專利名稱：一種抑制血管新生十肽及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新的抗血管新生蛋白多肽Kp-lO，以及該蛋白多肽的應(yīng)用， 屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
癌癥與心血管疾病、糖尿病是威脅人類健康的三大疾病。惡性腫瘤是目前大 多數(shù)國(guó)家疾病性死亡的第一原因，同時(shí)，隨著環(huán)境以及人們生活習(xí)慣的改變，癌 癥病例數(shù)呈上升趨勢(shì)。
上世紀(jì)70年代，哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院Judah Folkman首次提出通過(guò)抑制血管新 生來(lái)抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。腫瘤在沒(méi)有養(yǎng)分的供應(yīng)下，只能長(zhǎng)到2—3立方毫 米。如果有新生血管與腫瘤相連，腫瘤獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與氧氣，便能以幾何級(jí)數(shù)迅 速生長(zhǎng)；同時(shí)腫瘤細(xì)胞還可以通過(guò)新生的血管轉(zhuǎn)移到其他器官，發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移， 導(dǎo)致人體死亡。由于腫瘤種類繁多，而且腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)快，極易發(fā)生突變，因此 易對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性，而血管的內(nèi)皮細(xì)胞由于遺傳穩(wěn)定，突變概率相對(duì)小得多。 因此理論上應(yīng)用抗血管新生藥物不易產(chǎn)生耐藥性，而且抗血管新生藥物具有廣譜 的抗腫瘤活性。
除了腫瘤以外，血管新生失調(diào)還會(huì)引起關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變及老年 黃斑病變動(dòng)脈粥樣硬化、子宮內(nèi)膜炎、牛皮癬、子宮平滑肌瘤、良性前列腺肥大 等多種疾病。2004年，美國(guó)FDA批準(zhǔn)第一例血管新生抑制劑用于腫瘤治療，并 發(fā)現(xiàn)血管新生抑制劑可以治療多種腫瘤，并可用來(lái)治療失明等其他疾病，現(xiàn)有多 種血管新生制劑在進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)。
Kissp印tin-lO (Kp-10)是來(lái)源于人類KISS1基因翻譯產(chǎn)物的一種十肽，該十 肽通過(guò)與G蛋白偶聯(lián)受體一GPCR54 (G protein—coupled receptor—54)的結(jié)合 行使生物學(xué)功能，目前國(guó)內(nèi)外沒(méi)有Kp-10對(duì)血管新生以及腫瘤生長(zhǎng)方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種抗血管新生的蛋白多肽，該多肽是人(Homo sapien)來(lái)源的，氨基酸序列YNWNSFGLRF，分子量為1303.4，命名為Kp-lO，
及其活性片段、衍生物和類似物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該蛋白多肽的多核苷酸片段。 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供Kp-10在制備治療與血管新生異常相關(guān)的疾病
的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供的抑制血管新生十肽是人(Homo sapien)來(lái)源的，氨基酸序列 YNWNSFGLRF， 分子量為1303.4 ,命名為Kp-10，本發(fā)明還提供了上述抗血
3管新生的蛋白多肽的保守性。
本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供編碼抑制血管新生十肽的多核苷酸片段，該多核 苷酸包括一核苷酸,該核苷酸與選自下列一組核苷酸序列有至少70%同源性(1 ) 編碼上述抗血管新生肽Kp-10的多核苷酸；(2)與多核苷酸(1)互補(bǔ)的多核苷 酸；
本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明的多肽或其一部分可以用于制備治療和/或預(yù)防 血管新生方面引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
如本文所用，"新的抗血管新生肽"Kp-lO是指抗血管新生蛋白多肽中基本上 不含天然與其相關(guān)的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質(zhì)。
本發(fā)明提供了一種新的多肽——抗血管新生多肽Kp-lO。本發(fā)明的多肽可以 是化學(xué)合成的產(chǎn)物，或使用重組技術(shù)從原核或真核宿主(例如，細(xì)菌，酵母，高 等植物，昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中產(chǎn)生。根據(jù)重組方案所用的宿主，本發(fā)明的多 肽可以是糖基化的，也可以是非糖基化的。
