專利名稱：一種治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊。
背景技術(shù)：
短暫性腦缺血發(fā)作(transient ischemic attack, TIA)是指頸內(nèi)動(dòng)脈系統(tǒng)或椎 基底動(dòng)脈系統(tǒng)局部短暫性血液供應(yīng)不足引起的一過(guò)性神經(jīng)功能障礙綜合征，腦缺血的局灶 性、短暫性和反復(fù)發(fā)作性是其最主要的臨床特征，多見(jiàn)于50歲以上的中老年人。TIA是缺 血性中風(fēng)的臨床早期表現(xiàn)，TIA發(fā)作越頻繁，發(fā)生中風(fēng)的危險(xiǎn)性就越大。TIA患者有10% 37%在3 5年內(nèi)可發(fā)展為完全性腦卒中，從第1次TIA發(fā)作到發(fā)展為腦卒中，多數(shù)在TIA 后第1年內(nèi)，且在TIA后頭2個(gè)月內(nèi)發(fā)生腦卒中的危險(xiǎn)性最高。TIA患者1年后腦卒中的發(fā) 生率比同年齡而無(wú)TIA的對(duì)照高16倍。TIA被認(rèn)為是腦梗死的超級(jí)預(yù)警信號(hào)，無(wú)論何種原 因所致的TIA都應(yīng)作為發(fā)生完全性腦卒中的重要危險(xiǎn)因素，一旦出現(xiàn)即意味著腦梗死風(fēng)險(xiǎn) 顯著增加，及時(shí)治療TIA是預(yù)防缺血性腦卒中的重要措施。藥物對(duì)腦血管疾病的干預(yù)治療已成為社會(huì)和醫(yī)學(xué)界關(guān)注的重要課題，雖然對(duì)治療 腦血管疾病藥物的開(kāi)發(fā)還在不斷深入，但是現(xiàn)有的藥物由于價(jià)格較貴且給藥方式受限、不 良反應(yīng)及副作用多而不適宜正常狀況下反復(fù)應(yīng)用或因用藥時(shí)間長(zhǎng)、給藥劑量大等使應(yīng)用受 到了限制，目前缺少一種專一用于防治TIA的藥物，因而仍需進(jìn)一步研發(fā)高效、低毒的防治 腦缺血疾病的藥物。中藥治療腦血管疾病的歷史悠久，且中藥具有副作用小，成本低等優(yōu)點(diǎn)；中醫(yī)學(xué)具 有整體觀念的特點(diǎn)，而中藥又具有多成分、作用于多靶點(diǎn)的特征，從而干預(yù)腦缺血損傷病理 程多條路經(jīng)。對(duì)于腦缺血疾病，中醫(yī)多認(rèn)為血瘀、火熱內(nèi)灼是缺血性腦卒中常見(jiàn)原因，因此 長(zhǎng)期主張使用以“活血化瘀”、“清熱解毒”為主的治則來(lái)治療本病。中醫(yī)藥利用“活血化瘀” 方法治療腦缺血取得了較好的效果，得到了較廣泛的肯定。運(yùn)用“活血化瘀”方藥治療TIA 具有較廣闊的研究前景，研發(fā)出療效確切、起效快、劑量小的新劑型是中藥治療腦血管疾病 的關(guān)鍵。毛冬青是臨床常用中藥，其活血化瘀、清熱解毒作用已在臨床廣泛應(yīng)用，用于腦缺 血療效確切。目前國(guó)內(nèi)已有的毛冬青制劑均為毛冬青的粗提取物，就是毛冬青注射液也是 水提醇沉粗制劑，只控制了總黃酮類成分?，F(xiàn)有毛冬青各類加工中均無(wú)專一用于防治TIA 的制劑，且只考慮了毛冬青所含黃酮類成分而忽略了皂苷類成分，或考慮了皂苷類成分而 忽略了黃酮類成分。本研究的重點(diǎn)將毛冬青所含的總黃酮、總皂苷兩類主要活性部位配比 研究，確定毛冬青組分適宜配比。為防治TIA心制劑研究打下基礎(chǔ)。那么如何將毛冬青總 黃酮、總皂苷制備成膠囊，供人們服用，用于治療短暫性腦缺血發(fā)作呢？

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明的目的就在于提供一種治療短暫 性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊?？捎行Ы鉀Q治療短暫性腦缺血發(fā)作的問(wèn)題。
本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，該膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 5-7 混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和輔料總重量和的10-50%的輔料，裝入膠囊內(nèi)制 成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛冬青藥材加毛冬青重量的10倍量的質(zhì)量濃度為 70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加毛冬青重量的8倍量的質(zhì)量濃度為 70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH 調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃 度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷，所述的輔料為微晶纖維素，或淀粉，或硬脂酸 鎂，或糊精的一種或兩種的混合。本發(fā)明組方簡(jiǎn)單，配伍科學(xué)合理，功效顯著，是毛冬青藥用價(jià)值上的創(chuàng)新。具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作詳細(xì)的說(shuō)明。實(shí)施例1本發(fā)明在實(shí)施中，本發(fā)明膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 5混合在 一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和微晶纖維素總重量和的10%微晶纖維素，裝入膠囊內(nèi)制 成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛冬青800g藥材加10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙 醇，浸泡30min，提取Ih，回收藥液。藥渣再加8倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min， 提取lh，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃 度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬 青總皂苷。實(shí)施例2本發(fā)明在實(shí)施例中，本發(fā)明膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 6混合 在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和淀粉、硬脂酸鎂總重量和的10-20 %的淀粉、1 %的硬 脂酸鎂，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛冬青800g藥材加10倍量的 質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加8倍量的質(zhì)量濃度為 70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH調(diào)到4_5 后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70% 的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷。