專利名稱：冬凌草乙素高度分散制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種冬凌草乙素高度分散制劑。
背景技術(shù)：
冬凌草乙素是從冬凌草中提取的一種烯類二萜。冬凌草又名冰凌草，具有清熱解 毒、消炎止痛之功效，產(chǎn)于我國(guó)河南、河北、山西、四川等地，也是民間治療食管癌和胃癌的 一種草藥。1991年我國(guó)衛(wèi)生部批準(zhǔn)將冬凌草干燥葉及地上部分作為中藥材，收入部頒中藥 材標(biāo)準(zhǔn)。我國(guó)從二十世紀(jì)70年代起對(duì)冬凌草的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用開始研究， 并提取得到冬凌草乙素。 體內(nèi)外抗癌實(shí)驗(yàn)表明，冬凌草乙素對(duì)很多癌細(xì)胞系都有明顯的抑制殺滅作用。 冬凌草乙素對(duì)休外培養(yǎng)的艾氏腹水癌腹水型細(xì)胞有明顯細(xì)胞毒性，其50%抑制濃度為 0. 5ii g/ml。冬凌草乙素對(duì)多種移植性腫瘤有抑制作用，它對(duì)小白鼠艾氏腹水癌，S180肝癌 及L1型腹水型癌均有明顯抗腫瘤作用，使存活期明顯延長(zhǎng)，并使部分動(dòng)物長(zhǎng)期存活，對(duì)網(wǎng) 織細(xì)胞肉瘤及肝癌實(shí)體型亦有明顯抗腫瘤作用(張覃沐等，冬凌草乙素藥理作用之研究， 河南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1979， (1) :10 ;張覃沐等，冬凌草中又一抗腫瘤有效成份-冬凌草乙素，科 學(xué)通報(bào)，1980， (22) :1051)。 冬凌草乙素能以時(shí)間、劑量方式顯著抑制人骨髓瘤細(xì)胞系K562和HL-60細(xì)胞的增 殖并誘導(dǎo)凋亡。用冬凌草乙素處理細(xì)胞48 72h后，可以清楚地觀察到細(xì)胞凋亡。凋亡發(fā)生 時(shí)，caspase-3酶原蛋白(32X 103)分裂出17X 103亞單位，同時(shí)相對(duì)分子質(zhì)量為116X103 的PARP分裂產(chǎn)生89X 103組分。冬凌草乙素處理細(xì)胞24 48h后，Bcl-2表達(dá)下調(diào)而Bax 表達(dá)上調(diào)(Liu JJ，et al.Oncol R印，2005， 13 (4) :653)。冬凌草乙素顯著抑制人肝癌細(xì)胞 系QGY-7701和H印G-2細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡，其機(jī)制是Survivin和Bcl_2表達(dá)下調(diào)及Bax 表達(dá)上調(diào)(Zhang JF， et al. Dig Liver Dis， 2007， 39 (2) :160)。 冬凌草乙素為白色結(jié)晶性粉末，不溶于水，溶于乙醇等溶劑。如果采用冬凌草乙素 乙醇溶液靜脈注射，大量乙醇對(duì)人體產(chǎn)生一定剌激，產(chǎn)生靜脈炎等炎癥反應(yīng)，影響了患者適 應(yīng)性，有時(shí)會(huì)很難給藥。 藥物制劑的劑型有很多種，如常用的片劑、膠囊、微丸、混懸液等，但高度分散制劑 對(duì)于脂溶性藥物的給藥有特殊優(yōu)勢(shì)。高度分散制劑包括脂質(zhì)體、非離子表面活性劑泡囊、微 粒、納米粒、乳劑、膠束、納米凝膠、固體分散制劑等。 脂質(zhì)體(Liposomes)是一種由磷脂雙分子層構(gòu)成的泡囊(Vesicles)，是一種可 以在水溶液中高度分散的傳遞系統(tǒng)，可以作為很多種藥物的載體。