專利名稱：一種清熱解毒,利尿通淋的中藥組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及制備方法，特別涉及一種清熱解毒，利尿通淋的中 藥組合物及制備方法。
背景技術(shù)：
泌尿系統(tǒng)感染為泌尿系統(tǒng)常見疾病，在不同年齡組的人群中，泌尿系統(tǒng)感染的發(fā) 病率不同。新生兒中以男童多見，青少年和成年人群中女性的感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于男性。對(duì)女 性而言，年齡每增加10歲，感染率便增加1%，至65歲時(shí)可達(dá)10%。有50%的女性一生中 至少會(huì)得一次尿路感染。老年人群中，無論男性和女性，尿路感染都是一個(gè)重要問題。老年 人患泌尿道疾病(如前列腺增生癥、神經(jīng)原性膀胱和導(dǎo)尿管使用等)增多，會(huì)導(dǎo)致復(fù)雜性泌 尿系統(tǒng)感染。在第一次尿路感染發(fā)生后常會(huì)出現(xiàn)多次復(fù)發(fā)。一項(xiàng)對(duì)179例膀胱炎婦女的前 瞻性研究表明，44%的患者在12個(gè)月內(nèi)至少有一次復(fù)發(fā)，其中33%復(fù)發(fā)感染的致病菌與初 次感染的致病菌的血清型一致。盡管多數(shù)泌尿系統(tǒng)感染復(fù)發(fā)源于新菌株的重新感染，初次 感染病原菌治療后的潛伏和同一菌株的重新感染也見于相當(dāng)多的患者。但該病經(jīng)治療后， 臨床癥狀往往得到迅速好轉(zhuǎn)而被忽視作徹底的治療。因多次治療與反復(fù)發(fā)作易造成惡性循 環(huán)，從而形成慢性而經(jīng)久不愈病情。該病的成因除了細(xì)菌感染的因素外，還易受諸多因素影響，如人體的抵抗力或免 疫反應(yīng)等。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)一向主張整體治療，認(rèn)為慢性泌尿系感染多屬“正已傷，邪仍實(shí)”的虛 實(shí)兼證類型，其病機(jī)主要為內(nèi)因脾虛，正氣不固，外感濕熱病毒而發(fā)病，以致脾虛水濕下注 與濕熱蘊(yùn)結(jié)下焦，致使腎與膀胱功能失調(diào)而發(fā)病，屬中醫(yī)的淋證范疇，故需清熱利濕與扶正 并重的治療方法。本發(fā)明采用清熱利濕、健脾固腎，臨床上對(duì)慢性泌尿系感染或急性發(fā)作(尿道炎、 膀胱炎、腎盂腎炎)有極佳的效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明第一個(gè)目的在于提供一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物；本發(fā)明的第 二個(gè)目的在于提供該中藥組合物制劑的制備方法；本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供該中藥組 合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物制劑的原料組成為四季紅450-640重量份、車前草200-300重量份。四季紅為蓼科植物頭花蓼Polygonum capitatun Buch. -Ham. ex D. Don的干燥全 草或地上部分。春、夏、秋三季采收，鮮用或晾干。^llr^^J^lir^l^^lirPlantago asiatica L. ^^p^fifPlantago depressa Willd.的干燥全草。夏季采挖，除去泥沙，曬干。本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物制劑的原料組成優(yōu)選為
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四季紅540重量份、車前草260重量份。本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物制劑的制備方法為二味藥材，加水 煎煮1-5次，每次0. 5-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮，按照常規(guī)工藝，制成臨床或藥學(xué)上 可接受的劑型，包括但不限于片劑、膠囊劑、散劑、軟膠囊劑、滴丸、蜜丸、丸劑、顆粒劑、蜜煉 膏劑、緩釋制劑、速釋制劑、控釋制劑、口服液體制劑、注射制劑或外用制劑。本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物口服液的制備方法優(yōu)選為二 味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10 1. 15(50°C)的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液回收乙醇， 加入適量蔗糖、山梨酸，加水調(diào)整總量至1000體積份，攪勻，灌裝，即得；所述重量份/體積 份與g/ml相對(duì)應(yīng)。本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物顆粒劑的制備方法優(yōu)選為以 上二味藥材，水煎三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10 1. 15 (50°C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液濃縮至相 對(duì)密度為1.35 1.40(50°C )的稠膏，加入適宜輔料，制成顆粒，干燥，即得。本發(fā)明一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物膠囊劑的制備方法優(yōu)選為以 上二味藥材，水煎三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10 1. 15 (50°C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液濃縮至相 對(duì)密度為1.35 1.40(50°C )的稠膏，加入適宜輔料，制成顆粒，干燥，裝膠囊，即得。本發(fā)明提供該中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法，該方法包括步驟A、鑒別取該中藥組合物口服液制劑5_50ml，用石油醚(60-90°C )振搖提取1_3 次，每次15-30ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取1-3次，每次10-40ml，合并 乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解作為供試品溶液；另取四季紅對(duì)照藥材0. 