專利名稱：單獨使用parp抑制劑或與其他抗腫瘤劑組合治療乳腺癌的制作方法
單獨使用PARP抑制劑或與其他抗腫瘤劑組合治療乳腺癌交叉參考本申請書要求下列的優(yōu)先權于2007年11月12日提交的題為“Treatment of Triple Negative Metastatic Breast Cancer with a Combination of an Antimetabolite, a Platinum Complex, and a PARP Inhibitor"白勺 _ Bl Bi _ if 60/987，333 (律師卷宗號 28825-742. 101)；于 2007 年 12 月 7 日提交的題為“Treatment of Cancer with Combination of Topoisomerase Inhibitors and PARPInhibitors，，的美國 臨時申請61/012，364 (律師卷宗號28825-747. 101)；以及于2008年6月3日提交的題為 “Treatment of Breast,Ovarian,and UterineCancer with a PARP Inhibitor，，的美國臨 時申請61/058，528 (律師卷宗號28825-757. 101)，以上每份申請均在此引入作為參考。
背景技術：
癌癥是一類以細胞生長失控為特征的疾病。僅美國而言，癌癥的年發(fā)病率估計已 超過130萬。盡管治療癌癥采用了手術、放療、化療和激素，但在美國癌癥仍然是導致死亡 的第二大原因。據(jù)估計，每年有560，000余名美國人死于癌癥。癌細胞同時激活數(shù)條通路，它們正向和負向調(diào)節(jié)細胞生長和細胞死亡。這一特點 表明，細胞死亡和生存信號的調(diào)節(jié)可為改善目前的化療療效提供新戰(zhàn)略。乳腺癌一般是以手術和輔助性治療相結合來治療的。手術是為了移除癌性病變， 而輔助性治療(放療、化療或兩者結合)是為了攻擊手術后任何可能殘留的癌細胞。乳腺癌 可根據(jù)激素受體(HR)是否存在而大致地分類。激素受體陽性(HR+)癌癥的特征是雌性激 素受體一雌激素受體(ER)的表達或孕酮受體(PR)的表達，或它們兩者的同時表達。ER+乳 腺癌的輔助性治療通常包括用選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)如他莫昔芬或雷洛昔芬化 療。不幸的是，雖然大約70%乳腺癌是ER陽性，但其余30%的HR陰性乳腺癌不宜用SERM 治療。因此，對于ER陰性乳腺癌嘗試了其他輔助化療，例如用蒽環(huán)類抗生素(單獨或與紫 杉烷結合)治療?；趯π呐K毒性的擔心，蒽環(huán)類抗生素治療受到終身劑量極限的限制。對于轉移 性乳腺癌患者，無論是首次使用紫杉烷還是曾受過紫杉烷預治療，用吉西他濱和卡鉬的治 療是慣用的組合化療。對于基底樣局部晚期乳腺癌，鉬類藥物顯示了很有希望的抗腫瘤活 性。對于基底樣乳腺癌，由于這類乳腺癌固有的DNA修復途徑中的缺陷，DNA損傷劑具有可 觀的抗腫瘤療效。盡管有如吉西他濱的抗代謝藥物和如卡鉬的鉬絡合物可供利用，尚沒有可接受的 ER陰性乳腺癌護理標準。尤其是，三重陰性轉移性乳腺癌(即ER陰性、和/或冊陰性、和 /或人表皮生長因子受體2(HER2)陰性的乳腺癌)是難以用標準治療方法治療的，而SERM 化療則完全不起作用。因此，對于癌癥，尤其是三重陰性轉移性乳腺癌，需要有有效的治療 方法。雖然對于癌癥存在著一些有限的治療選擇，但癌癥的各種變型，包括三重陰性乳 腺癌，是尤其難以治療的，因為它們是難以用標準的化療或激素療法治愈的。因此，對于癌 癥，尤其是癌癥的各種變型，需要有一種有效的治療方法。
發(fā)明概述在一些實施方案中，本發(fā)明提供了治療患者ER、ra或HER2中至少一種呈陰性的 乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少一種PARP抑制劑。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了 在需要治療的患者中治療ER、ra或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法，包括(a)從 患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項該癌癥是ER陽性還是ER陰性；該癌癥 是ra陽性還是ra陰性；該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果測試表明該癌癥對 ER、PR或HER2中至少一種呈陰性，則使用至少一種PARP抑制劑治療患者。在一些實施方 案中，如果滿足下列兩種或兩種以上條件，則該方法進一步包括使用至少一種PARP抑制劑 治療患者(a)該癌癥呈ER陰性，(b)該癌癥呈冊陰性，(c)該癌癥呈HER2陰性。在一些 實施方案中，本發(fā)明提供了治療患者ER、冊或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法，包 括(a)測試取自患者的樣品的PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患 者給藥至少一種PARP抑制劑。在本文所公開的任何一種方法的實施過程中，獲得了至少一種治療效果，所述的 至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理 學完全應答。在一些實施方案中，與抗腫瘤劑治療相比較，用PARP抑制劑的治療達到了與 之相當?shù)呐R床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)。在一些實施方案中，與單獨用抗腫瘤 劑的治療相比，臨床受益率的改善為至少約30%。在一些實施方案中，PARP抑制劑是一種 PARP-I抑制劑。在一些實施方案中，該PARP-I抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝 產(chǎn)物。在一些實施方案中，該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物
O
Il
C-NH2
R3
(IIa)
式(IIa)
其中，(I)VHR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取 代基RpRyRyR4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6) 烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中RpRyRyR4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基 總是氫；或者(2)禮、R2, R3、R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2、 R3、R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝 基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、 異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥。在一些實施方案中，在(2)的化合物中，碘 基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5取代基相鄰。在一些實施 方案中，在⑵的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的隊、1 2、1 3、1 4或1 5取 代基相鄰。 在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I
13期、II期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、ra或HER2中至少一種呈陰性。在 一些實施方案中，乳腺癌對于ER、冊或HER2中至少一種呈陰性；且其中乳腺癌對于ER、 冊或HER2中至少一種呈陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。 在一些實施方案中，乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。在一些實施方案中，治療包 括為期至少11天的治療周期，其中在該治療周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約 100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中， 4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、胃腸外注射或輸注、或吸入給藥。在一些實施方案中，治 療周期為約11天至約30天。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制 劑與至少一種抗腫瘤劑組合?？鼓[瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、 植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、 單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、 分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90抑制劑、微 管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲異構酶抑制 劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥學上可接受 的鹽。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是西他濱(citabine)、卡培他濱(capecitabine)、瓦洛 他濱(valopicitabine)或吉西他濱(gemcitabine)。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑選自 Avastin (貝伐單抗)、Sutent (舒尼替尼)、Nexavar (索拉非尼)、Recentin (西地尼布)、 ABT-869、Axitinib (阿西替尼)、伊立替康(Irinotecan)、拓撲替康(topotecan)、紫杉醇、 多西紫杉醇、拉帕替尼、曲妥單抗(赫賽汀)、拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、 非類固醇芳香酶抑制劑、氟維司群、表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單 抗、胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)抑制劑，以及CP-751871。在一些實施方案中，該方 法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與一種以上抗腫瘤劑組合。在一些實施方案中，抗腫 瘤劑是在給藥PARP抑制劑之前、同時或之后給藥。在一些實施方案中，該方法進一步包括 手術、放射治療、化學治療、基因治療、DNA治療、病毒治療、RNA治療、DNA治療、輔助性治療、 新輔助性治療、免疫治療、納米治療或其組合。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患 者給藥PARP抑制劑與γ輻射組合。在一些實施方案中，該樣品是組織或體液樣品。在一 些實施方案中，該樣品是腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹膜液樣品、滲出液(exudate)或 積液(effusion)。在一些實施方案中，該方法進一步包括以取自患者的樣品測定雌激素受 體、孕酮受體或人表皮生長因子2受體的表達。 在一些實施方案中，本發(fā)明提供了治療患者乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少 一種PARP抑制劑與至少一種抗腫瘤劑組合。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了在需要治療 的患者中治療乳腺癌的方法，包括(a)從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一 項該癌癥是ER陽性還是ER陰性；該癌癥是冊陽性還是冊陰性；該癌癥是HER2陽性還 是HER2陰性；(c)如果測試表明該癌癥對ERJR或HER2中至少一種呈陰性，則使用治療劑 的組合治療患者，其中治療劑包括至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑。在一些實施 方案中，其中如果滿足以下兩種或兩種以上條件，則該方法進一步包括用治療劑的組合治 療患者，治療劑包括至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑(a)該癌癥呈ER陰性，(b) 該癌癥呈I3R陰性，(c)該癌癥呈HER2陰性。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了治療患者乳 腺癌的方法，包括(a)測試取自患者的樣品的PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患者給藥至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑。在本文所公開的任何一種方法的實施過程中，在一些實施方案中獲得了至少一種 治療效果，所述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病 情穩(wěn)定，或病理學完全應答。在一些實施方案中，與使用抗腫瘤劑但不用PARP抑制劑進行 治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到改善。在一些實施方案中，臨床 受益率的改善為至少約60%。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰 胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物
式(IIa)
其中=(I)VHR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取 代基RpRyRyR4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6) 烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中RpRyRyR4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基 總是氫；或者(2)禮、R2, R3、R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2、 R3、R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝 基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、 異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥。在一些實施方案中，在(2)的化合物中，碘 基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一些實施方 案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的Ri、R2、R3、R4或R5基 團相鄰。 在一些實施方案中，抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、 植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、 單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、 分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90抑制劑、微 管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲異構酶抑制 劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥學上可接受 的鹽。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是西他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西他濱。在一些實施 方案中，該抗腫瘤劑選自Avastin (貝伐單抗)、Sutent (舒尼替尼)、NeXaVar (索拉非尼)、 Recentin (西地尼布)、ABT-869、Axitinib (阿西替尼)、伊立替康、拓撲替康、紫杉醇、多西 紫杉醇、拉帕替尼、赫賽汀、拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑 制劑、氟維司群、表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單抗、胰島素樣生長 因子1受體(IGFlR)抑制劑，以及CP-751871。在一些實施方案中，該方法進一步包括手術、 放射治療、化學治療、基因治療、DNA治療、病毒治療、DNA治療、輔助性治療、新輔助性治療、RNA治療、免疫治療、納米治療或其組合。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥 PARP抑制劑與γ輻射組合。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I 期、II期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌是HR陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺 癌對于ER、PR或HER2中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、PR或HER2 中至少一種呈陰性；且其中乳腺癌對于ER、冊或HER2中至少一種呈陽性。在一些實施方 案中，乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。在一些實施方案中，乳腺癌具有損傷的BRCAl或 BRCA2功能。在一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，其中(a)在該周期的第1 天和第8天，患者接受約100-5000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患者 接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約 100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，治 療周期為約11天至約30天。在一些實施方案中，在該周期的第1天和第8天，患者接受約 100-2，500mg/m2的吉西他濱和約10至約400mg/m2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11 天，患者接受約1至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。 在一些實施方案中，在該周期的第1天和第8天，患者接受約500-2000mg/m2的吉西他濱和 約50至約400mg/m2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約50mg/kg 的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，在該周期的 第1天和第8天，患者接受約lOOOmg/m2的吉西他濱和約AUC 2的卡鉬；以及在該周期的第 1、4、8 和 11 天，患者接受約 1、2、3、4、6、8 或 10、12、14、16、18 或 20mg/kg 的 4-碘 _3_ 硝基 苯甲酰胺。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是以胃腸外注射或輸注的方式給藥。在一些實施方 案中，PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺，它是以口服、或胃腸外注射或輸注、或吸入給 藥。在一些實施方案中，該方法進一步包括以胃腸外注射或輸注的方式向患者給藥紫杉烷。 在一些實施方案中，該樣品是組織或體液樣品。在一些實施方案中，該樣品是腫瘤樣品、血 液樣品、血漿樣品、腹膜液樣品、滲出液或積液。在一些實施方案中，該方法進一步包括以取 自患者的樣品測定雌激素受體、孕酮受體或人表皮生長因子2受體的表達。參考文件引用本說明書中提及的所有出版物和專利申請均通過引用而引入本文，就好像每一篇 出版物或專利申請書都被明確地和單獨地如此表明一樣。附圖的簡要說明在所附的權利要求書中具體地闡明了本發(fā)明的新穎特點。通過參閱以下關于運用 本發(fā)明原理的具體實施方案的詳細說明以及附圖，將能更好地理解本發(fā)明的特征和優(yōu)點

圖1顯示人類原發(fā)性癌癥中PARPl基因表達的上調(diào)。水平線，中位PARPl表達 ’方 框，四分位區(qū)間(interquartile range)；長條，標準差。圖2顯示4-碘-3-硝基苯甲酰胺加卡鉬或吉西他濱對體外TNBC (三重陰性轉移 乳腺癌)細胞周期進程的影響。MDA-MB-463 TNBC細胞的存活率用FACS(熒光激活細胞分 選儀)分析定量。圖3顯示接受4-碘-3-硝基苯甲酰胺治療的患者的外周單核血細胞(PMBC)中 PARP的抑制。圖4顯示轉移性TNBC 二期試驗的人乳腺癌腫瘤樣品的PARPl、ER、ra和HER2的表達圖譜。數(shù)據(jù)相對于葡糖醛酸糖苷酶基因表達進行歸一化。數(shù)據(jù)代表了 50個臨床乳 腺癌樣品和19個正常乳腺樣品的分析。垂直線代表中位基因表達，方框代表四分位區(qū)間。圖5顯示了轉移性TNBC患者的PFS(無病情進展的存活)Kaplan-Meier曲線，以 4-碘-3-硝基苯甲酰胺加吉西他濱/卡鉬治療與單獨用吉西他濱/卡鉬治療相比較。采 用Kaplan-Meier法總結了兩個治療分組的PFS分布。采用雙側對數(shù)秩檢驗法(log-rank)， 5%的顯著性水平，比較了兩個分組的數(shù)據(jù)。G/C，吉西他濱/卡鉬；G/C+BA，吉西他濱/卡鉬 +4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)。圖6顯示，在人類三重陰性MDA-MB-468乳腺癌細胞中，4_碘_3_硝基苯甲酰胺 (BA)加強了 S-和G2/M細胞周期停滯，并增強了 γ輻射的抗增殖作用。詳細說明在一些實施方案中，本發(fā)明提供了治療患者ERJR或HER2中至少一種呈陰性的乳 腺癌的方法，包括向患者給藥至少一種PARP抑制劑。在一些實施方案中，獲得了至少一種 治療效果，所述的至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、 病理學完全應答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，與抗腫瘤劑治療相比較，用PARP抑制劑 的治療達到了與之相當?shù)呐R床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)。在一些實施方案中，臨 床受益率的改善為至少約30%。在一些實施方案中，PARP抑制劑是PARP-I抑制劑。在一 些實施方案中，該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物
式(IIa)
其中=(I)VHR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取 代基RpRyRyR4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6) 烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中RpRyRyR4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基 總是氫；或者(2)禮、R2, R3、R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2、 R3、R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝 基、羥基氨基、羥基或氨基的Ri、R2、R3、R4或R5取代基相鄰；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合 物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥。在一些實施方案中，在(2)的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的札、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一些 實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4或 R5基團相鄰。在一些實施方案中，該PARP-I抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn) 物。 在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I 期、II期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、ra或HER2中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、ra或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ER、I3R或 HER2中至少一種呈陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性乳腺癌。在一些實施方案 中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和冊陽性。在一 些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性以及同時呈HER2陽性和冊陽性。在一些實施方案中，乳 腺癌是I3R陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和ER陽性。在一些實施方案 中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性以及同時呈ER陽 性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺 癌呈HER2陰性和ER陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈HER2陰性和冊陽性。在一些實 施方案中，乳腺癌呈HER2陰性以及同時呈ER陽性和冊陽性。在一些實施方案中，乳腺癌 呈ER陰性和I3R陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和HER2陽性。在一 些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、HER2 陰性和I3R陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案中， 乳腺癌呈I3R陰性、HER2陰性和ER陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和 HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。在一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，在該治療周期的第1、4、8和 11天，患者接受約1至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn) 物。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、胃腸外注射或輸注、或吸入給藥。 在一些實施方案中，治療周期為約11天至約30天。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與至少一種抗腫 瘤劑組合。該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、植物來源的抗腫 瘤劑、抗腫瘤有機鉬化合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、 干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、分化誘導劑， 或其他顯示抗腫瘤活性的藥物，或其藥學上可接受的鹽。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是西 他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西他濱。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是鉬絡合物。在一 些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與一種以上抗腫瘤劑組合。該抗 腫瘤劑是在給藥PARP抑制劑之前、同時或之后給藥。在一些實施方案中，該方法進一步包 括向患者給藥PARP抑制劑與抗血管生成劑如Avastin(貝伐單抗)組合。在一些實施方 案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與拓撲異構酶抑制劑如伊立替康或拓撲 替康組合。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與紫杉烷如紫杉 醇或多西紫杉醇組合。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與靶 向Her-2的藥物如曲妥單抗(赫賽汀)組合。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患 者給藥PARP抑制劑與激素治療劑如激素拮抗劑他莫昔芬組合。在一些實施方案中，該方法 進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與靶向生長因子受體的藥物，包括表皮生長因子受體 (EGFR)和胰島素樣生長因子I(IGF-I)受體(IGFlR)抑制劑組合。在一些實施方案中，該方 法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與γ輻射組合。在一些實施方案中，該方法進一步 包括手術、放射治療、化學治療、基因治療、DNA治療、輔助性治療、新輔助性治療、RNA治療、 DNA治療、病毒治療、免疫治療、納米治療或其組合。本文敘述的一些實施方案提供了治療患者乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少一 種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑。在一些實施方案中，獲得了至少一種治療效果，所述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病理學完全應答 或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，與用抗代謝劑和鉬絡合物但不用PARP抑制劑進行治療相 比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到改善。在一些實施方案中，臨床受益率 的改善為至少約60%。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一 些實施方案中，該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該 鉬絡合物選自順鉬、卡鉬、草酸鉬(oxaplatin)和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合 物是卡鉬。在一些實施方案中，該抗代謝劑是西他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑選自 西他濱、卡培他濱、吉西他濱或瓦洛他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是吉西他濱。在 一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥紫杉烷。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫 杉醇或多西紫杉醇。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺 癌處于I期、II期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌是HR陰性乳腺癌。在一些實施方 案中，乳腺癌對于ER、I3R或HER2中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、 PR或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ERJR或HER2中至少一種受體呈陽性。在一 些實施方案中，乳腺癌是HR陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性乳腺癌。在 一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和 I3R陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性以及同時呈HER2陽性和I3R陽性。在一些實 施方案中，乳腺癌是I3R陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和ER陽性。在 一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性以 及同時呈ER陽性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性乳腺癌。在一些實 施方案中，乳腺癌呈HER2陰性和ER陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈HER2陰性和冊陽 性。在一些實施方案中，乳腺癌呈HER2陰性以及同時呈ER陽性和冊陽性。在一些實施方 案中，乳腺癌呈ER陰性和I3R陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和HER2 陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER 陰性、HER2陰性和I3R陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈TO陰性和HER2陰性。在一些實 施方案中，乳腺癌呈I3R陰性、HER2陰性和ER陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、 I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
