專利名稱：：結(jié)晶噠嗪化合物的制作方法結(jié)晶噠嗪化合物
背景技術(shù)：
：丙型肝炎病毒是黃病毒科的有包膜的、單鏈的、正義RNA病毒。HCV主要在肝臟的肝細胞內(nèi)復(fù)制。循環(huán)的HCV粒子結(jié)合于肝細胞表面上的受體肝細胞并且隨后進入細胞。一旦處于肝細胞內(nèi)部，HCV利用實現(xiàn)其自身復(fù)制所需的細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)。Lindenbach，B.Nature436(7053):932-8(2005)。HCV基因組經(jīng)過翻譯以產(chǎn)生大約3011個氨基酸的單個蛋白質(zhì)。這個"多蛋白"然后由病毒和細胞蛋白酶類進行蛋白水解處理，以產(chǎn)生三種結(jié)構(gòu)蛋白(與病毒粒子相關(guān)的)和七種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS)。HCV編碼兩種蛋白酶類，NS2半胱氨酸自體蛋白酶(autoprotease)和NS3-4A絲氨酸蛋白酶。然后NS蛋白質(zhì)將病毒基因組補充到RNA復(fù)制復(fù)合物中，這通常與重排的細胞質(zhì)膜有關(guān)。RNA復(fù)制通過NS5B的病毒RNA依賴性的RNA聚合酶進行，產(chǎn)生負鏈的RNA中間體。然后負鏈RNA作為模板，用于產(chǎn)生新的正鏈病毒基因組。然后初生的基因組經(jīng)過翻譯，進一步復(fù)制，或在新的病毒顆粒內(nèi)包裝。新的病毒顆粒有可能芽接到分泌途徑中，并且在細胞表面釋放。HCV具有高的復(fù)制速率，其中被感染的個體每天產(chǎn)生大約1萬億個粒子。由于缺乏HCVRNA聚合酶的校對，HCV還具有特別高的突變率，這是有助于使其逃避宿主的免疫應(yīng)答的因素?；贖CV分離物之間的遺傳學(xué)差異，丙型肝炎病毒種類被分為六個基因型(1-6)，每個基因型內(nèi)含若干亞型。亞型進一步基于它們的遺傳多樣性而劃分為準種。在全球，占優(yōu)勢的HCV基因型以及HCV基因型的分布是不同的。例如，在北美洲，基因型la占優(yōu)勢，隨后是1、2a、2b、和3a。在歐洲，基因型1占優(yōu)勢，隨后是2a、2b、2c、和3a?；蛐?和5幾乎唯一地在非洲出現(xiàn)?；蛐蛯τ诖_定對基于干擾素的治療的潛在應(yīng)答以及這種治療的所需的持續(xù)時間來說在臨床上是重要的。相對于其它基因型(2、3、5和6)，基因型1和4對基于干擾素的治療應(yīng)答較差。用于基因型1和4的標準的基于干擾素治療的持續(xù)時間是48周，而用于基因型2和3的治療只有24周。世界衛(wèi)生組織估計，全世界有1.7-2億人(世界人口的3%)長期地感染HCV。這些個體中大約75X是慢性感染，在他們的血漿中具有可檢測的HCVRNA。這些長期帶菌者處于發(fā)展為用于硬化和/或肝癌的危險之中。在7-16年的隨訪研究中，7-16%的患者發(fā)展為用于硬化，O.7-1.3%發(fā)展為肝細胞癌和1.3-3.7%死于肝臟相關(guān)疾病。現(xiàn)在可得到的唯一的治療選擇是單獨使用或與利巴韋林合用干擾素a_2(或其聚乙二醇化的形式)。然而，僅在約40%的患者中觀察到持續(xù)的應(yīng)答，并且治療涉及嚴重的副作用。因此，急需有效的和選擇性的HCV抑制劑。相關(guān)的公開包括美國專利號4，914，108、4，988，707、4，990，518、5，137，896、5，208，242、5，227，384、5，302，601、5，374，638、5，405，964、5，438，063、5，486，525、6,479,508，和美國專利公開US2003/0108862Al，加拿大專利號2423800Al，德國專利號4211474A1、4236026、4309969、4318813，歐洲專利號EP0138552A2、EP0706795A2、EP1132381A1，英國專利號2158440A，PCT專利公開號WO00/20416、WO00/39127、4WO00/40583、WO03/007945Al、W003/010140A2、WO03/010141A2、WO93/02080、WO93/14072、WO96/11192、WO96/12703、WO99/27929、PCT-US2004/43112、PCT-BE2003/000117、PCT-US2005/26606，Akamatsu，等人，"NewEfficientRouteforSolid-PhaseSynthesisofBenzimidazoleDerivatives〃，4:475-483，J.COMB.CHEM.，2002;BaginskiSG等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2000Jul5、97(14):7981-6);Cleve等人，〃DerivatedesImidazo[4.5_b]_imdlmidazo[4.5-c]pyridins〃，747:158-171，JUSTUSLIEBIGSANNALENDERCHEMICA，1971;Kiyama，等人，〃SynthesisandEvaluationofNovelNonpeptideAngiotensinIIReceptorAntagonists:Imidazo[4，5_c]pyridineDerivativeswithanAromaticSubstituent"，43(3):450-60，CHEMPHARMBULL,1995;Mederski等人，〃SynthesisandStructuralAssignmentofSomeN-substitutedImidazopyridineDerivatives"，48(48):10549-58，TETRAHEDRON,1992;Yutilov等人，23(1):56-9，KHIMIKO-FA薩TSEVTICHESKIIZHURNAL，1989。另夕卜，參見W005/063744。式(1)的化合物是WO08/005519的主題。(1)通過WO05/063744的方法生產(chǎn)的化合物(1)基本上或完全是無定形的。認為其是一種水合物(以下稱為"無定形的"化合物(l))。本發(fā)明的目的是提供結(jié)晶型式的化合物(1)。
發(fā)明內(nèi)容根據(jù)前述的本發(fā)明的目的，提供式(1)的結(jié)晶化合物及其鹽，(1)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其基本上不含無定形的化合物(1)。在實施方案中，結(jié)晶化合物(1)是基本上不含無定形的化合物(1)和化合物(1)的任何其它晶型的游離堿。本發(fā)明的另一個實施方案是制備結(jié)晶化合物(1)的方法，包括使化合物(1)從結(jié)晶溶劑中結(jié)晶，以及控制結(jié)晶溶劑中的水的量。在另一個實施方案中，提供了組合物，其包括基本上不含化合物(1)的鹽酸鹽(chloridesalt)的結(jié)晶游離堿化合物(1)。結(jié)晶化合物(1)可用于治療或預(yù)防HCV感染的方法，所述方法包括對受試者給予治療或預(yù)防劑量的結(jié)晶化合物(1)。另一個實施方案包括使用結(jié)晶化合物(1)生產(chǎn)藥物，所述藥物用于預(yù)防或治療哺乳動物(更具體地，人)的HCV感染。本發(fā)明的另一個實施方案涉及式(1)的結(jié)晶化合物的藥物組合物，其包括至少一種藥學(xué)可接受的賦形劑。在一個實施方案中，將式(1)的化合物與有機酸配制，并且任選地配制為藥物劑型，例如膠囊。在另一個實施方案中，結(jié)晶化合物(1)經(jīng)過微粉化，并且配制為懸浮液。本發(fā)明的結(jié)晶化合物(1)或藥物組合物可用于治療或預(yù)防丙型肝炎。結(jié)晶化合物(1)表現(xiàn)出藥理學(xué)特征的改善和成本優(yōu)勢、特別地具有改善的純度、儲藏穩(wěn)定性和生產(chǎn)再現(xiàn)性。一個特別的優(yōu)點在于其具有與無定形形式相比更高的熔點。通過整體考慮本申請，包括新的中間體和產(chǎn)物組合物在內(nèi)的本發(fā)明的其它特征是顯而易見的。附圖簡述圖1描述了通過實施例1的方法得到的結(jié)晶化合物(1)參比標準的X射線粉末衍射(XRPD)圖。圖2描述了得自結(jié)晶化合物(1)的另一個X射線粉末衍射圖。圖3是通過WO08/005519的實施例la的方法得到的無定形形式的化合物(1)ResearchLot6的X射線粉末衍射圖。圖4舉例說明了通過如下實施例1的方法得到的結(jié)晶化合物(1)參比標準的DSC熱分析圖，以1°C/min進行掃描。