實(shí)施例3本發(fā)明在實(shí)施例中，本發(fā)明膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 7混合 在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和糊精總重量和的40% -50%的糊精，裝入膠囊內(nèi)制 成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛冬青800g藥材加10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙 醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加8倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min， 提取lh，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液pH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃 度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬 青總皂苷。本發(fā)明根據(jù)具體使用情況可制成膠囊，還可制成顆?；蚱瑒１景l(fā)明具有活血化瘀、清熱解毒之功效，有效用于治療短暫性腦缺血發(fā)作的病癥 問(wèn)題，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)資料得到了充分的證明，有關(guān)實(shí)驗(yàn)資料如下
實(shí)驗(yàn)1毛冬青總黃酮與總皂苷不同配比組對(duì)小鼠TIA模型的影響1.實(shí)驗(yàn)材料1. 1藥物試劑毛冬青總黃酮、總皂苷，有河南中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供，方法為，取毛冬青800g藥 材加10倍量70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加8倍量70 %的乙 醇，浸泡30min，提取lh，合并第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后上 大孔樹(shù)脂；用35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，在用70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬 青總皂苷。養(yǎng)血清腦顆粒，由天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)；尼莫地平，山東新華 制藥股份有限公司生產(chǎn)；氯化鈉注射液，由鄭州永和制藥有限公司生產(chǎn)；水合氯醛，由上 海山浦化工有限公司生產(chǎn)；甲醛溶液，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；過(guò)氧化叔丁醇 (tert-butylhydroperoxide, t-BHP)，由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)；考馬斯亮蘭檢測(cè) 試劑盒，由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；SOD (Superoxide dismutase)檢測(cè)試劑盒，由南 京建成生物工程研究所生產(chǎn)；MDA(MaIonicdiaIdehyde)檢測(cè)試劑盒，由南京建成生物工程 研究所生產(chǎn)；NO (Nitric oxide)檢測(cè)試劑盒，由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；NOS (Nitric oxide synthetase)檢測(cè)試劑盒，由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。1. 2實(shí)驗(yàn)儀器UV-2000紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，尤尼柯(上海)儀器有限公司生產(chǎn)；TGL-16G臺(tái)式 離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；電子分析天平，奧豪斯(上海)公司生產(chǎn)；DZKW-4型電 子恒溫水浴鍋，北京永光明醫(yī)療儀器廠生產(chǎn)；DY89-1型電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)，寧波新芝生物科 技有限公司生產(chǎn)；可調(diào)式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司生產(chǎn)。1. 3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重30 35g，河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2.實(shí)驗(yàn)方法2. 1造模與給藥取體重為30 35g的昆明種小鼠260只，雌雄各半，隨即均勻分為13組，即空 白對(duì)照組，模型組，尼莫地平組，養(yǎng)血清腦顆粒組，極限等比增減設(shè)計(jì)毛冬青總黃酮與總皂 苷不同配比組(總黃酮總皂苷10 0組，10 2組，10 3組，10 4組，10 5組， 10 6組，10 8組，10 10組，0 10組)，每組20只。除空白組外，其余12組造小鼠 TIA模型。造模型9組分別灌服毛冬青總黃酮與總皂苷不同配比藥物(給藥劑量總量保持 0. 3g/kg不變，毛冬青總黃酮與總皂苷之間按上述比例，臨用前用生理鹽水配成相同濃度 30mg/ml但不同比例的藥液，給藥體積0. lml/10g)、養(yǎng)血清腦顆粒組(陽(yáng)性對(duì)照藥，給藥劑 量為2g/kg，臨用前用生理鹽水配成0. 2g/ml，給藥體積0. lml/10g)、尼莫地平組(陽(yáng)性對(duì)照 藥，給藥劑量為0. 4g/kg，臨用前用生理鹽水配成0. 002g/ml，給藥體積0. lml/10g)、模型組 (灌服同體積生理鹽水)。空白對(duì)照組灌服同體積生理鹽水。造模方法小鼠尾靜脈注射0. llmol/L過(guò)氧化叔丁醇(7. 5ml/kg) IOmin后，置于 0. 45L的廣口瓶中，密封，使小鼠缺氧15min后取出，進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分。