在一些實施方案中，該方法進一步包括給藥PARP抑制劑與抗腫瘤劑組合。在一些 實施方案中，該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、植物來源的抗 腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、干 擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、血管生成抑制劑、分化誘導劑，或其他顯示抗腫瘤 活性的藥物，或其藥學上可接受的鹽。在一些實施方案中，該鉬絡合物是順鉬、卡鉬、草酸鉬 和奧沙利鉬。在一些實施方案中，抗腫瘤抗代謝劑是西他濱、卡培他濱、吉西他濱或瓦洛他 濱。在一些實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與一種以上抗腫瘤劑組 合。在一些實施方案中，抗腫瘤劑是在給藥PARP抑制劑之前、同時或之后給藥。一些實施方 案中，該抗腫瘤劑是抗血管生成劑，如Avastin (貝伐單抗)。在一些實施方案中，該抗腫瘤 劑是拓撲異構酶抑制劑，包括但不限于伊立替康、拓撲替康或喜樹堿。在一些實施方案中， 該抗腫瘤劑是紫杉烷，包括但不限于紫杉醇或多西紫杉醇。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑 是靶向Her-2的藥物，如曲妥單抗(赫賽汀)。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是激素拮抗 劑，如他莫昔芬。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是靶向生長因子受體的藥物。在一些實施方案中，這種藥物是表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑或胰島素樣生長因子I(IGF-I)受體 (IGFlR)抑制劑。在其他實施方案中，該方法進一步包括手術、放射治療、化學治療、基因治 療、DNA治療、輔助性治療、新輔助性治療、病毒治療、RNA治療、免疫治療、納米治療或其組合ο在一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，在該治療周期的第1、4、8和 11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn) 物。在一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，在該治療周期的第4、8和11天， 患者接受約1至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在 一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，在該治療周期的第1、4、8和11天，患者 接受約 1、2、3、4、5、6、8 或 10、12、14、16、18 或 20mg/kg 的 4-碘 _3_ 硝基苯甲酰胺。在一些實施方案中，治療包括至少11天的治療周期，其中(a)在該周期的第1天 和第8天，患者接受約100-2000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患者接 受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約 100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中， 在該周期的第1天和第8天，患者接受約100-2，500mg/m2的吉西他濱和約AUC 1-5的卡鉬 (約10至約400mg/m2的卡鉬)；以及在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約50mg/ kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，在該周期 的第1天和第8天，患者接受約500-2000mg/m2的吉西他濱和約50至約400mg/m2的卡鉬； 以及在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺 或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，在該周期的第1天和第8天，患者接受 約lOOOmg/m2的吉西他濱和約AUC 2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11天，患者接受 約 1、2、3、4、6、8 或 10、12、14、16、18 或 20mg/kg 的 4-碘-3-硝基苯甲酰胺。本文敘述的一些實施方案提供了為三重陰性乳腺癌患者治療乳腺癌的方法，包括 在21天治療周期的第1、4、8和11天，向患者給藥約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯 甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口 服或靜脈輸注給藥。一些實施方案提供了為三重陰性乳腺癌患者治療乳腺癌的方法，包括在21天治 療周期內(nèi)(a)在該周期的第1天和第8天，向患者給藥約100-2000mg/m2的吉西他濱；(b) 在該周期的第1天和第8天，向患者給藥AUC 0. 1-10的卡鉬(約10至400mg/m2的卡鉬)； 以及(c)在該周期的第1、4、8和11天，向患者給藥約10至約100mg/kg的4-碘_3_硝基苯 甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在 一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服 或靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，卡鉬 以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。本文敘述的一些實施方案提供了為三重陰性乳腺癌患者治療乳腺癌的方法，其包 括(a)建立約10天至約30天的治療周期；(b)在該周期的1至10個單獨的日子，每天向 患者給藥約lmg/kg至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺，或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn) 物。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。本文敘述的一些實施方案提供了為三重陰性乳腺癌患者治療乳腺癌的方法，其包括(a)建立一個約10天至約30天的治療周期；(b)在該周期的1至5個單獨的日子，以靜 脈輸注的方式，每天向患者給藥約100至約5000mg/m2的吉西他濱；(c)在該周期的1至5 個單獨的日子，以靜脈輸注的方式，每天向患者給藥AUC 1至AUC 10的卡鉬(例如約10至 約400mg/m2卡鉬)；以及(d)在該周期的1至10個單獨的日子，每天向患者給藥約lmg/kg 至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺，或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案 中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案 中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。一些實施方案提供了為需要治療的患者治療乳腺癌的方法，包括(a)從患者獲 取樣品；(b)測試該樣品以確定以下至少一項(i)該癌癥是ER陽性還是ER陰性；(ii)該 癌癥是PR陽性還是PR陰性；(iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果測試表明 該癌癥是ER陰性、PR陰性或HER2陰性，則使用治療劑的組合治療患者，其中該治療劑包括 至少一種抗代謝劑、至少一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制劑；以及(d)如果測試結果 未表明該癌癥是ER陰性、PR陰性或HER2陰性，則選擇不同的治療方式。一些實施方案包括為需要治療的患者治療乳腺癌的方法，包括(a)從患者獲取 樣品；(b)測試該樣品以確定以下至少一項(i)該癌癥是ER陽性還是ER陰性；(ii)該癌 癥是PR陽性還是PR陰性；(iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果測試表明該 癌癥是ER陰性、PR陰性或HER2陰性，則使用至少一種PARP抑制劑治療患者；以及(d)如 果測試結果未表明該癌癥是ER陰性、PR陰性或HER2陰性，則選擇不同的治療方式。在一些實施方案中，獲得了至少一種治療效果，所述至少一種治療效果是乳腺腫 瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病理學完全應答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案 中，與沒用PARP抑制劑的治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到改善。 在一些實施方案中，臨床受益率為至少約30 %。在一些實施方案中，與用抗代謝劑和鉬絡合 物但不用PARP抑制劑進行治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD>6個月)得到改善。 在一些實施方案中，臨床受益率為至少約60 %。在一些實施方案中，PARP抑制劑是PARP-I 抑制劑。在其他實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中， 該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該鉬絡合物選自 順鉬、卡鉬、草酸鉬和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合物是卡鉬。在一些實施方案 中，該抗代謝劑是西他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑選自西他濱、卡培他濱、吉西他濱 或瓦洛他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是吉西他濱。在一些實施方案中，該方法進一 步包括向患者給藥紫杉烷。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫杉醇或多西紫杉醇。在一些 實施方案中，該樣品是組織或體液樣品。在一些實施方案中，該樣品是腫瘤樣品、血液樣品、 血漿樣品、腹膜液樣品、滲出液或積液。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一 些實施方案中，乳腺癌是ER陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I期、II 期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌對于ERJR或HER2中至少一種呈陰性。在一些實 施方案中，乳腺癌對于ER、PR或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ER、PR或HER2中 至少一種呈陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和ra陽性。在一些實施方案中，乳 腺癌呈ER陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性以及同時呈I3R陽性和 HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是I3R陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺 癌呈I3R陰性和ER陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈冊陰性以及同時呈ER陽性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是 HER2陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌呈HER2陰性和ER陽性。在一些實施 方案中，乳腺癌呈HER2陰性和冊陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈HER2陰性以及同時 呈ER陽性和ra陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和ra陰性。在一些實施方案 中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和HER2陽性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2 陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、HER2陰性和冊陽性。在一些實施方案中，乳 腺癌呈I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性、HER2陰性和I3R陽性。 在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和HER2陰性。 本發(fā)明的一些實施方案提供了為需要治療的患者治療乳腺癌的方法，包括(a) 從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項(i)該癌癥是ER陽性還是ER陰性； ( )該癌癥是PR陽性還是PR陰性；(iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果 滿足下列兩種或兩種以上條件，則使用至少一種PARP抑制劑治療患者(i)該癌癥是ER陰 性；(ii)該癌癥是I3R陰性；或(iii)該癌癥是HER2陰性；以及(d)如果至少兩種前述條件 不滿足，則選擇不同的治療方式。本發(fā)明的一些實施方案提供了為需要治療的患者治療乳 腺癌的方法，包括(a)從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項(i)該癌癥是 ER陽性還是ER陰性；(ii)該癌癥是PR陽性還是PR陰性；(iii)該癌癥是HER2陽性還是 HER2陰性；(c)如果滿足下列兩種或兩種以上條件，則使用治療劑的組合治療患者，其中該 治療劑包括至少一種抗代謝劑、至少一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制劑(i)該癌癥 是ER陰性；(ii)該癌癥是I3R陰性；或(iii)該癌癥是HER2陰性；以及(d)如果至少兩種 前述條件不滿足，則選擇不同治療方式。在一些實施方案中，獲得了至少一種治療效果，所 述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病理學完全應 答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，與沒用PARP抑制劑的治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)得到改善。在一些實施方案中，臨床受益率為至少約30%。在一些實 施方案中，與用抗代謝劑和鉬絡合物但不用PARP抑制劑進行治療相比較，臨床受益率(CBR =CR+PR+SD彡6個月)得到改善。在一些實施方案中，臨床受益率為至少約60%。在一些 實施方案中，該樣品是組織或體液樣品。在一些實施方案中，該樣品是腫瘤樣品、血液樣品、 血漿樣品、腹膜液樣品、滲出液或積液。在一些實施方案中，PARP抑制劑是PARP-I抑制劑。 在其他實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該苯甲 酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該鉬絡合物選自順鉬、卡 鉬、草酸鉬和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合物是卡鉬。在一些實施方案中，該抗 代謝劑是西他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是西他濱、卡培他濱、吉西他濱或瓦洛他 濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是吉西他濱。在一些實施方案中，該方法進一步包括向 患者給藥紫杉烷。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫杉醇或多西紫杉醇。在一些實施方案 中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I期、II期或III期。在一些 實施方案中，乳腺癌對于ER、冊或HER2中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳腺癌對 于ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ERJR或HER2中至少一種呈陽性。在 一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是I3R陰性轉 移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中， 乳腺癌呈ER陰性和冊陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陰性。在一些
22實施方案中，乳腺癌呈冊陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰 性和HER2陰性。在一些實施方案中，治療包括選擇至少11天的治療周期，以及(a)在該 治療周期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或 其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸 注給藥。在一些實施方案中，治療包括選擇至少11天的治療周期，以及(a)在該周期的第 1天和第8天，患者接受約100-2000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患 者接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約10 至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案 中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案 中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。本文公開的一些實施方案提供了一種為需要治療的患者治療乳腺癌的方法，包 括(a)從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項(i)該癌癥是ER陽性還是ER 陰性；( )該癌癥是PR陽性還是PR陰性；以及(iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性； (c)如果滿足下列兩種或兩種以上條件，則使用至少一種PARP抑制劑治療患者(i)該癌癥 是ER陰性；(ii)該癌癥是I3R陰性；或(iii)該癌癥是HER2陰性；以及(d)如果條件(i) 至(iii)中有兩種或兩種以上條件未滿足，則選擇不同的治療方式。本文敘述的一些實施方案提供了一種為需要治療的患者治療ER陰性、冊陰性、 HER-2陰性轉移性乳腺癌的方法，包括向所述患者給藥至少一種PARP抑制劑。在一些實施 方案中，與沒用PARP抑制劑的治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到 改善。在一些實施方案中，臨床受益率為至少約30%。在一些實施方案中，以單位劑量形 式向患者給藥兩種或兩種以上治療化合物。在一些實施方案中，PARP抑制劑是PARP-I抑 制劑。在其他實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中， 該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性 乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌 是I3R陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性轉移性乳腺癌。在一些 實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和冊陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陰 性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER 陰性、PR陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，治療包括選擇至少11天的治療周期，在該 治療周期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或 其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸 注給藥。一些實施方案提供了治療患者乳腺癌的方法，包括(a)測試取自患者的樣品的 PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患者給藥至少一種PARP抑制劑。在 一些實施方案中，獲得了至少一種治療效果，所述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、 轉移減少、完全緩解、部分緩解、病理學完全應答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，與沒用 PARP抑制劑的治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)得到改善。在一些實 施方案中，臨床受益率的改善為至少約30%。在一些實施方案中，PARP抑制劑是PARP-I抑 制劑。在其他實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中， 該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性
23乳腺癌。在一些實施方案中，該方法進一步包括以取自患者的樣品測定雌激素受體、孕酮 受體或人表皮生長因子2受體的表達。在一些實施方案中，乳腺癌是HR陰性乳腺癌。在一 些實施方案中，乳腺癌是ER陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是ra陰性乳腺癌。在 一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和冊 陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R 陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性、PR陰性和HER2陰性。在一些實 施方案中，治療包括選擇至少11天的治療周期，在該治療周期的第1、4、8和11天，患者接 受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些 實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。本文公開的一些實施方案提供了為需要治療的患者治療乳腺癌的方法，包括(a) 從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項(i)該癌癥是ER陽性還是ER陰性； ( )該癌癥是I3R陽性還是冊陰性；以及(iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如 果滿足下列兩種或兩種以上條件，則使用治療劑的組合治療患者，其中該治療劑包括至少 一種抗代謝劑、至少一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制劑(i)該癌癥是ER陰性；(ii) 該癌癥是I3R陰性；或(iii)該癌癥是HER2陰性；以及(d)如果條件⑴至(iii)中有兩種 或兩種以上條件未滿足，則選擇不同的治療方式。在一些實施方案中，吉西他濱以靜脈輸注 給藥。在一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰 胺以口服或靜脈輸注給藥。本文敘述的一些實施方案提供了為需要治療的患者治療ER陰性、PR陰性、HER-2 陰性轉移性乳腺癌的方法，包括向所述患者給藥至少一種抗代謝劑、至少一種鉬絡合物以 及至少一種PARP抑制劑。在一些實施方案中，與用抗代謝劑和鉬絡合物但不用PARP抑制 劑進行治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到改善。在一些實施方案 中，臨床受益率為至少約60%。在一些實施方案中，以單位劑量形式向患者給藥兩種或兩 種以上治療化合物。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些 實施方案中，該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該 鉬絡合物選自順鉬、卡鉬、草酸鉬和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合物是卡鉬。在 一些實施方案中，該抗代謝劑是西他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑選自西他濱、卡培 他濱、吉西他濱或瓦洛他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是吉西他濱。在一些實施方案 中，該方法進一步包括向患者給藥紫杉烷。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫杉醇或多西紫 杉醇。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌處于I期、 II期或III期。在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、ra或HER2中至少一種呈陰性。在一 些實施方案中，乳腺癌對于ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ERJR或HER2 中至少一種呈陽性。在一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案 中，乳腺癌是PR陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性轉移性乳腺癌。 在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和冊陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和 HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌 呈ER陰性、冊陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，治療包括選擇至少11天的治療周期， 以及(a)在該周期的第1天和第8天， 者接受約100-2000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患者接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1、4、8 和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇?謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸 注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。一些實施方案提供了治療患者乳腺癌的方法，包括(a)測試取自患者的樣品的 PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患者給藥至少一種抗代謝劑、至少 一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制劑。在一些實施方案中，獲得了至少一種治療效果， 所述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病理學完全 應答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，與用抗代謝劑和鉬絡合物但不用PARP抑制劑進行 治療相比較，臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)得到改善。在一些實施方案中，臨床 受益率的改善為至少約60%。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn) 物。在一些實施方案中，該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施 方案中，該鉬絡合物選自順鉬、卡鉬、草酸鉬和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合物是 卡鉬。在一些實施方案中，該抗代謝劑是西他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑選自西他 濱、卡培他濱、吉西他濱或瓦洛他濱。在一些實施方案中，該抗代謝劑是吉西他濱。在一些 實施方案中，該方法進一步包括向患者給藥紫杉烷。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫杉醇 或多西紫杉醇。在一些實施方案中，乳腺癌是轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，該方法進 一步包括以取自患者的樣品測定雌激素受體、孕酮受體或人表皮生長因子2受體的表達。 在一些實施方案中，乳腺癌對于ER、冊或HER2中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳 腺癌對于ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且乳腺癌對于ERJR或HER2中至少一種呈陽 性。在一些實施方案中，乳腺癌是HR陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是ER陰性乳 腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是I3R陰性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰 性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺癌呈ER陰性和I^R陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈 ER陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，乳腺癌呈I3R陰性和HER2陰性。在一些實施方案 中，乳腺癌呈ER陰性、冊陰性和HER2陰性。在一些實施方案中，治療包括選擇至少11天的 治療周期，以及(a)在該周期的第1天和第8天，患者接受約100-2000mg/m2的吉西他濱； (b)在該周期的第1天和第8天，患者接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期 的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含 量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，吉西他濱以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，卡 鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服或靜脈輸注給藥。因此，本文所述的實施方案包括用至少三種化學不同的物質(zhì)治療患者，其中一種 是抗代謝劑、一種是含鉬絡合物，還有一種是PARP抑制劑。在一些實施方案中，一種或多種 這樣的物質(zhì)能以各種各樣的物理形態(tài)存在，例如游離堿、鹽(尤其是藥學上可接受的鹽)、 水合物、多晶型物、溶劑合物、代謝產(chǎn)物等。除非本文另行限定，化學名稱的使用旨在包括所 命名化合物的所有物理形態(tài)。例如，如果未進一步限定，列舉4-碘-3-硝基苯甲酰胺旨在 籠統(tǒng)地包括游離堿以及所有藥學上可接受的鹽、多晶型物、水合物、代謝產(chǎn)物等。當旨在對 化合物的某種具體物理形態(tài)的公開或權利要求進行限制時，這將在提及該化合物的段落或 權利要求中加以明確。在一些實施方案中，本文內(nèi)容提供了治療乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少一種紫杉烷、至少一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制劑。在一些實施方案中，獲得了至少 一種治療效果，所述至少一種治療效果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩 解、病理學完全應答或病情穩(wěn)定。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝 產(chǎn)物。在一些實施方案中，該苯甲酰胺是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實 施方案中，該鉬絡合物選自順鉬、卡鉬、草酸鉬和奧沙利鉬。在一些實施方案中，該鉬絡合物 是卡鉬。在一些實施方案中，該紫杉烷是紫杉醇或多西紫杉醇。在一些實施方案中，該紫杉 烷是紫杉醇。在一些實施方案中，在至少11天的治療周期中，該方法包括下列內(nèi)容(a)在 該周期的第1天，向患者給藥約10-200mg/m2的紫杉醇；(b)在該周期的第1天，向患者給藥 約10-400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1天以及在整個周期中每周兩次，向患者給 藥約l-100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。在一些實施方案中，本文內(nèi)容提供了治療患者乳腺癌的方法，包括(a)從患者獲 取樣品；(b)測試該樣品以確定樣品的PARP表達水平；(c)確定PARP表達是否超過預定水 平，如果超過，則向患者給藥至少一種紫杉烷、至少一種鉬絡合物以及至少一種PARP抑制 劑。在一些實施方案中，如果樣品的PARP表達未超過預定水平，則該方法進一步包括選擇 不同的治療方案。在一些實施方案中，癌癥是對一種或多種激素受體呈陰性的乳腺癌。在 一些實施方案中，乳腺癌是HER2陰性乳腺癌。在一些實施方案中，癌癥對雌激素受體(ER)、 孕酮受體(PR)或HER2呈陰性。