圖5是通過WO08/005519的實施例la的方法得到的無定形形式的化合物(1)ResearchLot6的DSC熱分析圖，以5°C/min進行掃描。發(fā)明詳述結(jié)晶化合物(1)定義為包括化合物(1)的固體，其中組成分子在所有三個空間維數(shù)中都是以規(guī)律的有序重復(fù)圖案延伸填充。結(jié)晶性的鑒定可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法實現(xiàn)。試驗組合物的顯微鏡檢查經(jīng)常會揭示規(guī)則形狀的存在，表明有序的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。在實施例1中生產(chǎn)的晶體實施方案的情況中，所述規(guī)則形狀通常是棒狀或針狀的。XRPD是用于確定結(jié)晶化合物(1)的另一種方法。晶體中的組成分子的規(guī)則有序結(jié)構(gòu)以獨特的圖案衍射入射的x-射線，其被描述為多個峰的譜。結(jié)晶化合物(1)的峰的圖案顯示在圖1和2中。另一方面，圖3描述了基本上無定形的化合物(1)的XRPD，其沒有獨特的峰。盡管結(jié)晶化合物(1)的XRPD峰在強度方面有所不同，但是在重復(fù)的X射線衍射分析中會產(chǎn)生相同的一般圖案。結(jié)晶化合物(1)表現(xiàn)出在大約17°e20(theta20)的XRPD主峰，通常為17.4和17.5。術(shù)語大約是指在XRDP峰測量的典型偏差范圍內(nèi)。這種偏差可以由使用不同的儀器、儀器組合、產(chǎn)物的批次、結(jié)晶后的處理(例如微粉化或碾磨)、以及不同的樣品制備方法所引起。一般說來，"大約"意味著±0.5°e20。這類偏差的實例可以通過將圖1和圖2進行對比觀察到。特別地，峰強度(例如，大約30的峰強度)可以由于晶體定向效應(yīng)而不同。結(jié)晶化合物(1)的其它主峰的說明性實例為約8、10、13、16、19和24。920，通常為8.4、10.0、13.5、15.7、16.8、16.9、18.8和24.4。這些峰中的任何一個或多個(但是特別是8、10、15.7、16.7和16.9)都適合于限定結(jié)晶化合物(1)的XRDP，無論在大約17有或者沒有峰存在。化合物(1)的晶型的鑒定不需要圖1或2中所看見的任何一個或多個主峰的存在。相反地，主峰的存在或不存在通常與用于確定候選物為結(jié)晶化合物(1)的其它診斷特性(例如DSC熱分析圖)一起考慮。結(jié)晶化合物(1)還通過DSC熱分析圖來表征，DSC熱分析圖揭示在差示掃描量熱圖中在大約235t:吸熱開始。典型地，這個測量值也會出現(xiàn)一些偏差(通?！?_3°C)。結(jié)晶化合物(1)還通過其約81J/g(42KJ/摩爾)的熔化熱(DHf)來表征。通過如下方法制備結(jié)晶化合物(1):將化合物(1)溶解在溶劑中并由其形成晶體。本文中使用的典型的溶劑是乙酸乙酯、異丙醇、或包含乙酸乙酯和異丙醇的共溶劑。其它適合的溶劑得自McConville，F(xiàn).X."PilotPlantRealBook"(2002)中的溶解度圖，所述圖描繪了各種溶劑的介電常數(shù)和Hildebrand溶解度參數(shù)。在圖上與乙醇和異丙醇接近的溶劑(介電常數(shù)2.5-20和Hildebrand15-24)是乙醚、乙酸異丁酯、乙酸丁酯、苯甲醚、氯苯、氯仿、乙酸甲酯、THF、二氯甲烷、二氯乙烷、1，2-二氯苯(dichlorobenzekeh甲基異丁基酮，甲乙酮，環(huán)己酮，丙酮U-丁醇J-甲氧基乙醇、異丁醇、2_丁醇、環(huán)己醇、異戊醇、妣啶、甲酸甲酯U-戊醇、和/或2-丁氧基乙醇?！┤軇┯捎诙拘詥栴}而不是優(yōu)選的，但是這可以通過從產(chǎn)物中仔細地除去溶劑來克服。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠進行實驗室篩選來確定候選溶劑用于制備結(jié)晶化合物(1)的適用性。這些溶劑的組合也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。有助于制備結(jié)晶化合物(1)的一個關(guān)鍵發(fā)現(xiàn)在于，必須控制結(jié)晶溶劑的水含量，以實現(xiàn)和/或優(yōu)化結(jié)晶產(chǎn)物的產(chǎn)生。例如，在使用乙酸乙酯作為溶劑時，水含量的上限為大約0.6重量％-0.9重量％。關(guān)于水含量的另一個考慮是，其用于除去在液體親脂性藥物載體中比結(jié)晶游離堿的溶解性更差的化合物(1)的其它形式。例如，在本文中用作載體的脂肪酸溶液中，化合物(1)的鹽酸鹽比游離堿的溶解性差。在以足夠大量存在時，這種鹽在藥物產(chǎn)品中產(chǎn)生不需要的混濁。實施例1的最終的合成步驟產(chǎn)生游離堿與微量鹽酸鹽的混合物。如下除去產(chǎn)生混濁的鹽酸鹽，首先在堿性的pH下將產(chǎn)物溶解于包含相對高水含量的溶劑中。在這種溶劑中回流確保了有足夠的水將鹽酸鹽反向轉(zhuǎn)化為游離堿。其后，結(jié)晶游離堿從這種溶劑中結(jié)晶。任選地使用降低的水濃度重復(fù)這種方法，以便從產(chǎn)物逐步除去鹽酸鹽。然后使用低的水含量(通常低于約0.9%的水))完成最后一個步驟，以便使基本上不含無定形的化合物(1)的游離堿結(jié)晶。一般來說，在最終產(chǎn)物中的氯化物含量通常低于約100ppm時，藥物制劑中不會出現(xiàn)混濁。所用的水的量隨污染的鹽酸鹽的濃度和本領(lǐng)域技術(shù)人員可測定的其它實驗變量而不同?？傊?，控制結(jié)晶溶劑的水含量，既能夠轉(zhuǎn)化氯化物(或化合物(1)的其它相對水溶性的鹽類)又避免生成無定形的化合物(1)。對于每種作用所允許的水的量隨用于結(jié)晶化的溶劑或多種溶劑、化合物(1)的濃度、結(jié)晶化步驟的溫度、結(jié)晶化的時間、容許的無定形的化合物(1)的量、和其它變量而不同。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員需要確定最佳的水含量，以便獲得期望的結(jié)果，通常通過進行典型的變量矩陣研究來確定。避免生成無定形的化合物(1)的最低水濃度更是現(xiàn)實經(jīng)濟學(xué)上的問題。例如，O.05重量％的水是可接受的?！阏f來，最后的結(jié)晶步驟在基本上無水的溶劑中進行?；旧蠠o水的溶劑定義為溶劑包含十分少量的水，使得得到的產(chǎn)物包含結(jié)晶化合物(1)并且基本上不含無定形的化合物(l)，典型地，在產(chǎn)物組合物的化合物(1)的全部所有形式中包含低于約40重量％，通常低于約30、20、10、5、3、2或1重量％的無定形的化合物(1)。—般說來，基本上無水的溶劑包含結(jié)晶溶劑的約O.5%-0.9重量％的水。然而，如果期望的產(chǎn)物允許包含更大比例的無定形的化合物(l)，則可以存在有更多的水。然而，如果化合物(1)組合物不含可檢測的無定形的化合物(l)，則是最佳的。通過任何方式控制水含量，使得在所涉及的結(jié)晶化步驟中具有適量的水。在避免形成無定形的化合物(1)時，用于使水的量最小化或降低水的量的適用技術(shù)包括添加干燥劑和/或共沸除水。最方便的是在即將結(jié)晶化之前在化合物(1)的回流溶解過程中除去水。當(dāng)然，水含量的控制也包括添加水，在轉(zhuǎn)化鹽酸鹽的步驟過程中情況典型地是這樣的。無定形的化合物(1)任選地被用作結(jié)晶化的原材料(形式轉(zhuǎn)化)?；蛘?，可以從最終的反應(yīng)產(chǎn)物中直接進行結(jié)晶化，而沒有無定形的化合物(1)的中間體回收。典型地如下進行結(jié)晶化提供化合物(1)并在回流下將化合物(1)溶解于溶劑或溶劑混合物中(足以8使化合物(1)溶解，約1-5小時)，隨后在4-8小時內(nèi)冷卻到約18_23°C，然后任選地在大約18-23t:攪拌約8-20小時。攪拌是任選的，但是攪拌增加結(jié)晶化速率?；亓鞑皇顷P(guān)鍵的，因為只需要化合物(1)處于溶液中。然而，使化合物(1)回流具有同時進行迅速溶解化合物(1)和共沸除水的優(yōu)點。在結(jié)晶化開始之前或者在結(jié)晶化過程中或者在結(jié)晶化開始之前和在結(jié)晶化過程中都進行對水的控制，盡管一般而言最好是在任何化合物(1)可以作為無定形的多晶型物沉淀之前將水減至低于期望的極限。通過使用相對更長的結(jié)晶化時間、較高的溫度和較低的化合物(1)濃度優(yōu)化無定形物的生成。各種最佳的結(jié)晶化工藝參數(shù)的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。