5-5g， 加水20-100ml煎煮15-45分鐘，濾過，濾液濃縮至10_40ml，用乙酸乙酯振搖提取1_3次， 同法制成對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各2-10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 3-5 5-8 0.4-0.7的環(huán)己烷-丙酮-甲酸混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、鑒別供試品溶液的制備取該中藥組合物口服液制劑5_50ml，用石油醚 (60-90°C )振搖提取1-3次，每次15-30ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取1_3 次，每次10-40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解作為供試品溶液；另取車 前草對(duì)照藥材0. 5-5g加水60-140ml煎煮15-45分鐘，濾過，濾液濃縮至10_40ml，用乙酸乙 酯振搖提取1-3次，每次10-40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml作為對(duì)照藥材溶 液；吸取上述兩種溶液各2-8 iU，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以5-8 3-6 0. 2的環(huán) 己烷-丙酮-甲酸混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、浸出物含量測(cè)定精密量取該中藥組合物口服液制劑5_20ml，置已干燥至恒重 的蒸發(fā)皿中，在水浴蒸干后，于105°C干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重 量；浸出物含量不得低于4.0%。上述質(zhì)量檢測(cè)方法中優(yōu)選包括如下鑒別法
四季紅薄層鑒別取中藥組合物制劑20ml，用石油醚(60_90°C )振搖提取2次， 每次20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸 干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解作為供試品溶液；另取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分 鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，同法制成對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩 種溶液各5iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4 6 0.5的環(huán)己烷-丙酮-甲酸為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜 中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；車前草薄層鑒別供試品溶液的制備同鑒別A項(xiàng)下供試品溶液的制備方法；另取 車前草對(duì)照藥材lg加水100ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取 2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml作為對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種 溶液各4iU，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2)為展開 劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中， 在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；浸出物含量測(cè)定精密量取中藥組合物制劑10ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中， 在水浴蒸干后，于105°C干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量；浸出物 含量不得低于4.0%。上述質(zhì)量檢測(cè)方法所述中藥組合物制劑為四季紅540g、車前草260g，加水煎煮 三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10 1. 15(50°C )的清膏，放 冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液回收乙醇，加入適量蔗糖、山梨 酸，加水調(diào)整總量至1000ml，攪勻，灌裝，即得。本發(fā)明具有很好的清熱解毒，利尿通淋作用，對(duì)小鼠足腫脹有明顯抑制作用，具有 明顯的抗炎作用，能明顯增加小鼠尿量明顯促進(jìn)尿中K+、Na+的排出。本發(fā)明一種的中藥組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明含量測(cè)定方 法檢測(cè)專屬性好、穩(wěn)定性高、重現(xiàn)性好、精密度高，更加適合工業(yè)化的生產(chǎn)，真正確保了臨床 用藥的安全、有效、可靠。下面實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。本發(fā)明所有實(shí)驗(yàn)例所選用的制劑均為根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1制得的本發(fā)明片劑，但 是本發(fā)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不僅限于該片劑。實(shí)驗(yàn)例1 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)材料藥物及試劑中藥組合物制劑口服液，灌胃(ig)量為3. 5g生藥/kg組，7. 0g生藥 /kg組，14g生藥/kg組，醋酸強(qiáng)的松5mg/片、氫氯噻嗪25mg/片。動(dòng)物昆明種小白鼠。2、實(shí)驗(yàn)方法2. 1對(duì)蛋清所致小鼠足腫脹的影響取小鼠50只，體重25士5g，全雄。按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分組及給藥劑 量見表1。每日ig給藥1次，連續(xù)4次。末次給藥后30min，每鼠右足注入20%蛋清30ul 致炎，lh后自踝關(guān)節(jié)下0. 5mm處剪下雙后足稱重，以左右足重差為足腫脹程度(mg)。2. 2對(duì)角叉菜膠所致小鼠足腫脹的影響
取小鼠50只，體重25士5g，全雄。按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分組及給藥 劑量見表1。每日ig給藥1次，連續(xù)4次。末次給藥后30min，每鼠右足注入角叉菜膠 30ul致炎，3. 5h后自踝關(guān)節(jié)下0. 5mm處剪下雙后足稱重，以左右足重差為足腫脹程度(mg)。
