專利名稱：一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠。
背景技術(shù)：
黃芩(RadixScutellariae)是唇形科植物黃芩 Scutellaria baicalensis Georgi (Lamiaceae)的干燥根，在我國分布極廣，黑龍江、吉林、遼寧、河南、河北、山東、四川、云南、山西、陜西、甘肅和內(nèi)蒙古等省均為產(chǎn)地。功能與主治清熱燥濕，瀉火解毒，止血， 安胎。用于濕熱、暑熱胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動不安。黃芩具有抗炎抗變態(tài)反應(yīng)、抗微生物作用、解熱作用、降壓、利尿作用， 對血脂及血糖的作用，利膽、解痙作用，鎮(zhèn)靜作用等。目前黃芩提取物的制備方法較多，如專利申請?zhí)?00610014770. 7，發(fā)明名稱雙黃連滴丸及其制備方法，該方法公開了黃芩提取物的制備方法。也有提取高純度的黃芩中活性成分黃芩苷的文獻(xiàn)報(bào)道。目前還有黃芩苷磷脂復(fù)合物的報(bào)道，如黃芩苷磷脂復(fù)合物經(jīng)鼻給藥腦內(nèi)遞藥特性的研究，成都中醫(yī)藥大學(xué)，2009-04-01。黃芩中成分復(fù)雜，黃芩苷僅是其中的活性成分之一，當(dāng)黃芩苷的含量較低時，由于其中多種成分包括雜質(zhì)存在，制備成制劑(如磷脂復(fù)合物)較困難；而采用黃芩苷純品制劑，它是理化性質(zhì)明確的化合物，制劑容易，但黃芩中成分黃芩苷的含量為不得少于 9.0%《中國藥典》2010年版，提取分離黃芩苷純品成本高，不便于大生產(chǎn)用藥，不能滿足制劑的需求。原位凝膠(in situ gel)或稱在體凝膠、環(huán)境敏感凝膠，是隨著藥用高分子材料學(xué)的發(fā)展而產(chǎn)生的新穎劑型，是指以溶液狀態(tài)給藥后立即在用藥部位發(fā)生膠凝，從而形成非化學(xué)交聯(lián)的半固體制劑。原位凝膠具有凝膠制劑高度親水性的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)及良好的組織相容性，同時，獨(dú)特的溶液一凝膠轉(zhuǎn)變性質(zhì)使其兼有制備簡單、使用方便、與用藥部位尤其是豁膜組織親和力強(qiáng)、滯留時間長等優(yōu)點(diǎn)。近年來，原位凝膠給藥系統(tǒng)已經(jīng)引起了各國學(xué)者的廣泛關(guān)注，成為藥劑學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。溫敏型原位凝膠，貯藏條件和用藥部位的溫度差異可以使某些高分子溶液發(fā)生溶液凝膠的轉(zhuǎn)變，形成凝膠。這些聚合物在結(jié)構(gòu)上均包含一定比例的疏水和親水嵌段，其熱敏型的膠凝行為與不同性質(zhì)的嵌段間、以及嵌段與溶劑間的相互作用有關(guān)。利用對熱敏感的聚合物，可以研制成黏膜給藥的制劑，如口腔，鼻腔， 陰道，直腸等部位的給藥。亞微乳是一種乳滴粒徑在100 IOOOm之間的乳劑，早在1961年，瑞典人已經(jīng)用大豆油和蛋黃磷脂制成脂肪乳劑，但早期的亞微乳中不加入藥物，僅作為脂肪乳劑用于高能量的胃腸外營養(yǎng)，為人體提供能量。近年來，亞微乳作為一種載藥體系日益受到重視，人們將藥物溶解于油相中制成亞微乳，不僅將其用于靜脈給藥，而且將這種載藥體系用于眼部給藥，或其它局部用藥。乳劑一般分為0/W型和W/0型乳劑，由于黃芩提取物磷脂復(fù)合物具有較強(qiáng)的親脂性，其在油中的溶解度遠(yuǎn)大于水中(是其在水中溶解度的40多倍)，因此擬選擇制成0/W型乳劑。同時黃芩苷制備成磷脂復(fù)合物以后，其在水及油中的溶解性能比黃芩苷及物理混合物均有明顯的改善，因而認(rèn)為其既改善了黃芩苷的親水性，又改善了親脂性，且親脂性改善程度更大。制成0/W型亞微乳后藥物呈現(xiàn)微小乳滴分散在水中，改善了其分散性能，而外相的水與鼻粘液也具有較強(qiáng)的親和性，從而使亞微乳產(chǎn)生極好的吸收效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠。