專利名稱：：麥角甾酮在制備治療慢性腎衰竭藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及麥角甾酮在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的用途，屬于醫(yī)藥
技術領域：
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背景技術：
：腎功能衰竭疾病的治療一直是困擾醫(yī)學界的難題。據(jù)國際腎臟病協(xié)會統(tǒng)計慢性腎功能衰竭在自然人群中的年發(fā)病率為98-198/100萬，經(jīng)濟發(fā)達國家發(fā)病率更高,美國和日本的發(fā)病率分別達802/100萬和996/100萬。在西方國家中，腎功能衰竭以繼發(fā)性因素為主要原因，已經(jīng)公認糖尿病和高血壓是兩大首位因素，糖尿病人中至少40%有腎臟疾病，高血壓病人中約50%有腎臟病。我國腎功能衰竭患者也在逐年遞增。馬兜鈴、關木通、廣防己、天仙藤(含馬兜鈴酸的中藥約200種)及大黃是常用中藥，但是服用它們會導致各種與腎臟有關的疾病，特別是慢性腎功能衰竭位居首位，引起醫(yī)學界的廣泛關注。目前，對慢性腎功能衰竭的治療，西藥有愛西特(藥用活性炭)；中藥有尿毒清顆粒、腎衰寧、血肌酐片等。西藥雖然有一定的療效，但毒副作用大，復發(fā)率高等缺點，如愛西特在初期是有效的，但后期反而會使病情加重，血肌酐、尿素氮居高不下，出現(xiàn)難以控制的癥狀,最終會發(fā)展為尿毒癥。中藥治療,效果緩慢，服用一個月甚至幾個月后才能感到是否有效，服用周期長，有的患者服藥長達幾年，長期服藥對胃的剌激很大，許多患者食欲下降，身體消瘦,療效難以肯定。當前醫(yī)藥界以及臨床上迫切需要解決的技術問題是提供一種治療慢性腎功能衰竭的無毒副作用、療效顯著的藥物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供麥角甾酮在制備治療慢性腎功能衰竭藥物中的新用途。麥角甾酮可以降低尿素氮、血肌酐，能改善腎功能、減少腺嘌呤代謝產(chǎn)物對腎臟的病理性損害具有較好保護作用，可為臨床提供一種新的治療由腺嘌呤、馬兜鈴酸及大黃等所致的慢性腎功能衰竭的藥物。具體實施例方式麥角甾酮是從中藥豬苓中提取分離得到的一種化合物，其也可以通過化學合成的方法，以麥角甾醇為底物合成麥角甾酮。麥角甾酮的提取分離工藝及有機合成工藝如下麥角甾酮提取分離工藝豬苓樣品經(jīng)過切片、千燥、粉碎后，用約5倍體積的75%乙醇浸泡24小時后，開始滲漉，回收甲醇,重新利用。濃縮得棕色膏狀物。膏狀物用75%乙醇溶解，用石油醚萃取3次,濃縮石油醚提取物得膏狀物。膏狀物溶于乙醇，用硅膠拌樣,上100-200目的硅膠柱，石油醚-乙酸乙酯(10:1)洗脫，收集餾分,合并，濃縮，最后溶于乙酸乙酯中，放置，析出結晶，過濾，得麥角甾酮純品。麥角甾酮的合成工藝i:將5.oog麥角甾醇溶于丙酮和二氯甲烷(體積比i:i)3混合液，然后將體積比為i:i:i的草酰氯、DMSO、三乙胺溶液30mi加入到ot;的麥角甾醇的丙酮和二氯甲烷溶液中，攪拌6h后，然后加入異丙醇，減壓回收丙酮和二氯甲烷，加蒸餾水有沉淀出現(xiàn)，放置，過濾，固體物進行干燥。取干燥的固體物和DDQ在丙酮中加熱回流3h,放置在(C的環(huán)境，過濾，減壓回收丙酮得到固體物，此固體物過100-200目氧化鋁柱，洗脫劑為正己烷_丙酮，最后得到1.9g麥角甾酮。麥角留酮的合成工藝2:將5.OOg麥角留醇溶于三氯甲烷，將IBX試劑(2-碘?；郊姿?30ml慢慢滴加到在0°C的麥角甾醇的三氯甲烷溶液，在0°C攪拌8h之后，然后加入異丙醇，減壓回收二氯甲烷，加蒸餾水有沉淀出現(xiàn),放置，過濾，固體物進行干燥。