2. 3對(duì)小鼠尿量及尿中K+、Na\ Cl_含量的影響取全雄小鼠，體重40士 10g，常規(guī)喂養(yǎng)，自由飲水。選取2h內(nèi)尿量達(dá)到灌入量的 40%以上的小鼠50只，分組及給藥劑量見表2。試驗(yàn)前一天ig給藥1次，禁16 18h，自由 飲水。試驗(yàn)每次取1只小鼠，輕壓動(dòng)物下腹排盡余尿，按0. 4ml/10gip生理鹽水給予負(fù)荷， 然后ig給藥或0. 5% CMC-Na對(duì)照液。隨機(jī)將動(dòng)物置于簡(jiǎn)易代謝籠中，每籠放1只小鼠，收 集4h總尿量，求出小鼠每10g體重的尿量及尿量增加百分率％。收集尿液密閉后冰箱0°C 保存，測(cè)定前將尿液在37°C水浴中溶解，搖勻后取樣并用去離子水稀釋10倍。采用電解質(zhì) 分析儀測(cè)定尿中K+、Na\ CF含量，求出尿中K+、Na\ Cl_排出量。3、結(jié)果
3. 1對(duì)蛋清、角叉菜膠所致小鼠足腫脹的影響由表1可見，中藥組合物制劑給藥組，均能明顯對(duì)抗蛋清所致小鼠足腫脹，與模型 對(duì)照組比較有顯著性差異P < 0.01-0. 001。中藥組合物制劑能明顯對(duì)抗角叉菜膠所致小鼠 足腫脹，與模型對(duì)照組比較有顯著性差異P < 0. 05。強(qiáng)的松組亦能明顯抑制蛋清、角叉菜膠 所致小鼠足腫脹程度(P < 0.01-0. 001)。表1中藥組合物制劑對(duì)蛋清、角叉菜膠所致小鼠足腫脹的影響(X士s，n=10) 注與模型對(duì)照比較:*P< 0. 05，**P < 0. 01，***P < 0. 0013. 2對(duì)小鼠尿量及尿中K+、Na\ Cl_含量的影響由表2所示，中藥組合物制劑組及氫氯噻嗪組小鼠尿量有明顯增加，與對(duì)照組比 較有顯著性差異(P < 0. 05-0. 01)。從表3可見，中藥組合物制劑組小鼠尿中K+排出量均明顯增加，與正常對(duì)照組比 較均有顯著性差異P < 0. 01。中藥組合物制劑組及氫氯噻嗪組則能明顯促進(jìn)小鼠尿中Na+ 的排出，與對(duì)照組比較均有顯著性差異P < 0. 05-0. 01。各給藥組尿中Cl_排出量均有增加 趨勢(shì) P > 0. 05。
7 中藥組合物制劑對(duì)蛋清所致小鼠足腫脹有明顯抑制作用，能明顯增加小鼠尿量明顯促進(jìn)尿中K-、Na’的排出。本試驗(yàn)結(jié)果表明中藥組合物制劑具有抗炎、利尿作用其中利尿作用可能與促進(jìn)尿中K+、Na+、Cl—排出有關(guān)。實(shí)驗(yàn)例2 四季紅薄層鑒別試驗(yàn)本中藥組合物制劑成分復(fù)雜，本發(fā)明利用薄層色譜鑒定制劑中四季紅藥材。1、薄層色譜方法的選擇常見的薄層色譜有硅膠薄層層析、紙層析等。四季紅中成分多為黃酮類成分，中等極性，選擇硅膠層析進(jìn)行試驗(yàn)。2、供試品的制備2. 1四季紅有效成分的富集、純化使用分段萃取法對(duì)制劑中的四季紅成分進(jìn)行富集、純化。取中藥組合物制劑20ml，用石油醚(60_90°C )振搖提取2次，每次20ml，棄去石油 醚液，合并石油醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液1。將供試品溶液1萃余水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯 液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液2。將供試品溶液2萃余水液再用正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液， 蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液3。取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，按供試品 萃取方法分別制取對(duì)照藥材溶液1、2、3。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于三塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)照藥材溶液1色譜中觀察不到明顯斑點(diǎn)。對(duì)照藥材溶液2色譜中有明顯斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)清晰。對(duì)照藥材溶液3色譜中觀察不到明顯斑點(diǎn)。供試品溶液1色譜中在與對(duì)照藥材溶液2色譜相應(yīng)位置上沒有觀察到明顯斑點(diǎn)。供試品溶液2色譜中在與對(duì)照藥材溶液2色譜相應(yīng)位置上，有相同顏色的斑點(diǎn)，斑 點(diǎn)清晰，板面整潔。供試品溶液3色譜中在與對(duì)照藥材溶液3色譜相應(yīng)位置上沒有觀察到明顯斑點(diǎn)。 因此使用供試品溶液2及對(duì)照藥材溶液2制備方法制備供試品溶液和對(duì)照藥材溶液。2. 2供試品制備方法的優(yōu)選(1)、低極性雜質(zhì)的除去方法優(yōu)選利用正交試驗(yàn)對(duì)影響除去低極性雜質(zhì)的3個(gè)因素進(jìn)行考察，分別為溶劑種類、萃 取溶劑量、萃取次數(shù)，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表4 表 4 按正交表L9 (34)安排實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法如表5 表5 通過以上實(shí)驗(yàn)除去制劑中低成分雜質(zhì)后，水液用乙酸乙酯振搖提取2次，每次 20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液。通過以上試驗(yàn)共制 備9份供試品溶液。取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙 酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。試驗(yàn)結(jié)果表明采用石油醚(60-90°C )除雜的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置，顯相 同顏色的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，板面整潔，無雜質(zhì)干擾。采用苯、二氯甲烷除雜時(shí)，供試品溶液色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，斑點(diǎn) 顏色較使用石油醚(60-90°C )除雜的供試品溶液色譜中斑點(diǎn)顏色弱。沒有使用溶劑萃取的樣品(萃取次數(shù)為0)，供試品溶液較濃稠，點(diǎn)樣困難，色譜中 雜質(zhì)多，干擾四季紅鑒別。確定選用石油醚(60_90°C )除雜。