本文中的一個實施方案是通過如下方法制備的組合物，將結(jié)晶化合物(1)與藥學(xué)可接受的賦形劑合并并形成藥物劑型，例如片劑或膠囊。得到的產(chǎn)物不必包含結(jié)晶化合物(1)。盡管可以預(yù)期由結(jié)晶化合物(1)制成的劑型會僅含結(jié)晶型態(tài)的化合物(1)。然而，在一些實施方案中，結(jié)晶化合物(1)是用于在載體或賦形劑中溶解的中間體。本發(fā)明的結(jié)晶化合物(1)通過本領(lǐng)域中公知的任何方式，S卩，經(jīng)口、鼻內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、非腸道或通過導(dǎo)管法以治療有效量對受試者哺乳動物(包括人)給藥，所述治療有效量即抑制HCV的量或抑制HCV復(fù)制的量。這個量被認為是確保血槳水平為約100nM的量，是經(jīng)過蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)的EC90的3倍。對于人來說，通常預(yù)期通過每天口服給藥約0.5-約5mg/kg體重、典型地約0.7-2.2mg/kg體重、最通常約1.2mg/kg體重來實現(xiàn)。本發(fā)明化合物的最佳劑量取決于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的許多因素，包括給定制劑中的化合物的生物利用度、化合物在受試者中的代謝和分布、受試者的禁食或進食狀態(tài)、制劑中的載體和賦形劑的選擇、以及其它因素。典型地在臨床前和臨床情況中確定適合的劑量，這在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物的治療有效量任選地被分為每天的幾個亞單位，或者每天或以超過一天的間隔給予，這取決于感染的性質(zhì)、患者的一般狀況、和本發(fā)明化合物的制劑。通常，化合物每天給藥兩次。本發(fā)明的化合物與有效對抗HCV感染的其它藥物合作使用。任選地將它們在一系列治療中分別給藥，或者與化合物(1)在單劑型，例如片劑、iv溶液或膠囊中組合。這種其它藥物包括例如干擾素a、利巴韋林、和/或落入EP1162196、WO03/010141、WO03/007945、W000/204425和/或WO03/010140(以及它們的同族專利內(nèi)的其它文件)的公開范圍內(nèi)的化合物。用于在系列治療中與本發(fā)明的化合物一起給藥的其它藥物包括現(xiàn)在處于臨床試驗階段的化合物，特別是HCV蛋白酶抑制齊U，例如VX-950(VertexPharmaceuticals)、SCH5030347(ScheringPlough)和BILN-2061(BoehringerIngelheim)，核苷HCV抑制劑例如NM283、NM107(都來自Idenix/Novartis)和R1626(Hoffmann-LaRoche)，和非核苷HCV抑制劑包括HCV-086和-796(都來自ViroPharma/Wyeth)。補充的抗病毒藥可以以常規(guī)的量使用。如果本發(fā)明化合物和補充的化合物的效力是相加的，則任選地每種活性劑的量相稱地降低，如果所述藥物協(xié)同起作用，則降低的幅度更大。然而，一般說來，各藥物以其在單組分組合物中的普通的活性的量使用。共同給藥的藥物一般與本發(fā)明的化合物配制成單一的組合物，只要它們是化學(xué)上相容的并且用于通過相同的途徑給藥。如果不是，則任選地將它們以兩種藥物包含在單獨的容器或隔室中的醫(yī)用試劑盒或包裝的形式提供。本發(fā)明的化合物典型地作為游離堿提供，但是任選地制備為鹽。典型地通過有機酸和/或無機酸對游離堿的酸加成來制備鹽。實例包括(1)無機酸，例如，氫鹵酸例如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、和氨基磺酸；或(2)有機酸，例如，乙酸、丙酸、羥基乙酸、苯甲酸、2_羥基丙酸、2-氧代丙酸、乳酸、富馬酸、酒石酸、丙酮酸、馬來酸、丙二酸、蘋果酸、水楊酸(例如2-羥基苯甲酸)、對氨基水楊酸、羥乙磺酸、乳糖醛酸、琥珀酸、草酸和檸檬酸；有機的磺酸，例如，甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸，C1-C6烷基磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、和環(huán)己烷氨基磺酸。典型的鹽是鹽酸鹽、硫酸鹽、酸式硫酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、乙磺酸鹽、磷酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、擰檬酸鹽、丙二酸鹽、和/或富馬酸鹽。本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括本發(fā)明化合物與一種或多種氨基酸所形成的鹽，所述氨基酸典型地為天然存在的氨基酸，例如在蛋白質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的氨基酸之一。期望地，酸性的平衡離子是生理學(xué)無害和無毒的，或者以其它方式為藥學(xué)可接受的，除非所述鹽被用作中間體用來制備化合物，從而有無毒性無關(guān)緊要。通常，化合物(1)作為游離堿給藥，但是適合的鹽包括甲磺酸鹽(甲磺酸)和HC1的鹽。本發(fā)明的化合物包括由本發(fā)明的化合物或其鹽所形成的溶劑合物，諸如例如，水合物、乙醇合物等。本發(fā)明藥物組合物任選地使用常規(guī)的藥用載體和賦形劑來配制，所述載體和賦形劑根據(jù)常規(guī)的實踐來選擇。片劑將包含賦形劑、助流劑、填充劑、粘結(jié)劑等。含水制劑從無菌形式制備，并且在設(shè)計用于通過非口服給藥來遞送時，通常是等滲的。制劑任選地包含賦形劑，例如在"HandbookofPharmaceuticalExcipients，，(2005)中闡述的那些，包括抗壞血酸和其它抗氧化劑，螯合劑例如EDTA，碳水化合物例如糊精、羥基烷基纖維素、羥基烷基甲基纖維素，和/或有機酸例如油酸或硬脂酸。本文中使用的術(shù)語"藥學(xué)可接受的載體"是指與活性成分一起配制以便促進其制備和/或及其施用或散布到待治療位置的任何材料或物質(zhì)。用于本發(fā)明組合物中的適合的藥用載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。它們包括添加劑，例如潤濕齊U、分散齊U、粘合齊U、乳化劑、溶劑、助流劑、涂料、抗菌劑、和抗真菌藥(例如，苯酚、山梨酸、三氯叔丁醇)、和等滲劑(例如，糖或氯化鈉)，條件是其符合藥學(xué)實踐，即它們對哺乳動物無毒。本發(fā)明的藥物組合物以任何已知的方式制備，例如通過在單步驟操作或多步驟操作中均勻混合、涂布和/或研磨活性成分以及所選的載體材料以及在適當(dāng)?shù)那闆r下包含其它添加劑例如表面活性劑。配制為微球體(通常直徑為約l-10gm)的包含本發(fā)明化合物的組合物可作為控制釋放制劑或持續(xù)釋放制劑使用。在一個任選的制劑中，將化合物(1)研細為細分散的形式，典型地研細到約1-20微米范圍內(nèi)的任一點的平均粒度。實施例1的產(chǎn)物是棒狀或針狀的，并且表現(xiàn)出典型地約25-40微米的晶體長度。任選地將這些在Jetmi11-00中在大約60-80psi微粉化，以得到約3-4微米且表面積為約7-8平方米/g的粒子。然而，初始的晶體尺寸隨批次的不同而不同，并且微粉化的程度是可以選擇的。因此，經(jīng)過微粉化的結(jié)晶化合物(1)簡單地定義為已經(jīng)經(jīng)過微粉化處理的晶體或無定形的化合物(1)，所述微粉化處理例如本文中所述的。所得到的粒子的尺寸和表面積都不是關(guān)鍵。將經(jīng)過微粉化的化合物(1)懸浮在水溶液中，任選地在懸浮劑、乳化劑和/或表面活性劑的幫助下，如以下進一步描述的。典型地，藥物制劑為化合物(1)的溶解形式，其中結(jié)晶化合物(1)被溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┗蛟鋈軇┗蚱浣M合物中。將結(jié)晶化合物(1)溶解在用于治療或預(yù)防給藥的藥學(xué)可接受的賦形劑中。用于藥物制劑的適合的化合物(1)溶液包括水以及各種有機酸(典型地為C4-C24)，通常是脂肪酸，如癸酸、油酸、月桂酸、癸酸、棕櫚酸和/或肉豆蔻酸。脂肪酸任選地為飽和的或不飽和的，或其混合物。另外，使用聚乙二醇(PEG)和/或短鏈、中鏈或長鏈的甘油單酯、二酯、三酯作為有機酸的補充或者代替有機酸。