在一些實施方案中，癌癥對至少一種激素受體或HER2呈陽 性。在一些實施方案中，該紫杉烷是順鉬、卡鉬、草酸鉬或奧沙利鉬。在一些實施方案中，該 紫杉烷是紫杉醇。在一些實施方案中，該鉬絡合物是順鉬或卡鉬。在一些實施方案中，該鉬 絡合物是卡鉬。在一些實施方案中，該PARP抑制劑是苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施 方案中，該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。在一些實施方案中，該樣 品是腫瘤切片或體液。本文所述的一些實施方案提供了治療患者乳腺癌的方法，在21天治療周期內(nèi)包 括以下內(nèi)容(a)在該周期的第1天，向患者給藥約750mg/m2的紫杉醇；(b)在該周期的第 1天，向患者給藥約10-400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該周期的第1天以及此后每周兩次，向 患者給藥約l-100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺。在一些實施方案中，紫杉醇以靜脈輸 注給藥。在一些實施方案中，卡鉬以靜脈輸注給藥。在一些實施方案中，4-碘-3-硝基苯甲 酰胺以口服或靜脈輸注給藥。本文所述的一些實施方案提供了治療患者乳腺癌的方法，包括(a)建立約10天 至約30天的治療周期；(b)在該周期的1至5個單獨的日子，以靜脈輸注的方式，每天向患 者給藥約100至約2000mg/m2的紫杉醇；(c)在該周期的1至5個單獨的日子，以靜脈輸注 的方式，每天經(jīng)約10至約300分鐘，向患者給藥約10-400mg/m2的卡鉬；以及(d)在該周期 的1至10個單獨的日子，每天經(jīng)約10至約300分鐘期間，向患者給藥約lmg/kg至約8mg/ kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺。因此，本文所述的實施方案包括用至少三種化學不同的物質(zhì)治療患者，其中一種 是紫杉烷(如紫杉醇或多西紫杉醇)，一種是含鉬絡合物(如順鉬或卡鉬或順鉬)，還有一 種是PARP抑制劑(如BA或其代謝產(chǎn)物)。在一些實施方案中，一種或多種這些物質(zhì)能以各 種各樣的物理形態(tài)存在，例如游離堿、鹽(尤其是藥學上可接受的鹽)、水合物、多晶型物、 溶劑合物、代謝產(chǎn)物等。除非本文另行限定，化學名稱的使用旨在包括所命名化合物的所有物理形態(tài)。例如，如果未進一步限定，列舉4-碘-3-硝基苯甲酰胺旨在籠統(tǒng)地包括游離堿 以及所有藥學上可接受的鹽、多晶型物、水合物，及其代謝產(chǎn)物。當旨在對一種化合物的某 種具體物理形態(tài)的公開或權利要求進行限制時，這將在提及該化合物的段落或權利要求中 加以明確?！坝行Я俊被颉八帉W有效量”這些術語是指治療劑的量，其足以產(chǎn)生所需的生物、治 療和/或預防效果。其結果可以是體征、癥狀或病因的減少和/或減輕，或生物體系的任何 其他期望的變化。例如，用于治療的“有效量”是指為使疾病出現(xiàn)有臨床意義的減輕而所需 的本文所公開的硝基苯甲酰胺化合物本身的量，或含有該硝基苯甲酰胺化合物的組合物的 量。任何個案的適當有效量可由本領域一般技術人員采用常規(guī)的實驗來確定?！八帉W上可接受的，，或“藥理學上可接受的，，意為物質(zhì)不是在生物學方面或在其他 方面不希望有的物質(zhì)，即該物質(zhì)可向個體給藥而不會導致顯著的不希望有的生物學效應， 或不會以有害的方式與組合物所含的任何組分相互作用。本文所用的術語“治療”及其語法上相當?shù)拇朐~包括達到治療效益和/或預防效 益。治療效益意為所治疾病的根治或改善。例如，對于癌癥患者而言，治療效益包括所治癌 癥的根治或改善。同樣，隨著與疾病相關的一種或多種生理癥狀的根治或改善，達到了某種 治療效益，從而在患者身上觀察到病情改善，盡管實際上患者也可能仍然遭受著疾病的折 磨。為了達到預防效益起見，可給有罹患癌癥風險的患者或報告患有這類病情的一種或多 種生理癥狀的患者實施本發(fā)明的方法或給藥本發(fā)明的組合物，即使病情的診斷也許尚未做 出ο抗腫瘤劑可用于本發(fā)明的抗腫瘤劑包括但不限于抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤 抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶 抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑，以及其他顯示抗腫瘤活性的藥物，或其藥學 上可接受的鹽。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是烷化劑。本文所用的術語“烷化劑”是指在烷基 化反應中給出烷基的試劑，在烷基化反應中有機化合物的氫原子被烷基取代?？鼓[瘤烷化 劑的實例包括但不限于氮芥N-氧化物、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、白消安、二溴甘露 醇、卡波醌、塞替哌、雷莫司汀、尼莫司汀、替莫唑胺或卡莫司汀。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是抗代謝劑(antimetabolite)。本文所用的術語 “抗代謝劑”在廣義上包括擾亂正常新陳代謝的物質(zhì)和抑制電子轉移系統(tǒng)從而防止產(chǎn)生高 能量中間體的物質(zhì)，因為它們與對活體生物有機體很重要的代謝產(chǎn)物(如維生素、輔酶、氨 基酸以及糖類)在結構和功能方面具有類似性。具有抗腫瘤活性的抗代謝劑的實例包括但 不限于甲氨蝶呤、6-巰嘌呤核苷、巰嘌呤、5-氟尿嘧啶、替加氟、去氧氟尿苷、卡莫氟、阿糖 胞苷、阿糖胞苷酯(cytarabine ocfosfae)、依諾他濱、S-1、吉西他濱、氟達拉濱或培美曲塞 二鈉，優(yōu)選的是5-氟尿嘧啶、S-I、吉西他濱等。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是抗腫瘤抗生素?？鼓[瘤抗生素的實例包括但不 限于放線菌素D、多柔比星、柔紅霉素、新制癌菌素、博來霉素、培洛霉素、絲裂霉素C、阿克 拉霉素、吡柔比星、表柔比星、凈司他丁斯酯、伊達比星、西羅莫司或戊柔比星。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是植物來源的抗腫瘤劑。植物來源的抗腫瘤劑的
27實例包括但不限于長春新堿、長春堿、長春地辛、依托泊苷、索布佐生、多西紫杉醇、紫杉醇 和長春瑞濱，優(yōu)選的是多西紫杉醇和紫杉醇。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是顯示抗腫瘤活性的喜樹堿衍生物?？鼓[瘤喜樹 堿衍生物的實例包括但不限于喜樹堿、10-羥基喜樹堿、拓撲替康、伊立替康或9-氨基喜樹 堿，優(yōu)選的是喜樹堿、拓撲替康和伊立替康。而且，伊立替康在體內(nèi)代謝并顯示如同SN-38 的抗腫瘤效應。據(jù)信，喜樹堿衍生物的作用機理和活性幾乎與喜樹堿一樣(例如Nitta，等 人，Gan to KagakuRyoho,14,850-857(1987)) 在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是具有抗腫瘤活性的有機鉬化合物或鉬配位化合 物。本文中的有機鉬化合物是指能以離子形式提供鉬的含鉬化合物。優(yōu)選的有機鉬化合物 包括但不限于順鉬；順雙胺二水合鉬(II)-離子；氯(二乙基三胺)-鉬(II)氯化物；二氯 (乙二胺)-鉬(II)；雙胺(1，1-環(huán)丁二羧酸)鉬(II)(卡鉬)；順螺鉬；異丙鉬；雙胺(2-乙 基丙二酸)鉬(II)；乙二胺丙二酸鉬(II)；水合(1，2-二氨基二環(huán)己烷)硫酸鉬(II)；水 合(1，2-二氨基二環(huán)己烷)丙二酸鉬(II) ； (1，2-二氨基環(huán)己烷)丙二酸鉬(II) ； (4-羧基 鄰苯二甲酸)(1，2_ 二氨基環(huán)己烷)鉬(II) ； (1，2_ 二氨基環(huán)己烷)-(異檸檬酸)鉬(II)； (1，2_ 二氨基環(huán)己烷)草酸鉬(II)；奧馬鉬；四鉬；卡鉬、奈達鉬以及奧沙利鉬，優(yōu)選的是卡 鉬或奧沙利鉬。此外，本說明書所提及的其他抗腫瘤有機鉬化合物是已知的且可經(jīng)商業(yè)途 徑購得和/或可由本領域普通技術人員以常規(guī)技術制備。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑。本文所用的術語“酪 氨酸激酶抑制劑”是指抑制“酪氨酸激酶”的化學物質(zhì)，它將ATP的λ-磷酸轉化為蛋白中 特異性酪氨酸的羥基?？鼓[瘤酪氨酸激酶抑制劑的實例包括但不限于吉非替尼、伊馬替尼、
Sutent> Nexavar> Recentin> ABT-869 Axitinib。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是抗體或抗體中顯示抗腫瘤活性的結合部分。在 一些實施方案中，該抗腫瘤劑是單克隆抗體。其實例包括但不限于阿昔單抗、阿達木單抗、 阿侖單抗、巴利昔單抗、貝伐單抗、西妥昔單抗、達利珠單抗、艾庫組單抗(eculizumab)、依 發(fā)單抗(efalizumab)、替伊莫單抗、英夫利昔單抗、莫羅單抗-CD3、那他珠單抗、奧馬珠單 抗(omalizumab)、帕利珠單抗、帕尼單抗(panitumumab)、蘭尼單抗(ranibizumab)、吉姆單 抗奧佐米星、利妥昔單抗、托西莫單抗、曲妥單抗，或對抗原具有特異性的任何抗體片段。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是干擾素。這樣的干擾素具有抗腫瘤活性，它是 由大多數(shù)動物細胞在病毒感染后產(chǎn)生和分泌的糖蛋白。它不但具有抑制病毒生長的作用， 還具有各種免疫效應機理，包括抑制細胞(尤其是腫瘤細胞)生長和加強天然殺傷細胞活 性，從而被指定為一種細胞因子?？鼓[瘤活性干擾素的實例包括但不限于干擾素α、干擾素 a-2a、干擾素a-2b、干擾素β、干擾素Y-Ia和干擾素Y_nl。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑是生物反應調(diào)節(jié)劑。它通常是這樣一些物質(zhì)或藥 物的通稱，這些物質(zhì)或藥物調(diào)節(jié)生命有機體防御機理或生物應答，如組織細胞的存活、生長 及分化，以使它們有助于個體抵抗腫瘤、感染或其他疾病。生物反應調(diào)節(jié)劑的實例包括但不 限于云芝多糖、香菇多糖、西佐喃、溶血鏈球菌和烏苯美司。在一些實施方案中，該抗腫瘤劑包括但不限于米托蒽醌、L-天門冬酰胺酶、 丙卡巴胼、達卡巴嗪、羥基脲、噴司他丁、維甲酸、阿法賽特(alefac印t)、α-達貝泊汀 (darbepoetin alfa)、阿那曲唑、依西美坦、比卡魯胺、亮丙瑞林、氟他胺、氟維司群、哌加他尼鈉(pegaptanib octasodium)、地尼白介素(denileukin diftitox)、阿地白介素、促甲狀 腺素-α、三氧化二砷、硼替佐米(bortezomib)、卡培他濱和戈舍瑞林。上述術語“抗腫瘤烷化劑”、“抗腫瘤抗代謝劑”、“抗腫瘤抗生素”、“植物來源的抗 腫瘤劑”、“抗腫瘤鉬配位化合物”、“抗腫瘤喜樹堿衍生物”、“抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑”、“單 克隆抗體”、“干擾素”、“生物反應調(diào)節(jié)劑”以及“其他抗腫瘤藥物”均是已知的，且可經(jīng)商 業(yè)途徑購得或可由本領域技術人員以本身所知的、或眾所周知的、或常規(guī)的方法制備。吉 非替尼的制備過程在例如美國專利5，770，599中有所敘述；西妥昔單抗的制備過程在例 如TO96/40210中有所敘述；貝伐單抗的制備過程在例如WO 94/10202中有所敘述；奧沙利 鉬的制備過程在例如美國專利5，420，319和5，959，133中有所敘述；吉西他濱的制備過程 在例如美國專利5，434，254和5，223，608中有所敘述；以及喜樹堿的制備過程在美國專利 5，162，532,5, 247，089,5, 191，082,5, 200，524,5, 243，050 和 5，321，140 中有所敘述；伊立 替康的制備過程在例如美國專利4，604，463中有所敘述；拓撲替康的制備過程在例如美國 專利5，734，056中有所敘述；替莫唑胺的制備過程在例如JP-B No. 4-5029中有所敘述；以 及利妥昔單抗的制備過程在例如JP-W No. 2-503143中有所敘述。上述抗腫瘤烷化劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示=MitsubishiPharma Corp.出品的以Nitrorin為商標名稱的氮芥N-氧化物；Shionogi&Co.，Ltd.出品的以 Endoxan為商標名稱的環(huán)磷酰胺；購自Shionogi&Co.，Ltd.的以Ifomide為商標名稱的 異環(huán)磷酰胺；GlaxoSmithKline Corp.出品的以Alkeran為商標名稱的美法侖；Takeda Pharmaceutical Co. ,Ltd.出品的以Mablin為商標名稱的白消安；Kyorin Pharmaceutical Co.，Ltd.出品的以Myebrol為商標名稱的二溴甘露醇；購自Sankyo Co.，Ltd.的以 Esquinon 為商標名稱的卡波酉昆；Sumitomo Pharmaceutical Co. , Ltd.出品的以 Tespamin 為商標名稱的塞替哌；Mitsubishi Pharma Corp.出品的以Cymerin為商標名稱的雷莫司 ??；Sankyo Co.，Ltd.出品的以Nidran為商標名稱的尼莫司?。籗cheringCorp.出品的以 Temodar為商標名稱的替莫唑胺；以及GuilfordPharmaceuticals Inc.出品的以Gliadel Wafer為商標名稱的卡莫司汀。上述抗腫瘤抗代謝劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自 TakedaPharmaceutical Co.，Ltd.的以Methotrexate為商標名稱的甲氨蝶呤；購自 Aventis Corp.的以 Thioinosine 為商標名稱的 6-巰嘌呤苷；購自 TakedaPharmaceutical Co.，Ltd.的以Leukerin為商標名稱的巰嘌呤；購自KyowaHakko Kogyo Co.，Ltd.的以 5-FU為商標名稱的5-氟尿嘧啶；購自TaihoPharmaceutical Co.，Ltd.的以Futraful 為商標名稱的替加氟；購自NipponRoche Co.，Ltd.的以Furutulon為商標名稱的去氧 Μ^ Ρ ； S YamanouchiPharmaceutical Co. ， Ltd.白勺以 Yamafur 力 Itf t示g 禾爾白勺 + 貞 氟；購自NipponShinyaku Co.，Ltd.的以Cylocide為商標名稱的阿糖胞苷；購自Nippon KayakuCo. , Ltd.的以Strasid為商標名稱的阿糖胞苷酯；購自Asahi Kasei Corp.的以 Sanrabin為商標名稱的依諾他濱；購自Taiho Pharmaceutical Co.，Ltd.的以TS-1為 商標名稱的S-I ；購自Eli Lilly&Co.的以Gemzar為商標名稱的吉西他濱；購自Nippon Schering Co.，Ltd.的以Fludara為商標名稱的氟達拉濱；以及購自Eli Lilly&Co.的 以Alimta為商標名稱的培美曲塞二鈉。上述抗腫瘤抗生素可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列 實例所示購自Banyu PharmaceuticalCo.，Ltd.的以Cosmegen為商標名稱的放線菌素D ；購自Kyowa Hakko KogyoCo.，Ltd.的以adriacin為商標名稱的多柔比星；購自 Meiji Seika Kaisha Ltd.的以Daunomycin為商標名稱的柔紅霉素；購自Yamanouchi PharmaceuticalCo. ，Ltd.白勺M Neocarzinostatin ^JlSft示$禾爾白勺胃 ;_自 Nippon KayakuCo.，Ltd.的以Bleo為商標名稱的博來霉素；購自Nippon Kayaku Co, Ltd.的以 Pepro為商標名稱的培洛霉素；購自Kyowa Hakko Kogyo Co. ,Ltd.的以Mitomycin為商標
C ；^ g Yamanouchi Pharmaceutical Co. ,Ltd. ^U Aclacinon ^J 稱的阿克拉霉素；購自Nippon Kayaku Co.，Ltd.的以Pinorubicin為商標名稱的吡柔比 星；購自Pharmacia Corp.的以Pharmorubicin為商標名稱的表柔比星；購自Yamanouchi Pharmaceutical Co.，Ltd.的以Smancs為商標名稱的凈司他丁斯酯；購自Pharmacia Corp.的以Idamycin為商標名稱的伊達比星；購自Wyeth Corp.的以Rapamune為商標名 稱的西羅莫司；以及購自Anthra Pharmaceuticals Inc.的以Valstar為商標名稱的戊柔 比星。上述植物來源的抗腫瘤劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自 Shionogi&Co.，Ltd.的以 Oncovin 為商標名稱的長春新堿；購自 KyorinPharmaceutical Co. ,Ltd.的以Vinblastine為商標名稱的長春堿；購自Shionogi&Co. ,Ltd.的以Fildesin 為商標名稱的長春地辛；購自Nippon Kayaku Co.，Ltd.的以Lastet為商標名稱的依托泊 苷；購自Zenyaku Kogyo Co.，Ltd.的以Perazolin為商標名稱的索布佐生；購自Aventis Corp.的以Taxsotere為商標名稱的多西紫杉醇；購自Bristol-Myers Squibb Co.的以 Taxol為商標名稱的紫杉醇；以及購自Kyowa Hakko Kogyo Co. ,Ltd.的以Navelbine為商 標名稱的長春瑞濱。上述抗腫瘤鉬配位化合物可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自Nippon Kayaku Co.，Ltd.的以Randa為商標名稱的順鉬；購自Bristol-MyersSquibb Co.的以 Paraplatin為商標名稱的卡鉬；購自Shionogi&Co.，Ltd.的以Aqupla為商標名稱的奈達 鉬；以及購自Sanofi-Synthelabo Co.的以Eloxatin為商標名稱的奧沙利鉬。上述抗腫瘤喜樹堿衍生物可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自Yakult Honsha Co. ,Ltd.的以Campto為商標名稱的伊立替康；購自GlaxoSmithKline Corp.的以 Hycamtin為商標名稱的拓撲替康；以及購自美國Aldrich Chemical Co.，Inc.的喜樹堿。上述抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自 AstraZeneca Corp.的以Iressa為商標名稱的吉非替尼；購自Novartis AG的以Gleevec 為商標名稱的伊馬替尼；以及購自OSI Pharmaceuticals Inc.的以Tarceva為商標名稱的 埃羅替尼。上述單克隆抗體可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自Bristol-MyersSquibb Co.的以Erbitux為商標名稱的西妥昔單抗；購自Genentech，Inc.的以Avastin為商標 名稱的貝伐單抗；購自Biogen Idec Inc.的以Rituxan為商標名稱的利妥昔單抗；購自 Berlex Inc.的以Campath為商標名稱的阿倉單抗；以及購自Chugai Pharmaceutical Co.，Ltd.的以Here印tin為商標名稱的曲妥單抗。上述干擾素可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自SumitomoPharmaceutical Co. ,Ltd.的以 Sumiferon 為商標名稱的干擾素 α ；購自 TakedaPharmaceutical Co. ,Ltd. 的以Canferon-A為商標名稱的干擾素α -2a ；購自Schering-Plough Corp.的以Intron
30A 為商標名稱的干擾素 α -2b ；購自 MochidaPharmaceutical Co.，Ltd.的以 IFN. beta.為 商標名稱的干擾素β ；購自Shionogi &Co.，Ltd.的以Imunomax-γ為商標名稱的干擾 素Y-Ia ；以及購自OtsukaPharmaceutical Co.，Ltd.的以Ogamma為商標名稱的干擾素
Y -nlo上述生物反應調(diào)節(jié)劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如下列實例所示購自SankyoCo.，Ltd. 的以krestin為商標名稱的云芝多糖；購自Aventis Corp.的以Lentinan為商標名稱的香 菇多糖；購自Kaken Seiyaku Co.，Ltd.的以Sonifiran為商標名稱的西佐喃；購自Chugai Pharmaceutical Co.，Ltd.的以Picibanil為商標名稱的溶血鏈球菌；以及購自Nippon Kayaku Co.，Ltd.的以Bestatin為商標名稱的烏苯美司。上述其他抗腫瘤劑可經(jīng)商業(yè)途徑購得，如以下實例所示購自WyethLederle Japan, Ltd.的以 Novantrone 為商標名稱的米托蒽醌；購自 KyowaHakko Kogyo Co.，Ltd. 的以Leunase為商標名稱的L-天門冬酰胺酶；購自Nippon Roche Co.，Ltd.的以Natulan 為商標名稱的丙卡巴胼；購自KyowaHakko Kogyo Co.，Ltd.的以Dacarbazine為商標名 稱的達卡巴嗪；購自Bristol-Myers Squibb Co.的以Hydrea為商標名稱的羥基脲；購 自KagakuOyobi Kessei Ryoho Kenkyusho的以Coforin為商標名稱的噴司他丁 ；購自 Nippon Roche Co.，Ltd.的以Vesanoid為商標名稱的維甲酸；購自Biogen IdecInc.的 以Amevive為商標名稱的阿法賽特；購自Amgen Inc.的以Aranesp為商標名稱的達貝泊汀 α ；購自AstraZeneca Corp.的以Arimidex為商標名稱的阿那曲唑；購自Pfizer Inc.的 以Aromasin為商標名稱的依西美坦；購自AstraZeneca Corp.的以Casodex為商標名稱的 比卡魯胺；購自TakedaPharmaceutical Co.，Ltd.的以Leuplin為商標名稱的亮丙瑞林； 購自Schering-Plough Corp.的以Eulexin為商標名稱的氟他胺；購自AstraZenecaCorp. 的以Faslodex為商標名稱的氟維司群；購自Gilead Sciences, Inc.的以Macugen為商標 名稱的哌加他尼鈉；購自Ligand Pharmaceuticals Inc.的以Ontak為商標名稱的地尼白 介素-毒素連接物；購自Chiron Corp.的以Proleukin為商標名稱的阿地白介素；購自 Genzyme Corp.的以Thyrogen為商標名稱的促甲狀腺素α ；購自Cell Therapeutics, Inc. 的以Trisenox為商標名稱的三氧化二砷；購自Millennium Pharmaceuticals, Inc.的以 Velcade為商標名稱的硼替佐米；購自Hoffmann-La Roche, Ltd.的以Xeloda為商標名稱 的卡培他濱；以及購自AstraZeneca Corp.的以Zoladex為商標名稱的戈舍瑞林。本說明 書所用的術語“抗腫瘤劑”包括上述抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、植物來 源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬配位化合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、單 克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑，以及其他抗腫瘤藥物。其他抗腫瘤劑或抗癌劑可與苯并吡喃酮化合物組合使用。這類適宜的抗腫瘤劑或 抗癌劑包括但不限于13-順維甲酸、2-CdA、2-氯脫氧腺苷、5-阿扎胞苷、5-氟尿嘧啶、5-FU、 6-巰基嘌呤、6-MP、6-TG、6-硫鳥嘌呤、Abraxane、異維甲酸、放線菌素-D、多柔比星、氟尿嘧 啶、阿那格雷、Ala-Cort、阿地白介素、阿侖單抗、ALIMTA、阿利維A酸、Alkaban_AQ、美法蘭、 全反式維甲酸、α干擾素、六甲蜜胺、甲氨喋呤、氨磷汀、氨魯米特、阿那格雷、尼魯米特、阿 那曲唑、阿糖胞嘧啶(Arabinosylcytosine)、Ara-C、阿法達貝泊汀(Aranesp)、阿可達、阿 那曲唑、依西美坦、阿侖恩(Arranon)、三氧化二砷、天門冬酰胺酶、ATRA, Avastin(貝伐單 抗)、阿扎胞苷、BCG、BCNU、苯達莫司汀、貝伐單抗、貝沙羅汀、BEXXAR、比卡魯胺、BiCNU、硫酸博來霉素、博萊霉素、硼替佐米(Bortezomib)、白消安、Busulfex、C225、亞葉酸鈣、Campath、 Camptosar、喜樹堿-11、卡培他濱、Carac、卡鉬、卡莫司汀、Carmustine Wafer、比卡魯胺、 CC-5013、CCI-779、CCNU, CDDP、CeeNU、柔紅霉素、西妥昔單抗、苯丁酸氮芥、順鉬、亞葉酸 鈣、克拉屈濱、可的松、更生霉素、CPT-11、環(huán)磷酰胺、氨魯米特、阿糖胞苷、阿糖胞苷脂質(zhì)體、 Cytosar-U、Cytoxan、達卡巴嚷、Dacogen、放線菌素、α-達貝泊汀(DarbepoetinAlfa) > 達沙替尼(Dasatinib)、柔紅霉素、紅比霉素、鹽酸柔紅霉素、柔紅霉素脂質(zhì)體、枸櫞酸柔 紅霉素脂質(zhì)體、地塞米松、地西他濱、De 1 ta-Cortef,潑尼松、地尼白介素(Deni 1 eukin Diftitox)、D印oCyt 、地塞米松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸鈉、地塞米松、右雷佐生、 DHAD, DIC、醋酸地塞米松(Diodex)、多西紫杉醇、鹽酸多柔比星脂質(zhì)體、多柔比星、多柔比 星月旨質(zhì)體、Droxia 、DTIC、DTIC-Dome> Duralone、Efudex、EligarcU Ellence、Eloxatin、 Elspar、Emcyt> Epirubicin、阿法依伯汀、Erbitux> Erlotinib、歐文氏菌 L-天門冬酰胺 酶、雌莫司汀、氨磷汀、凡畢復、依托泊苷、磷酸依托泊苷、氟他胺、易維特、依西美坦、法樂 通、Faslodex、弗隆、非格司亭、氟尿苷、福達華、氟達拉濱、Fluoroplex、氟尿嘧啶、氟尿嘧啶 (乳膏)、氟甲睪酮、氟他胺、亞葉酸、FUDR、氟維司群、G-CSF、吉非替尼、吉西他濱、吉姆單抗 奧佐米星、健擇_化療藥物、格列衛(wèi)、Gliadel Wafer, GM-CSF、戈舍瑞林、粒細胞-細胞集落 刺激因子、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、Halotestin、赫賽汀、Hexadrol、克瘤靈、六甲 蜜胺、HMM、和美新、羥基脲、醋酸氫化可的松、氫化可的松、氫化可的松磷酸鈉、氫化可的松 琥珀酸鈉、磷酸氫化可的松、羥基脲、替伊莫單抗、澤瓦林(Ibritumomab Tiuxetan)、依達比 星、伊達比星、Ifex, IFN-alpha、異環(huán)磷酰胺、IL-11、IL-2、甲磺酸伊馬替尼、達卡巴嗪、干 擾素α、干擾素α _2b (聚乙二醇軛合物)、白細胞介素-2、白細胞介素-11、(干擾素(干 擾素a-2b)、Iressa、伊立替康、異維A酸(Isotretinoin)、氮雜埃博霉素(Ixab印ilone)、 氮雜埃博霉素(Ixempra)、Kidrolase (t)、氫化可的松、拉帕替尼、L-天門冬酰胺酶、LCR、來 那度胺(Lenalidomide)、來曲唑、亞葉酸(Leucovorin)、留可然、Leukine、醋酸亮丙瑞林、 長春新堿、克拉立平、脂質(zhì)體Ara-C、Liquid Pred、洛莫司汀、L-PAM、L-沙可來新、Lupron, 醋酸亮丙瑞林儲庫型緩釋注射劑、Matulane, Maxidex、氮芥、鹽酸氮芥、甲潑尼松龍、美卓 樂、梅格施、甲地孕酮、醋酸甲地孕酮、美法侖、巰嘌呤、美司鈉、Mesnex,甲氨蝶呤、甲氨蝶 呤鈉、甲潑尼松龍、Meticorten、絲裂霉素、絲裂霉素-C、米托蒽醌、M-潑尼松龍、MTC、MTX、 氮芥(Mustargen)、氮芥(Mustine)、絲裂霉素、馬利蘭、Mylocel、Mylotarg、諾維本、奈拉 濱、Neosar> Neulasta、Neumega、優(yōu)保津、Nexavar> Nilandron> MNipent、氮芥 (Nitrogen Mustard)、Novaldex、i若夕肖胃、胃曲月太、Ugl；^ 曲月太、Oncospar> Oncovin、Ontak> Onxal, Oprevelkin、Orapred、Orasone、奧沙利鉬、紫杉醇、蛋白結合紫杉醇、帕米磷酸、帕 尼單抗、Panretin、鉬爾定、潑尼松龍、PEG干擾素、培門冬酶、Peg非格司亭、聚乙二醇-干 擾素、PEG-L-天門冬酰胺酶、PEMETREXED、噴托他丁、苯丙氨酸氮芥、順鉬、順鉬-AQ、潑尼松 龍、潑尼松、Prelone、丙卡巴胼、PROCRIT, Proleukin, Prolifeprospan 20 (具有卡莫司汀 植入劑)、巰嘌呤、雷洛昔芬、來那度胺(Revlimid)、Rheumatrex、Rituxan、美羅華、干擾素 α -2a、Rubex、柔紅霉素鹽酸鹽、善得定、善得定LAR、沙格司亭、Solu-Cortef、Solu_Medrol、 索拉非尼、SPRYCEL, STI-571、鏈脲霉素、SU11248、Sunitinib, Sutent、他莫昔芬、它塞瓦 (Tarceva)、Targretin、Taxol、泰索帝(Taxotere)、Temodar、替莫唑胺、Temsirolimus、 替尼泊苷、TESPA、沙利度胺、Thalomid, TheraCys、硫鳥嘌呤、硫鳥嘌呤片劑、硫代磷酰胺
32(Thiophosphoamide)、Thioplex、塞替哌、TICE、拓撲殺、拓撲替康、托瑞米芬、Torisel、托西
Velban、Velcade、VePesid、維 A 酸、Viadur、Vidaza、長春堿、硫酸長春堿、Vincasar Pfs、長 春新堿、長春瑞濱、酒石酸長春瑞濱、VLB、VM-26、V0rin0Stat、VP-16、威猛(Vumon)、希羅達、 鏈脲霉素、澤瓦林(Zevalin)、右雷佐生、諾雷德、唑來膦酸、Zolinza、Zometa?？勾x劑抗代謝劑是干擾細胞正常代謝過程的藥物。由于癌細胞復制迅速，所以干擾細胞 代謝對癌細胞的影響將大于對宿主細胞的影響。吉西他濱(即4-氨基-l-[3，3-二氟-4-羥 基-5-(羥基甲基)四羥基呋喃-2-基]-IH-嘧啶-2-酮；EliLi Ily公司以GEMZAR 的商標 名稱銷售)是一種核苷類似物，它通過阻斷DNA合成而干擾細胞分裂，從而顯然是通過細胞 凋亡機理而導致細胞死亡。吉西他濱的劑量可根據(jù)具體的患者而調(diào)整。在成人中，當與含 鉬藥物和PARP抑制劑組合使用時，吉西他濱的劑量將在約lOOmg/m2至約5000mg/m2的范圍 內(nèi)，約100mg/m2至約2000mg/m2的范圍內(nèi)，約750mg/m2至約1500mg/m2的范圍內(nèi)，約900mg/ m2至約1400mg/m2的范圍內(nèi)，或為1250mg/m2。量綱mg/m2是指按照患者單位表面積(平方 米，m2)所用吉西他濱的劑量(毫克，mg)。吉西他濱可以靜脈(IV)輸注的方式給藥，例如在 約10至約300分鐘的時間內(nèi)，約15至約180分鐘的時間內(nèi)，約20至約60分鐘的時間內(nèi)， 或約10分鐘的時間內(nèi)給藥。在此上下文中，術語“約”表示近似的正常用量；在一些實施方 案中表示士 10%或士5%的容忍限。牽白會各合奪勿(platinum complexes)鉬絡合物是用于治療癌癥的藥物組合物，含有與至少一個有機基團絡合的至少一 個鉬中心?？ㄣf((SP-4-2)-二胺[1，1_環(huán)丁二羧酸根(2-)-0，0’]鉬)與順鉬和奧沙利鉬 一樣，是DNA烷化劑。卡鉬的劑量以癌癥化療領域技術人員已知的方法，并考慮患者的肌酐 清除率，通過計算血漿濃度曲線下的面積(AUC)而確定。在一些實施方案中，計算與抗代謝 劑(如吉西他濱)和PARP抑制劑(如4-碘-3-硝基苯甲酰胺)組合治療時所用的卡鉬劑 量，使得 AUC 為約 0. l-6mg/ml ·π η，約 l_3mg/ml ·π η，約 1. 5 至約 2. 5mg/ml ·π η，約 1. 75 至約 2. 25mg/ml · min 或約 2mg/ml · min。(例如，AUC 2 是 2mg/ml · min 的簡寫。)在一些 實施方案中，計算與紫杉烷(如紫杉醇或多西紫杉醇)和PARP抑制劑(如4-碘-3-硝基苯 甲酰胺)組合治療時所用的卡鉬劑量，使得AUC為約0. l-6mg/ml .min，約l_3mg/ml - min, 約 1. 5 至約 2. 5mg/ml · min,約 1. 75 至約 2. 25mg/ml · min 或約 2mg/ml · min。(例如，AUC 2是2mg/ml -min的簡寫。)在一些實施方案中，適宜的卡鉬劑量是約10至約400mg/m2，如 約360mg/m2。鉬絡合物如卡鉬通常是在約10至約300分鐘、約30至約180分鐘、約45至 約120分鐘或約60分鐘的時間內(nèi)以靜脈(IV)給藥。在此上下文中，術語“約”的通常意思 是“近似地”。在一些實施方案中，“約”表示士 10%或士5%。拓撲異構酶抑制劑在一些實施方案中，本發(fā)明的方法可包括向乳腺癌患者給藥有效量的PARP抑制 劑與拓撲異構酶抑制劑(如伊立替康或拓撲替康)組合。拓撲異構酶抑制劑設計為干擾拓撲異構酶(拓撲異構酶I和II)作用的藥物，所 述拓撲異構酶為在正常細胞周期中通過催化DNA鏈的磷酸二酯骨架的斷裂和再連接來控 制 DNA 結構改變的酶(http://en. wikipedia. org/wiki/Topoisomerase_inhibitor_cite_
33note-urIDorlands_Medical_Dicitionary :topoisomerase_inhibitor_l#cite_ note-urlDorlands_Medical_dDictionary :topoisomerase_inhibitor-l)。對于癌癥化學 療法治療拓撲異構酶已經(jīng)成為了流行的靶點。認為拓撲異構酶抑制劑阻斷細胞周期的連接 步驟，產(chǎn)生單鏈和雙鏈的斷裂，其破壞基因組的完整性。這些斷裂的引入隨后導致細胞凋亡 和細胞死亡。拓撲異構酶抑制劑通常根據(jù)其抑制的酶的類型分類。拓撲異構酶I，在真核生 物中最常見的拓撲異構酶類型，是托泊替康、伊立替康、勒托替康和依沙替康的靶點，這些 藥物都是市售可得的。托泊替康購自GlaxoSmithKline，商品名為Hycamtim 。伊立替康購 自Pfizer，商品名為Ccamptosar_ 。勒托替康可從Gilead Sciences Inc.以脂質(zhì)體制劑
