專利名稱：一種甜菊醇衍生物及制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤活性的化合物一甜菊醇衍生物和該類化合物的制備方法，及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是危害人們生命健康的重大疾病，據(jù)報道，全世界有4000多萬人患惡性腫瘤，其中每年新增患者900多萬、死亡700多萬，我國年均癌癥發(fā)病人數(shù)約180萬 200 萬，死亡人數(shù)約140萬 150萬。目前惡性腫瘤發(fā)生與死亡還有日趨嚴(yán)重的趨勢，有些地區(qū)已經(jīng)成為人口死亡的首要原因。因此，開發(fā)新穎的抗腫瘤藥物具有重要的意義。甜菊醇衍生物是一種含對映-貝殼杉烯型骨架結(jié)構(gòu)的二萜化合物。許多天然二萜類化合物，如冬凌草甲素、冬凌草乙素均含有對映-貝殼杉烯型骨架結(jié)構(gòu)，且具有良好的生物活性，已發(fā)展為一類重要的藥物。細(xì)胞毒活性篩選結(jié)果證明對映-貝殼杉烯型二萜化合物都具有一定的抗腫瘤活性，化合物結(jié)構(gòu)中的α，不飽和酮結(jié)構(gòu)片斷是其活性中心，α-亞甲基環(huán)戊酮結(jié)構(gòu)的存在，大大增強了該類化合物的抗腫瘤活性，其作用機制可能是通過一個類似于邁克爾加成的反應(yīng)，使活性中心與腫瘤細(xì)胞中的巰基酶相結(jié)合而發(fā)生作用。甜菊醇是甜菊糖的苷元，具有抗高血壓、降低血糖、抑制癌細(xì)胞等生理活性，甜菊醇分子為具有貝殼杉骨架的四環(huán)二萜類化合物，通過對甜菊醇分子的結(jié)構(gòu)改造，向分子中引入 α -亞甲基環(huán)戊酮活性基團，可增強其抗菌、抗腫瘤活性，獲得新的抗腫瘤化合物。因此對甜菊醇進行結(jié)構(gòu)修飾，制備具有抗腫瘤活性的二萜化合物新藥，具有非常重大的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一類新的具有抗腫瘤活性的化合物-甜菊醇衍生物和該類化合物的制備方法，及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種結(jié)構(gòu)如式⑴所示的甜菊醇衍生物
權(quán)利要求
1.-種結(jié)構(gòu)如式(I)所示的甜菊醇衍生物
2.如權(quán)利要1所述的甜菊醇衍生物，其特征在于，所述的甜菊醇衍生物為下列之-
3. 一種制備如權(quán)利要求1所述的甜菊醇衍生物的方法，其特征在于所述的方法為，所述的化合物(VIII)與如式(VII)所示的溴代烷烴溶解在有機溶劑中，加入催化劑碘化鉀， 另加入縛酸劑，在20 50°C溫度下連續(xù)反應(yīng)8 12小時，反應(yīng)液后處理得到式(I)所示的甜菊醇衍生物，所述縛酸劑為無水碳酸鉀或KOH;式(VIII)中禮與式(I)中禮相同，式 (VII)中&與式(I)中&相同，式(I)中R1SH或乙酰基，當(dāng)R1SH時，&為異丙基、仲丁基、2-溴乙基、2-溴丙基、3-溴丙基或4-溴丁基；當(dāng)R1為乙?；鶗r，&為乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、芐基、2-溴乙基、2-溴丙基、3-溴丙基或4-溴丁基；
4.如權(quán)利要求3所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的后處理為，反應(yīng)液加水稀釋，過濾，濾液再用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌，再用無水硫酸鎂干燥、過濾，取濾液濃縮至干，再用丙酮溶解，以體積比5 12 1的石油醚、丙酮混合液為洗脫劑進行硅膠柱層析，收集洗脫液，濃縮，再用丙酮重結(jié)晶，制得式(I)所示的甜菊醇衍生物。
