專利名稱：一種強(qiáng)抗氧化活性的組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種仿刺參多肽(Apostichopus japonicus)和香菇 (Lentinulaedodes)多糖的組合物及其制備方法，特別是仿刺參多肽作為功能性食品在抗 氧化，延緩衰老方面的應(yīng)用；以及香菇多糖對仿刺參肽抗氧化活性的促進(jìn)作用和香菇多糖 本身在增強(qiáng)機(jī)體免疫力方面的功能。
背景技術(shù)：
生物體內(nèi)自由基可與DNA、蛋白質(zhì)和多不飽和脂肪酸作用，造成DNA鏈氧化性損 傷、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)交換、蛋白質(zhì)-DNA交聯(lián)和脂質(zhì)過氧化。脂質(zhì)過氧化是造成生物體氧化 損傷的主要原因，可以引發(fā)各種心血管疾病、癌癥與老化現(xiàn)象。仿刺參多肽具有較強(qiáng)的總抗氧化活性，分子量在500 3000Da范圍內(nèi)的多肽都具 有抗氧化性，能清除生物體內(nèi)自由基，保護(hù)生物體膜生物大分子免受損害，延緩衰老。而且， 仿刺參酶解液中還含有豐富的仿刺參多糖、仿刺參皂苷等多種生物活性物質(zhì)。刺參多糖主 要分為兩類一類是糖胺聚糖，即黏多糖；另一類是巖藻多糖，是由L-巖藻糖構(gòu)成的直鏈多 糖。刺參多糖具有抗凝血、抗癌、增強(qiáng)免疫力、延緩衰老、降血脂等功效；刺參的皂苷元為仿 刺參留烷醇，是仿刺參特有的皂苷元。刺參中還存在非仿刺參留烷醇三萜類苷元，主要為刺 參苷A、A1及C。刺參皂苷的主要活性有抗腫瘤及免疫調(diào)解、溶血作用、抗菌作用等；香菇多糖(Lentinan，LNT)是一種天然人體免疫調(diào)節(jié)劑，具有抗腫瘤、抗感染和調(diào) 節(jié)免疫力等作用。香菇浸提液中除了含有香菇多糖，還含有較為豐富的氨基酸，其中有組氨 酸、谷氨酸、丙氨酸等18種氨基酸，其中人體必需氨基酸就有7種。香菇中還含有香菇素、 膽堿、亞油酸、香菇多糖及30多種酶。這些營養(yǎng)成分對腦功能的正常發(fā)揮有重要的促進(jìn)作 用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明將海洋來源的仿刺參多肽與陸地來源的香菇多糖相結(jié)合提供了一種安全、 無毒副作用的強(qiáng)抗氧化活性的組合物。本發(fā)明采用南京建成生物工程研究所試劑盒(T-AOC)測定酶解液總抗氧化活性。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)木瓜蛋白酶水解后的仿刺參酶解液抗氧化活性明顯增強(qiáng)，由最初的10. 08單位/ mg蛋白增至27. 59單位/mg蛋白；將無抗氧化活性的香菇多糖浸提液按照不同比例和仿刺 參酶解液混合后，組合物的抗氧化活性進(jìn)一步提升，當(dāng)仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液質(zhì) 量比為1 100時(shí)，抗氧化活性達(dá)到最高值84. 09單位/mg蛋白，相應(yīng)對照組的抗氧化活性 則為47. 54單位/mg蛋白。研究結(jié)果表明木瓜蛋白酶水解可以增強(qiáng)仿刺參的抗氧化活性， 而香菇多糖浸提液又可進(jìn)一步增強(qiáng)仿刺參酶解產(chǎn)物的抗氧化活性。本發(fā)明可用于具有增強(qiáng) 機(jī)體抗氧化活性、延緩衰老的功能性食品的開發(fā)。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種強(qiáng)抗氧化活性的組合物，包括仿刺參多肽和香菇多糖，它們間質(zhì)量比是
31 1-100 ；最好為 1 6-32。所述仿刺參多肽為仿刺參的蛋白酶酶解液(又可稱之為仿刺參酶解液)，按照下 述方法制備仿刺參勻漿后加1-5倍質(zhì)量的水調(diào)pH4. 8-6. 2，加入仿刺參質(zhì)量的木瓜 蛋白酶，50-70°C酶解2-5h，85-100°C水浴15_30min，降至室溫后4000r/min離心15min，取 上清液為仿刺參酶解液；所述香菇多糖為香菇水的浸提液(又可稱之為香菇多糖浸提液)，按照下述方法 制備的干燥香菇粉碎后加入20-50倍質(zhì)量的水，80-100°C水浴浸提100-200min，過濾，濾 液即為香菇多糖浸提液；仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液體積比是1 0.1-5;最好為1 0.25-4。所述組合物配制時(shí)，將上述二種物質(zhì)按不同比例混合均勻即可。