003°和IOO200倍的3種水-醇稀釋液的混合物，相當(dāng)于百倍順勢療法稀釋液C12、C30和C200。為制備固體劑型，將固態(tài)載體通過順勢療法方法所獲得的期望稀釋液進(jìn)行處理。為獲得本發(fā)明復(fù)合物的固體單位劑型，用各稀釋液對載體物質(zhì)進(jìn)行浸潰。為制備期望的復(fù)合劑型，兩種浸潰順序都是適合的。在優(yōu)選的實施方式中，用于制備包含本發(fā)明所述復(fù)合物的活性強(qiáng)化形式的起始材料是抗腦特異性s-100蛋白多克隆抗體和抗內(nèi)皮NO合酶多克隆抗體，將濃度為0.5mg/ml至5.0mg/ml的初始(基質(zhì))溶液用于進(jìn)行后續(xù)的活性強(qiáng)化形式的制備。為制備所述藥物組合物，優(yōu)選使用抗腦特異性S-1OO蛋白多克隆抗體和抗內(nèi)皮NO合酶多克隆抗體。將佐劑和具有以下序列的牛內(nèi)皮NO合酶的整個分子用作免疫原(抗原)來對兔進(jìn)行免疫而獲得抗內(nèi)皮NO合酶多克隆抗體:
權(quán)利要求
1.一種對注意力不足過動癥進(jìn)行治療的方法，所述方法包括向有需要的患者給予復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含a)活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-1OO蛋白抗體、以及b)活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體針對的是整個牛腦特異性S-100蛋白。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體針對的是具有序列 SEQ ID NO:9, SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11 或 SEQ ID NO: 12 的腦特異性S-100蛋白。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體針對的是整個牛NO合酶。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體針對的是整個人NO合酶。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性s-100蛋白抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體，并且b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體為多克隆抗體。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體通過連續(xù)的百倍稀釋、且每次稀釋時均伴以振蕩而制備。
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述復(fù)合藥物組合物以1-2單位劑型進(jìn)行給予，各劑型每日給予1-4次。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中，所述復(fù)合藥物組合物以1-2單位劑型進(jìn)行給予，各劑型每日給予2次。
15.一種減輕注意力不足過動癥的癥狀的方法，所述癥狀的減輕通過ADHDRS-1V家庭版測試進(jìn)行測量，通過給予權(quán)利要求1所述的復(fù)合藥物組合物來減輕所述癥狀。
16.一種減輕注意力不足過動癥的癥狀的方法，所述癥狀的減輕通過CG1-ADHD嚴(yán)重程度測試進(jìn)行測量，通過給予權(quán)利要求1所述的復(fù)合藥物組合物來減輕所述癥狀。
17.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述患者為年齡低于12歲的兒童。
18.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述患者為成人。
19.一種對注意力不足癥進(jìn)行治療的方法，所述方法包括向有需要的患者給予復(fù)合藥物組合物，所述復(fù)合藥物組合物包含a)活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-1OO蛋白抗體、以及b)活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體針對的是整個牛腦特異性S-100蛋白。
21.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體針對的是具有序列 SEQ ID NO:9, SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11 或 SEQ ID NO: 12 的腦特異性S-100蛋白。
22.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體針對的是整個牛NO合酶。
23.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體針對的是整個人NO合酶。
24.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式。
25.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式。
26.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C50順勢療法稀釋液的混合物形式。
27.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體處于浸潰至固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式，并且所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體處于浸潰至所述固態(tài)載體上的C12、C30及C200順勢療法稀釋液的混合物形式。
28.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體，并且b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體為單克隆抗體、多克隆抗體或天然抗體。
29.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體為多克隆抗體。
30.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，a)所述活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及b)所述活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體通過連續(xù)的百倍稀釋、且每次稀釋時均伴以振蕩而制備。
31.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，所述復(fù)合藥物組合物以1-2單位劑型進(jìn)行給予，各劑型每日給予1-4次。
32.如權(quán)利要求31所述的方法，其中，所述復(fù)合藥物組合物以1-2單位劑型進(jìn)行給予，各劑型每日給予2次。
33.一種用于對患有注意力不足過動癥的患者進(jìn)行治療的藥物組合物，所述組合物通過如下步驟獲得:提供a)活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及b)活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體，各抗體根據(jù)順勢療法技術(shù)通過對每次獲得的溶液進(jìn)行連續(xù)的重復(fù)稀釋和多次振蕩而制備；然后通過混合將強(qiáng)化后的溶液進(jìn)行復(fù)合，或者用所述復(fù)合后的溶液或用各強(qiáng)化后的溶液分別浸潰載體物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過給予活性強(qiáng)化形式的抗腦特異性S-100蛋白抗體以及活性強(qiáng)化形式的抗內(nèi)皮NO合酶抗體，對注意力不足過動癥(ADHD)以及注意力不足癥(ADD)進(jìn)行治療的方法。
文檔編號C07K16/40GK103119061SQ201180045523
公開日2013年5月22日 申請日期2011年7月15日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月21日
發(fā)明者奧列格·伊里奇·愛潑斯坦 申請人:奧列格·伊里奇·愛潑斯坦