專利名稱：：一種喜樹堿類藥物注射溶液及其注射劑和制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術領域：
，是一種喜樹堿類藥物注射溶液及其注射劑和制備方法。
背景技術：
：喜樹堿類藥物(camptothecins)是從我國特有的珙桐科植物喜樹的樹干、樹皮和果實中提取分離的一種具有抗腫瘤作用的吲哚類生物堿，是拓撲異構酶I的抑制劑。目前臨床主要用于膀胱癌、直腸癌、肝癌、胃癌、卵巢癌、白血病等惡性腫瘤的治療。喜樹堿類藥物化學結(jié)構中E環(huán)上的a-羥基內(nèi)酯環(huán)具有開環(huán)和閉環(huán)兩種形式，均是喜樹堿類藥物的活性形式，但兩者的活性差別較大。Slichemeyer等(J.Natl.Cancer.Inst.(1993)85，271-291.)報道，內(nèi)酯環(huán)形式的喜樹堿類藥物對拓撲異構酶I的抑制作用要遠遠大于其羧酸鹽開環(huán)形式。周建軍等在對"羥基喜樹堿內(nèi)酯環(huán)形式與其抗癌活性的關系"(中國藥理學報2001,22(9):827-830)的研究中報道，在體內(nèi)試驗中，閉環(huán)的喜樹堿類藥物對腫瘤的抑制率明顯高于開環(huán)形式的喜樹堿類藥物，是開環(huán)形式喜樹堿的抑瘤率的23倍。Han.R.等(StemCells.(1994)12，53_63.)報道，在對動物試驗與臨床試驗中發(fā)現(xiàn)，閉環(huán)形式的喜樹堿具有更小的毒性?？梢?，與開環(huán)形式的喜樹堿類藥物相比，閉環(huán)形式的喜樹堿類藥物療效高，毒性低。但是由于閉環(huán)形式的喜樹堿類藥物往往水溶性較差，沒法制成合適的注射劑，目前臨床用制劑通過與堿反應將a-羥基內(nèi)酯環(huán)開環(huán)形成羧酸鹽來提高在水中的溶解度，從而降低了喜樹堿類藥物的臨床使用效果，增加了毒副作用。為了開發(fā)一種高效、低毒，處于內(nèi)酯環(huán)形式的喜樹堿類藥物制劑，目前學者進行了很多相關的研究。宋金春等(ChinaPharmacy(2008)Vol.19No.4)制備了喜樹堿類藥物羥丙基-|3-環(huán)糊精包合物，由于環(huán)糊精等包合材料生物相容性差，腎毒性大，會產(chǎn)生一系列的副反應，并且環(huán)糊精對喜樹堿的包合率低，因而限制了對喜樹堿類藥物環(huán)糊精包合物的進一步研究禾口開發(fā)。Kai丄等(DrugDevelopmentandIndustrialPharmacy.(2008)34:465-471.)研制了喜樹堿類藥物的脂質(zhì)納米粒，處方中使用了表面活性劑吐溫-80和芐澤-35，但這些表面活性劑易對人體產(chǎn)生溶血作用，臨床使用往往會造成低血壓、休克等嚴重毒副作用，生理毒性大。Jin.S.等(InternationalJournalofPharmaceutics379(2009)167-173)制備了喜樹堿類藥物的脂質(zhì)混懸液，處方中加入了增溶劑二甲基亞砜，據(jù)報道，靜脈注射二甲亞砜可引起溶血、生化指標改變和可逆的神經(jīng)性損壞。也有學者將喜樹堿類藥物制備成脂質(zhì)體，但由于喜樹堿藥物的水難溶性和脂難溶性，因此會很難將藥物包裹進去，對于進一步的臨床開發(fā)沒有多大價值。脂肪乳劑是根據(jù)乳糜微粒的組成結(jié)構與特點而設計的，主要是甘油三酯和磷脂組成的乳劑顆粒溶液，其理化、生物穩(wěn)定性好，無毒素和致熱源，滿足靜脈用制劑的要求，被廣泛應用于腸外營養(yǎng)以提供必要的能量和必需脂肪酸，預防和減少各種與單獨使用葡萄糖有關的并發(fā)癥。近年來，人們將其作為藥物的載體，提高水難溶性藥物在水中的溶解度，以提高治療效果。然而，由于脂肪乳劑仍屬水分散體系，隨著儲存時間的延長體系不穩(wěn)定，易油水分離產(chǎn)生飄油現(xiàn)象。至今未見將喜樹堿類藥物與注射用乳劑制成注射劑的報道c
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種穩(wěn)定性好、毒性低的喜樹堿類藥物注射劑，由喜樹堿類藥物注射溶液和分散介質(zhì)組成，其中喜樹堿類藥物注射溶液由藥物活性成分、穩(wěn)定劑、pH值調(diào)節(jié)劑、注射用溶劑組成。本發(fā)明所用的藥物活性成分是以內(nèi)酯環(huán)形式存在為主的喜樹堿類藥物，可以提高藥物的治療活性與降低毒副作用；所用的分散介質(zhì)為注射用乳劑，可以增加喜樹堿類藥物的分散度，解決了喜樹堿類藥物因為水溶性差而難以制成注射劑的問題；本發(fā)明將喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑分別包裝后存儲，臨用前再將它們混勻進行靜脈給藥，可提高長期儲存藥物的穩(wěn)定性。本發(fā)明的喜樹堿類藥物注射溶液由藥物活性成分、穩(wěn)定劑、pH值調(diào)節(jié)劑、注射用溶劑組成，其組分與配比如下含量(克/毫升)0.01-10.0%，優(yōu)選0.5-2.0%;0-5.0%，優(yōu)選0-1.0%;適量，調(diào)節(jié)pH至2.0-5.5，優(yōu)選pH2.5-5.0;組分藥物活性成分穩(wěn)定劑pH值調(diào)節(jié)劑注射用溶劑余量。其中，藥物活性成分選自10-羥基喜樹堿、9-硝基喜樹堿、7-乙基-10-羥基喜樹堿、7-叔丁基二甲硅烷基_10-羥基喜樹堿、10-甲基-7-(咪唑-l)亞甲基高喜樹堿UO-甲基-7-(苯并咪唑-l)亞甲基高喜樹堿或10-甲基-7-(吡啶鹽-l)亞甲基高喜樹堿，優(yōu)選io-羥基喜樹堿。穩(wěn)定劑選自檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸、蘋果酸、酒石酸、乙二胺四乙酸三鈉、檸檬酸、乳酸二鈉、維生素E、2.6-二叔丁基對甲酚中的一種或多種，優(yōu)選檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉、維生素E中的一種或多種。pH值調(diào)節(jié)劑選自檸檬酸、乳酸、蘋果酸、鹽酸、醋酸、磷酸、酒石酸中的一種或多種，優(yōu)選檸檬酸或乳酸。注射用溶劑選自聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600、丙二醇、甘油、無水乙醇的一種或多種，優(yōu)選聚乙二醇400。本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液的制備方法如下1)按配比將藥物活性成分、穩(wěn)定劑加至適量的注射用溶劑中，在25-8(TC下攪拌或剪切溶解，然后用注射用溶劑定容至全量；2)用pH值調(diào)節(jié)劑將上述溶液pH值調(diào)節(jié)至2.0-5.5;3)在上述溶液中按溶液量的0.01%-3%(克/毫升)加入針用活性炭，在25-8(TC下吸附15-60分鐘，然后過濾，將濾液分裝、消毒備用即可。本發(fā)明的喜樹堿類藥物注射劑的分散介質(zhì)為注射用乳劑，可以用市售的注射用乳劑，也可自己制備。本發(fā)明注射劑的喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑的體積比為1:IO-IOO，優(yōu)選i:20-80，最佳為i:40。