專利名稱:葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域,涉及一種葉黃素的新型眼用制劑,具體涉及一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑及其制備方法。
背景技術(shù):
老年型黃斑變性(AMD)是一種能引起中心視力逐漸下降,嚴(yán)重時可導(dǎo)致失明的眼病。目前該眼病仍然是難治之癥,現(xiàn)也成為我國老年人4種主要致盲性疾病之一。因此,對這一疾病的預(yù)防就顯得相當(dāng)重要。而葉黃素是優(yōu)異的天然抗氧化劑和黃色素,能增加視網(wǎng)膜中黃斑色素的密度,有效地防治老年性眼球視網(wǎng)膜黃斑退化引起的視力下降與失明,還具有防治白內(nèi)障等多種生理功能。目前美國和歐洲許多公司都研發(fā)了添加葉黃素和玉米黃素的用于治療眼病的藥膏,而我國尚處于研究開發(fā)階段。與眼藥膏相比,滴眼液使用方便,順應(yīng)性好,價格低廉而被廣大患者接受。但溶液型滴眼劑因眼球的運(yùn)動和鼻淚系統(tǒng)的作用使藥物在角膜前滯留的時間很短,一般情況下約 80 90%的滴眼液在滴入眼睛后一分鐘內(nèi)流失。同時角膜的屏障作用,藥物的跨角膜滲透也受到限制,眼部生物利用度很低。為克服這些不足,一些新型的眼用藥物載體正在被廣泛的開發(fā)和研究,如眼用乳劑、納米粒、膠原罩、納米囊和脂質(zhì)體等。這些新制劑的設(shè)計,主要目的是集中于延長藥物與眼球表面的接觸時間,增強(qiáng)藥物在角膜的通透性,提高眼部生物利用度,增加眼用制劑的臨床療效。其中納米囊具有載藥量高、改善溶解性和滲透性、穩(wěn)定性好、延長藥物的作用時間以及降低毒副作用等特點,已用于多肽蛋白類藥物的口腔黏膜給藥。研究表明,納米囊對胰島素具有較高的透黏膜作用,起效快。因葉黃素穩(wěn)定性及溶解性差,如簡單制劑在眼中易受淚液影響,從而導(dǎo)致藥物損失或透黏膜作用減弱。原位凝膠系統(tǒng)在體外為低黏度的流體,生理條件下如溫度、pH值等下,自身將會產(chǎn)生溶膠-凝膠的相轉(zhuǎn)變,既保持凝膠劑的優(yōu)點又克服了溶液劑的不足。目前,研究較多的是將原位凝膠用于眼部給藥劑型中。與普通凝膠制劑相比,原位凝膠具有給藥方便,延長藥物的角膜滯留時間,給藥劑量準(zhǔn)確,可重現(xiàn)性好等優(yōu)點。國外已有許多成熟產(chǎn)品上市,如美國Merck公司的馬來酸賽瑪洛爾眼用膠體溶液產(chǎn)品于1996年上市,瑞士公司CIBA Vision AG開發(fā)的人工淚液Hypotears眼用凝膠已經(jīng)在中國市場銷售,美國Alcon公司的抗青光眼產(chǎn)品Pilopine-HS也采用了凝膠劑型。其中溫度敏感型泊洛沙姆研究深入,此種類型則會迅速轉(zhuǎn)變?yōu)楦唣ざ饶z,近年來被廣泛研究用于眼部給藥。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑及其制備方法,以增加葉黃素的穩(wěn)定性和滲透性,延緩藥物釋放,提高生物利用度。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是,由下列質(zhì)量體積比的原料組成的 葉黃素0. 1克 2克
脂質(zhì)材料0. 1克 20克乳化劑 0. 3克 2克
抗氧化劑 0. 001 克~0.1 克
凝膠基質(zhì)0. 1克 30克
增稠劑 0. 0克 2. 5克
等滲調(diào)節(jié)劑 1克~5克
抑菌劑 0. 01克 0. 3克
PH7. 4磷酸鹽緩沖液 加至100毫升。本發(fā)明所述的脂質(zhì)材料為卵磷脂、硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、棕櫚酸、膽固醇中的一種或是幾種的混合物。本發(fā)明所述的乳化劑為聚山梨酯類包括吐溫-80、吐溫-60,聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆中的一種或幾種。本發(fā)明所述的抗氧化劑為維生素E、維生素C的一種或是兩種的混合物。本發(fā)明所述的凝膠基質(zhì)為泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的一種或兩種的混合物。本發(fā)明所述的凝膠基質(zhì)為泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的一種或兩種的混合物, 在磷酸鹽緩沖液中泊洛沙姆407占16 % -25 %,泊洛沙姆188占0. 5 % 10 %。本發(fā)明所述的增稠劑為甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、玻璃酸鈉、透明質(zhì)酸鈉、黃原膠、瓜爾膠、殼聚糖中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明所述的等滲調(diào)節(jié)劑為氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、枸櫞酸鈉中的一種或幾種的混合物。本發(fā)明所述的抑菌劑為山梨酸及其鹽,尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、三氯叔丁醇、苯扎氯銨、苯扎溴銨中的一種或幾種的混合物。一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑的制備方法,其特征在于含有下列步驟