除去制劑中低極性雜質(zhì)的最優(yōu)方法為取本中藥組合物制劑口服液20ml，用石油 醚(60-90°C )振搖提取2次，每次20ml，棄去石油醚液。(2)、中極性段富集成分的考察利用正交試驗(yàn)對(duì)影響制劑中四季紅成分富集的3個(gè)因素進(jìn)行考察，分別為溶劑種 類、萃取溶劑量、萃取次數(shù)，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表6 表 6 按正交表L9 (34)安排實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法如表7 表7 以上實(shí)驗(yàn)首先使用取本中藥組合物制劑口服液20ml，用石油醚(60-90°C )振搖提 取2次，每次20ml，棄去石油醚液，再按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，共制備9份供試品溶液。取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙 酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用乙酸乙酯富集制劑中四季紅成分的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位 置，顯相同顏色的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，板面整潔，無雜質(zhì)干擾。
采用乙醚、氯仿富集制劑中四季紅成分時(shí)，供試品溶液色譜中在與對(duì)照藥材色譜 相應(yīng)位置上，斑點(diǎn)顏色較使用乙酸乙酯萃取的供試品溶液色譜中斑點(diǎn)顏色弱。確定選用乙酸乙酯富集制劑中四季紅成分。最優(yōu)供試品制備方法為取本中藥組合物制劑口服液20ml，用石油醚(60-90°C ) 振搖提取2次，每次20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并 乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液。2. 3對(duì)照藥材溶液制備方法考察對(duì)照藥材應(yīng)遵循制劑工藝，水煎煮后，提取水提液中四季紅相應(yīng)成分進(jìn)行試驗(yàn)。(1)、對(duì)照藥材煎煮時(shí)間的考察取四季紅對(duì)照藥材Ig三份，加水50ml分別煎煮15、30、60分鐘，濾過，濾液濃縮至 20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液1、2、3。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于三塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明煎煮30分鐘即可提取完全。(2)、對(duì)照藥材提取溶劑量的考察取四季紅對(duì)照藥材Ig三份，分別加水25、50、IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮 至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液1、2、3。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于三塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明50ml水煎煮30分鐘即可提取完全。(3)、富集對(duì)照藥材中四季紅成分實(shí)驗(yàn)條件的考察方法一取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用 石油醚(60-90°C )振搖提取2次，每次20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2 次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為對(duì)照藥材溶液。方法二 取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用 乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為對(duì)照 藥材溶液。吸取上述溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于兩塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (4:6: 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明制備對(duì)照藥材溶液時(shí)不需要使用石油醚(60-90°C )萃取除去低極 性成分，這部分成分對(duì)檢測(cè)沒有干擾。最終確定對(duì)照藥材溶液制備方法為取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分 鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘 渣加甲醇Iml使溶解作為對(duì)照藥材溶液。2. 4供試品溶液及對(duì)照藥材溶液點(diǎn)樣量的考察按2. 2,2. 3項(xiàng)下方法制備供試品溶液。
吸取上述溶液各2 μ 1、5 μ 1、10 μ 1，分別點(diǎn)于三塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(4 6 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至 斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下對(duì)照藥材溶液點(diǎn)樣量為2 μ 1時(shí)，熒光斑點(diǎn)強(qiáng)度較低，不宜觀察；點(diǎn)樣量為5μ 1時(shí)，四季紅對(duì)照藥材溶液薄層上熒光斑點(diǎn)清晰，大小適中；點(diǎn)樣量為10 μ 1時(shí)，斑點(diǎn)太大，拖尾。因此，確定四季紅對(duì)照藥材溶液的最佳點(diǎn)樣量為5μ 1。供試品溶液點(diǎn)樣量為2μ 1時(shí)，在四季紅對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上斑點(diǎn)強(qiáng)度 較低，不宜觀察；點(diǎn)樣量為5 μ 1時(shí)，在四季紅對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上斑點(diǎn)明顯，斑點(diǎn)大小適 中，前后無干擾；點(diǎn)樣量為10 μ 1時(shí)，在四季紅對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上熒光斑點(diǎn)較大，明顯 拖尾，與前后熒光斑點(diǎn)相連。因次確定供試品的最佳點(diǎn)樣量為5 μ 1。2. 5展開劑的選擇按2. 2,2. 3項(xiàng)下方法制備供試品溶液。吸取上述溶液各5μ 1，分別用以下展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶 液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。