任選地還以相同的方式使用聚乙二醇化的短鏈、中鏈或長鏈脂肪酸。最常見的有機酸是酸性與羧基-C00H有關(guān)的羧酸類。包含基團0S03H的磺酸類是用于本文中的相對更強的酸。一般說來，期望所述酸包含親脂性的結(jié)構(gòu)域。適合的是單羧酸或二羧酸類。任選地將適合的表面活性劑與本發(fā)明的任何制劑一起使用(以下試劑中的任何一種或多種，典型地為它們中的任何一種)。這種試劑還被稱為利泄劑或乳化劑，并且可用于本發(fā)明的藥物組合物中。它們是具有適當(dāng)?shù)娜榛⒎稚?、?或潤濕性能的非離子型、陽離子型和/或陰離子型材料。適當(dāng)?shù)年庪x子表面活性劑包括水溶性的皂類和水溶性的合成表面活性劑。適當(dāng)?shù)脑眍愂菈A金屬鹽或堿土金屬鹽、高級脂肪酸(c1Q-c22)的未被取代的或被取代的銨鹽，例如油酸或硬脂酸的鈉鹽或鉀鹽、或可得自椰子油或動物脂油的天然脂肪酸混合物的鈉鹽或鉀鹽。合成的表面活性劑包括聚丙烯酸類的鈉鹽或鈣鹽；脂肪族磺酸鹽和硫酸鹽；磺化的苯并咪唑衍生物和烷基芳基磺酸鹽。脂肪族的磺酸鹽或硫酸鹽通常是堿金屬或堿土金屬鹽、未被取代的銨鹽或被具有8-22個碳原子的烷基或?；〈匿@鹽的形式，例如木質(zhì)素磺酸或十二烷基磺酸的鈉鹽或鈣鹽或得自天然脂肪酸的脂肪醇硫酸鹽的混合物、硫酸酯或磺酸酯的堿金屬或堿土金屬鹽(例如十二烷硫酸鈉)和脂肪醇/環(huán)氧乙烷加合物的磺酸的堿金屬或堿土金屬鹽。適合的磺化的苯并咪唑衍生物優(yōu)選包含8-22個碳原子。烷基芳基磺酸鹽的實例是十二烷基苯磺酸或二丁基萘磺酸或萘磺酸/甲醛縮合產(chǎn)物的鈉鹽j丐鹽或醇胺鹽。還適合的是相應(yīng)的磷酸鹽例如磷酸酯的鹽和對壬基苯酚與乙烯和/或環(huán)氧丙烷的加合物的鹽、或磷脂。用于此目的的適合的磷脂是腦磷脂或卵磷脂類型的天然(來源于動物或植物細胞)或合成的磷脂，諸如例如磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、溶血卵磷脂、心磷脂、二辛基磷脂酰膽堿、二棕櫚?；字Ｄ憠A和它們的混合物。含這種試劑的含水乳液在本發(fā)明的范圍內(nèi)。適合的非離子型表面活性劑包括在分子中包含至少12個碳原子的烷基酚、脂肪醇、脂肪酸、脂肪胺或脂肪酰胺的聚乙氧基化的和聚丙氧基化衍生物、烷基芳烴磺酸鹽和二烷基磺基琥珀酸酯，例如脂肪醇和脂環(huán)醇、飽和和不飽和脂肪酸和烷基酚的聚乙二醇醚衍生物，優(yōu)選所述衍生物在(脂肪族)烴部分中包含3-10個乙二醇醚基團和8-20個碳原子和在烷基酚的烴基部分中包含6-18個碳原子。另外的適合的非離子型表面活性劑是聚環(huán)氧乙烷與在烷基鏈中包含i-io個碳原子的聚丙二醇，乙二胺聚丙二醇的水溶性加合物，所述加合物包含20-250個乙二醇醚基團和/或10-100個丙二醇醚基團。這種化合物通常每個丙二醇單元包含l-5個乙二醇單元。非離子型表面活性劑的代表性實例是壬基苯酚-聚乙氧基乙醇、蓖麻油聚乙二醇醚(castoroilpolyglycolicethers)、聚環(huán)氧丙烷/聚環(huán)氧乙烷加合物、三丁基苯氧基聚乙氧基乙醇、聚乙二醇和辛基苯氧基聚乙氧基乙醇。聚乙烯失11水山梨糖醇(例如聚氧乙烯失水山梨糖醇三油酸酯)、甘油、失水山梨糖醇、蔗糖、和季戊四醇的脂肪酸酯還是適合的非離子型表面活性劑。適合的陽離子型表面活性劑包括季銨鹽，特別具有4個烴基任選地被鹵素、苯基、取代的苯基或羥基取代的鹵化物；例如包含作為至少一種C8-C22烷基(例如，鯨蠟基、月桂基、棕櫚基、肉豆蔻基和油烯基)的N-取代基以及作為另外的取代基、未被取代的或鹵化的低級烷基、芐基、和/或羥基_低級烷基的季銨鹽。關(guān)于適合于此目的的表面活性劑的更詳細的說明在"McCutcheon'sDetergentsandEmulsifiersAnnual"(MCPublishingCrop.，Ridgewood，NewJersey,1981)，〃Tensid-Taschenbucw"，2nded.(HanserVerlag，Vienna,1981)禾口"EncyclopediaofSurfactants，，(ChemicalPublishingCo.，NewYork，1981)中找至lj。本發(fā)明的化合物通過適合于待治療的病況的通過任何適合的途徑給藥，例如經(jīng)口、經(jīng)直腸、經(jīng)鼻、局部(包括經(jīng)眼睛、經(jīng)頰和舌下)、經(jīng)陰道和非腸道(包括皮下、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、真皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)。優(yōu)選的給藥途徑可以隨例如接受者的狀況而變化，但是通常為經(jīng)口。用于口服給予的本發(fā)明化合物的制劑通常作為獨立的單元存在，例如膠囊、扁囊劑或片劑，其各自包含預(yù)定量的活性成分；作為粉末或顆粒形式存在；作為在含水液體或非含水液體中的溶液或懸浮液存在；或作為水包油液體乳液或油包水液體乳液存在。本發(fā)明的化合物任選地作為丸劑、藥糖劑或糊劑存在?？梢酝ㄟ^壓制或模制生產(chǎn)片劑，任選地使用一種或多種輔助成分。壓制的片劑可以通過在適合的機器中將本發(fā)明化合物的自由流動的形式(例如粉末或顆粒)并任選地與粘結(jié)劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑和/或分散劑混合來制備。模制的片劑典型地通過在適合的機器中模制用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末化合物的混合物來制備。片劑可以任選地包衣或者刻痕，并且可以配制成提供其中活性成分的緩慢釋放或受控釋放。制劑任選地作為局部用膏劑或霜劑施用，包含例如O.075-20Xw/w(包括以0.1%w/w的增量介于O.1%-20%的范圍內(nèi)的活性成分，例如0.6%w/w、0.7%w/w等)、優(yōu)選0.2-15%w/w且最優(yōu)選0.5-10%w/w的量的活性成分。在膏劑中配制時，化合物與石蠟膏劑基質(zhì)或可與水互溶的膏劑基質(zhì)一起使用。作為選擇，化合物用例如水包油霜劑基質(zhì)配制為霜劑。如果需要，霜劑基質(zhì)的水相可以包括例如至少30%w/w的多元醇，即具有兩個或更多個羥基的醇，例如丙二醇、l，3-丁二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG400)及其混合物。局部用制劑可以理想地包括增強活性成分通過皮膚或其它患病區(qū)域的吸收或滲透性的化合物。這種皮膚滲透性增強劑的實例包括二甲亞砜和相關(guān)類似物。本發(fā)明的乳液的油相由已知的成分以已知的方式構(gòu)成。盡管這個相可以只包括一種乳化劑(或者稱為利泄劑)，期望它包括至少一種乳化劑與脂肪或油的混合物或與脂肪和油二者的混合物。任選地，包括親水性乳化劑以及作為穩(wěn)定劑的親脂性乳化劑。還優(yōu)選同時包括油和脂肪。合起來，有或者沒有穩(wěn)定劑的乳化劑構(gòu)成所謂的乳化蠟，而蠟與油和脂肪合起來構(gòu)成所謂的乳化軟膏基質(zhì)，所述軟膏基質(zhì)形成霜劑制劑的油分散的相。用于制劑的適合的油或脂肪的選擇是基于要實現(xiàn)的所需化妝品性質(zhì)。因此霜劑應(yīng)該任選地為非油膩的、未著色的和可洗滌的產(chǎn)物，具有適合的稠度以避免從管或其它容器滲漏。可以使用直鏈或支鏈的一元或二元的烷基酯，例如二-異己二酸、硬脂酸異十六烷基酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸基酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己基酯、或被稱為CrodamolCAP的支鏈酯的共混物，其中后三種是優(yōu)選的酯。這些可以單獨使用或組合使用，取決于需要的性質(zhì)?；蛘?，可以使用高熔點的脂質(zhì)，例如白色軟石蠟和/或液體石蠟或其它礦物油。適合于對眼睛局部給藥的制劑還包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮于適合的載體，特別是用于活性成分的含水溶劑中。活性成分任選地以0.5_20%、有利地為0.5_10%、特別是約1.5%w/w的濃度存在于這種制劑中。適合于在口中局部給藥的組合物包括錠劑，其包括在調(diào)味基質(zhì)(通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中的活性劑；軟錠劑，包括在惰性基質(zhì)(例如，明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠)中的活性成分；和嗽口劑，其包括在適合的液體載體中的活性成分。