(1)納米囊泡的制備按處方精密稱取脂質(zhì)材料、抗氧劑、葉黃素,加入溶劑使其完全溶解,加入含有乳化劑的PH7. 4磷酸鹽緩沖液水化洗膜,高壓均質(zhì)處理;
(2)納米囊原位凝膠的制備將上述納米囊溶液,于冰箱4°C保存^Tiai;磁力攪拌下 100^300轉(zhuǎn)/分鐘,緩慢加入處方量的凝膠基質(zhì),使其均勻分散,加入增稠劑、等滲調(diào)節(jié)劑和抑菌劑攪拌均勻后,冰箱4°C冷藏保存12tT48h,直至得到澄明溶液。為改善葉黃素穩(wěn)定性及溶解性差,使其在眼部更好發(fā)揮作用,如僅采用薄膜分散法制備納米囊,但穩(wěn)定性差,儲藏1個月出現(xiàn)粒徑明顯增大,外觀渾濁度明顯增大的現(xiàn)象, 質(zhì)量差;經(jīng)改進(jìn)研究發(fā)現(xiàn),采用薄膜分散、高壓勻質(zhì)一次制備的納米囊,粒徑均勻,穩(wěn)定性好。本發(fā)明結(jié)合納米囊和原位凝膠技術(shù)的優(yōu)點,改善了葉黃素的溶解性能,增加了其穩(wěn)定性及滲透性,延長其在眼角膜的鋪展效果和滯留時間,使其更好地發(fā)揮療效。本發(fā)明開發(fā)的納米囊原位凝膠劑結(jié)合了納米囊和原位凝膠的優(yōu)點。與普通滴眼液和普通凝膠劑相比,本發(fā)明具有以下優(yōu)點(1)納米囊粒徑小,平均粒徑236nm,不僅可提高葉黃素的溶解度,穩(wěn)定性,角膜滲透性,還可以延緩釋放藥物,延長作用時間,有利于提高生物利用度;(2)原位凝膠劑既克服與普通滴眼液和普通凝膠劑的不足,又保持了二者的優(yōu)點;(3)所用脂質(zhì)材料對眼部幾乎無刺激性和副作用。
圖IA是納米囊泡的X 15,000倍下透射電鏡圖; 圖IB是納米囊泡的X 30,000倍下透射電鏡圖; 圖2是納米囊的粒度分布圖; 圖3是葉黃素X-射線衍射圖譜; 圖4是空白囊泡X-射線衍射圖譜; 圖5是葉黃素納米囊泡X-射線衍圖譜。
具體實施例方式實施例1
將0. 3g葉黃素、1. 2g卵磷脂、0. 4g膽固醇、0. 05g維生素E溶解于IOOml無水乙醚中, 于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上水浴35°C,150r/min旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)除去溶劑,茄形瓶壁上得到均勻的薄膜;將0. 5g吐溫-80溶解于pH7. 4的磷酸鹽緩沖液100ml,加入到茄形瓶中旋轉(zhuǎn)洗膜,得到葉黃素囊泡初乳,初乳經(jīng)過高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì),壓力lOOObar、均質(zhì)1次,用0. 45 μ m的濾膜過濾,得到葉黃素納米囊泡;
將上述納米囊溶液,于冰箱4°C保存12h,磁力攪拌下200轉(zhuǎn)/分鐘,緩慢加入23g泊洛沙姆407,Ig泊洛沙姆188攪拌使其均勻分散,加入5g甘露醇,Ig甲基纖維素,0. 02g苯扎溴銨,攪拌溶解后,然后放入冰箱4 °C冷藏12h,直至得到澄明溶液。納米囊的評價試驗如下
1、外觀形態(tài)納米囊泡混懸液適量,滴至覆有碳膜的銅篩網(wǎng)上,用洲磷鎢酸負(fù)染色,用透射電鏡觀察。如附圖1。2、粒徑大小及度分布取葉黃素納米囊泡適量,采用激光粒度測定儀測定。如附圖 2。結(jié)果表明,所制囊泡粒子分布較均勻、顆粒間彼此分散、獨立、連續(xù)呈球形或類球形囊狀顆粒。3、測定包封率采用離心-超濾法測定。先離心移取游離藥物沉淀,再超濾得游離藥物溶液,采用HPLC法測定%。包封率(EE%) = (C 總—C 游離)/C 總 X 100% 4、X-射線衍射圖譜
測試條件CuK輻射;40kV X 40mA;狹縫參數(shù)分別為DS狹縫2°、SS狹縫2°、RS狹縫0.3mm ;Ni濾波器;連續(xù)掃描,掃描速度2 ° /min,步長0. 1 °。掃描角度從5 °到 60° (2 θ ),掃描靶 Cu,Ka 1 :1. 5406,管壓 40kV,管流 40mA,掃描速度 2° /min。分別取干燥的葉黃素、空白納米囊泡和葉黃素納米囊泡(實施實例1),放入玻璃凹槽里鋪平進(jìn)行測試,衍射圖譜見附圖3-5。由附圖3可見,葉黃素在8. Γ、14.2°、14.7°、 17.5°、20.8°處有特征衍射峰,并且在2Θ為10-20°之間的衍射峰最強(qiáng)。附圖4是空白囊泡主要由卵磷脂和膽固醇組成,在23. 4°、32°、44.8°處有特征衍射峰。由附圖5可見, 部分葉黃素包裹于納米囊中,特征衍射峰消失。5、穩(wěn)定性考察
