專利名稱：：一種獸用復(fù)方抗菌注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于獸藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種獸用復(fù)方抗菌注射液，同時(shí)涉及一種該注射液的制備方法。
背景技術(shù)：
：在現(xiàn)代化養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，自動(dòng)化、集約化程度日益提高，各種疾病一旦傳播，都將給養(yǎng)殖場(chǎng)造成滅頂之災(zāi)，獸藥是重要的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料，作為畜牧業(yè)的物質(zhì)基礎(chǔ)，獸藥行業(yè)的發(fā)展和獸藥質(zhì)量將直接關(guān)系到畜牧業(yè)的健康發(fā)展，關(guān)系到農(nóng)村經(jīng)濟(jì)持續(xù)發(fā)展和農(nóng)民增收問(wèn)題。近年來(lái)，隨著國(guó)際間動(dòng)物流通和貿(mào)易量的增加，各種疾病有了新的發(fā)展變化，出現(xiàn)了許多新的疾病，同時(shí)原先基本控制的疾病由于野外病毒株變異加快，毒力增強(qiáng)，呈現(xiàn)新的嚴(yán)重病癥，引起了國(guó)際醫(yī)學(xué)界和獸醫(yī)界的高度重視和傾力研究。從20世紀(jì)90年代末開(kāi)始，國(guó)外獸藥研發(fā)速度放慢前進(jìn)的腳步，重點(diǎn)放在復(fù)方制劑的研究。尤其近年來(lái)，各種細(xì)菌病的混合感染以及豬傳染性附紅細(xì)胞體、弓形蟲(chóng)等病的發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，我國(guó)在復(fù)方制劑開(kāi)發(fā)方面已呈現(xiàn)新的趨勢(shì)，市場(chǎng)上普遍流行磺胺抗菌藥加上抗菌增效劑甲氧芐啶的組合，甲氧芐啶為磺胺藥的增效劑，增強(qiáng)磺胺藥的作用達(dá)數(shù)倍至數(shù)十倍。磺胺間甲氧嘧啶是體內(nèi)外抗菌作用最強(qiáng)的磺胺藥，對(duì)大多數(shù)G+菌和G—菌都有較強(qiáng)抑制作用，細(xì)菌對(duì)此藥產(chǎn)生耐藥性較慢，對(duì)敏感菌引起的各種疾病以及豬附紅細(xì)胞體、弓形蟲(chóng)、禽兔球蟲(chóng)病等都有很好療效。內(nèi)服吸收良好，血藥濃度高，有效血藥濃度維持時(shí)間長(zhǎng)；甲氧芐啶能抑制二氫葉酸還原酶，阻礙敏感菌葉酸的代謝和利用，妨礙菌體核酸合成。二者聯(lián)合使用時(shí)，能雙重阻斷病原菌的二氫葉酸的合成，快速抑制細(xì)菌和原蟲(chóng)的生長(zhǎng)繁殖，使抗菌作用增強(qiáng)數(shù)倍至近百倍。二者配伍可雙重阻斷細(xì)菌的葉酸代謝，增強(qiáng)了療效。但是目前的復(fù)方磺胺類和甲氧芐啶聯(lián)合的注射劑還存3在一定缺點(diǎn)，由于在輔料的種類和用量選擇上還存在不足，造成了注射劑的穩(wěn)定性還不夠好，容易結(jié)晶和變色，而且藥物在動(dòng)物體內(nèi)停留時(shí)間較短，不能使藥物長(zhǎng)效吸收，影響藥物的療效，給藥時(shí)需要一日兩次。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定性好、半衰期長(zhǎng)的獸用復(fù)方抗菌注射液。本發(fā)明的另一目的是提供一種獸用復(fù)方抗菌注射液的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種獸用復(fù)方抗菌注射液，配方如下磺胺間甲氧嘧啶1015g甲氧芐啶23gN-甲基吡咯烷酮510g聚乙二醇-4002040g氫氧化鈉1.01.5g乙二胺四乙酸二鈉0.010.02g焦亞硫酸鈉0.20.5g注射用水加至100ml。一種獸用復(fù)方抗菌注射液的制備方法，包括以下步驟(1)將聚乙二醇-400、N-甲基吡咯烷酮加入濃配罐中，加熱至5060。