用于直腸給藥的制劑可以作為栓劑存在，包含適合的基質(zhì)，包括例如可可脂或水楊酸酯。其中載體是固體的適合于經(jīng)鼻給藥的制劑包括粒徑為例如20-500微米(包括以5微米的增量介于20-500微米之間的粒徑，例如30微米、35微米等)的粗粉末，其通過氣霧劑或粉末吸入器給藥，對于氣霧劑或粉末吸入器有許多實例可用。其中載體是液體的適合于例如鼻用噴霧劑或作為滴鼻劑給藥的適合的制劑包括活性成分的含水或油性溶液。適合于陰道給藥的組合物可以作為陰道栓、棉塞、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫或噴霧劑存在，包含除活性成分之外的諸如本領(lǐng)域中已知適合的載體。適合于非腸道給藥的制劑包括含水或非水的無菌注射溶液，其可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與預(yù)定接受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及含水和非水的無菌懸浮液，其可以包括懸浮劑和增稠劑。制劑可以作為單元劑量存在或存在于多劑量容器中，例如密封的小瓶和安瓿，并且可以儲存在冷凍干燥(凍干)條件下，僅需要在即將使用前加入無菌的液體載體例如注射用水?？梢詮那笆鲱愋偷臒o菌粉末、顆粒、和片劑制備即用的注射溶液和懸浮液。本發(fā)明的化合物任選地配制成控制釋放組合物，其中化合物的釋放受到控制和調(diào)節(jié)，以允許更低頻率的給藥和改善本發(fā)明化合物的藥代動力學(xué)或毒性特征?？刂漆尫沤M合物根據(jù)已知的方法制備，其中許多方法涉及將活性化合物與一種或多種聚合物載體進行配制，所述聚合物載體諸如聚酯、聚氨基酸、聚乙烯基吡咯烷酮、乙烯_醋酸乙烯酯共聚物、甲基纖維素、羧甲纖維素、和/或硫酸魚精蛋白。任選地通過將活性成分結(jié)合在聚合物(例如水凝膠、聚乳酸、羥甲基纖維素、聚甲基丙烯酸甲酯和其它上述聚合物)的粒子中(例如微膠囊)來控制藥物釋放的速率和作用的持續(xù)時間。還適合的是膠體藥物遞送系統(tǒng)，例如脂質(zhì)體、微球體、微乳液、納米粒子、納米膠囊等。取決于給藥途徑，藥物組合物(例如，片劑)可能需要保護性包衣。通過參考以下實施例更完全地理解本發(fā)明，以下實施例只是說明性的而非限制本發(fā)明的范圍。除非從上下文顯而易見不是這樣，組成百分比是以重量計。實施例1結(jié)晶5-((6-(2，4-雙(三氟甲基)苯基]噠嗪_3_基)甲基)-2-(2-氟苯基)-5H-咪唑并「4，5-d吡啶的合成反應(yīng)圖解1歩驟1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>CF3CF3向包含2，4-雙(三氟甲基)溴苯(l.OOeq)和四氫呋喃(THF)的反應(yīng)器中加入異丙基氯化鎂(PrMgCI)(2M，在THF中，1.14eq)同時保持內(nèi)容物為_10°C。將混合物在_10°C攪拌，直到通過HPLC分析顯示反應(yīng)完成。將得到的混合物轉(zhuǎn)移到被保持在-l(TC的包含硼酸三甲酯(2.26eq)和THF的第二個反應(yīng)器中。然后通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)，直到1，3_雙(三氟甲基)苯不超過2%。然后加入從水和濃37%鹽酸(HC1)制備的HC1水溶液(鹽酸)以淬滅反應(yīng)，同時保持內(nèi)容物不超過25°C。在將內(nèi)容物攪拌1-2小時并且靜置大約30分鐘之后，將各層分開。有機層用與水混合的鹽水溶液洗滌，然后真空濃縮。加入庚烷并將內(nèi)容物進一步真空濃縮。再次重復(fù)該操作。然后加入庚烷并將得到的漿狀物冷卻到3t:，并在該溫度攪拌4-6小時。將產(chǎn)物過濾，用庚烷洗滌兩次并且在最高4(TC真空干燥。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>歩驟2CF3,化合物2a將3-氯-6-甲基噠嗪(1.00eq)，2-(二環(huán)己基膦基)聯(lián)苯(0.05eq)、2，4_雙(三氟甲基)苯基硼酸(1.85eq)、l，2-二甲氧基乙烷和碳酸鉀水溶液都加入到反應(yīng)器中。在用氮氣脫氣三次之后，加入乙酸鈀(0.025eq)，加熱內(nèi)容物并在回流下攪拌，直到反應(yīng)被認為完成。將反應(yīng)混合物冷卻到22t:。加入庚烷，隨后加入硅藻土。在22t:攪拌大約30分鐘之后，將混合物過濾到第一反應(yīng)器中，用1，2-二甲氧基乙烷和庚烷的混合物漂洗以幫助過濾。將濾液的各層分開。向有機層加入硼烷三甲胺復(fù)合物(0.03eq)、水、和乙酸。將pH最大為4的所得混合物在22t:攪拌1-2小時，然后在大約8(TC回流2-3小時。在冷卻回到22。C之后，在保持內(nèi)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>容物在22°C同時通過加入5%的氫氧化鈉水溶液將混合物調(diào)整到pH10-11，然后攪拌1-2小時。將混合物過濾并將各層分開。將水層拋棄，有機層過濾通過ZetaCarbon柱進入到進行(in-process)清理的第一反應(yīng)器，用1，2-二甲氧基乙烷漂洗以幫助通過碳柱。將濾液真空濃縮，夾套最高為60°C。加入庚烷并將內(nèi)容物進一步真空濃縮，夾套最高為60°C。向濃縮物加入另外的庚烷并通過NMR檢查混合物的1，2-二甲氧基乙烷(DME)含量(最大0.5%)。在調(diào)節(jié)到85t:并攪拌大約1小時之后，將混合物熱過濾精密通過(polished)過濾器到第二反應(yīng)器中。將第二反應(yīng)器中的濾液調(diào)節(jié)到回流，然后攪拌1小時。隨著勻變(raup)的冷卻和中等的攪拌，混合物在最低4小時時間段內(nèi)從回流冷卻到o-6t:，然后在o-6t:攪拌1小時。將產(chǎn)物過濾，用環(huán)境溫度的庚烷洗滌并且在最高4(TC真空干燥，直到干燥失重最大為1%。材料M.W.w/w比摩爾比v/w比2，4-雙(三氟曱基)苯基-硼酸257.924.001.85—硼烷三甲胺復(fù)合物72.920.0180.03一3-氯-6-曱基噠嗪128.561.001.00—硅藻土(celite)N/A0.30一—二(環(huán)己基)膦基聯(lián)笨350.490.140.05一1，2-二曱氧基乙烷90.1212.00—13.80飲用水18.023.75—3.75水醋酸60.050.050.10—庚烷100.2120.40一29.80乙酸鈀(II)224.490.0440.025—碳酸鉀138.212.152.00—5%氫氧化鈉溶液40.00———歩驟31)曱磺酸2)五氧化二磷3)100oC,4-6hrs.4)H20,NH4OH3,4-二氨基吡啶MW=10—9.132-氟苯曱酸MW=140.11核'—"(、)MW=213.2向反應(yīng)器加入甲磺酸，隨后分多個部分加入五氧化二磷(1.OOeq)，同時保持內(nèi)容物為23t:。分多個部分加入3，4-二氨基吡啶(1.00eq)，同時保持內(nèi)容物在2(TC至最高50°C。然后加入2-氟苯甲酸(1.09eq)。將混合物加入到IO(TC并通過HPLC監(jiān)測反應(yīng)，直16到完成。將內(nèi)容物調(diào)節(jié)到l(TC并加入水，同時保持內(nèi)容物在最高25°C。在將混合物在這個溫度攪拌1小時之后，將其過濾到第二反應(yīng)器中。向第二反應(yīng)器中的濾液加入27X氫氧化銨，直到pH為6.0-6.5。保持內(nèi)容物溫度最高為30°C。將得到的稀薄的漿狀物在22t:攪拌至少一小時，進一步加入27%氫氧化銨，直到pH為8.0-9.3。進一步將漿狀物在22t:攪拌至少2小時。將產(chǎn)物過濾，用水洗滌兩次，并在最高6(TC真空干燥，直到水含量不超過1%。如果需要，將產(chǎn)物碾磨，以除去大的團塊。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>向反應(yīng)器加入化合物2a(1.24eq)，二氯甲烷和三氯異氰尿酸(0.491eq)。將混合物調(diào)節(jié)到回流并在回流下攪拌，直到反應(yīng)完成。將反應(yīng)混合物冷卻到22t:并加入硅藻土。在攪拌最少30分鐘之后，將混合物過濾到第二反應(yīng)器中，用二氯甲烷漂洗3次，以便于過濾。將濾餅拋棄。向第二反應(yīng)器中的濾液加入3%氫氧化鈉水溶液同時保持內(nèi)容物為22°C。