各實施例初步穩(wěn)定性(粒徑、包封率)考察結(jié)果見表1。由表可見,葉黃素納米囊在6個月的貯藏期內(nèi),粒子未發(fā)生聚集現(xiàn)象,各項指標(biāo)均無明顯變化,說明該制劑的穩(wěn)定性良好。表1各實施例初步穩(wěn)定性考察結(jié)果(以實施例1為例,η=3)
權(quán)利要求
1.一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于由下列質(zhì)量體積比的原料組成的葉黃素0. 1克1克脂質(zhì)材料0. 1克 20克乳化劑0. 3克1克抗氧化劑0. OOl克、.1克凝膠基質(zhì)0. 1克 30克增稠劑0. O克5克等滲調(diào)節(jié)劑1克、克抑菌劑0. Ol克、.3克pH7. 4磷酸鹽緩沖液加至100毫升。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于脂質(zhì)材料為 卵磷脂、硬脂酸、單硬脂酸甘油酷、三棕櫚酸甘油酷、棕櫚酸、膽固醇中的一種或是幾種的混 合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于乳化劑為聚 山梨酯類包括吐溫-80、吐溫-60,聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于抗氧化劑為 維生素E、維生素C的一種或是兩種的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于凝膠基質(zhì)為 泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的一種或兩種的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于凝膠基質(zhì)為 泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的一種或兩種的混合物,在磷酸鹽緩沖液中泊洛沙姆407占 16 % -25 %,泊洛沙姆 188 占 0. 5 % 10 %。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于增稠劑為甲 基纖維素、輕丙甲基纖維素、聚乙烯醇、聚乙烯卩比略燒酮、玻璃酸鈉、透明質(zhì)酸鈉、黃原膠、瓜 爾膠、殼聚糖中的一種或幾種的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于等滲調(diào)節(jié)劑 為氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、枸櫞酸鈉中的一種或幾種的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑,其特征在于抑 菌劑為山梨酸及其鹽,尼泊金甲酷、尼泊金乙酷、尼泊金丙酷、三氯叔丁醇、苯扎氯銨、苯扎溴銨中的一種或幾種的混合物。
10.如權(quán)利要求1所述的一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑的制備方法,其特征在 于含有下列步驟(1)納米囊泡的制備按處方精密稱取脂質(zhì)材料、抗氧劑、葉黃素,加入溶劑使其完全 溶解,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸發(fā)除去溶剤,瓶壁上得到均勻的薄膜,加入含有乳化劑的PH7. 4 磷酸鹽緩沖液水化洗膜,高壓均質(zhì)處理;(2)納米囊原位凝膠的制備將上述納米囊溶液,于冰箱4で保存ariai;磁力攪拌下 100-300轉(zhuǎn)/分鐘,緩慢加入處方量的凝膠基質(zhì),使其均勻分散,加入增稠劑、等滲調(diào)節(jié)劑和 抑菌劑攪拌均勻后,冰箱4で冷藏保存12tr48h,直至得到澄明溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種葉黃素眼用納米囊原位凝膠制劑及其制備方法,屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。該制劑包括葉黃素0.1克~2克,脂質(zhì)材料0.1克~20克,乳化劑0.3克~2克,抗氧化劑為0.001克~0.1克,凝膠基質(zhì)為0.1克~30克,增稠劑為0.0克~2.5克,滲透壓調(diào)節(jié)劑為1克~5克,抑菌劑為0.01克~0.3克,pH磷酸鹽緩沖液加至100ml。先制備納米囊,再制備原位凝膠劑。本發(fā)明制備的納米囊粒徑平均236nm,包封率高,平均包封率為92.5%。納米囊泡可提高主成分葉黃素的穩(wěn)定性及透過角膜的穿透率,以及凝膠的粘附性和緩慢溶蝕,使得釋藥緩慢,延長藥物作用時間,提高了藥物的生物利用度。
文檔編號A61K47/36GK102210645SQ201110144619
公開日2011年10月12日 申請日期2011年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月31日
發(fā)明者林天慕, 管清香, 陳倩, 魯晶雯 申請人:吉林大學(xué)