本發(fā)明還提供了該黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠的制備方法和用途。本發(fā)明提供了一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠，它由黃芩提取物磷脂復(fù)合物制備而成。其中，所述的黃芩提取物中含有黃芩苷的重量百分含量為85%以上。其中，所述的黃芩提取物的制備包括如下步驟取黃芩藥材，加水煎煮提取，濾液濃縮成清膏，加鹽酸調(diào)節(jié)PH值至1. 0 2. 0，70-80°C保溫lh，靜置，濾過，沉淀物加水?dāng)噭颍?用40%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7. 0，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1. 0 2. 0，60-70°C保溫0. 5-1小時，靜置，濾過，沉淀用水洗或乙醇洗至pH值至7. 0，減壓干燥，即得黃芩提取物。其中，所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物它是由下述重量配比的黃芩提取物與大豆卵磷脂為原料制備而成黃芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物它是由下述重量配比的黃芩提取物與大豆卵磷脂為原料制備而成黃芩提取物1份、大豆卵磷脂2份。其中，所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備方法，包括如下步驟a、取下述重量配比的原料黃芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份；b、加入脫水無水乙醇，黃芩提取物藥物濃度為2. 5-7. 5g/ml，在20_70°C恒溫水浴中60-240轉(zhuǎn)/min磁力攪拌1_4小時，減壓回收溶劑，真空干燥，即得黃芩提取物磷脂復(fù)合物。進(jìn)一步地，它包括如下步驟a、取下述重量配比的原料黃芩提取物1份、大豆卵磷脂1-3份；b、加入脫水無水乙醇，黃芩提取物藥物濃度為5. Omg/ml，在55°C恒溫水浴中120 轉(zhuǎn)/min磁力攪拌2小時，減壓回收溶劑，真空干燥，即得黃芩提取物磷脂復(fù)合物。本發(fā)明鼻用溫敏型原位凝膠，是由下述重量配比的原料藥制備而成泊洛沙姆407 16% %、泊洛沙姆 188 0% -12%, PEG6000 0% _2%、甘露醇 5%、苯扎氯胺0. 02%、三乙醇胺0. 1%。本發(fā)明還提供了所述的鼻用溫敏型原位凝膠在制備治療腦缺血的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了所述的鼻用溫敏型原位凝膠在制備用于鼻腔給藥的治療腦缺血的藥物中的用途。本發(fā)明提供了一種黃芩提取物亞微乳，它是由下述百分含量的原料藥及輔料制備而成黃芩提取物磷脂復(fù)合物1 10g，卵磷脂0. 6%，輔助乳化劑F-68為0. 3%，0. 油酸鈉為PH調(diào)節(jié)劑和穩(wěn)定劑，10 20%油相，2. 5%甘油。
本發(fā)明還提供了一種制備所述的黃芩提取物亞微乳的方法，將黃芩提取物磷脂復(fù)合物加入到大豆油中、立即剪切分散，溶解后加入卵磷脂等油溶性成分，得油相；甘油、等水溶性成分溶于水中，得水相；將油相和水相加熱到一定溫度后，油相緩慢加入到水相中，高剪切乳化分散制備初乳；初乳迅速冷卻至室溫，再經(jīng)兩步高壓乳勻機(jī)均質(zhì)數(shù)次(700bar的壓力)，熱壓滅菌，即得亞微乳。由于血腦屏障的存在，傳統(tǒng)的口服及靜脈給藥，藥物很難到達(dá)腦內(nèi)，對于缺血性腦損傷的治療效果不佳，為此尋找一種新型的給藥途徑成為了黃芩提取物磷脂復(fù)合物治療缺血性腦損傷的必然，根據(jù)藥效試驗(yàn)證明，本發(fā)明藥物藥效明確、可控性強(qiáng)，安全穩(wěn)定，黃芩磷脂復(fù)合物更適合于鼻腔給藥，藥效明確，且藥效明顯優(yōu)于黃芩苷純品，制備方法簡便，便于大生產(chǎn)，以鼻用溫敏型原位凝膠和亞微乳兩種制劑形式，能更好的發(fā)揮黃芩提取物的藥效。


