專利名稱：一種白花蛇舌草多糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白花蛇舌草多糖的制備方法，尤其是一種從植物中提取白花蛇舌
草多糖的制備方法。
背景技術(shù)：
白花蛇舌草為茜草科植物白花蛇舌草01denlandia diffusa(Wilid. )Roxb.的全草，現(xiàn)收載于《中國藥典》2005年版(一部)附錄III(成方制劑中本版藥典未收載的藥材及飲片)，其性寒，味苦、甘，歸心、肝、脾經(jīng)，具有清熱解毒、利尿消腫、抗菌消炎等功效。臨床常用于腫瘤和自身免疫性疾病的治療，其中的多糖類物質(zhì)具有抗腫瘤、抗菌消炎和提高機體免疫等作用，是其重要的活性成分。 現(xiàn)有技術(shù)中記載了一些白花蛇舌草多糖的制備方法，如《白花蛇舌草多糖的提取純化工藝研究》[楊培民，等.齊魯藥事，2009，28(9) :549] —文中記載的方法白花蛇舌草藥材預(yù)先加12倍量水浸泡2h，加熱至7(TC，提取3次，每次1. 5h，采用鞣酸沉淀法聯(lián)合活性炭可有效去除多糖中的蛋白質(zhì)和色素等雜質(zhì)；《白花蛇舌草多糖除蛋白工藝研究》[劉志剛，等.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2008，26(10) :2283] —文中記載了白花蛇舌草多糖除蛋白的工藝白花蛇舌草多糖以1倍量5%三氯乙酸溶液除蛋白l次，靜置2h后離心。
現(xiàn)有技術(shù)在制備白花蛇舌草多糖的過程中往往存在長時間加熱、加入大量有機溶劑等問題，既不利于節(jié)能減排又有可能導(dǎo)致多糖鏈斷裂影響產(chǎn)品質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種能耗少、污染小、利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高的白花蛇舌草多糖的制備方法。 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案 取白花蛇舌草，加入其重量3-6倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分鐘，合并萃取液，濾過，通過大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫，收集3-8倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為5000-50000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃縮液加入乙醇使溶液含醇量達(dá)到70-90%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、
干燥即得。 微波萃取條件優(yōu)選為加入藥材重量5倍量蒸餾水，萃取功率450W，萃取2次，每
次5分鐘。 大孔吸附樹脂選自AB-8型、D101型、D102型大孔吸附樹脂中的一種。
蒸餾水洗脫液的收集量優(yōu)選為5倍量柱體積。
聚砜超濾膜的分子截留量優(yōu)選為30000道爾頓。
濃縮液加入乙醇使溶液達(dá)到的含醇量優(yōu)選為80%。 采用本發(fā)明制備白花蛇舌草多糖，大大縮短了加熱的時間，既節(jié)約了能耗又有利于糖鏈的保護(hù)；減少了有機溶劑的使用量，減小了污染；產(chǎn)品含量高。
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采用本發(fā)明制備所得白花蛇舌草多糖的含量測定方法如下
試驗l多糖含量測定 1. 1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取105t:干燥至恒重的D(+)-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 28. 0mg置于250mL量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為112 y g/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶 液。精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液O，O. l，O. 2，0. 4，0. 6，0. 8，1. OmL分別置具塞試管中，各加蒸餾水 至1. OmL再加5%苯酚溶液1. OmL搖勻后再加入濃硫酸5. OmL搖勻，室溫下放置5min，沸水 浴中恒溫15min，取出，水浴冷卻至室溫，以蒸餾水作為空白，在490nm處測吸光度。以吸光 度為縱坐標(biāo)，D (+)-無水葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算得回歸方程。
1. 2樣品含量測定取白花蛇舌草多糖0. 2g，精密稱定，置于lOOmL量瓶中，加蒸餾 水使溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取lmL置于10mL量瓶中加蒸餾水至刻度，搖勻，得白花 蛇舌草多糖供試品溶液，精密量取lmL置具塞試管中，按1. 1項下操作，測定吸光度值，計算 多糖提取粗品中多糖含量。 下面將結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不 局限于下列實施方式。
具體實施方式
實施例1 取白花蛇舌草，加入其重量3倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率 300W，萃取1次，每次3分鐘，合并萃取液，濾過，通過AB-8大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫， 收集3倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為5000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃縮 液加入乙醇使溶液含醇量達(dá)到70%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得白花蛇舌 草多糖112. 4g，按試驗1方法測得含量為87. 4% 。
實施例2 取白花蛇舌草，加入其重量6倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率 600W，萃取3次，每次10分鐘，合并萃取液，濾過，通過大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫，收集 8倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為50000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃縮液 加入乙醇使溶液含醇量達(dá)到90%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得白花蛇舌草 多糖100. 7g，按試驗1方法測得含量為91. 7% 。
實施例3 取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率 450W，萃取2次，每次5分鐘，合并萃取液，濾過，通過AB-8大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫， 收集5倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為30000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃 縮液加入乙醇使含醇量達(dá)到80%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得白花蛇舌草 多糖146. 8g，按試驗1方法測得含量為89. 3% 。
實施例4 取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率 450W，萃取2次，每次5分鐘，合并萃取液，濾過，通過D101大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫， 收集5倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為30000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃 縮液加入乙醇使含醇量達(dá)到80%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得白花蛇舌草
4多糖125. 3g，按試驗1方法測得含量為86. 6% 。
實施例3 取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率 450W，萃取2次，每次5分鐘，合并萃取液，濾過，通過D102大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫， 收集5倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為30000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃 縮液加入乙醇使含醇量達(dá)到80%，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得白花蛇舌草 多糖118. 8g，按試驗1方法測得含量為84. 1%。
權(quán)利要求
一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成取白花蛇舌草，加入其重量3-6倍量蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分鐘，合并萃取液，濾過，通過大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫，收集3-8倍量柱體積的洗脫液，通過分子截留量為5000-50000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃縮液加入乙醇使溶液含醇量達(dá)到70-90％，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述的微波萃取 條件為加入藥材重量5倍量蒸餾水，萃取功率450W，萃取2次，每次5分鐘。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述的大孔吸附 樹脂選自AB-8型、D101型、D102型大孔吸附樹脂中的一種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述蒸餾水洗脫 液的收集量為5倍量柱體積。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述聚砜超濾膜 的分子截留量為30000道爾頓。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種白花蛇舌草多糖的制備方法，其特征在于所述濃縮液加入 乙醇使溶液含醇量達(dá)到80% 。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡便、污染小、能耗少的白花蛇舌草多糖的制備方法。工藝步驟為取白花蛇舌草，加入蒸餾水，置微波萃取裝置中萃取，合并萃取液，濾過，通過大孔吸附樹脂吸附，蒸餾水洗脫，通過分子截留量為5000-50000道爾頓的聚砜超濾膜超濾、濃縮，濃縮液加入乙醇使溶液含醇量達(dá)到70-90％，靜置24小時，濾過，取濾渣，洗滌、干燥即得。采用本發(fā)明制備白花蛇舌草多糖，產(chǎn)品純度高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號A61P31/04GK101792493SQ201010132779
公開日2010年8月4日 申請日期2010年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月26日
發(fā)明者朱纓 申請人:蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院