本發(fā)明的多肽還可以包括或是不包括起始的甲硫氨酸殘基。 本發(fā)明還包括抗血管新生蛋白多肽Kp-10的片段、衍生物和類似物。如本發(fā) 明所用，術(shù)語(yǔ)"片段"、"衍生物"和"類似物"是指基本上保持本發(fā)明的抗血管新生 蛋白多肽Kp-10相同的生物學(xué)功能或活性的多肽。本發(fā)明多肽片段、衍生物和類 似物是指(I )這樣一種，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被保守或非保守氨基酸 殘基(優(yōu)選的是保守氨基酸殘基)取代，而且取代的氨基酸可以是也可以不是有 遺傳密碼子編碼的；或者(II)這樣一種，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上的某個(gè)
基團(tuán)被其它基團(tuán)取代包含取代基；或是(ni)這樣一種，多肽與另一種化合物(比
如延長(zhǎng)多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)這樣一種，其中 附加的氨基酸融合進(jìn)多肽而形成的多肽序列(如前導(dǎo)序列或分泌序列或用來(lái)純化 此多肽的序列或蛋白原序列)。通過(guò)本文的闡述，這樣的片段、衍生物和類似物 被認(rèn)為在本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)范圍之內(nèi)。
"同源性"是指同一袓先來(lái)源的物種間生物迸化距離的遠(yuǎn)近，主要反應(yīng)在核苷 酸或是氨基酸上。通常將序列排列起來(lái)，以獲得最大限量的匹配，"同源性"本身 具有本領(lǐng)域認(rèn)識(shí)的意義并且可用公開(kāi)的技術(shù)計(jì)算。該術(shù)語(yǔ)"同源性"為技術(shù)人員周 知。測(cè)定同源性或形似性的方法以按規(guī)則編在計(jì)算機(jī)程序中，任選的、用于測(cè)量 兩個(gè)序列間的同源性或相似性的計(jì)算機(jī)程序方法包括(但不限于)GCG程序包。
通過(guò)一種多肽進(jìn)行說(shuō)明，其所具有的氨基酸序列YNWNSFGLRF與參考氨 基酸序列至少具有70%的"同源性"是指YNWNSFGLRF序列中，該多肽之氨 基酸序列與參考序列至少70%相同的多肽，參考序列中多達(dá)25°/。的氨基酸序列 可被刪除或被另一氨基酸取代，或可將一些氨基酸序列插入多肽序列中。其中插 入的氨基酸多達(dá)參考氨基酸之總氨基酸殘基的25%，參考序列的這些突變可發(fā) 生在參考序列的氨基或羧基末端位置，或在氨基末端之間的任意地方，它們或單獨(dú)分散在參考序列的參加中，或在一個(gè)或多個(gè)附近存在于參考序列中。
本發(fā)明在于Kp-10在制備血管新生抑制藥物中的應(yīng)用，尤其是Kp-10在制備 抑制癌癥以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、糖尿病綜合癥、血管瘤等血管新生依賴 性疾病中的相關(guān)應(yīng)用。
根據(jù)本發(fā)明可以將治療有效量的Kp-10和藥學(xué)上允許的任意一種輔料制成 藥物組合物，也可以添加其他與Kp-10沒(méi)有拮抗作用的抗血管新生藥物。其制劑 可以是藥學(xué)上的任意一種劑型，包括但不限于片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、口 服液、注射劑、脂質(zhì)體等。
為實(shí)施本發(fā)明的方法，Kp-10可通過(guò)口服、腸胃外、吸入式噴霧或通過(guò)植入 式j(luò)e存器給藥。"腸胃外"包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、 滑膜腔內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)及顱內(nèi)注射或輸入技術(shù)。
口服可用固體或液體狀的劑量單位，如末劑、散劑、片劑、糖衣劑、膠囊劑、 顆粒劑、懸浮劑、溶液劑、糖漿劑、滴劑、舌下含片等劑型進(jìn)行給藥。
末劑是將本發(fā)明化合物磨成適當(dāng)?shù)募?xì)度而制成。散劑是將本發(fā)明化合物磨成 適當(dāng)?shù)募?xì)度，然后與同樣細(xì)度的醫(yī)藥用載體(如載體、甘露糖醇之類可食性碳水 化合物等)混合制成。根據(jù)需要，也可混入矯味劑、防腐劑、分散劑、著色劑、 香料等物質(zhì)。
膠囊劑是將如上所述制成粉末狀的末劑和散劑或入片劑部分所述的顆?；?的物質(zhì)填充到膠囊外殼中而制成。也可將潤(rùn)滑劑和助流劑等混合到粉末狀物質(zhì) 中，然后在膠囊中進(jìn)行填充。若添加助溶劑和崩解劑等，如聚乙二醇，碳酸鈉， 可改善膠囊攝取時(shí)的藥效。
本發(fā)明的有益結(jié)果
本發(fā)明公開(kāi)了蛋白多肽Kp-10及其在制備抗血管新生藥物中的應(yīng)用。在 VEGF(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子)誘導(dǎo)的系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Kp-10在人臍帶靜脈內(nèi) 皮細(xì)胞(HUVEC)增殖實(shí)驗(yàn)、遷移實(shí)驗(yàn)、微管形成實(shí)驗(yàn)、雞胚尿囊膜血管新生 和小鼠角膜實(shí)驗(yàn)中均有明顯的抑制作用，可能可用于制備抑制血管新生的藥物。


