專利名稱：一種抗腫瘤的藥物組合物及其生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗腫瘤的藥物組合物及其生 產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
牛樟芝又稱牛樟菇或樟芝，學(xué)名為AntrodiaCamphorata，屬擔(dān)子軍類 綱，多孔菌目，多孔菌科，多孔菌屬。
樟芝是臺(tái)灣特有的真菌，僅生長(zhǎng)于臺(tái)灣特有的牛樟樹(shù)上。牛樟芝生長(zhǎng)于 牛樟樹(shù)干腐朽的中空內(nèi)部或倒伏樹(shù)干的潮濕表面。野生樟芝長(zhǎng)在老齡的牛樟 樹(shù)，子實(shí)體形態(tài)多變化，有板狀、鍾狀、馬蹄狀或塔狀；初生時(shí)鮮紅色，漸 長(zhǎng)變?yōu)榘咨?、淡紅褐色、淡褐色或淡黃褐色。牛樟芝氣芳香味辛苦、平。有 祛風(fēng)行氣、化淤活血、溫中消結(jié)、解毒消腫、鎮(zhèn)靜止痛、抗菌、抗病毒、抗 腫瘤、提升機(jī)體免疫力之效；對(duì)于治療胃腸疼痛、腹瀉嘔吐、食物中毒、毒 蕈中毒、糖尿病、酒精肝、脂肪肝、肝硬化、肝癌等更是有獨(dú)特功能。牛樟 芝是有許多的生理活性成分，如多糖體、三萜類化合物、超氧歧化酶、腺苷、 蛋白質(zhì)(含免疫蛋白)、維生素、微量元素、核酸、凝集素、氨基酸、固醉 累、纖維素、血壓穩(wěn)定物質(zhì)等。牛樟芝的有效成分中以三萜類化合物為最特 別，高達(dá)200種以上，是其他菇菌無(wú)法相比的，200多中三萜類化合物使牛 樟芝具有抗癌、保肝等功效。由于樟芝在臺(tái)灣被視為獨(dú)特而珍貴的藥用真菌， 因此具有極高的研究和商業(yè)價(jià)值，也是目前臺(tái)灣最昂貴的野生真菌，在港澳 被稱為"神芝"，臺(tái)灣民間稱之為"森林中的紅寶石"。
灰樹(shù)花灰樹(shù)花又名貝葉多孔菌，日本稱舞茸，屬擔(dān)子菌綱，是亞熱帶至溫帶森林中的大型真菌，其多糖具有良好抗腫瘤效果。
靈芝自古以來(lái)就被認(rèn)為是吉祥、富貴、美好、長(zhǎng)壽的象征，有"仙草"、 "瑞草"之稱，中華傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)長(zhǎng)期以來(lái)一直視為滋補(bǔ)強(qiáng)壯、固本扶正的珍貴 中草藥。民間傳說(shuō)靈芝有起死回生、長(zhǎng)生不老之功效。靈芝作為藥物已正式 被國(guó)家藥典收載，同時(shí)它又是國(guó)家批準(zhǔn)的新資源食品，無(wú)毒副作用，可以藥 食兩用。
目前對(duì)于癌癥的治療方法主要是放療、化療，不管是放療、化療都有著很 大的毒副作用，會(huì)引起嚴(yán)重的全身毒性反應(yīng)。如胃腸功能紊亂，肝腎功能受損， 脫發(fā)、惡心、嘔吐、口干、厭食、腹脹、腹瀉，有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)口腔潰瘍、腸梗 阻、便秘、胃腸出血等。如果反應(yīng)嚴(yán)重，會(huì)使病人無(wú)法承受而不得不停止治療。 可見(jiàn)，現(xiàn)有的放、化療等傳統(tǒng)療法只注重殺癌細(xì)胞，而忽視機(jī)體自身的抗癌能
力，忽視機(jī)體自身抗癌細(xì)胞群NK細(xì)胞、LAK。市場(chǎng)上也有一些增強(qiáng)人體自身的 免疫能力的，但很多藥物是存在很大的毒副作用，其效果也不是很明顯。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，設(shè)計(jì)提供一種無(wú)毒副作用，能增強(qiáng)人體 自身的免疫能力并且能抗腫瘤的藥物組合物及其生產(chǎn)方法的技術(shù)方案。
所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量百分比的組份構(gòu)
成
牛樟芝提取物20%-60%靈芝提取物5%-30%灰樹(shù)花提取物20%-60%。 所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量百分比的組份構(gòu)
成
牛樟芝提取物25%-55%靈芝提取物10%-25%灰樹(shù)花提取物25%-55%。 所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量百分比的組份構(gòu)
成牛樟芝提取物30%-50%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物30%-50%。 所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量百分比的組份構(gòu)
成
牛樟芝提取物35%-45%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物35%-45%。 所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于包括以下工藝步
驟
(1) 制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量2-10倍濃 度為60-80%的乙醇，在溫度60-8(TC下，提取1-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾 后濾渣，再在濾渣中加入濾渣重量1-5倍濃度為60-80%的乙醇，在溫度60-80 。C下，提取1-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，回收乙醇，得到浸膏備用； 取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15-25倍的水，提取1-3小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5-15倍的水，提取1-3小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行薄膜蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為l.O -1.5 g/cm3,然后進(jìn)行噴霧干燥，收集噴霧粉，即得到牛樟芝提取物；