C，加入甲氧芐啶，攪拌使之溶解，打入稀配罐；(2)再向濃配罐中加入2040ml注射用水，然后加入乙二胺四乙酸二鈉、氫氧化鈉、磺胺間甲氧嘧啶和焦亞硫酸鈉，攪拌溶液至均勻，然后打入步驟(1)的稀配罐中；(3)將稀配罐中的溶液攪拌至完全均勻后，加注射用水定容至100ml，測(cè)定PH值范圍為6.09.0;(4)過(guò)濾、灌封、滅菌。本發(fā)明大大優(yōu)化了磺胺間甲氧嘧啶和甲氧芐啶聯(lián)合制備注射液時(shí)的輔料種類及其用量。其中，以N-甲基吡咯烷酮和聚乙二醇-400作為溶劑，毒性小，無(wú)刺激性，能溶解許多有機(jī)藥物，選擇適量的聚乙二醇-400能延緩藥物的水解，使藥物有延效作用，使藥物在動(dòng)物體內(nèi)的代謝半衰期變長(zhǎng)，加入離子絡(luò)合劑乙二胺四乙酸二鈉，提高溶液澄明度，同時(shí)又加入了抗氧劑焦亞硫酸鈉。本發(fā)明經(jīng)過(guò)輔料的優(yōu)選配合后，使得本發(fā)明注射液的穩(wěn)定性好，改善了以往該類注射液不穩(wěn)定、容易結(jié)晶、變色的缺點(diǎn)，經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性試驗(yàn)考查驗(yàn)證本發(fā)明注射液可以在常溫下保存至少24個(gè)月，本發(fā)明注射液的半衰期長(zhǎng)，使有效血藥濃度維持時(shí)間延長(zhǎng)，又可以減少給藥次數(shù)，節(jié)約人力和時(shí)間，減輕頻繁注射給病畜帶來(lái)的應(yīng)激反應(yīng)，主要用于治療仔豬附紅細(xì)胞體病，在獸醫(yī)臨床將會(huì)有更為廣闊的應(yīng)用前景。使用本發(fā)明獸用復(fù)方抗菌注射液治療仔豬附紅細(xì)胞體病時(shí)，每天只需給藥1次，給藥劑量為100mg/kg，連續(xù)給藥3-5d。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:配方如下磺胺間甲氧嘧啶甲氧芐啶N-甲基吡咯烷酮聚乙二醇-400氫氧化鈉乙二胺四乙酸二鈉焦亞硫酸鈉注射用水制備方法，包括以下步驟(1)將聚乙二醇-400、N-甲基吡咯烷酮加入濃配罐中，加熱至50。C，加入甲氧芐啶，攪拌使之溶解，打入稀配罐；(2)再向濃配罐中加入40ml注射用水，然后加入乙二胺四乙酸二鈉、氫氧化鈉、磺胺間甲氧嘧啶和焦亞硫酸鈉，攪拌溶液至均勻，然后打入步驟(1)的稀配罐中；(3)將稀配罐中的溶液攪拌至完全均勻后，加注射用水定容至100ml，測(cè)10g2g10g20gl.OgO.Olg0.2g加至100ml,定PH值范圍為6.09.0;(4)過(guò)濾、灌封、滅菌。實(shí)施例2:配方如下磺胺間甲氧嘧啶13g甲氧芐啶2.5gN-甲基吡咯烷酮8g聚乙二醇-40030g氫氧化鈉1.2g乙二胺四乙酸二鈉0.015g焦亞硫酸鈉0.3g注射用水加至100ml。制備方法，包括以下步驟(1)將聚乙二醇-400、N-甲基吡咯垸酮加入濃配罐中，加熱至55'C，加入甲氧芐啶，攪拌使之溶解，打入稀配罐；(2)再向濃配罐中加入30ml注射用水，然后加入乙二胺四乙酸二鈉、氫氧化鈉、磺胺間甲氧嘧啶和焦亞硫酸鈉，攪拌溶液至均勻，然后打入步驟(1)的稀配罐中；(3)將稀配罐中的溶液攪拌至完全均勻后，加注射用水定容至100ml，測(cè)定PH值范圍為6.09.0;(4)過(guò)濾、灌封、滅菌。實(shí)施例3:配方如下磺胺間甲氧嘧啶15g甲氧芐啶3gN-甲基吡咯烷酮5g聚乙二醇-40040g氫氧化鈉1.5g乙二胺四乙酸二鈉0.02g焦亞硫酸鈉0.5g注射用水加至100ml。制備方法，包括以下步驟(1)將聚乙二醇-400、N-甲基吡咯烷酮加入濃配罐中，加熱至60。C，加入甲氧芐啶，攪拌使之溶解，打入稀配罐；(2)再向濃配罐中加入20ml注射用水，然后加入乙二胺四乙酸二鈉、氫氧化鈉、磺胺間甲氧嘧啶和焦亞硫酸鈉，攪拌溶液至均勻，然后打入步驟(1)的稀配罐中；(3)將稀配罐中的溶液攪拌至完全均勻后，加注射用水定容至100ml，測(cè)定PH值范圍為6.09.0;(4)過(guò)濾、灌封、滅菌。以下為本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液的穩(wěn)定性、藥代試驗(yàn)和藥效試驗(yàn)。