獲得。拓撲異構酶抑制劑可以以有效劑量給藥。在一些實施方案中，用于人治療的有效劑 量為約0.01至約10mg/m2/天。該治療可以每天重復、每兩周重復、每半周重復、每周重復或 每月重復。在一些實施方案中，治療周期后可以有1天到幾天，或1周到幾周的休息期。與 PARP-I抑制劑組合，PARP-I抑制劑和拓撲異構酶抑制劑可在同一天給藥或在不同天給藥。靶向II型拓撲異構酶的化合物分為2大類拓撲異構酶毒劑，其靶向拓撲異 構酶-DNA復合物，和拓撲異構酶抑制劑，其破壞催化轉化(catalyticturnover)。拓撲 IKtopo II)毒劑包括但不限于真核II型拓撲異構酶抑制劑(拓撲II)安吖啶、依托泊 苷、磷酸依托泊苷、替尼泊苷和多柔比星。這些藥物為抗癌治療。拓撲異構酶抑制劑的實例 包括ICRF-193。這些抑制劑靶向拓撲II的N-末端ATP酶結構域，且防止拓撲II轉化。該化 合物與ATP酶結構域結合的結構已經(jīng)由Classen (Proceedings of the National Academy ofScience,2004)闡明，表明藥物以非競爭性方式結合，并鎖定(locks doWn)ATP酶結構域 的二聚作用?？寡芘３蓜┰谝恍嵤┓桨钢校景l(fā)明的方法可包括向乳腺癌患者給藥有效量PARP抑制劑 與抗血管生成劑組合。血管生成抑制劑是抑制血管生成(新血管的生長)的物質(zhì)。每種實體瘤(與白血 病相反)一旦達到一定的大小都需要產(chǎn)生血管以維持其存活。腫瘤只有當它們形成新血管 時才能生長。通常，在成人體中，血管并非在到處都會形成除非正在進行積極的組織修復。 血管生成抑制劑內(nèi)皮細胞抑制素以及相關的化學物質(zhì)能夠抑制血管的形成，從而防止癌癥 無限地發(fā)展。在患者試驗中，腫瘤失去活力并保持那種狀態(tài)，即使在內(nèi)皮細胞抑制素治療結 束之后也是如此。該治療的副作用很少，但似乎選擇性很有限。其他血管生成抑制劑如沙 利度胺以及天然的基于植物的物質(zhì)也正在積極的研究之中。已知的抑制劑包括藥物貝伐單抗(Avastin)，它與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)結 合，從而抑制其與促進血管生成的受體結合。其他抗血管生成劑包括但不限于羧基酰胺三 唑、TNF-470、CM101、干擾素-a、IL_12、血小板因子4、蘇拉明、SU5416、血小板反應蛋白、血 管生成抑制類固醇(angiostaticsteroids) +肝素、軟骨衍生的血管生成抑制因子、基質(zhì)金 屬蛋白酶抑制劑、血管它丁(angiostatin)、內(nèi)皮它丁(endostatin)、2_甲氧基雌二醇、替 可加蘭、血小板反應蛋白、催乳素、α νβ3抑制劑以及利諾胺。靶向Her-2治療在一些實施方案中，本發(fā)明的方法可包括向HER2陽性乳腺癌患者給藥有效量的 PARP抑制劑與曲妥單抗(赫賽汀)組合。
赫賽汀(Here印tin)(曲妥單抗(trastuzumab))是用于早期HER-2陽性乳腺癌的 靶向治療劑。赫賽汀被批準用于HER-2過表達、淋巴結陽性或淋巴結陰性(ER/PR-陰性或 帶有一種高風險特點)乳腺癌的輔助性治療。赫賽汀可以幾種不同的方式使用作為包括 多柔比星、環(huán)磷酰胺以及紫杉醇或多西紫杉醇的治療方案的一部分使用；與多西紫杉醇和 卡鉬一起使用；或在基于多模態(tài)蒽環(huán)類抗生素的治療之后作為單一藥物使用。赫賽汀已被 批準與紫杉醇結合用于HER-2過表達轉移性乳腺癌的第一線治療。赫賽汀已被批準作為單 一藥物用于HER-2過表達乳腺癌的治療，為接受一種或多種轉移性疾病化療方案的患者治 療。拉帕替尼或二甲苯磺酸拉帕替尼是口服活性化療藥物，用于實體瘤如乳腺癌的治 療。在開發(fā)期間它被稱為小分子GW572016?？山o符合特定指征標準的患者處方拉帕替尼作 為乳腺癌結合治療的一部分。從藥理學上講，拉帕替尼是一種打斷引起癌癥的細胞信號的 雙重酪氨酸激酶抑制劑。拉帕替尼用于為患有HER-2陽性晚期乳腺癌且在先用其他化療藥 物如蒽環(huán)類抗生素、紫杉烷衍生藥物或曲妥單抗(赫賽汀，Genentech公司產(chǎn)品)后病情進 展的婦女治療乳腺癌。激素治療在一些實施方案中，本發(fā)明的方法可包括向乳腺癌患者給藥有效量的PARP抑制 劑與激素治療組合。存在一些能附在癌細胞上并影響其增殖能力的激素。激素治療的目的是添加、阻 斷或去除激素。在乳腺癌方面，雌性激素雌激素和孕酮能促進一些乳腺癌細胞的生長。因 此，對這些患者而言，進行激素治療是為了阻斷人體內(nèi)天然產(chǎn)生的雌激素并抵抗癌癥的增 長。對于乳腺癌有兩種類型的激素治療抑制雌激素和孕酮以免其促進乳腺癌細胞生長的 藥物，以及阻止卵巢產(chǎn)生激素的藥物或手術。常見的用于治療乳腺癌的激素治療藥物包括但不限于他莫昔芬、托瑞米芬、阿那 曲唑、阿諾新、弗隆(Femara)以及諾雷德。他莫昔芬-激素拮抗劑他莫昔芬(商品名為Nolvadex)減少了一些早期乳腺癌復發(fā)的機會，并可防止癌 癥在未患病乳房的發(fā)展。他莫昔芬也減慢或停止了體內(nèi)癌細胞的增長。此外，他莫昔芬可 為罹患乳腺癌風險高的婦女提供一種選擇，以替代觀望等待或接受預防性乳房切除術。他 莫昔芬是一種被稱為選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)的藥物。在乳房里，它作為抗雌激素 起作用。雌激素促進乳腺癌細胞的增長，而他莫昔芬則阻止雌激素附著于這些細胞上的雌 激素受體。這樣一來，據(jù)信乳腺癌細胞的生長將會停止。他莫昔芬經(jīng)常與化療和其他乳腺 癌治療方法一起使用。它被認為是下列情況下的一種選項與乳房保留術或乳房切除術結 合的原位導管性癌(DCIS)的治療；為降低乳腺癌進一步發(fā)展的風險而進行的原位乳腺小 葉癌(LCIS)輔助性治療；為罹患雌激素受體陽性癌癥的男性和女性進行轉移性乳腺癌的 輔助性治療；復發(fā)性乳腺癌的治療；預防罹患乳腺癌風險高的婦女罹患乳腺癌。類固醇和非類固醇芳香酶抑制劑芳香酶抑制劑(Al)是一類阻斷芳香酶的藥物，用于為絕經(jīng)后婦女治療乳腺癌和 卵巢癌。芳香酶抑制劑降低了患激素受體陽性乳腺癌的絕經(jīng)后婦女體內(nèi)的雌激素量。隨著 體內(nèi)雌激素的減少，激素受體接收較少的生長信號，癌癥的發(fā)展能夠減緩或停止。
芳香酶抑制劑藥物包括瑞寧得(化學名稱阿那曲唑)、阿諾新(化學名稱依西 美坦)，以及弗隆(化學名稱來曲唑)。每種藥物以丸劑形式服用，每日一次，最多服用5 年。但對于患晚期(轉移性)疾病的婦女，只要此藥物作用良好就應繼續(xù)使用。芳香酶抑制劑(Al)分為兩種類型不可逆轉的類固醇抑制劑，例如與芳香酶復合 物形成永久性結合的依西美坦；以及以可逆性競爭方式抑制酶的非類固醇抑制劑(如阿那 曲唑、來曲唑)。氟維司群，又稱為ICI 182，780和1狀10(1^”，是為在抗雌激素治療后疾病進展 的絕經(jīng)后婦女治療激素受體陽性轉移性乳腺癌的藥物。它是一種無激動劑效應的雌激素受 體拮抗劑，通過同時下調(diào)和降解雌激素受體而起作用。它以每月注射一次給藥。靶向治療在一些實施方案中，本發(fā)明的方法可包括向乳腺癌患者給藥有效量的PARP抑 制劑與靶向生長因子受體抑制劑組合，該生長因子受體包括但不限于表皮生長因子受體 (EGFR)和胰島素樣生長因子I受體(IGFlR)。EGFR在人的一些類型的癌(包括但不限于肺癌和乳腺癌)細胞中過表達。高度 增殖、侵入性乳腺癌細胞往往表達異常高水平的EGFR，已知這種現(xiàn)象會控制細胞分化和遷 移。特異性EGFR酪氨酸激酶抑制劑如吉非替尼的可用性和FDA的批準，進一步提高了人們 對EGFR的興趣。抑制EGFR是重要的抗癌治療。EGFR抑制劑的實例包括但不限于西妥昔單 抗。這是靜脈注射的嵌合單克隆抗體，用于治療癌癥，包括但不限于轉移性結腸直腸癌和頭 頸癌。帕尼單抗是EGFR抑制劑的另一個實例。這是抗EGFR的人源化單克隆抗體。當單獨 用于晚期結腸癌患者時，帕尼單抗已被證明是有益的且比支持性護理效果更好，而且美國 FDA已批準這種用途。1型胰島素樣生長因子受體(IGFlR)的激活促進細胞增殖并抑制各種細胞的凋 亡。表達組成性激活IGFlR或IGF-I的轉基因小鼠罹患乳腺腫瘤，且在原發(fā)性乳腺癌中測 出IGFlR水平上升(Yanochko等人.Breast CancerResearch 2006)。業(yè)已顯示，乳腺癌中 胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)和HER2展示了重要的信號相互作用。這些受體中一種 受體的特異性抑制劑可交叉抑制其他受體的活性。靶向這兩種受體對其下游的細胞外信 號調(diào)節(jié)激酶和AKT信號通路產(chǎn)生了最大的抑制作用。因此，這樣的藥物組合可在臨床 上應用，甚至對單一藥物治療無效的腫瘤也有益，其具體實例為HER2/IGF1R抑制劑組合在 無 HER2 過表達的 MCF7 細胞中的作用(Chakraborty AK，等人，Cancer Res. 2008 Mar 1 ； 68(5) 1538-45) IGFlR抑制劑的一個實例是CP-751871。CP-751871是人單克隆抗體，它 與IGFlR選擇性地結合，從而防止IGFl與受體結合以及隨后的受體自身磷酸化。對IGFlR 自身磷酸化的抑制可導致表達IGFlR的腫瘤細胞上受體表達的下降、IGF抗凋亡作用的下 降，以及對腫瘤生長的抑制。IGFlR是在大多數(shù)腫瘤細胞上表達的受體酪氨酸激酶，并參與 細胞分裂、血管生成以及腫瘤細胞存活。PI3K/mT0R 通路磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)通路失調(diào)是人類癌癥中常見的現(xiàn)象，這種失調(diào)可以是 由于腫瘤抑制因子(染色體10上缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物)的失活，也可以是由于 PllO-α的激活突變。這些熱點突變導致酶的致癌活性，并造成抗HER2抗體曲妥單抗的治 療抗藥性。因此，該ΡΙ3Κ通路是癌癥治療的有吸引力的目標。業(yè)已證明，ΡΙ3Κ的雙重抑制劑NVP-BEZ235和下游的哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)能抑制乳腺癌細胞中下游效應子 Akt、S6核糖體蛋白和4EBP1的激活。NVP-BEZ235抑制PI3K/mT0R軸并在含有野生型和突變 型PllO-α的癌細胞中導致抗增殖和抗腫瘤活性(Violeta Serra，等人.Cancer Research 68，8022-8030，2008 年 10 月 1 日)。Hsp90 抑制劑這些藥物靶向熱休克蛋白90(hsp90)。Hsp90是一種伴侶蛋白，其正常的作用是幫 助其他蛋白質(zhì)形成和維持它們起作用時所需的形狀。伴侶蛋白通過與其他蛋白的實際接觸 而起作用。盡管有通常會造成癌細胞死亡的遺傳缺陷，Hsp90也可使癌細胞存活，甚至茁壯 成長。因此，阻斷HSP90和相關伴侶蛋白的功能可能會導致癌細胞死亡，尤其是如果將阻斷 伴侶功能與阻斷癌細胞存活的其他策略相結合。微管蛋白抑制劑微管蛋白是形成微管的蛋白，它們是細胞骨架(結構網(wǎng))的關鍵組成部分。微管 是細胞分裂(有絲分裂)、細胞結構、運輸、信號傳導和活動所必需的。鑒于它們在有絲分裂 中的主要作用，微管已成為抗癌藥物的重要目標-通常被稱為抗有絲分裂藥物、微管蛋白 抑制劑和微管靶向藥物。這些化合物與微管中的微管蛋白結合，并通過干擾細胞分裂所需 的微管形成而防止癌細胞的增殖。這種干擾阻斷了細胞周期順序，從而導致細胞凋亡。細胞凋亡抑制劑細胞凋亡抑制劑(IAP)是功能相關和結構相關的蛋白家族，最初表征于桿狀病毒 中，起著細胞凋亡內(nèi)源性抑制劑的作用。人IAP家族至少有6個成員，已在許多生物體內(nèi)發(fā) 現(xiàn)了 IAP同源物。10058-F4是誘導細胞周期停滯和細胞凋亡的c-Myc抑制劑。它是細胞滲 透性噻唑烷酮，能特異性地抑制c-Myc-Max的相互作用并防止c-Myc靶基因表達的反式激 活。10058-F4在體外和體內(nèi)均能抑制腫瘤細胞以c-Myc-依賴的方式增長。BI-6C9是tBid 抑制劑和抗凋亡劑。GNF-2屬于新的一類Bcr-abl抑制劑。GNF-2似乎與遠離活性位點的變 構位點肉豆蔻酰結合袋結合，從而穩(wěn)定激酶的失活形式。它以267nM的IC5tl值抑制Bcr-abl 的磷酸化，但并不抑制63種其他激酶，包括天然的c-Abl，并顯示對不表達Bcr-Abl的細胞 完全沒有毒性。在研究Bcr-abl活性和治療由Bcr-Abl癌蛋白引起的治療抵抗的慢性粒細 胞白血病(CML)方面，GNF-2顯示了新一類抑制劑的巨大潛力。Pifithrin-α是p53介導 的細胞凋亡和P53依賴的基因轉錄(如細胞周期蛋白G、p21/Wafl和mdm2表達)的可逆性 抑制劑。Pifithrin-α提高了基因毒性應激如UV輻射和用細胞毒性化合物治療后的細胞 存活率，所述細胞毒性化合物包括多柔比星、依托泊苷、紫杉醇和胞嘧啶-β-D-呋喃阿拉 伯糖苷。Pifithrin-α可保護小鼠免受致命的全身Y射線輻射的傷害，癌癥發(fā)病率也未上 升。PARP 抑制制在一些實施方案中，通過向需要治療的患者給藥至少一種PARP抑制劑，本發(fā)明提 供了治療對ER、ra或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法。在另一些實施方案中，通過 向需要治療的患者給藥本文所述的至少一種PARP抑制劑與至少一種抗腫瘤劑組合，本發(fā) 明提供了治療乳腺癌的方法。并非意圖受任何特定作用機理的限制，據(jù)信由于聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)活 性的調(diào)節(jié)，本文所述的化合物具有抗癌特性。這一作用機理與PARP抑制劑結合PARP并降低
37其活性的能力有關。PARP催化β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)向煙酰胺和聚-ADP-核糖 (PAR)的轉化。聚(ADP-核糖)和PARP兩者都與轉錄、細胞增值、基因穩(wěn)定性以及致癌作用 相關(Bouchard V. J.等人· Experimental Hematology, Volume 31, Number 6, 2003年6 月， pp.446-454 (9) ；Herceg Ζ. ；Wang Ζ.-Q. Mutation Research/Fundamentaland Molecular Mechanisms of Mutagenesis,Volume 477,Number 1，2001年 6 月 2 日，pp.97-110(14))。聚 (ADP-核糖)聚合酶I(PARPl)是DNA單鏈斷裂(SSBs)修復過程中的關鍵分子(de Murcia J，等人· 1997，Proc Natl Acad SciUSA 94 7303-7307 ；Schreiber V, Dantzer F, Ame JC, de Murcia G(2006)NatRev Mol Cell Biol 7 517-528 ；Wang ZQ，等人.(1997)Genes Devll 2347-2358)。由于PARPl功能受抑制而導致SSB敲除修復，引起了 DNA雙鏈斷裂(DSBs)， 后者可引起同源定向DSB修復有缺陷的癌細胞的合成致死(Bryant HE，等人(2005)Nature 434 913-917 ；Farmer H，等人(2005) Nature 434 :917_921)。BRCAl和BRCA2作為同源重組機理(HR)不可分割的組成部分而起作用(Narod SA,Foulkes WD(2004)Nat Rev Cancer 4:665-676 ；Gudmundsdottir K,Ashworth A (2006) Oncogene 25 :5864_5874)。在以基于基因轉換的同源重組(HR)為機理的雙鏈斷裂(DSB)修復過程中，BRCAl 或 BRCA2 有缺陷的細胞具有缺陷(Farmer H，等人(2005) Nature 434:917-921 ；Narod SA, Foulkes WD(2004)Nat Rev Cancer 4665-676 ；Gudmundsdottir K, Ashworth A (2006) Oncogene 25 5864-5874 ；Helleday T，等人(2008)Nat Rev Cancer 8:193-204)。乳腺癌 易感蛋白BRCAl或BRCA2的缺陷誘導了細胞對抑制聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)活性的敏 感性，從而導致細胞周期的停滯和凋亡。據(jù)報道，在以同源重組(HR)為機理的雙鏈斷裂修 復過程中，BRCAl和BRCA2的關鍵作用是這種敏感性的根本原因，而且RAD51、RAD54、DSS1、 RPAl、NBS1、ATR、ATM、CHKl、CHK2、FANCD2、FANCA 或 FANCC 的缺乏誘導 了這種敏感性(McCabe N. ^A · Deficiency in the repair of DNA damage by homologous recombinationand sensitivity to poly(ADP-ribose)polymerase inhibition, Cancerresearch 2006, vol. 66,8109-8115)。有人建議，對于BRCA1/2或其他HR通路組件有缺陷的癌癥，PARPl的 抑制可作為特殊的治療方法(Helleday T，等人.(2008) Nat Rev Cancer 8:193-204)。三 重陰性腫瘤占所有乳腺癌的15%，并經(jīng)常掩蓋以同源重組(HR)為機理的DNA雙鏈斷裂修 復過程中的缺陷，如 BRCAl 功能障礙(Rottenberg S，等人.Proc Natl Acad Sci USA. 2008 Nov4 ； 105 (44) 17079-84)。抑制PARP分子的活性包括降低這些分子的活性。術語“抑制”及其語法上的變體 如“抑制的”，并非旨在要求PARP活性的完全下降。在一些實施方案中，與抑制作用不存在 的情況相比，例如與本發(fā)明的硝基苯甲酰胺抑制劑不存在的情況相比，分子活性的下降為 至少約50 %、至少約75 %、至少約90 %，或至少約95 %。在一些實施方案中，抑制是指可觀 察到的或可測量的活性下降。在治療的一些情況下，所述抑制足以在所治療的狀況中產(chǎn)生 治療和/或預防效益。短語“不抑制”及其語法上的變體并不要求對活性完全沒有作用。例 如，它指的是這樣的情況，其中在抑制劑如本發(fā)明的硝基苯甲酰胺存在的情況下，PARP活性 的下降少于約20%、少于約10%，最好是少于約5%。聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)是DNA修復過程中很重要的酶，因此在化療耐藥性 方面有著潛在的作用。靶向PARP被認為是打斷DNA的修復過程，從而在腫瘤細胞中加強紫
38杉烷介導的、抗代謝劑介導的、拓撲異構酶抑制劑介導的、和生長因子受體抑制劑如IGFlR 抑制劑介導的，和/或鉬絡合物介導的DNA復制和/或修復。對于BRCAl和BRCA2功能受 損的乳腺癌或其他DNA修復途徑有缺陷的那些患者，PARP抑制劑也可具有高度活性。ER、 冊和HER2陰性的原發(fā)性乳腺癌顯示出PARP的上調(diào)。此乳腺癌亞型具有9倍的發(fā)生BRCA-I 突變的風險，并可能在范可尼貧血DNA修復途徑中具有進一步的缺陷。4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)是一種小分子，它作用于腫瘤細胞但對正常細胞卻 無毒性作用。據(jù)信，BA通過抑制PARP而實現(xiàn)其抗腫瘤作用。BA是非常親脂性的，它分布 迅速并廣泛地進入各種組織，包括大腦和腦脊液(CSF)。它在體外能積極地抵抗范圍廣泛 的癌細胞，包括耐藥性細胞系。本領域的技術人員將會認識到，BA可以藥學上可接受的任 何形式給藥，如以藥學上可接受的鹽、溶劑合物，或絡合物的形式給藥。此外，由于BA能在 溶液中實現(xiàn)互變異構化，BA的互變異構形式與鹽、溶劑合物或絡合物一起都包括在BA(或 相應的4-碘-3-硝基苯甲酰胺)這一術語中。在一些實施方案中，BA可與環(huán)糊精如羥丙 基- β _環(huán)糊精組合給藥。不過，本領域技術人員將會認識到，其他活性和非活性藥物也可 與BA組合使用；除非另有說明，關于BA的敘述將包括其藥學上可接受的所有形式?；讟尤橄侔┯修D移到大腦的較高傾向；已知BA能穿越血腦障礙。雖然不想受任 何特定理論的約束，但據(jù)信BA是通過抑制PARP的功能而實現(xiàn)其抗腫瘤作用的。在一些實施 方案中，BA可用于治療三重陰性轉移性乳腺腫瘤。在一些實施方案中，BA可用于治療ER、 I3R和Her2中至少有一個是陰性的乳腺腫瘤。在一些實施方案中，BA可用于治療ER、I3R和 HER2中至少有兩個是陰性的乳腺腫瘤，例如，ER陰性、PR陰性及Her_2陽性；或ER陽性、PR 陰性及Her-2陰性；或ER陰性、PR陽性及Her-2陰性。在一些實施方案中，BA可與抗腫瘤藥組合使用以治療乳腺腫瘤。在一些實施方案 中，該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗 腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物 反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、分化誘導劑，或其他顯示抗 腫瘤活性的藥物，或其藥學上可接受的鹽。在另一些實施方案中，BA可與抗代謝劑如吉西他 濱和鉬絡合物如卡鉬組合使用，以治療乳腺腫瘤。在另一些實施方案中，BA可與紫杉烷如紫 杉醇和鉬絡合物如卡鉬組合使用，以治療轉移性乳腺腫瘤。在另一些實施方案中，BA可與 抗代謝劑如吉西他濱和鉬絡合物如卡鉬組合使用，以治療乳腺腫瘤。在另一些實施方案中， BA可與紫杉烷如紫杉醇和鉬絡合物如卡鉬組合使用，以治療轉移性乳腺腫瘤。在另一些實 施方案中，BA可與抗血管生成劑結合使用以治療乳腺腫瘤。在另一些實施方案中，BA可與 拓撲異構酶抑制劑如伊立替康或拓撲替康組合使用，以治療乳腺腫瘤。在另一些實施方案 中，BA可與激素治療組合使用以治療乳腺腫瘤。在另一些實施方案中，BA可與生長因子受 體抑制劑(包括但不限于EGFR和IGFlR抑制劑)組合使用，以治療乳腺腫瘤。在一些實施 方案中，乳腺癌是三重陰性轉移性乳腺癌。在一些實施方案中，乳腺腫瘤對ER、冊或HER2 中至少一種呈陰性。在一些實施方案中，乳腺腫瘤對ERJR或HER2中至少兩種呈陰性。在 一些實施方案中，乳腺腫瘤對ERJR或HER2中至少一種呈陰性，對ERJR或HER2中至少一 種呈陽性。在一些實施方案中，乳腺腫瘤對ER、I3R和HER2中至少兩種呈陰性，例如，ER陰 性、PR陰性及Her-2陽性；或ER陽性、PR陰性及Her-2陰性；或ER陰性、PR陽性及Her-2 陰性。
39
取決于患者的年齡、身高、體重、總的健康狀況等，PARP抑制劑的劑量可以改變。 在一些實施方案中，BA的劑量范圍為約lmg/kg至約100mg/kg、約2mg/kg至約50mg/kg、 約 2mg/kg、約 4mg/kg、約 6mg/kg、約 8mg/kg、約 10mg/kg、約 12mg/kg、約 15mg/kg、約 20mg/ kg、約 25mg/kg、約 30mg/kg、約 35mg/kg、約 40mg/kg、約 50mg/kg、約 60mg/kg、約 75mg/kg、約 90mg/kg、約 1 至約 25mg/kg、約 2 至約 70mg/kg、約 4 至約 lOOmg、約 4 至約 25mg/kg、約 4 至 約20mg/kg、約50至約100mg/kg或約25至約75mg/kg。BA可以靜脈的方式給藥，例如在約 10至約300分鐘、約30至約180分鐘、約45至約120分鐘或約60分鐘(即約1小時)的 時間內(nèi)采取靜脈(IV)輸注。在一些實施方案中，BA也可以口服的方式給藥。在此上下文 中，術語“約”的通常意思是“近似地”。在一些實施方案中，“約”表示士 10%或士5%。美國專利5，464，871敘述了 BA (4_碘_3_硝基苯甲酰胺)的合成，該專利通過引 證以其整體引入本文。BA可以lOmg/mL的濃度制備并可以方便的形式如IOmL小瓶包裝。BA 代謝產(chǎn)物(BA Metabolites)本文所用的“BA”意為4-碘-3-硝基苯甲酰胺；“ΒΝ0”意為4_碘_3_亞硝基苯甲 酰胺；“ΒΝΗ0Η”意為4-碘-3-羥基氨基苯甲酰胺。本發(fā)明中有用的前體化合物結構式為(Ia) 其中R1、R2, R3, R4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、(CrC6)烷基、(C1-C6) 烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2、R3、R4和R5這5個取代基中至少兩個總是氫， 這5個取代基中至少一個總是硝基，且鄰近硝基的至少一個取代基總是碘，及其藥學上可 接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物或前藥。Ri、R2、R3、R4和R5也可 以是鹵素，如氯、氟或溴取代基。式Ia的優(yōu)選前體化合物是 4-碘-3-硝基苯甲酰胺
(BA)可用于本發(fā)明的一些代謝產(chǎn)物是式(IIa)化合物 其中(1)禮、R2, R3,禮和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，且其余 的取代基隊、R2> R3> R4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、 (C「C6)烷氧基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3> R4和R5這5個取代基中至少有兩 個取代基總是氫；或者(2)禮、R2, R3、R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基， 且R1,R2,R3^R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝 基、亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2> R3、R4或R5基團相鄰；及其藥學上可接受的鹽、 溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥。在一些實施方案中，在(2)的化 合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2> R3、R4或R5基團相鄰。在 一些實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的Ri、R2、R3、 R4或R5基團相鄰。以下組分是優(yōu)選的代謝化合物，分別由下列化學結構式代表 R6選自氫、(C「C8)烷基、(C「C8)烷氧基、異喹啉酮、噴哚、噻唑、噁唑、噁二唑、噻盼 或苯基 盡管不限于任何特定的機理，以下提供了 MS292通過硝基還原酶或谷胱甘肽綴合 機理發(fā)生代謝的實例硝基還原酶機理 BA谷胱甘肽綴合和代謝 本發(fā)明提供了前述硝基苯甲酰代謝化合物的用途，其用于治療乳腺癌，包括對ER、 I3R和/或HER2中一種或多種呈陰性的乳腺癌。已有報道，硝基苯甲酰代謝化合物對惡性癌細胞具有選擇性細胞毒性，但對非惡 性癌細胞則無毒性。參閱 Rice 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA89 7703-7707 (1992)，該文 以其整體弓I入本文。在一個實施方案中，相對于非腫瘤細胞，本發(fā)明的方法所用的硝基苯甲 酰代謝化合物對于腫瘤細胞可顯示更有選擇性的毒性。在一些實施方案中，通過向需要治療的受試者給藥至少一種PARP抑制劑，本發(fā) 明提供了治療對ER、ra或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法。在另一些實施方案 中，通過向需要治療的受試者給藥至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑，本發(fā)明提 供了治療乳腺癌的方法。在一些實施方案中，結合化療向需要這種治療的患者給藥本發(fā) 明的代謝產(chǎn)物，所述化療使用至少一種代謝產(chǎn)物(例如一種西他濱，如吉西他濱)和至 少一種鉬絡合物(例如卡鉬、順鉬等)。在另一些實施方案中，結合化療向需要這種治療 的患者給藥本發(fā)明的代謝產(chǎn)物，所述化療除了使用至少一種鉬絡合物(如卡鉬、順鉬等) 外，還使用至少一種紫杉烷(如紫杉醇或多西紫杉醇)。這類代謝產(chǎn)物的劑量范圍可在約 0. 0004至約0. 5mmol/kg (毫摩爾代謝產(chǎn)物/千克患者體重)，以摩爾計的該劑量對應于約 0. 1至約100mg/kg BA的范圍。代謝產(chǎn)物的其他有效劑量范圍為0. 0024-0. 5mmol/kg和 0. 0048-0. 25mmol/kg。這樣的劑量可以每天一次、每隔一天一次、每周兩次、每周一次、每兩 周一次、每月一次或其他適宜的方案給藥。對于代謝產(chǎn)物可采用與BA基本上一樣的給藥方 式，如口服、靜脈注射、腹腔內(nèi)注射等。紫杉烷
紫杉烷是從太平洋紫杉樹(Taxus brevifolia)的樹枝、針葉和樹皮獲得的藥物。 尤其是，通過已知的合成方法從10-脫乙?；鶟{果赤霉素衍生的紫杉醇。紫杉烷如紫杉醇 及其衍生物多西紫杉醇對各種類型的腫瘤顯示了抗腫瘤活性。紫杉烷通過使微管結構超穩(wěn) 定化而干擾正常的微管生長功能，從而破壞細胞以正常方式利用其細胞骨架的能力。尤其 是，紫杉烷與作為微管結構單元的微管蛋白的β亞單元結合。生成的紫杉烷/微管復合 物不能分解，從而導致異常的細胞功能和最終的細胞死亡。通過與名為Bcl-2(B細胞白血 病-2)的凋亡抑制蛋白的結合，紫杉醇誘導癌細胞中的程序化細胞死亡(凋亡)，從而防止 Bcl-2抑制細胞凋亡。因此已證明，通過在細胞分裂過程中打斷正常的細胞骨架排列來下調(diào) 細胞分裂，并通過抗Bcl-2機理來誘導凋亡，紫杉醇可有效地治療各種各樣的癌癥。取決于患者的身高、體重、健康狀況、腫瘤大小和發(fā)展狀態(tài)等，紫杉醇的劑量可以 改變。在一些實施方案中，紫杉醇的劑量范圍為約100至約1500mg/m2、約200至約1250mg/ m2、約500至約1000mg/m2、約700至800mg/m2或約750mg/m2紫杉醇，在最多約10小時、最 多約8小時或最多約6小時的一段時間內(nèi)給藥。在此上下文中，術語“約”表示近似的正常 用量；在一些實施方案中表示士 10%或士5%的容忍限。紫杉烷的實例包括但不限于多西紫杉醇、紫杉醇以及白蛋白結合紫杉醇 (Abraxane)。&[^iifr (combination therapy)在本發(fā)明的一些實施方案中，本發(fā)明的方法進一步包括通過向受試者給藥PARP 抑制劑(有或沒有至少一種抗腫瘤劑)以及與下述其它抗癌治療組合來治療乳腺癌，所述 其它抗癌治療包括，但不限于手術、放射療法(如X射線)、基因療法、免疫療法、DNA療法、 輔助性療法、新輔助性療法、病毒療法、RNA療法或納米療法。當組合治療進一步包括非藥物治療時，所述非藥物治療可在任何時間進行，只 要治療藥物與非藥物治療的組合的共同作用獲得有益效果。例如，在適合的病例中，當 非藥物治療暫時從給藥治療藥物中移除明顯的一段時間時，仍然獲得有益效果。綴合物 (conjugate)和其它藥理學活性藥物可以同時地、順序地或組合向患者給藥。應理解，當使 用本發(fā)明的組合時，本發(fā)明的化合物和其它藥理學活性藥物可以在相同的藥學可接受的載 體中，且因此同時給藥。它們可以在同時服用的分開的藥學載體(如常規(guī)口服劑型)中。術 語"組合"還涉及下述情況，其中以分開的劑型提供所述化合物，且順序給藥。放射治療放射療法(或放射治療)為電離輻射作為癌癥治療的一部分以控制惡性細胞的醫(yī) 學用途。放射治療可用于治愈性或輔助性癌癥治療。其用作姑息療法(其中不可能治愈， 且目標是局部疾病控制或癥狀緩解)或作為治療性治療(其中治療具有存活益處，且其可 被治愈)。放射治療用于治療惡性腫瘤，且可以用作初始治療(primary therapy)。還通常 將放射治療與手術、化學療法、激素療法或其一些混合形式組合。大多數(shù)常見的癌癥類型能 夠用放射治療以一些方式治療。精確的治療目的(治愈、輔助性、新輔助性、治療或姑息) 將取決于腫瘤的類型、位置和階段，以及患者的總體健康。放射療法通常用于癌性腫瘤。放射區(qū)域也可包括引流淋巴結，如果它們臨床上或 放射學上與腫瘤相關，或如果認為有亞臨床惡性擴散的風險。需要包括圍繞腫瘤的正常組 織的邊緣以考慮每天情況的變化和內(nèi)部腫瘤的動向。
放射療法通過破壞細胞的DNA起作用。該破壞通過光子、電子、質(zhì)子、中子或離子 束直接或間接離子化組成DNA鏈的原子而產(chǎn)生。由于水的離子化發(fā)生直接離子化，形成自 由基，特別是羥基自由基，然后其破壞DNA。在最常見的放射療法形式中，大多數(shù)放射效果是 通過自由基。由于細胞具有修復DNA損傷的機制，在兩條鏈上都破壞DNA證實是改變細胞 特性的最有效的技術。由于癌細胞通常是未分化的和干細胞樣的，所以它們復制的更多，且 與大多數(shù)健康分化的細胞相比對于修復亞致死性損傷的能力降低。DNA損傷是通過細胞分 裂傳遞的，將損傷蓄積到癌細胞中，使它們死亡或復制更慢。質(zhì)子放射治療通過發(fā)出改變動 能的質(zhì)子以精確地停止在腫瘤處。γ射線也用于治療一些類型的癌癥，包括乳腺癌。在稱作Y刀手術的方法中，多 個濃集的Y射線束直接作用于生長以殺死癌細胞。來自不同角度的光束使輻射集中作用 于生長，同時使周圍組織的損傷最小化。在一些實施方案中，Y射線被用于治療三重陰性乳癌，在實施例9中舉例說明?；虔煼ㄋ幬锘虔煼ㄋ幬飳⒒蚩截惒迦氲交颊呒毎奶囟ㄎ稽c，且能夠靶向癌細胞和非癌 細胞?；虔煼ǖ哪繕耸怯霉δ苄曰蛱鎿Q改變的基因，以激發(fā)患者對于癌癥的免疫應答， 使癌細胞對于化學療法更敏感，以將“自殺”基因置于癌細胞中，或抑制血管發(fā)生。基因可 以使用病毒、脂質(zhì)體、或其它載體或攜帶體遞送到靶細胞。這可以通過將基因-載體組合物 直接注射到患者中，或用體外感染的細胞回輸至患者中來進行。這樣的組合物適于用于本 發(fā)明中。輔助性治療(adjuvant therapy)輔助性治療是在主要治療措施后給予的治療，以提高治愈機會。輔助性治療可包 括化療、放射治療、激素治療或生物治療。由于輔助性治療的主要目的是殺死任何可能已擴散的癌細胞，所以治療通常是全 身性的(使用通過血液傳送的物質(zhì)，達到和影響全身的癌細胞)。乳腺癌的輔助性治療涉及 化療或激素治療，可以單獨或組合的方式輔助性化療是利用藥物來殺死癌細胞。研究表明，使用化療作為早期乳腺癌的輔 助性治療有助于防止原來的癌癥復發(fā)。輔助化療通常是抗癌藥物的組合，業(yè)已證明比單一 抗癌藥物更有效。輔助性激素治療去除了癌細胞中的女性激素雌激素，雌激素是一些乳腺癌細胞繁 殖時所需要的。在最經(jīng)常的情況下，輔助性激素治療是用他莫昔芬藥物治療。研究表明，當 他莫昔芬用于早期乳腺癌的輔助性治療時，它有助于防止原來的癌癥復發(fā)，也有助于防止 新的癌癥在另一個乳腺發(fā)展。卵巢是更年期前雌激素的主要來源。對于患有乳腺癌的絕經(jīng)前婦女，輔助性激素 治療可能涉及用他莫昔芬來去除腫瘤細胞的雌激素。抑制卵巢產(chǎn)生雌激素的藥物正在研究 之中。作為一種選擇，可進行手術以摘除卵巢。放射治療有時作為局部的輔助性治療使用。當放射治療在乳房切除術之前或之后 進行時，它被認為是輔助性治療。這種治療的目的是破壞已擴散到身體鄰近部位如胸壁或 淋巴結的乳腺癌細胞。當在乳房保留手術后進行放射治療時，它是主要治療的組成部分，而 不是輔助性治療。