本發(fā)明注射用乳劑由注射用油、乳化齊U、抗氧齊U、等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)齊IJ、注射用水組成，組分與配比如下;升)配比(克1-30%0.5-5%0-0.5%2.25-2.5%適量調(diào)節(jié)pH至6.0-9.0，優(yōu)選pH6.5-8.5組分注射用油乳化劑抗氧劑等滲調(diào)節(jié)劑pH調(diào)節(jié)劑注射用水其中，注射用油選自辛癸酸甘油三酯、辛酸甘油單酯、辛酸甘油二酯、辛酸甘油三酯、靈芝孢子油、癸酸甘油單酯、癸酸甘油二酯、癸酸甘油三酯、辛癸酸甘油單酯、薏苡仁油、鴉膽子油、青蒿油、辛癸酸甘油二酯、大豆油、魚油、亞麻子油、葵花子油、月見草油、沙棘油、莪術油、紅花籽油、芝麻油、玉米油、欖香烯油中的一種或多種，優(yōu)選辛癸酸甘油三酯、大豆油中的一種或兩種，含量為10-30%(克/毫升)。乳化劑選自大豆磷脂、蛋黃磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、泊洛沙姆188中的一種或多種，優(yōu)選大豆磷脂、蛋黃磷脂中的一種或兩種，含量為0.8-3%(克/毫升)?？寡鮿樯?，含量優(yōu)選0-0.3%克/毫升。等滲調(diào)節(jié)劑選自甘油、山梨醇、甘露醇、葡萄糖、氯化鈉中的一種或多種，優(yōu)選甘油。pH調(diào)節(jié)劑選自檸檬酸、蘋果酸、鹽酸、醋酸、乳酸、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉中的一種或幾種，優(yōu)選氫氧化鈉。制備步驟如下1)制備油相按配比將注射用油和抗氧劑混合，加熱至50-9(TC，加入乳化劑，攪拌或剪切使乳化劑溶解，得油相；2)制備水相將等滲調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑加入適量注射用水中，加熱至50-9(TC攪拌溶解，得水相；3)制備初乳將油相和水相在50-9(TC下混合，用剪切乳化器乳化或攪拌乳化5-60分鐘，轉(zhuǎn)速為5000-30000轉(zhuǎn)/分鐘，得初乳；4)制備注射用乳劑將初乳進一步乳化，然后用注射用水定容，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為6.0-9.0，過濾，分裝，充氮，封口，消毒，即得?！闱闆r下乳劑的制備步驟中包括把乳化劑溶解在注射用油中或把乳化劑溶解在水中。其中初乳進一步乳化是采用高壓均質(zhì)機乳化，壓力為5000-25000psi。乳劑的制備步驟中的消毒是采用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋、流通蒸汽或過微孔濾膜等滅菌消毒，其中高溫滅菌溫度100-12rC，時間8-45分鐘。乳劑的制備步驟中的過濾用裝置，包括但不限于微孔濾膜、砂濾棒、垂溶漏斗或囊式過濾器。乳劑為白色或類白色乳狀液體，有乳光，平均粒徑為100-500nm，pH為6.0_9.0。注射用乳劑的制備方法詳見文獻"中/長鏈脂肪乳注射液制6備工藝研究"(廖頌明，廣東藥學院學報，2001年，第17巻，第3期)。市場上已有注射用乳劑，如華瑞制藥有限公司生產(chǎn)的注射用乳劑，規(guī)格250毫升，30%長鏈脂肪乳劑，可以直接購買。本發(fā)明的喜樹堿類藥物注射劑的制備方法如下本發(fā)明注射劑的喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑的體積比為1:io-ioo，優(yōu)選i:20-80，最佳為i:40;將上述制備的喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑臨用時按配比混勻，即為喜樹堿類藥物注射劑，就可進行靜脈給藥；為降低成本，可將本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液與適量注射用乳劑混合后再加入到適量生理鹽水或葡萄糖溶液中制成注射劑進行靜脈給藥。本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液可以單獨包裝，臨用時與市售注射用乳劑按所需比例混合即可；也可將喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑按所需比例分別包裝后再組合包裝，臨用時分別拆封喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑各自的包裝將它們混勻配成注射劑；還可將分別包裝的喜樹堿類藥物注射溶液、注射用乳劑和生理鹽水或葡萄糖溶液按所需比例組合包裝在一起。本發(fā)明喜樹堿類藥物注射劑經(jīng)體外穩(wěn)定性評價實驗，表明1)喜樹堿類藥物溶液與注射用乳劑混勻后10小時內(nèi)，喜樹堿類藥物內(nèi)酯環(huán)保存率不低于90%，未析出藥物結(jié)晶，乳劑粒徑也沒有變化，說明完全符合臨床用藥要求。2)在pH2.0-5.5的特定pH值范圍內(nèi)，喜樹堿類藥物注射溶液分散于注射用乳劑中穩(wěn)定性好于PH值大于5.5(常規(guī)pH值范圍為5.5以上)，特別是延長了分散液的穩(wěn)定時間，克服了分散液飄油的不足。從而改善了制劑的質(zhì)量，提高了臨床用藥的安全性與有效性。3)本發(fā)明將喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑分別包裝后保存，臨用時再按配比混勻成注射劑，大大提高了喜樹堿類藥物的穩(wěn)定性。喜樹堿類藥物注射溶液與將喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑直接混合成注射劑相比，在2天內(nèi)，注射劑中喜樹堿類藥物內(nèi)酯環(huán)含量下降顯著，而本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液中的喜樹堿類藥物內(nèi)酯環(huán)含量即使在室溫中保存半年也不變，說明在本發(fā)明的喜樹堿類藥物注射溶液中喜樹堿類藥物的穩(wěn)定性好。本發(fā)明為喜樹堿類藥物提供了一種低毒、安全、便于保存的靜脈注射劑。具體實施例方式現(xiàn)結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細描述。實施例1制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取10-羥基喜樹堿1.0克、乙二胺四乙酸二鈉0.0005克，加入到適量聚乙二醇400中，在4(TC下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為4.15;加入0.50克的針用活性炭，在30°C的溫度下吸附25分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽IO(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備取注射用辛癸酸甘油三酯100克、大豆油100克，水浴加熱至75t:，加入注射用蛋黃磷脂12克，按常規(guī)剪切溶解，攪拌混勻，得油相；取注射用水740毫升，加入甘油22.5克，攪拌溶解，加熱至75t:得水相；將油相和水相在75t:溫度下混合，用剪切乳化器乳化12分鐘(轉(zhuǎn)速18000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力18000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8.21，用微孔濾膜過濾，分裝于塑料瓶或玻璃瓶中，按常規(guī)充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆?。?jīng)測定，其平均粒徑為194nm，pH為7.26。