專利名稱：雷帕霉素在制備治療嗎啡類藥物成癮的藥物上的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
木發(fā)明涉及雷帕霉素在制備治療嗎啡類藥物成癮的藥物上的用途。
背景技術(shù)：
藥物成癮(Drug addiction)是困擾人類健康和社會(huì)發(fā)展的公共衛(wèi)生和社 會(huì)問題，嚴(yán)重危害人類健康，影響家庭安定和社會(huì)發(fā)展。如2007年我國(guó)艾滋病 新增感染病例中，約42%患者與藥物成癮和濫用有關(guān)。 '
藥物成癮是一種慢性高復(fù)發(fā)的復(fù)雜性腦疾病，其特點(diǎn)表現(xiàn)為從初次用藥引 起沖動(dòng)性覓藥進(jìn)行性發(fā)展為強(qiáng)迫性覓藥，形成強(qiáng)烈的軀體依賴和精神依賴。針 對(duì)軀體依賴的脫毒治療已經(jīng)積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)，如丁丙諾啡、美沙酮和納 曲酮等藥物治療以及射頻熱凝毀損及腦深部電刺激等手術(shù)治療(Medvedev S V， et al. Fiziol Cheloveka， 2003, 29 (4): 117-23。 Gao G， etal. Stereotact Funct Neurosurg， 2003， 81 (1-4): 96-104。高國(guó)棟等.醫(yī)學(xué)與哲學(xué)，2007， 28 (12): 38-41)，脫毒后軀體依賴癥狀很快消失，而成癮者對(duì)藥物強(qiáng)烈的心 理渴求即精神依賴很難消除甚至持續(xù)終生。尤其已經(jīng)戒毒的患者在藥物線索， 即先前的吸毒環(huán)境、毒品或者相關(guān)應(yīng)激再次暴露后極易誘發(fā)藥物復(fù)吸(relapse) (Gri腿JW， et al. Nature, 2001， 412 (6843) : 141-142.Kalivas PW， et al.Curr Opin Neurobiol， 1999， 9 (2) :223-227)。因此，消除患者對(duì)成癮性物 質(zhì)的精神依賴非常重要。
阿片類藥物中的嗎啡成癮與大腦的獎(jiǎng)賞特性(rewarding property)有關(guān)， 嗎啡可以通過作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)[主要包括伏隔核 (nucleus accumbens NAc)、 前客員葉皮層(prefrontal cortex PFC)、腹側(cè)被 蓋區(qū)(ventral tagmental area VTA)]產(chǎn)生強(qiáng)烈的獎(jiǎng)賞效應(yīng)，從而使中腦邊緣 多巴胺系統(tǒng)發(fā)生長(zhǎng)期神經(jīng)可塑性變化(neur叩lasticity)，導(dǎo)致強(qiáng)烈的心理渴 求及精神依賴。這種獎(jiǎng)賞效應(yīng)和與之引發(fā)的獎(jiǎng)賞記憶是成癮者持久強(qiáng)烈心理渴 求和復(fù)吸的神經(jīng)基礎(chǔ)(KelleyAE. Neuron, 2004， 44(1) : 161-79. Hyman SE. Am J Psychiatry, 2005， 162(8) :1414-22)。而突觸可塑性(synaptic plasticity)長(zhǎng)吋程增強(qiáng)(long term potentiation LTP)是獎(jiǎng)賞記憶的潛在機(jī)制，在此過程 屮，涉及新蛋白質(zhì)的合成(Hyman SE， et al. A畫Rev Neurosci， 2006)。如 果能阻斷此過程中新蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而阻斷獎(jiǎng)賞記憶的形成，使得治療嗎啡 成癮所引起的精祌依賴和脫毒后的嗎啡復(fù)吸成為可能。