將混合物攪拌1-2小時并將各層分開。將底部有機層轉(zhuǎn)移到進行清理的第一反應(yīng)器并真空濃縮，夾套最高溫度45°C。加入二氯甲烷并將混合物精密過濾到進行清理的第二反應(yīng)器中。將濾液真空濃縮，夾套溫度最高為45t:。加入二甲基甲酰胺(DMF)并進一步將內(nèi)容物濃縮。將混合物調(diào)節(jié)到22t:并加入DMF，隨后加入化合物核心2(1.OOeq)和10%氫氧化鈉水溶液同時保持內(nèi)容物為22°C。將得到的混合物在22°C攪拌，直到通過HPLC分析顯示反應(yīng)完成。在反應(yīng)過程中，監(jiān)測內(nèi)容物的pH并根據(jù)需要添加10%氫氧化鈉水溶液以保持通過pH計測定的pH在11-12。在反應(yīng)之后，加入10%氫氧化鈉水溶液，同時保持內(nèi)容物在22°C。將混合物用DMF稀釋并攪拌2小時。在最少1小時時間內(nèi)將混合物過濾到包含水的第一個進行清理的第一反應(yīng)器中，同時保持內(nèi)容物為16t:，然后用DMF漂洗以便于過濾。將得到的漿狀物在22t:攪拌1-3小時。將粗產(chǎn)物過濾并用水洗滌，然后用甲基叔丁基醚(MTBE)洗滌。將濕的粗產(chǎn)物從過濾器中排出并轉(zhuǎn)移到第一反應(yīng)器中，加入乙酸乙酯(EtOAc)。將混合物加熱到回流并在回流溫度攪拌，直到所有的固體溶解。水含量必需低于6.0%。隨著勻變的冷卻，在至少4小時內(nèi)將內(nèi)容物調(diào)節(jié)到22t:。將結(jié)晶的產(chǎn)物過濾并用EtOAc洗滌，然后加回到第一反應(yīng)器中。加入乙酸乙酯(EtOAc)。將混合物加熱到回流并在回流溫度攪拌，直到所有的固體溶解。水含量必需不低于1.0%。將混合物熱過濾通過精密過濾器進入到第二反應(yīng)器(預(yù)先用EtOAC處理的)中，用EtOAc漂洗以幫助過濾。在大氣壓力下將產(chǎn)物濃縮。在調(diào)節(jié)到65t:并加入Et0Ac之后，將反應(yīng)罐調(diào)節(jié)到回流并在回流攪拌大約30分鐘。檢查水含量，如果水含量大于0.2%，則重復(fù)相同的循環(huán)?！┧窟_到最大為0.2%，則將內(nèi)容物調(diào)節(jié)到回流，然后在回流下攪拌1-3小時。隨著勻變冷卻，在至少4小時內(nèi)調(diào)節(jié)內(nèi)容物到22t:，然后在該溫度攪拌至少8小時。將產(chǎn)物過濾，用Et0Ac洗滌并且在最高6(TC真空干燥。然后將產(chǎn)物碾磨。材料_M.W.w/w比摩爾比v/w比3-(2,4-雙(三氟甲基)-苯306.211.001.00—基)-6-曱基噠,，叔丁基曱基醚88.15一——硅藻土(Celite)——A#-二曱基曱酰胺73.106.90一7.30飲用水18.0227.72—27.72乙酸乙酯88.1133.90—37.702-(2-氟苯基)-咪唑并[4，5-c]213.210.5600,78—吡咬，GS-9133二氯曱烷84.9316.50—12.50氫氧化鈉40.000.276一—三氯異氰尿酸232.410.3150.415—核磁共振(殳H-，C-、和^F-NMR)譜化合物(1)的核磁共振(NMR)譜符合提出的結(jié)構(gòu)。使用VarianUnitylnova-400FT-NMR光譜儀來測量化合物(1)在DMS0-d6中的"C、，、和力-NMR譜。譜圖顯示在以下表中。使用2D相關(guān)實驗(COSY、HSQC、HMBC和HSQCTOCSY)確定NMR化學(xué)位移歸屬?；衔?1)參比標準的^_和13C_NMR化學(xué)位移歸屬18原子SC/卯m(DMS0-d6)SF/ppm(DMS0-d6)SH/ppm(DMS0-d6)1A140.162A128.32(qa，JCF=32Hz)3A123.61，m8.24(m，1H)4A130.27(q，JCF=34Hz)5A129.54(q，JCF=3Hz)8.22(m，1H)6A133.367.88(m，1H)7A123.20(q，JCF=273Hz)-56.4b8A123.02(q，JCF=275Hz)-62.Ob1158.762B128.168.01(d，lH，J=8.4Hz)原子SC/卯m(DMS0-d6)SF/ppm(DMS0-d6)SH/ppm(DMS0-d6)3B126.207.95(d，1H，J=8.8Hz)4B157.705B60.496.17(s，2H)2C131.868.31(m，lH)3C112.637.86(m，1H)19原子SC/卯m(DMS0-d6)SF/ppm(DMS0-d6)SH/ppm(DMS0-d6)4C155.446C168.ll(d，JCF=6Hz)8C145.089C133.069.25(s，1H)1D123.ll(d，JCF=10Hz)2D160.46(d，JCF=254Hz)-111.73D116.59(d，JCF=22Hz)7.29(m，1H)4D130.84(d，JCF=8Hz)7.46(m，1H)5D124.13(d，JCF=4Hz)7.31(m，lH)6D131.72(d，JCF=2Hz)8.35(m，1H)a.多重性s，單峰；d，雙峰；q四重峰；m，多重峰；b.可互換的信號差示掃描量熱法根據(jù)在WO08/005519的實施例la中公布的方法制備指定為"Researchlot6"的化合物(1)樣品(無定形)，所述專利被全文并入本文作為參考。其余樣品是結(jié)晶化合物(1)。使用差示掃描量熱(DSC)裝置(DSC2010，由TAInstrumentsCorporation生產(chǎn))在氮氣氛下測量樣品，樣品重量5±lmg，升溫速率每分鐘1°C、每分鐘5°C、每分鐘10°C，開放鋁盤，使用銦標準作為參考。測定從DSC曲線上獲得的焓、外推的起始溫度和吸熱峰的最高溫度。Researchlot6和各代表性的結(jié)晶游離堿化合物(1)批次的DSC結(jié)果分別總結(jié)在表i和圖4和圖5中。在化合物(i)的晶體形式經(jīng)歷rc/分鐘的Dsc掃描時，吸熱峰的烚為約80J/g，外推的起始溫度是233.2°C±2.0°C。吸熱峰的最高溫度為233.9°C±3.0°C。表1.得自化合物(1)各批次的DSC值實例20<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注釋除焓之外，所有數(shù)值單位都是t:。**為Lot6報告了5°C/分鐘掃描X身機m雄身報-石蹄l將得自W005/063744的實施例la的方法制備的樣品和通過本發(fā)明的方法制備的樣品進行原樣分析，只是在分析之前用刮鏟進行混合。將樣品固定在鋁制單元上，并使用X射線粉末衍射儀(XRD-6000,ShimadzuLabX，由ShimadzuCorporation生產(chǎn)，X射線源:Cu-Kal射線，電子管電壓35kV，管電流40mA，掃描速度每分鐘2。，連續(xù)掃描模式，取樣間距0.02°，掃描范圍:4-35°，P軸旋轉(zhuǎn)60rpm)進行。通過本發(fā)明方法得到的非微粉化的針狀(ascicular)化合物(1)晶體的X射線粉末衍射圖譜具有在通過X射線粉末衍射儀測量的如下衍射角2e(°)的特征性衍射峰13.46，15.59，16.90，17.48，23.05和30.15(圖1)。指出的是，在這個實施例中檢驗的化合物(1)的非微粉化的"高熔化"的235t:熔化物的針狀晶型表現(xiàn)出由于擇優(yōu)取向和粒徑顯示一些作用。結(jié)果，應(yīng)該將圖l只考慮為示例性的，因為不同的晶體大小和取向會改變圖中峰的大小。另外，由于測試裝置和測試條件等，在上述衍射角2e(°)的衍射峰峰值可能表現(xiàn)出輕微的測量誤差。典型地，測量誤差通常為約±0.3的范圍內(nèi)。ShimadzuXRD-6000的技術(shù)標準是±0.04。另外，由于產(chǎn)品和試驗的波動，可以預(yù)期存在有峰位上的一些變化，因此必需將它們考慮為近似值。包括根據(jù)實施例la方法(或在再漿化步驟之前的方法lb)制備的產(chǎn)物的化合物(1)的22(TC"低熔化"固態(tài)形式得到與無定形物質(zhì)一致的X射線粉末衍射圖案(圖3)。通過本發(fā)明的方法得到的化合物(1)典型地表現(xiàn)出0.7微克/ml的固有溶解度，5.8的pKa、2.8的logP，在pH2的幾何平均(3個批次)pH溶解度特征為458微克/ml，在pH7.3為0.7微克/ml。在人工腸液(禁食pH6.4，0.75mM卵磷脂，3mM?；悄懰徕c，270m0smo1;進食pH5.0，3.75mM卵磷脂，15mM?；悄懰徕c，635m0smo1)中的幾何平均溶解度(3個批次)為19.1微克/ml(禁食)和122微克/ml(進食)。