(2) 制備靈芝提取物:取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量2-10倍濃度為60-80% 的乙醇，在溫度60-8(TC下，提取1-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在 濾渣中加入濾渣重量1-5倍濃度為60-80%的乙醇，在溫度60-80。C下，提取l-3 小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，回收乙醇，得到浸膏備用；取上述第二次 過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15-25倍的水，并調(diào)節(jié)PH至7-9，提取卜3小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5-15倍的水，并調(diào)節(jié)PH至7-9， 提取l-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行薄膜蒸發(fā)濃縮， 濃縮至密度為1.0 -1.2 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，收集噴霧粉，即得到靈芝 提取物；
(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量25-35倍的水，提取2-6小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.0-1. 1 g/cm、在濃縮液中加入濃縮液體積1-3倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌20-40 分鐘，放置10-15小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水， 加熱溶解，同時(shí)進(jìn)行攪拌，調(diào)節(jié)密度至1.0-1.05 g/cm3,然后噴霧干燥，收集 噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；
(4)將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重 量百分比進(jìn)行混合
牛樟芝提取物20%-60%靈芝提取物5%-30%灰樹(shù)花提取物20%_60%，即 得到抗腫瘤藥物組合物。
所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(1)中在牛 樟芝粗粉中加入4-8倍濃度為65-75%的乙醇，在溫度65-75。C下，提取2-3小 時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加入2-4倍濃度為65_75%的乙醇，在溫度65_75 。C下，提取2-3小時(shí)后；合并兩次濾液，回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得 到浸膏；在第二次過(guò)濾后的濾渣中加入17-23倍的水，提取1.5-2.5小時(shí)；取 過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入8-12倍的水，提取1.5-2.5小時(shí)；蒸發(fā)濃縮至密度為 1.02 -1.03 g/cm3，噴霧干燥采用進(jìn)風(fēng)溫度220-240°C，出風(fēng)溫度80-100°C 。
所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(2)中取靈 芝粗粉，加入4-8倍濃度為65-75%的乙醇，在溫度65-75。C下，提取2-3小時(shí)； 取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加入2-4倍濃度為65%-75%的乙醇，在溫度65-75。C 下，提取2-3小時(shí)后；合并兩次濾液，回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到 浸膏;第二次過(guò)濾后的濾渣中17-23倍的水，用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH至7. 5-8， 提取1.5-2.5小時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入8-12倍的水，用食用級(jí)氫氧化 鈉調(diào)節(jié)PH至7.5-8，提取1.5-2.5小時(shí)；蒸發(fā)濃縮至密度為1. 02 -1. 03 g/cm3， 噴霧干燥采用進(jìn)風(fēng)溫度220-240°C ，出風(fēng)溫度80-100°C 。所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(3)中加入
灰樹(shù)花細(xì)粉重量27-33倍的水，提取3-5小時(shí)；濾液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至相 對(duì)密度為1. 07-1. 09 g/cm3;濃縮液中加入濃縮液體積1. 5-2. 5倍濃度為95%的 乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌25-35分鐘，放置11-14小時(shí)；過(guò)濾后濾液回流冷凝回收 乙醇，沉淀物加入水，直至密度為1.0-1.04 g/cm3，噴霧干燥采用進(jìn)風(fēng)溫度 220-230°C，出風(fēng)溫度80-9(TC。
所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(4)中牛樟 芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重量百分比進(jìn)行混合
牛樟芝提取物25%-55%靈芝提取物10%-25%灰樹(shù)花提取物25%_55%。 所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(4)中牛樟 芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重量百分比進(jìn)行混合
牛樟芝提取物30%-50%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物30%-50。 本發(fā)明的一種抗腫瘤的藥物組合物是一種免疫增強(qiáng)劑，無(wú)毒副作用，其主 要通過(guò)增強(qiáng)人體自身的免疫能力從而達(dá)到抗腫瘤的效果。本發(fā)明采用的組方配 伍合理，組分都是來(lái)自天然產(chǎn)物，安全無(wú)毒副作用。其腫瘤抑制率為 26. 16%(P〈0.05)，抑制率與現(xiàn)有抗癌藥物環(huán)磷酰胺相當(dāng)，但毒性明顯低于環(huán)磷 酰胺。
