專利名稱：：玉米提取物防治腫瘤的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及玉米提取物，提取物的制備方法，含有這類提取物的組合物，以及這類提取物在制備抗腫瘤產(chǎn)品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：癌癥嚴(yán)重威脅著人類的生命，是當(dāng)今世界上大多數(shù)國(guó)家的主要死因之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全世界每年死于癌癥的患者約500萬(wàn)，因此癌癥的預(yù)防與治療任務(wù)十分艱巨。手術(shù)、放療和化療被認(rèn)為是是癌癥治療的三大法寶，但嚴(yán)格地說，能用藥物治療癌癥是最理想的。和可怕、危險(xiǎn)又有痛苦的外科手術(shù)法，或者須有高度設(shè)備的放射性療法(使用放射能，若稍有不慎，可能影響重要臟器)相比，如果可以利用癌癥化學(xué)療法劑等藥物抑制癌癥的發(fā)展，征服癌癥，那么對(duì)患者而言真是一大福音。腫瘤藥物治療的歷史由來(lái)以久，但用化學(xué)藥物治療腫瘤只是近四十年的事，與手術(shù)治療及放射治療相比，藥物治療的歷史要短得多。經(jīng)過四十多年的努力，科學(xué)家已發(fā)現(xiàn)幾十種有效的抗腫瘤藥物。正是這些藥物使急性白血病患兒的平均生存期由過去的23個(gè)月延長(zhǎng)到5年以上，使過去的不治之癥絨毛膜上皮癌得以治愈，使不少晚期腫瘤病人的生命明顯延長(zhǎng)，從而使腫瘤療效得以改觀。新抗腫瘤藥物的不斷發(fā)現(xiàn)及深入研究已使腫瘤化學(xué)治療成為學(xué)科并使腫瘤內(nèi)科學(xué)得以誕生。Elion及Hitchings于1988年被授予諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)表明抗腫瘤藥的歷史性成就己舉世公認(rèn)。當(dāng)然，這并不意味抗腫瘤藥的研究不再需要發(fā)展，相反它面臨嚴(yán)重的挑戰(zhàn)，這就是多數(shù)常見實(shí)體瘤如肺癌、肝癌、結(jié)腸癌及胰腺癌等還缺乏有效藥物，不少抗腫瘤藥在臨床應(yīng)用過程中產(chǎn)生耐藥性。因此，新型抗腫瘤藥物研究勢(shì)在必行。玉米是我國(guó)三大糧食作物之一，又名玉蜀黍、大蜀黍、棒子、苞米、苞谷、玉菱、玉麥、六谷、蘆黍、珍珠米、包谷、包米等；為未本科Gramineae玉蜀黍?qū)僖荒晟荼局参铮∶麨閆eamaysLinn.。玉米原產(chǎn)于中南美洲，主要分布在30°-50°的諱度之間；現(xiàn)在世界各地均有栽培，栽培面積最多的是美國(guó)、中國(guó)、巴西、墨西哥、南非、印度和羅馬尼亞。我國(guó)的玉米主要產(chǎn)區(qū)是東北、華北和西南山區(qū)。玉米不僅可以作為食品和飼料，還是一種重要的可再生的工業(yè)原料，在國(guó)家糧食安全中占有重要的地位。據(jù)國(guó)家發(fā)展和改革委員會(huì)"關(guān)于促進(jìn)玉米深加工業(yè)健康發(fā)展的指導(dǎo)意見"統(tǒng)計(jì)，"十五"期間我國(guó)玉米消費(fèi)量從2000年的1.12億噸增長(zhǎng)到2005年的1.27億噸，年均增長(zhǎng)2.5%。2006年國(guó)內(nèi)玉米消費(fèi)量(不含出口)為1.34億噸，比2005年增長(zhǎng)5.5%;其中，飼用消費(fèi)8400萬(wàn)噸，占國(guó)內(nèi)玉米消費(fèi)總量的64.2%，比重呈下降趨勢(shì)；深加工消耗玉米3589萬(wàn)噸，占消費(fèi)總量的26.8%，比重呈增長(zhǎng)趨勢(shì)；種用和食用消費(fèi)相對(duì)穩(wěn)定。特別需要注意的是，近兩年來(lái)隨著化石能源在全球范圍內(nèi)的供應(yīng)趨緊，以玉米淀粉、乙醇及其衍生產(chǎn)品為代表的玉米深加工業(yè)發(fā)展迅速，成為農(nóng)產(chǎn)品加工業(yè)中發(fā)展最快的行業(yè)之一，盡管玉米在世界各地的食品和深加工業(yè)方面已獲得廣泛應(yīng)用，但有關(guān)玉米的具體藥用價(jià)值至今未見任何正式研究報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容為了充分利用玉米的資源，本發(fā)明的發(fā)明人對(duì)玉米進(jìn)行了系統(tǒng)研究，通過廣泛的藥理篩選，證明玉米具有預(yù)防和/或治療腫瘤的作用。本發(fā)明的目的在于提供一種玉米提取物。本發(fā)明的另一目的在于提供一種玉米提取物的制備方法。本發(fā)明的再一目的在于提供一種含有玉米提取物的組合物。本發(fā)明的又一目的在于提供一種該類化合物在制備預(yù)防和/或治療腫瘤的產(chǎn)品中的應(yīng)用。為了完成本發(fā)明之目的，可采用如下技術(shù)方案玉米經(jīng)干燥并適當(dāng)?shù)姆鬯?，以利增大與溶劑的接觸面積提高效率。玉米的提取溶劑使用水、醇類、或水與醇類的混合物。