它的高度分散性使其在 體內(nèi)具有耙向、緩釋等效果，口服具有淋巴趨向性，較易攜帶藥物穿越血腦屏障，容易通過 融合、內(nèi)吞等途徑進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)(basic DD肌d P即ahadjopoulos D丄iposomes revisited. Science, 1995， 267 :1275)。修飾后的磷脂組成的脂質(zhì)體還可以有體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)、溫度靶向、 pH靶向、磁靶向、主動(dòng)靶向等功能。脂質(zhì)體的局部(眼、鼻、皮膚)給藥有生物相容性好、促 進(jìn)藥物滲透的作用。脂質(zhì)體還是生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究領(lǐng)域中經(jīng)常使用的一種轉(zhuǎn)染試劑，現(xiàn)在還是基因治療的一禾中重要載體(Kikuchi H， et al. Genedelivery using liposome technology. J Controlled Rel，1999，62 :269)。 脂質(zhì)體泡囊的磷脂雙分子層膜將內(nèi)部包裹的水相和外部水相隔開，雙分子層內(nèi)呈 疏水性。藥物根據(jù)其物理化學(xué)性質(zhì)的不同分別包裹在內(nèi)水相或膜中。 一般地，水溶性藥物 在內(nèi)水相中；脂溶性藥物在膜層中。脂質(zhì)體的制備是磷脂分子在水中自組裝的過程，內(nèi)外水 相的體積比例不能很大。這些因素決定了大部分水溶性藥物的包裹率較低(<50%)，有 時(shí)還會(huì)很低(<5%)，并且包裹的藥物有滲漏到外水相的可能。如果有合適的脂溶性基團(tuán) (如脂肪鏈)，脂溶性藥物分子就可插入到磷脂雙分子層中，結(jié)合比較牢固，藥物分子不容 易脫掉，所以藥物的包裹率較高。因此為了增加某些水溶性藥物在脂質(zhì)體中的包裹率，人們 往往采用了制備成帶有長(zhǎng)脂肪鏈的脂溶性前體藥物的方式(Gulati M， et al. Lipophilic drug derivatives in liposomes. Int J Pharm，1998，165 :129)。 非離子表面活性劑泡囊(Niosomes)是指某些非離子表面活性劑(如司盤60) 在一定條件下在水中自組裝成泡囊結(jié)構(gòu)，類似脂質(zhì)體。它同樣可以作為藥物載體，具有 類似月旨質(zhì)體的一些體內(nèi)夕卜特征(Uchegbu IF， Vyas SP. Non—ionic surfactant based vesicles (niosomes)in drug delivery. Int J Pharm，1998，172 :33-70)。
微粒(Microparticles) —般指粒徑在微米級(jí)的粒子，范圍可從1微米到1000微 米。由于其高度分散性，在體內(nèi)可產(chǎn)生黏附，高的表面積也有助于藥物特別是脂溶性藥物 的溶出，也會(huì)g產(chǎn)生控釋效果(Hombreiro-Perez M， et al. Non_degradable microparticles conteining a hydrophilic and/or a lipophilic drug-preparation,characterization and drug release modeling. J Controlled Rel，2003，88 :413-428)。微球(Microspheres) 一般指藥物溶解或分散在基質(zhì)中的微粒(Freiberg S，Zhu XX. Polymer microspheres for controlled drug release. Int JPharm， 2004， 282 :1-18)。將固體藥物或液體藥物作囊 心物包裹而成藥庫型微小膠囊稱微囊(Microcapsules)(陸彬主編.藥物新劑型與新技 術(shù).北京人民衛(wèi)生出版社，1998)。 