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備臨用時，將上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液和注射用乳劑按體積比為1:40混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。也可將上述制備的io-羥基喜樹堿注射溶液臨用時和市售的注射用乳劑按所需體積比混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，進行靜脈給藥。4.包裝上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液可單獨包裝，臨用時和市售的注射用乳劑按所需體積比混勻即可。也可將上述制備分裝的10-羥基喜樹堿注射溶液和分裝于玻璃瓶或塑料瓶中的注射用乳劑按所需比例組合包裝在一起。例如，io-羥基喜樹堿注射溶液以l毫升/瓶分裝于安瓶中，注射用乳劑以100毫升/瓶分裝于鹽水瓶中，再以l-5安瓶10-羥基喜樹堿注射溶液與1-5瓶注射用乳劑包裝在一起，臨用時按所需體積比將它們混勻。還可將10-羥基喜樹堿注射溶液、注射用乳劑和葡萄糖注射液或注射用生理鹽水按所需比例組合包裝在一起。實施例2制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備取10-羥基喜樹堿1.1克，加入到適量聚乙二醇400中，在35t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為4.28;加入0.2克的針用活性炭，在25t:下吸附35分鐘，然后用0.22iim微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓滅菌鍋115t:滅菌20分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。2.注射用乳劑的制備取注射用大豆油200克，水浴加熱至75t:，加入注射用蛋黃磷脂12克，攪拌使溶解得油相；取注射用水700毫升，加入甘油22.5克，攪拌使溶解，加熱至75。C得水相；將油相和水相在75t:溫度下混合，用剪切乳化器乳化15分鐘(轉(zhuǎn)速15000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力21000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其PH為7.66，用微孔濾膜過濾，分裝于塑料瓶或玻璃瓶中，按常規(guī)充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆?。?jīng)測定，其平均粒徑為201nm，pH為7.01。3.10-羥基喜樹堿藥物注射劑的制備方法同實施例l。4.包裝方法同實施例l。實施例3制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備取10-羥基喜樹堿0.7克、維生素E0.01克，加入到適量聚乙二醇400中，在45t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值至3.95;加入0.8克的針用活性炭，在45t:下吸附60分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備取大豆油50克、辛癸酸甘油三酯50克，混合，水浴加熱至6(TC，加入注射用蛋黃磷脂12克，剪切使溶解，得油相；取注射用水800毫升，加入甘油25克，攪拌使溶解，加熱至6(TC得水相；將油相和水相在6(TC下混合，用剪切乳化器乳化30分鐘(轉(zhuǎn)速25000轉(zhuǎn)/分)，得初乳，將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力20000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其PH為7.54，用囊式過濾器過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋115t:滅菌30分鐘，即得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為187nm，pH為6.99。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備臨用時，將上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液和注射用乳劑按體積比為1:30混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。也可將上述制備的io-羥基喜樹堿注射溶液臨用時和市售的注射用乳劑按所需體積比混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，進行靜脈給藥。4.包裝方法同實施例l。實施例4制備10-羥基喜樹堿注射溶液取IO-羥基喜樹堿O.1克、檸檬酸0.4克、維生素E0.1克，加入至適量聚乙二醇300中，在8(TC下攪拌溶解，然后用聚乙二醇300定容至100毫升；用乳酸調(diào)節(jié)pH值至3.82;加入1.2克的針用活性炭，在7(TC下吸附15分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽10(TC滅菌45分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。使用時，10-羥基喜樹堿注射溶液和市售注射用乳劑(華瑞制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格250毫升，30%長鏈脂肪乳劑，[批號]:GM0810022)按體積比1:10混勻，成10-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。實施例5制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取10-羥基喜樹堿1.8克，加入到適量聚乙二醇400中，在45t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.57;加入0.4克的針用活性炭，在40°C的溫度下吸附20分鐘，然后過0.22iim微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備大豆油200克、生育酚2克，混合，水浴加熱至8(TC，攪拌混勻，得油相；量取注射用水750毫升，加入蛋黃磷脂12克、甘油22.5克，剪切分散，加熱至8(TC得水相；將油相和水相在8(TC溫度下混合，用剪切乳化器乳化28分鐘(轉(zhuǎn)速9000轉(zhuǎn)/分)，得初乳。