本發(fā)明的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，設(shè)計(jì)合理，操作簡(jiǎn)單方便， 提取純度高。
具體實(shí)施例方式
以下通過(guò)實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。發(fā)明中涉及的牛樟芝由臺(tái) 灣購(gòu)入，靈芝、灰樹(shù)花由浙江方格藥業(yè)有限公司基地生產(chǎn)。
實(shí)施例1:
(1)制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量6倍濃度為75%的乙醇，在溫度75r下，提取2小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾 渣中加入濾渣重量4倍濃度為75%的乙醇，在溫度75。C下，提取1.5小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得 到浸膏；取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量22倍的水，提取2小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量10倍的水，提取1.5小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1.02 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度23(TC，出風(fēng)溫度9(TC，收集噴
霧粉，即得到牛樟芝提取物；
(2) 制備靈芝提取物取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量6倍濃度為75%的乙 醇，在溫度75X:下，提取2小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加 入濾渣重量4倍濃度為75%的乙醇，在溫度75"C下，提取1. 5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò) 濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到浸膏； 取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量22倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié) ra至7.5，提取2小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量IO 倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)ra至7.5，提取1.5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合 并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1.02 g/cm3，然后進(jìn) 行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度230°C，出風(fēng)溫度9(TC收集噴霧粉，即得到靈 芝提取物；
(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量30倍的水， 提取4小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.08 g/cm3; 在濃縮液中加入濃縮液體積1. 5倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌30分鐘， 放置12小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水，進(jìn)行加熱， 同時(shí)進(jìn)行攪拌，直至密度為1.02 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫 度225"C，出風(fēng)溫度85"C，收集噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；(4)將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重
量百分比進(jìn)行混合牛樟芝提取物40%、靈芝提取物20%、灰樹(shù)花提取物40%。
實(shí)驗(yàn)例
1. 藥物評(píng)價(jià)指標(biāo):腫瘤抑制率(％)。
給藥組平均瘤重
腫瘤抑制率=(1--) X100%
陰性對(duì)照組平均瘤重
觀察時(shí)間14天。
2. 實(shí)驗(yàn)主要步驟
2.1瘤株及實(shí)體腫瘤移植方法小鼠肝癌(H22)瘤株由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫 瘤研究所中心實(shí)驗(yàn)室常規(guī)保存。腫瘤細(xì)胞從液氮內(nèi)取出，37。C迅速解凍復(fù)蘇后， 接種于小鼠腹腔內(nèi)，8天后可見(jiàn)小鼠腹部脹大，腫瘤復(fù)蘇成功。
2.2腫瘤接種與分組處死荷瘤小鼠在無(wú)菌條件下抽取腹水癌細(xì)胞，稀釋、 計(jì)數(shù)、每只鼠接種0.2毫升細(xì)胞懸液。隨機(jī)分為6組，每組10只。即生理鹽水 組、環(huán)磷酰胺注射組、牛樟芝1組、牛樟芝2組、牛樟芝3組、牛樟芝4組。(其 中牛樟芝1組為牛樟芝提取物40%、灰樹(shù)花提取物60%混合物，牛樟芝2組為牛 樟芝提取物60%、灰樹(shù)花提取物40%混合物，牛樟芝3組為牛樟芝提取物100%， 牛樟芝4組為實(shí)施例1組合物即牛樟芝提取物40%、靈芝提取物20%、灰樹(shù)花提 取物40%混合物)
2. 3受試物劑量牛樟芝臨床人用劑量是6克/天(0. 5克/粒*4粒*3次/天)， 人的標(biāo)準(zhǔn)體重通常按70kg計(jì)算，即人的劑量為85. 71mg/kg。