納米粒(Nanoparticles) —般指是納米級(jí)分散的固體粒子，由于其高度分散性， 它作為藥物載體有提高藥物生物利用度、增強(qiáng)靶向性等特點(diǎn)。固體脂質(zhì)納米粒(SLN)采 用人體相容的脂質(zhì)材料作為主要輔料形成納米粒，具有普通納米粒的特點(diǎn)和生物相容性 好的特點(diǎn)，近年來研究較多。納米囊(Nanocapsules)特指藥物包裹在成膜材料中形成 的纟內(nèi)米粒子，同樣具有纟內(nèi)米粒的體內(nèi)夕卜特點(diǎn)(Kreuter J. Nanoparticles—a historical perspective. Int J Pharm，2007，331 :1-10)。 乳劑(emulsions)系指互不相溶的兩相液體混合，其中一相液體以液滴狀態(tài)分散 于另一相中形成的非均勻相液體分散體系。乳劑液滴大小一般在0. 1 10微米之間。乳 劑中的液滴分散度很大，藥物吸收和藥效的發(fā)揮很快，有利于提高生物利用度；脂溶性藥 物制成乳劑能保證劑量準(zhǔn)確，而且使用方便；靜脈注射乳劑注射后分布較快、藥效高、有靶 向性；靜脈營(yíng)養(yǎng)乳劑可以提供高能量?？诜閯┤菀妆涣馨拖到y(tǒng)攝取，靜脈注射乳劑在體 內(nèi)可以被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬(如肝、脾、腎)，具有靶向性。因此乳劑是抗癌藥物常采用的 劑型，如鴉膽子油乳、氟尿嘧啶乳劑、康萊特注射液等。乳劑中的油脂還可以提供一定營(yíng)養(yǎng) 能量。納米乳(Nanoemulsions)是指粒徑在200納米以下的乳滴組成的體系，可以將脂溶 性藥物包裹在乳滴中。由于其高度分散性，它作為藥物載體同樣有提高藥物生物利用度、增強(qiáng)耙向性等特點(diǎn)。而微乳(Microemulsions)是指粒徑在100納米以下的乳滴組成的 體系，同樣具有納米乳的特點(diǎn)。(Solans C， et al.Nano_emulsions.Curr Opin Colloid Interface Sci，2005，10 :102-110 ;Kawakami K， et al. Microemulsion formulation for enhancedabsorption of poorly soluble drugs II. In vivo study. J Controlled Rel， 2002,81 :75-82) 膠束(Micelles)對(duì)藥物，特別是脂溶性藥物有很好的增溶作用，可用作藥物傳遞 系統(tǒng)(Rangel-Yagui C0，et al.Micellar solubilization of drugs. J PharmPharmaceut Sci，2005，8 :147-163)。近年來，聚合物膠束作為傳遞系統(tǒng)的作用越來越受到重視 (Torchilin VP.Micellar nanocarriers :Pharmaceuticalperspectives. Pharm Res， 2007,24 :1-16)。 納米凝膠(Nanogels)是近年來開始被研究的 一種納米傳遞系統(tǒng)，藥物包裹 在內(nèi)部，并顯示出纟內(nèi)米粒子的體內(nèi)夕卜特點(diǎn)(Xu D—M， et al. Size—d印endentproperties of M_PEIs nanogels for gene delivery in cancer cells.Int J Pharm，2007，338 : 291-296)。 固體分散體指藥物以微粒、微晶或分子狀態(tài)等形式均勻分散在固態(tài)載體物質(zhì)中的 體系。固體分散體能夠增加一些難溶性藥物的溶解度和釋放速度、提高口服生物利用度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)將冬凌草乙素制備成高度分散制劑后，具有突出的優(yōu) 勢(shì)。