一、本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液的穩(wěn)定性試驗(yàn)依據(jù)《中華人民共和國(guó)獸藥典》2005年版的獸藥穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則，河南新正好生物工程有限公司自2007年4月開(kāi)始對(duì)試生產(chǎn)的本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液三批產(chǎn)品進(jìn)行加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)，并為產(chǎn)品報(bào)批以及獲得批準(zhǔn)文號(hào)后的產(chǎn)品生產(chǎn)做必要的準(zhǔn)備。主要對(duì)性狀、含量、PH值、澄明度等項(xiàng)目進(jìn)行重點(diǎn)考査，來(lái)觀察本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液的穩(wěn)定性。其試驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果如下1.加速試驗(yàn)1.1加速試驗(yàn)l.l.l試驗(yàn)樣品分別選用本發(fā)明實(shí)施例l、實(shí)施例2和實(shí)施例3的試驗(yàn)樣品，依次編號(hào)為l號(hào)、2號(hào)、3號(hào)，均為河南新正好生物工程有限公司生產(chǎn)，包裝安瓿瓶裝。1.1.2試驗(yàn)儀器FR-SP人工氣候箱1.1.3考察項(xiàng)目性狀、含量、PH值、澄明度。1.1.4試驗(yàn)過(guò)程將1號(hào)、2號(hào)和3號(hào)的三批試驗(yàn)樣品分別置于溫度40土2。CFR-SP人工氣候箱放置六個(gè)月，于第1、2、3、6月末按取樣時(shí)檢測(cè)其性狀、含量、PH值、澄明度等項(xiàng)目，與O月的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，試驗(yàn)結(jié)果如下表l:表lo月l月2月3月6月性狀l號(hào)微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體2號(hào)微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體3號(hào)微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體微黃色澄明液體PH值l號(hào)8.78.88.68.78.82號(hào)8.88.68.78.88.73號(hào)8.78.78.88.68.8澄明度l號(hào)符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定2號(hào)符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定3號(hào)符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定含量l號(hào)99.6%99.5%99.5%99.4%99.2%100.3%100.4%100.5%100.4%100.5%2號(hào)98.6%98.5%98.3%98.4%98.5%99.2%99.4%99.3%99.6%99.5%3號(hào)100.8%100.9%100.5%100.8%100.7%101.5%101.4%101.3%101.5%101.6%加速試驗(yàn)結(jié)果表明在加速試驗(yàn)條件下放置6個(gè)月，各項(xiàng)質(zhì)量考察項(xiàng)目均無(wú)明顯變化，說(shuō)明本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液在加速試驗(yàn)條件下穩(wěn)定性良好，包裝材料能很好的保護(hù)本品質(zhì)量不受外界環(huán)境影響。1.2長(zhǎng)期試驗(yàn)1.2.1試驗(yàn)樣品分別選用本發(fā)明實(shí)施例l、實(shí)施例2和實(shí)施例3的試驗(yàn)樣品，依次編號(hào)為1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)，均為河南新正好生物工程有限公司生產(chǎn)包裝安瓿瓶裝。1.2.2試驗(yàn)儀器FR-SP人工氣候箱1.2.3考察項(xiàng)目性狀、含量、pH值、澄明度。