專利名稱：一種對映-貝殼杉型二萜類化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種結(jié)構(gòu)新穎的抗癌化合物一對映-貝殼杉型二萜類化合物、特別涉及藍萼香茶菜庚素(glaucocalyxin G，GLG)，及其制備方法以及在治療癌癥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
唇形科香茶菜屬植物，在亞洲東部和非洲西部廣為分布，全世界約有150種，我國約有90種25個變種，其中約有30種民間作為藥用，具有清熱解毒之功效，用于抗癌、消炎、 健脾、活血、抗菌。該屬植物的化學成分已經(jīng)做了大量研究，從中提取了四百多種化學成分。 經(jīng)藥理篩選發(fā)現(xiàn)，該屬植物中的許多二萜化合物具有細胞毒、抗癌、抗炎活性。研究還發(fā)現(xiàn)， 該屬植物除富含二萜類成分外，還含有三萜，脂肪酸以及少量的黃酮、倍半萜、鏈烴等。香茶菜屬植物廣泛分布于我國，河南、湖北、四川、貴州、山西、陜西、河北等省均有分布。全草具有抗菌消炎等作用，民間用于治療急性黃疸型肝炎、急性膽囊炎、跌打損傷、毒蛇咬傷等。對藍萼香茶菜粗制劑進行了藥理作用研究，結(jié)果表明其對體內(nèi)和體外的艾氏腹水癌腫瘤細胞有明顯的抑制作用。藍萼香茶菜(Isodon japonica var. glaucocalyx)是唇形科香茶菜屬植物中的一種，分布于我國的東北、華北地區(qū)。河南省山區(qū)資源豐富。藍萼香茶菜具有健脾、清熱解毒、 活血、抗菌消炎和抗癌活性，用于胃炎、肝炎初期、感冒發(fā)熱、乳腺炎、關(guān)節(jié)痛等疾病的治療。 現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)其全草對心血管有一定的作用，而其中的有效成分對血小板聚集及癌癥有一定的影響。從上世紀80年代至今，各國學者對其藥理及化學等各方面進行了研究，以我國學者研究較多。1981年許云龍等人從藍萼香茶菜中提取出藍萼甲素(glaucocalyxin Α)和藍萼乙素(glaucocalyxin B)，波譜分析推斷藍萼甲素具有香茶菜屬二萜典型的15-氧_16_貝殼杉烯(ent-15-OXO-16-kaurene)骨架，而藍萼乙素是藍萼甲素的14-乙?；?。1988年劉晨江等從北京地區(qū)產(chǎn)藍萼香茶菜中除了分得藍萼甲素和藍萼乙素外， 還分得藍萼丙素(glaucocalyxin C)，結(jié)構(gòu)為對映_7 β，14 α，15 α -三羥基-16-貝殼杉-3-酮。Dongsa kimls，除了從中分出藍萼甲素、藍萼乙素和藍萼丙素外，還分出了兩種新二萜glaucocalyxin D和glaucocalyxin E，并列出了這五種化合物結(jié)構(gòu)的紅外、紫外吸收以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)，對1H和"C核磁共振化學位移值也做了歸屬。2008年陳海生等從遼寧鞍山產(chǎn)藍萼香茶菜中分離得到兩個結(jié)構(gòu)新穎的對映-貝殼杉烷型二萜，藍萼香茶菜己素(glaucocalyxin F)和藍萼香茶菜X素(glaucocalyxin X)，并報道了兩個化合物的波譜數(shù)據(jù)。劉蘭娣等研究了藍萼香茶菜對大鼠全心缺血-再灌注時心肌C-FOS基因表達的影響。采用dortl離體全心缺血-再灌注損傷模型，免疫組化法，用相應(yīng)C-fos抗體檢測心肌細胞中C-fos基因表達情況，藍萼香茶菜生藥用乙醇回流提取3次，提取液回收乙醇，濃縮后加到0.5%淀粉糊中，揮去乙醇，濃度為lKg/L，分為高中低三種不同濃度的香茶菜對缺
3血-再灌注全心進行預(yù)灌注，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其能明顯減少凋亡相關(guān)基因C-fos基因的表達，表明心肌缺血-再灌注損傷輕，心肌受到一定的保護，同時發(fā)現(xiàn)高濃度藍萼香茶菜具有一定的心肌細胞毒性作用。其具有與劑量相關(guān)的心肌保護作用，但并非濃度越大越有效。綜上所述，藍萼香茶菜在我國資源豐富?；瘜W研究表明其含有二萜和三萜成分，二萜成分因其母核為對映貝殼杉烯型，類似于冬凌草甲素(oridonin)，故可能具有一定的抗癌作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于提供一種結(jié)構(gòu)新穎的對映-貝殼杉型二萜類化合物。本發(fā)明的目的之二在于提供所述對映-貝殼杉型二萜類化合物的制備方法。本發(fā)明的目的還在于提供所述對映-貝殼杉型二萜類化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所公開的結(jié)構(gòu)新穎的對映-貝殼杉型二萜類化合物分離自唇形科香茶菜屬植物藍萼香茶菜(Isodon japonica var. glaucocalyx)，是一種二萜化合物，具有貝殼杉烷型二萜結(jié)構(gòu)骨架、α-β不飽和環(huán)戊酮結(jié)構(gòu)單元和原兒茶縮醛結(jié)構(gòu)單元，其分子結(jié)構(gòu)通式如下