由于高度分散制劑的特點(diǎn)，冬凌草乙素可以充分發(fā)揮其治療特點(diǎn)，例如增強(qiáng)藥物的生物 利用度、緩控釋、靶向等，根據(jù)具體劑型和處方組成呈現(xiàn)不同的特點(diǎn)。因此本發(fā)明人設(shè)計(jì)了 本發(fā)明。 本發(fā)明中的冬凌草乙素高度分散制劑，其粒子成高度分散狀態(tài)，一般地粒子直徑 小于1000微米，優(yōu)選的粒子直徑小于100微米，更優(yōu)選的粒子直徑小于1微米，進(jìn)一步優(yōu)選 的是小于0. 5微米，更進(jìn)一步優(yōu)選的是小于0. 2微米。高度分散制劑一般以水性分散液的 形式存在并給藥，也可以經(jīng)過適當(dāng)處理如干燥過程獲得固態(tài)或半固態(tài)形式。高度分散制劑 的劑型選自脂質(zhì)體、非離子表面活性劑泡囊、微粒、納米粒、乳劑、膠束、納米凝膠、固體分散 體制劑，優(yōu)選自脂質(zhì)體、納米粒、乳劑、固體分散體制劑。高度分散制劑根據(jù)其具體組成和給 藥途徑，在體內(nèi)會(huì)表現(xiàn)出促吸收、耙向、緩釋或控釋等作用。 本發(fā)明中冬凌草乙素乳劑，其粒子大小沒有限制，優(yōu)選自微乳或納米乳。本發(fā)明中 冬凌草乙素膠束，優(yōu)選的是聚合物膠束。 冬凌草乙素脂質(zhì)體制備方法可參考相關(guān)文獻(xiàn)和專業(yè)技術(shù)(如New RRCed. Liposome :a practical approach. Oxford :0xford University Press, 1990 ;鄧英杰.月旨 質(zhì)體技術(shù).北京人民衛(wèi)生出版社，2007)，包括薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、注入法、冷凍干燥 法、凍融法等。 一般地，如果采用薄膜分散法制備脂質(zhì)體，可以將冬凌草乙素與磷脂等膜材 共同溶于有機(jī)溶劑，盛入燒瓶中，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層薄膜，然后加入水或適當(dāng)緩沖液， 進(jìn)行振蕩和超聲，直至形成均勻的混懸液。如果超聲時(shí)間延長(zhǎng)，還可能得到納米級(jí)分散系 統(tǒng)。如果采用反相蒸發(fā)法制備脂質(zhì)體，可以將冬凌草乙素與磷脂等膜材共同溶于有機(jī)溶劑， 加入水或緩沖液，高速攪拌或超聲制備成乳劑，然后減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到凝膠態(tài)物質(zhì)，然后加入水或適當(dāng)緩沖液或不加，繼續(xù)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，直至形成均勻的脂質(zhì)體混懸液。脂質(zhì)體混 懸液還可以選擇適當(dāng)處方并在適當(dāng)條件下進(jìn)行冷凍干燥或噴霧干燥，形成固態(tài)，這樣可以 保證制劑的穩(wěn)定性，臨用前加入水溶液振搖即可得到脂質(zhì)體混懸液。運(yùn)用相近的技術(shù)可以 獲得冬凌草乙素非離子表面活性劑泡囊。選擇合適的處方和工藝就可以得到較理想的冬凌 草乙素脂質(zhì)體和非離子表面活性劑泡囊。 冬凌草乙素微粒包括微球和微囊。微球的制備方法可參考相關(guān)文獻(xiàn)和專業(yè)技術(shù)。 一般地，可將藥物與聚合物共同溶于有機(jī)溶劑中，然后利用0/W乳化法制備得到微球。還 有很多其他制備微球的方法，在許多文獻(xiàn)中都可以找到(如Freiberg S， Zhu XX. Polymer microspheres for controlled drug release. IntJ Pharm， 2004， 282 :1-18)，包括單體聚 合法、溶劑揮發(fā)法、噴霧干燥法。微囊的制備方法包括相分離法、液中干燥法、噴霧干燥法等