試驗(yàn)結(jié)果如下方法1 展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(20 6 0.5)，展開劑極性較小，供試品、 對(duì)照藥材斑點(diǎn)Rf值接近0. 2，供試品色譜中四季紅成分斑點(diǎn)與前后斑點(diǎn)未分開。方法2 展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(4:6:0. 5)，極性適宜，對(duì)照藥材斑點(diǎn)Rf 值接近0. 5，供試品色譜中，在于對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的斑點(diǎn)，分離良好，前后無干擾；方法3:展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(1 6 0.5)，極性偏高，供試品、橙皮苷 斑點(diǎn)Rf值接近0. 85，供試品色譜中四季紅成分斑點(diǎn)與前后斑點(diǎn)未分開；通過上述實(shí)驗(yàn)，確定分離中藥組合物制劑中四季紅成分的最優(yōu)薄層展開劑為環(huán)己 烷-丙酮-甲酸(4 6 0.5)。2. 6顯色劑的選擇四季紅中的成分日光沒有顏色，考慮顯色后觀察。常用的通用型顯色劑為10%的 硫酸乙醇溶液及碘蒸氣。按上述方法制備供試品溶液、對(duì)照藥材溶液。取三塊硅膠薄層分別點(diǎn)樣、展開、晾干。方法一紫外光燈(365nm)下檢視；方法二 噴以10%的硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；方法三碘蒸氣顯色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下方法一，薄層在紫外光燈(365nm)下觀察，供試品溶液與對(duì)照藥材溶液色譜中沒 有觀察到顏色及Rf值一致的斑點(diǎn)。方法二，薄層在噴以10%的硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在四季紅對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的位置上，供試品溶液有明顯相同顏色的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，前后無干擾。方法三，碘蒸氣熏后斑點(diǎn)較多。在四季紅對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的位置上，供試品溶液色 譜中斑點(diǎn)與其他斑點(diǎn)相互重疊，干擾鑒別。最終，確定分離中藥組合物制劑中四季紅成分的最佳顯色條件為噴以10%的硫酸 乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)例3 車前草薄層鑒別試驗(yàn)車前草中主要含有黃酮類化合物如車前苷等，為車前草的有效成分。本處方藥味較多，成分復(fù)雜，薄層鑒別方法比較獨(dú)特。1、供試品制備方法及薄層板的選擇選擇本發(fā)明中利用車前草中化學(xué)成分與四季紅中化學(xué)成分極性相似，在四季紅薄層鑒 別供試品中也含有車前草中成分，以下對(duì)此進(jìn)行驗(yàn)證供試品溶液的制備取中藥組合物制劑20ml，用石油醚(60-90°C )振搖提取2次， 每次20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸 干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液。取車前草對(duì)照藥材Ig加水IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙 酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml作為對(duì)照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (6:4: 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果表明供試品色譜中，在與車前草對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑 點(diǎn)。四季紅薄層鑒別供試品溶液制備方法同樣適用于制備車前草的薄層鑒別供試品。2、對(duì)照藥材溶液制備方法考察對(duì)照藥材應(yīng)遵循制劑工藝，水煎煮后，提取水提液中車前草相應(yīng)成分進(jìn)行試驗(yàn)。(1)、對(duì)照藥材煎煮時(shí)間的考察取車前草對(duì)照藥材Ig三份，加水IOOml分別煎煮15、30、60分鐘，濾過，濾液濃縮 至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液1、2、3。吸取上述三種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (6:4: 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明煎煮30分鐘即可提取完全。(2)、對(duì)照藥材提取溶劑量的考察取車前草對(duì)照藥材Ig三份，分別加水50、100、150ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮 至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，制成對(duì)照藥材溶液1、2、3。吸取上述三種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (6:4: 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100ml水煎煮30分鐘即可提取完全。(3)、富集對(duì)照藥材中車前草成分實(shí)驗(yàn)條件的考察方法一取車前草對(duì)照藥材lg，加水IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用石油醚(60-90°C )振搖提取2次，每次20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為對(duì)照藥材溶液。方法二 取車前草對(duì)照藥材lg，加水IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml， 用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為對(duì) 照藥材溶液。吸取上述兩種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸 (6:4: 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明制備對(duì)照藥材溶液時(shí)不需要使用石油醚(60-90°C )萃取除去低極 性成分，這部分成分對(duì)檢測(cè)沒有干擾。