權(quán)利要求
1. 一類對映-貝殼杉型二萜類化合物，其分子結(jié)構(gòu)通式如下其中隊為-OH、OCH3 或 OAc ；R2 為-OH、OCH3 或 OAc。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的對映-貝殼杉型二萜類化合物，其特征在于，所述化合物的分子結(jié)構(gòu)通式中，R1為-OH, R2為-OH0
3.權(quán)利要求1或2所述的對映-貝殼杉型二萜類化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟取唇形科香茶菜屬植物的葉，干燥粉碎后，加入2-5倍量的提取溶劑浸提，浸提液減壓濃縮后用乙酸乙酯萃取，萃取液減壓濃縮得30°C時相對密度為1. 05-1. 25的浸膏； 取浸膏溶解后，以DlOl大孔吸附樹脂層析，用80%甲醇-水洗脫，洗脫液減壓濃縮得淡黃色粉末，然后以200-300目硅膠柱層析，用氯仿/甲醇以50 1,30 1,20 UlO 1進行梯度洗脫，對氯仿/甲醇30 1洗脫部位進行純化得到目標化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述香茶菜屬植物為藍萼香茶菜。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述提取溶劑為甲醇或70%丙酮-水溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述浸提為在室溫下浸泡2-3次，每次3-5天。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述萃取為采用1-2倍量的乙酸乙酯萃取2-3次。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述純化為對氯仿/甲醇30 1的洗脫部位進行硅膠柱層析，用石油醚/乙酸乙酯以5 1、1 1進行梯度洗脫，取石油醚/ 乙酸乙酯5 1洗脫部位，在甲醇中重結(jié)晶，得到目標化合物。
9.權(quán)利要求1或2所述的對映-貝殼杉型二萜類化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括對映-貝殼杉型二萜類化合物在制備治療肝癌、肺癌、腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、官頸癌、骨髓性白血病和食管癌的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種結(jié)構(gòu)新穎的對映-貝殼杉型二萜類化合物，特別是藍萼香茶菜庚素(GLG)。本發(fā)明還提供所述化合物的制備方法，采用溶劑室溫浸泡，浸提液減壓蒸餾，將所得浸膏進行重復(fù)硅膠柱層析得到目標化合物。本發(fā)明的對映-貝殼杉型二萜類化合物藥理作用明顯，能夠抑制人食管癌細胞(EC-1)、人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤細胞(U87MG)、人肺癌細胞(A549)、人乳腺癌細胞(MCF-7)、人宮頸癌細胞(Hela)、人慢性髓原白血病細胞(K562)、人肝癌細胞(HepG2)的活性，能夠顯著減小H22和S180荷瘤小鼠瘤體，并對免疫系統(tǒng)無明顯抑制作用。本發(fā)明進一步提供所述化合物在制備治療癌癥，特別是治療肝癌、肺癌、腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、官頸癌、骨髓性白血病、食管癌的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號A61K31/357GK102229598SQ201110100568
公開日2011年11月2日 申請日期2011年4月21日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月21日
發(fā)明者孫彭利, 尚校軍, 張崇, 房立真, 梁會娟, 海廣范, 白素平 申請人:新鄉(xiāng)醫(yī)學院