行為學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)伍氏標(biāo)準(zhǔn)修改①卒中指數(shù)毛發(fā)臟亂1 ；四肢顫抖1 ；運(yùn)動(dòng) 下降或遲鈍或過(guò)強(qiáng)1 ；耳觸覺(jué)減退1 ；上瞼下垂1 ；后肢外展呈“八”字3 ；②神經(jīng)系統(tǒng)癥狀 自發(fā)性探究1 ；刺激時(shí)走動(dòng)或爬行1 ；刺激時(shí)不能動(dòng)2 ；③步態(tài)正常0 ；肌張力高1 ；爬行2 ；無(wú)步態(tài)3 ；④進(jìn)食有0 ；無(wú)1 ；⑤飲水有0 ；無(wú)1 ；⑥對(duì)痛刺激的反應(yīng)移動(dòng)/走動(dòng)0 ；頭/軀 干運(yùn)動(dòng)過(guò)強(qiáng)或反應(yīng)1 ；肢體回縮或無(wú)反應(yīng)2。小鼠連續(xù)灌胃給藥3天后進(jìn)行第1次TIA誘發(fā)。連續(xù)給藥3天為1周期，每周期進(jìn) 行一次TIA誘發(fā)及行為學(xué)評(píng)分，共3個(gè)周期，結(jié)果見(jiàn)表6。于第3次誘發(fā)TIA及評(píng)分后第2天 給藥Ih后，立即在冰盤(pán)中分離腦，把腦從矢狀線分開(kāi)成對(duì)稱的腦，一半迅速放入倒有10% 福爾馬林溶液的瓶子中浸泡固定，做海馬區(qū)組織病理切片；另一半放在濾紙上洗干凈上面 的血跡，然后用分析天平稱量其重量，根據(jù)此重量計(jì)算應(yīng)加入的冰冷的生理鹽水的量，以腦 組織(g)生理鹽水(ml) = 1 9的比例在低溫下用玻璃勻漿機(jī)進(jìn)行勻漿。4°C，3000r/ min離心lOmin。取上清液于_20°C以下低溫保存。制成10%的腦勻漿按測(cè)試盒說(shuō)明操作， 分別測(cè)定MDA.N0含量及NOS、SOD酶活力，結(jié)果見(jiàn)表7、表8、表9、表10和表11。2. 2試劑盒測(cè)定方法表1考馬斯亮蘭蛋白測(cè)定操作順序表
權(quán)利要求
1.一種治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊，其特征在于，該膠囊是由毛冬青總 黃酮、總皂苷以重量比10 5-7混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和輔料總重量和的 10-50%的輔料，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛冬青藥材加毛冬青 重量的10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣再加毛冬青 重量的8倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液，合并第一次和第二 次的藥液；將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得 毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70 %的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷，所述的輔料為微晶 纖維素，或淀粉，或硬脂酸鎂，或糊精的一種或兩種的混合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊，其特征在于，該 膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 5混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和 微晶纖維素總重量和的10%微晶纖維素，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是 取毛冬青800g藥材加10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。 藥渣再加8倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，合并第一次和第二次的藥 液；將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青 總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊，其特征在于，該 膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 6混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和 淀粉、硬脂酸鎂總重量和的10-20 %的淀粉、1 %的硬脂酸鎂，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的毛冬 青總黃酮、總皂苷是取毛冬青800g藥材加10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min， 提取lh，回收藥液。藥渣再加8倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，合并 第一次和第二次的藥液；將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙 醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊，其特征在于，該 膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10 7混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和 糊精總重量和的40% -50%的糊精，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的毛冬青總黃酮、總皂苷是取毛 冬青800g藥材加10倍量的質(zhì)量濃度為70%的乙醇，浸泡30min，提取lh，回收藥液。藥渣 再加8倍量的質(zhì)量濃度為70 %的乙醇，浸泡30min，提取lh，合并第一次和第二次的藥液； 將兩次的藥液PH調(diào)到4-5后上大孔樹(shù)脂；用質(zhì)量濃度為35%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總 黃酮，再用質(zhì)量濃度為70%的乙醇沖樹(shù)脂柱得毛冬青總皂苷。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療短暫性腦缺血發(fā)作的毛冬青皂酮膠囊?？捎行Ы鉀Q治療短暫性腦缺血發(fā)作的問(wèn)題。本發(fā)明膠囊是由毛冬青總黃酮、總皂苷以重量比10∶5-7混合在一起，加入毛冬青總黃酮、總皂苷和輔料總重量和的10-50％的輔料，裝入膠囊內(nèi)制成，所述的輔料為微晶纖維素，或淀粉，或硬脂酸鎂，或糊精的一種或兩種的混合。本發(fā)明組方簡(jiǎn)單，配伍科學(xué)合理，功效顯著，是毛冬青藥用價(jià)值上的創(chuàng)新。
文檔編號(hào)A61K9/48GK102058636SQ201110007099
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2011年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月13日
發(fā)明者白明, 苗明三, 苗艷艷 申請(qǐng)人:河南中醫(yī)學(xué)院