優(yōu)選的醇類包括甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇等，最優(yōu)選的是乙醇，乙醇濃度為體積比50100%;優(yōu)選的濃度為體積比7095%。提取時(shí)溶劑量為原藥重量的214倍，優(yōu)選是35倍。提取可以在靜態(tài)或動(dòng)態(tài)下，優(yōu)選在動(dòng)態(tài)條件下。為了提高提取的效率，可以使用超聲波等。提取的溫度是從室溫(例如2(TC)到溶劑回流溫度的范圍內(nèi)，優(yōu)選在回流的溫度下。提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，間歇提取時(shí)可重復(fù)25次。提取時(shí)間是l小時(shí)到4小時(shí)，優(yōu)選為2.5到3小時(shí)。上步結(jié)束后，合并濾液，濾去藥渣。濾液在動(dòng)態(tài)狀態(tài)下，在常壓或減壓加熱濃縮成膏狀，優(yōu)選減壓濃縮。提取物可經(jīng)冷凍干燥或真空干燥成干粉，也可把濃縮液體直接噴霧干燥成干粉進(jìn)行各種制劑成型。本發(fā)明的玉米提取物還可以用下述方法制備將玉米用純凈水在加壓0.01-0.1MPa的條件下煎煮提取3次(溶劑量3-6倍，3-6倍，3-6倍)，每次時(shí)間為30-60min，過濾，合并提取液，濃縮干燥，得玉米水提取物。殘余玉米還再加50%乙醇常壓回流提取2次，每次1小時(shí)，過濾，合并提取液，回收溶劑，濃縮干燥，得提取物。對(duì)加壓提取如果改為常壓回流3小時(shí)，應(yīng)該也接近同樣效果。本發(fā)明的產(chǎn)品包括藥品、保健品、食品。本發(fā)明再一方面還涉及以本發(fā)明提取物作為活性成份的藥物組合物。該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^將本發(fā)明提取物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。本發(fā)明提取物在其藥物組合物中的含量通常為0.1-95重量％。本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。本發(fā)明提取物可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。為了將本發(fā)明提取物制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤(rùn)劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、聚乙烯吡咯垸酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤(rùn)滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明提取物與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明提取物先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼瑁僦糜谟材z囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明提取物片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明提取物的膠囊劑。為將本發(fā)明提取物制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、pH調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-e-環(huán)糊精等；pH調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。本發(fā)明提取物藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的個(gè)體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來(lái)講，本發(fā)明提取物的每天的合適劑量范圍為0.l-800mg/Kg體重，優(yōu)選為0.l-100mg/Kg體重，更優(yōu)選為l-60mg/Kg體重，最優(yōu)選為2-30mg/Kg體重。上述劑量可以一個(gè)劑量單位或分成幾個(gè)劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及包括運(yùn)用其它治療手段的給藥方案。本發(fā)明的提取物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的提取物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整它的劑量。