f _|i]t生治# (neoadjuvant therapy)新輔助性治療是指在主要治療之前提供的治療。新輔助性治療的實例包括化療、 放射治療和激素治療。在治療乳腺癌過程中，新輔助性治療使得大面積乳腺癌患者可采取 乳房保留手術。溶瘤病毒療法(oncolytic viral therapy)對于癌癥的病毒療法使用一類稱為溶瘤病毒的病毒。溶瘤病毒為能夠感染和裂解 癌細胞的病毒，同時對正常細胞無害，使得它們在癌癥治療中是潛在有用的。溶瘤病毒的復 制促進腫瘤細胞的破壞，而且還在腫瘤位點產(chǎn)生劑量放大。它們還可作為抗癌基因的載體， 將抗癌基因特異地遞送到腫瘤位點。產(chǎn)生腫瘤選擇性的2種主要的方法為轉導靶向和非轉導靶向。轉導靶向涉及改 變病毒殼蛋白的特異性，因此增加靶細胞進入同時降低非靶細胞進入。非轉導靶向涉及改 變病毒的基因組，使其僅能夠在癌細胞中復制。這能夠通過轉錄靶向(其中，將對于病毒復 制必需的基因置于腫瘤特異性啟動子的控制下)，或通過衰減(attenuation)(其涉及將缺 失引入到病毒基因組，以消除在癌細胞中非必需的而在正常細胞中必需的功能)實現(xiàn)。還 有其它較不著名的方法。Chen等人(2001)在小鼠中前列腺癌上使用CV706 (前列腺-特異性腺病毒)與放 射治療組合。組合治療導致細胞死亡發(fā)生協(xié)同性增加，以及病毒釋放規(guī)模(從每次細胞裂 解中釋放的病毒顆粒的數(shù)量)明顯增加。0NYX-015已經(jīng)進行了與化學療法組合的實驗。組合治療與每個單獨治療相比提供 了更好的響應，但結果還尚未完全定論。0NYX-015已經(jīng)顯示出有希望與放射治療組合。靜脈給藥病毒劑能夠尤其有效地抵抗對于常規(guī)治療尤其困難的轉移的癌癥。然 而，血液傳播病毒可能被抗體滅活，并通過如庫弗細胞(肝中活性很高的吞噬細胞，其負責 腺病毒清除)迅速從血流中清除。逃避免疫系統(tǒng)直到腫瘤被破壞可能是溶瘤病毒治療成功 的最大障礙。至今，用于逃避免疫系統(tǒng)的技術都不能完全滿意。正是與常規(guī)癌癥治療結合， 溶瘤病毒方表現(xiàn)出最有希望，因為組合治療協(xié)同進行而沒有明顯不良作用。溶瘤病毒的特異性和適應性是指它們具有治療廣泛的癌癥(包括乳腺癌)而具有 最小的副作用的潛力。溶瘤病毒具有解決選擇性殺死癌細胞的問題的潛力。納米治療納米-大小的顆粒具有新穎的光學、電子、和結構特性，這些特性在單個分子或 大塊固體中是不可用的。當與腫瘤靶向部分如腫瘤特異性配體或單克隆抗體連接時， 這些納米顆粒能夠用于以高親和性和精確性靶向癌癥特異性受體、腫瘤抗原(生物標 記)和腫瘤脈管系統(tǒng)。用于癌癥納米治療的制劑和制備方法描述于美國專利7179484， 禾口文章 M. N. Khalid, P. Simard, D. Hoarau, A. Dragomir, J. Leroux, Long Circuiting Poly (Ethylene Glycol)Decorated LipidNanocapsules Deliver Docetaxel to Solid Tumors, Pharmaceutical Research, 23 (4), 2006 中，所有在此完整引入作為參考。RNA 治療包括但不限于siRNA、shRNA或微小RNA的RNA可用于調(diào)節(jié)基因表達和治療癌癥。 雙鏈寡核苷酸通過將2個不同的寡核苷酸序列組裝而形成，其中一條鏈的寡核苷酸序列 與第二條鏈的寡核苷酸序列互補；該雙鏈寡核苷酸通常由2個分別的寡核苷酸組裝(如，siRNA)，或由自身折疊形成雙鏈結構的單一分子組裝(如，shRNA或小發(fā)夾RNA)。本領域中 已知的這些雙鏈寡核苷酸均具有共同的特征，即雙鏈每條鏈具有不同的核苷酸序列，其中 僅有一個核苷酸序列區(qū)域(指導序列或反義序列)與靶核酸序列具有互補性，且另一條鏈 (有義序列)包含與靶核酸序列同源的核苷酸序列。微小RNAs(miRNA)為長度為約21_23個核苷酸的單鏈RNA分子，其調(diào)節(jié)基因表 達。miRNAs由從DNA轉錄的但沒有翻譯為蛋白質(zhì)的基因編碼(非編碼RNA)；而它們從稱為 pri-miRNA的初級轉錄物加工成稱為前-miRNA的短的莖-環(huán)結構，并最終成為功能miRNA。 成熟的miRNA分子與一個或多個信使RNA(mRNA)分子部分互補，且它們的主要功能是下調(diào)
基因表達。一些RNA抑制劑可用于抑制與癌癥表型相關的信使RNA (“mRNA”)的表達或翻譯。 適合本文使用的這些試劑的實例包括，但不限于，短干擾性RNA( “siRNA”)、核酶和反義寡 核苷酸。適合用于本文的RNA抑制劑的具體實例包括，但不限于Cand5、Sima-027、福米韋 生禾口 angiozyme。小分子酶抑制劑一些小分子治療藥物能夠靶向酪氨酸激酶活性或一些細胞受體(如表皮生長因 子受體(“EGFR”)或血管內(nèi)皮生長因子受體(“VEGFR”))的下游信號轉導信號。通過小分 子治療的該靶向能夠產(chǎn)生抗癌效果。適合用于本文的這些藥物的實例包括，但不限于，伊馬 替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、卡奈替尼、ZD6474、索拉非尼(BAY 43-9006)、ERB_569 及它們的類似物和衍生物?？罐D移劑癌細胞從原始腫瘤的位置擴散到身體的其他位置的過程稱為癌轉移。一些藥物具 有抗轉移特性，設計為用于抑制癌細胞擴散。適合用于本文的這些藥物的實例包括，但不 限于，馬立馬司他、貝伐單抗、曲妥單抗、利妥昔單抗、厄洛替尼、匪1-166、GRN163L、獵殺肽 (hunter-killer peptides)、金屬蛋白酶類的組織抑制劑(TIMPs)、它們的類似物、衍生物 和變體?；瘜W預防藥物一些藥物可用于預防癌癥的原始發(fā)生，或預防復發(fā)或轉移。給予這些化學預防藥 與本發(fā)明的依洛尼塞-NSAID綴合物的組合能夠用作治療和預防癌癥的復發(fā)。適合用于本 文的化學預防藥物的實例包括，但不限于，它莫西芬、雷洛昔芬、替勃龍、二膦酸鹽類、伊班 膦酸鹽、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、芳香酶抑制劑(來曲唑、阿那曲唑)、促黃體生成激素_釋放 激素激動劑、戈舍瑞林、維生素A、視黃醛、視黃酸、芬維A胺、9-順-類視黃酸(retinoid acid)、13-順-類視黃酸、全-反-視黃酸、異維A酸、維甲酸、維生素B6、維生素B12、維生 素C、維生素D、維生素E、環(huán)氧合酶抑制劑、非留抗炎藥(NSAIDs)、阿司匹林、布洛芬、塞來 考昔、多酚、多酚E、綠茶提取物、葉酸、葡萄糖二酸、干擾素-α、茴香腦二硫雜環(huán)戊二烯硫 酮(anethole dithiolethione)、鋅、吡哆醇、非那雄胺、多沙唑嗪、硒、吲哚_3_甲醛、α-二 氟甲基鳥氨酸、類胡蘿卜素、胡蘿卜素、番茄紅素、抗氧化劑、輔酶Q10、黃酮類、槲皮素、 姜黃、兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、N-乙?；腚装彼帷⑦胚?3-甲醇、六磷酸肌醇 酯、異黃酮、葡萄糖酸、迷迭香、大豆、沙巴棕和鈣。適合用于本發(fā)明的化學預防藥物的其它 實例為癌癥疫苗。這些可以通過使用經(jīng)疫苗鋪種過程而靶向的全部或部分癌細胞類型免疫患者而制備。臨床療效乳腺癌分期0期是用于描述非浸潤性乳腺癌，如DCIS和LCIS。在0期，沒有證據(jù)顯示癌細胞 或非癌異常細胞突破它們起源的那部分乳房，或擴散至或侵入鄰近的正常組織。I期描述浸潤性乳腺癌(癌細胞突破或侵入鄰近的正常組織)，其中腫瘤尺寸達2 厘米，且不涉及淋巴結。II期又分為IIA和IIB兩個亞類。IIA期描述這樣一種浸潤性乳腺癌，其中在乳 房內(nèi)未能發(fā)現(xiàn)腫瘤，但在腋淋巴結(腋下淋巴結)發(fā)現(xiàn)癌細胞，或者腫瘤尺寸為2厘米或以 下，且已擴散到腋淋巴結，或者腫瘤大于2厘米，但不大于5厘米，且沒有擴散到腋淋巴結。 IIB期描述這樣一種浸潤性乳腺癌，其中腫瘤大于2厘米，但不大于5厘米，且已擴散到腋淋 巴結，或腫瘤大于5厘米，但尚未擴散到腋淋巴結。III期又分為IIIA、IIIB和IIIC三個亞類。IIIA期描述這樣一種浸潤性乳腺癌， 其中在乳房內(nèi)未發(fā)現(xiàn)腫瘤。在腋淋巴結發(fā)現(xiàn)癌，淋巴結粘連成塊或粘在其他結構上，或癌癥 可能已經(jīng)擴散到胸骨附近的淋巴結，或腫瘤為5厘米或小于5厘米，且已擴散到腋淋巴結， 淋巴結粘連成塊或粘在其他結構上，或腫瘤大于5厘米，且已擴散到腋淋巴結，淋巴結粘連 成塊或粘在其他結構上。IIIB期描述浸潤性乳腺癌，其中的腫瘤可能是任何尺寸，且已擴散 至胸壁和/或乳房表皮，且可能已擴散到腋淋巴結，淋巴結粘連成塊或粘在其他結構上，或 癌癥可能已擴散到胸骨附近的淋巴結。IIIC期描述這樣一種浸潤性乳腺癌，其中在乳房可 能沒有患癌癥的跡象，或如果有腫瘤，它可以是任何尺寸，且可能已擴散至胸壁和/或乳房 表皮，或癌細胞已經(jīng)擴散到鎖骨上方或下方的淋巴結，以及癌癥可能已經(jīng)擴散到腋淋巴結 或胸骨附近的淋巴結。臨床療效可以本領域已知的任何方法衡量。在一些實施方案中，本文所述的臨床 治療療效可通過測量臨床受益率(CBR)來確定。臨床受益率是在治療結束后至少6個月的 某個時間，通過確定完全緩解(CR)患者的百分比，部分緩解(PR)患者的百分比和病情穩(wěn)定 (SD)患者的百分比的總和來衡量的。此公式的簡寫是CBR = CR+PR+SD彡6個月。用吉西 他濱和卡鉬組合治療的CBR是45%。因此，用抗代謝劑、鉬絡合物和PARP抑制劑的三重組 合治療(如吉西他濱、卡鉬和BA5CBRra)可與用吉西他濱和卡鉬(CBRre)的雙重組合治療相 比較。在一些實施方案中，CBR ；至少約60%。在一些實施方案中，CBR為至少約30%、 至少約40%、或至少約50%。用紫杉醇和卡鉬組合治療的CBR是45%。因此，用紫杉烷、鉬 絡合物和PARP抑制劑三重組合治療的CBR(如紫杉醇、卡鉬和BA ；CBRgcb)可與用紫杉醇和 卡鉬雙重組合治療的CBR(CBRec)相比較。在一些實施方案中，CBRra*至少約60%。在一些實施方案中，CBR為至少約30%、至少約40%、或至少約50%。在一些實施 方案中，治療效果包括乳房腫瘤尺寸的縮小、轉移的減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定， 或病理學完全應答。新輔助化療目前廣泛用于治療局部的或有可能進行手術的大面積乳腺癌。隨機試 驗已顯示新輔助化療降低了乳房切除術的需要(Powles等人，1995 ；Fisher等人，1998)，與 輔助化療具有相似的整體存活率(Fisher等人，1998)。在手術時進行的化療之后達到無 殘余腫瘤組織學證據(jù)(即病理學完全應答(pathologic complete response) (pCR))的婦女存活率顯著提高(Bonadonna等人，1998 ；Fisher等人，1998 ；Kuerer等人，1999)，且pCR 往往用來作為治療效果的早期替代指標。但是，乳腺腫瘤對新輔助化療的病理學應答尚無 標準的分級方法，業(yè)已提出許多不同的分級系統(tǒng)(Chevallier等人，1993 ；Sataloff等人， 1995 ；Fisher 等人，1997 ；Honkoop 等人，1998 ；Kuerer 等人，1998 ；Ogston 等人，2003)。大 多數(shù)但并非所有這些分級制度在PCR的定義中既包括了無任何形式的殘留疾病，又包括了 殘留原位導管性癌(DCIS)但無浸潤性疾病。在本文公開的一些實施方案中，該方法包括預先確定可用PARP調(diào)節(jié)劑治療癌癥。 一些這樣的方法包括鑒定患者的乳腺癌樣品中的PARP水平，確定該樣品中PARP的表達水 平是否高于預定值，如果PARP的表達高于預定值，則用紫杉烷(如紫杉醇)、鉬絡合物(如 卡鉬)和PARP抑制劑如BA組合治療患者。在另一些實施方案中，這些方法包括鑒定患者的 乳腺癌樣品中的PARP水平，確定該樣品中PARP的表達水平是否高于預定值，如果PARP的 表達高于預定值，則用PARP抑制劑如BA治療患者。在另一些實施方案中，該方法包括預先 確定可用PARP調(diào)節(jié)劑治療癌癥。一些這樣的方法包括鑒定患者的乳腺癌樣品中的PARP水 平，確定該樣品中PARP的表達水平是否高于預定值，且如果PARP的表達高于所述預定值， 則用抗代謝劑(如吉西他濱)、鉬絡合物(如卡鉬)和PARP抑制劑如BA組合治療患者。乳腺腫瘤在繼承了 BRCAl或BRCA2基因缺陷的婦女身上發(fā)生，因為腫瘤細胞喪失 了特定的修復受損DNA的機制。BRCAl和BRCA2對于通過同源重組而進行DNA雙鏈斷裂的修 復是重要的，而這些基因突變使得易患乳腺癌和其他癌癥。PARP參與堿基切除修復，DNA單 鏈斷裂的修復途徑。BRCAl或BRCA2功能不全使得細胞對PARP酶活性的抑制敏感，造成染色 體不穩(wěn)定、細胞周期停滯以及隨后的細胞凋亡(Jones C,Plummer ER. PARPinhibitors and cancer therapy-early results and potential applications. Br JRadiol. 2008 Oct ； 81 Spec No 1:S2_5 ；Drew Y,Calvert H. The potential of PARPinhibitors in genetic breast and ovarian cancers. Ann N Y Acad Sci.2008 Sep ；1138 136-45 ；Farmer H 等人.Targeting the DNA repair defect in BRCA mutantcells as a therapeutic strategy. Nature. 2005 Apr 14；434 (7035) :917_21)。BRCA基因有缺陷的患者其PARP水平可能上調(diào)。PARP的上調(diào)可作為有缺陷的DNA 修復途徑及未識別的BRCA樣遺傳缺陷的指標。對于PARP基因表達和受損的DNA修復尤其 是有缺陷的同源重組DNA修復的評估可作為腫瘤對PARP抑制劑的敏感性指標。因此，在一 些實施方案中，不僅可以通過確定癌癥的HR和/或HER2狀況，還可以通過測量PARP水平 而鑒定BRCA和同源重組DNA修復有缺陷的患者中癌癥的早期發(fā)作來加強乳腺癌治療。如 果PARP水平上調(diào)，就可以識別可用PARP抑制劑治療的BRCA和同源重組DNA修復有缺陷的 患者。此外，這些同源重組DNA修復有缺陷的患者是可以用PARP抑制劑治療的。在一些實施方案中，從具有疑為癌變的乳房病變或增生的患者采集樣品。雖然這 種樣品可以是任何生物組織，但在大多數(shù)情況下，樣品將是疑為乳房病變的一部分，無論是 通過微創(chuàng)活檢或治療手術的方式采集(如乳房腫瘤切除術，乳房切除術，部分或改良的乳 房切除術或根治性乳房切除術，子宮切除術，或卵巢切除術)。這種樣品也可能包括在治療 手術期間提取的一個或多個淋巴結的全部或一部分。然后就可分析PARP的表達。在一些 實施方案中，如果PARP的表達高于預定水平(例如相對于正常組織上調(diào))，那么患者就可 以用PARP抑制劑組合抗代謝劑和鉬劑治療。在另一些實施方案中，如果PARP的表達高于預定水平(例如相對于正常組織上調(diào))，那么患者就可能用PARP抑制劑治療，包括如BA的 PARP抑制劑。因此，應該理解，雖然本文所述的實施方案是針對三重陰性轉移性乳腺癌的治 療，但在一些實施方案中，乳腺癌并非必須具有這些特點，只要達到PARP上調(diào)閾值即可。在一些實施方案中，同源重組缺陷型腫瘤是通過評估PARP的表達水平而鑒定的。 如果觀察到PARP的上調(diào)，那么這種腫瘤就可以用PARP抑制劑治療。另一個實施方案是治 療同源重組缺陷型癌癥的方法，包括評估PARP的表達水平，如果觀察到過表達，那么此癌 癥就可用PARP抑制劑治療。樣品采集、制備和分離生物學樣品可從患者的多種來源收集，包括體液樣品或組織樣品。收集的樣品可 以為人正常樣品和腫瘤樣品，乳頭抽吸物(nipple aspirants) 0樣品可以經(jīng)一段時間從個 體中重復收集(如，約一天1次，一周1次，一月1次，半年1次或一年1次)。經(jīng)一段時間 從個體獲得的多種樣品可以用于驗證早期檢測的結果和/或鑒定生物學模型由于例如疾 病進展、藥物治療等產(chǎn)生的改變。樣品制備和分離可涉及任何方法，這取決于所收集的樣品的類型和/或PARP的分 析。這些方法包括(僅為示例)濃縮、稀釋、調(diào)節(jié)PH、移除高豐度的多肽(如，白蛋白、Y-球 蛋白和轉鐵蛋白等)、加入防腐劑和校準物、加入蛋白酶抑制劑、加入變性劑、使樣品脫鹽、 濃縮樣品蛋白、提取和純化脂質(zhì)。樣品制備也可以分離以非共價鍵與其它蛋白(如，載體蛋白)復合的分子。該方 法可分離那些與特定載體蛋白(如，白蛋白)結合的分子，或使用更一般性的方法，如通過 蛋白質(zhì)變性(例如使用酸)從所有載體蛋白上釋放結合的分子，然后移除載體蛋白。從樣品中移除不需要的蛋白質(zhì)(如，高豐度的、無益的或不可檢測的蛋白)可使用 高親和試劑、高分子量濾膜、超速離心和/或電滲析進行。高親和試劑包括抗體或其它試劑 (如，適體)，其選擇性結合高豐度的蛋白質(zhì)。樣品制備也可以包括離子交換色譜、金屬離子 親和色譜、凝膠過濾、疏水性色譜、色譜聚焦、吸附色譜、等電聚焦和相關的技術。分子量濾 膜包括根據(jù)大小和分子量分離分子的膜。該濾膜還可使用反滲透、納米過濾、超濾和微孔過 濾ο超速離心為從樣品中移除不需要的多肽的方法。超速離心以約15，000-60, OOOrpm 離心樣品，同時用光學系統(tǒng)監(jiān)測顆粒沉積(或沒有沉積)。電滲析為使用電性膜或半透膜的 方法，在該過程中在電勢梯度的影響下離子通過半透膜從一種溶液轉移到另一種溶液。由 于電滲析中使用的膜可具有選擇性傳遞帶有正電或負電荷的離子的能力，排斥相反電荷的 離子，使得物質(zhì)根據(jù)大小和電荷通過半透膜，因此電滲析對于濃縮、移除或分離電解質(zhì)是有 用的。本發(fā)明中的分離和純化可包括本領域中已知的任何方法，如毛細管電泳(如，在 毛細管中或芯片上)或色譜法(如，在毛細管中、柱子中或芯片上)。電泳為可用于在電場 的影響下分離離子分子的方法。電泳可在凝膠中、毛細管中、或芯片的微通道中進行。用于 電泳的凝膠的實例包括淀粉、丙烯酰胺、聚氧化乙烯、瓊脂糖或其組合。凝膠可通過下述方 法改性自交聯(lián)、加入清潔劑或變性劑、酶或抗體的固定(親和電泳)或底物的固定(酶譜 法)和引入PH梯度。用于電泳的毛細管的實例包括與電噴霧接口的毛細管。毛細管電泳(CE)優(yōu)選用于分離復合的親水性分子和高帶電的溶質(zhì)。CE技術也可應用到微流芯片上。根據(jù)所用的毛細管和緩沖液的類型，CE可進一步分為各種分離技術， 如毛細管區(qū)域電泳(CZE)、毛細管等電聚焦(CIEF)、毛細管等速電泳(cITP)和毛細管電色 譜法(CEC)。偶聯(lián)CE技術與電噴霧離子化的實施方案包括使用揮發(fā)性溶液，例如，包含揮發(fā) 性酸和/或堿和有機物(如醇或乙腈)的水性混合物。毛細管等速電泳(cITP)為其中被分析物以恒定的速度移動通過毛細管但由于它 們各自的移動性不同而被分離的技術。毛細管區(qū)域電泳(CZE)，也稱為自由溶液CE (FSCE)， 基于物質(zhì)的電泳移動性的差異(由分子上的電荷確定)和移動過程中分子遇到的摩擦力 (其通常與分子的大小成正比)。毛細管等電聚焦(CIEF)使得可較弱電離的兩性分子通過 電泳在PH梯度中分離。CEC為傳統(tǒng)高效液相色譜法(HPLC)和CE之間的雜合技術。本發(fā)明中所用的分離和純化技術包括本領域中已知的任何色譜法。色譜法可基于 一些被分析物的吸附和洗脫的差異，或被分析物在流動相和固定相之間的分配。色譜法的 不同實例包括，但不限于，液相色譜法(LC)、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)等。鑒定PARP水平聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)(poly (ADP-ribose) polymerase))又稱為聚 (ADP-核糖)合成酶和多聚ADP-核糖轉移酶。PARP催化單和聚(ADP-核糖)聚合物 的形成，它們可附著于細胞蛋白(以及其本身)從而改變這些蛋白的活性。這種酶在 轉錄調(diào)節(jié)、細胞增殖以及染色質(zhì)重塑等方面都起作用(關于綜述，參閱D.D’ amours等 人· "Poly(ADP-ribosylation reactions in theregulation of nuclear functions", Biochem. J. 342 249-268(1999))。PARP包含N端DNA結合域、自身修飾域和C端催化域且多種細胞蛋白與PARP相 互作用。N端DNA結合域包含兩個鋅指基序。轉錄增強因子-I(TEF-I)、類視黃醇X受體 α、DNA聚合酶α、Χ_射線修復交叉互補因子_1 (XRCCl)和PARP本身在此結合域內(nèi)與PARP 相互作用。自身修飾域包含BRCT基序、一種蛋白-蛋白相互作用模塊。此基序最初是在 BRCAl (乳腺癌易感蛋白1)的C端發(fā)現(xiàn)的，并存在于與DNA修復、重組和細胞周期檢查點控 制相關的各種蛋白中。含有POU同源結構域的八聚體轉錄因子-I(Oct-I)，Yin Yang(YY)I 和遍在蛋白9 (ubc9)能夠與PARP中的BRCT基序相互作用。PARP基因家族的超過15個成員存在于哺乳動物基因組中。PARP家族蛋白和聚 (ADP-核糖)糖水解酶(PARG)(其將聚(ADP-核糖)降解為ADP-核糖)，可參與到多種細 胞調(diào)節(jié)功能中，包括DNA損傷響應和轉錄調(diào)節(jié)，且與致癌作用和癌癥的生物學在許多方面 中相關。已經(jīng)鑒定了一些PARP家族蛋白。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)端錨聚合酶為端粒調(diào)節(jié)因子1 (TRF-I) 的相互作用蛋白，且參與端粒調(diào)節(jié)中。穹窿體PARP (Vault PARP) (VPARP)為穹窿體復合物 (vault complex)(其作為核_細胞質(zhì)運載體)中的成分。已經(jīng)鑒定了 PARP-2、PARP-3和 2,3,7,8-四氯二苯并-對-二噁英可誘導的PARP (TiPARP)。因此，聚(ADP-核糖)代謝可 與多種細胞調(diào)節(jié)功能相關。該基因家族中的一員為PARP-I。PARP-I基因產(chǎn)物在細胞核中以高水平表達，且依 賴于DNA損傷而活化。不受任何理論限制，認為PARP-I通過氨基末端DNA結合域結合至 DNA單鏈或雙鏈斷鏈。該結合活化了羧基末端催化域，且導致形成ADP-核糖在靶分子上的 聚合物。由于位于中間的自身修飾域，PARP-I自身為聚ADP-核糖基化的靶點。PARP-I的核糖基化導致PARP-I分子從DNA上分離。結合、核糖基化和分離的整個過程發(fā)生得非常迅 速。已經(jīng)有人提出PARP-I與DNA損傷位點的瞬時結合導致DNA修復系統(tǒng)(machinery)的 募集，或可作用于抑制重組足夠長的時間以募集修復系統(tǒng)。PARP反應的ADP-核糖源為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。NAD在細胞中從細胞 ATP庫合成，且因此PARP活性的高水平活化可迅速導致細胞能量庫的耗竭。已經(jīng)證明PARP 活性的誘導能夠導致細胞死亡，其與細胞NAD和ATP庫耗竭相關。在許多氧化應激的實例 中或炎癥過程中PARP活性被誘導。例如，缺血組織再灌注過程中，產(chǎn)生反應性一氧化氮，且 一氧化氮導致其它反應性氧物質(zhì)包括過氧化氫、過氧化硝酸鹽和羥基自由基的產(chǎn)生。后述 的這些物質(zhì)可直接損傷DNA，且產(chǎn)生的損傷誘導PARP活性的活化。通常，似乎發(fā)生PARP活 性的充分活化，使得細胞能量庫耗竭且細胞死亡。認為在炎癥過程中發(fā)生相似的機理，這時 內(nèi)皮細胞和促炎細胞合成一氧化氮，其在周圍細胞中產(chǎn)生氧化性的DNA損傷，且隨后活化 PARP活性。由PARP活化導致的細胞死亡據(jù)信是對組織損傷(由于缺血-再灌注或炎癥導 致的)程度的起主要貢獻的因素。在一些實施方案中，PARP在來自患者的樣品中的水平與預先確定的標準樣品進行 比較。來自患者的樣品通常來自疾病組織，如癌細胞或組織。標準樣品可來自相同患者或 來自不同的受試者。標準樣品通常為正常的、無病變樣品。然而，在一些實施方案中，如為 了將疾病分期或為了評估治療效果，標準樣品來自疾病組織。標準樣品可以是來自幾個不 同受試者的樣品的組合。在一些實施方案中，來自患者的PARP的水平與預定的水平相比。 該預定的水平通常來自正常樣品。如本文所述的，“預定的PARP水平”可以為用于下述用 途的PARP水平，例如，評估可被選擇用于治療的患者，評估對PARP抑制劑治療的響應，評估 對PARP抑制劑和第二種治療劑組合治療的響應，和/或診斷患者的癌癥、炎癥、疼痛和/或 相關病癥。預定的PARP水平可在患有或沒有癌癥的患者人群中測定。預定的PARP水平可 以為單個數(shù)值，相等地可用于每個患者，或預定的PARP水平可根據(jù)患者的具體的亞群而改 變。例如，男性可能具有與女性不同的預定的PARP水平；不吸煙者可能具有與吸煙者不同 的預定的PARP水平?；颊叩哪挲g、體重和身高可能影響個體的預定的PARP水平。而且，預 定的PARP水平可以是對于每個患者個別測定的水平。預定的PARP水平可以為任何適合的 標準。例如，預定的PARP水平可以來自與正在進行患者選擇評估后的人相同或不同的人。 在一個實施方案中，預定的PARP水平可以來自同一患者的以前的評估。以此方式，可以隨 時間監(jiān)測患者選擇的進程。而且，標準可以來自其他一個或多個人(例如，被選擇的人群) 的評估。在該方案中，對于選擇性正在被評估的人的選擇程度，可以與適合的其他人進行比 較，所述其他人是與所關注的人具有相似情況的人，如患有相似或相同病癥的那些人。在本發(fā)明的一些實施方案中，PARP從預定水平發(fā)生的變化為約0. 5倍、約1. 0倍、 約1. 5倍、約2. 0倍、2. 5倍、約3. 0倍、3. 5倍、約4. 0倍、約4. 5倍、約5. 0倍。在一些實施 方案中，倍數(shù)變化為約小于1、約小于5、約小于10、約小于20、約小于30、約小于40或約小 于50。在另一些實施方案中，PARP水平相對于預定水平的變化為約大于1、約大于5、約大 于10、約大于20、約大于30、約大于40，或約大于50。優(yōu)選的相對于預定水平的倍數(shù)變化為 約0. 5、約1. 0、約1. 5、約2. 0、約2. 5以及約3. 0?；颊咧蠵ARP水平的分析是尤其有價值的和有信息的，因為其使得醫(yī)師根據(jù)PARP 的上調(diào)或下調(diào)的水平更有效的選擇最好的治療，以及使用更有力的治療和治療方案。更有力的治療，或治療和治療方案的組合能夠抵消患者的較差預后和總體存活時間。具有這些 信息，醫(yī)藥從業(yè)者能夠選擇提供一些類型的治療，如用PARP抑制劑和/或更有力的療法的 治療。在檢測患者的PARP水平中，隨時間(其可以為幾天、幾周、幾個月，且在一些情況 中幾年，或其多種間隔)，患者的體液樣品(如血清或血漿)可間隔收集(時間間隔由從業(yè) 者(如醫(yī)師或臨床醫(yī)生)確定)，以測定PARP的水平，并與治療過程中的正常個體的水平 比較。例如，根據(jù)本發(fā)明，患者樣品可每月、每2個月或1、2或3個月間隔的組合進行采集 和監(jiān)測。而且，在監(jiān)測期間，隨時間獲得的患者的PARP水平可方便地彼此之間進行比較，以 及與正常對照的PARP值比較，由此提供患者自身的PARP值，作為內(nèi)部的或個人的用于長期 PARP監(jiān)測的對照。PARP的分析技術 PARP的分析可包括PARP基因表達的分析，包括DNA、RNA的分析，PARP水平的分析 和/或PARP活性的分析，包括單和多聚ADP核糖基化水平的分析。不限制本發(fā)明的范圍， 本領域內(nèi)已知的任何技術均可用于PARP的分析，且它們都屬于本發(fā)明的范圍。下面舉出這 類檢測技術的一些實例，但這些實例決不限制可用于本發(fā)明的各種各樣的檢測技術。基因表達譜基因表達分析方法包括基于多核苷酸雜交分析的方法、基于多核 苷酸測序的多核糖核苷酸方法，以及基于多核糖核苷酸和蛋白質(zhì)組學的方法。本領域內(nèi) 已知的最常用的樣品中mRNA表達的定量方法包括RNA印跡法和原位雜交法(Parker & Barnes, Methods in Molecular Biologyl06 :247_283 (1999)) ;RNA 酶保護分析法(Hod， Biotechniques 13:852-854(1992))以及基于PCR的方法，如逆轉錄聚合酶鏈式反應 (RT-PCR)技術(Weis et al.，Trends in Genetics 8 :263_264 (1992))?；蛘?，也可使用能 識別特定雙鏈包括DNA雙鏈，RNA雙鏈以及DNA-RNA雜交雙鏈或DNA-蛋白質(zhì)雙鏈的各種抗 體。代表性的基于測序的基因表達分析方法包括基因表達系列分析(SAGE)、基于大規(guī)模平 行信號測序(MPSS)的基因表達分析、比較基因組雜交技術(CGH)、染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)、 單核苷酸多態(tài)性(SNP)和SNP陣列、熒光原位雜交(FISH)、蛋白結合陣列和DNA微陣列(通 常也稱為基因或基因組芯片、DNA芯片，或基因微陣列)，以及RNA微陣列。逆轉錄酶PCR(RT-PCR)—種最靈敏、最靈活的基于定量PCR技術的基因表達分析 方法是RT-PCR，它可用于比較不同樣品群、正常組織和腫瘤組織(經(jīng)藥物治療或無藥物治 療)中的mRNA水平，以描述基因表達模式的特征，區(qū)別密切相關的mRNA，并分析RNA結構。第一步是從目標樣品分離mRNA。例如，初始原料通常可以是從人類腫瘤或腫瘤細 胞系分離的總RNA，以及分別相應的正常組織或細胞系。因此，可以從各種各樣的正常和病 變細胞和組織例如腫瘤分離RNA，包括乳房、肺、結腸、前列腺、腦、肝、腎、胰、脾、胸腺、睪丸、 卵巢、子宮等，或腫瘤細胞系。如果mRNA來源是原發(fā)性腫瘤，則可從冷凍或封存的固定組織 如石蠟包埋和固定(如福爾馬林固定)的組織樣品提取mRNA。提取mRNA的一般方法是本 領域內(nèi)眾所周知的，并已公開于標準的分子生物學教科書，包括Ausubel et al. , Current Protocols of Molecular Biology, John Wiley andSons(1997)。尤其是，可使用制造商提供的純化試劑盒、配套緩沖液和蛋白酶，根據(jù)制造商的說 明進行RNA分離。例如，可以氯化銫密度梯度離心法分離從腫瘤制備的RNA。由于RNA不能 作為PCR的模板，用RT-PCR進行基因表達分析的第一步是將RNA模板逆轉錄成cDNA，然后在PCR反應中進行其指數(shù)擴增。兩種最常用的逆轉錄酶是avilo成髓細胞白血病病毒逆轉 錄酶(AMV-RT)和莫洛尼氏鼠白血病病毒逆轉錄酶(MMLV-RT)。逆轉錄步驟通常是用特異性 引物、隨機六聚體，或寡聚dT引物引發(fā)，這取決于表達分析的情況和目標。然后，在隨后的 PCR反應中可使用衍生的cDNA作為模板。為了盡量減少誤差和不同樣品之間變化的影響，通常使用內(nèi)標進行RT-PCR。理想 的內(nèi)標是在不同組織之間以恒定的水平表達，且并不受實驗處理的影響。最常用于基因表 達模式歸一化的RNA是管家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)和β-肌動蛋白的mRNA。RT-PCR技術最新的變化是實時定量PCR，它通過雙標記熒光探針測量PCR產(chǎn)物積 累。實時定量PCR技術與定量競爭PCR和定量比較PCR都相容。在定量競爭PCR中，將每 個靶序列的內(nèi)部競爭者用于歸一化。定量比較PCR則使用樣品內(nèi)所含的歸一化基因，或 RT-PCR的管家基因。熒光顯微術本發(fā)明的一些實施方案包括用于分析PARP的熒光顯微術。熒光顯微 術使得所觀察的結構分子組成能夠用高度化學特異性的熒光標記探針如抗體加以鑒定。這 可通過使熒光團與蛋白直接綴合并引回細胞而實現(xiàn)。熒光類似物可以像天然蛋白一樣起作 用，因此可用來揭示此蛋白在細胞內(nèi)的分布和表現(xiàn)。與NMR、紅外光譜、圓二色譜及其他技術 一起，蛋白質(zhì)固有的熒光衰減及其相關的熒光各向異性觀察，碰撞猝滅和共振能量轉移都 是蛋白檢測的技術。天然熒光蛋白可作為熒光探針使用。水母熒光蛋白產(chǎn)生一種被稱為綠 色熒光蛋白(GFP)的天然熒光蛋白。這些熒光探針與靶蛋白的融合使得能通過熒光顯微鏡 實現(xiàn)可視化和通過流式細胞儀實現(xiàn)量化。僅作為舉例而已，一些探針是標記物，如熒光素及其衍生物、羧基熒光素、羅丹明 及其衍生物、阿托標簽、熒光紅、熒光橙cy3/cy5替代品、長壽命鑭系絡合物、長波長(最多 800nm)標記、DY花青素標記和藻膽蛋白。僅作為舉例而已，一些探針是輟合物，如異硫氰酸 酯輟合物、生物素蛋白輟合物以及生物素輟合物。僅作為舉例而已，一些探針是酶底物，如 熒光和顯色底物。僅作為舉例而已，一些探針是熒光染料，如FITC(綠色熒光，激發(fā)/發(fā)射 波長=506/529nm)，羅丹明B (橙色熒光，激發(fā)/發(fā)射波長=560/584nm)，以及尼羅藍A (紅 色熒光，激發(fā)/發(fā)射= 636/686nm)。熒光納米粒子可用于各種類型的免疫分析。熒光納米 粒子是以不同的材料如聚丙烯腈、聚苯乙烯等為基礎的。熒光分子轉子是微環(huán)境限制的傳 感器，當它們的旋轉受限制時會發(fā)出熒光。分子限制的幾個實例包括增加染料(聚集)、與 抗體結合，或受肌動蛋白聚合的限制。IEF(等電聚焦)是一種用于兩性電解質(zhì)(主要是蛋 白質(zhì))分離的分析工具。使用熒光IEF-標記的IEF-凝膠電泳的優(yōu)點是有可能直接觀察梯 度的形成。熒光IEF-標記也可以UV吸收法于280nm(20°C )監(jiān)測到?？稍诠腆w載體上合成肽庫，并通過使用著色受體，逐一選擇隨后染色的固體載體。 如果受體不能顯示任何顏色，它們的結合抗體可被染色。該方法不僅可用于蛋白質(zhì)受體，還 可用于篩選合成人工受體的結合配體和篩選新的金屬結合配體。也可采用HTS和FACS (熒 光激活細胞分選儀)的自動化方法。FACS機器先讓細胞通過毛細管，并通過檢測細胞的熒 光強度來分離細胞。免疫分析本發(fā)明的一些實施方案包括分析PARP的免疫分析。在免疫印跡如電 泳分離蛋白的蛋白質(zhì)印跡試驗中，單個蛋白可通過其抗體來鑒定。免疫分析可以是競爭 性結合免疫分析，其中分析物與標記抗原競爭一些有限的抗體分子(如放射免疫分析法，EMIT)。免疫分析也可以是非競爭性的，其中抗體過量存在并帶標記。隨著分析物抗原復 合物的增加，標記抗體-抗原復合物的量也可能增加(如ELISA)。如果它們是通過給實驗 動物注射抗原的方式產(chǎn)生的，或是單克隆抗體，如果它們是通過細胞融合和細胞培養(yǎng)技術 產(chǎn)生的，抗體可以是多克隆抗體。在免疫分析中，抗體可作為對分析物抗原具有特異性的試 劑。不限制本發(fā)明的范圍和內(nèi)容，一些類型的免疫分析是，僅作為舉例而已，RIA(放射 免疫分析)、酶免疫分析如ELISA (酶聯(lián)免疫吸附分析)、EMIT (酶增強免疫分析)、微粒子酶 免疫分析(MEIA)、LIA (發(fā)光免疫分析)以及FIA (熒光免疫分析)。這些技術可用于檢測 鼻腔樣品中的生物物質(zhì)。該抗體既可作為一抗也可作為二抗。它們可用放射性同位素(如 1251)、熒光染料(如FITC)或可催化熒光反應或發(fā)光反應的酶(如HRP或AP)來標記。生物素或維生素H是一種輔酶，它繼承了對于抗生物素蛋白和鏈霉抗生物素蛋白 的特異性親和力。這種相互作用使得生物素化肽成為各種生物技術分析中定性和定量測試 的有用工具。為了通過最大限度地減小立體位阻而改善生物素/鏈霉抗生物素蛋白識別， 可能有必要擴大生物素和肽本身之間的距離。這可以通過在生物素和肽之間耦合間隔分子 (如6-硝基己酸)來實現(xiàn)。生物素化蛋白的生物素定量分析提供了靈敏的熒光分析，以準確地確定蛋白上生 物素標記的數(shù)目。生物素化肽廣泛地用于各種各樣的生物醫(yī)學篩選系統(tǒng)，這些系統(tǒng)要求將 相互作用的物質(zhì)中至少一種固定在鏈霉抗生物素蛋白涂覆的珠、膜、玻片或微粒滴定板上。 這項分析是基于用猝滅染料標記的配體從某種試劑的生物素結合位點的位移。為了暴露多 標記蛋白中空間受限制和無法接觸該試劑的任何生物素基團，該蛋白質(zhì)可用蛋白酶處理以 消化該蛋白質(zhì)。EMIT是競爭性結合免疫分析，避免了通常的分離步驟。這是一種其中的蛋白是酶 標記的免疫分析，且酶-蛋白-抗體復合物是酶失活的，使得能夠實現(xiàn)無標記蛋白的定量。 本發(fā)明的一些實施方案包括分析PARP的ELISA。ELISA是基于附在固體載體上的選擇性抗 體，并與酶反應組合以產(chǎn)生能夠檢測低水平蛋白質(zhì)的系統(tǒng)。它又被稱為酶免疫分析或EIA。 蛋白是由抗該蛋白的抗體檢測的，換言之，它是該抗體的抗原。單克隆抗體是經(jīng)常使用的。這種測試可能需要將抗體固定在固體表面如試管的內(nèi)表面上，并需要制備與酶偶 聯(lián)的同樣抗體。這種酶可以是一種能從無色底物產(chǎn)生有色產(chǎn)品的酶(例如半乳糖苷 酶)。這種測試，例如，可通過用待檢測的抗原溶液(如蛋白質(zhì))充填試管而實現(xiàn)。任何存 在的抗原分子均可與固定的抗體分子結合?？蓪⒖贵w-酶輟合物加入反應混合物。輟合物 的抗體部分與先前結合的任何抗原分子結合，產(chǎn)生抗體-抗原-抗體“三明治”。洗去任何 未結合的輟合物后，可加入底物溶液。經(jīng)過一定的時間，終止反應(例如通過加入IN NaOH) 并用分光光度計測量所形成的有色產(chǎn)物的濃度。顏色的強度與所結合抗原的濃度成正比。ELISA法也可用來測量抗體濃度，在這種情況下，培養(yǎng)孔要用相應的抗原涂覆。可 加入含有抗體的溶液(如血清)。在它有足夠時間與固定的抗原結合之后，可加入由所測試 抗體的抗體組成的酶-輟合的抗免疫球蛋白。洗去未反應的試劑之后，可加入底物。所產(chǎn) 生的顏色強度與結合的酶標記抗體的數(shù)量(從而與所檢測抗體的濃度)成正比。本發(fā)明的一些實施方案包括放射性免疫分析以分析PARP。放射性同位素可以用 來研究小量化合物的體內(nèi)代謝、分布以及結合。使用體內(nèi)放射性同位素1H、12C、31P、32S以及1271，如3H、14C、32P、35S以及125L在96孔板上的受體固定方法中，用抗體或化學方法將受體 固定在每個孔中，并在每孔中加入放射性標記的配體以誘導結合?？上慈ノ唇Y合的配體，然 后可通過結合配體或洗出配體的放射性定量分析來確定標準。然后，加入篩選目標化合物 可誘導與受體的競爭性結合反應。如果與標準放射性配體相比，該化合物顯示出與受體的 較高親和力，那么大多數(shù)放射性配體都不會與受體結合并可以留在溶液中。因此，通過分析 所結合放射性配體(或洗去的配體)的量，即可顯示受試化合物與受體的親和力。當受體無法固定在96孔板上或當配體結合需要在溶液相中進行時，可能需要采 用濾膜法。換言之，在溶液中發(fā)生配體_受體結合反應之后，如果反應溶液是通過硝酸纖維 素濾紙過濾的，那么小分子包括配體可能會通過它，只有蛋白受體可能會留在紙上。只有與 受體牢固結合的配體可能留在濾紙上，所添加化合物的相對親和力可由標準放射性配體的 定量分析確定。本發(fā)明的一些實施方案包括用于分析PARP的熒光免疫分析?；跓晒獾拿庖邔W 方法是以高度特異性受體結合位點上的標記配體與未標記配體之間的競爭性結合為基礎 的。熒光技術可用于以熒光壽命隨分析物濃度變化的變化為基礎的免疫分析。這種技術可 與短壽命染料如異硫氰酸熒光素(FITC)(供體)配合，其熒光可被轉移至曙紅(受體)的 能量猝滅。很多光致發(fā)光化合物都可使用，如花菁、噁嗪、噻嗪、嚇啉、酞菁、熒光紅外發(fā)光多 核芳烴、藻膽蛋白、方酸類化合物和有機金屬絡合物、烴類以及偶氮染料?；跓晒獾拿庖邔W方法是，例如，異相的或均相的。異相免疫分析包括結合的與游 離的標記待分析物之間的物理分離。待分析物或抗體可附在固體表面上。這項技術可以是 競爭性的(為了更高的選擇性)或非競爭性的(為了更高的靈敏度)。檢測可以是直接的 (只用一種抗體)或間接的(使用第二種抗體)。均相免疫分析不包括物理分離。雙抗體 熒光團標記的抗原參加與同時指向抗原和熒光團的抗體的平衡反應。標記抗原和未標記抗 原可與有限的抗_抗原抗體競爭?！晒饷庖叻治龇椒òê唵蔚臒晒鈽擞浄?、熒光共振能量轉移(FRET)、時間 分辨熒光(TRF)以及掃描探針顯微鏡(SPM)。通過使用相關的熒光以及作為各種體內(nèi)生理 變化如PH值、離子濃度和電壓的熒光指示劑，簡單的熒光標記法可用于測定受體_配體結 合和酶活性。TRF是一種在其他熒光分子的發(fā)射結束之后選擇性測量鑭系熒光的方法。TRF 可與FRET —起使用，鑭系可成為供體或受體。在掃描探針顯微鏡中，例如在捕獲階段，至少 有一種單克隆抗體附在固相表面，且掃描探針顯微鏡是用于檢測可能存在于固相表面的抗 原/抗體復合物。掃描隧道顯微鏡的使用消除了對通常用于許多免疫分析系統(tǒng)檢測抗原/ 抗體復合物的標記的需要。蛋白質(zhì)鑒定方法僅作為舉例而已，蛋白質(zhì)鑒定方法包括通過Edman降解的低通 量測序、質(zhì)譜技術、肽質(zhì)量指紋圖譜、重新測序，以及基于抗體的分析。該蛋白定量分析方法 包括熒光染料凝膠染色、標記或化學修飾方法(即同位素編碼親和標簽(ICATS)、結合分數(shù) 對角線色譜(C0FRADIC))。純化蛋白也可用于三維晶體結構的確定，此法可用于模擬分子間 的相互作用。確定三維晶體結構的常用方法包括χ-射線晶體學和核磁共振波譜學的方法。 蛋白質(zhì)的三維結構的特征性象征可以用質(zhì)譜探測。通過用化學交聯(lián)法來偶聯(lián)蛋白質(zhì)中空間 上接近但序列上相距遙遠的那些部分，可以推斷出關于整體結構的信息。通過追蹤酰胺質(zhì) 子與溶劑中氘的交換，有可能探測溶劑接近蛋白質(zhì)各個部分的可能性。