根據(jù)Drug And Statistics Ver 1.0藥學(xué)軟件動(dòng)物間等效劑量換算(即人 與小鼠)，小鼠標(biāo)準(zhǔn)體重是0.02Kg，換算結(jié)果得個(gè)體所用劑量15.3557mg/只， 767.7848mg/Kg。第14天處死動(dòng)物，稱體重后完整剝離腫瘤并稱瘤重。計(jì)算腫瘤抑制率％，
DAS .verl.O藥理學(xué)軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1動(dòng)物給藥后反應(yīng)口服藥物期間小鼠活動(dòng)、進(jìn)食等一般狀態(tài)良好。
3. 2陽(yáng)性對(duì)照環(huán)磷酰胺及受試物1至4組與生理鹽水組比較-環(huán)磷酰胺與生理鹽水組比較腫瘤抑制率為46.2% (P〈0.001)。牛樟芝樣本4
抑瘤率為26. 16%(P<0.001)，其余牛樟芝樣本1、 2、 3的腫瘤抑制率分別為
17. 38%(P>0.05)、 19.07%(P〉0. 05)、 14. 74%(P>0. 05)。
表l: 口服中藥制劑牛樟芝對(duì)小鼠肺癌(Lewis)的抑制作用
組別 劑量動(dòng)物數(shù)給藥途徑體重(x士SD，g)瘤重抑制率p值
ng/kg)(只)次數(shù)前后(x士SD.g)(
生理鹽水組10口月艮X1421. 3431.243.792
環(huán)磷酰胺組2010注射X1421. 3229. 452.0446. 2<0. 001
牛樟芝1組 767. 7810口月艮X1420.0132. 6183. 1317. 38>0.05
牛樟芝2組 767. 7810口月艮X1421. 1428.033.06919. 07>0. 05
牛樟芝3組 767. 7810口月艮X1421. 3229.043.23314. 74>0. 05
牛樟芝4組 767. 7810口月艮X1421.3230. 942.826. 16<0. 001
表2:各實(shí)驗(yàn)組1本重變化(g)
分組o天3天6天 9天12天14天
生理鹽水組21. 3424. 1627.0530. 6330.82■31.24
CTX20mg/Kg21. 3221. 7624.3224. 3526.429. 45
牛樟芝1組20.0121.5724. 58931.6732.8532.618
牛樟芝2組21. 1422. 7124. 0324. 6930. 4428. 032
牛樟芝3組21.3222. 11323.0225.630. 9329. 036
牛樟芝4組21.3222.2123.8726. 293030. 9375
4實(shí)驗(yàn)結(jié)論
本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果口服牛樟芝4樣品組腫瘤抑制率為26. 16%(P〈0.001)，高于 其它各實(shí)驗(yàn)組，其余牛樟芝樣本l、 2、 3的腫瘤抑制率分別為17.38%(P〉0.05)、
1219.07%(P〉0.05)、 14.74%(P〉0.05)，其毒副作用小于環(huán)磷酰胺。
實(shí)施例2:
(1) 制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量10倍濃度為
60%的乙醇，在溫度6(TC下，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾 渣中加入濾渣重量5倍濃度為60%的乙醇，在溫度65。C下，提取2小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到 浸膏；取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15倍的水，提取3小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量15倍的水，提取3小時(shí)后，進(jìn)行 過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1.05 g/cm3， 然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度22(TC，出風(fēng)溫度8(TC收集噴霧粉，即 得到牛樟芝提取物；
(2) 制備靈芝提取物取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量8倍濃度為80%的乙 醇，在溫度8(TC下，提取1小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加 入濾渣重量3倍濃度為80%的乙醇，在溫度80。C下，提取1小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾； 合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到浸膏；取 上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH 至9，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量8倍的水， 并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH至9，提取1小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和 上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1.03 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥， 噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度225T:，出風(fēng)溫度85'C收集噴霧粉，即得到靈芝提取物；
(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量25倍的水， 提取2小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.0 g/cm3;在 濃縮液中加入濃縮液體積3倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌20分鐘，放置 10小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水，進(jìn)行加熱，同時(shí)進(jìn)行攪拌，直至密度為1. 05 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度220 °C，出風(fēng)溫度80。C，收集噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；