圖1YM-J、YM-S對(duì)裸鼠人胃癌(BJC803)生長(zhǎng)曲線變化的影響術(shù)語(yǔ)和縮寫YM-J:玉米酒精提取物YM-S:玉米水提取物具體實(shí)施例方式玉米提取物的制備實(shí)施例l將10kg玉米用95%乙醇回流提取3次，以重量計(jì)，溶劑量分別是玉米的5倍，3.5倍，3.5倍，合并提取液，減壓回收乙醇，真空干燥。得玉米乙醇提取物。實(shí)施例2將10kg玉米用水回流提取3次，以重量計(jì)，溶劑量分別是玉米的溶劑量5倍，3.5倍，3.5倍，合并提取液，減壓回收水，真空干燥。得玉米水提取物。實(shí)施例3將20kg玉米用純凈水在加壓0.01-0.1MPa的條件下煎煮提取3次(溶劑量5倍，5倍，5倍)，每次時(shí)間為30分鐘，過濾，合并提取液，回收溶劑，至約10L，用敞口鍋揮干，真空干燥。得玉米水提取物YM-S。實(shí)施例4將20kg玉米用純凈水在常壓回流3小時(shí)的條件下煎煮提取3次(溶劑量:5倍，5倍，5倍)，每次時(shí)間為30-60min，過濾，合并提取液，回收溶劑，至約IOL，用敞口鍋揮千，真空干燥。得玉米水提取物YM-S。實(shí)施例5將20kg玉米用純凈水在加壓0.01-O.lMPa的條件下煎煮提取3次(溶劑量5倍，5倍，5倍)，每次時(shí)間為60分鐘，過濾，合并提取液，殘余玉米再加50%乙醇常壓回流提取2次，每次1小時(shí)，過濾，與水提取液合并，回收溶劑，至約10L，用敞口鍋揮干，真空千燥。得玉米水提取物YM-S。藥理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)例1玉米體外給藥對(duì)人腫瘤細(xì)胞的抑制作用研究1試驗(yàn)?zāi)康挠^察玉米乙醇提取物、玉米水提取物體外抗人腫瘤細(xì)胞作用。2受試藥物玉米乙醇提取物稱取玉米乙醇提取物8.6mg，DMSO溶解后，1640培養(yǎng)液配至6.45mL(DMSO含量為5%。)，終濃度1.33mg/mL，為最高劑量，再依次3倍倍比稀釋6個(gè)劑量，最低劑量為0.0019mg/mL。玉米水提取物稱取玉米水提取物24.Omg,DMSO溶解后，1640培養(yǎng)液配至4.8mL(DMSO含量為5%。)，終濃度5.Omg/mL，為最高劑量，再依次3倍倍比稀釋6個(gè)劑量，最低劑量為0.0069mg/mL。3試劑RPMI-1640MEDIUM:CAT:SH30807.01，Lot:AQM25276BC，EXP:Dec/2008HycloneNewbornCalfSerum:CAT:B15-001，Lot:B00104-0786，EXP:07/2009，PAA4腫瘤細(xì)胞株人胃癌細(xì)胞BGC-823，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)研究所細(xì)胞中心人肝癌細(xì)胞SMMC-7721，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)研究所細(xì)胞中心5儀器BIO-RADModel450型酶標(biāo)儀(日本)Kendro培養(yǎng)箱(德國(guó))SanyoLaboAutoclave消毒柜(日本)6實(shí)驗(yàn)方法6.1玉米對(duì)人胃癌細(xì)胞BGC-823的影響0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞后，用含10%新生牛血清的1640培養(yǎng)液吹打細(xì)胞至單個(gè)，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1(f個(gè)/ml，100ul/孔接種于96孔板中，細(xì)胞培養(yǎng)24h后吸棄培養(yǎng)液，設(shè)正常對(duì)照組，DMSO組(DMSO含量為5%。)，玉米乙醇提取物終濃度分別為1.33、0.44、0.15、0.05、0.017、0.0057、0.0019mg/mL共7個(gè)濃度組，玉米水提取物終濃度分別為5.0、1.67、0.56、0.185、0.062、0.021、0.0069mg/mL共7個(gè)濃度組。37'C，02培養(yǎng)箱中培育24h，取出，吸棄培養(yǎng)液，lmg/mLMTT50uL/孔，37°C，5呢C02培養(yǎng)箱中培育4h，吸棄上清，DMS0200uL/孔，微量振蕩器充分混勻，570nM處測(cè)OD值。計(jì)算各給藥劑量對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率，求出IC5。。結(jié)果見表l。腫瘤細(xì)胞抑制率=(5%。DMSO組OD值一各給藥組OD值)/5%。DMSO組OD值X100%采用SARS9,0計(jì)算玉米乙醇提取物和玉米水提取物的IC5。6.2玉米對(duì)人肝癌細(xì)胞S函C-7721的影響實(shí)驗(yàn)方法同6.1，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。