在一個實施方案中，熒光激活細胞分選(FACS)是用來鑒定PARP表達細胞。FACS 是一種特殊類型的流式細胞儀。基于每個細胞特定的光散射和熒光特性，它提供了將生物 細胞異相混合物分選進兩個或多個容器的方法，每次分選一個細胞。它提供了定量記錄發(fā) 自單個細胞的熒光信號以及物理分離特別感興趣細胞的方法。在另一個實施方案中，使用 基于微流體的設備來評估PARP的表達。質(zhì)譜也可以用來表征患者樣品的PARP。全蛋白離子化的兩種方法是電噴霧離子化 (ESI)和基質(zhì)輔助激光解吸/離子化(MALDI)。首先，以上述兩種方法中任一種方法將完整 的蛋白離子化，然后引入質(zhì)量分析儀。其次，用試劑如胰蛋白酶或胃蛋白酶將蛋白酶消化為 較小的肽。其他蛋白分解消化劑也可使用。然后，將收集的肽產(chǎn)物引入質(zhì)量分析器。這種 方法通常稱為“自下而上”的蛋白分析方式。全蛋白質(zhì)譜分析是用飛行時間(TOF)質(zhì)譜或傅立葉變換離子回旋共振(FT-ICR) 質(zhì)譜進行的。用于肽質(zhì)譜分析的儀器是四極桿離子阱質(zhì)譜。多級四極桿-飛行時間和MALDI 飛行時間儀器也可用于這種應用。有兩種方法用于分離蛋白質(zhì)或其酶消化的肽產(chǎn)物。第一種方法分離全蛋白，被稱 為雙向凝膠電泳。第二種方法高效液相色譜用于分離酶消化后的肽產(chǎn)物。在一些情況下， 可能有必要將這兩種技術結合。質(zhì)譜儀可以兩種方式用于鑒別蛋白。肽質(zhì)譜使用蛋白水解肽的質(zhì)量作為輸入以搜 索預測質(zhì)量數(shù)據(jù)庫，該水解肽是因一系列已知蛋白質(zhì)的消化而產(chǎn)生的。如果該參考系列中 某個蛋白序列能使相當多的預測質(zhì)量與實驗值匹配，則有一些證據(jù)表明這種蛋白質(zhì)存在于 原始樣品中。串聯(lián)質(zhì)譜也是一種鑒定蛋白質(zhì)的方法。碰撞誘導解離在大部分應用中用于從特定 的肽離子產(chǎn)生一組片段。該分裂過程主要產(chǎn)生沿肽鍵斷裂的裂解產(chǎn)品。業(yè)已敘述了許多鑒定肽和蛋白質(zhì)的不同算法，用于串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)、肽從新測序 和基于序列標簽的搜索。一個綜合了全面數(shù)據(jù)分析特點的選項是PEAKS。現(xiàn)有的其他質(zhì)譜 分析軟件包括肽片段指紋SEQUEST、Mascot、OMSSA和X ！ Tandem)。蛋白質(zhì)也可用質(zhì)譜來定量分析。通常，將穩(wěn)定的(如非放射性)較重的碳(C13) 或氮(N15)同位素加入一個樣品，而另一個樣品則用較輕的同位素(如C12和W4)標記。 在分析前混合這兩個樣品。由于其質(zhì)量差異，可以區(qū)分從不同樣品衍生的肽。其峰值強度 比對應于肽(和蛋白質(zhì))的相對豐度比。同位素標記的方法是SILAC(在細胞培養(yǎng)過程中 利用氨基酸進行穩(wěn)定同位素標記)、胰蛋白酶催化018標記、ICAT(同位素編碼親和標記)、 ITRAQ(用于相對和絕對定量的同位素標記)?！鞍攵俊辟|(zhì)譜可以在樣品未標記的情況下進 行。通常，這是用MALDI分析(用線性模式)進行的。各個分子(通常是蛋白質(zhì))的峰強 度，或峰面積，與樣品中蛋白質(zhì)的量相關。但是，各個信號取決于蛋白質(zhì)的主要結構、樣品的 復雜性，以及儀器的設置。N-端測序有助于未知蛋白的鑒別，確認重組蛋白的同一性和保真性(閱讀框、翻 譯出發(fā)點等)，有助于NMR和晶體結構數(shù)據(jù)的解釋，顯示蛋白之間的同一性程度，或為產(chǎn)生 抗體的合成肽的設計提供數(shù)據(jù)，等等。N-端測序利用埃德曼降解化學，從蛋白質(zhì)的N-端依 次去除氨基酸殘基，并通過反相HPLC鑒定它們。靈敏度可達幾百飛摩爾的水平，經(jīng)常可從 幾十皮摩爾的初始原料獲得長序列讀長(20-40殘基)。純蛋白(> 90% )可產(chǎn)生很容易解釋的數(shù)據(jù)，但不夠純的蛋白混合物也可提供有用的數(shù)據(jù)，這取決于嚴格的數(shù)據(jù)解釋。N端 修飾(特別是乙酰化)的蛋白不能直接測序，因為游離伯氨基的缺乏妨礙了埃德曼化學方 法。然而，封閉蛋白的有限水解(例如用溴化氰水解)可能會讓氨基酸混合物在每個儀器 周期內(nèi)產(chǎn)生，對這種情況可進行數(shù)據(jù)庫分析以解釋有意義的序列信息。C-端測序是翻譯后 修飾，影響蛋白質(zhì)的結構和活性。各種各樣的病情可與受損的蛋白加工相聯(lián)系，C-端測序 提供了研究蛋白質(zhì)結構和加工機理的另一種手段。
實施例實施例1 JDC乳腺癌中的PARPl表汰先前研究已經(jīng)顯示，與正常的健康對照組織相比，在卵巢癌、肝細胞癌和直腸腫瘤 中以及來自白血病患者的人外周血淋巴細胞中PARP活性提高(Yalcintepe L，等人Braz J Med Biol Res 2005 ；38 361-5. Singh N. ^A Cancer Lett 1991 ；58 131-5 ；Nomura F, et al.J Gastroenterol Hepatol 2000;15:529-35)。本發(fā)明使用基因表達數(shù)據(jù)庫來檢驗 2000多種原發(fā)惡性組織和正常人組織中的PARPl基因調(diào)節(jié)作用。盡管PARPl的表達和活性 在大部分正常人組織和器官中極低且均一，然而它在所選擇的腫瘤細胞和原發(fā)人惡性腫瘤 中上調(diào)，在乳腺癌、卵巢癌、肺癌和子宮癌中存在最明顯的差異(圖1)。組織樣品將樣品作為正常手術操作的一部分收獲并在切除后30分鐘內(nèi)速凍。對進行分析 的樣品進行內(nèi)部病理學審查和確認。以相鄰組織制備的蘇木精和伊紅(H&E)染色的載玻 片用來確認和劃分診斷類別并用來評價腫瘤細胞構成。使用免疫組化和熒光原位雜交確 定ER、冊和HER2的表達。這些結果以及附屬病理學和臨床數(shù)據(jù)用樣品清單和管理數(shù)據(jù)庫 (Ascenta，BioExpressdatabases ；GeneLogic, Inc.，Gaithersburg, MD)注釋。RNA提取和表達情況RNA提取和雜交如Hansel等人所述進行。使用陣列高通量應用(Ascenta， Bioexpress Gene Logic，Gaithersburg MD and Affymetrix, Santa Clara，CA)評價陣列 數(shù)據(jù)質(zhì)量，其中所述的陣列高通量應用將數(shù)據(jù)針對包括5’ /3’ GAPDH比、信/噪比及背景以 及其他額外量度的多種客觀標準進行評估。用Affymetrix微陣列分析軟件包5. O版、Data Mining Tool 2. O 和微陣列數(shù)據(jù)庫軟件(Affymetrix, Santa Clara, CA)進行 GeneChip 分 析。將GeneChip上所代表的所有基因全部歸一化并按信號強度100換算。微陣列數(shù)據(jù)分析使用病理學正常組織樣品來確定PARPl mRNA的基線表達。計算每個預測值的平 均值和90%、95%、99%和99.9%置信上限(UCL)。因為我們評估了一組正常的樣品之外 的各個樣品處在基線分布范圍內(nèi)的可能性，故而選擇平均值的預測區(qū)間而非置信區(qū)間來估 計未來各個量值的期望范圍。預測區(qū)間由公式定義，其中歹是正常乳腺樣品 的平均值；S是標準差，η是樣品數(shù)，并且A是具有η-1個自由度的Student’ s t_分布的第 100(1-(ρ/2))個百分位數(shù)。使用病理學正常組織樣品來確定PARPl的基線表達。樣品根據(jù)特征劃分成多個亞 類，所述特征包括腫瘤階段、吸煙狀況、CA125狀況或年齡。根據(jù)90%、95%、99%或99.9% UCL分析評價每份腫瘤樣品。使用針對Windows的SAS v8. 2 (www. sas. com)進行分析。
60
與PARPl相比，計算11個探針集合(probe sets)的Pearson相關性。相關性以 194份樣品的完整集合為基礎。Pearson積差相關性由下式定義 = Σ - g) (yt - i/) 其中ι是PARPl探針集合的平均值并且？是PARPl與之相關的探針集合的平均值。
統(tǒng)計學顯著性由公式(二 — 2IZl確定，其中r是相關性且η是樣品數(shù)。認為所得值具有η-2 丨(1 -rz)‘
個自由度的t分布。 多重逆轉錄酶-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)使用每份樣品25ng總RNA如前所述(Khan等人，2007)進行多重RT-PCR。用于本 研究的多重測定法設計用于檢測來自福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品或來自冷凍組織 的 RNA。使用 RiboGreen RNA 定量試劑盒(Invitrogen)以 Wallac Victo r2 1420 多標記 物計數(shù)器(multilable counter)確定RNA的濃度。在Agilent Bioanalyzer生物分析儀 上按照Agilent 2100BioanalyZer的說明書分析來自每份樣品的RNA樣品。逆轉錄(RT) 反應如前所述用 Applied Biosystems 9700 實施。用 Applied Biosystems 9700 對每種 cDNA實施PCR反應。RT反應以卡那霉素RNA摻合以監(jiān)測RT和PCR反應的效率。所用對照 包括陽性對照RNA、無模板對照和無逆轉錄酶對照。PCR反應通過毛細管電泳分析。將熒光 標記的PCR反應產(chǎn)物稀釋、與GenomeLab規(guī)格標準物-400 (Beckman-Coulter)合并、變性并 用CEQ 8800基因分析系統(tǒng)分析。將每種靶基因的表達相對于同一反應內(nèi)的葡糖醛酸 糖苷酶(⑶SB)的表達報道為對每種樣品3次獨立評估的平均值和標準差。與正常乳腺組織相比，患有浸潤性導管癌(IDC)的乳腺癌患者平均PARPl表達增 加1. 8倍(P < . 00001)。重要的是，PARPl過表達最頻繁地出現(xiàn)于ERJR或HER2陰性的乳 腺癌組織中(表1)。表1 IDC乳腺組織中的PARPl過表達 PARPl過表達定義為超過正常乳腺組織分布中95%置信上限的樣品實施例2 :4-it -3-硝某苯甲酰胺(BA)與化學療法的鉬合細胞培養(yǎng)從ATCC獲得乳腺癌細胞并在含有10%胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基中 培養(yǎng)。細胞以每個PlOO細胞培養(yǎng)皿IO5個細胞或以每個P60細胞培養(yǎng)皿IO4個細胞在不同 濃度的化合物或DMSO對照存在條件下鋪種。在處理后，使用Coulter計數(shù)器并通過用
亞甲藍染色測量貼壁細胞數(shù)。亞甲藍溶于甲醇和水的50%-50%混合物。將細胞鋪種于 24孔或96孔板中并如計劃那樣處理，抽吸培養(yǎng)基，細胞用PBS洗滌，在甲醇中固定5-10分 鐘，抽吸甲醇并使板完全干燥。添加亞甲藍溶液至孔中并孵育板5分鐘。移除染色液并用 dH20洗滌板直至洗液不再呈藍色。在板完全干燥后，將少量IN HCl添加至每個孔以提取亞 甲藍。使用在600nm的OD讀數(shù)和校準曲線來確定細胞數(shù)?；衔锘衔镏苯佑筛煞廴芙獬蒁MSO中的IOmM儲備液用于每個獨立實驗。用溶媒 (DMSO)的匹配體積/濃度實施對照實驗；在這些對照中，細胞的生長或細胞周期分布未顯
示變化。PI排斥、細胞周期和TUNEL實驗在添加藥物和孵育后，細胞經(jīng)胰酶消化并取等份試樣的樣品用于計數(shù)和PI (碘化 丙啶)排斥實驗。將一部分細胞離心并重懸于含有5 μ g/ml PI的0. 5ml冰冷PBS中。將 其余部分的細胞固定于冰冷70%乙醇中并在冰箱中貯存過夜。對于細胞周期分析，細胞以 碘化丙啶(PI)通過標準方法染色。通過使用BD LSRII FACS的流式細胞儀確定細胞DNA 含量并且使用ModFit軟件確定處在Gl、S或G2/M的細胞百分數(shù)。用“熒光素原位細胞死亡檢測試劑盒”(Roche Diagnostics Corporation, Roche Applied Science, Indianapolis, IN)針對凋亡標記細胞。簡言之，將固定的細胞離心并在 含有牛血清白蛋白(BSA)的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中洗滌一次，隨后在室溫重懸于2ml 透化緩沖液(0. 1% Triton X-100和0. 1 %檸檬酸鈉的PBS溶液)中持續(xù)25分鐘并在0. 2ml PBS/1% BSA中洗滌兩次。將細胞重懸于50 μ 1 TUNEL反應混合物(TdT酶和標記溶液)并 在37°C于濕化黑暗環(huán)境下在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育60分鐘。標記的細胞在PBS/1% BSA中洗滌一 次，隨后重懸于含有1 μ g/ml 4' ,6- 二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)的0. 5ml冰冷PBS中持 續(xù)至少30分鐘。所有細胞樣品均用BD LSR II分析(BDBiosciences，San Jose，CA)。溴脫氧尿苷(BrdU)標記分析添力卩50 μ 1 BrdU (Sigma Chemical Co. ,St. Louis, M0)儲備液(ImM)以產(chǎn)生 10 μ M BrdU終濃度。將細胞于37°C孵育30分鐘并在冰冷70%乙醇中固定，然后在冷室(4°C )中貯存過夜。將固定的細胞離心并在2ml PBS中洗滌一次，隨后在37°C重懸于0. 7ml變性液 (0. 2mg/ml胃蛋白酶的2NHC1)在黑暗中持續(xù)15分鐘，用1. 04ml IM Tris緩沖液(Trizma 堿，SigmaChemical Co.)懸浮并在2ml PBS中洗滌。隨后，將細胞重懸于TBFP滲透性緩 沖液(0. 5% Tween-20、1%牛血清白蛋白和胎牛血清的PBS)中稀釋度為1 100的 100 μ 1抗BrdU抗體(DakoCytomation，Carpinteria，CA)中，并于室溫在黑暗中孵育25分 鐘并在2ml PBS中洗滌。將一抗標記的細胞重懸于TBFP滲透性緩沖液中稀釋度1 200的 100 μ 1 山羊抗小鼠 IgG(H+L)的Alexa Fluor F(ab' )2片段(2mg/mL) (Molecular Probes, Eugene, OR)，并于室溫在黑暗中孵育25分鐘并在2ml PBS中洗滌，隨后重懸于含有1 μ g/ ml 4'，6- 二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)的0. 5ml冰冷PBS中持續(xù)至少30分鐘。用BD LSR II (BD Biosciences, San Jose，CA)分析全部細胞樣品。已經(jīng)在體外和體內(nèi)癌癥模型中檢驗過4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)與各種化療藥 物的組合。在從具有三重陰性轉移腺癌的患者來源的MDA-MB-468乳腺癌細胞系中評價與 吉西他濱或卡鉬組合的BA，結果表明BA加強S-和G2/M細胞周期停滯并增強由卡鉬或吉西 他濱誘導的細胞毒效應(圖2)。在nu/nu裸小鼠中的人三重陰性轉移乳腺癌MDA-MB-231異種移植模型上評價與 吉西他濱和卡鉬組合的BA活性。BA增加吉西他濱和卡鉬組合的活性并且在藥物施用35日 后產(chǎn)生4個部分緩解(PR)和2個完全緩解(CR)以及1名無腫瘤幸存者(TFS)(表2)。BA 與吉西他濱和卡鉬的組合耐受良好。表2 與吉西他濱/卡鉬組合的BA在三重陰性乳腺癌的MDA-MB-231異種移植模 型中的體內(nèi)活性
治療部分 緩解兀生 緩解無腫瘤 幸存者對照000吉西他濱(15mg/kg ；腹膜內(nèi)； 每3天1次X4腹膜內(nèi))+卡鉑 (10mg/kg ；腹膜內(nèi)；每周1次 X 3)400BSl-201(50mg/kg ；腹膜內(nèi)； 每兩周1次)+吉西他濱 (15mg/kg;腹膜內(nèi)；每3天1 次X 4腹膜內(nèi))+卡鉑(10mg/kg ； 腹膜內(nèi)海周1次X3)421因而，4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)可以加強包括卡鉬和吉西他濱在內(nèi)的多種細胞 毒化療藥的活性。
3 :4-it -3-硝某苯甲酰胺(BA)與彳尹立替康的鉬合從ATCC獲得乳腺癌細胞并在含有10%胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基中 培養(yǎng)。細胞以每只PlOO細胞培養(yǎng)皿IO5個細胞或以每只P60細胞培養(yǎng)皿IO4個細胞在不同 濃度的化合物或DMSO對照存在條件下鋪種。在處理后，使用Coulter計數(shù)器并通過用
亞甲藍染色測量貼壁細胞數(shù)。亞甲藍是溶于甲醇和水的50%-50%混合物。將細胞鋪種于 24孔或96孔板中并如計劃那樣處理，抽吸培養(yǎng)基，細胞用PBS洗滌，在甲醇中固定5-10分 鐘，抽吸甲醇并使板完全干燥。添加亞甲藍溶液至孔中并孵育板5分鐘。移除染色液并用 dH20洗滌板直至洗液不再呈藍色。在板完全干燥后，將少量IN HCl添加至每個孔以提取亞 甲藍。使用在600nm的OD讀數(shù)和校準曲線來確定細胞數(shù)。化合物直接由干粉溶解成DMSO中的IOmM儲備液用于每個獨立實驗。用溶媒 (DMSO)的匹配體積/濃度實施對照實驗；在這些對照中，細胞的生長或細胞周期分布未顯
示變化。PI排斥測定、細胞周期測定、TUNEL測定和BrdU標記測定如上文實施例2中所述 進行。在體外癌癥模型中檢驗多種濃度的4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)與依立替康的組 合。在患有三重陰性轉移腺癌的患者衍生的MDA-MB-468三重陰性乳腺癌細胞系中評價BA 與依立替康的組合，結果表明BA加強S-和G2/M細胞周期停滯并增強由依立替康誘導的細 胞毒效應(表3)。表3:用與依立替康組合的4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)治療的三重陰性 MDA-MB-468乳腺癌的細胞周期調(diào)節(jié) 因此，4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)可以加強包括卡鉬、吉西他濱和依立替康在內(nèi) 的多種細胞毒化療藥的活性。實施例4 :4_碘-3-硝某苯甲酰胺(BA) M IGFlR抑制劑鬼,臼苦素(PPP)的鉬合從ATCC獲得乳腺癌細胞并在含有10%胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基中 培養(yǎng)。細胞以每只PlOO細胞培養(yǎng)皿IO5個細胞或以每只P60細胞培養(yǎng)皿IO4個細胞在不同 濃度的化合物或DMSO對照存在條件下鋪種。在處理后，使用Coulter計數(shù)器并通過用
亞甲藍染色測量貼壁細胞數(shù)。亞甲藍溶于甲醇和水的50%-50%混合物中。將細胞鋪種于 24孔或96孔板中并如計劃那樣處理，抽吸培養(yǎng)基，細胞用PBS洗滌，在甲醇中固定5-10分 鐘，抽吸甲醇并使板完全干燥。添加亞甲藍溶液至孔中并孵育板5分鐘。移除染色液并用 dH20洗滌板直至洗液不再呈藍色。在板完全干燥后，將少量IN HCl添加至各孔以提取亞甲 藍。使用在600nm的OD讀數(shù)和校準曲線來確定細胞數(shù)?；衔镏苯佑筛煞廴芙獬蒁MSO中的IOmM儲備液用于每個獨立實驗。用溶媒 (DMSO)的匹配體積/濃度實施對照實驗；在這些對照中，細胞的生長或細胞周期分布未顯
示變化。PI排斥測定、細胞周期測定、TUNEL測定和BrdU標記測定如上文實施例2中所述 進行。在體外癌癥模型中檢驗多種濃度的4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)與胰島素樣生長 因子1受體(IGFlR)抑制劑鬼臼苦素(PPP)的組合。從患有三重陰性轉移腺癌的患者獲得 的MDA-MB-468三重陰性乳腺癌細胞系中評價BA與PPP的組合，結果表明BA加強S-和G2/ M細胞周期停滯并增強由PPP誘導的細胞毒效應(表4)。表4:用與IGFlR抑制劑鬼臼苦素(PPP)組合的4_碘_3_硝基苯甲酰胺(BA)治 療的三重陰性MDA-MB-468乳腺癌的細胞周期調(diào)節(jié) 因此，4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)可以加強包括鬼臼苦素(PPP)的生長因子受體 靶向抑制劑的活性。實施例5 用BA治療三重陰件乳腺癌實施多中心、開放標記、隨機研究以證實用4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)治療三重 陰性轉移乳腺癌的治療效能。研究目的本研究的主要目的如下臨床受益率(clinicalbenefit rate) (CBR = CR+PR+SD 彡 6 個月)確定與用吉 西他濱和卡鉬治療相關的45% CBR相比，BA將產(chǎn)生30%或更高的CBR。進一步研究BA的安全性和耐受性本研究的次要目的如下總體應答率(overall response) (ORR)無病情進展的存活(Progression-free survial, PFS)評價與每個分組相關的毒性本研究的探索性目的(exploratory objectives)如下表征BA對PARP活性的抑制作用表征歷史性(historic)腫瘤組織樣品中的PARP活性研究三重陰性乳腺癌中BRCA的狀況與不帶已知BRCA突變的受試者相比，研究患有癌癥和這些突變的受試者中的應 答將乳腺癌組織分類為基底型或管腔型(luminal)研究設計開放標記、2分組隨機的安全性和療效研究，其中多達90位患者(每分 組45位)將隨機分配至研究分組1 在21日周期的第1日和第8日，吉西他濱(1000mg/m2 ；30分鐘靜脈 輸注)及卡鉬(AUC 2 ；60分鐘靜脈輸注)；或研究分組2 在每個21日周期的第1、4、8日和11日，4_碘_3_硝基苯甲酰胺(4mg/ kg, 1小時靜脈輸注)隨機分配至研究分組2的患者將在疾病進展時退出該研究交叉組隨機分配至研究分組1的患者可以交換，以在疾病進展時接受用與 4-碘-3-硝基苯甲酰胺組合的吉西他濱/卡鉬繼續(xù)治療樣品量多達90位受試者，每個分組多達45位受試者參與研究。受試者將隨機分 配，分組1或分組2中每組多達45位受試者。
受試者群體納入標準至少18歲具有按RECIST標準為可測量疾病的轉移性乳腺癌(IV期)在轉移情況下0-2個先期化療療程。允許先期輔助/新輔助治療。組織學記錄(原發(fā)或轉移部位)乳腺癌，所述乳腺癌由免疫組化(0，1)證實呈 ER-陰性、PR-陰性和無HER-2過表達，或通過對原發(fā)腫瘤或轉移性病變所進行的FISH證實 無基因擴增。在參于研究前至少3周結束先期化學療法?；颊呖稍谳o助或轉移情況下接受療法，然而，若服用雙膦酸鹽類，不能使用骨病變 評估病情進展或緩解。放射療法必須在參于研究前至少2周結束且輻射病變可不作為可測量疾病計。若在局部治療后穩(wěn)定(無病情進展證據(jù))達至少3個月，患者可能有CNS轉移。ECOG 表現(xiàn)狀況 0-1如下定義的足夠器官功能ANC大于或等于l，5000/mm3，血小板大于或等于 100，000/mm3，肌酐清除率大于50mL/分鐘，ALT和AST低于2. 5倍正常值上限(ULN)(或在 肝轉移的情況下低于5倍ULN)；總膽紅素低于1. 5mg/dL。推薦可用于PARP研究的組織塊，盡管沒有組織塊也不會排除患者參與。將排除妊娠或哺乳期婦女。育齡婦女必須在參與研究2周內(nèi)獲得有記錄的陰性懷 孕檢驗并同意在研究療法持續(xù)時間期間采取可接受的避孕措施。簽字的由IRB批準的書面知情同意書。排除標準僅由PET可鑒定的病變2個以上先期化療療程(包括輔助療法)。序貫(sequential)治療方案如AC-紫 杉醇治療將視為一種方案。已經(jīng)接受了用吉西他濱、卡鉬、順鉬或4-碘-3-硝基苯甲酰胺的先期治療?？赡苡绊憛⑴c研究的重大醫(yī)學病癥(不可控的肺部、腎臟或肝臟功能紊亂，不可 控的感染)。明顯不可控的心臟病病史；即，不可控的高血壓、不穩(wěn)定性心絞痛、新近心肌梗死 (在先前6個月內(nèi))、不可控的充血性心力衰竭和有癥狀或無癥狀但射血分數(shù)下降至低于 45%的心肌病。研究人員感覺可能有損于有效和安全參與研究的其他明顯共存性病癥。已登記參加另一項研究性藥物設備試驗或正在接受其他研究性藥物的受試者。共存或先期(在研究第1日的7日范圍內(nèi))抗凝療法(允許用于維持導管的低劑 量)指定的伴隨藥物治療在整個研究期間不允許同時進行的放射療法不能遵守研究要求僅從每位受試者獲得倫理委員會(IRB)批準的簽字的書面知情同意書后，才會進行篩選試驗和評價。除非另行說明，手續(xù)將在給藥(第1日)14日內(nèi)辦理。臨床評價完整歷史、身體檢查、ECOG狀況、身高、體重、生命體征和伴隨藥物治療記錄。實驗室研究血液學(具有差異性、網(wǎng)狀細胞計數(shù)和血小板)；凝血酶原時間(PT) 和局部凝血活酶時間(PTT)；綜合化學項目(鈉、鉀、氯化物、CO2、肌酐、鈣、磷、鎂、BUN、尿 酸、白蛋白、AST、ALT、堿性磷酸酶、總膽紅素和膽固醇、HDL和LDL)、伴以顯微鏡檢驗的尿分 析、PBMC中的PARP抑制、育齡婦女的妊娠血清或尿檢驗。如果簽署單獨的知情同意書，將 獲得BRCA譜。該信息也可以從受試者的病歷中抽出。臨床期通過計算機層析X射線照相 術(CT)或磁共振成像(MRI)對可測量的疾病成像。治療將接受合格患者參加本研究并隨機分配至分組1或分組2。研究分組1 在21日周期的第1日和第8日，吉西他濱(1000mg/m2 ；30分鐘靜脈 輸注)及卡鉬(AUC 2 ；60分鐘靜脈輸注)；或研究分組2 在每個21日周期的第1、4、8日和11日，4_碘_3_硝基苯甲酰胺(4mg/ kg, 1小時靜脈輸注)交叉組隨機分配至研究分組1的患者可以交換，以在疾病進展時接受用與 4-碘-3-硝基苯甲酰胺組合的吉西他濱/卡鉬繼續(xù)治療給藥前和給藥后試驗將如研究方案中所概述的步驟進行。對兩個治療分組的給藥將以21日周期重復。受試者可以參與本研究直至他們體驗到藥物不耐受或疾病進展或撤回同意書。達 到CR的受試者將接受額外4個周期。在PD前中斷治療的受試者應當經(jīng)歷每個方案的常規(guī) 階段評價直至PD時間。一旦受試者中斷治療，對無病情進展的存活和總體應答率的評價將 以3個月區(qū)間繼續(xù)直至疾病進展或死亡。除了在基線處所做的初始分類之外，對可測量疾病的第一計劃腫瘤應答測量將在 第2周期后進行并且隨后每隔一個治療周期(大約每隔6-8周)進行一次。將使用根據(jù)實 體瘤改良應答評價標準(RECIST)的腫瘤應答通過CT或MRI (必須使用在篩查期間使用的 相同技術)來確定疾病進展。治療結束全部受試者應當按方案所述于最后一劑4-碘-3-硝基苯甲酰胺之后不 超過30日結束治療過程。另外，如果在最后一劑4-碘-3-硝基苯甲酰胺之前30日范圍內(nèi) 未被評估，受試者將借助臨床成像獲得整體的腫瘤應答評估。安全性評估安全性將由標準臨床檢驗及實驗室檢驗(血液學、血液化學和尿分 析)評估。毒性等級由國家癌癥研究所(National Cancer Institute) 3. 0版CTCAE定義。藥物代謝動力學/藥效學用于PK和藥效學分析的血樣將僅從登記參加研究分組2的受試者獲得，這包括交 叉組受試者。PK樣品將在第1周期內(nèi)、給藥前和在第1日及第11日輸注結束后立即收集。藥效學或PARP樣品將在第1周期內(nèi)、給藥前第1、4、8和11日收集。給藥后僅在 第1日采樣。將允許不能如規(guī)定那樣進行PK或藥效學樣品收集的位點參與本研究，并且那些 位點的方案將相應地進行修正。
療效腫瘤將通過標準方法(例如CT)在基線處評估并隨后在缺少臨床明顯疾病 進展時大約每隔6-8周評估一次。統(tǒng)計方法本研究的主要目的是估計BA分組中的臨床受益率(CBR)。在兩個分組的每一分組 中，將評估主要療效終點(primary efficacy endpoint) (CBR)，并計算精確二項的90%置 信區(qū)間。將使用單側Fisher精確檢驗以5%顯著性水平比較兩個分組中的CBR。將估計無 病情進展的存活和總體存活的次要和探索性療效終點，并將使用Kaplan-Meier方法計算 95%置信區(qū)間。將使用時序檢驗(log-rank test)比較兩個分組中無病情進展的存活和總 體存活的分布。對PARP抑制數(shù)據(jù)的分析本質(zhì)上將是探索性和描述性的。對于主要安全性 終點，AE和嚴重不利事件(SAE)將按研究分組、系統(tǒng)器官類別和優(yōu)選條款列表。第一周期 后的實驗室檢驗結果將按照偏離基線值進行總結。隨訪在第90日并在最后一劑研究藥物后每隔90日(士20日)獲得隨訪信息。實驗室評估-將使用標準步驟制備用于血液學、血清化學和尿分析的血樣和尿 樣。實驗項目定義如下血液學差異性WBC計數(shù)、RBC計數(shù)、血紅蛋白、血細胞比容和血小板計數(shù)血清化學白蛋白、ALP、ALT、AST、BUN、鈣、二氧化碳、氯化物、肌酐、、-谷氨酰基 轉移酶、葡萄糖、乳酸脫氫酶、磷、鉀、鈉、總膽紅素和總蛋白。尿分析外觀、顏色、pH、比重、酮類、蛋白質(zhì)、葡萄糖、膽紅素、亞硝酸鹽、尿膽素原 和潛血(沉積物顯微鏡檢驗將僅在尿分析驗片評價的結果測為陽性時進行)藥物代謝動力學血樣將僅從登記參加研究分組2或交叉分配到研究分組2的受試 者獲得。樣品將在給藥前立即收集并在第1周期第1日及第11日每次輸注結束后立即收集。生物標記是正常生物學過程、病理學過程或對治療性介入的藥理學應答的客觀測 量與評價的指示物。在腫瘤學中，對于構成腫瘤過程發(fā)生基礎的分子改變特別感興趣，其中 所述分子改變可以鑒定癌癥亞型、對疾病分期、評估腫瘤生長的量或預測疾病進展、轉移和 對BA的反應。將使用PARP活性測定法在外周血單核細胞(PBMC)中確定PARP在BA治療之前和 之后的功能活性。PBMC將根據(jù)研究手冊中詳述的步驟從5mL血樣制備，并將測量PARP活性 /抑制作用。關于全部PARP樣品的詳細收集、處理和運輸步驟，參考將提供至每個地點的研究 手冊。乳腺癌(BRCA)基因檢測是在幫助控制正常細胞生長的基因(BRCA1和BRCA2)中 檢查特定改變(突變)的血液檢驗。帶有BRCA突變的婦女顯示乳腺癌發(fā)生幾率為36%至 85%，卵巢癌發(fā)生幾率為16%至60%。向帶有BRCA突變的婦女給藥PARP抑制劑可以證明 是有益的。本研究是確定BRCA狀況和BA治療應答之間任何關聯(lián)的初步嘗試。為實現(xiàn)該目的，應當確定全部受試者的BRCA狀況(如果仍未知)。受試者需要簽 署獨立的知情同意書。由于這不是本研究的納入標準，故不同意接受這項檢驗的潛在受試 者將不會光因這個理由而被排除參與本研究。在兩個分組的每一分組中，將估計主要療效終點(CBR)，并計算精確二項的90%置信區(qū)間。將使用單側Fisher精確檢驗以5%顯著性水平比較兩個分組中的CBR。將使用 時序檢驗比較兩個分組中無病情進展的存活和總體存活的次要和探索性療效終點。腫瘤應答數(shù)據(jù)將針對安全性群體中的全部受試者以描述性列表的形式報告，目的 在于確定BA治療是否已經(jīng)具有可測量的臨床效果(例如時間對病情進展)并是否應當在 第一個8周后繼續(xù)進行。應答數(shù)據(jù)將使用改良RECIST分類。PARP抑制分析將根據(jù)情況是探索性的并在本質(zhì)上是描述性的。將考慮PARP抑制 差異的統(tǒng)計分組比較結果和來自BA治療之前、期間和之后所取的樣品中任何藥物基因組 學結果(例如BRCA)。將對接受至少1個劑量BA的全部受試者完成安全性分析。本研究中所用的BA將以lOmg/mL濃度在含有25%羥丙基β -環(huán)糊精的IOmM磷酸 鹽緩沖液(ρΗ 7.4)中配制。實體月中瘤應答評價標準(response evaluation criteria in solid tumors) (RECIST)資格在客觀腫瘤應答是主要終點的方案中應當僅包括在基線處具有可測量疾病的患