圖中均以p<0.05表示有顯著差異，*,p<0.05， **，p<0.01， ***,p<0.001。
圖l:濃度為1微摩爾/升的Kp-10抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)遷移(左 邊為VEGF對(duì)照組，右邊為VEGF+ Kp-10組)；
圖2:濃度為1微摩爾/升的Kp-10抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)Boyden 小室中的遷移(左邊為VEGF對(duì)照組，右邊為VEGF+ Kp-10組)；
圖3:濃度為1微摩爾/升的Kp-10抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)微管 形成(左邊為未加Kp-10對(duì)照組，右邊為加Kp-10組)；
圖4: 10微克Kp-10抑制雞胚尿囊膜新生血管新生(左邊為生理鹽水對(duì)照組， 右邊為加Kp-10組，箭頭所指為新生血管)；圖5: l微克Kp-10抑制抑制VEGF誘導(dǎo)的角膜血管新生，箭頭所指為緩釋 顆粒位置,(左邊為VEGF對(duì)照組，右邊為VEGF+Kp-10組)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l: Kp-10抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖
目的和原理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)采用MTSAssay。 MTS Assay是一 種運(yùn)用比色法來(lái)間接測(cè)量活細(xì)胞數(shù)量的測(cè)定方法。CellTiter 96 AQueous單溶液 試劑包含一種四唑化合物(內(nèi)鹽;MTS)和一個(gè)電子耦合試劑(乙硫吩嗪，PES)。 MTS可被有代謝活性細(xì)胞中脫氫酶作用生成可溶于組織培養(yǎng)基的顆粒，在490nm 測(cè)量產(chǎn)物的吸光值與培養(yǎng)物中活細(xì)胞的數(shù)量直接成正比。
方法向96孔板中加入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)，設(shè)立對(duì)照組和加樣組。 對(duì)照組加入溶劑，加樣組加入不同濃度的Kp-10多肽，每個(gè)濃度做三個(gè)復(fù)孔。孵 育48 — 72小時(shí)后，加入細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑，再孵育4個(gè)小時(shí)，用酶標(biāo)儀在490nrn 處檢測(cè)吸光值，同樣的實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行三遍。
結(jié)果與評(píng)價(jià)與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組相比，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖能力受到抑制，說(shuō) 明KP-10可以抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。
實(shí)施例2:劃痕實(shí)驗(yàn)中Kp-lO抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞遷移
目的和原理在血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的作用下，人臍靜脈內(nèi)皮 細(xì)胞可以向沒(méi)有細(xì)胞的劃痕區(qū)域遷移。通過(guò)觀察遷入劃痕區(qū)的內(nèi)皮細(xì)胞量，來(lái)評(píng) 價(jià)KP-10是否有具有抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞遷移的能力。
方法在6孔板中加入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，大約長(zhǎng)滿時(shí)，用Tip頭劃一個(gè)十 字形劃痕，用PBS洗凈劃下的細(xì)胞，加入含不同藥物濃度及VEGF的培養(yǎng)基， 于5%(302培養(yǎng)箱中37'C培養(yǎng)至劃線兩側(cè)的細(xì)胞遷移至劃線區(qū)域。
結(jié)果評(píng)價(jià)在倒置顯微鏡下觀察拍照統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，加入 Kp-10肽后，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的遷移受到抑制，說(shuō)明Kp-10肽可以抑制人臍靜 脈內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，同樣的實(shí)驗(yàn)至少進(jìn)行三遍。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例3: Kp-lO肽抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Boyden小室遷移
目的和原理Boyden遷移實(shí)驗(yàn)基于Boyden小室被微孔分離成兩個(gè)部分。 細(xì)胞置于上面的部分，下面的部分含有趨化因子，在趨化因子的誘導(dǎo)下，上層細(xì) 胞可以穿過(guò)微孔膜遷移至膜的底部，并貼附在膜的背面，此實(shí)驗(yàn)可以檢測(cè)藥物對(duì) 內(nèi)皮細(xì)胞穿過(guò)微孔膜能力的影響。