7實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1玉米對(duì)人胃癌細(xì)胞BGC-823的影響組別劑量(mg/mL)腫瘤細(xì)胞抑制率(%)IC50(ug/mU玉米乙醇1.3369.83提取物0.4474.650.1570.690.0548.6124.160.01740.420.005742.340.001928.93玉米水5.069.76提取物1.6772.6312.610.5676.39<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>8結(jié)論玉米乙醇提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞BGC-823、人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的ICs。分別為24.16和127.42ug/mL。玉米水提取物對(duì)人胃癌細(xì)胞BGC-823、人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的ICs。分別為12.61和1352.72ug/mL。實(shí)驗(yàn)例2玉米對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制作用1試驗(yàn)?zāi)康挠^察玉米乙醇提取物、玉米水提取物對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制作用。2受試藥物玉米乙醇提取物稱取玉米乙醇提取物2.0g，蒸餾水配至100mL，濃度為0.02g/roL,為高劑量，再倍比稀釋成低劑量0.01g/mL，給藥量為0.2mL/10g體重。玉米水提取物稱取玉米水提取物2.0g,蒸餾水配至100mL，濃度為0.02g/mL，為高劑量，再倍比稀釋成低劑量0.01g/mL,給藥量為0.2mL/10g體重。3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物KM小鼠，SPF級(jí)，雄性，中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證編號(hào)SCXK(軍)2002-001，質(zhì)量合格證明編號(hào)0059391。小鼠飼養(yǎng)于中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心動(dòng)物房，實(shí)驗(yàn)設(shè)施許可證SYXK(京)2005—0028。動(dòng)物房為人工光照，12h明暗周期，溫度2022°C，相對(duì)濕度為4060%,換氣15次/h。動(dòng)物自由攝食與飲水。喂飼北京市科奧協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，產(chǎn)品許可證號(hào)京動(dòng)許字(2000)第015號(hào)，登記證號(hào)京飼(配)字第238號(hào)。4造模方法小鼠右腋皮下接種H22瘤細(xì)胞5X107ml，接種量0.2ml/只。5實(shí)驗(yàn)分組模型對(duì)照組環(huán)磷酰胺組30mg/kg玉米乙醇提取物高劑量組400mg/kg玉米乙醇提取物低劑量組200mg/kg玉米水提取物高劑量組400mg/kg玉米水提取物低劑量組200mg/kg共6組，每組12-14只。6實(shí)驗(yàn)方法KM種小鼠右腋皮下接種H22瘤細(xì)胞5X10V只，接種量0.2ml/只。接種后按體重隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥環(huán)磷酰胺30mg/kg組、玉米乙醇提取物400mg/kg、玉米乙醇提取物200mg/kg、玉米水提取物400mg/kg、玉米水提取物200呢/kg組共6組，于接種后24h開始給藥，每日灌胃一次，連續(xù)10天，模型對(duì)照組灌胃等容量蒸餾水，環(huán)磷酰胺組腹腔注射，隔日給藥。各組小鼠于末次給藥后24h剝離瘤體稱重，計(jì)算平均瘤重、腫瘤系數(shù)及抑制率，t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表。7試驗(yàn)結(jié)果玉米對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制作用見表3。玉米乙醇提取物、玉米水提取物給小鼠連續(xù)口服給藥10天，對(duì)H22實(shí)體瘤顯示出一定的抑制作用。其中玉米乙醇提取物400mg/kg、200mg/kg對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制率分別為44.82%和25.14%,玉米水提取物400mg/kg、200mg/kg對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制率分別為38.恥％和25.09%。表3玉米對(duì)H22實(shí)體瘤的抑制作用(X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>與模型組比較，*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001腫瘤系數(shù)i中瘤重量/體重xioo抑制率(％)=(對(duì)照組腫瘤系數(shù)-給藥組腫瘤系數(shù))/對(duì)照組腫瘤系數(shù)X1008結(jié)論玉米乙醇提取物和玉米水提取物對(duì)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤均有一定的抑制作用。