者ο可測量的疾病_存在至少一種可測量病變。如果該可測量疾病限于孤立病變，則 其腫瘤特征應當通過細胞學/組織學證實。可測量的病變-可以在至少一個維度上精確測量的病變，使用常規(guī)技術時所述病 變的最大直徑> 20mm，或使用螺旋CT掃描時最大直徑> 10mm。不可測量的病變_所有其他病變，包括微小病變(使用常規(guī)技術時最大直徑 < 20mm或使用螺旋CT掃描時最大直徑< 10mm)，即骨病變、軟腦脊膜疾病、腹水、胸膜/心 包膜滲出、炎性乳腺疾病、皮膚/肺淋巴管炎、囊性病變并且還包括未證實并隨后由成像技 術證實的腹部腫塊；并且所有量值應當使用尺子或測徑器取得并以公制符號記錄。全部基線評價應當盡可 能接近于治療開始時并且決不能超過治療開始前4周進行。應當在基線處和隨訪期間使用相同的評估方法和相同技術來表征所發(fā)現(xiàn)和報告 的每一種病變。僅當臨床病變在淺表時(例如，皮膚小結和可觸及的淋巴結)才將它們視為可測 量的。對于皮膚病變的情況，推薦用彩色照相記錄，包括評估病變大小的尺子。測量方法為進行應答評估在測量所選擇的靶病變時，CT和MRI是目前所具備的最好和具有 再現(xiàn)性的方法。常規(guī)的CT和MRI應使連續(xù)切面厚度為IOmm或以下。螺旋CT應當使用5mm 連續(xù)重建算法進行。以上適用于胸部、腹部和骨盆的腫瘤。頭頸部腫瘤和肢端腫瘤通常需 要特殊方法。如果X射線胸片上病變顯示清楚，且被充氣的肺組織包繞，此病變也可認為是可 測量的。然而，CT是優(yōu)選的。當研究的主要目的是客觀的應答評價時，不應當使用超聲術(US)來測量腫瘤病 變。然而，它可作為臨床測量可觸及性淺表淋巴結、皮下病變和甲狀腺結節(jié)的備用方法。超聲術也可用來證實通常由臨床檢驗評估的淺表性病變是否徹底消失。
仍沒有對于客觀腫瘤評價可用的充分和廣泛地確認內(nèi)窺鏡檢查和腹腔鏡檢查。它 們在這種特定環(huán)境下的用途要求復雜的設備和高水平專家，但只有一些中心才具備這樣的 條件。因此，以這類技術評價客觀腫瘤應答的應用應局限于特定中心的確認目的。然而，當 獲得活組織檢查樣品時，這些技術可以用于證實完全病理學應答。腫瘤標記不能單獨地用來評估應答。如果初始標記水平高于正常上限，必須將它 們降至正常水平，才能在所有病變消失時，認為患者是完全臨床應答。在一些罕見情況下，細胞學和組織學可用于區(qū)分I3R和CR (例如在一些腫瘤如生殖 細胞腫瘤的治療之后區(qū)分殘余良性病變和殘余惡性病變)?！鞍小焙汀胺前小辈∽兊幕€記錄應將代表所涉及全部器官的所有可測量病變，按每個器官計最多5處病變、總計 10處病變，鑒定為靶病變，并在基線處予以記錄和測量。靶病變的選擇應根據(jù)它們的大小(具有最大直徑的病變)以及是否適合用可重復 的測量手段(成像技術或臨床測量)精確測量。將計算所有靶病變的最大直徑(LD)的總和并作為基線LD總和報告。該基線LD 總和將用作表征客觀腫瘤的參考。全部其他病變(或疾病部位)應當被鑒定為非靶病變并也應當在基線處予以記 錄。不要求進行這些病變的測量，不過在整個隨訪過程中應當指出這些病變中每一種病變 是否存在。應答標準(response criteria)靶病變的評估完全緩解(complete response) (CR)所有靶病變均消失部分緩解(partial response) (PR)以基線LD總和為參考，靶病變的LD總和至 少下降30%病情進展(progressive disease) (PD):以治療開始或一種或多種新病變出現(xiàn)以 來所記錄的最小LD總和為參考，靶病變的LD總和至少增加20%病情穩(wěn)定(SD)以治療開始以來的最小LD總和為參考，即沒有充分縮小到可定性 為PR，也沒有充分增加到可定性為PD對非靶病變的評價完全緩解(CR):全部非靶病變消失和腫瘤標記水平正?；峭耆徑?病情穩(wěn)定(SD)—種或多種非靶病變持續(xù)存在或/和腫瘤標記水平 持續(xù)高于正常限。病情進展(PD)出現(xiàn)一種或多種新病變和/或現(xiàn)有非靶病變(1)明顯地發(fā)展盡管“非靶”病變的明顯發(fā)展僅是例外，然而在這種環(huán)境下，應以治療醫(yī)師的意見 為主，且發(fā)展狀況應在稍后由評審專家組(或研究主持人)證實。最佳總體應答(overall response)的評價最佳總體應答是從治療開始直至疾病進展/復發(fā)的最佳應答記錄(以治療開始以 來記錄的最小量值作為PD的參考)。通常，患者最佳應答的結論將取決于是否完成測量和 達到確證標準。
靶病變非靶病變新病變總體應答(overall
response)
CRCR無CR
CR非完全緩解(incomplete無PR
response)/SD
PR非-PD無PR
SD非-PD無SD
PD任何有或無PD
任何PD有或無PD
任何任何有PD
應當將健康狀況全面惡化的要求中斷治療而當時沒有疾病進展客觀證據(jù)的患者
劃分為具有“明顯癥狀的惡化(symptomatic deterioration) 應作出一切努力記錄客觀 的病情進展，即使在中斷治療之后也是如此。在一些情況下，可能難以將疾病與正常組織區(qū)分開。當完全緩解的評價取決于這 種決定因素時，推薦應當研究殘余病變(細針頭抽吸/活組織檢查)以證實完全緩解狀況。證實證實客觀應答的主要目的是避免過高估計所觀察到的應答率(responserate)。在 應答的證實不可行的情況下，應當在報告此類研究的結果時澄清所述應答未經(jīng)證實。為了將某種狀況定性為I3R或CR，腫瘤量值的改變必須通過重復評估證實，其中所 述的重復評估應當在首次滿足應答標準不少于4周后進行。研究方案所確定的較長間隔期 也可認為是適宜的。在SD的情況下，在以研究方案所定義的最小間隔(通常不少于6-8周)參與研究 后，后續(xù)測量至少有一次必須符合SD標準?？傮w緩解的持續(xù)期(duration of overall response)總體應答持續(xù)期是從測量標準符合CR或無論哪種狀況記錄在先)的時間起 直至客觀記錄到復發(fā)或PD的首日，以治療開始以來記錄的最小量值作為PD的參考。病情穩(wěn)定的持續(xù)期以治療開始以來記錄的最小量值作為參考，從治療開始直至達到疾病進展的標 準，測量SD。SD持續(xù)期的臨床關聯(lián)性隨不同腫瘤類型和等級而變化。因此，高度推薦在方案中 詳細說明為了確定SD在兩次測量之間所要求的最小時間間隔。這個時間間隔應考慮到這 種狀況可能給研究群體帶來的預期臨床益處。應答審核(response review)對于應答率是主要目的的試驗，強烈推薦應當在研究完成時由獨立于該項研究的 專家審核全部應答。同時審閱患者的檔案和放射學圖像是最好的方法。結果的報告必須評估本研究中包括的全部患者對治療的響應，即便在治療方案中存在重大偏 離或他們不符合資格。每位患者將被劃入以下類別之一 1)完全緩解，2)部分緩解，3)病情穩(wěn)定，4)病情進展，5)因惡性疾病早期死亡，6)因毒性早期死亡，7)因其他原因早期死亡， 或9)未知(未評估，數(shù)據(jù)不充分)。應當將符合資格標準的全部患者都包括在應答率的主要分析結果中。屬于應答分 類4-9的患者應當視為對治療無響應(疾病進展)。因而，不恰當?shù)闹委熞?guī)劃或藥物施用不 會導致從應答率分析結果中排除。分類4-9的精確定義將因方案而異。全部結論應當基于所有符合資格的患者。隨后，排除已經(jīng)鑒定在方案中存在重大偏離(例如因其他原因所致的早期死亡、 早期治療中斷、重大方案違規(guī)等)的那些患者，可以患者亞組為基礎進行次級分析。然而， 可不以這些次級分析作為就治療療效得出結論的基礎，并且應當清晰地報告將患者從分析 中排除的原因。應當規(guī)定95%置信區(qū)間。實施例6 用BA治療乳腺癌Ib期、開放標簽、劑量遞增研究評價了與化療方案(拓撲替康、吉西他濱、替莫唑 胺和卡鉬+紫杉醇)組合的BA(2. 0,2. 8,4. 0,5. 6,8. 0和11. 2mg/kg)在患有晚期乳腺腫瘤 的受試者中的安全性。對來自患者的PBMC的評價顯示，多次用2.8mg/kg或更高BA劑量給 藥后PARP抑制作用明顯且延長(圖3)。鑒定了 BA與每種細胞毒素治療方案的良好耐受組合。觀察到的任何毒性與每種 化療方案的已知且預期的副作用相一致。沒有證據(jù)顯示，在任何已試驗過的細胞毒方案中 添加BA治療會加強已知毒性或增加其預期毒性頻率。鑒定到以有效臨床前血液濃度激發(fā) 明顯和持久的PARP抑制作用的生物學相關劑量(2.8mg/kg)。證據(jù)顯示，大約80%受試者 病情穩(wěn)定達2個治療周期或更長，從而顯示潛在的臨床效益。實施例7 單獨用BA或用BA與吉西他濱/卡鉬組合治療三重陰性轉移乳腺癌 (TNBC)的2期研究2期、開放標簽、2分組隨機安全性和療效試驗，調(diào)查在轉移性TNBC乳腺癌患者中， 與僅采用標準化療相比，通過BA與吉西他濱/卡鉬的組合治療來抑制PARP活性是否能改 善臨床受益率(CBR = CR+PR+SD > 6個月)。所檢驗的結論是，TNBC受試者的CBR，與單獨 使用吉西他濱/卡鉬時所達到的45%相比，在吉西他濱/卡鉬中添加BA后達到60%。主要終點·臨床受益率(CBR = CR+PR+SD≥6個月)· BA的安全性和耐受性次要終點·總體應答率(ORR)·無病情進展的存活(PFS)探索性終點·獲得的腫瘤樣品的PARP基因表達和藥物基因組學的鑒定· BRCA 狀況·與不帶已知BRCA突變的受試者相比，患有癌癥和這些突變的受試者的應答·將乳腺癌組織分為基底型或管腔型
劑量L時間表以1 1比例將受試者隨機分配至試驗分組1 在21日周期的第1日和第8日，吉西他濱(1000mg/m2 ；30分鐘靜脈 輸注)+卡鉬(AUC 2 ；60分鐘靜脈輸注)試驗分組2:在21日周期的第1和第8日，吉西他濱(1000mg/m2 ;30分鐘靜脈輸 注)+卡鉬(AUC 2;60分鐘靜脈輸注)；在該周期的第1、4、8和第11日，再加BA (5. 6mg/kg ； 1小時靜脈輸注)每21天重復所有的給藥周期。一旦病情進展，隨機分配至分組2的受試者即終止試驗。一旦病情進展，即讓隨機 分配至分組1的受試者交叉接受BA與吉西他濱/卡鉬的組合治療。主要資格標準·具有按RECIST標準為可測量疾病的轉移性乳腺癌(IV期)·在轉移情況下，0-2個先期化療療程；允許先期輔助/新輔助療法 組織學記錄的(原發(fā)或轉移部位)乳腺癌，所述乳腺癌由免疫組化(0，1)證實呈 ER-陰性、PR-陰性和無HER-2過表達，或經(jīng)FISH證實無基因擴增。· ECOG 0-1研究群體迄今為止，已有85名患者在23個研究地點登記參加(表5)。表5 :11期研究的患者統(tǒng)計特征 *基于可用的數(shù)據(jù)ER、PR和HER2表汰情況研究內(nèi)容基于在研究位點的傳統(tǒng)組織學測試。原始活檢組織的石蠟包埋切片獲 自參加臨床試驗的患者，并鑒定作為TNBC標志(包括ER、PR和HER2)以及PARP1、Top2A 和Ki-67的基因狀態(tài)。該方法基于優(yōu)化的多重定量RT-PCR，用于福爾馬林固定和石蠟包埋 (FFPE)組織中基因表達的定量評估。對臨床試驗的樣品進行了比較，以獨立地獲得代表 FFPE正常和腫瘤組織的對照樣品。此外，從被記錄為HER2基因過表達的患者獲得一系列樣
P
ΡΠ O組織樣品將樣品作為正常手術操作的一部分收獲并在切除后30分鐘內(nèi)速凍。對受分析的 樣品進行內(nèi)部病理學審查和證實。從相鄰組織得到的蘇木精和伊紅(H&E)染色的玻片用來 證實和劃分診斷類別并用來評價腫瘤細胞性。使用免疫組化和熒光原位雜交確定ERjR和 HER2的表達。這些結果以及附屬病理學和臨床數(shù)據(jù)用樣品清單和管理數(shù)據(jù)庫(Ascenta， BioExpress databases ；GeneLogic，Inc.，Gaithersburg，MD)注釋。RNA提取和表達情況RNA提取和雜交如Hansel等人所述進行。使用陣列高通量應用(Ascenta， Bioexpress Gene Logic，Gaithersburg MD and Affymetrix, Santa Clara，CA)評價陣列 數(shù)據(jù)質(zhì)量，其中所述的陣列高通量應用將數(shù)據(jù)針對包括5’ /3’ GAPDH比、信/噪比及背景以 及其他額外量度的多種客觀標準進行評估。用Affymetrix微陣列分析軟件包5. O版、Data Mining Tool 2. O 和微陣列數(shù)據(jù)庫軟件(Affymetrix, Santa Clara, CA)進行 GeneChip 分 析。將GeneChip上所代表的所有基因全部按信號強度100歸一化并換算。微陣列數(shù)據(jù)分析使用病理學正常組織樣品來確定PARPl mRNA的基線表達。計算每個預測值的平均值和90%、95%、99%和99.9%置信上限(UCL)。因為我們評估了一組正常的樣品之外 的單個樣品處在基線分布范圍內(nèi)的可能性，故而選擇平均值的預測區(qū)間而非置信區(qū)間來估 計未來各個量值的期望范圍。預測區(qū)間由公式定義，其中7是正常乳腺樣品 的平均值；S是標準差，η是樣品數(shù)，并且A是具有η-1個自由度的Student’ s t_分布的第 100(1-(ρ/2))個百分位數(shù)。使用病理學正常組織樣品來確定PARPl的基線表達。樣品根據(jù)特征劃分成多個亞 類，所述特征包括腫瘤階段、吸煙狀況、CA125狀況或年齡。根據(jù)90%、95%、99%或99.9% UCL分析評價每份腫瘤樣品。使用針對Windows的SAS v8. 2 (www. sas. com)進行分析。與PARPl相比，計算11個探針集合的Pearson相關性。相關性以194份樣品的完 整集合為基礎。Pearson積差相關性定義為下式 其中7是PARP探針集合的平均值并且7是PARPl與之相關的探針集合的平均值。 統(tǒng)計學顯著性由公式(n-2)1/2r/(1－r2)1/2確定，其中r是相關性且η是樣品數(shù)。所得值假定具有η-2 個自由度的t分布。多重逆轉錄酶-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)使用每份樣品25ng總RNA如前所述(Khan等人，2007)進行多重RT-PCR。用于 本研究的多重測定法設計用于檢測來自福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣品或來自冷凍組 織的 RNA。使用 RiboGreen RNA 定量試劑盒(Invitrogen)以 Wallac Victo r2 1420 多標 記物計數(shù)器確定RNA的濃度。在Agilent Bioanalyzer生物分析儀上按照Agilent 2100 Bioanalyzer的說明書分析來自每份樣品的RNA樣品。逆轉錄(RT)反應如前所述用Applied Biosystems9700 實施。用 Applied Biosystems 9700 對每種 cDNA 實施 PCR 反應。RT 反應 以卡那霉素RNA摻合以監(jiān)測RT反應和PCR反應的效率。所用對照包括陽性對照RNA、無模 板對照和無逆轉錄酶對照。PCR反應物由毛細管電泳分析。將熒光標記的PCR反應產(chǎn)物稀 釋、與Genome Lab規(guī)格標準物-400 (Beckman-Coulter)合并、變性并用CEQ 8800基因分析 系統(tǒng)分析。將每種靶基因的表達相對于同一反應內(nèi)的葡糖醛酸糖苷酶(GUSB)表達報 道為對每種樣品3次獨立評估的平均值和標準差。圖4顯示了參加這項試驗的第一批50名患者的結果。雖然患者的“三重陰性”分 類是基于用常規(guī)臨床方法取得的ER、ra和HER2的結果，這些結果顯示，ER和I5R的基因表 達均比正常組織低。HER2表達與正常的相當，但與過表達PARPl的患者明顯不同，基因表達 顯著上升，從而證實了我們先前的觀察。初步結果安全性無論以劑量減少的患者百分比還是劑量減少的總人數(shù)而論，兩組劑量減少的情況 相似(表6)。表6 劑量減少 如方案中的算法所定義的吉西他濱/卡鉬劑量減少在只進行化療的分組中，39名受試者中有15名(38.9% )劑量減少，在BA+化療 分組，39名受試者中有11名(28.2%)劑量減少。總的說來，吉西他濱/卡鉬組有20例劑 量減少，BA+吉西他濱/卡鉬組有19例劑量減少?？紤]到分組B中所給的劑量大約是分組 A的三倍，在吉西他濱/卡鉬中添加BA的安全性被進一步證實。對不良反應(AE)的評價顯示，這兩個研究分組情況相當(風險比=1. 0，未根據(jù)研 究的總時間校正；表7)。表7不良反應
1. 0療效試驗分組A (僅用吉西他濱/卡鉬)的患者遠早于隨機分配至試驗分組B (吉西他 濱/卡鉬+BA)的患者顯示出病情進展的跡象。分組A約有50%的受試者在第2周期末顯 示病情進展，而在同一時間內(nèi)分組B只有15%受試者顯示病情進展。利用可用的初步數(shù)據(jù)，進行了正式的統(tǒng)計分析。這一分析顯示，與僅接受吉西他濱 /卡鉬的患者相比，接受BA加吉西他濱/卡鉬的患者具有明顯較長的中位數(shù)PFS (211天相 對于 67 天；P < 0. 0001 ；圖 5)。對于參加研究120天和180天的患者分別進行了臨床受益率(CBR)的初步評估 (分別為CBR-120和CBR-180)，并顯示在表8中。表8 臨床效果的初步評估 a參加的第一批40位患者，SD (180天)+PR+CR ;b參加的第一批40位患者，SD (120 天)+PR+CRPR的確定包括證實和未證實的應答。結果顯示，吉西他濱/卡鉬+BA的分組具有較高的CBR趨勢。初步研究結論基于上述結果，對2期轉移性TNBC研究可以作出以下結論 接受了適當?shù)幕颊邊⒓釉囼?。使用傳統(tǒng)的免疫組化(IHC)和基因表達概括分析， 最初參加試驗的50名患者的基因組表達概括分析結果表明，這些患者確實都是ER陰性和 PR陰性而且不過表達HER2?！蓚€研究分組的患者情況相當。ο統(tǒng)計資料顯示，每組的年齡中位數(shù)和表現(xiàn)狀況相似。
ο兩組在轉移情況下的先期化療程度類似。最初69名患者的數(shù)據(jù)顯示，無論那個 分組的預治療情況均無顯著差異。BA分組有較多患者接受了 2個療程的先期化療，這說明 與僅接受吉西他濱/卡鉬治療的受試者相比，這些受試者對化療可能更有抗性。ο無論以劑量降低的患者百分比還是劑量降低的總人數(shù)而論，兩組劑量降低的情 況相似。在只進行化療的分組中，39名受試者中有15名(38.9%)劑量減少，在BA+化療 分組中，39名受試者中有11名(28.2%)劑量減少。總的說來，吉西他濱/卡鉬組有20例 劑量減少，BA+吉西他濱/卡鉬組有19例劑量減少。ο兩組的AE比率相似，從而支持這樣的結論在吉西他濱/卡鉬中添加BA不會 增強已知的毒性或引起任何新的毒性?！せ趯o病情進展存活狀況(211天相對于67天；P < 0. 0001)的中位數(shù)分析， 與那些僅接受吉西他濱/卡鉬治療的患者相比，接受了 BA加吉西他濱/卡鉬的患者顯示出 顯著的臨床效益。與其他轉移性TNBC研究相比，這些結果代表了 PFS狀況的顯著改善。 對參加試驗的最初40名患者臨床受益率的分析顯示了在吉西他濱/卡鉬中添加 BA后有改善趨勢。隨著研究的成熟，認為這種效果將變得更為明顯。實施例8 用紫杉醇、卡鉬和BA組合治療乳腺癌患者患有三重陰性轉移性乳腺癌并有病情進展的記錄。要求具備關于原發(fā)性腫瘤 的組織學確認。所有患者均患有可測量的疾病?？蓽y量的疾病是指至少有一個可在至少一個方向 (將要記錄的最長尺寸)準確測量的病變。用常規(guī)技術包括觸診、X射線平片、CT和MRI測 量時，每個病變必須> 20mm,或用螺旋CT測量時，每個病變必須> 10mm?；颊邔⒂兄辽僖粋€用于評估對本試驗方案應答的“靶病變”，所述應答的定義如 RECIST(8. 1節(jié))。先前輻射區(qū)域內(nèi)的腫瘤將被稱為“非靶”病變，除非有病情進展的記錄或 經(jīng)過活檢證實放射治療結束后病變持續(xù)達至少90天。此外，患者必須已經(jīng)從最近的手術、 放射治療或其他治療得到康復，并應沒有需要使用抗生素的活動期感染。任何針對惡性腫瘤的激素療法必須在注冊前至少一個星期就中止。允許繼續(xù)進行 激素替代治療?；颊弑仨氂凶銐虻墓撬韫δ苎“逵嫈?shù)大于或等于100，000/微升，ANC計數(shù)大于或等于1，500/微 升，相當于CTCAE 3.0版第1級。腎功能肌酐小于或等于1. 5X正常值上限(ULN)，CTCAE 3. 0版第1級。肝功能膽紅素小于或等于1. 5xULN(CTCAE 3. 0版第1級)。SGOT和堿性磷酸酶 小于或等于2. 5xULN(CTCAE 3. 0版第1級)。神經(jīng)功能神經(jīng)病變(感覺和運動)小于或等于CTCAE 3. 0版第1級?？赡軕言械幕颊咴趨⒓友芯壳氨仨氂嘘幮匝迦焉镌囼灲Y果，并采取有效的避孕 措施。不符合資格的患者為控制乳腺癌而接受先期細胞毒素化療的患者。如果有任何證據(jù)證明在過去五年內(nèi)患有其他惡性腫瘤，那么有其他浸潤性惡性腫 瘤病史的患者將被排除，但非黑素瘤皮膚癌和第3. 23和3. 24節(jié)注明的其他特定惡性腫瘤則例外。如果患者以前的癌癥治療與本試驗方案的治療發(fā)生沖突，那么這些患者也要排除 在外。在過去5年內(nèi)并非為乳腺癌治療而在腹腔或骨盆的任何部分接受先期放療的患 者將被排除在外。局部的乳房、頭頸或皮膚的癌癥的先期輻射是允許的，只要治療已于注冊 前三年以上結束，而且患者的病一直沒有復發(fā)或轉移。患者可能已經(jīng)接受了局部乳腺癌的先期輔助化療，只要治療已于注冊前三年以上 結束，而且患者的病一直沒有復發(fā)或轉移。有癥狀或未治療的腦轉移性瘤需要同時進行治療，包括但不限于手術、放療和皮 質(zhì)類固醇治療。在研究第1天的6個月內(nèi)的心肌梗死(MI)、不穩(wěn)定心絞痛、紐約心臟協(xié)會(NYHA) 標準II類以上的充血性心力衰竭(CHF)，或不可控的高血壓。有癲癇病史或目前正在服用抗癲癇藥物。研究方式卡鉬(Paraplatin丨 ，NSC#241240)配方卡鉬是以無菌凍干粉末的形式提供，裝在含50mg、150mg和450mg卡鉬的單 劑量小瓶內(nèi)供靜脈輸注。每個小瓶含有相等重量份數(shù)的卡鉬和甘露醇。溶液制備在即將使用前，每個小瓶的內(nèi)容物必須用美國藥典注射級無菌水、5% 葡萄糖水溶液，或美國藥典0. 9%氯化鈉注射液按照下表配成溶液小瓶含量稀釋體積_50mg5ml150mg15ml450mg45ml這些稀釋過程都將形成10mg/ml的卡鉬濃度。注鋁能與卡鉬反應從而導致沉淀的形成和失效。因此，可能與藥物接觸的含有鋁 質(zhì)零件的針頭或靜脈給藥裝置不得用于卡鉬的制備或給藥。儲存當在受控的室溫和避光條件下儲存時，未開封的卡鉬小瓶是穩(wěn)定的，其壽命 見包裝所示。穩(wěn)定性當按照指示制備時，卡鉬溶液在室溫下能保持穩(wěn)定8小時。由于配方中不 含抗菌防腐劑，因此建議在稀釋后8小時丟棄卡鉬溶液。/A Bristol-Myers Squibb Comp￡iriy_i|。紫杉醇(Taxol ，NSC#673089)配方紫杉醇是從Taxus baccata提取的難溶植物產(chǎn)品。改善溶解度要求進一步 用0. 9%氯化鈉或5%葡萄糖水溶液稀釋的混合溶劑體系。紫杉醇以無菌濃縮溶液的形式提供，濃度為6mg/ml，盛于5ml小瓶(30mg/瓶)內(nèi)， 溶劑為50%聚氧乙基化蓖麻油(Cremophor EL)和美國藥典級50%無水乙醇。瓶內(nèi)藥物必 須在臨床即將使用前稀釋。它也可以IOOmg和300mg小瓶的形式提供。溶液制備紫杉醇將以適當劑量稀釋于500_1000ml美國藥典級0. 9%氯化鈉注 射液，或美國藥典級(D5W)5%葡萄糖注射液(如果紫杉醇是單一藥物，則500ml即足夠)。由于溶解紫杉醇的Cremophor溶劑會將鄰苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)增塑劑從聚氯乙烯 (PVC)袋和靜脈輸液管中浸出，紫杉醇必須在玻璃或聚烯烴容器內(nèi)制備。注在紫杉醇制備完畢后，在溶液中觀察到少量纖維的形成(在美國藥典小容量 注射液微粒試驗規(guī)定的可接受限度內(nèi))。因此，在紫杉醇溶液給藥時有必要進行在線過濾。 應在靜脈輸液通路上遠離輸液泵處設置一個孔徑不大于0. 22微米的親水性微孔過濾器 (例如IVEX-II、IVEX-HP或類似裝置)，以實現(xiàn)在線過濾。雖然微粒的形成并不表示藥物失 效，但不應使用有過多微粒形成的溶液。儲存完好無損的小瓶可在原包裝內(nèi)于20-25°C (36-77 T )的溫度范圍儲存。冷 凍或冷藏不會給產(chǎn)品穩(wěn)定性造成不良反應。穩(wěn)定性盡管當按照上述步驟制備時，紫杉醇溶液(0. 3-1. 2mg/ml)在環(huán)境溫度 (約25°C )和室內(nèi)照明條件下在物理和化學上可保持穩(wěn)定27小時，但所有紫杉醇溶液都略 帶混濁，其程度與藥物濃度和制備后的時間長短成正比。供應商可從 Bristol-Myers Squibb Company 購得。給藥在適當?shù)膭┝亢拖♂寳l件下，紫杉醇將以3小時連續(xù)靜脈輸注的形式給藥。 紫杉醇將通過使用非聚氯乙烯管材和接頭的輸液控制裝置(泵)如靜脈輸注硝酸甘油用的 靜脈注射裝置(聚乙烯或聚烯烴)給藥。不應通過正在進行紫杉醇給藥的管線輸注任何其 他藥物。見5. 2節(jié)。BA (4-碘-3-硝基苯甲酰胺)將以BiPar科學公司的名義生產(chǎn)和包裝BA并用經(jīng)BiPar批準的臨床試驗藥物 經(jīng)銷程序經(jīng)銷。BA將以IOml瓶裝單次輸入的液體無菌產(chǎn)品形式提供。BA在25%羥丙 基-β-環(huán)糊精/IOmM磷酸鹽緩沖溶液中配制，ρΗ值為7. 4，活性成分濃度為10mg/ml。每 瓶含有不少于9. Oml的可提取量。研究藥物標簽上的信息將遵照美國食品與藥物管理局 (FDA)的ICH要求。BA散裝瓶將以每箱10瓶的硬紙箱運輸，且用單張標簽標識。該標簽 將包含以下信息美國關于研究性藥物的告誡用語、研究編號、產(chǎn)品名稱、濃度、儲存注意事 項、再次測試日期，以及研究贊助商名稱。溶液制備BA將按照如下所述步驟制備并以靜脈方式給藥，為時一小時用受試者的基線體重乘以劑量水平以計算給藥所需的BA量(4mg/kg)。例如受試者基線體重=70kg劑量=4mg/kg所需劑量=(4mg/kgx70kg)= 280mg BA用所需的BA劑量除以小瓶內(nèi)BA濃度(10mg/ml)，以確定給藥所需的BA藥品的毫 升數(shù)。例如280mg+ 10mg/mL = 28mL按每瓶IOml計算BA小瓶的數(shù)量，以獲得所需的體積。(在此例中，將需要3瓶。) 為了得到所需體積的BA，必要時可使用更多小瓶。按照如下所述，用注射器從小瓶吸取適當體積BA藥品并在準備靜脈輸注袋時擱
置一旁。推薦在靜脈輸注袋內(nèi)總共裝入250ml溶液，給藥時間為一小時。使用0. 9%生理鹽 水或D5W為靜脈輸注溶液。如果用含有250ml以上溶液的靜脈輸注袋開始輸注，則移去并丟棄過量的溶液，再將全部藥品加入到該溶液。將計算量的BA藥品注入靜脈輸注袋，并確 保充分混合。接上靜脈輸注管并用該溶液置換一下。注也可使用一個空的靜脈輸注袋，注 入算出的BA量，然后添加0. 9%生理鹽水或5DW直至達到250ml總體積。對于BA體積大于 50ml的情況，這種做法可能很有用。儲存BA藥瓶必須在2-8°C的溫度下避光保存。將藥瓶保存在原紙箱內(nèi)并置入一 個2-8°C溫控裝置內(nèi)。根據(jù)需要，BA可于25°C溫度下儲存24小時。如果確定以前BA未在 這些儲存條件下處理，請馬上與BiPar公司聯(lián)系。未經(jīng)BiPar公司授權，不要使用未在推薦 儲存條件下儲存的藥品。穩(wěn)定性BA應在制備后8小時內(nèi)給藥。在給受試者給藥前，該輸注溶液應保存在 環(huán)境溫度(室溫)下。供應商BiPar Sciences Inc.治療計劃每21天于第1天在輸注卡鉬30分鐘(AUC = 6. 0)之后，輸注175mg/m2紫杉醇， 為時3小時，從第1天起每周兩次按4mg/ml/kg劑量加注BA，為時1小時(BA給藥必須至少 相隔2天)，直至病情進展或不良反應限制進一步治療。這段三星期的時間被認為是一個治 療周期。達到完全臨床應答以后的周期數(shù)將由治療醫(yī)生決定。不符合病情進展標準(局部 應答或病情穩(wěn)定)的患者，應繼續(xù)接受研究治療，直至受到毒性的限制。卡鉬的給藥劑量使用根據(jù)杰利夫(JellifTe)公式評估的腎小球濾過率(GFR)， 以濃度曲線下的目標面積(AUC)乘以時間，按照卡爾弗特(Calvert)公式計算劑量。初始 劑量將為經(jīng)30分鐘輸注AUC = 6?？ㄣf的初始劑量必須用GFR計算。在沒有新的腎功能障礙或其他高于或等于 CTCAE 3. 0版第2級(血清肌酐> 1. 5 XULN)腎毒性情況下，對隨后的周期不會重新計算卡 鉬的劑量，但將根據(jù)說明進行調(diào)整。對于血清肌酐異常低(低于或等于0. 6mg/dl)的患者，由于蛋白質(zhì)攝入量減少和 /或肌肉質(zhì)量降低，應使用0. 6mg/dl最低值來估計肌酐清除率。如果在4星期的治療期間 有更合適的基線肌酐值，也可用它來進行GFR的初步評估?？柛ヌ毓娇ㄣf劑量(mg)=目標AUCX (GFR+25)。出于本試驗方案的目的，GFR被認為是等同于肌酐清除率。肌酐清除率(Ccr)是根 據(jù)杰利夫方法使用下面的公式估計的{98-
}Ccr = 0.9XScr，其中Ccr =估計的肌酐清除率(ml/min)；年齡=患者年齡(年)(20-80) ；Scr =血清肌酐(mg/dl)。 在沒有新的腎功能障礙或血清肌酐高于1.5XULN(CTCAE 3. 0版第2級)的情況下，對隨后 的周期不會重新計算卡鉬的劑量，但將根據(jù)說明的血液學標準或其他情況進行調(diào)整。建議的化療管理方法可以在門診實施該方案。將輸注紫杉醇3小時，隨后是30 分鐘的卡鉬，然后是1小時的BA。BA將以靜脈輸注方式給藥(輸注1小時)，研究期間每周 兩次。BA的給藥必須間隔至少2天(例如可于星期一 /星期四、星期一 /星期五，或星期二 /星期五給藥)。對于第1天的紫杉醇和卡鉬治療，建議制訂止吐方案。所用的止吐方案應 基于同行評審的共識準則。對于僅用BA的治療，不需要使用預防性止吐藥。紫杉醇的預備療程在本研究中，紫杉醇將以輸注3小時的方式給藥。對于所有施 用紫杉醇的周期，建議采用紫杉醇預備療程，以降低與過敏反應相關的風險。此療程應包括地塞米松(靜脈輸注或口服)、抗組胺Hl (如苯海拉明)以及抗組胺H2(如西咪替丁、雷尼 替丁，或法莫替丁)。用于劑量計算的最大身體表面積將為2. Om2。如果副作用不嚴重，患者可無限期地使用研究藥物，由研究主持人決定。達到完全 臨床應答的患者可根據(jù)治療醫(yī)生的決定再繼續(xù)更多的周期。評價標準緩解參數(shù)(Parametersof Response)-RECIST 標準可測量的疾病是指至少有一個可在至少一個方向(將要記錄的最長尺寸)準確測 量的病變。用常規(guī)技術包括觸診、X射線平片、CT和MRI測量時，每個病變必須> 20mm,或 用螺旋CT測量時，每個病變必須> 10mm?！鞍小焙汀胺前小辈∽兊幕€記錄應將代表所涉及全部器官的所有可測量病變，按每個器官計最多5處病變、總計 10處病變，鑒定為靶病變，并在基線處予以記錄和測量。靶病變的選擇應根據(jù)它們的大小 (具有最大尺寸的病變)以及是否適合用可重復的測量手段(成像技術或臨床測量)精確 測量。將計算所有靶病變的最大尺寸(LD)的總和并作為基線LD總和報告。該基線LD總 和將作為進一步表征可測量疾病的客觀腫瘤應答的參考。全部其他病變(或疾病部位)應當被鑒定為非靶病變并也應當在基線處予以記 錄。不需要進行測量，但應跟蹤這些病變并記錄為“存在”或“不存在”。所有疾病狀況的基線評價應當盡可能接近于治療開始時的評價且決不能早于治 療開始前4周進行。最佳應答(best response)需要測量每個病變的最長尺寸以便跟蹤病情。根據(jù)這些尺寸總和的變化可以估計 腫瘤大小的變化以及治療療效。所有疾病都必須用同樣的技術作為基準來評估。某一病例 的上述變化，應以該患者參加此研究后所達到的最佳應答來報告。完全緩解(CR)是指所有靶病變和非靶病變均消失，而且在相隔至少4周的兩次病 情評估中沒有新病變的證據(jù)。部分緩解(PR)是指以基線LD總和為參考，所有可測量的靶病變的最長尺寸(LD) 總和至少下降30%。不能有非靶病變的明確進展，也不能有新的病變。要求兩次病情評估 至少相隔4周。在唯一的靶病變是經(jīng)體檢測量的孤立盆腔腫塊(不能用放射成像測量)的 情況下，要求LD下降50%?！凹觿〉募膊　笔侵敢宰钚D總和為參考，靶病變的LD總和增加至少20%，或在 參加研究8周內(nèi)出現(xiàn)新病變。根據(jù)治療醫(yī)生的意見，在參加研究8周內(nèi)出現(xiàn)非靶病變的明 確進展(而不是無腫瘤起源細胞學證據(jù)的胸腔積液)，也被視為加劇的疾病(在這種情況下 必須提供解釋)。在唯一的靶病變是經(jīng)體檢測量的孤立盆腔腫塊(不能用放射成像測量) 的情況下，要求LD上升50%。癥狀惡化的定義是由于疾病引起健康狀況的全面惡化，需要改變療法但無客觀的 疾病進展證據(jù)。病情穩(wěn)定是指不符合上述標準的任何情況。無法評估緩解狀況的定義是由于與疾病的癥狀或跡象無關的原因在研究治療開始后未進行重復腫瘤評估。進展(可測量疾病的研究)的定義為下列任何一種以參加研究以來所記錄的最小LD總和為參考，靶病變的LD總和至少增加20%。以參加研究以來所記錄的最小LD總和為參考，在唯一的靶病變是經(jīng)體檢測量的 孤立盆腔腫塊(不能用放射成像測量)的情況下，要求LD上升50%。出現(xiàn)一個或多個新病變。因病死亡但無先前的病情進展客觀記錄。由于疾病引起健康狀況的全面惡化，需要改變療法但無客觀的疾病進展證據(jù)。根據(jù)治療醫(yī)生的意見，現(xiàn)有非靶病變的明確進展，而不是無腫瘤起源細胞學證據(jù) 的胸腔積液(在這種情況下必須提供解釋)。復發(fā)(非可測量疾病的研究)是指自參加臨床研究以來增加的臨床、放射學或組 織學疾病證據(jù)。存活是指從參加研究起至死亡或最后一次接觸為止所觀察到的壽命長度。“無病情進展的存活(Progression-Free Survival)，，(可測量疾病的研究)是指 從參加研究起直至疾病進展、死亡或最后一次接觸的階段。“無病情復發(fā)的存活(Recurrence-Free Survival) ”(不可測量疾病的研究)是指 從參加研究起直至疾病復發(fā)、死亡或最后一次接觸的階段。主觀參數(shù)包括表現(xiàn)狀況、具體癥狀以及副作用根據(jù)CTCAE 3. 0版分級。研究持續(xù)時間患者將接受治療直至疾病進展或無法忍受的毒性介入?；颊呖稍谌魏螘r候拒絕研 究治療。治療后出現(xiàn)完全臨床應答的患者將根據(jù)治療醫(yī)生的決定繼續(xù)接受更多周期的治 療。局部應答或病情穩(wěn)定的患者應繼續(xù)接受治療，除非無法忍受的毒性妨礙進一步治療。所有患者將接受治療(并填寫所有要求的病例報告表)直至病情進展或研究撤 消。然后，患者在頭兩年將每隔3個月接受一次隨訪(包括體檢和病史)，在隨后的3年內(nèi) 每隔6個月接受一次隨訪。在這5年期間，將監(jiān)測延遲毒性并了解患者的存活情況?；颊?須向GOG統(tǒng)計和數(shù)據(jù)中心提交問答卷，除非撤回同意書。實施例9 4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)與、輻射的組合從ATCC獲得三重陰性乳腺癌細胞MDA-MB-468并在含有10 %胎牛血清的 Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細胞以每只PlOO細胞培養(yǎng)皿IO5個細胞或以每只 P60細胞培養(yǎng)皿IO4個細胞在不同濃度的化合物或DMSO對照存在條件下鋪種。在處理后， 使用Coulter計數(shù)器并通過用1 %亞甲藍染色測量貼壁細胞數(shù)。亞甲藍溶于甲醇和水的 50% -50%混合物中。將細胞鋪種于24孔或96孔板中并如計劃那樣處理，抽吸培養(yǎng)基，細 胞用PBS洗滌，在甲醇中固定5-10分鐘，抽吸甲醇并使板完全干燥。添加亞甲藍溶液至孔 中并孵育板5分鐘。移除染色液并用dH20洗滌板直至洗液不再呈藍色。在板完全干燥后， 將少量IN HCl添加至每個孔以提取亞甲藍。使用在600nm的OD讀數(shù)和校準曲線來確定細 胞數(shù)。BA化合物直接從干粉溶解成DMSO中的IOmM儲備液用于每個獨立實驗。用溶媒 (DMSO)的匹配體積/濃度實施對照實驗；在這些對照中，細胞的生長或細胞周期分布未顯