(4)將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重 量百分比進(jìn)行混合牛樟芝提取物60%、靈芝提取物20%、灰樹(shù)花提取物20%。
最后得到的藥物組合物經(jīng)試驗(yàn)，其腫瘤抑制率為23. 5%。
實(shí)施例3:
(1) 制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量5倍濃度為 80%的乙醇，在溫度80。C下，提取1小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾 渣中加入濾渣重量1倍濃度為80%的乙醇，在溫度6(TC下，提取3小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到 浸膏；取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量25倍的水，提取1小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5倍的水，提取3小時(shí)后，進(jìn)行 過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1.5 g/cm3， 然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度240°C ，出風(fēng)溫度IO(TC收集噴霧粉，即 得到牛樟芝提取物；
(2) 制備靈芝提取物取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量10倍濃度為60%的 乙醇，在溫度6(TC下，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中 加入濾渣重量5倍濃度為60%的乙醇，在溫度6(TC下，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò) 濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到浸膏； 取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量25倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié) PH至7，提取1小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量15倍
的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)ra至7，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次
濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1. 2 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干 燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度24CTC ，出風(fēng)溫度IO(TC收集噴霧粉，即得到靈芝提取物;(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量28倍的水， 提取6小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1. 1 g/cm3;在 濃縮液中加入濃縮液體積2.5倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌40分鐘，放 置15小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水，進(jìn)行加熱，同 時(shí)進(jìn)行攪拌，直至密度為1.0g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度230 °C，出風(fēng)溫度9(TC，收集噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；
(4) 將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重 量百分比進(jìn)行混合牛樟芝提取物55%、靈芝提取物15%、灰樹(shù)花提取物30%。
最后得到的藥物組合物經(jīng)試驗(yàn)，其腫瘤抑制率為24. 5%。 實(shí)施例4:
(1) 制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量2倍濃度為
78%的乙醇，在溫度65'C下，提取2.5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在 濾渣中加入濾渣重量3倍濃度為65%的乙醇，在溫度8(TC下，提取1小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得 到浸膏；取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量20倍的水，提取2. 5小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量8倍的水，提取1小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1. 0 g/cm3， 然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度230。C，出風(fēng)溫度IO(TC收集噴霧粉，即 得到牛樟芝提取物；
(2) 制備靈芝提取物取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量2倍濃度為65%的乙 醇，在溫度6(TC下，提取2.5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中 加入濾渣重量1倍濃度為65%的乙醇，在溫度65。C下，提取3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò) 濾；合并兩次濾液，用乙醇回流塔回流冷凝回收乙醇，直至無(wú)醇味，得到浸膏； 取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量20倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)ra至8，提取2.5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5