(如陸彬主編.藥物新劑型與新技術(shù).北京人民衛(wèi)生出版社，1998)。選擇合適的處方和 工藝就可以得到較理想的冬凌草乙素微粒。 冬凌草乙素納米粒制備方法有很多種，文獻(xiàn)也很多，根據(jù)納米粒的材料和要求不 同，可參考相關(guān)文獻(xiàn)和專業(yè)技術(shù)。 一般地，聚合物納米粒的制備方法包括聚合法、沉淀法、溶 劑揮發(fā)法、鹽析法；固體脂質(zhì)納米粒(SLN)的制備方法包括高壓乳勻法、微乳法、溶劑揮發(fā) 法；無機(jī)納米粒的制備方法包括沉淀法。納米囊的方法一般地包括單體界面聚合法和聚合 物界面納米沉積法。冬凌草乙素納米粒混懸液還可以選擇適當(dāng)處方并在適當(dāng)條件下進(jìn)行冷 凍干燥或噴霧干燥，形成固體粉末狀，這樣可以保證制劑的穩(wěn)定性，臨用前加入水溶液振搖 即可得到納米?；鞈乙骸＿x擇合適的處方和工藝就可以得到較理想的冬凌草乙素納米粒。
固體脂質(zhì)納米粒作為冬凌草乙素納米粒劑型的優(yōu)選。 一般地，將冬凌草乙素與常 溫下為固態(tài)的脂質(zhì)，如磷脂、脂肪酸、甘油酯，共同加熱熔融，然后加入水或適當(dāng)緩沖液，在 加熱情況下在高壓乳勻機(jī)上循環(huán)乳化多次，形成納米分散的乳滴，迅速冷卻，使之固化，即 得到冬凌草乙素固體脂質(zhì)納米粒。用微乳法也可制得冬凌草乙素固體脂質(zhì)納米粒。
冬凌草乙素乳劑制備方法可參考相關(guān)文獻(xiàn)和專業(yè)技術(shù)(如陸彬主編.藥物新 劑型與新技術(shù).北京人民衛(wèi)生出版社，1998)。 一般地，需要添加乳化劑、油相，采用各 種乳化設(shè)備(如電動(dòng)攪拌器、膠體磨、超聲波乳化器、高速攪拌器、高壓乳勻機(jī))進(jìn)行分散 制得。選擇適當(dāng)處方后，乳劑還可以干燥形成干乳，臨用前配置重新形成乳劑。設(shè)計(jì)適 當(dāng)處方后，還可以制備得到自乳化系統(tǒng)(如Gursoy RN， et al. Self-emulsifying drug delivery systems(SEDDS)for improved oral delivery of lipophilic drugs. Biomed Pharmacother，2004，58 :173-182)。納米乳和微乳是較特殊的乳劑。納米乳的粒徑主要分 布在200nm以下；而微乳的粒徑主要分布在lOOnm以下。冬凌草乙素納米乳制備參考相應(yīng) 文獻(xiàn)(如Solans C， et al.Nano_emulsions.Curr Opin Colloid Interface Sci，2005， 10:102-110)。冬凌草乙素微乳制備可以參考相應(yīng)文獻(xiàn)。 一般地，在微乳中包括乳化劑、助
乳化劑、助溶劑、油相、水相、藥物。 一般在選擇合適的處方后，即可容易地形成微乳。如果 選擇合適的處方，一般包括乳化劑、助乳化劑、助溶劑、油相，還可以組成自微乳化系統(tǒng)，在 加入適量水溶液后，系統(tǒng)可以自行分散成微乳。選擇合適的處方和工藝就可以得到較理想 的冬凌草乙素乳劑。 本發(fā)明中的冬凌草乙素乳劑中含有0.01% 20% (重量)的冬凌草乙素，5% 60% (重量)的油脂，0.5% 30% (重量)的乳化劑；優(yōu)選的是含有O. 1% 10% (重量)的冬凌草乙素，5% 50% (重量)的油脂，1% 20% (重量)的乳化劑；更優(yōu)選的是含有 1% 5% (重量)的冬凌草乙素，10% 40% (重量)的油脂，2% 10% (重量)的乳化 劑。 冬凌草乙素膠束制備可以參考相應(yīng)文獻(xiàn)。