將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力20000psi)，注射用水定容至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為7.10，用囊式過濾器過濾，分裝，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rc滅菌15分鐘，即得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為200.3nm，pH為6.54。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備方法同實施例l。4.包裝方法同實施例l。實施例6制備10-羥基喜樹堿注射溶液稱取10-羥基喜樹堿1.6克、維生素E0.001克、乙二胺四乙酸二鈉0.001克，加入到15克無水乙醇、70克聚乙二醇400中，在38t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為4.00;加入0.7克的針用活性炭，在60°C的溫度下吸附20分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。使用時，10-羥基喜樹堿注射溶液和市售注射用乳劑(廣州百特僑光醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)，規(guī)格100毫升，20%中/長鏈脂肪乳劑，[批號]:GM0809034)按體積比l:30混勻，成10-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。實施例7制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取10-羥基喜樹堿1.4克、酒石酸0.3克、蘋果酸0.01克，加入至25克丙二醇、10克甘油、60克無水乙醇中，在4(TC下攪拌溶解，然后用無水乙醇定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)PH值至2.51;加入0.02克的針用活性炭，在8(TC的溫度下吸附35分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋115°C滅菌35分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備芝麻油5克、玉米油5克、癸酸甘油單酯12克、生育酚0.5克，混合，水浴加熱至7(TC，攪拌混勻，得油相；量取注射用水850毫升，加入1克注射用泊洛沙姆、蛋黃磷脂4克、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿1克、甘油25克，剪切分散，加熱至7(TC，得水相；將油相和水相在7(TC溫度下混合，攪拌乳化10分鐘，得初乳。將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力8000psi)，注射用水定容至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為8.50，用微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，即得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為187nm，pH為7.85。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備臨用時，將上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液和注射用乳劑按體積比為1:35混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。也可將上述制備的io-羥基喜樹堿注射溶液臨用時和市售的注射用乳劑按所需體積比混勻，再與5%葡萄糖注射液按所需比例混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑后進行靜脈給藥。4.包裝方法同實施例l。實施例8制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取10-羥基喜樹堿10克、乳酸二鈉0.5克，加入至80克聚乙二醇600、10克無水乙醇中，在45t:下攪拌溶解，然后用無水乙醇定容至100毫升；用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.00;加入3.0克的針用活性炭，在45°C的溫度下吸附15分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽10(TC滅菌35分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取大豆油200克，水浴加熱至65t:，得油相；量取注射用水700毫升，加入蛋黃磷脂12克、甘油22.5克，攪拌使均勻分散，加熱至65t:得水相。將油相和水相在65t:溫度下混合，用剪切乳化器乳化30分鐘(轉(zhuǎn)速8000轉(zhuǎn)/分)，得初乳，將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力12000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為6.82，用垂溶漏斗過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rc滅菌8分鐘，即得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為198nm，pH為6.10。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備給藥時，將上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液與注射用乳劑按體積比1:100混合，成10-羥基喜樹堿注射劑，即可靜脈給藥。4.包裝:方法同實施例l。實施例9制備10-羥基喜樹堿注射溶液稱取10-羥基喜樹堿1.3克、乙二胺四乙酸二鈉0.005克，加入到20克無水乙醇、75克聚乙二醇400中，在45t:下攪拌溶解，用聚乙二醇400定容至100ml;用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為4.35;加入0.9克的針用活性炭，在25°C的溫度下吸附45分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，高壓蒸汽115t:滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。使用時，10-羥基喜樹堿注射溶液和市售注射用乳劑(華瑞制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格:250毫升，30%長鏈脂肪乳劑，[批號]:GM0810022)按體積比1:30混勻，成10-羥基喜樹堿注射劑，即進行可靜脈給藥。