卩甫乳動(dòng)物雷屮白霄素靴蛋白(mammalian target of Rapamycin mT0R)是-一 種絲氨酸/蘇氨酸激酶。mT0R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路控制了突觸可塑性長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)和長(zhǎng) 吋程易化的蛋白合成(Dash PK，et al. J Neurosci, 2006， 26(31) :8048-56. Parsons RG， et al. J Neurosci, 2006， 26 (50) : 12977-83)。雷帕霉素(西羅莫 司、Sirolimus、 Rapamycin)是mT0R的天然抑制劑(Gingras AC， et al. Curr Top Microbiol Immunol, 2004， 279(169-97 ; Hay N， et al. Genes Dev， 2004, 18(16) :1926-1945. Inoki K， et al.Nat Genet, 2005， 37 (1) : 19-24)，屬新型 大環(huán)內(nèi)酯的抗排斥藥物，是目前世界上最新的強(qiáng)效免疫抑制劑，臨床上用于器 官移植的抗排斥反應(yīng)和自身免疫性疾病的治療。它的免疫抑制活性比現(xiàn)行臨床 廣泛使用的環(huán)孢素強(qiáng)數(shù)十倍，雷帕霉素毒性低、用量小(2mg/天/人)，且與環(huán) 孢素有協(xié)同免疫抑制作用，臨床上與環(huán)孢素聯(lián)合使用。與環(huán)孢素和FK506 (他 克莫司)相比，雷帕霉素是腎毒性最低的免疫抑制劑，且無神經(jīng)毒性。
經(jīng)檢索沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)雷帕霉素用于制備治療藥物成癮和防止復(fù)吸的藥物的 報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)嗎啡成癮后產(chǎn)生的精神依賴，本發(fā)明目的在于提供雷帕霉素在制備治 療嗎啡類藥物成癮或防止嗎啡復(fù)吸的藥物上的應(yīng)用。應(yīng)用此藥可治療嗎啡類藥 物成癮所引起的精神依賴和防止嗎啡脫毒后的嗎啡復(fù)吸。
本發(fā)明所述的嗎啡類藥物是指嗎啡、鴉片、海洛因、阿片、可待因、美沙 酮、鎮(zhèn)痛藥、復(fù)方樟腦酊、復(fù)方吐根散或罌粟堿等之一種。
本發(fā)明中所述的雷帕霉素(英文名稱為Rapamycin , Sirolimus ，RAPA;中文 還稱為西羅莫司)屬大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，雷帕霉素的分子式為C51H79N013，分 子量為914.17，為白色固體結(jié)晶，熔點(diǎn)為183 185°C，親脂性，可溶解于甲 醇、乙醇、丙酮和氯仿等有機(jī)溶劑，極微溶于水，幾乎不溶于乙醚。
雷帕霉素的分子結(jié)構(gòu)式為使用時(shí)按照本領(lǐng)域技術(shù)人員常識(shí)給予醫(yī)學(xué)上有效劑量即可。 本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)(1)、本發(fā)明為治療嗎啡成癮和防嗎啡脫毒后的嗎啡復(fù)
吸的精神依賴提供了一種有效方法；(2)、本發(fā)明效果好，有望從根本上消除嗎
啡成癮患者的精祌依賴與防止嗎啡脫毒后的復(fù)吸。


圖1為腦室給予雷帕霉素對(duì)嗎啡條件位置偏愛形成的影響的柱形圖。
圖2為腦室給予雷帕霉素對(duì)大鼠自發(fā)活動(dòng)的影響的曲線圖。 圖3為CPP試驗(yàn)設(shè)計(jì)流程示意圖。
圖4為伏隔核的核部給予雷帕霉素抑制嗎啡成癮大鼠CPP形成的柱形圖。 圖5為CPP試驗(yàn)設(shè)計(jì)流程示意圖。
圖6為伏隔核的核部給予雷帕霉素抑制環(huán)境線索誘導(dǎo)嗎啡成癮大鼠CPP形 成的柱形圖。
圖7為伏隔核的殼部給予雷帕霉素抑制環(huán)境線索誘導(dǎo)嗎啡成癮大鼠CPP形 成的柱形圖。
具體實(shí)施例方式
下面以實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，但是不對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍構(gòu)成 任何限制。
實(shí)施例l 大鼠嗎啡成癮模型的建立方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明采用條件位置偏愛(conditioned place preference 簡(jiǎn)稱CPP) 訓(xùn)練方式建立大鼠嗎啡成癮模型。相關(guān)描述如下
條件性位置偏愛訓(xùn)練和測(cè)試的儀器是由三箱構(gòu)成的條件性位置偏愛箱(中 國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制)兩個(gè)側(cè)室(LxWxH: 27.9cmx21cmx20.9cm) 和一個(gè)屮間室(LxWxH: 12.lcmx21cmx20.9cm)。三室由可移動(dòng)的隔板分開，且地板不同。