聚合物膠束在本發(fā)明中作為優(yōu)選，其 制備方法參考相應(yīng)文獻(xiàn)(如Torchilin VP.Micellar nanocarriers-Pharmaceutical perspectives. Pharm Res， 2007， 24 :1-16)， 一般地包括透析法、乳化法、薄膜分散法。選擇 合適的處方和工藝就可以得到較理想的冬凌草乙素膠束。 冬凌草乙素納米凝膠制備可以參考相應(yīng)文獻(xiàn)(如Shin Y，et al. Hybridnanogels for sustainable positive thermosensitive drug release. J Controlled Rel，2001， 73 :1-6)。 一般采用具有兩親性的共聚物分散在水中形成。 冬凌草乙素固體分散體制劑中的冬凌草乙素固體分散體的成分包括冬凌草乙素 和作為載體的輔料。其中輔料選自能和冬凌草乙素混合均勻的各種輔料，優(yōu)選自水溶性輔 料、胃溶性輔料、腸溶性輔料，更優(yōu)選自水溶性輔料。水溶性輔料選自聚乙二醇類化合物、 聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類化合物、糖類化合物、醇類化合物、有機(jī)酸類化合物、表面活性 劑。聚乙二醇類化合物選自分子量大于1000的聚乙二醇，具體如聚乙二醇1500、聚乙二 醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚乙二醇12000，優(yōu)選自聚乙二醇1500、聚乙二醇 4000、聚乙二醇6000。聚乙烯吡咯烷酮類化合物選自聚乙烯吡咯烷酮K15、聚乙烯吡咯烷酮 K30、聚乙烯吡咯烷酮K90。纖維素類化合物選自甲基纖維素、羥丙甲纖維素。糖類化合物 選自右旋糖、半乳糖、葡萄糖、葡聚糖、蔗糖、乳糖、果糖、木糖。醇類化合物選自甘露醇、山梨 醇、木糖醇、肌醇、乳糖醇、麥芽糖醇、聚乙烯醇。有機(jī)酸類化合物選自檸檬酸、酒石酸、琥珀 酸、順丁烯二酸、膽酸、脫氧膽酸、蘋果酸。表面活性劑選自泊洛沙姆、賣澤、磷脂、蔗糖脂肪 酸酯。胃溶性輔料選自聚丙烯酸樹脂IV號(hào)和相應(yīng)的優(yōu)特奇(Eudragit)系列中的胃溶性聚 丙烯酸樹脂，如Eudragit E 100。腸溶性輔料選自可在腸內(nèi)溶解的材料，具體選自羥丙甲 纖維素酞酸酯、羥丙甲纖維素酞酸酯、醋酸纖維素酞酸酯、醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯、聚 丙烯酸樹脂II號(hào)、聚丙烯酸樹脂III號(hào)、Eudragit L和S系列聚丙烯酸樹脂。上述輔料可 單獨(dú)使用，也可混合使用。固體分散體的制備方法根據(jù)不同材料組合可以選自熔融法、溶劑 法、溶劑-熔融法、溶劑-噴霧(冷凍)干燥法、研磨法。采用參考公開資料或用本專業(yè)領(lǐng) 域現(xiàn)有的常規(guī)技術(shù)可獲得滿意的冬凌草乙素固體分散體。冬凌草乙素固體分散體制劑的劑 型選自片劑、膠囊劑、顆粒劑、干混懸劑、滴丸劑。 本發(fā)明中冬凌草乙素高度分散制劑，如果其組成或表面吸附有高度親水的分子 或分子片斷，由于在體外環(huán)境或體內(nèi)環(huán)境可以形成親水性保護(hù)層，可以阻滯粒子間的聚合 或在體內(nèi)阻滯調(diào)理化作用而獲得長(zhǎng)循環(huán)效果。常用的親水性分子或分子片斷是聚乙二醇 (PEG)。在本發(fā)明中，可以采用添加帶有聚乙二醇鏈的脂肪類衍生物如聚乙二醇化磷脂、聚 乙二醇化膽固醇、聚山梨酯的方法制備得到表面親水的冬凌草乙素的高度分散制劑。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l、冬凌草乙素fl旨質(zhì)體 取冬凌草乙素(20mg)、大豆磷脂(0. 15g)于200ml燒瓶中，用15ml 二氯甲烷溶解， 減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層有機(jī)脂溶性膜，加入pH7.4的磷酸鹽緩沖液10ml，振蕩，大部分膜