倍的水，并用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH至8，提取2.5小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并 兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為1. 0 g/cm3，然后進(jìn)行噴 霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度240°C ，出風(fēng)溫度10(TC收集噴霧粉，即得到靈芝提 取物；
(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量35倍的水， 提取5小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.05 g/cm3; 在濃縮液中加入濃縮液體積1倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌35分鐘，放 置15小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水，進(jìn)行加熱，同 時(shí)進(jìn)行攪拌，直至密度為1.01 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度 230°C，出風(fēng)溫度9(TC，收集噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；
(4) 將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重 量百分比進(jìn)行混合牛樟芝提取物55%、靈芝提取物15%、灰樹(shù)花提取物30%。
最后得到的藥物組合物經(jīng)試驗(yàn)，其腫瘤抑制率為26. 05%。 實(shí)施例5:
按牛樟芝提取物35%、靈芝提取物25%和灰樹(shù)花提取物40%混合，其他步驟 及條件均與實(shí)施例1相同，最后得到的藥物組合物經(jīng)試驗(yàn)，其腫瘤抑制率為
24. 15%。
實(shí)施例6:
按牛樟芝提取物54%、靈芝提取物14%和灰樹(shù)花提取物32%混合，其他步驟
及條件均與實(shí)施例1相同，最后得到的藥物組合物經(jīng)試驗(yàn)，其腫瘤抑制率為
25. 18%。
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量百分比的組份構(gòu)成牛樟芝提取物 20％-60％ 靈芝提取物 5％-30％ 灰樹(shù)花提取物 20％-60％。
2. 如權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量 百分比的組份構(gòu)成牛樟芝提取物25%_55°/。靈芝提取物10%-25%灰樹(shù)花提取物25%-55%。
3. 如權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量 百分比的組份構(gòu)成牛樟芝提取物30%-50%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物30%-50%。
4. 如權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的藥物組合物，其特征在于由下述重量 百分比的組份構(gòu)成牛樟芝提取物35%-45%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物35%-45%。
5. —種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于包括以下工藝步驟(1) 制備牛樟芝提取物取牛樟芝粗粉，加入牛樟芝粗粉重量2-10倍濃 度為60-80%的乙醇，在溫度60-8(TC下，提取1-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾 后濾渣，再在濾渣中加入濾渣重量卜5倍濃度為60_80%的乙醇，在溫度60-80 。C下，提取l-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，回收乙醇，得到浸膏備用； 取上述第二次過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15-25倍的水，提取1-3小時(shí)后，進(jìn) 行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5-15倍的水，提取1-3小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行薄膜蒸發(fā)濃縮，濃縮至密度為l.O -1.5g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，收集噴霧粉，即得到牛樟芝提取物；(2) 制備靈芝提取物:取靈芝粗粉，加入靈芝粗粉重量2-10倍濃度為60-80% 的乙醇，在溫度60-8(TC下，提取l-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，再在 濾渣中加入濾渣重量1-5倍濃度為60-80%的乙醇，在溫度60-8(TC下，提取l-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液，回收乙醇，得到浸膏備用；取上述第二次 過(guò)濾后的濾渣加入濾渣重量15-25倍的水，并調(diào)節(jié)PH至7-9，提取l-3小時(shí)后， 進(jìn)行過(guò)濾；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入濾渣重量5-15倍的水，并調(diào)節(jié)PH至7-9， 提取1-3小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；合并兩次濾液和上述浸膏后，進(jìn)行薄膜蒸發(fā)濃縮， 濃縮至密度為1.0 -1.2 g/cm3，然后進(jìn)行噴霧干燥，收集噴霧粉，即得到靈芝 