5.如權(quán)利要求3所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的有機溶劑為二甲基甲酰胺或二甲基亞砜，所述的有機溶劑的體積用量以式(VIII)所述化合物物質(zhì)的量計為 10 13. 3ml/mmol0
6.如權(quán)利要求3所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的方法中，式 (VIII)所示的化合物與如式(VII)所示的溴代烷烴物質(zhì)的量比為1 2 3，式(VIII)所示的化合物與催化劑物質(zhì)的量比為1 0. 1 0. 14 ；所述式(VIII)所示的化合物和縛酸劑投料物質(zhì)的量之比為1 3 6。
7.如權(quán)利要求3所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的方法為所述的化合物(VIII)與如式(VII)所示的溴代烷烴溶解在二甲基甲酰胺中，加入催化劑碘化鉀，另加入縛酸劑，在20 50°C溫度下連續(xù)反應(yīng)8 12小時，反應(yīng)液加水稀釋，過濾，濾液再用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌，再用無水硫酸鎂干燥、過濾，取濾液濃縮至干，再用丙酮溶解，以體積比5 12 1的石油醚丙酮混合液為洗脫劑進行硅膠柱層析，收集洗脫液，濃縮，再用丙酮重結(jié)晶，得到式(I)所示的甜菊醇衍生物，所述縛酸劑為無水碳酸鉀或Κ0Η;所述的二甲基甲酰胺的體積用量以式(VIII)所述化合物物質(zhì)的量計為13. aiil/mmol，所述式(VIII)所示的化合物與如式(VII)所示的溴代烷烴物質(zhì)的量比為1 2 3，所述式(VIII)所示的化合物和碘化鉀、縛酸劑投料物質(zhì)的量之比為 1 0. 12 3 6。
8.如權(quán)利要求3所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的方法按如下步驟進行(1)在水中，將甜菊糖用高碘酸鈉在室溫下進行氧化反應(yīng)16小時；然后加入氫氧化鉀加熱回流反應(yīng)3小時，冷卻后以冰醋酸調(diào)節(jié)pH至5. 0，乙醚萃取，乙醚層用無水硫酸鎂干燥，過濾，濾液濃縮至干，得甜菊醇，所述的甜菊糖、高碘酸鈉、氫氧化鉀投料物質(zhì)的量比為 1 5 6 100 120，所述的水的體積用量以甜菊糖的質(zhì)量計為40 45ml/g;(2)將甜菊醇溶于1，4-二氧六環(huán)和水以體積比為1 1的混合溶劑，加入1，4_叔丁基過氧化氫的甲苯溶液，再加入二氧化硒，于60°C反應(yīng)5小時，加入水稀釋，以氯仿萃取，合并有機相并用無水硫酸鎂干燥、過濾，濾液濃縮至干，得15-羥基甜菊醇，所述的甜菊醇、1， 4-叔丁基過氧化氫、二氧化硒物質(zhì)的量比為1 2.5 0.32，所述的混合溶劑體積用量以甜菊醇質(zhì)量計為200ml/g，所述的甲苯體積用量以甜菊醇質(zhì)量計為2ml/g ；(3)將15-羥基甜菊醇溶于吡啶a，加入三氧化鉻的體積比為8 1的吡啶b、水混合溶劑，在室溫下連續(xù)攪拌12小時后，加入水稀釋，乙醚萃取，合并有機相用無水硫酸鎂干燥、 過濾，濾液濃縮至干，濃縮物用丙酮重結(jié)晶得ent-13-羥基-15-羰基貝殼杉烯_19_酸，所述的15-羥基甜菊醇與三氧化鉻物質(zhì)的量比為1 3，所述的吡啶a體積用量以15-羥基甜菊醇質(zhì)量計為70ml/g，所述的吡啶b、水混合溶劑的體積用量以15-羥基甜菊醇質(zhì)量計為 63ml/g ；(4)將ent-13-羥基-15-羰基貝殼杉烯-19-酸溶于吡啶C、和乙酸酐中，室溫下攪拌反應(yīng)四天，減壓蒸去乙酸酐和吡啶c，得棕褐色油狀物，硅膠柱色譜純化，以體積比為1 