最終確定對(duì)照藥材溶液制備方法為取車前草對(duì)照藥材Ig加水IOOml煎煮30分 鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘 渣加甲醇Iml作為對(duì)照藥材溶液。3、供試品溶液及對(duì)照藥材溶液點(diǎn)樣量的考察按2. 1,2. 2項(xiàng)下方法制備供試品溶液、對(duì)照藥材溶液。分別吸取上述供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各2μ 1、4μ 1、8μ 1，分別點(diǎn)于三塊硅膠 H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10% 硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下車前草對(duì)照藥材溶液點(diǎn)樣量為2μ 1時(shí)，熒光斑點(diǎn)強(qiáng)度較低，不宜觀察；點(diǎn)樣量為4μ 1時(shí)，四季紅對(duì)照藥材溶液薄層上熒光斑點(diǎn)清晰，大小適中；點(diǎn)樣量為8μ 1時(shí)，斑點(diǎn)太大，拖尾。因此，確定車前草對(duì)照藥材溶液的最佳點(diǎn)樣量為4 μ 1。供試品溶液點(diǎn)樣量為2μ 1時(shí)，在車前草對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上斑點(diǎn)強(qiáng)度 較低，不宜觀察；點(diǎn)樣量為4 μ 1時(shí)，在車前草對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上斑點(diǎn)明顯，斑點(diǎn)大小適 中，前后無干擾；點(diǎn)樣量為8μ 1時(shí)，在車前草對(duì)照藥材溶液相對(duì)應(yīng)的位置上熒光斑點(diǎn)較大，明顯拖 尾，與前后熒光斑點(diǎn)相連。因次確定供試品的最佳點(diǎn)樣量為4 μ 1。4、展開劑的選擇按上述方法制備供試品溶液和對(duì)照藥材溶液。吸取上述溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于三 塊硅膠H薄層板上，分別用以下展開劑展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加 熱至斑點(diǎn)顯色清晰。試驗(yàn)結(jié)果如下方法1 展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(15 4 0.2)，展開劑極性較小，供試品、 對(duì)照藥材斑點(diǎn)Rf值接近0. 3。供試品和對(duì)照藥材色譜中斑點(diǎn)均未得到較好的展開。方法2 展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2)，極性適宜，對(duì)照藥材斑點(diǎn)Rf 值接近0. 4-0. 6，但斑點(diǎn)形態(tài)不好，不太圓整，需改善甲酸的用量；方法3 展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(1 4 0.2)，極性適宜，對(duì)照藥材斑點(diǎn)Rf值接近0. 4-0. 6，且斑點(diǎn)圓整，清晰。通過與四季紅展開條件進(jìn)行比對(duì)，調(diào)整展開劑比例。確定分離中藥組合物制劑中 車前草成分的最優(yōu)薄層展開劑為環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2)。
5、顯色劑的選擇車前草中的成分日光沒有顏色，考慮顯色后觀察。常用的通用型顯色劑為10%的 硫酸乙醇溶液及碘蒸氣。按上述方法制備供試品溶液、對(duì)照藥材溶液。取三塊硅膠薄層分別點(diǎn)樣、展開、晾干。方法一紫外光燈(365nm)下檢視；方法二 噴以10%的硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；方法三碘蒸氣顯色。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下方法一，薄層在紫外光燈(365nm)下觀察，供試品溶液與對(duì)照藥材溶液色譜中沒 有觀察到顏色及Rf值一致的斑點(diǎn)。方法二，薄層在噴以10%的硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在車前草 對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的位置上，供試品溶液有明顯相同顏色的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，前后無干擾。方法三，碘蒸氣熏后斑點(diǎn)較多。在四季紅對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的位置上，供試品溶液色 譜中斑點(diǎn)與其他斑點(diǎn)相互重疊，干擾鑒別。最終，確定分離中藥組合物制劑中車前草成分的最佳顯色條件為噴以10%的硫酸 乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。6、薄層板的選擇常見硅膠薄層板有兩種，一種為硅膠G、一種為硅膠H薄層板，本發(fā)明中對(duì)這兩種 薄層板分離車前草成分的能力差別進(jìn)行比較，優(yōu)選最佳分離條件。按上述方法制備供試品溶液、對(duì)照藥材溶液。取硅膠G、H薄層板，均點(diǎn)樣4μ1供試品溶液與對(duì)照藥材溶液，以環(huán)己烷-丙酮-甲 酸(6 4 0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯 色清晰。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，硅膠G和硅膠H薄層板均可分離車前草中的化學(xué)成分，但硅膠H較 硅膠G薄層板實(shí)驗(yàn)結(jié)果更好，供試品色譜中在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)位置的斑點(diǎn)與前后 斑點(diǎn)分離更佳，所以選擇硅膠H薄層板分離車前草中成分。實(shí)驗(yàn)例4 中藥組合物制劑口服液總固體的測(cè)定本發(fā)明中改變了原有標(biāo)準(zhǔn)中利用HPLC測(cè)定制劑中槲皮素的含量規(guī)定制劑質(zhì)量， 而改用測(cè)定總固體量規(guī)定制劑質(zhì)量。有以下優(yōu)點(diǎn)中藥組合物制劑中化學(xué)成分復(fù)雜，槲皮素僅僅為無數(shù)成分中的一個(gè)成分，沒有代 表整體性，而且槲皮素不具有清熱解毒，利尿通淋的功效，使用槲皮素規(guī)定制劑的質(zhì)量不能 很好的保證制劑的療效。槲皮素化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，容易被氧化，供試品溶液提取24小時(shí)后衰變嚴(yán)重，故使 用槲皮素作為含量測(cè)定檢測(cè)指標(biāo)會(huì)增加分析的難度，而且會(huì)造成質(zhì)量波動(dòng)較大。對(duì)于有效成分不明確的中藥制劑可以測(cè)定藥物的總固體量，也就是浸出物量規(guī)定制劑含量。本發(fā)明中利用總固體量規(guī)定制劑含量，制劑質(zhì)量穩(wěn)定，經(jīng)10批樣品的利尿?qū)嶒?yàn) 證明藥效穩(wěn)定，同時(shí)測(cè)定制劑中槲皮素含量，波動(dòng)較大，所以選擇測(cè)定總固體量規(guī)定制劑質(zhì)量。附