基礎(chǔ)值測(cè)試本實(shí)驗(yàn)采用無偏設(shè)計(jì)。第1天，Sprague-Dawley(SD)雄性大 鼠(購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)SCXK(京)2002-2003， 體重200-220g)由中間室放入，任其在二室中自山活動(dòng)15分釗'，電腦同步記錄 其在各室中停留的吋間。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物納入標(biāo)準(zhǔn)為各箱中停留時(shí)間分別在總時(shí)間的 25 75%的大鼠。
條件性位置偏愛訓(xùn)練第2、 4、 6、 8天，給予嗎啡(10mg/kg)并放入伴 藥室45分鐘；第3、 5、 7、 9天，給予生理鹽水(lml/kg)并放入非伴藥室45分 鐘。之后大鼠被放回飼養(yǎng)籠。
獲得測(cè)試第10天進(jìn)行獲得測(cè)試，方法同基礎(chǔ)值測(cè)試。 偏愛分?jǐn)?shù)(CPP score)定義為伴藥室停留時(shí)間與非伴藥室停留時(shí)間的差值。 實(shí)施例2:腦室給予雷帕霉素抑制大鼠的嗎啡成癮行為試驗(yàn) 將40只SD雄性大鼠(購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司)隨機(jī)分 為兩組，分別進(jìn)行生理鹽水(lml/kg, i.p)或嗎啡(10mg/kg， i.p)的條件位置偏愛訓(xùn) 練(方法同實(shí)施例l)，在每次訓(xùn)練前60min每組(20只/組)再均分為2組(10 只/組)分別給予腦室注射雷帕霉素300(ig或溶媒DMSO,觀察CPP的形成情況。 具體分組情況如下(1)生理鹽水+溶媒對(duì)照組生理鹽水進(jìn)行CPP訓(xùn)練，訓(xùn)練 前60min給予腦室注射溶媒DMSO ("=10); (2)生理鹽水+雷帕霉素組生理鹽 水進(jìn)行CPP訓(xùn)練，訓(xùn)練前60min給予腦室注射雷帕霉素300(ig("二10); (3)嗎啡+ 溶媒對(duì)照組嗎啡進(jìn)行CPP訓(xùn)練，訓(xùn)練前60min給予腦室注射溶媒DMSO(『10); (4)嗎啡+雷帕霉素組嗎啡進(jìn)行CPP訓(xùn)練，訓(xùn)練前60min給予腦室注射雷帕霉 素300(ig("=10)。
結(jié)果(見圖l )嗎啡(10mg/kg， i.p)訓(xùn)練可以使大鼠產(chǎn)生明顯的條件位 置偏愛(F(1，39) 二10.515,pO.01);每次訓(xùn)練前給予雷帕霉素不能形成嗎啡條件 位置偏愛(F (1,39) =10.150， p<0.01)。藥物與干預(yù)因素之間存在明顯的相互作用 (F(1,39) =11.301, p<0. 01)。說明嗎啡訓(xùn)練可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生成癮，訓(xùn)練前腦室注 射雷帕霉素能有效抑制大鼠嗎啡成癮的形成。
實(shí)施例3:腦室給予雷帕霉素對(duì)大鼠自發(fā)活動(dòng)影響試驗(yàn) 將16只大鼠隨機(jī)分為兩組，每組8只， 一組腦室注射雷帕霉素300(ig，另 一組腦室注射溶媒DMSO， 1小時(shí)后置于自主活動(dòng)測(cè)試箱(購(gòu)自上海吉量軟件 科技有限公司)，電腦程序自動(dòng)觀察記錄大鼠的總活動(dòng)次數(shù)，每5分鐘記錄一次，共記錄60分鐘。
結(jié)果(見圖2)腦室注射雷帕霉素或溶媒DMSO后，大鼠的自發(fā)活動(dòng)隨時(shí) 間逐漸降低(F(n， 191) =74.576， p<0.001)，但組間沒有差異(F (1, 19|) 二 1.785 ， p>0.05)，藥物與時(shí)間之間不存在相互作用(F(n, 191) =0.656, p>0.05)。說明雷 帕霉素不影響大鼠自發(fā)活動(dòng)。
實(shí)施例4:伏隔核的核部給予雷帕霉素抑制嗎啡成癮大鼠的覓藥行為試驗(yàn) 大鼠40只于伏隔核的核部行定位手術(shù)，分為2組(20只/組)，分別進(jìn)行生理 鹽水或嗎啡CPP訓(xùn)練(訓(xùn)練方法同實(shí)施例1)，訓(xùn)練結(jié)束后第2天將生理鹽水或 嗎啡訓(xùn)練的大鼠各自分為2組(10只/組)，共4組，g卩(l)生理鹽水訓(xùn)練后給予 溶媒組；(2)生理鹽水訓(xùn)練后給予雷帕霉素組；(3)嗎啡訓(xùn)練后給予溶媒組；(4) 嗎啡訓(xùn)練后給予雷帕霉素組。在CPP測(cè)試前分別微注射相應(yīng)的藥物雷帕霉素 (50嗎&1, 0.5pl/側(cè))或溶媒對(duì)照(0.5pl/側(cè))到伏隔核的核部，給藥后24小時(shí)，進(jìn) 行CPP測(cè)試(試驗(yàn)設(shè)計(jì)如圖3 )。