提取物；(3) 制備灰樹(shù)花提取物取灰樹(shù)花細(xì)粉，加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量25-35倍的 水，提取2-6小時(shí)后，進(jìn)行壓濾；取濾液進(jìn)行濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.0-1.1 g/cm 在濃縮液中加入濃縮液體積1-3倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌20-40 分鐘，放置10-15小時(shí)后，進(jìn)行過(guò)濾；過(guò)濾后濾液回收乙醇，沉淀物加入水， 加熱溶解，同時(shí)進(jìn)行攪拌，調(diào)節(jié)密度至1.0-1.05 g/cm3，然后噴霧干燥，收集 噴霧粉，即得到灰樹(shù)花提取物；(4) 將上述所得到的牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重 量百分比進(jìn)行混合牛樟芝提取物20%-60%靈芝提取物5%-30%灰樹(shù)花提取物20%-60%，即 得到抗腫瘤藥物組合物。
6.如權(quán)利要求5所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于 步驟(1)中在牛樟芝粗粉中加入4-8倍濃度為65-75%的乙醇，在溫度65-75" 下，提取2-3小時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加入2-4倍濃度為65-75%的乙 醇，在溫度65-75"C下，提取2-3小時(shí)后；合并兩次濾液，回流冷凝回收乙醇， 直至無(wú)醇味，得到浸膏；在第二次過(guò)濾后的濾渣中加入17-23倍的水，提取 L5-2.5小時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入8-12倍的水，提取1.5-2.5小時(shí)； 蒸發(fā)濃縮至密度為1. 02 -1. 03 g/cm3，噴霧干燥采用進(jìn)風(fēng)溫度220-240°C，出風(fēng) 溫度80-100°C。
7. 如權(quán)利要求5所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于步驟(2)中取靈芝粗粉，加入4-8倍濃度為65-75%的乙醇，在溫度65-75。C下， 提取2-3小時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，再在濾渣中加入2-4倍濃度為65-75%的乙醇， 在溫度65-75X:下，提取2-3小時(shí)后；合并兩次濾液，回流冷凝回收乙醇，直至 無(wú)醇味，得到浸膏；第二次過(guò)濾后的濾渣中17-23倍的水，用食用級(jí)氫氧化鈉 調(diào)節(jié)PH至7. 5-8，提取1. 5-2. 5小時(shí)；取過(guò)濾后濾渣，濾渣中加入8-12倍的水， 用食用級(jí)氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH至7. 5-8，提取1. 5-2. 5小時(shí);蒸發(fā)濃縮至密度為1. 02 -1.03 g/cm3，噴霧干燥采用進(jìn)風(fēng)溫度220-240°C，出風(fēng)溫度80-10(TC 。
8. 如權(quán)利要求5所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于 步驟(3)中加入灰樹(shù)花細(xì)粉重量27-33倍的水，提取3-5小時(shí)；濾液進(jìn)行蒸發(fā) 濃縮，濃縮至相對(duì)密度為1.07-1.09 g/cm、濃縮液中加入濃縮液體積1.5-2.5 倍濃度為95%的乙醇進(jìn)行醇沉，攪拌25-35分鐘，放置11-14小時(shí)；過(guò)濾后濾液 回流冷凝回收乙醇，沉淀物加入水，直至密度為1.0-1.04 g/cm3，噴霧干燥采 用進(jìn)風(fēng)溫度220-23(TC ，出風(fēng)溫度80-90°C 。
9. 如權(quán)利要求5所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于 步驟(4)中牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重量百分比進(jìn)行 混合牛樟芝提取物25%-55%靈芝提取物10%-25%灰樹(shù)花提取物25%-55%。
10. 如權(quán)利要求5所述的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于 步驟(4)中牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物按下述重量百分比進(jìn)行 混合牛樟芝提取物30%-50%靈芝提取物15%-20%灰樹(shù)花提取物30%-50。
全文摘要
一種抗腫瘤的藥物組合物及其生產(chǎn)方法，屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域。其藥物組合物為牛樟芝提取物20％-60％，靈芝提取物5％-30％和灰樹(shù)花提取物20％-60％，其生產(chǎn)步驟包括制備牛樟芝提取物；制備靈芝提取物；制備灰樹(shù)花提取物；將牛樟芝提取物、靈芝提取物和灰樹(shù)花提取物混合。本發(fā)明的一種抗腫瘤的藥物組合物是一種免疫增強(qiáng)劑，無(wú)毒副作用，其主要通過(guò)增強(qiáng)人體自身的免疫能力從而達(dá)到抗腫瘤的效果。本發(fā)明采用的組方配伍合理，組分都是來(lái)自天然產(chǎn)物，安全無(wú)毒副作用。其腫瘤抑制率為26.16％(P＜0.05)，抑制率與現(xiàn)有抗癌藥物環(huán)磷酰胺相當(dāng)，但毒性明顯低于環(huán)磷酰胺。本發(fā)明的一種抗腫瘤的藥物組合物的生產(chǎn)方法，設(shè)計(jì)合理，操作簡(jiǎn)單方便，提取純度高。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101559084SQ20091009793
公開(kāi)日2009年10月21日 申請(qǐng)日期2009年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月23日
發(fā)明者周曉芬, 徐財(cái)泉, 茆廣華 申請(qǐng)人:徐財(cái)泉