1、10批樣品利尿?qū)嶒?yàn)結(jié)果取小鼠120只分為12組，分別為空白組，10個(gè)給藥組，1個(gè)陽性藥對(duì)照組。試驗(yàn)每 次取1只小鼠，輕壓動(dòng)物下腹排盡余尿，按0. 4ml/10gip生理鹽水給予負(fù)荷，然后ig給藥或 0. 5% CMC-Na對(duì)照液。隨機(jī)將動(dòng)物置于簡(jiǎn)易代謝籠中，每籠放1只小鼠，收集4h總尿量，求 出小鼠每IOg體重的尿量及尿量增加百分率％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表8 表810批制劑利尿作用比較 注與正常對(duì)照組比較:*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 0110批樣品的利尿?qū)嶒?yàn)證明藥效穩(wěn)定，均可增加小鼠尿量。2、10批樣品利總固體及槲皮素含量測(cè)定結(jié)果，見表9 表910批樣品利總固體及槲皮素含量測(cè)定結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該中藥組合物制劑口服液用槲皮素作為含量測(cè)定指標(biāo)，結(jié)果穩(wěn)定性 較差，而使用總固體量作為含量測(cè)定指標(biāo)，結(jié)果穩(wěn)定。同時(shí)藥效結(jié)果穩(wěn)定，所以本中藥組合 物制劑口服液選用總固體量作為含量測(cè)定的指標(biāo)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1四季紅540g 車前草260g以上二味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 10 1. 15 (50 0C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清 液回收乙醇，加入適量蔗糖、山梨酸，加水調(diào)整總量至1000ml，攪勻，灌裝，即得。鑒別(1)取本品20ml，用石油醚(60_90°C )振搖提取2次，每次20ml，棄去石油醚液，水 液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作 為供試品溶液。另取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml， 用乙酸乙酯振搖提取2次，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液 各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(4 6 0.5)為展開劑， 展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與 對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2)供試品溶液的制備同鑒別(1)項(xiàng)下供試品溶液的制備方法。另取車前草對(duì) 照藥材Ig加水IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次 20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取 上述兩種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色 譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
浸出物精密量取本品10ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴蒸干后，于105°C干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。本品浸出物含量不得低于 4. 0%。功能主治清熱解毒，利尿通淋。用于濕熱蘊(yùn)結(jié)所致淋證，證見排尿不暢，淋漓澀痛。用法用量口服，一次1支，一日3次；5天一療程。規(guī)格每支IOml實(shí)施例2四季紅740g 車前草460g以上二味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 10 1. 15 (50 0C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清 液回收乙醇，加入適量蔗糖、山梨酸，加水調(diào)整總量至1000ml，攪勻，灌裝，即得。實(shí)施例3四季紅640g 車前草260g以上二味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 10 1. 15 (50 0C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清 液回收乙醇，加入適量蔗糖、山梨酸，加水調(diào)整總量至1000ml，攪勻，灌裝，即得。實(shí)施例4四季紅540g 車前草260g以上二味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 10 1. 15 (50 0C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清 液濃縮至相對(duì)密度為1. 35 1. 40 (500C )的稠膏，加入適宜輔料，制成顆粒，干燥，裝膠囊， 即得。實(shí)施例5四季紅540g 車前草260g以上二味藥材，加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度 為1. 10 1. 15 (50 0C )的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清 液濃縮至相對(duì)密度為1. 35 1. 40 (500C )的稠膏，加入適宜輔料，制成顆粒，干燥，即得。
權(quán)利要求