實施例10制備10-羥基喜樹堿注射溶液及其注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取IO-羥基喜樹堿O.5克、維生素E0.001克，加入到適量的聚乙二醇200中，在38t:下攪拌溶解，用聚乙二醇200定容至100ml;用醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.61;加入0.5克的針用活性炭，在3(TC的溫度下吸附40分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，封口，流通蒸汽IO(TC滅菌45分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取大豆油150克，水浴加熱至6(TC，加入注射用蛋黃磷脂12克，剪切溶解，得油相；量取注射用水750毫升，加入甘油22.5克，攪拌使溶解，加熱至6(TC得水相；將油相和水相在6(TC溫度下混合，用剪切乳化器乳化10分鐘(轉(zhuǎn)速22000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力18000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為8.56，用微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為173nm，pH為8.03。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備臨用時，將上述制備的10-羥基喜樹堿注射溶液和注射用乳劑按體積比為1:20混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，即可進行靜脈給藥。也可將上述制備的io-羥基喜樹堿注射溶液臨用時和市售的注射用乳劑按所需體積比混勻，成io-羥基喜樹堿注射劑，即可靜脈給藥。4.包裝方法同實施例l。實施例11制備10-羥基喜樹堿注射劑1.10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取IO-羥基喜樹堿O.01克，加入到適量的聚乙二醇200中，在38t:下攪拌溶解，用聚乙二醇200定容至100ml;用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值至5.45;加入0.5克的針用活性炭，在3(TC的溫度下吸附40分鐘，然后用0.22iim微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，流通蒸汽10(TC滅菌45分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取大豆油100克、辛葵酸甘油三酯50克，水浴加熱至65t:，加入注射用蛋黃磷脂12克，剪切溶解，得油相；量取注射用水750毫升，加入甘油22.5克，攪拌使溶解，加熱至65t:得水相；將油相和水相在65t:溫度下混合，用剪切乳化器乳化12分鐘(轉(zhuǎn)速22000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力17000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其PH為8.76，用微孔濾膜過濾，分裝在玻璃或塑料瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為173nm，pH為8.13。3.10-羥基喜樹堿注射劑的制備方法同實施例10。[One]4.組合包裝方法同實施例l。實施例12制備10-甲基-7_(咪唑-1)亞甲基高喜樹堿藥物注射溶液取10-甲基-7-(咪唑-l)亞甲基高喜樹堿1.9克、維生素E0.01克，加入到適量的聚乙二醇400中，在7(TC下攪拌溶解，用聚乙二醇400定容至100ml;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.39;加入0.02克的針用活性炭，在55°C的溫度下吸附30分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，流通蒸汽10(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。使用時，IO-甲基-7-(咪唑-l)亞甲基高喜樹堿藥物注射溶液和市售注射用乳劑(廣州百特僑光醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)，規(guī)格100毫升，20%中/長鏈脂肪乳劑，批號GM0809034)按體積比1:40混勻，成注射劑，即可靜脈給藥。實施例13制備10-羥基喜樹堿注射溶液稱取10-羥基喜樹堿0.9克，加入到適量的聚乙二醇400中，在7(TC下攪拌溶解，用聚乙二醇400定容至100ml;用酒石酸調(diào)節(jié)pH值至2.89;加入0.3克的針用活性炭，在45°C的溫度下吸附30分鐘，然后用0.22iim微孔濾膜過濾，分裝在塑料或玻璃瓶中，流通蒸汽IO(TC滅菌30分鐘。制備全過程注意避光。使用時，10-羥基喜樹堿注射溶液和市售注射用乳劑(同實施例12)按體積比1:30混勻，成注射劑，即可靜脈給藥。實施例14制備9-硝基喜樹堿注射劑及組合包裝1.9-硝基喜樹堿注射溶液的制備稱取9-硝基喜樹堿1.0克、維生素E0.2克，加入到60克聚乙二醇400、無水乙醇20克中，在25t:下攪拌溶解，然后用無水乙醇定容至100毫升；用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.02;加入0.5克的針用活性炭，在25°C的溫度下吸附25分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽10(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取注射用辛癸酸甘油三酯100克、大豆油100克，水浴加熱至7(TC，加入注射用大豆磷脂12克，剪切使溶解，攪拌混勻，得油相；量取注射用水780毫升，加入甘油22.5克、1.5克泊洛沙姆188，攪拌使溶解，加熱至7(TC得水相；將油相和水相在7(TC溫度下混合，用剪切乳化器乳化12分鐘(轉(zhuǎn)速10000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力18000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為7.98，用微孔濾膜過濾，分裝在塑料或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為201nm，pH為7.25。3.9-硝基喜樹堿注射劑的制備方法同實施例l。4.包裝將上述制備分裝的9-硝基喜樹堿注射溶液和分裝于玻璃瓶或塑料瓶中的注射用乳劑以及5%葡萄糖注射溶液按所需比例組合包裝在一起。實施例15制備9-硝基喜樹堿藥物注射溶液取9-硝基喜樹堿1.8克、乳酸二鈉0.06克，加入到適量聚乙二醇400中，在75°C下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值至3.98;加入0.4克的針用活性炭，在55°C的溫度下吸附45分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。