1.2.4試驗(yàn)過(guò)程:將1號(hào)、2號(hào)和3號(hào)的三批試驗(yàn)樣品分別置于溫度25±2°CFR-SP8說(shuō)明書第7/13頁(yè)人工氣候箱中放置，于第0、3、6、9、12、18、24個(gè)月取樣檢測(cè)其性狀、含量、PH值、澄明度等項(xiàng)目，與0月的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比，試驗(yàn)結(jié)果如下表2:表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液置于溫度25±2°CFR-SP人工氣候箱放置24個(gè)月，各項(xiàng)質(zhì)量考察項(xiàng)目均無(wú)明顯變化，依據(jù)《中華人民共和國(guó)獸藥典》2005年版之"關(guān)于有效期確定的統(tǒng)計(jì)分析方法"統(tǒng)計(jì)計(jì)算后得出該產(chǎn)品的有效期超過(guò)2年。二、本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液的藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)l.試驗(yàn)動(dòng)物健康仔豬6頭，公母各半，體重18-25kg，6頭豬隨機(jī)分為兩組，試驗(yàn)期間單籠常規(guī)飼養(yǎng)，詞喂不含抗生素的全價(jià)飼料，自由飲水和采食，給藥前飼養(yǎng)14天，臨床觀察健康。2.試驗(yàn)藥品本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液(河南新正好生物工程有限公司提供，實(shí)施例l處方)；普通復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶注射液(處方磺胺間甲氧嘧啶10g、甲氧芐啶2g、乙醇30g、氫氧化鈉1.0g、硫代硫酸鈉0.5g、注射用水加至100ml)河南新正好生物工程有限公司提供?；前烽g甲氧嘧啶對(duì)照品(批號(hào)066H0688,含量為98.15%)購(gòu)自Sigma公司。3.給藥及血樣采集給藥劑量均為IOOmg/kgBW(以磺胺間甲氧嘧錠計(jì)，注射液lml)，從前腔靜脈采血，在給藥前采空白血10mL。2種注射液頸部肌肉注射后分別于0.25、0.5、1、2、4、8、12、24、48、72h采血5mL，置于肝素化離心管中，4'C、4000r/min離心10min后分離血漿，-20。C保存待測(cè)。4.血漿中磺胺間甲氧嘧啶的測(cè)定d8固相萃取小柱，先用2mL甲醇淋洗，再用2mL水淋洗，以活化柱子。取血樣lmL加到小柱上，先用5%甲醇溶液3mL淋洗，最后用乙腈一水溶液(50:50，含O.15%三氟乙酸)3mL將藥物洗脫下來(lái)，洗脫液流速為20滴/min，收集洗脫液，用冷凍干燥儀將洗脫液揮干后，用流動(dòng)相定容至lmL，12000r/min離心10min，取上清液20PL注入高效液相色譜儀分析。色譜條件色譜柱為KromasilC18(250mmX4.6mm，5um),柱溫30。C，流動(dòng)相為A:乙腈+甲醇(1:1);B:1.5%冰乙酸/水，流速為O.8mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為271nm，進(jìn)樣量20nL。5.數(shù)據(jù)處理與分析根據(jù)外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算血藥濃度6.結(jié)果與分析6.1血漿中磺胺間甲氧嘧啶的濃度經(jīng)測(cè)定，磺胺間甲氧嘧啶血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線在O.05100ug/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(F0.9999)，血藥濃度分別為O.1、1、10ug/mL時(shí)，相對(duì)回收率依次為98.6%、99.0%、99.2%，n=12。6.2兩種注射液不同時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度肌肉注射IOOmg/kgBW的本發(fā)明的復(fù)方抗菌注射液、普通復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶注射液后，血漿藥物濃度隨時(shí)間變化情況見(jiàn)表3。