7脫落，熱水浴超聲，直至得到均勻混懸液，顯微鏡下觀察，大部分粒子直徑小于5微米，即為 冬凌草乙素脂質(zhì)體。 輔你l 2、錄乾輸軒表麗舌體體 取冬凌草乙素(30mg)、司盤60(0.08g)于250ml燒瓶中，用20ml 二氯甲烷溶解，減 壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到一層有機(jī)脂溶性膜，加入PH7. 4的Tris緩沖液10ml，振蕩，大部分膜脫落， 超聲，直至得到冬凌草乙素非離子表面活性劑泡囊的均勻混懸液，粒度分析儀檢測(cè)，平均粒 徑為465nm。 輔你l 3、錄乾就f綱旨i1H本 取冬凌草乙素(50mg)、大豆磷脂(0. 15g) 、 PEG化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺
(PEG-DSPE) (0. 02g)于燒瓶中，用20ml氯仿:異丙醚(1 : 1，v/v)溶解，加入適量蒸餾水，
超聲使其成為乳劑，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到凝膠態(tài)物質(zhì)，加入少量水，繼續(xù)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，凝膠
態(tài)物質(zhì)脫落并分散成均勻混懸液，顯微鏡下觀察，大部分粒子直徑小于2微米，即為冬凌草
乙素長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。 實(shí)施例4、冬凌草乙素納米粒 取冬凌草乙素(50mg)、單硬脂酸甘油酯(0. 7g)、吐溫80(0. 03g)于燒杯中加熱至
8(TC，逐漸加入含十二烷基硫酸鈉(10mg)的8(TC水(10ml)，保持溫度不變，呈透明液體。再
將其用注射器注入到高速攪拌的ot:水中，呈透明液體。在原子力顯微鏡下觀察，多為100
納米以下的粒子。該冬凌草乙素固體脂質(zhì)納米?；鞈乙嚎沙胤胖肐O天未見沉淀析出。該
固體脂質(zhì)納米?；鞈乙禾砑舆m當(dāng)保護(hù)劑后凍干成固體粉末，臨用前加入水，即成冬凌草乙
素固體脂質(zhì)納米?；鞈乙?。 實(shí)施例5、冬凌草乙素微球 取冬凌草乙素(50mg)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA) (0. 5g)溶于5ml二氯甲烷 中，加入3%的聚乙烯醇(PVA)水溶液(20ml)，高速攪拌，形成乳液，轉(zhuǎn)移至30ml的3% PVA 水溶液中，在室溫下，攪拌4小時(shí)，揮發(fā)二氯甲烷，微球固化。離心微球混懸液，所得微球以 蒸餾水洗滌3次，加入適量甘露醇，冷凍干燥，即得到白色粉末。用少量水分散后，可在顯微 鏡下觀察到10微米以下的圓整微球，即為冬凌草乙素微球。
實(shí)施例6、冬凌草乙素乳劑 取冬凌草乙素、泊洛沙姆P188、玉米油、丙二醇加熱，全溶，溶液緩慢滴入攪拌著的
pH7. 4磷酸緩沖液中，得到乳劑。該乳劑經(jīng)過高壓乳勻機(jī)循環(huán)乳化3次，得到乳滴粒徑小于
l微米的乳劑。該乳劑灌封于安瓿內(nèi)，經(jīng)過10(TC加熱30分鐘加熱。取樣觀察，絕大部分乳
滴粒徑小于5微米。該乳劑在室溫放置可保持較長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定。該乳劑可用于靜脈注射、肌
肉注射，也可以用于口服。 實(shí)施例7、冬凌草乙素納米乳 取冬凌草乙素(50mg)溶于5ml油酸乙酯/四氫呋喃混合溶劑中，加入適量聚氧乙 烯蓖麻油和單甘酯，加熱攪拌成溶液，在高速攪拌條件下，加入約4ml水，持續(xù)攪拌，得到半 透明狀分散液體。粒度測(cè)定結(jié)果表明大部分粒子在120nm以下，即為冬凌草乙素納米乳。