取干燥的固體物和DDQ在二氯甲烷中加熱回流6h，放置至室溫，過濾，減壓回收二氯甲垸得到固體物，此固體物100-200目硅膠柱，洗脫劑為苯-丙酮，最后得到1.4g麥角甾酮。有效成分用麥角甾酮制備治療慢性腎功能衰竭藥物以常規(guī)藥用制劑的形式來使用；所述的常規(guī)藥物用制劑含作為活性成分在制劑中與藥學上可接受的載體,如適宜于腸胃內(nèi)和腸胃外給藥的有機或無機的固體或液體賦形劑混合，該藥用制劑可以是固體形式如片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、顆粒劑，也可以是液體形式如注射劑、乳劑等。上述制劑中可含有輔助物質、穩(wěn)定劑、潤濕劑和其它常用的添加劑，如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、乙二醇、抗壞血酸、甘露醇等。上述的制劑可按照各種制劑常規(guī)的制備工藝制成。為了驗證麥角甾酮治療慢性腎功能衰竭的有益效果,發(fā)明人采用腺嘌呤所致慢性腎功能衰竭模型進行了藥效學試驗，各種試驗情況如下1、實驗藥物麥角留酮懸濁液，乳白色溶液，含2%的阿拉伯樹膠粉的生理鹽水配制。2、實驗動物雄性SD大鼠，體重190210g，由西安交通大學醫(yī)學院動物中心提供。合格證號陜醫(yī)動字第08005。3、實驗試劑腺嘌呤購于sigma公司(批號A8626-5g,純度>99%),阿拉伯樹膠粉購于上?；瘜W試劑采購供應站英國進口分裝。其它的血樣測定試劑有西安交通大學口腔醫(yī)院提供。4、實驗方法(1)模型建立及藥物治療試驗動物模型的制備與分組動物購置后適應環(huán)境一周，根據(jù)其體重、性別隨機分為水正常組、腺嘌呤模型組、腺嘌呤加麥角甾酮給藥組，每組均為8只。實驗期間動物自由飲水、攝食。實驗開始后，正常組以蒸餾水10ml*kg—1*d—'灌胃；腺嘌呤模型組以腺嘌呤200mg'kg—1*d—1灌胃；腺嘌呤加麥角甾酮給藥組，每天先以腺嘌呤200mgkg—1d—1灌胃，3個小時后，再以麥角甾酮20mg*kg1*d1灌胃。所有動物于實驗第12天、第24天置于代謝籠中，留取尿液進行蛋白定量測定，于最后一次留尿后活殺取血及心、肝、腎等組織進行生化測定、重量變化及病檢。定量測定麥角甾酮對腺嘌呤所致大鼠慢性腎功能衰竭的血液生化指標、腎指數(shù)、腎體積及胸腺、腎上腺指數(shù)、主要臟器指數(shù)及血液學指標，并作統(tǒng)計學分析。結果見表1、2、3、4。(2)檢測方法各種臟器用TD型電子天平，美特列_托利多十萬分之一分析天平并記錄。生化指標的測定委托西安交通大學口腔醫(yī)院完成。結果均以平均值±SD表示，采用t檢驗，計算t,P值,將模型組與空白組、麥角甾酮組與模型進行組間差異性比較，t檢驗，P<0.05為有顯著性差異，P<0.01為有非常顯著性差異，判斷藥物對腺嘌呤所致慢性腎功能衰竭的治療效果。(4)實驗結果A.以麥角甾醇為底物合成麥角甾酮，本實驗探索了2個合成路線，它們的產(chǎn)率分別為38%、28%。其中合成路線1產(chǎn)率高，且使用的試劑容易得到，合成所需的時間最短。減少有色的其它雜質的產(chǎn)生，易--匕柱分離純化。合成路線2的產(chǎn)物采用氧化鋁柱無法與其他的雜質分離,采用硅膠柱分離時需要經(jīng)過2次上柱才能夠得到麥角甾酮純品。B.病理學檢查正常組各動物腎臟大小適中、顏色鮮紅、表面光滑。模型組各動物腎臟明顯腫大，體積增大、顏色蒼白、表面凹凸不平，似人類的"大白腎"，個別動物腎體積較正常組可增大1倍以上。各腎均存在區(qū)域性腎單位萎縮、消失,纖維組織增生明顯及炎細胞浸潤。