圖1黃芩提取物磷脂復(fù)合物制備工藝流程2黃芩提取物磷脂復(fù)合物溫敏凝膠制備工藝流程3剪切時間考察，其中，①剪切:3min②剪切6min③剪切9min④剪切iaiiin⑤ 剪切15min圖4剪切時間考察，其中，①13000rpm剪切②16000rpm剪切③16000rpm剪切 ④22000rpm剪切圖5HE染色后光鏡觀察鼻黏膜形態(tài)(X 200)，其中，A.空白(生理鹽水)組；B.藥物組
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明黃芩提取物制備取黃芩藥材，加水煎煮三次，每次1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，加入鹽酸適量調(diào)節(jié)pH值至1. 0 2. 0，70°C保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水?dāng)噭?，?0 %氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至7. 0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1. 0 2. 0，70°C保溫30分鐘，靜置，濾過，沉淀用47. 5%乙醇洗至pH值6. 0 7. 0，揮盡乙醇，減壓干燥，即得。通過此方法制備得到的黃芩提取物中黃芩苷含量為82 % 88 % %之間。(根據(jù)中國藥典2010版一部黃芩藥材項(xiàng)下方法測定)實(shí)施例2本發(fā)明黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備稱取一定量的黃芩提取物和PC含量為80的大豆卵磷脂(重量比為1 2，w/w)， 加入無水乙醇，黃芩提取物藥物濃度為5. Omg/ml，在55°C恒溫水浴中120轉(zhuǎn)/min磁力攪拌 2小時，減壓回收溶劑，真空干燥，即得黃芩提取物磷脂復(fù)合物。實(shí)施例3黃芩提取物磷脂復(fù)合物制備工藝實(shí)驗(yàn)制備工藝流程見圖11單因素考察1. 1反應(yīng)溶劑的選擇以大豆卵磷脂PC含量為80、反應(yīng)溫度為50°C，磁力攪拌速度為120轉(zhuǎn)/min，磁力攪拌時間為池、反應(yīng)濃度為5mg/ml、黃芩提取物與磷脂投料重量比為1 2制備磷脂復(fù)合物，分別考察四氫呋喃、無水乙醇、石油醚(30 60)無水乙醇(7 3)、脫水無水乙醇作為反應(yīng)溶劑對復(fù)合反應(yīng)的影響，以磷脂復(fù)合物結(jié)合率為評價(jià)指標(biāo)，考察反應(yīng)溶劑對于黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備的影響。表1不同反應(yīng)溶劑的考察
不同反應(yīng)溶劑磷脂復(fù)合物(g)坩堝(g)溶解物+±tf堝 (g)溶解量(g)復(fù)合率 (%)平均復(fù)合率 (%)1.013533.026434.0190.992693.8135無水乙醇1.02437.023638.02481.001293.320393.77681.013238.396439. 390.993694.1966]_· 0450.132451.15491.022594.9519脫水無水乙醇1.023657.031658.03851.006995.105595.10371.017636.125637.12711.001595.25351.008950.132951.12820.995395.9560四氫呋喃1.014933.021434.02130.999995.566195.57611.013835.013236.01080.997695.2062石油醚(30 1.006946.130246.89440.764227.688960)無水乙醇1.005857.013257.76770.754525.044726.1147=7:31.03235.124635.90070.776125.6105實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以四氫呋喃和脫水無水乙醇為反應(yīng)溶劑時，平均復(fù)合率均較高， 說明脫水無水乙醇和四氫呋喃均能為反應(yīng)提供較好的質(zhì)子體系，無水乙醇為反應(yīng)溶劑時其次，可能是由于無水乙醇中存在少量水有關(guān)，石油醚(30 60)無水乙醇=7 3為反應(yīng)溶劑時最低，表明石油醚和無水乙醇的混合溶劑不能提供較好的質(zhì)子體系。