專(zhuān)利名稱(chēng)：咖啡廢渣提取物在藥物制備中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從咖啡廢渣中提取分離一種含三萜類(lèi)成分的提取物及其在制備藥物方面的應(yīng)用，屬藥學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
速溶咖啡廠在生產(chǎn)速溶咖啡的同時(shí)，產(chǎn)生了大量的咖啡廢渣，這些廢渣大多按垃圾處理。據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計(jì)，全球每年有大約70億千克的咖啡產(chǎn)出，這些咖啡經(jīng)食用或提取過(guò)后，產(chǎn)生的咖啡廢渣量極其可觀。隨著環(huán)保和低碳逐漸成為世界主流觀念，咖啡渣的廢物利用研究獲得了較大的進(jìn)展，如日本和美國(guó)的科學(xué)家利用咖啡廢渣提煉生物柴油；另有文獻(xiàn)報(bào)道咖啡渣提取物具有抗氧化作用及可從咖啡廢渣中提取糖類(lèi)物質(zhì)，然而從咖啡廢渣中制備提取物用于抗炎，目前尚未見(jiàn)報(bào)道。研究表明，許多三萜類(lèi)化合物具有明顯的抗炎作用，而咖啡廢渣中就含有大量三萜類(lèi)物質(zhì)。 本發(fā)明的目的就是要提供一種咖啡廢渣提取物，其含有三萜類(lèi)物質(zhì)，具有顯著的抗炎作用，可用于藥物制備方面的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所述的咖啡廢渣提取物，經(jīng)過(guò)試驗(yàn)篩選出最佳提取方法，經(jīng)薄層色譜顯示其三萜類(lèi)成分含量較高。在獲得該提取物后，經(jīng)海南醫(yī)學(xué)院海南省熱帶藥用植物研究與開(kāi)發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室對(duì)其進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)與抗炎藥效學(xué)試驗(yàn)。一、咖啡廢渣提取物的制備咖啡廢渣提取物用以下方法制備而成取一定質(zhì)量的咖啡廢渣，加入一定量的乙醇回流提取，收集提取液并濃縮成浸膏狀，得到咖啡渣提取物。該咖啡廢渣提取物經(jīng)顯色反應(yīng)檢識(shí)和薄層鑒別顯示含有三萜類(lèi)成分。顯色反應(yīng)取提取物少量于試管內(nèi)，用醋酐溶解，進(jìn)行醋酐-濃硫酸顯色反應(yīng)，結(jié)果溶液最終呈紅色。薄層色譜鑒別展開(kāi)劑石油醚-丙酮(4 1)，結(jié)果可見(jiàn)光下無(wú)斑點(diǎn)，噴10%硫酸乙醇溶液顯色，可見(jiàn)光下觀察到有四個(gè)斑點(diǎn)出現(xiàn)。薄層色譜鑒別結(jié)果表明提取物中含有三萜類(lèi)成分。本發(fā)明咖啡廢渣提取物的制備方法最好是取一定質(zhì)量的咖啡廢渣，加入I 20倍量的乙醇回流提取I 3次，收集合并提取液并濃縮成浸膏狀，得到咖啡渣提取物。制備咖啡廢渣提取物方法中乙醇濃度優(yōu)選50 % 95%，最好是用95 %的乙醇；乙醇用量?jī)?yōu)選5 10倍量，最好為8倍量；提取時(shí)間最好為3小時(shí)；提取次數(shù)最好為2次。二、急性毒性試驗(yàn)1.試驗(yàn)材料SPF級(jí)昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 22g ;小鼠灌胃器；吐溫-802.試驗(yàn)方法與結(jié)果
取咖啡廢渣提取物，以吐溫-80為助溶劑，加水配成最大濃度混懸液(O. 43g -πιΓ1)。預(yù)試驗(yàn)取昆明種小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組4只，禁食不禁水12h后，在一天內(nèi)分別按8. 60g ·1^、12. 70g*kg-\l7. 20g · kg—1灌胃給予咖啡廢渣提取物(每次灌胃體積O. 2ml/10g, I天內(nèi)最多給藥2次)，給藥后觀察小鼠生存狀態(tài)，連續(xù)觀察7天。結(jié)果見(jiàn)表I。預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)法找出其100%致死劑量，正式試驗(yàn)欲找出其最大耐受量。正式試驗(yàn)取昆明種小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組20只，禁食不禁水12h后，給藥組分別灌胃給予咖啡廢渣提取物8. 60g kg'lO. 75g kg—1，對(duì)照組灌胃給予1%吐溫-80水溶液。觀察自主活動(dòng)變化，連續(xù)觀察14天。結(jié)果見(jiàn)下表2.表I急性毒性預(yù)試驗(yàn)結(jié)果 組別劑量/gkg4 動(dòng)物數(shù)死亡動(dòng)物數(shù)給藥前體重/g 給藥7天后存活鼠體重/g