一種清熱解毒、利尿通淋的中藥組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為四季紅450-640重量份、車前草200-300重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為四季紅540重量份、車前草260重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為四季紅、車前草加水煎煮1-5次，每次0. 5-3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮，按照常規(guī) 工藝，制成臨床或藥學(xué)上可接受的劑型，包括但不限于片劑、膠囊劑、散劑、軟膠囊劑、滴丸、 蜜丸、丸劑、顆粒劑、蜜煉膏劑、緩釋制劑、速釋制劑、控釋制劑、口服液體制劑、注射制劑或 外用制劑。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物口服液體制劑的制備方法，其特征在于該方法為四季紅、車前草加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 10 1. 15(50°C)的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)50%，攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液回 收乙醇，加入適量蔗糖、山梨酸，加水調(diào)整總量至1000體積份，攪勻，灌裝，即得。
5.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下步驟A、鑒別取該中藥組合物口服液制劑5-50ml，用石油醚(60-90°C)振搖提取1_3次， 每次15-30ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取1-3次，每次10_40ml，合并乙 酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液；另取四季紅對(duì)照藥材0. 5-5g， 加水20-100ml煎煮15-45分鐘，濾過，濾液濃縮至10_40ml，用乙酸乙酯振搖提取1_3次， 同法制成對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各2-10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 3-5 5-8 0.4-0.7的環(huán)己烷-丙酮-甲酸混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、鑒別供試品溶液的制備取該中藥組合物口服液制劑5-50ml，用石油醚(60-90°C) 振搖提取1-3次，每次15-30ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取1_3次，每次 10-40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液；另取車前草對(duì)照 藥材0. 5-5g加水60-140ml煎煮15-45分鐘，濾過，濾液濃縮至10_40ml，用乙酸乙酯振搖提 取1-3次，每次10-40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml作為對(duì)照藥材溶液；吸取 上述兩種溶液各2-8μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以5-8 3-6 0.2的環(huán)己烷-丙 酮-甲酸混合溶劑為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn) 顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、浸出物含量測(cè)定精密量取該中藥組合物口服液制劑5-20ml，置已干燥至恒重的蒸 發(fā)皿中，在水浴蒸干后，于105°C干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量； 浸出物含量不得低于4.0%。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括如下步驟四季紅薄層鑒別取中藥組合物制劑20ml，用石油醚(60-90°C )振搖提取2次，每次 20ml，棄去石油醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干， 殘?jiān)蛹状糏ml使溶解作為供試品溶液；另取四季紅對(duì)照藥材lg，加水50ml煎煮30分鐘， 濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次，同法制成對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4 6 0.5的環(huán)己烷-丙酮-甲酸為展開 齊U，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中， 在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；車前草薄層鑒別供試品溶液的制備同鑒別A項(xiàng)下供試品溶液的制備方法；另取車前 草對(duì)照藥材Ig加水IOOml煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，用乙酸乙酯振搖提取2次， 每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml作為對(duì)照藥材溶液；吸取上述兩種溶液 各4μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-甲酸(6 4 0.2)為展開劑， 展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在 與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；浸出物含量測(cè)定精密量取中藥組合物制劑10ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水 浴蒸干后，于105°C干燥3小時(shí)，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量；浸出物含量 不得低于4.0%。
7.如權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物在制備具有抗炎作用或促進(jìn)尿中K+、Na+的排 出藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種清熱解毒，利尿通淋的中藥組合物制劑，該組合物由四季紅、車前草加水煎煮三次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮為清膏，放冷，加乙醇攪勻，靜置24小時(shí)，取上清液回收乙醇，加入適量蔗糖、山梨酸，制成口服液，該組合物制劑具有很好的清熱解毒，利尿通淋作用。
文檔編號(hào)A61P13/00GK101843670SQ20091008066
公開日2010年9月29日 申請(qǐng)日期2009年3月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月25日
發(fā)明者付建家, 付立家 申請(qǐng)人:北京亞東生物制藥有限公司