測量的參數(shù)隨批次的不同而不同，因此，除分子量之外的所有前述參數(shù)都應(yīng)該考慮為近似值。用酸滴定顯示在甲磺酸根(>20mg/ml)時具有比氯化物(約0.6mg/mL)或硫酸根(約0.5mg/mL)平衡離子更高的溶解度。X射線粉末衍射法_研究2以與研究1相同的方式分析通過本發(fā)明的方法制備另一個結(jié)晶化合物(1)樣品，不同之處在于X射線粉末衍射儀是由PANalyticalInc.，生產(chǎn)的PANalyticalX'PertProMPDPW3040Pro,使用的X射線源Cu-Ka射線(1.54059A)，電子管電壓45kV，安培數(shù)40mA，掃描范圍1-55°29，步長0.008°2e，收集時間3373s，掃描速度每分鐘0.9°，狹縫DS:1/2。，SS:1/4。，旋轉(zhuǎn)時間0.5s，模式發(fā)射。結(jié)果描述在圖2中。實施例2(1)白鄉(xiāng)A麵綱將結(jié)晶化合物(1)用作中間體來生產(chǎn)藥學(xué)可接受的溶液?；谥亓?重量基礎(chǔ)制備以下實施例，以實現(xiàn)10%w/w活性劑。為了制備12kg溶液，以下列舉了化合物(1)膠囊20mg和40mg的示例性定量組成?；衔?1)膠囊20mg和40mg的定量組成組分Ww膠嚢單位單1制劑(mg/立)官方參考作用20mg40mg化合物110.0020.0復(fù)0無活性成分油酸84.55169.1338.2NF溶劑聚山梨酯805.0010.020.0NF表面活性劑丁幾甲苯(BHT)0.100.20.4NF抗氧化劑丁羥茴醚(BHA)0.350.71.4NF抗氧化劑膠囊密封溶液a乙醇純化水---b一—一b___b___bUSPUSP膠嚢封閉劑膠囊殼，0號Licaps"1WhUeOpaqueN/A各1個各1個無膠囊殼總計100.00200.0楊.03組合物為i:lw/w乙醇水溶液b在膠囊密封過程中除去容器/器皿12kg不銹鋼按照以下順序稱量0.012kg丁羥甲苯(0.10%)0.035kg丁羥茴醚(0.35%)1.2kg化合物(1)游離堿(10%)。0.6kg聚山梨酯80(5X)，稱重10.153kg油酸(等于84.55g(84.55%))通過一系列單元加工步驟生產(chǎn)溶解的結(jié)晶化合物(1)膠囊20mg或40mg。將化合22物(1)藥物物質(zhì)、油酸、聚山梨酯80、丁羥甲苯(BHT)、和丁羥茴醚(BHA)混合在一起，直到得到溶液。將溶液填充到2片硬膠囊中。隨后用含水醇溶液(hydroalcoholicsolution)密封閉合的膠囊，所述溶液在密封工藝過程中蒸發(fā)。在包裝之前對經(jīng)過密封的膠囊進行真空漏泄檢驗。可供選擇的制劑任選地將式(1)的結(jié)晶化合物用作中間體，使用以下試劑配制為溶解形式脂肪酸(短鏈、中鏈和長鏈的飽和以及不飽和的)典型地為C4-C22。典型的脂肪酸是亞油酸、月桂酸、癸酸或油酸。醇類，例如乙醇、芐醇、甘油、聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400。，表面活性劑，包括離子型和非離子型表面活性劑。非離子型表面活性劑的實例為聚氧乙烯山梨糖醇酐的脂肪酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯甘油氧基硬脂酸酯、聚乙二醇60、氫化蓖麻油、和/或環(huán)氧乙烷和環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物?？寡趸瘎?，例如丁羥茴醚(BHA)、丁羥甲苯(BHT)、棕櫚酸抗壞血酸酯、維生素E、和/或維生素EPEGIOOO琥珀酸酯，用于化學(xué)穩(wěn)定性。粘度誘導(dǎo)劑(二氧化硅、聚乙二醇、二氧化鈦等)。以及上述的混合物可以在軟的彈性明膠膠囊或硬的明膠膠囊或硬的羥丙基甲基纖維素膠囊中進行包囊。液體制劑(溶液或包封的溶液)提供改善的口服生物利用度。膠囊填充軟的彈性膠囊的組成和制備是本領(lǐng)域中公知的。所述組合物典型地包括30-50重量％的明膠、10_40重量％的增塑劑或增塑劑與大約25-40重量％水的共混物。增塑劑可以是甘油、山梨糖醇或山梨糖醇衍生物、丙二醇等或其組合物?？梢允褂枚喾N方法來生產(chǎn)和填充軟的彈性膠囊，例如旋轉(zhuǎn)、襯圈或accogel機器等。硬明膠或HPMC膠囊可以購自C即sugel、Greenwood,S.C.和其它供應(yīng)商。膠囊手動填充或用膠囊裝料機填充。[OWO]制劑制備通常，可以以下述方式制備本發(fā)明的組合物。使用高架混合器將各成分混合在適當(dāng)?shù)娜萜鞔笮≈?混合槽可以用氮氣吹掃)。在室溫下混合藥學(xué)可接受的脂肪酸和藥學(xué)可接受的抗氧化劑。(如果需要，溶液可能需要溫?zé)岬竭m當(dāng)?shù)臏囟?，例如在月桂酸的情況中要溫?zé)岬郊s45t:，以使脂肪酸液化)。加入式(1)的化合物并攪拌，直到溶解。在混合下加入藥學(xué)可接受的表面活性劑。將適當(dāng)重量的所得混合物填充到硬膠囊中。另外的制劑組合物式(1)化合物8.0PEG40082.8EtOH9.2_合計100.0式(1)化合物8.0EtOH11.0PG7.4Maisine35-136.8CremophorRH4036.8_合計100.0式(1)化合物8.0油酸92.0_合計100.0式(1)化合物8.0油酸73.6EtOH9.2Tween209.2_合計100.0式(1)化合物8.00%油酸87.40%Tween804.60%_合計100.00%式(1)化合物20.00%油酸80.0%_合計100.0%式(1)化合物20.00%油酸76.00%Tween804.00%_合計100.00%式(1)化合物8.00油酸86.47%Tween804.60%Aerosil2000.92%BHT0.01%_合計100.0%式(1)化合物8.00油酸85.55%Tween804.60%24Aerosil2001.84%BHT0.01%_合計100.0%式(1)化合物8.00油酸85.55%Tween804.60%Aerosil2001.84%BHT0.01%_合計100.0%式(1)化合物10.00油酸84.55%Tween805.00%BHA0.35%BHT0.1%_合計100.0%實施例2a化合物(1)的微粉化制劑將微粉化的藥物物質(zhì)(Jetmill-OO，使用60-80psi;3-4微米平均大小，約7-8平方米/g)與乳糖、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、十二烷基硫酸鈉、酒石酸、和羥基丙基纖維素干混合。通過噴霧共混物溶液將共混物造粒。將顆粒在流化床中干燥。通過使干燥的顆粒通過碾磨進行分級，然后與另外的微晶纖維素和交聯(lián)羧甲纖維素鈉共混。通過添加硬脂酸鎂潤滑粉末共混物，然后使用旋轉(zhuǎn)壓片機壓縮為片劑。隨后將片劑薄膜包衣。下表是在狗中以40mg化合物(1)劑量給藥(對應(yīng)于大約4mg/kg)檢測的各種制劑的概述，該表舉例說明了溶解的化合物(1)制劑的優(yōu)異性能。體內(nèi)數(shù)據(jù)概述<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>a使用微粉化的APIb對用五肽胃泌素處理以降低胃pH7的狗劑量給藥實施例3化合物(1)的抗病毒活件本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出抗HCV復(fù)制子活性(在WO05/063744中所述的測定法)，對基因型la和基因型1都有效，具有低的細胞毒性(在Huh-7、H印G2和MT4細胞中〉50，000nM)和高度有利的選擇性指數(shù)。該化合物具有顯著更低的對基因型2a的活性?；衔?對HCV基因型1和基因型la復(fù)制子的活性在有或者沒有40mg/mL人血清白蛋白(HSA)的存在下，將HCV基因型1(Con_l/lucneo)和基因型la(H77/neo)復(fù)制子細胞與系列稀釋的化合物(1)2'C-甲基腺苷(2'CMeA)或IFNa培養(yǎng)3天。在培養(yǎng)之后，通過熒光素酶報道基因分析(基因型l復(fù)制子)或定量的實時PCR分析(基因型la復(fù)制子)測定經(jīng)過處理的細胞中的復(fù)制子RNA水平，并使用數(shù)據(jù)點計算抑制劑的EC5。(50X有效抑制濃度)值?；衔?1)對基因型l和基因型la復(fù)制子都表現(xiàn)出抑制，EC5。值分別為0.6nM和3.6nM(表A)。在人血清白蛋白的存在下，化合物(1)的ECs。值提高到llnM。表A:化合物(1)對HCV基因型la和基因型1復(fù)制子的活性<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>n.d.