表3肌注IOOmg/kgBW2種制劑后磺胺間甲氧嘧啶的血藥濃度(n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4兩種注射液肌肉注射100mg/kgBW后在豬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(n=6)普通復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶注本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液射液<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>7.結(jié)論根據(jù)上述兩種注射液的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，可以看出使用普通復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶注射液，每天需給藥2次，而使用本發(fā)明的復(fù)方抗菌注射液時(shí)，每天只需給藥1次，給藥劑量均為100mg/kg，連續(xù)給藥3-5d。本發(fā)明的復(fù)方抗菌注射液由于既能使有效血藥濃度維持時(shí)間延長(zhǎng)，又可以減少給藥次數(shù)，節(jié)約人力和時(shí)間，減輕頻繁注射給病畜帶來(lái)的應(yīng)激反應(yīng)，因此在獸醫(yī)臨床將會(huì)有更為廣闊的應(yīng)用前景。三、實(shí)驗(yàn)性仔豬附紅細(xì)胞體病的臨床治療試驗(yàn)l.材料與方法1.1供試藥品本發(fā)明實(shí)施例1配方的復(fù)方抗菌注射液，河南新正好生物工程有限公司提供；對(duì)照藥品血蟲(chóng)凈20070602規(guī)格l.Og/支，農(nóng)業(yè)部蘭州生物藥廠。1.2試劑鹽酸、氫氧化鈉、氯化鈉、磷酸二氫鉀等為國(guó)產(chǎn)分析純；瓊脂、蛋白胨、硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、霉菌培養(yǎng)基等為國(guó)產(chǎn)生化試劑等為國(guó)產(chǎn)生化試劑。1.3供試動(dòng)物3周齡的長(zhǎng)白商品仔豬120頭，偃師首陽(yáng)山肥肥養(yǎng)豬廠提供，體重7.65kg士0.5kg，未使用任何抗菌藥物。分成6組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)前經(jīng)血液檢査確認(rèn)未感染附紅細(xì)胞體.1.4人工發(fā)病參照馬增軍人工誘發(fā)豬附紅細(xì)胞體病方法1.4.1病料來(lái)源2008年5月洛陽(yáng)伊川東勝養(yǎng)豬廠自然感染豬附紅細(xì)胞體，經(jīng)診斷結(jié)果如下1.4.1.l臨床癥狀為3月齡育肥豬突然表現(xiàn)發(fā)熱、扎堆，體溫4rC42'C，步態(tài)不穩(wěn)，發(fā)抖，食欲不振。隨著病情的發(fā)展，病豬皮膚發(fā)紅或發(fā)黃，胸腹下及四肢內(nèi)側(cè)更甚，后期毛囊出血，可視黏膜黃染或蒼白，初期腹瀉，后期便秘。1.4.1.2病理剖檢剖檢見(jiàn)貧血及全身性黃疸，可視黏膜蒼白，血液稀薄，凝固不良，有半透明膠凍樣血凝塊。肝脾腫大，肝有脂肪變性，膽汁濃稠。腎臟有出血點(diǎn)，脾出血性梗死。膀胱積尿，內(nèi)有針尖狀出血點(diǎn)。腸臌氣，有的見(jiàn)出血，個(gè)別有卡他性炎癥。1.4.1.3無(wú)菌采集病豬耳血滴于載玻片上，加一滴生理鹽水混合稀釋,置320倍的光鏡下看到紅細(xì)胞呈鋸齒狀、菠蘿狀等，附著蟲(chóng)體的紅細(xì)胞上下震顫或左右運(yùn)動(dòng)；并見(jiàn)有些游離在血漿中能收縮、伸展、轉(zhuǎn)體等運(yùn)動(dòng)的蟲(chóng)體。血液涂片自然干燥、甲醇固定后用姬姆薩染色，見(jiàn)蟲(chóng)體被染成紫紅色或粉紅色，其中央發(fā)亮，形似空泡；用2%的碘液活染后，可見(jiàn)附紅細(xì)胞體被染成棕黃色，且附紅細(xì)胞體逐步停止活動(dòng)。