給藥時，9-硝基喜樹堿注射溶液與市售乳劑(同實施例12)體積比為1:50混勻，成注射劑，即可靜脈給藥，實施例16制備10-甲基-7_(吡啶鹽-1)亞甲基高喜樹堿藥物注射溶液稱取10-甲基-7-(吡啶鹽-l)亞甲基高喜樹堿O.7克、2.6-二叔丁基對甲酚0.001克，加入到25克丙二醇、70克聚乙二醇600中，在5(TC下攪拌溶解，然后用丙二醇定容至100毫升；用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為3.35;加入0.8克的針用活性炭，在35t:的溫度下吸附15分鐘，然后用0.22iim微孔濾膜過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋115t:滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。使用時，10-甲基_7-(吡啶鹽-1)亞甲基高喜樹堿藥物注射溶液和市售注射用乳劑(同實施例6)按體積比1:20混勻，成注射劑，即可靜脈給藥。實施例17制備9-硝基喜樹堿注射溶液稱取9-硝基喜樹堿0.1克、維生素E5.0克，加入到適量聚乙二醇200中，在25t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值至4.98;加入0.3克的針用活性炭，在65t:的溫度下吸附30分鐘，然后用0.22ym微孔濾膜過濾，分裝在塑料或玻璃瓶中，封口，流通蒸汽10(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。用藥時，9-硝基喜樹堿注射溶液與市售乳劑(同實施例9)按體積比為1:10的比例混勻，成注射劑，即可靜脈給藥。實施例18制備10-甲基-7_(苯并咪唑-1)亞甲基高喜樹堿注射溶液稱取10-甲基-7-(苯并咪唑-l)亞甲基高喜樹堿1.5克，加入到適量聚乙二醇400中，在5(TC下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用蘋果酸調(diào)節(jié)pH值為4.05;加入2.0克的針用活性炭，在6(TC的溫度下吸附45分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。給藥時，10-甲基-7_(苯并咪唑-1)亞甲基高喜樹堿注射溶液與市售乳劑(四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格250毫升，20%長鏈脂肪乳劑，批號F090203C2)按體積比為l:50混勻，成注射劑，即可靜脈給藥。實施例19制備7-乙基-10-羥基喜樹堿喜樹堿注射溶液稱取7-乙基-10-羥基喜樹堿1.3克，加入到適量的聚乙二醇400中，在35t:下攪拌溶解，用聚乙二醇400定容至100ml;用乳酸調(diào)節(jié)pH值至2.87;加入2.5克的針用活性炭，在25t:的溫度下吸附20分鐘，然后用0.22iim微孔濾膜過濾，分裝在塑料或玻璃瓶中，高壓蒸汽115t:滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。給藥時，將上述制備的7-乙基-10-羥基喜樹堿注射溶液與市售乳劑(浙江康萊特藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格250毫升，批號0811212-1)按體積比為l:25混勻，成注射劑，再將注射劑按所需比例分散于注射用生理鹽水中，即可靜脈給藥。實施例20制備7-叔丁基二甲硅烷基-10-羥基喜樹堿喜樹堿注射溶液及注射劑1.7-叔丁基二甲硅烷基-10-羥基喜樹堿注射溶液的制備稱取7-叔丁基二甲硅烷基-10-羥基喜樹堿2.5克、乙二胺四乙酸二鈉0.001克，加入到適量聚乙二醇300中，在35t:下攪拌溶解，然后用聚乙二醇300定容至100毫升；用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值為4.66;加入1.2克的針用活性炭，在5(TC的溫度下吸附16分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽IO(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆?。制備全過程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取注射用辛癸酸甘油三酯100克、大豆油100克，水浴加熱至7(TC，加入注射用大豆磷脂20克，剪切使溶解，攪拌混勻，得油相；量取注射用水750毫升，加入甘油22.5克，攪拌使溶解，加熱至7(TC得水相；將油相和水相在7(TC溫度下混合，用剪切乳化器乳化15分鐘(轉(zhuǎn)速15000轉(zhuǎn)/分)，得初乳；將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力15000psi)，注射用水定量至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH為8.IO，用微孔濾膜過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rC滅菌15分鐘，得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為240nm，pH為7.68。3.7-叔丁基二甲硅烷基-10-羥基喜樹堿注射溶液的制備方法同實施例l。4.包裝方法同實施例l。實施例21制備喜樹堿類藥物注射溶液稱取10-羥基喜樹堿1.0克、9_硝基喜樹堿0.5克、維生素E0.02克，加入到適量聚乙二醇400中，在3(TC下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用酒石酸調(diào)節(jié)pH值為2.28;加入0.35克的針用活性炭，在25t:的溫度下吸附45分鐘，然后用囊式過濾器過濾，分裝于塑料或玻璃瓶中，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋12rc滅菌8分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。使用方法同實施例9。實施例22制備喜樹堿類藥物注射溶液及注射劑1.喜樹堿類藥物注射溶液的制備稱取10-羥基喜樹堿1.5克、7_乙基-10-羥基喜樹堿0.6克、檸檬酸0.3克、乙二胺四乙酸0.002克，加入到適量聚乙二醇400中，在6(TC下攪拌溶解，然后用聚乙二醇400定容至100毫升；用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.95;加入0.5克的針用活性炭，在25t:的溫度下吸附25分鐘，然后用微孔濾膜過濾，分裝在塑料或玻璃瓶中，封口，用流通蒸汽10(TC滅菌30分鐘，儲存?zhèn)溆谩Ｖ苽淙^程注意避光。2.注射用乳劑的制備稱取辛酸甘油單酯50克、辛酸甘油三酯120克、葵花子油80克、生育酚3克，水浴加熱至55t:，加入注射用二硬脂酰磷脂酰乙醇胺3克、蛋黃磷脂4克，攪拌使溶解，得油相；量取注射用水620毫升，加入甘油22.5克、1克泊洛沙姆188，加熱至55。C，攪拌使溶解，得水相；將油相和水相在75t:溫度下混合，用剪切乳化器乳化6分鐘(轉(zhuǎn)速30000轉(zhuǎn)/分)，得初乳。將初乳用高壓均質(zhì)機進一步乳化(壓力15000psi)，注射用水定容至1000毫升，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其PH為8.75，用垂熔漏斗過濾，分裝在塑料瓶或玻璃瓶中，充氮，封口，用旋轉(zhuǎn)式高壓蒸汽滅菌鍋115t:滅菌30分鐘，即得乳劑。