實(shí)施例8、冬凌草乙素聚合物膠束 取冬凌草乙素(10mg)溶于5ml二甲基亞砜(DMSO)中，加入50mg乳酸-羥基乙 酸-乙二醇共聚物溶解，放入透析袋中，再放入盛有蒸餾水的燒杯中，攪拌24小時(shí)，取出透析袋，測(cè)定粒度，大部分粒子在50nm以下，即為冬凌草乙素聚合物膠束。
輔亂錄乾穀謹(jǐn)術(shù) 取冬凌草乙素(10mg)溶于5ml 二甲基亞砜(DMSO)中，加入40mg膽固醇基普魯蘭 溶解，用微量注射器緩慢注射到水中，測(cè)定分散液中的粒子直徑，大部分粒子在80nm以下， 即為冬凌草乙素納米凝膠。 輔你l 10、錄乾糊^扁本^齊l1 取5g冬凌草乙素溶解在熱的100ml乙醇中，與300ml含10%聚乙烯吡咯烷酮K30 的乙醇溶液混合，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓揮發(fā)盡乙醇，得到白色粉末狀固體，即為冬凌草 乙素的聚乙烯吡咯烷酮固體分散體。該固體分散體能快速溶于水。 取上述方法制備得到冬凌草乙素固體分散體35g，加入微晶纖維素50g，羧甲基淀 粉鈉10g，混勻，再加入lg硬脂酸鎂，混勻，用10mm淺凹沖壓片，得到白色光潔片劑，平均 片重380g，含冬凌草乙素20mg。該片劑依照2005年版《中國(guó)藥典》溶出度測(cè)定第二法，選 用900ml水作溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50rpm，在45分鐘取樣測(cè)定冬凌草乙素溶出量，溶出百分率為 93. 1%。
權(quán)利要求
一種冬凌草乙素高度分散制劑。
2. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，其粒子直徑小于1微米。
3. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型選自脂質(zhì)體、非離子表面活性 劑泡囊、微粒、納米粒、乳劑、膠束、納米凝膠、固體分散體制劑。
4. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是脂質(zhì)體。
5. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是乳劑。
6. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是微粒，并選自聚合物微粒和 脂質(zhì)微粒。
7. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是納米粒，并選自聚合物納米 粒和脂質(zhì)納米粒。
8. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是聚合物膠束。
9. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，劑型是乳劑，并且每100ml冬凌草乙 素乳劑中含有0.01% 20% (重量)的冬凌草乙素，5% 60% (重量)的油脂，0.5% 30% (重量)的乳化劑。
10. 如權(quán)利要求1所述的冬凌草乙素高度分散制劑，是固體分散體制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了冬凌草乙素高度分散制劑，劑型選自脂質(zhì)體、非離子表面活性劑泡囊、微粒、納米粒、乳劑、膠束、納米凝膠、固體分散體制劑。該制劑穩(wěn)定性好，粒徑小，可用于靜脈注射、肌肉注射或口服。由于制劑的高度分散性，能提高冬凌草乙素的生物利用度、緩控釋性或靶向性，有利于腫瘤或其他疾病的治療。
文檔編號(hào)A61K9/00GK101703462SQ20091022330
公開日2010年5月12日 申請(qǐng)日期2009年11月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月17日
發(fā)明者佟麗, 常菁 申請(qǐng)人:佟麗;常菁