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是將來源于海八珍之一的仿刺參與來源于陸地的被稱為“植物皇 后”的香菇結(jié)合作為保健食品，具有較好的抗氧化活性。本發(fā)明將仿刺參多肽的多種保健功能(易消化吸收，生物效價(jià)高；抗氧化，延緩衰 老；降血壓，預(yù)防心腦血管疾病抗疲勞，增強(qiáng)體力；提高免疫力，抗腫瘤等)，與香菇多糖的 多種保健功能(提高人體免疫力，抗癌；緩解便秘、消化不良癥等)有效地結(jié)合，使海洋來源 的仿刺參多肽與陸地來源的香菇多糖的保健功能達(dá)到互進(jìn)互補(bǔ)的作用。尤其是，香菇多糖 在仿剌參多肽總抗氧化活性方面的促進(jìn)作用相當(dāng)明顯，為開發(fā)具有增強(qiáng)機(jī)體抗氧化活性、 延緩衰老的功能性食品提供了依據(jù)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明實(shí)施例中木瓜蛋白酶采用國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，酶活性 彡6000，ρΗ4· 8-6. 2，水分彡6. 0% ；仿刺參、香菇購于煙臺(tái)本地。所述的仿刺參多肽(即實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液)是按照下述方法制備的仿刺參勻 漿后加3倍質(zhì)量的水，并調(diào)ρΗ5. 5，加入2%仿刺參質(zhì)量的木瓜蛋白酶，55°C酶解:3h，90°C水 浴15min，降至室溫后4000r/min離心15min，取上清液得實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液。實(shí)驗(yàn)組仿 刺參酶解液蛋白量為89. 87 μ g/ml。對照組仿刺參酶解液仿刺參勻漿后加3倍質(zhì)量的水，并調(diào)pH5. 5，加入2%仿刺參 質(zhì)量經(jīng)高溫滅活的木瓜蛋白酶，55°C酶解:3h，90°C水浴15min，降至室溫后4000r/min離心 15min，取上清液得對照組仿刺參酶解液。對照組仿刺參酶解液蛋白含量為212. 9μ g/ml。所述香菇多糖是按照下述方法制備的干燥香菇粉碎后加入30倍質(zhì)量的水， 90°C水浴浸提150min，過濾，濾液即為香菇多糖浸提液。香菇多糖浸提液中多糖含量為 2962 μ g/ml。實(shí)施例1分別取實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液和對照組仿刺參酶解液，以及香菇多糖浸提液，采用 南京建成生物工程研究所試劑盒(T-AOC)測定酶解液總抗氧化活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液總抗氧化活性為27. 59單位/mg蛋白；對照組仿刺參酶解液總抗氧化活性為10. 08單位/mg蛋白，木瓜蛋白酶水解產(chǎn)物 可顯著提高仿刺參的抗氧化活性。而香菇多糖浸提液總抗氧化活性則幾乎為0。
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實(shí)施例2取細(xì)1實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液和Iml香菇多糖浸提液混合。此時(shí)測得實(shí)驗(yàn)組混合 液中蛋白含量為99.36口8/1111，多糖含量592.4口8/1111(質(zhì)量比為1 6)。參照實(shí)例1方法 測定抗氧化活性。結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液4 1混合物總抗氧化活性為 35. 02單位/mg蛋白；同樣取細(xì)1對照組仿刺參酶解液和Iml香菇多糖浸提液混合.此時(shí)測得混合液 中蛋白含量為218.22“8/1111，多糖含量592.4“8/1111(質(zhì)量比為1 2.7)。參照實(shí)例1方 法測定抗氧化活性。結(jié)果表明對照組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液4 1混合物總抗氧化活性為 13. 93單位/mg蛋白；實(shí)施例3取2. 5ml實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液和2. 5ml香菇多糖浸提液混合。此時(shí)測得實(shí)驗(yàn)組 混合液中蛋白含量為107. 88 μ g/ml，多糖含量1481 μ g/ml (質(zhì)量比為1 13.7)。參照實(shí) 例1方法測定抗氧化活性。結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液1 1混合物總抗氧化活性為