經(jīng)測定，其平均粒徑為223nm，pH為7.95。3.喜樹堿類藥物注射溶劑的制備方法同實施例l。4.包裝方法同實施例l。藥物穩(wěn)定性實驗1.喜樹堿類藥物注射劑的藥物穩(wěn)定時間評價實驗喜樹堿類藥物注射劑以實施例1制備的10-羥基喜樹堿藥物注射劑為例，檢測喜樹堿類藥物溶液和注射用乳劑混勻后不同時間點注射劑中閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量、pH值以及外觀變化情況。檢測方法為精確吸取藥物溶液2.5毫升，將其分散在適量乳劑中，然后用乳劑定量至100毫升，搖勻；用高效液相色譜儀、粒徑測定儀分別測定該注射劑在不同時間點的閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量和乳劑的粒徑；在測定含量時，先測定2.5ml藥物溶液內(nèi)的閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量，以此含量為100%，然后依次按時間點用注射器抽取適量的注射劑過0.45i！m的微孔濾膜，分別測定濾液中閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量，與上述藥物溶液內(nèi)測得的含量相比，計算出各時間點閉環(huán)io-羥基喜樹堿的百分含量，以閉環(huán)io-羥基喜樹堿的含量變化來評價藥物是否析出結(jié)晶或藥物開環(huán)；粒徑則直接測定；用肉眼觀察外觀。高效液相色譜條件AgilentllOO液相色譜，AgilentG1314AWD檢測器，AgilentG1311A型四元泵，AgilentLC1100色譜數(shù)據(jù)工作站，分析柱為DiamonsilC18分析柱(5iim，4.6mmX250mm)，甲醇-水(55:45)為流動相，流速1.Oml/min，檢測波長266nm，進樣量為20iU，外標法以峰面積定量(上述色譜條件測定的藥物含量為10-羥基喜樹堿以內(nèi)酯環(huán)形式存在的藥物含量)，結(jié)果見表1。表110-羥基喜樹堿注射劑不同時間點藥物含量、乳劑粒徑及表觀的檢測結(jié)果時間(小時)5^^§^15分散液含量(％)^iH^i71iTi~~分散液粒徑(nm)192.2195.1188.8193.7189.5198.4表觀表觀良好，io小時內(nèi)無變化由表1可見，10-羥基喜樹堿分散在注射用乳劑中，閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量達到95.6%，并且在10小時內(nèi)，閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量在90%以上，表明注射劑10小時內(nèi)基本上沒有析出藥物結(jié)晶或產(chǎn)生開環(huán)現(xiàn)象，且乳劑粒徑也沒有變化，說明本發(fā)明注射劑完全符合臨床用藥要求。2.本發(fā)明不同pH值范圍的藥物注射溶液對注射劑中藥物和注射用乳劑穩(wěn)定性影響的評價實驗本實驗所用的喜樹堿類藥物注射劑為實施例2制備的10-羥基喜樹堿注射劑，喜樹堿類藥物溶液和注射用乳劑的體積比為1:40。實驗設兩個組，即本發(fā)明特定pH值范圍(pH2.0-5.5)的喜樹堿類藥物溶液組和常規(guī)pH值范圍(pH5.5以上)組，后者為對照組，用檸檬酸調(diào)節(jié)pH值，本發(fā)明特定pH值范圍組分pH2.14、3.29、4.28、5.45四個樣品，對照組分pH5.98、6.73、7.67三個樣品。實驗時，將藥物溶液分散在注射用乳劑中進行考察。將喜樹堿類藥物溶液和注射用乳劑混勻后，檢測不同時間點各組注射劑中閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量、乳劑粒徑及外觀變化情況。檢測方法同上述藥物穩(wěn)定時間評價實驗，對喜樹堿含量的影響結(jié)果見表2，對乳劑粒徑的影響結(jié)果見表3，外觀變化結(jié)果見表4。表2不同pH值注射溶液對注射劑中藥物含量的影響結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表3.不同pH值注射溶液對乳劑粒徑的影響結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表4.不同pH值注射溶液對注射劑外觀的影響結(jié)果樣品PH值Oh2h6h8h9h10h2.14無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油3.29無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油4.28無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油5.45無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油無飄油5.98無飄油無飄油輕微漂油飄油較多6.73無飄油無飄油輕微漂油飄油較多7.67無飄油無飄油輕微漂油飄油較多由表2、3和表4可見，藥物溶液在pH2.0_5.5范圍內(nèi)，注射劑中藥物和乳劑的穩(wěn)定時間長于對照組，表觀也較對照組好，克服了注射劑的飄油問題，而PH值為5.5以上的對照組，其有明顯油漬掛壁，且隨著時間的延長飄油增多；在藥物析出結(jié)晶前，注射劑中乳劑的粒徑保持不變，但隨著藥物的析出，粒徑有增大的趨勢。因此，本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液pH值范圍為2.0-5.5，延長了分散在注射用乳劑中的穩(wěn)定時間，提高了臨床用藥的安全性與有效性。3.本發(fā)明喜樹堿類藥物注射溶液與注射劑穩(wěn)定性對比實驗本實驗采用實施例2制備的10-羥基喜樹堿注射溶液和注射劑進行比較，于室溫下放置6個月，考察10-羥基喜樹堿注射溶液與注射劑中閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量變化。10-羥基喜樹堿注射溶液分別于第0月、第1個月、第3個月和第6個月測定閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量，并與第0月含量比較，求得藥物含量隨時間的變化百分率。io-羥基喜樹堿注射劑于第0天、第1天、第2天測定閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量，并與第0天含量比較，求得藥物含量隨時間的變化百分率。檢測方法同上。數(shù)據(jù)結(jié)果見表5。表5.10-羥基喜樹堿在本發(fā)明注射溶液與注射劑中穩(wěn)定性檢測結(jié)果i^閉環(huán)10-羥基喜樹堿含量(%)本發(fā)明注射劑o天100.0l天50.42天19.6本發(fā)明注射溶液o月跳0l個月99.83個月99.46個月99.2由表5可見，本發(fā)明10-羥基喜樹堿注射劑2天內(nèi)，閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量下降顯著，而本發(fā)明10-羥基喜樹堿注射溶液室溫放置6個月閉環(huán)10-羥基喜樹堿的含量不變。