，未測定；HSA，人血清白蛋白a從至少4個獨立實驗測定平均EC5。值和標準誤差化合物(1)對HCV基因型la復(fù)制子和病毒的活性在長期感染有基因型2a病毒的細胞中以及在復(fù)制次基因組2a復(fù)制子的細胞中檢驗化合物(1)對HCV基因型2a的抗病毒活性。在沒有人血清白蛋白的存在下將包含慢性復(fù)制HCV基因型2a(J6/JFH-Rluc)病毒或次基因組復(fù)制子的Huh_7細胞與化合物(1)或2'CMeA培養(yǎng)3天。在培養(yǎng)之后，分別使用Promega的熒光素酶分析和新型時間分辨熒光分析測定包含2a-病毒的細胞中的熒光素酶的量和包含2a復(fù)制子的細胞中的HCVNS3蛋白酶活性。與復(fù)制HCV-1次基因組復(fù)制子的Huh-7細胞(EC5。=0.0006yM)相比，在長期感染HCV-2a的細胞培養(yǎng)物模型(EC5。=2.9yM)中和在2a次基因組復(fù)制子模型(EC5。=21.9iiM)中，化合物(1)的抗病毒活性顯著降低(表2)。合起來，這些結(jié)果提示化合物(1)對HCV基因型2a的效力降低可能是由于HCV的基因型1和基因型2之間的遺傳型差別。表B:化合物(1)對HCV基因型1和基因型2a的活性<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>n.d.，未測定；HSA，人血清白蛋白a從至少4個獨立實驗測定平均EC5。值和標準誤差使用CellTiter-GloLuminescenceCellViability分析(Promega)評價化合物(1)在各種細胞系中的細胞毒性，包括包含HCV復(fù)制子的細胞系(Huh-7、SL3和MH4)以及不含復(fù)制子的細胞系(H印G2、MT4)。在所試驗的最高濃度(50iiM)，在任何細胞系中都沒有觀察到毒性作用(表C)。這些結(jié)果與其在HCV-l和HCV-la復(fù)制子中有效的抗病毒活性(EC5。=0.62-3.6nM)聯(lián)系起來，表明化合物(1)具有高的選擇性指數(shù)(CC5。/EC5。>13，000-80，000)。表C:化合物(1)在包含HCV復(fù)制子的細胞系中的細胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>n.d.，未測定；HSA，人血清白蛋白a從至少4個獨立實驗測定平均CC5。值和標準誤差b包含HCV復(fù)制子的細胞系化合物(1)與IFN組合的體外抗HCV活性聚乙二醇化的干擾素-a(PEG-IFN-a)與利巴韋林的組合代表了用于治療感染HCV的患者的目前的標準療法。在復(fù)制子細胞中進行了化合物(1)與IFN-a的體外組合研究。使用由Prichard和Shipman開發(fā)的MacSynergy模板分析數(shù)據(jù)。得自這些研究的結(jié)果顯示，在化合物(1)和IFN-a之間有相加的相互作用。實施例4化合物(1)在感染有HCV某閔型1的孕試者中的1期首次人體試驗中的杭病毒、靴'云力將禾口糊?；\。設(shè)計了隨機、雙盲、安慰劑對照的試驗來評價化合物(1)(油酸溶液，如上所述)在長期感染有HCV基因型1(GT-1)且沒有失代償性的硬化的受試者中的單次劑量給藥(部分A)和多次劑量給藥(部分B)的安全性/耐受性、藥代動力學(xué)和抗病毒活性。預(yù)期的受試者為18-60歲，首次接受HCV治療，并且處于一般好的健康中。在完成的部分A中，每組6名受試者的五個連續(xù)組隨機(5:l)接受單次的遞增的化合物1劑量(40、120、240、240(隨食物給藥)、或480mg)或安慰劑。在進行的部分B中，每組12名受試者的四個連續(xù)組隨機(10:2)接受多次的遞增的化合物l劑量(40mgBID、120mgBID、240mgQD、240mgBID)或安慰劑，持續(xù)8天。參加部分A的31名受試者平均年齡43.6歲，主要是男性(20/31)，高加索人(25/31)，且感染HCV基因型-la(24)或HCV基因型-1(6)。中值(范圍)基線HCV病毒負載是6.6Log10RNAIU/mL(5.2-7.3)?；衔?1)單次劑量給藥被很好地耐受，沒有報告嚴重的或限制治療的不利事件(AE)。最常見的AE是頭痛。所有的AE在嚴重程度上都是輕微的，只有一個中度頭痛例外。沒有出現(xiàn)3或4級的治療發(fā)生的實驗室異常。在所有組，化合物(1)的中值血漿半衰期范圍為10-15小時。在將化合物(1)與高脂肪飲食一起給予時，系統(tǒng)暴露增加大約2倍。在240mg劑量的禁食劑量給藥24小時之后的化合物(1)平均濃度比經(jīng)過蛋白質(zhì)結(jié)合調(diào)節(jié)的體外HCVGT-1復(fù)制子EC5。值高7倍。在單劑量暴露之后，在24小時觀察到最大的抗病毒作用，在所有組中，中值下降范圍為280.46-1.49Log10HCVRNAIU/mL。在所有的化合物(1)接受者中，在單次劑量暴露之后的個體的HCVRNA下降范圍為0.19-2.54log1QIU/mL。這是關(guān)于化合物(1)的抗病毒活性的第一個臨床證明。對化合物(1)的單次暴露得到良好的耐受，證明了有利的PK性質(zhì)和有效的抗病毒活性。權(quán)利要求式(1)的結(jié)晶化合物及其鹽，其基本上不含無定形的化合物(1)。F200880023677XC00011.tif2.權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物，在差示掃描量熱法(DSC)圖中在大約235t:具有吸熱開始。3.權(quán)利要求2的結(jié)晶化合物，具有約81J/g(42KJ/摩爾)的熔化熱(DHf)。4.權(quán)利要求3的結(jié)晶化合物，通過X射線粉末衍射法測量，其在約17。的衍射角29處具有至少一個近似峰。5.權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物，是游離堿形式。6.權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物，為針狀或棒狀的形式。7.包括權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物的組合物，包含低于約40重量％的無定形的化合物(1)。8.權(quán)利要求7的包括結(jié)晶化合物的組合物，包含低于約10重量％的無定形的化合物(1)。9.權(quán)利要求8的包括結(jié)晶化合物的組合物，其中結(jié)晶化合物(1)包含低于約100ppm的氯化物。10.權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物，已經(jīng)經(jīng)過微粉化處理。11.結(jié)晶化合物，其為基本上不含無定形的化合物(1)和化合物(1)的任何其它晶型的游離堿。12.權(quán)利要求l的結(jié)晶化合物，其基本上不含化合物(1)的鹽酸鹽。13.組合物，包括權(quán)利要求l的結(jié)晶化合物和藥學(xué)可接受的賦形劑。14.制備結(jié)晶化合物(1)的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>包括使化合物a)從結(jié)晶溶劑結(jié)晶，以及控制結(jié)晶溶劑中的水的量。15.權(quán)利要求14的方法，其中化合物(1)從乙酸乙酯或乙酸乙酯/異丙醇溶劑結(jié)晶，在該溶劑中包含低于約0.9重量％的水。16.權(quán)利要求14的方法，其中控制水的量，使得低于約10重量％的無定形化合物(1)在結(jié)晶化過程中沉淀。17.權(quán)利要求14的方法，其中通過從結(jié)晶溶劑共沸除水來控制水。18.權(quán)利要求14的方法，包括在結(jié)晶溶劑中提供濃度低于約10%的水。19.權(quán)利要求18的方法，包括多個結(jié)晶化步驟，其中從包括依次降低濃度的水的溶劑進行結(jié)晶化。20.權(quán)利要求18的方法，其中從包括低于約0.9%水的溶劑進行最后一個結(jié)晶化步驟。全文摘要提供了式(1)的結(jié)晶化合物及其鹽和溶劑合物，用于治療或預(yù)防丙型肝炎病毒感染，提供了制備和配制結(jié)晶化合物(1)的方法。文檔編號A61P31/12GK101778847SQ200880023677公開日2010年7月14日申請日期2008年7月3日優(yōu)先權(quán)日2007年7月6日發(fā)明者E·D·道迪,K·M·肯特,N·J·托姆,V·齊亞申請人:吉里德科學(xué)公司;K·U·勒芬研究和發(fā)展公司;格哈德·皮爾斯廷格