部分腎小管上皮細胞壞死、消失或擴張，甚至呈囊性。腎間質內(nèi)腎小球數(shù)目明顯減少，并可見大小不--、數(shù)量不等的棕褐色結晶或異物肉芽腫形成及粉染勻質的管型。上述病變與Yokozawa報道的類似。同時腎指數(shù)、腎長度和寬度顯著增大，心、脾及腎上腺指數(shù)顯著升高，它們與正常組比較明顯升高，存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異(P<0.01)。尿量與模型組比較也顯著增加。結果見表2，3。麥角甾酮組結果見表1，2。結果顯示麥角甾酮對此模型有對抗作用，表現(xiàn)為腎臟體積變小，顏色蒼白度減輕、腎指數(shù)、腎長度和寬度降低。同時，心、脾及腎上腺指數(shù)也減小，而且腎上腺指數(shù)與模型比較存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異，結果接近空白組。另外，尿量與模型組比較沒有變化,可能是麥角甾酮有促進利尿的影響造成的。C.生化指標的變化模型組從表3,4可見，血中尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)與正常組比較顯著升高。血紅細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積與正常組比較顯著降低，造成貧血狀態(tài)。白細胞顯著升高，血總膽固醇顯著升高，血甘油三酯顯著降低。均存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異(P<0.01)。麥角甾酮組觀察麥角甾酮對此模型動物的生化指標的影響，結果見表1,4。從表l可見，兩個衡量腎功能衰竭的重要指標尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)與模型組比較明顯下降，存在統(tǒng)計學....匕的顯著差異。甘油三酯與模型組比較明顯升高，甚至達到正常組的正常水平，存在統(tǒng)計學上的非常顯著差異(P<0.01)?？偰懝檀肌准毎c模型組比較降低。紅細胞、血紅蛋白、紅細胞壓積高于模型組。與模型組比較，這些生化指標的變化說明麥角甾酮能促進體內(nèi)的氮質化合物的排出，對腺嘌呤所致大鼠慢性腎功能衰竭有較好治療作用。5結論麥角甾酮在腺嘌呤所致漫性腎功能衰竭的大鼠體內(nèi)進行治療實驗。實驗結果表明凌角甾酮可以降低尿素氮(BL1N)、血肌酐(Scr)，統(tǒng)計學處理結果有非常顯著和顯著性差異治療作用(P<0.OIA05)。麥角甾酮能改善腎功能、減少腺嘌呤代謝產(chǎn)物對腎臟的病理性損害具有較鐘護作用?？蔀榕R床掛共一種新的治療由腺嘌呤、馬兜鈴紐大黃等所致的慢性腎功能衰竭的藥物。表1麥角甾酮對腺嘌呤所致大鼠慢性腎功能衰竭的腎指數(shù)、腎體積及胸腺、腎上5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>與正常組比較:*P<0.05，**P<0.01;與模型組比較AP<0.05,AAP<0.0權利要求麥角甾酮在制備治療慢性腎衰竭藥物中的應用。全文摘要本發(fā)明涉及麥角甾酮在制備治療慢性腎衰竭藥物中的應用。麥角甾酮可以降低尿素氮、血肌酐，能改善腎功能、減少腺嘌呤代謝產(chǎn)物對腎臟的病理性損害具有較好保護作用，本發(fā)明為臨床提供了一種新的治療由腺嘌呤、馬兜鈴酸及大黃等所致的慢性腎功能衰竭的藥物。文檔編號A61P13/12GK101785776SQ20101013783公開日2010年7月28日申請日期2010年4月2日優(yōu)先權日2010年4月2日發(fā)明者孫文基,謝人明,趙英永申請人:西北大學