說明在本發(fā)明喜樹堿類藥物注射用溶液中喜樹堿類藥物穩(wěn)定性好，可長期保存，但若將其與注射用乳劑混合后制成注射劑，喜樹堿類藥物穩(wěn)定性就下降了，雖然10小時內(nèi)基本不變，可符合臨床要求，然而不能長期保存，不利于運輸和儲存。因此，本發(fā)明將喜樹堿類藥物注射用溶液與注射用乳劑分別包裝后儲存，臨用時再混合，這就解決了長時間存儲的穩(wěn)定性的問題。權利要求一種喜樹堿類藥物注射溶液，由藥物活性成分、穩(wěn)定劑、pH值調(diào)節(jié)劑、注射用溶劑組成，其組分與配比如下組分含量(克/毫升)藥物活性成分0.01-10.0％；穩(wěn)定劑0-5.0％；pH值調(diào)節(jié)劑適量，調(diào)節(jié)pH至2.0-5.5；注射用溶劑余量；其中，藥物活性成分選自10-羥基喜樹堿、9-硝基喜樹堿、7-乙基-10-羥基喜樹堿、7-叔丁基二甲硅烷基-10-羥基喜樹堿、10-甲基-7-(咪唑-1)亞甲基高喜樹堿、10-甲基-7-(苯并咪唑-1)亞甲基高喜樹堿或10-甲基-7-(吡啶鹽-1)亞甲基高喜樹堿；穩(wěn)定劑選自檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸、蘋果酸、酒石酸、乙二胺四乙酸三鈉、檸檬酸、乳酸二鈉、維生素E、2.6-二叔丁基對甲酚中的一種或多種；pH值調(diào)節(jié)劑選自檸檬酸、乳酸、蘋果酸、鹽酸、醋酸、磷酸、酒石酸中的一種或多種；注射用溶劑選自聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600、丙二醇、甘油、無水乙醇中的一種或多種。2.按權利要求1所述的喜樹堿類藥物注射溶液，其特征在于配比如下組分含量(克/毫升)藥物活性成分0.5-2.0%;穩(wěn)定劑0-1.0%;pH值調(diào)節(jié)劑適量，調(diào)節(jié)pH至2.5-5.0;注射用溶劑余量。3.按權利要求1或2所述的喜樹堿類藥物注射溶液，其特征在于藥物活性成分為10-羥基喜樹堿；穩(wěn)定劑選自檸檬酸、乙二胺四乙酸二鈉、維生素E中的一種或多種；PH值調(diào)節(jié)劑選自檸檬酸或乳酸；注射用溶劑為聚乙二醇400。4.權利要求1或2或3所述喜樹堿類藥物注射溶液的制備方法，步驟如下(1)按配比將藥物活性成分、穩(wěn)定劑加至適量的注射用溶劑中，在25-8(TC下攪拌或剪切溶解，然后用注射用溶劑定容至全量；(2)用pH調(diào)節(jié)劑將上述溶液pH值調(diào)節(jié)至2.0-5.5;(3)在上述溶液中按溶液量的0.01%-3%(克/毫升)加入針用活性炭，在25-80°C下吸附15-60分鐘，然后過濾，將濾液分裝、消毒即可。5.權利要求1或2或3所述喜樹堿類藥物注射溶液在制備喜樹堿類藥物注射劑中的應用。6.喜樹堿類藥物注射劑制備方法，其特征在于將權利要求1或2或3所述喜樹堿類藥物注射溶液與分散介質(zhì)按體積比為1:10-100混勻即可，所說的分散介質(zhì)為注射用乳劑。7.按權利要求6所述的喜樹堿類藥物注射劑制備方法，其特征在于所說注射用乳劑由注射用油、乳化劑、抗氧劑、等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、注射用水組成，組分與配比如下組分配比(克/毫升)注射用油1-30%乳化劑0.5-5%抗氧劑0-0.5%等滲調(diào)節(jié)劑2.25-2.5%pH調(diào)節(jié)劑適量調(diào)節(jié)pH至6.0-9.0注射用水余量；其中注射用油選自辛癸酸甘油三酯、辛酸甘油單酯、辛酸甘油二酯、辛酸甘油三酯、靈芝孢子油、癸酸甘油單酯、癸酸甘油二酯、癸酸甘油三酯、辛癸酸甘油單酯、薏苡仁油、鴉膽子油、青蒿油、辛癸酸甘油二酯、大豆油、魚油、亞麻子油、葵在子油、月見草油、沙棘油、莪術油、紅花籽油、芝麻油、玉米油、欖香烯油中的一種或多種；乳化劑選自大豆磷脂、蛋黃磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰膽堿、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、泊洛沙姆188中的一種或多種；抗氧劑為生育酚；等滲調(diào)節(jié)劑選自甘油、山梨醇、甘露醇、葡萄糖、氯化鈉中的一種或多種；PH調(diào)節(jié)劑選自檸檬酸、蘋果酸、鹽酸、醋酸、乳酸、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉中的一種或幾種；制備步驟如下(1)制備油相按配比將注射用油和抗氧劑混合，加熱至50-9(TC，加入乳化劑，攪拌或剪切使乳化劑溶解，得油相；(2)制備水相將等滲調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑加入適量注射用水中，加熱至50-9(TC攪拌溶解，得水相；(3)制備初乳將油相和水相在50-9(TC下混合，用剪切乳化器乳化或攪拌乳化5-60分鐘，轉(zhuǎn)速為5000-30000轉(zhuǎn)/分鐘，得初乳；(4)制備注射用乳劑將初乳進一步乳化，然后用注射用水定容，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH為6.0-9.0，過濾，分裝，充氮，封口，消毒即可。8.按權利要求6或7所述喜樹堿類藥物注射劑的制備方法，其特征在于所說喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑的體積比為1:20-80。9.按權利要求8所述喜樹堿類藥物注射劑的制備方法，其特征在于所說喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑的體積比為1:40。10.權利要求6、7或9所述方法制備的喜樹堿類藥物注射劑。11.權利要求8所述方法制備的喜樹堿類藥物注射劑。12.權利要求11所述的喜樹堿類藥物注射劑的組合包裝，其特征在于按體積比將喜樹堿類藥物注射溶液和注射用乳劑分別包裝后再組合包裝在一起。全文摘要本發(fā)明涉及醫(yī)藥
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，是一種喜樹堿類藥物注射溶液及其注射劑和制備方法。本發(fā)明提供一種穩(wěn)定性好、療效高、毒性低的喜樹堿類藥物注射劑，由喜樹堿類藥物注射溶液和分散介質(zhì)組成，其中喜樹堿類藥物注射溶液由藥物活性成分、穩(wěn)定劑、pH值調(diào)節(jié)劑、注射用溶劑組成。本發(fā)明所用的藥物活性成分是以內(nèi)酯環(huán)形式存在為主的喜樹堿類藥物，可以提高藥物的治療活性與降低毒副作用；所用的分散介質(zhì)為注射用乳劑，可以增加喜樹堿類藥物的分散度，解決了喜樹堿類藥物因為水溶性差而難以制成注射劑的問題；本發(fā)明將喜樹堿類藥物注射溶液與注射用乳劑分別包裝后存儲，臨用前再將它們混合均勻后進行靜脈給藥，可提高長期儲存藥物的穩(wěn)定性。本發(fā)明為喜樹堿類藥物提供了一種低毒、安全、便于保存的靜脈注射劑。文檔編號A61K47/12GK101708156SQ20091020022公開日2010年5月19日申請日期2009年12月10日優(yōu)先權日2009年12月10日發(fā)明者劉文麗,劉薇,孫靖,張佳良,張瑩瑩,楊秋霞,鄧莉,陳建明,陳明,顧芃,高保安,黃碩申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學