方法用明膠將小室包被，培養(yǎng)箱中37'C孵育后，棄明膠。小室外六孔板 中加入含有VEGF的細(xì)胞培養(yǎng)基，小室中接入細(xì)胞，在培養(yǎng)箱中孵育四小時(shí)后， 將所有培養(yǎng)液吸去，將小室在多聚甲醛中固定，用PBS洗三遍，蘇木精伊紅染 色，用洗液將多余染料洗去，顯微鏡下拍照計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。
結(jié)果與評(píng)價(jià)與對(duì)照組相比，給予Kp-10后，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞穿過(guò)Boydeii 小室的能力受到抑制，說(shuō)明Kp-10可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞穿過(guò)微孔膜的能力，同樣的實(shí)驗(yàn)至少進(jìn)行三遍。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例4:Kp-10抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞成管
目的和原理Matrigel是從小鼠肉瘤中抽提得到的可容性基底膜抽提物，富 含細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞可以在Matrigel上貼附成管，可以利用 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在Mtrigel上的這種成管特性來(lái)研究藥物對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞成管的 影響。
方法將Matrigel鋪到48孔板上，于培養(yǎng)箱放置30分鐘待其凝固。每孔加 入內(nèi)皮細(xì)胞，再加入含有不同濃度Kp-10肽的培養(yǎng)基，于37'C5X培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 過(guò)夜后在顯微鏡下觀察微管形成情況。每孔選擇不同部位，計(jì)算微管形成數(shù)量并 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，同樣的實(shí)驗(yàn)至少進(jìn)行三遍。
結(jié)果與評(píng)價(jià)內(nèi)皮細(xì)胞在Matrigel中生長(zhǎng)過(guò)夜后，單個(gè)細(xì)胞延伸形成三維網(wǎng) 狀結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，給予Kp-10之后，內(nèi)皮細(xì)胞成管過(guò)程受到影響， 未能形成完整的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，說(shuō)明Kp-10可以抑制人微血管內(nèi)皮細(xì)胞微管形成。
實(shí)施例5: Kp-10抑制雞胚尿囊膜新生血管形成
目的和原理雞胚尿囊膜模型目前是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)較為理想的血管新生類藥物 篩選模型，特點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)成本低，直觀，數(shù)據(jù)可靠。將含藥物的載體置于受精雞胚 尿囊膜表面的無(wú)血管區(qū)，可觀察到藥物對(duì)新的微血管生成的影響。
方法將受精的雞胚置于孵化箱中孵化5天，在超凈工作臺(tái)中，用酒精擦拭
表面，在雞胚卵殼鈍端丌一個(gè)小口，將含不同量的Kp-10加到滅菌的濾紙片上， 將濾紙片加在尿囊膜上，用透明膠帶封口，放入孵育箱中繼續(xù)孵育。
結(jié)果與評(píng)價(jià)孵育兩天后，揭去透明膠帶，在體視顯微鏡下拍照，用軟件計(jì)
算濾紙周圍一定環(huán)形范圍內(nèi)新生微血管數(shù)量，統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示與對(duì)照組比較，加
Kp-10之后，新生微血管生成數(shù)量較少，說(shuō)明Kp-10可以抑制雞胚尿囊膜的血管 新生，每組雞胚數(shù)量為8-10。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例6: Kp-10抑制小鼠角膜新生血管
目的與原理為了確證進(jìn)一歩確證Kp-10肽對(duì)血管新生的影響，我們還用了
另外的體內(nèi)模型——小鼠角膜模型來(lái)檢驗(yàn)，雖然操作精細(xì)，但該模型是目前世界 研究血管新生的金標(biāo)準(zhǔn)之一，因?yàn)樾∈蠼悄な且粋€(gè)無(wú)血管區(qū)域，在角膜上誘導(dǎo)出
的血管全部為新生血管，其原理是在小鼠角膜上做一個(gè)小袋，植入含有血管內(nèi)
皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的緩釋顆粒，可以誘導(dǎo)存角鞏緣處的血管向含有血管內(nèi) 皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的緩釋顆粒的小袋生長(zhǎng)。在緩釋顆粒上同時(shí)加入VEGF 與Kp-10肽，觀察這些誘導(dǎo)的血管面積是否有改變。
