專利名稱：：光葉桂木提取物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及光葉桂木提取物及其在制備預(yù)防或治療肥胖癥及相關(guān)代謝性疾病藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：在近20年中，全世界尤其是發(fā)達國家的肥胖癥發(fā)病率日益增多。由于經(jīng)濟的快速發(fā)展和生活水平的不斷提高，現(xiàn)代人生活方式中始終存在運動不足和攝食能量相對過剩的問題，這導致了眾多現(xiàn)代人機體能量的攝入超過了能量消耗，過剩的能量中會有一部分作為脂肪貯存在脂肪組織中，由于它的積累會導致肥胖以及相關(guān)疾病，如糖尿病、癌癥、心臟病、高脂血癥和脂肪肝等的發(fā)生。目前，肥胖癥的治療主要在于開發(fā)增加能量消耗的藥物或減少能量攝取的藥物。其中，減少能量攝取的主要方法就是減小身體消化和吸收食品，尤其是脂肪。胰脂肪酶是腸道中脂肪消化吸收所必需的酶，食物中的脂肪在胰脂肪酶作用下被水解為單酰甘油和游離脂肪酸，在腸道被重新吸收后，在體內(nèi)再次合成脂肪，引起脂肪堆積，最終導致肥胖以及相伴的高脂血癥、糖尿病等代謝性疾病的發(fā)生。胰脂肪酶抑制劑可有效抑制腸道中胰脂肪酶對脂肪的分解催化作用，達到減少脂肪吸收和治療肥胖的目的，因而開發(fā)和應(yīng)用有效的胰脂肪酶抑制劑受到人們的普遍關(guān)注。目前市場暢銷的胰脂肪酶抑制劑是賽尼可，賽尼可具有活性強，穩(wěn)定性好等特點，但同時具有難以控制的腸道癥狀、油便和嘔吐腹?jié)q等缺點。因此尋找新的胰脂肪酶抑制劑對肥胖以及糖尿病等代謝性疾病的防治具有重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種光葉桂木提取物。本發(fā)明的另一個目的是提供上述提取物的藥物用途，尤其是胰脂肪酶抑制活性和減肥的作用。本發(fā)明的提取物可用于制備預(yù)防或治療臨床常見多發(fā)的肥胖癥及相關(guān)代謝性疾病的藥物。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的將光葉桂木ArtocarpusnitidusTree.的莖枝粉碎后，用有機溶劑或/和水提取制備得到總提取物，所用的有機溶劑可采用醇類，如乙醇，甲醇等，其中優(yōu)選95%(體積比)乙醇。將總提取物溶于水后，分別以石油醚、鹵代烴類溶劑萃取，取鹵代烴類溶劑萃取相，回收溶劑后干燥即得到本發(fā)明的提取物，所用的鹵代烴類溶劑可以用氯仿或二氯甲烷，其中優(yōu)選氯仿。本發(fā)明所得提取物進行了含量測定采用高效液相法(HPLC-UV)測定提取物中異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃化合物的含量，色譜柱為C18分析柱，流動相為20-90%甲醇水溶液或20-90%乙腈水溶液，檢測波長為300nm，檢測時間為0-60min，用外標法測定保留時間為10.0至50.Omin范圍內(nèi)異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃類化合物的含量，計算含量為30%-60%。為證實本發(fā)明提取物的用途，對本發(fā)明提取物進行了體外胰脂肪酶活性測試和動物體內(nèi)減肥作用考察，結(jié)果顯示，本發(fā)明提取物具有明顯的胰脂肪酶抑制活性和減肥作用，可用于制備預(yù)防或治療臨床常見多發(fā)的肥胖癥及相關(guān)代謝性疾病的藥物。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施實例對本發(fā)明作進一步闡述，但不限制本發(fā)明。實施例1光葉桂木提取物的制備光葉桂木干燥莖枝20公斤粉粹后，用95%含水乙醇100升浸泡12h后滲漉，收集滲漉液400升，濃縮干燥，得到浸膏1.5公斤。將此浸膏溶于水后用氯仿萃取，回收溶劑濃縮至干，得本發(fā)明提取物50克。經(jīng)高效液相色譜分析，提取物中異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃化合物的含量之和為60%。實施例2光葉桂木提取物的制備光葉桂木干燥莖枝20公斤粉粹后，用70%含水乙醇100升浸泡12h后滲漉，收集滲漉液400升，濃縮干燥，得到浸膏1.2公斤。將此浸膏溶于水后用氯仿萃取，回收溶劑濃縮至干，得本發(fā)明提取物40克。經(jīng)高效液相色譜分析，提取物中異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃化合物的含量之和為52%。