一8.604O18.93±0.8925.46±0.82
二12.704I19.24±1. 3123.08±0.24
三_17. 20_4_3_18. 77±0. 57_22. 18±0. PO_表2急性毒性正式試驗(yàn)結(jié)果
組另I]_劑量/g.kg·1動(dòng)物數(shù)死亡動(dòng)物數(shù)給藥前體重/g 給藥14天后存活鼠體重/g
給藥一組 8.6020 O 18.73±1.3927.76±3. 12
給藥二組 10.7520 2 19. 16±1.4426.99±2.74
對(duì)照組等體積吐溫-80水溶液 20_O_19. 01 土1. 97_29. 19±3. 46小鼠給藥后自主活動(dòng)減少，偶有狂躁不安，給藥2天后，所有小鼠自主活動(dòng)恢復(fù)正
堂
巾O以上試驗(yàn)結(jié)果表明，咖啡廢渣提取物毒性較低，其小鼠的最大耐受量為8. 60g · kg-1。三、抗炎藥效學(xué)試驗(yàn)1.抑制二甲苯致小鼠耳腫脹試驗(yàn)。取咖啡廢渣提取物，以吐溫-80為助溶劑，加水配成不同濃度混懸液，取18 22g昆明種白鼠50只，雌雄各半，每組10只，隨機(jī)分為咖啡廢渣提取物高、中、低劑量組、阿司匹林組、空白組共5組。每組分別灌胃給予相應(yīng)藥物，每天一次，連續(xù)給藥7天。第7天給藥Ih后，將二甲苯20 μ L均勻涂于小白鼠左耳兩面，右耳作為對(duì)照，至炎30min后，處死小鼠，沿耳廓線(xiàn)剪下兩耳，用直徑為8_打孔器取左右耳片，隨即用電子天平稱(chēng)重，以?xún)啥亓恐顬槟[脹度。采用t檢驗(yàn)法比較各給藥組與對(duì)照組空白組差異。結(jié)果見(jiàn)表3.腫脹率=(左耳質(zhì)量-右耳質(zhì)量)/右耳質(zhì)量X 100%。2.抑制醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加試驗(yàn)取18 22g昆明種小鼠50只，雌雄各半，每組10只，隨機(jī)分為咖啡廢渣提取物高、中、低劑量組、阿司匹林組、空白組共5組。每組分別灌胃給予相應(yīng)藥物，每天一次，連續(xù)給藥7天。第7天給藥Ih后，每只小鼠尾靜脈注射O. 5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液O. lml/10g(體重)，隨即腹腔注射O. 6 %冰醋酸O. 2ml/只，15min后斷頭處死小鼠，剪開(kāi)小鼠腹部，用6ml生理鹽水洗滌腹腔，用吸管吸取腹腔洗出液約5ml，3000r ^mirT1離心lOmin，取上清液上紫外分光光度計(jì)測(cè)定590nm處吸光度值(Abs)。采用t檢驗(yàn)法比較各給藥組與對(duì)照組空白組差異。結(jié)果見(jiàn)表4.表3咖啡廢渣提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的作用
權(quán)利要求
1.一種咖啡廢渣提取物，其特征在于含有三萜類(lèi)成分，經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有抗炎作用。
2.如權(quán)利要求1中所述的提取物，其制備方法為取一定質(zhì)量的咖啡廢渣，加入I 20倍量的乙醇回流提取I 3次，收集合并提取液并濃縮成浸膏狀。
3.如權(quán)利要求2中所述的提取物，其制備方法中乙醇濃度為50% 95%，乙醇量為5 10倍量。
4.如權(quán)利要求2中所述的提取物，其制備方法中乙醇濃度為95%，乙醇量為8倍量，提取時(shí)間為2小時(shí),提取次數(shù)為2次。
5.將權(quán)利要求1所述的咖啡廢渣提取物，配伍其他藥物并添加相關(guān)輔料，制成臨床上可接受的各種劑型的藥物。
6.如權(quán)利要求5所述的含有咖啡廢渣提取物的藥物，其劑型為片劑、顆粒劑、膠囊劑。
全文摘要
咖啡廢渣提取物在藥物制備中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及從咖啡廢渣中得到的一種提取物及其在藥物制備中的應(yīng)用，屬于藥學(xué)領(lǐng)域。薄層鑒別顯示該提取物主要含三萜類(lèi)物質(zhì)，該提取物對(duì)醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加具有抑制作用，能減少二甲苯誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹率，顯示其具有一定的抗炎作用。本發(fā)明廢物利用，將咖啡廢渣提取物應(yīng)用于藥物制備。
文檔編號(hào)A61K36/74GK102988533SQ20111028319
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2011年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月14日
發(fā)明者張俊清, 廖小平, 譚銀豐, 蘇文琴 申請(qǐng)人:海南醫(yī)學(xué)院