47.54單位/mg蛋白；同樣取細(xì)1對照組仿刺參酶解液和Iml香菇多糖浸提液混合.此時(shí)測得混合液 中蛋白含量為180. 7 μ g/ml，多糖含量1481 μ g/ml (質(zhì)量比為1 8.2)。參照實(shí)例1方法 測定抗氧化活性。結(jié)果表明對照組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液1 1混合物總抗氧化活性為 26. 64單位/mg蛋白。實(shí)施例4取1. Oml實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液和4. Oml香菇多糖浸提液混合。此時(shí)測得實(shí)驗(yàn)組 混合液中蛋白含量為73. 73 μ g/ml，多糖含量2369. 6 μ g/ml (質(zhì)量比為1 32)。參照實(shí)例 1方法測定抗氧化活性。結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液1 1混合物總抗氧化活性為 84. 09單位/mg蛋白；同樣取1. Oml對照組仿刺參酶解液和4. Oml香菇多糖浸提液混合.此時(shí)測得混 合液中蛋白含量為120. 38 μ g/ml，多糖含量2369. 6 μ g/ml (質(zhì)量比為1 19.7。參照實(shí)例 1方法測定抗氧化活性。結(jié)果表明對照組仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液1 4混合物總抗氧化活性為
48.7單位/mg蛋白。
權(quán)利要求
1.一種強(qiáng)抗氧化活性的組合物，其特征在于包括仿刺參多肽和香菇多糖，它們質(zhì)量 比是 1 1-100。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于仿刺參多肽和香菇多糖的質(zhì)量比是 1 6-32。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于所述仿刺參多肽為仿刺參的蛋白酶酶解液，按照下述方法制備仿刺參勻漿后加 1-5倍質(zhì)量的水調(diào)pH4. 8-6. 2，加入1_3 %仿刺參質(zhì)量的木瓜蛋白酶，50_70°C酶解2_5h， 85-100°C水浴15-30min，降至室溫后離心，取上清液為仿刺參酶解液；所述香菇多糖為香菇水的浸提液，按照下述方法制備的干燥香菇粉碎后加入20-50 倍質(zhì)量的水，85-120°C水浴浸提100-200min，過濾，濾液即為香菇多糖浸提液；仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液體積比是1 0.1-5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液體積 比是 1 0. 25-4。
5.一種權(quán)利要求1所述組合物可用于制備具有增強(qiáng)機(jī)體抗氧化活性延緩衰老的功能 性食品或藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種強(qiáng)抗氧化活性的組合物，包括仿刺參多肽和香菇多糖，它們間的質(zhì)量比是1∶1-100。采用南京建成生物工程研究所試劑盒(T-AOC)測定酶解液總抗氧化活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)木瓜蛋白酶水解后的仿刺參酶解液抗氧化活性明顯增強(qiáng)，由最初的10.08單位/mg蛋白增至27.59單位/mg蛋白；將無抗氧化活性的香菇多糖浸提液按照不同比例和仿刺參酶解液混合后，組合物的抗氧化活性可進(jìn)一步提升。當(dāng)仿刺參酶解液與香菇多糖浸提液體積比為1∶4時(shí)，抗氧化活性達(dá)到最高值84.09單位/mg蛋白，相應(yīng)對照組的抗氧化活性則為47.54單位/mg蛋白。研究結(jié)果表明木瓜蛋白酶水解可以增強(qiáng)仿刺參的抗氧化活性，而香菇多糖浸提液又可進(jìn)一步增強(qiáng)仿刺參酶解產(chǎn)物的抗氧化活性。本發(fā)明可用于具有增強(qiáng)機(jī)體抗氧化活性、延緩衰老的功能性食品的開發(fā)。
文檔編號(hào)A61K38/02GK102100324SQ20091025570
公開日2011年6月22日 申請日期2009年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月18日
發(fā)明者夏傳海, 李成華, 秦松, 陳愛芹 申請人:煙臺(tái)海岸帶可持續(xù)發(fā)展研究所