綜合反應(yīng)溶劑的安全性和復(fù)合率考慮，選用脫水無水乙醇為反應(yīng)溶劑。1.2不同PC含量的考察以脫水無水乙醇作為反應(yīng)溶劑，分別以大豆卵磷脂中PC (磷脂酰膽堿)含量為60、 70、80、90時，反應(yīng)濃度為5mg/ml、反應(yīng)溫度為50°C，磁力攪拌速度為120轉(zhuǎn)/min，磁力攪拌時間為池，黃芩提取物與磷脂投料重量比為1 2制備磷脂復(fù)合物，以磷脂復(fù)合物結(jié)合率為評價(jià)指標(biāo)，考察不同PC含量對于黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表2不同PC含量的考察
撤含量合斷)St) ^s麟)；復(fù)合率
1.026325.389826.33130. 941575.2119601.054055.364756.33120. 966575.094975.10381.053828.365829.33180. 96675.00471.003229.653530.60350. 9584.0909701.040060.454461.44210. 987784.913584.51391.005052.132053.08520. 953284.53731.003251.386552.37430.987895.3947800.968030.398331.35190.953695.537295.57031.002152.130253.11820. 98895.7789 結(jié)果表明隨著大豆卵磷脂PC含量的增高，反應(yīng)復(fù)合率隨之增高，PC含量為80時，復(fù)合反應(yīng)完全，大豆磷脂PC含量不同對復(fù)合反應(yīng)影響重大，因此，選擇PC含量為80的大豆磷脂作為實(shí)驗(yàn)反應(yīng)原料。1. 3反應(yīng)藥物濃度以脫水無水乙醇作為反應(yīng)溶劑，分別以反應(yīng)藥物濃度為2. 5,5. 0,7. 5、10mg/ml 時，大豆卵磷脂PC含量為80、反應(yīng)溫度為50°C，磁力攪拌速度為120轉(zhuǎn)/min，攪拌時間為池、黃芩提取物與磷脂投料重量比為1 2制備磷脂復(fù)合物，以磷脂復(fù)合物結(jié)合率為評價(jià)指標(biāo)，考察反應(yīng)藥物濃度對于黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備的影響。結(jié)果見表3。表3不同濃度的考察
權(quán)利要求
1.一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于它是以黃芩提取物為活性成分，制備成黃芩提取物磷脂復(fù)合物，再加入溫敏型原位凝膠輔料制備而成，活性成分與輔料的重量百分比為黃芩提取物磷脂復(fù)合物0. 2-1. 5%、泊洛沙姆40716% 、泊洛沙姆1880% -12%, PEG6000 0% -2%、甘露醇5%、苯扎氯胺0.02%、三乙醇胺0. 1%，余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物是由下述重量配比的黃芩提取物與大豆卵磷脂為原料制備而成黃芩提取物1-3份、大豆卵磷脂或蛋黃磷脂1-4份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物是由下述重量配比的黃芩提取物與大豆卵磷脂為原料制備而成黃芩提取物1份、大豆卵磷脂或蛋黃磷脂2份。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物中含有黃芩苷的重量百分含量為82 88%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物是由下述方法制備而成a、取黃芩藥材，加水煎煮提取，濾液濃縮成清膏，加鹽酸調(diào)節(jié)PH值至1.0 2. 0， 60-80°C保溫lh，靜置，濾過，得沉淀物；b、沉淀物加水?dāng)噭颍?0%-40%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7，加入與氫氧化鈉等量的乙醇， 使含醇量為10-47. 