1 的石油醚-丙酮洗脫，收集洗脫液得ent-13-乙酰氧基-15-羰基貝殼杉烯_19_酸，所述的 ent-13-羥基-15-羰基貝殼杉烯-19-酸與乙酸酐物質(zhì)的量比1 40，所述的吡啶c的體積用量以ent-13-羥基-15-羰基貝殼杉烯_19_酸計為27ml/g ；(5)將ent-13-羥基-15-羰基貝殼杉烯-19-酸(V)或ent-13-乙酰氧基_15_羰基貝殼杉烯-19-酸(VI)溶于二甲基甲酰胺中，加入催化劑碘化鉀、溴代烷烴和縛酸劑，在40 45°C溫度下連續(xù)反應(yīng)8 12小時，反應(yīng)液加水稀釋，過濾，濾液用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌，再用無水硫酸鎂干燥、過濾，取濾液濃縮至干，再用丙酮溶解，以體積比5 1的石油醚丙酮混合液為洗脫劑進行硅膠柱層析，收集洗脫液，濃縮，再用丙酮重結(jié)晶，得式(I)所示化合物；所述二甲基甲酰胺的體積用量以化合物(V)或化合物(VI)摩爾質(zhì)量計為13. 3ml/mmol ；所述式(V)或(VI)所示的化合物和碘化鉀投料物質(zhì)的量之比為 1 0.12，所述縛酸劑為無水碳酸鉀時，所述的化合物(V)或化合物(VI)、碳酸鉀、溴代烷烴的物質(zhì)的量比為1:4: 2，所述縛酸劑為氫氧化鉀時，所述的化合物(V)或化合物(VI)、 氫氧化鉀、溴代烷烴的量比為1:4:3;
9.一種如權(quán)利要求1所述的甜菊醇衍生物的制備方法，其特征在于所述的方法為所述的化合物(VIII)與如式(VII)所示的溴代烷烴溶解在二甲基亞砜中，加入縛酸劑，在 20 50°C溫度下連續(xù)反應(yīng)8 12小時，反應(yīng)液加水稀釋，過濾，濾液再用乙酸乙酯萃取， 取乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌，再用無水硫酸鎂干燥、過濾，取濾液濃縮至干，再用丙酮溶解，以體積比5 12 1的石油醚丙酮混合液為洗脫劑進行硅膠柱層析，收集洗脫液， 濃縮，再用丙酮重結(jié)晶，得到式(I)所示的甜菊醇衍生物，所述縛酸劑為無水碳酸鉀或KOH; 所述的二甲基亞砜的體積用量以式(VIII)所述化合物物質(zhì)的量計為lOml/mmol，所述式 (VIII)所示的化合物與如式(VII)所示的溴代烷烴物質(zhì)的量比為1 2 3，所述式(VIII) 所示的化合物和縛酸劑投料物質(zhì)的量之比為1 3 6。
10.如權(quán)利要求1所述的甜菊醇衍生物在制備制療抗H印G2細(xì)胞株導(dǎo)致的肝癌、HeLa 細(xì)胞株導(dǎo)致的子宮頸癌、k562細(xì)胞株導(dǎo)致的慢性粒細(xì)胞白血病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種如式(I)所示的甜菊醇衍生物及其制備與應(yīng)用，所述制備方法為所述的化合物(VIII)與如式(VII)所示的溴代烷烴反應(yīng)，在有機溶劑中，加入催化劑碘化鉀，另加入縛酸劑，在20～50℃溫度下連續(xù)反應(yīng)8～12小時，反應(yīng)液后處理得到式(I)所示的甜菊醇衍生物；本發(fā)明甜菊醇衍生物提供了一種新的、有明顯抗腫瘤活性的抗腫瘤藥物，為新藥篩選提供研究基礎(chǔ)，具有重大應(yīng)用前景；本發(fā)明甜菊醇衍生物制備流程簡單，利于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P35/02GK102557942SQ20111046026
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者石浩, 胡艷秋 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)