1.4.1.4將血液接種硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基及霉菌培養(yǎng)基，確認(rèn)無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。1.4.2人工發(fā)病121.4.2.1病料采集無(wú)菌采集自然感染豬附紅細(xì)胞體病的豬耳尖采血，先棄去第一滴血，然后吸血1滴于載玻片上，用等量生理鹽水稀釋后，輕蓋蓋玻片，置于高倍顯微鏡下觀察。如果20個(gè)視野中有1個(gè)以上紅細(xì)胞被感染，則判定為陽(yáng)性。從紅細(xì)胞感染率在75%以上病豬采血，加入抗凝劑，置于4'C冰箱中保存?zhèn)溆谩?.4.2.2攻毒每只豬肌肉注射上述血液2.0ml，隔日觀察供試豬的發(fā)病情況。1.5實(shí)驗(yàn)性治療將以上感染豬于感染后第7天癥狀明顯時(shí)，采用藥物治療，將120頭豬分為6組，每組20頭，用藥情況見(jiàn)表5，連用3天。表5試驗(yàn)動(dòng)物分組與用藥組別用藥用法用量A不感染不用藥B感染不用藥C本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液低劑量肌注每lkg體重0.5ml，每天1次D本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液中劑量肌注每lkg體重1.Oml，每天1次E本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高劑量肌注每lkg體重1.5ml，每天1次F血蟲(chóng)凈對(duì)照組用生理鹽水稀釋成O.5g/lL水溶液肌肉注射，5mg/kg體重劑量，每日1次，1.6療效評(píng)價(jià)指標(biāo)1.6.1治愈經(jīng)用藥治療后臨床癥狀完全消失；精神及食欲恢復(fù)正常為治愈，血液中檢不出附紅細(xì)胞體，統(tǒng)計(jì)治愈數(shù)計(jì)算治愈率；1.6.2顯效經(jīng)用藥治療后臨床癥狀明顯減輕精神及t欠食欲好轉(zhuǎn)者為治療顯效，統(tǒng)計(jì)顯效數(shù)計(jì)算顯效率；1.6.3有效為治愈率與顯效率之和；1.6.4無(wú)效經(jīng)用藥治療后癥狀未消失病情未好轉(zhuǎn)以及治療期間因本病死亡者均視為無(wú)效，統(tǒng)計(jì)無(wú)效數(shù)，計(jì)算無(wú)效率；1.6.5相對(duì)增重率相對(duì)增重率是按各用藥組與空白對(duì)照組的平均增重之比算出。1.7數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理用生物學(xué)統(tǒng)計(jì)進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)，其中有效率用卡方(X2)檢驗(yàn)；增重用t檢驗(yàn)。2.結(jié)果2.1仔豬附紅細(xì)胞體治療情況及試驗(yàn)結(jié)果攻毒后7天，仔豬開(kāi)始出現(xiàn)明顯豬附紅細(xì)胞體的癥狀高熱不退，大多數(shù)腹瀉后糞千，大身體上有出血點(diǎn)，體表有出血點(diǎn)或出血斑，喘咳，眼瞼腫脹，眼圈發(fā)紫。經(jīng)鏡檢確診感染上附紅細(xì)胞體。各用藥組連用藥物3天，感染豬的臨床癥狀逐漸減輕或消失，本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組及血蟲(chóng)凈藥物對(duì)照組開(kāi)始用藥8小時(shí)體溫恢復(fù)正常，而本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液低劑量組開(kāi)始用藥24小時(shí)時(shí)平均體溫才開(kāi)始恢復(fù)正常，試驗(yàn)觀察2周，各項(xiàng)指標(biāo)詳見(jiàn)表6:<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中、低劑量組及藥物對(duì)照組對(duì)人工感染誘發(fā)附紅細(xì)胞體病豬的有效率與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異顯著P〈0.01，本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組的有效率與血蟲(chóng)凈相比差異不顯著P〉0.05;本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組的有效率顯著高于低劑量組0.01<P<0.05。