5%，攪勻，靜置12小時，濾過，得濾液；c、濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1 2，60 80°C保溫1小時，冷卻至室溫，靜置，濾過，得沉淀；d、沉淀用10-47.5%乙醇洗滌至pH至6 7，將沉淀減壓干燥，即得黃芩提取物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備方法，包括如下步驟a、取下述重量配比的原料黃芩提取物1-3份、大豆卵磷脂1-4份；b、加入脫水無水乙醇，黃芩提取物藥物濃度為2.5-7. 5mg/ml，在20-70°C恒溫水浴中 60-240轉(zhuǎn)/min磁力攪拌1_4小時，減壓回收溶劑，真空干燥，即得黃芩提取物磷脂復(fù)合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的鼻用溫敏型原位凝膠，其特征在于所述的黃芩提取物磷脂復(fù)合物的制備方法，包括如下步驟a、取下述重量配比的原料黃芩提取物1份、大豆卵磷脂1-3份；b、加入脫水無水乙醇，黃芩提取物藥物濃度為5.Omg/ml，在55°C恒溫水浴中120轉(zhuǎn)/ min磁力攪拌2小時，減壓回收溶劑，真空干燥，即得黃芩提取物磷脂復(fù)合物。
8.權(quán)利要求1所述的鼻用溫敏型原位凝膠的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟a、制備0.1 % ν/ν三乙醇胺TEA溶液的配制精密量取1. Oml三乙醇胺，加入IOOOml去離子水中，充分?jǐn)嚢枋够靹?，備用；b、空白凝膠的制備取P407、P188、PEG6000加入0.1% TEA溶液，冰浴4°C磁力攪拌下使其分散均勻，放入4°C冰箱冷藏Mh以上，使凝膠充分溶脹，得到澄明溶液；c、含藥凝膠的制備先將黃芩提取物磷脂復(fù)合物溶于0.1% TEA溶液中，再加入b步驟制備的澄明溶液中。
9.一種黃芩提取物亞微乳，它是由下述百分含量的原料藥及輔料制備而成黃芩提取物1.33%、大豆磷脂2. 67%、中鏈甘油三酯17%、大豆油8%、油酸0. 1 %、大豆卵磷脂S-751.5%、泊洛沙姆1881%、甘油1%，余量為水。
10.一種制備權(quán)利要求9所述的黃芩提取物亞微乳的方法，其特征在于a、稱取黃芩提取物、大豆卵磷脂，制備成黃芩提取物磷脂復(fù)合物；b、將反應(yīng)溶劑于60°C減壓回收溶劑，至有物質(zhì)析出時，暫?；厥?，加入中鏈甘油三酯、 大豆油、油酸，繼續(xù)減壓回收溶劑至無醇味，即得油相；將甘油、泊洛沙姆、乙二胺四乙酸鈉水相成分溶于預(yù)熱的蒸餾水中，即得水相；將兩相均加熱到60°C后，將水相加入油相中，使混勻；c、將初乳保持在60°C的條件下，以19000轉(zhuǎn)/min的剪切速度，高速剪切IOmin；冷卻至室溫后，于高壓均質(zhì)機(jī)上進(jìn)行高壓均質(zhì)，高壓均質(zhì)壓力為400bar，次數(shù)為9次，低壓均質(zhì)壓力為50bar，次數(shù)為3次，完后收集得黃芩提取物磷脂復(fù)合物亞微乳溶液，加入0. lmol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH值至5，濾過。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠。本發(fā)明還提供了該黃芩提取物鼻用溫敏型原位凝膠的制備方法和用途。本發(fā)明還提供該黃芩提取物制備的磷脂復(fù)合物亞微乳。本發(fā)明藥物藥效明確、可控性強(qiáng)，安全穩(wěn)定，黃芩磷脂復(fù)合物適合于鼻腔給藥，藥效明確，且藥效明顯優(yōu)于黃芩苷純品，制備方法簡便，便于大生產(chǎn)，以鼻用溫敏型原位凝膠和亞微乳兩種制劑形式，能更好的發(fā)揮黃芩提取物的藥效。
文檔編號A61K36/539GK102349944SQ201110146139
公開日2012年2月15日 申請日期2011年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月1日
發(fā)明者史亞軍, 吳品江, 楊小容, 楊勝, 林彥君, 王達(dá)賓, 許潤春 申請人:四川大千藥業(yè)有限公司