實施例3光葉桂木提取物的制備光葉桂木干燥莖枝20公斤粉粹后，依次用100升、80升、60升的80%含水甲醇室溫浸泡三次，合并提取液，濃縮干燥，得到浸膏1.0公斤。將此浸膏溶于水后用氯仿萃取，回收溶劑濃縮至干，得本發(fā)明提取物32克。經(jīng)高效液相色譜分析，提取物中異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃化合物的含量之和為40%。實施例4光葉桂木提取物對胰脂肪酶的抑制活性測定首先底物p-Nitrophenylacetate(sigma公司)用磷酸緩沖液(PBS，pH7.4)配成1.35M；豬胰脂肪酶(sigma公司)用磷酸緩沖液配成10mg/ml；將根據(jù)實施例1的方法制得的光葉桂木提取物用磷酸緩沖液配制成不同濃度的溶液。然后在96孔板中依次加入50μ1稀釋20倍后的酶溶液、40μ1稀釋1000倍后的底物溶液以及10μ1不同濃度的受試樣品，混勻。25°C下反應(yīng)20分鐘，每隔2分鐘在405nm下檢測每孔的吸光度。根據(jù)在405nm下的吸光度計算受試樣品對胰脂肪酶的抑制率(％)，以蒸餾水為對照，將酶活性抑制率(％)達到50%時抑制劑的濃度測定為IC5tl值。抑制率(％)可以根據(jù)下式進行抑制率(%)=[(A-B)-(C-D)]/(A-B)X100上式中，A表示反應(yīng)后空白孔在405nm下的吸光度，B表示反應(yīng)前空白孔在405nm下的吸光度，C表示反應(yīng)后樣品孔在405nm下的吸光度，D表示反應(yīng)前樣品孔在405nm下的吸光度。檢測光葉桂木提取物對胰脂肪酶的抑制作用結(jié)果，IC5tl為10.65士0.139μg/ml，表明光葉桂木提取物對胰脂肪酶具有顯著的抑制作用。實施例5光葉桂木提取物對肥胖大鼠的減肥作用Zucker大鼠(遺傳性肥胖大鼠)由中國科學院上海藥物所動物房繁殖，雄性，8周齡。取正常Zucker大鼠6只，作為空白對照組。將肥胖Zucker大鼠分成2組，即模型對照組和給藥組，每組6只。將根據(jù)實施例1的方法制得的光葉桂木提取物用0.5%CMC-Na助溶，劑量為lg/kg；空白和模型對照組給予同等體積的0.5%CMC-Na,口服灌胃給藥二周。定期檢測飲食和體重。結(jié)果見表1。表1光葉桂木提取物對Zucker大鼠體重和飲食的影響(士SE)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>與模型組相比，*P<0.05.結(jié)論從表1可以看出，與模型對照組相比，光葉桂木提取物組大鼠體重增加明顯下降，對飲食沒有顯著性影響，而且大鼠糞便正常。脂肪攝入過多可能導致肥胖以及與肥胖相關(guān)的糖尿病、高脂血癥、脂肪肝等代謝失調(diào)性疾病。抑制胰脂肪酶可以抑制脂肪在小腸的分解，從而抑制脂肪的吸收。光葉桂木提取物作為胰脂肪酶抑制劑，并具有減肥作用，可用于預(yù)防或治療肥胖癥等疾病。權(quán)利要求一種光葉桂木提取物，其特征在于，該提取物通過下述方法制備以光葉桂木的莖枝為原料，用醇類或/和水提取獲得總提取物，再將總提取物溶于水后，分別用石油醚、氯仿或二氯甲烷溶劑萃取，取氯仿或二氯甲烷的萃取相，回收溶劑干燥制得提取物。2.按權(quán)利要求1所述的光葉桂木提取物，其特征是所述光葉桂木提取物中的主要成分為異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃類化合物，所述兩類化合物的含量為30%-60%。3.權(quán)利要求1的光葉桂木提取物在制備胰脂肪酶抑制劑中的應(yīng)用。4.權(quán)利要求1的光葉桂木提取物在制備預(yù)防或治療肥胖癥藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明屬醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及光葉桂木提取物及其用途。本發(fā)明以光葉桂木的莖枝為原料，用醇類或/和水提取獲得總提取物，再將總提取物溶于水后，分別用石油醚、氯仿或二氯甲烷溶劑萃取，取氯仿或二氯甲烷的萃取相，回收溶劑干燥制得提取物。所述提取物中的異戊烯基取代的黃酮和芳基苯并呋喃類化合物的含量為30％-60％。經(jīng)體外胰脂肪酶活性測試和動物體內(nèi)實驗，結(jié)果顯示，本發(fā)明提取物具有明顯的胰脂肪酶抑制活性和減肥作用，可用于制備預(yù)防或治療臨床常見多發(fā)的肥胖癥及相關(guān)代謝性疾病的藥物。文檔編號A61K36/60GK101829192SQ20091004760公開日2010年9月15日申請日期2009年3月13日優(yōu)先權(quán)日2009年3月13日發(fā)明者侯愛君,王賀瑤,趙婷,閆桂蕊,黃建明申請人:復(fù)旦大學;中國科學院上海藥物研究所