方法將C57/BL6小鼠麻醉，在小鼠角膜上開(kāi)一個(gè)小口，然后植入含Kp-lO 和VEGF+Kp-10的顆粒，實(shí)驗(yàn)后繼續(xù)飼養(yǎng)一周，然后觀察結(jié)果。
結(jié)果與評(píng)價(jià)Kp-10可以抑制由血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子緩釋顆粒誘導(dǎo)的新生 血管，每組角膜鼠為7-8。
權(quán)利要求
1.一種抑制血管新生十肽，其特征在于氨基酸序列為YNWNSFGLRF，分子量為1303.4。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制血管新生十肽，其特征在于包括氨基酸序列 同源性在70%及以上的變體或其衍生物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制血管新生十肽，其特征在于包括其對(duì)應(yīng)的基 因組序列及其同源性在70%及以上的變體或其衍生物；
4. 權(quán)利要求1至3所述的抑制血管新生十肽在制備治療和/或預(yù)防血管新生 疾病的藥物中的應(yīng)用。
5. 如權(quán)利要求4所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于制備成含有 該抑制血管新生十肽的藥物組合物。
6. 如權(quán)利要求4所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于血管新生疾 病包括腫瘤、關(guān)節(jié)炎、眼病、血管瘤、銀屑病。
7. 如權(quán)利要求6所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于關(guān)節(jié)炎是類 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和炎性關(guān)節(jié)炎。
8. 如權(quán)利要求6所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于眼病包括新 生血管性角膜疾病、視網(wǎng)膜疾病、虹膜疾病、青光眼、脈絡(luò)膜、白內(nèi)障、玻璃體 眼病、視神經(jīng)疾病。
9. 如權(quán)利要求8所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于視網(wǎng)膜疾病 為糖尿病性視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜靜脈閉塞、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變或者視網(wǎng)膜動(dòng)脈閉 塞。
10. 如權(quán)利要求8所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于脈絡(luò)膜病為 濕性老年黃斑病變。
11. 如權(quán)利要求6所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于腫瘤包括原 發(fā)性和繼發(fā)性的腫瘤。
12. 如權(quán)利要求6所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于血管瘤包括 多發(fā)性血管瘤、血管母細(xì)胞瘤和良性血管增生疾病。
13. 如權(quán)利要求4所述的抑制血管新生十肽的應(yīng)用，其特征在于抑制血管新 生藥物為抑制Kaposi' s肉瘤病變組織血管新生的藥物，抑制白血病、淋巴瘤、 骨髓瘤血液癌癥的藥物，以及抑制Paget' s疾病的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抑制血管新生十肽及其應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的抑制血管新生十肽是人(Homo sapien)來(lái)源的，氨基酸序列YNWNSFGLRF，分子量為1303.4，命名為Kp-10，本發(fā)明還提供了上述抗血管新生十肽在制備血管新生抑制藥物中的應(yīng)用，尤其是Kp-10在制備抑制癌癥以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、糖尿病綜合癥、血管瘤等血管新生依賴性疾病中的相關(guān)應(yīng)用。在VEGF(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子)誘導(dǎo)的系列實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Kp-10在人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)增殖實(shí)驗(yàn)、遷移實(shí)驗(yàn)、微管形成實(shí)驗(yàn)、雞胚尿囊膜血管新生和小鼠角膜實(shí)驗(yàn)中均有明顯的抑制作用，可用于制備抑制血管新生的藥物。
文檔編號(hào)A61P9/00GK101597324SQ20091004687
公開(kāi)日2009年12月9日 申請(qǐng)日期2009年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月2日
發(fā)明者劉明耀, 易正芳 申請(qǐng)人:華東師范大學(xué)