示變化。
PI排斥測定、細胞周期測定、TUNEL測定和BrdU標記測定如上文實施例2中所述 進行。在使用或不使用100 μ M BA的情況下，用3戈瑞γ輻射處理MDA_MB_468癌細胞。 如圖6所示，在人類三重陰性MDA-MB-468乳腺癌細胞中，BA加強了 S-和G2/M細胞周期停 滯，并增強了 Y輻射的抗增殖作用。雖然本文出示和說明了本發(fā)明優(yōu)選的一些實施方案，但對本領域技術人員很明顯 的是，這些實施方案僅是以舉例的方式提供。在不背離本發(fā)明的情況下，本領域技術人員將 可想出許多變化、修改和替代的方案。應該理解，本文所述的本發(fā)明實施方案的各種替代方 案，均可在實踐本發(fā)明的過程中應用。下列權利要求旨在限定本發(fā)明的范圍。這些權利要 求范圍內(nèi)的方法和結構及與其相當?shù)姆椒ê徒Y構也被包含在此范圍內(nèi)。
權利要求
治療患者中ER、PR或HER2中至少一種受體呈陰性的乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少一種PARP抑制劑。
2.權利要求1所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述的至少一種治療效果 是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
3.權利要求1所述的方法，其中與抗腫瘤劑治療相比較，用PARP抑制劑的治療達到了 相當?shù)呐R床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)。
4.權利要求3所述的方法，其中與單獨用抗腫瘤劑的治療相比，臨床受益率的改善為 至少約30%。
5.權利要求1所述的方法，其中PARP抑制劑是PARP-I抑制劑。
6.權利要求5所述的方法，其中該PARP-I抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。
7.權利要求1所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上 可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥O 其中，(1) RpRyRyR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3、R4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總 是氫；或者(2)禮、R2、R3> R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2> R3、 R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且所述的碘總是與作為硝基、亞硝基、羥 基氨基、羥基或氨基的禮、&、1 3、1 4或1 5取代基相鄰。在一些實施方案中，在(2)的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一些 實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4或 R5基團相鄰。
8.權利要求1所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
9.權利要求1所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
10.權利要求1所述的方法，其中所述乳腺癌的ER、冊或HER2中至少一種呈陰性；且 其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
11.權利要求1所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
12.權利要求1所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
13.權利要求1所述的方法，其中治療包括至少11天的治療周期，其中在該治療周期的 第1、4、8和11天，患者接受約1至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
14.權利要求13所述的方法，其中4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、或胃腸外注射或 輸注，或吸入給藥。
15.權利要求13所述的方法，其中治療周期為約11天至約30天。
16.權利要求1所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與至少一種抗 腫瘤劑組合。
17.權利要求16所述的方法，其中該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫 瘤抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激 酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生 成抑制劑、分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90 抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲異 構酶抑制劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥學 上可接受的鹽。
18.權利要求16所述的方法，其中抗腫瘤劑是西他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西他濱。
19.權利要求16所述的方法，其中抗腫瘤劑選自貝伐單抗、舒尼替尼、索拉非尼、西地 尼布、ABT-869、阿西替尼、伊立替康、拓撲替康、紫杉醇、多西紫杉醇、拉帕替尼、曲妥單抗、 拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氟維司群、表皮生長因 子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單抗、胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)抑制劑， 以及 CP-751871。
20.權利要求16所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與至少一種抗 腫瘤劑組合。
21.權利要求16所述的方法，其中在給藥PARP抑制劑之前、同時或之后給藥抗腫瘤劑。
22.權利要求1所述的方法，該方法進一步包括手術、放射治療、化學治療、基因治療、 DNA治療、病毒治療、RNA治療、DNA治療、輔助性治療、新輔助性治療、免疫治療、納米治療或 其組合。
23.權利要求1所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與γ輻射組I=I O
24.在需要治療的患者中治療ER、冊或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法，包括(a)從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項 ⑴該癌癥是ER陽性還是ER陰性； (iii)該癌癥是PR陽性還是PR陰性； (iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果測試表明該癌癥的ERJR或HER2中至少一種呈陰性，則使用至少一種PARP抑 制劑治療患者。
25.權利要求24所述的方法，如果滿足下列兩種或更多種條件，則該方法進一步包括 使用至少一種PARP抑制劑治療患者(a)該癌癥呈ER陰性，(b)該癌癥呈ra陰性，(c)該癌癥呈HER2陰性。
26.權利要求24所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述的至少一種治療效 果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
27.權利要求24所述的方法，其中該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。
28.權利要求24所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥 式(IIa)其中(1) RpRyRyR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中RpRyRyR4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總是 氫；或者(2)禮、R2、R3、RjPR5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2、R3、R4 和&這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述的碘總是與作為硝基、亞硝基、 羥基氨基、羥基或氨基的隊、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰。在一些實施方案中，在⑵的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的Ri、R2、R3、R4或R5基團相鄰；在一些實 施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4或R5 基團相鄰。
29.權利要求24所述的方法，其中所述樣品是組織或體液樣品。
30.權利要求29所述的方法，其中所述樣品是腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹膜液 樣品、滲出液或積液。
31.權利要求24所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
32.權利要求24所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
33.權利要求24所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且 其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
34.權利要求24所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
35.權利要求24所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
36.權利要求24所述的方法，其中治療包括選擇至少11天的治療周期，且在該治療周 期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾 含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
37.權利要求24所述的方法，其中4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、或胃腸外注射或輸注，或吸入給藥。
38.治療患者中ERJR或HER2中至少一種呈陰性的乳腺癌的方法，包括(a)測試取自患者的樣品的PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患者給藥至少一種PARP抑制劑。
39.權利要求38所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述的至少一種治療效 果是腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
40.權利要求38所述的方法，其中該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。
41.權利要求38所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥 其中(1) RpRyRyR4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，其余的取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3、R4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總 是氫；或者(2)禮、R2、R3> R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2> R3、 R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝基、 羥基氨基、羥基或氨基的隊、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰。在一些實施方案中，在⑵的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一些 實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4或 R5基團相鄰。
42.權利要求38所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
43.權利要求38所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
44.權利要求38所述的方法，該方法進一步包括測定取自患者的樣品的雌激素受體、 孕酮受體或人表皮生長因子2受體的表達。
45.權利要求38所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且 其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
46.權利要求38所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
47.權利要求38所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
48.權利要求38所述的方法，其中該樣品是組織或體液樣品。
49.權利要求38所述的方法，其中治療包括選擇至少11天的治療周期，且在該治療周 期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾 含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
50.權利要求49所述的方法，其中4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、或胃腸外注射或 輸注，或吸入給藥。
51.治療患者乳腺癌的方法，包括向患者給藥至少一種PARP抑制劑與至少一種抗腫瘤 劑組合。
52.權利要求51所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述至少一種治療效果 是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
53.權利要求51所述的方法，其中與用抗腫瘤劑但不用PARP抑制劑進行治療相比較， 臨床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)得到改善。
54.權利要求53所述的方法，其中臨床受益率的改善為至少約60%。
55.權利要求51所述的方法，其中該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝 產(chǎn)物。
56.權利要求51所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥 式(IIa)其中(1) R1,R2,R3^R4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，且其余取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3、R4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總 是氫；或者(2)禮、R2、R3> R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2> R3、 R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝基、 羥基氨基、羥基或氨基的隊、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰。在一些實施方案中，在⑵的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5取代基相鄰。在一 些實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4 或R5基團相鄰。
57.權利要求51所述的方法，其中該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫 瘤抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激 酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生 成抑制劑、分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90 抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲異 構酶抑制劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥學 上可接受的鹽。
58.權利要求51所述的方法，其中的抗腫瘤劑是西他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西他濱。
59.權利要求51所述的方法，其中該抗腫瘤劑選自貝伐單抗、舒尼替尼、索拉非尼、西 地尼布、ABT-869、阿西替尼、伊立替康、拓撲替康、紫杉醇、多西紫杉醇、拉帕替尼、曲妥單 抗、拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氟維司群、表皮生 長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單抗、胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)抑制 劑，以及 CP-751871。
60.權利要求51所述的方法，該方法進一步包括手術、放射治療、化學治療、基因治療、 DNA治療、病毒治療、DNA治療、輔助性治療、新輔助性治療、RNA治療、免疫治療、納米治療或 其組合。
61.權利要求51所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與γ輻射組I=I O
62.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
63.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
64.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌是HR陰性乳腺癌。
65.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性。
66.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且 其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
67.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
68.權利要求51所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
69.權利要求51所述的方法，其中治療包括至少11天的治療周期，其中(a)在該周期的第1天和第8天，患者接受約100-5000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患者接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該治療周期的第1、4、8和11天，患者接受約1至約100mg/kg的4-碘-3-硝基 苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
70.權利要求69所述的方法，其中治療周期為約11天至約30天。
71.權利要求69所述的方法，其中在該周期的第1天和第8天，患者接受約 100-2500mg/m2的吉西他濱和約10至約400mg/m2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11 天，患者接受約1至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
72.權利要求69所述的方法，其中在該周期的第1天和第8天，患者接受約 500-2000mg/m2的吉西他濱和約50至約400mg/m2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11 天，患者接受約1至約50mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
73.權利要求69所述的方法，其中在該周期的第1天和第8天，患者接受約lOOOmg/m2 的吉西他濱和約AUC 2的卡鉬；以及在該周期的第1、4、8和11天，患者接受約1、2、3、4、6、 8或10、12、14、16、18或20mg/kg的4-碘-3-硝基苯甲酰胺。
74.權利要求51所述的方法，其中抗腫瘤劑以胃腸外注射或輸注給藥。
75.權利要求51所述的方法，其中PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺，其以口服、 或胃腸外注射或輸注，或吸入給藥。
76.權利要求51所述的方法，進一步包括以胃腸外注射或輸注的方式向患者給藥紫杉焼。
77.在需要治療的患者中治療乳腺癌的方法，包括7(a)從患者獲取樣品；(b)測試該樣品以確定以下每一項 (i)該癌癥是ER陽性還是ER陰性； ( )該癌癥是PR陽性還是PR陰性； (iii)該癌癥是HER2陽性還是HER2陰性；(c)如果測試表明該癌癥的ERJR或HER2中至少一種呈陰性，則使用治療劑的組合治 療患者，其中治療劑包括至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑。
78.權利要求77所述的方法，如果滿足以下兩種或更多種條件，則進一步包括用治療 劑的組合治療患者，其中的治療劑包括至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫瘤劑(a)該癌癥呈ER陰性，(b)該癌癥呈ra陰性，(c)該癌癥呈HER2陰性。
79.權利要求77所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述至少一種治療效果 是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
80.權利要求77所述的方法，其中與用抗腫瘤劑但不用PARP抑制劑進行治療相比較， 臨床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)得到改善。
81.權利要求80所述的方法，其中臨床受益率為至少約60%。
82.權利要求77所述的方法，其中該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝 產(chǎn)物。
83.權利要求77所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥 式(IIa)其中(1) R1,R2,R3^R4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，且其余取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3、R4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總 是氫；或者(2)禮、R2、R3> R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2> R3、 R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝基、 羥基氨基、羥基或氨基的隊、&、1 3、1 4或1 5基團相鄰。在一些實施方案中，在⑵的化合物 中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一些 實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4或 R5取代基相鄰。
84.權利要求77所述的方法，其中該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗腫瘤抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸激 酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生 成抑制劑、分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90 抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲異 構酶抑制劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥學 上可接受的鹽。
85.權利要求77所述的方法，其中所述抗腫瘤劑是西他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西 他濱。
86.權利要求77所述的方法，其中該抗腫瘤劑選自貝伐單抗、舒尼替尼、索拉非尼、西 地尼布、ABT-869、阿西替尼、伊立替康、拓撲替康、紫杉醇、多西紫杉醇、拉帕替尼、曲妥單 抗、拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氟維司群、表皮生 長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單抗、胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)抑制 劑，以及 CP-751871。
87.權利要求77所述的方法，進一步包括手術、放射治療、化學治療、基因治療、DNA治 療、輔助性治療、新輔助性治療、病毒治療、RNA治療、免疫治療、納米治療或其組合。
88.權利要求77所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與γ輻射組合。
89.權利要求77所述的方法，其中該樣品是組織或體液樣品。
90.權利要求77所述的方法，其中所述樣品是腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹膜液 樣品、滲出液或積液。
91.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
92.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
93.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性。
94.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性；且 其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
95.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
96.權利要求77所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
97.權利要求77所述的方法，其中抗腫瘤劑以胃腸外注射或輸注給藥。
98.權利要求77所述的方法，其中4-碘-3-硝基苯甲酰胺是以口服、或胃腸外注射或 輸注，或吸入給藥。
99.治療患者乳腺癌的方法，包括(a)測試取自患者的樣品的PARP表達；以及(b)如果PARP表達超過預定水平，則向患者給藥至少一種PARP抑制劑和至少一種抗腫 瘤劑。
100.權利要求99所述的方法，其中獲得了至少一種治療效果，所述的至少一種治療效 果是乳腺腫瘤尺寸縮小、轉移減少、完全緩解、部分緩解、病情穩(wěn)定，或病理學完全應答。
101.權利要求99所述的方法，其中與用抗腫瘤劑但不用PARP抑制劑進行治療相比較， 臨床受益率(CBR = CR+PR+SD彡6個月)得到改善。
102.權利要求101所述的方法，其中臨床受益率的改善為至少約60%。
103.權利要求99所述的方法，其中該PARP抑制劑是4-碘-3-硝基苯甲酰胺或其代謝產(chǎn)物。
104.權利要求99所述的方法，其中該PARP抑制劑為式(IIa)或其代謝產(chǎn)物；及其藥學上可接受的鹽、溶劑合物、異構體、互變異構體、代謝產(chǎn)物、類似物、或前藥 C——NH2 R3式(IIa)其中(1) R1,R2,R3^R4和R5取代基中至少有一個取代基總是含硫取代基，且其余取代基 隊、1 2、1 3、1 4和R5獨立地選自氫、羥基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧 基、(C3-C7)環(huán)烷基以及苯基，其中禮、R2> R3、R4和R5這5個取代基中至少有兩個取代基總 是氫；或者(2)禮、R2、R3> R4和R5取代基中至少有一個取代基不是含硫取代基，且禮、R2> R3、 R4和R5這5個取代基中至少有一個取代基總是碘，且其中所述碘總是與作為硝基、亞硝基、 羥基氨基、羥基或氨基的禮、&、1 3、1 4或1 5取代基相鄰。在一些實施方案中，在(2)的化合 物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基、羥基或氨基的禮、R2> R3、R4或R5基團相鄰。在一 些實施方案中，在(2)的化合物中，碘基總是與作為亞硝基、羥基氨基或氨基的RpRpRyR4 或R5基團相鄰。
105.權利要求99所述的方法，其中該抗腫瘤劑是抗腫瘤烷化劑、抗腫瘤抗代謝劑、抗 腫瘤抗生素、植物來源的抗腫瘤劑、抗腫瘤鉬絡合物、抗腫瘤喜樹堿衍生物、抗腫瘤酪氨酸 激酶抑制劑、單克隆抗體、干擾素、生物反應調(diào)節(jié)劑、激素型抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管 生成抑制劑、分化誘導劑、PI3K/mT0R/AKT抑制劑、細胞周期抑制劑、細胞凋亡抑制劑、hsp 90抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪氨酸激酶抑制劑、拓撲 異構酶抑制劑、紫杉烷、靶向Her-2的藥物、激素拮抗劑、靶向生長因子受體的藥物，或其藥 學上可接受的鹽。
106.權利要求99所述的方法，其中抗腫瘤劑是西他濱、卡培他濱、瓦洛他濱或吉西他濱。
107.權利要求99所述的方法，其中該抗腫瘤劑選自貝伐單抗、舒尼替尼、索拉非尼、 西地尼布、ABT-869、阿西替尼、伊立替康、拓撲替康、紫杉醇、多西紫杉醇、拉帕替尼、曲妥單 抗、拉帕替尼、他莫昔芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氟維司群、表皮生 長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼單抗、胰島素樣生長因子1受體(IGFlR)抑制 劑，以及 CP-751871。
108.權利要求99所述的方法，進一步包括手術、放射治療、化學治療、基因治療、DNA治 療、輔助性治療、新輔助性治療、病毒治療、RNA治療、免疫治療、納米治療或其組合。
109.權利要求99所述的方法，該方法進一步包括向患者給藥PARP抑制劑與γ輻射組I=I O
110.權利要求99所述的方法，其中該樣品是組織或體液樣品。
111.權利要求99所述的方法，其中所述樣品是腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹膜液 樣品、滲出液或積液。
112.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌是轉移性乳腺癌。
113.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌處于I期、II期或III期。
114.權利要求99所述的方法，該方法進一步包括測定取自患者的樣品的雌激素受體、 孕酮受體或人表皮生長因子2受體的表達。
115.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌的ERJR或HER2中至少一種呈陰性。
116.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌的ER、冊或HER2中至少一種呈陰性； 且其中所述乳腺癌的ER、PR或HER2中至少一種呈陽性。
117.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌是同源重組DNA修復缺陷型。
118.權利要求99所述的方法，其中所述乳腺癌具有損傷的BRCAl或BRCA2功能。
119.權利要求99所述的方法，其中治療包括至少11天的治療周期，且(a)在該周期的第1天和第8天，患者接受約100-2000mg/m2的吉西他濱；(b)在該周期的第1天和第8天，患者接受約10至約400mg/m2的卡鉬；以及(c)在該治療周期的第1、4、8和11天，患者接受約10至約100mg/kg的4-碘-3-硝基 苯甲酰胺或其摩爾含量相當?shù)拇x產(chǎn)物。
120.權利要求99所述的方法，其中抗腫瘤劑以胃腸外注射或輸注給藥。
121.權利要求99所述的方法，其中4-碘-3-硝基苯甲酰胺以口服、或胃腸外注射或輸 注，或吸入給藥。
全文摘要
在一個方面中，本發(fā)明提供了治療ER、PR或HER2中至少一項呈陰性的乳腺癌的方法，包括向受試者給藥至少一種PARP抑制劑。在另一方面中，本發(fā)明提供了治療乳腺癌的方法，包括向受試者給藥至少一種PARP抑制劑與至少一種抗癌藥物組合。
文檔編號A61K31/166GK101917982SQ200880124571
公開日2010年12月15日 申請日期2008年11月11日 優(yōu)先權日2007年11月12日
發(fā)明者巴里·M·舍曼, 查爾斯·布拉德利, 瓦萊里婭·S·奧索夫斯卡亞 申請人:彼帕科學公司