結(jié)果(見圖4 )方差分析表明組間偏愛分?jǐn)?shù)具有顯著性差異(Fu,w二11.021， pO.Ol)，各測(cè)試時(shí)間之間偏愛分?jǐn)?shù)具有顯著性差異(F(1, 16) =8.236, pO.Ol)， 兩者之間具有交互作用(F(1, 16) =23.512, pO.Ol)。事后比較(Post Hoc)分析 表明CPP測(cè)試前伏隔核的核部給予雷帕霉素可抑制CPP的表達(dá)，直到給藥后---周時(shí)間都未見恢復(fù)，且小劑量的嗎啡不能點(diǎn)燃。說明環(huán)境線索暴露前伏隔核的核 部給予雷帕霉素能夠有效抑制嗎啡成癮大鼠的覓藥行為。
實(shí)施例5雷帕霉素抑制環(huán)境線索誘導(dǎo)后嗎啡成癮大鼠的覓藥行為試驗(yàn) 將80只大鼠進(jìn)行腦立體定位手術(shù)，將微量注射導(dǎo)管分別置于伏隔核的核部 和伏隔核的殼部各40只，核部和殼部各40只再分別分為2組，每組40只分別 進(jìn)行生理鹽水或嗎啡CPP訓(xùn)練(訓(xùn)練方法同實(shí)施例1 )， 4輪訓(xùn)練結(jié)束后的第2 天將2組分為8組，10只/組，即(1)生理鹽水訓(xùn)練后核部給予雷帕霉素組；
(2)生理鹽水訓(xùn)練后核部給予溶媒對(duì)照組；(3)嗎啡訓(xùn)練后核部給予雷帕霉素 組；(4)嗎啡訓(xùn)練后核部給予溶媒對(duì)照組；(5)生理鹽水訓(xùn)練后殼部給予雷帕 霉素組；(6)生理鹽水訓(xùn)練后殼部給予溶媒對(duì)照組；(7)嗎啡訓(xùn)練后殼部給予 雷帕霉素組；(8)嗎啡訓(xùn)練后殼部給予溶媒對(duì)照組。在CPP測(cè)試后立即分別微 注射50iig雷帕霉素(50(ig4il,0.5pl/側(cè))或lpl溶媒對(duì)照(0.5^il/側(cè))到伏隔核的核 部或伏隔核的殼部，給藥后24小時(shí)進(jìn)行CPP測(cè)試(訓(xùn)練方法同實(shí)施例1 )，給 藥后第1天和第7天進(jìn)行再次測(cè)試，觀察雷帕霉素覓藥行為的長(zhǎng)期影響效果，如果CPP消失，則用小劑量嗎啡點(diǎn)燃(5mg/kg， i.p)。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如圖5所示。
結(jié)果方差分析表明組間偏愛分?jǐn)?shù)具有顯著性差異(伏隔核的核部(見圖6 ):
Fai6) =12.035, p〈0.01;伏隔核的殼部(見圖7): F(1，16) =21.032, pO.Ol)，各 測(cè)試吋間之間偏愛分?jǐn)?shù)A有顯著性差異(伏隔核的核部Fai6, = 8.021, p<0.01; 伏隔核的殼部F u，w =9.356， p<0.01)，兩者之間具有交互作用(伏隔核的核 部F(1,16) =23.012， p〈0.01;伏隔核的殼部F u, 16) 二20.123， p<0.01 )。說明
伏隔核的核部或殼部分別給予雷帕霉素均能夠有效抑制線索暴露后嗎啡成癮大 鼠的覓藥行為。
權(quán)利要求
1、雷帕霉素在制備治療嗎啡類藥物成癮的藥物上的應(yīng)用。
2、 雷帕霉素在制備防止嗎啡類藥物脫毒后的復(fù)吸的藥物上的應(yīng)用。
3、 按照權(quán)利要求l所述的應(yīng)用，其特征在于所述的嗎啡類藥物是指嗎啡、 鴉片、海洛l天l、阿片、可待因、美沙酮、鎮(zhèn)痛藥、復(fù)方樟腦酊、復(fù)方吐根散或
4.按照權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的嗎啡類藥物是指嗎啡;、 鴉片、海洛因、阿片、可待因、美沙酮、鎮(zhèn)痛藥、復(fù)方樟腦酊、復(fù)方吐根散或 罌粟堿之一種。
全文摘要
本發(fā)明公開了雷帕霉素在制備治療嗎啡類藥物成癮的藥物上的用途。本發(fā)明為治療嗎啡類藥物成癮和防嗎啡類藥物脫毒后的嗎啡復(fù)吸提供了一種有效方法；并且本發(fā)明效果好，有望從根本上消除嗎啡類成癮患者的精神依賴。
文檔編號(hào)A61K31/436GK101444506SQ20081024756
公開日2009年6月3日 申請(qǐng)日期2008年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月30日
發(fā)明者史海水, 張肖麗, 杰 時(shí), 朱維莉, 李艷琴, 林 陸 申請(qǐng)人:北京大學(xué)