t檢驗(yàn)表明本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組及藥物對(duì)照組的增重顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組P<0.01，P〈0.05，但與空白對(duì)照組間的增重比較無(wú)顯著差異P>0.05，各用藥組間的增重比較無(wú)顯著差異。3.結(jié)論3.1本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液各用藥組有效率較陽(yáng)性對(duì)照組顯著升高，增重亦顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組，說(shuō)明三個(gè)劑量的本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液及血蟲(chóng)凈對(duì)仔豬附紅細(xì)胞體病均有治療效果。3.2本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組有效率顯著高于低劑量組(P〈0.05)，而本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液高、中劑量組有效率、增重?zé)o顯著差異，說(shuō)明臨床應(yīng)選擇中劑量。3.3據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果，推薦本發(fā)明復(fù)方抗菌注射液在治療豬附紅細(xì)胞體病的用法用量為肌注每lkg體重1.Oml,每天1次,連用3天。權(quán)利要求1、一種獸用復(fù)方抗菌注射液，其特征在于配方如下磺胺間甲氧嘧啶10～15g甲氧芐啶2～3gN-甲基吡咯烷酮5～10g聚乙二醇-40020～40g氫氧化鈉1.0～1.5g乙二胺四乙酸二鈉0.01～0.02g焦亞硫酸鈉0.2～0.5g注射用水加至100ml。2、一種如權(quán)利要求1所述的獸用復(fù)方抗菌注射液的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將聚乙二醇-400、N-甲基吡咯烷酮加入濃配罐中，加熱至506(TC，加入甲氧芐啶，攪拌使之溶解，打入稀配罐；(2)再向濃配罐中加入2040ml注射用水，然后加入乙二胺四乙酸二鈉、氫氧化鈉、磺胺間甲氧嘧啶和焦亞硫酸鈉，攪拌溶液至均勻，然后打入步驟(1)的稀配罐中；(3)將稀配罐中的溶液攪拌至完全均勻后，加注射用水定容至lOOml，測(cè)定PH值范圍為6.09.0;(4)過(guò)濾、灌封、滅菌。全文摘要本發(fā)明提供一種獸用復(fù)方抗菌注射液，配方如下磺胺間甲氧嘧啶10～15g、甲氧芐啶2～3g、N-甲基吡咯烷酮5～10g、聚乙二醇-40020～40g、氫氧化鈉1.0～1.5g、乙二胺四乙酸二鈉0.01～0.02g、焦亞硫酸鈉0.2～0.5g、注射用水加至100ml。本發(fā)明經(jīng)過(guò)輔料的優(yōu)選配合后，使得本發(fā)明注射液的穩(wěn)定性好，改善了以往該類注射液不穩(wěn)定容易結(jié)晶、變色的缺點(diǎn)，經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性試驗(yàn)考查驗(yàn)證本發(fā)明注射液可以在常溫下保存至少24個(gè)月，本發(fā)明注射液的半衰期長(zhǎng)，使有效血藥濃度維持時(shí)間延長(zhǎng)，又可以減少給藥次數(shù)，節(jié)約人力和時(shí)間，減輕頻繁注射給病畜帶來(lái)的應(yīng)激反應(yīng)。文檔編號(hào)A61K9/08GK101574355SQ20091006506公開(kāi)日2009年11月11日申請(qǐng)日期2009年6月1日優(yōu)先權(quán)日2009年6月1日發(fā)明者黎焦,王祝義,趙曉峰申請(qǐng)人:河南新正好生物工程有限公司