實(shí)驗(yàn)例3、YM-J,YM-S對(duì)裸鼠人胃癌(BGC803)的抑瘤作用1試驗(yàn)?zāi)康挠^察YM-J、YM-S對(duì)裸鼠人胃癌(BGC803)的抗腫瘤作用。2動(dòng)物裸鼠Balb/c-nu，SPF級(jí)，50只，4-6周齡，體重16土2g，雌雄各半，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所繁育場(chǎng)提供，合格證號(hào)SCXK(京)2005-0013。動(dòng)物詞養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物室中。動(dòng)物房室溫控制在22.6i0.fC，濕度75.8±6.2%，12小時(shí)照明，12小時(shí)黑暗。標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)盒內(nèi)喂養(yǎng)，每盒5只。采用清潔級(jí)鼠料喂飼，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心生產(chǎn)，生產(chǎn)許可證號(hào)京動(dòng)(2000)第015號(hào)。用飲用水瓶供應(yīng)電滲析超濾凈化水，每日沖洗飲水瓶、換水一次。3受試藥YM-J、YM-S均由醫(yī)科院藥物所提供，采用1%羥甲基纖維素鈉(稱取lg羥甲基纖維素鈉定容至100ml蒸餾水中，IO(TC水浴中煮至溶解)配制成10mg/ml和20mg/ml。YM-J:稱取YM-J2.0g，蒸餾水配至100mL，濃度為0.02g/mL，為高劑量，再倍比稀釋成低劑量0.01g/mL，給藥量為0.2tnL/10g體重。YM-S:稱取YM-S2.0g，蒸餾水配至100mL，濃度為0.02g/mL，為高劑量，再倍比稀釋成低劑量0.01g/mL,給藥量為0.2mL/10g體重。4試驗(yàn)方法人胃癌(BGC803)瘤株由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所中心實(shí)驗(yàn)室常規(guī)保存。腫瘤細(xì)胞從液氮內(nèi)取出，37t:迅速解凍復(fù)蘇后，接種于裸鼠的右側(cè)腋窩皮下，10天后移植腫瘤生長(zhǎng)達(dá)1.0cm直徑左右，處死裸鼠，在無(wú)菌條件下，剝離腫瘤按常規(guī)方法傳代。腫瘤接種與分組脫頸處死荷瘤裸鼠，在無(wú)菌條件下剝離腫瘤，生理鹽水清洗數(shù)次，剔除壞死的組織，選擇生長(zhǎng)良好的腫瘤組織，用手術(shù)刀片將腫瘤組織切割成3-4mn^大小的組織塊，以特制的組織接種器將腫瘤組織移植到右側(cè)腋窩皮下。接種后第12天隨機(jī)分為6組，每組8只(雌、雄性各4只)，分組后給藥。設(shè)4個(gè)受試藥物組(YM-J400mg/kg、YM-J200mg/kg、YM-S400mg/kg、YM-S200mg/kg)，另設(shè)陽(yáng)性藥對(duì)照組(環(huán)磷酰胺30mg/Kg，)和陰性對(duì)照組(1%羥甲基纖維素鈉20mg/kg)。受試藥物組每日上午9時(shí)口服一次，連續(xù)19天，環(huán)磷酰胺組隔日腹腔注射一次，共7次，環(huán)磷酰胺現(xiàn)用現(xiàn)配。陰性對(duì)照組1%羥甲基纖維素鈉20mg/kg(同受試藥物組)。分組后每4天用數(shù)顯卡尺測(cè)量腫瘤兩個(gè)垂直直徑，計(jì)算腫瘤相對(duì)增值率(％)。接種后30天斷頸處死裸鼠，稱體重后完整剝離腫瘤并稱瘤重，計(jì)算腫瘤抑制率(％)和相對(duì)腫瘤增值率T/C(呢)。腫瘤抑制率(％)=[1-(給藥組平均瘤重/陰性對(duì)照組平均瘤重)]X100%相對(duì)腫瘤增殖率T/C(%)=治療組111^/生理鹽水組111^乂100%。5實(shí)驗(yàn)結(jié)果動(dòng)物給藥后，各組動(dòng)物的活動(dòng)、進(jìn)食等一般狀態(tài)良好。陽(yáng)性對(duì)照環(huán)磷酰胺組與腫瘤模型組比較腫瘤抑制率(％)為61.39%(P<0.001)。YM-J400mg/kg組與腫瘤模型組比較腫瘤抑制率(％)為36.3%(PO.Ol)，顯示有一定的抗腫瘤作用。表4:YM-J、YM-S對(duì)人胃癌(BJC803)的抑瘤作用組別劑量(mg/kg)動(dòng)物數(shù)給藥途徑(只)次數(shù)體重(x士SD,g)前后(x土SD.g)抑制率P值(%)腫瘤模型會(huì)且環(huán)磷酰胺鄉(xiāng)且YM-J高劑量組YM-J低劑量組YM-S高劑量組YM-S低劑量組20ml/Kg830mg/Kg8400mg/Kg8200mg/Kg8400mg/Kg8口服X19注射X7口服X19口服X19口服X19200mg/Kg8口服X1916.9±0.8719.47±0.916.28±0.619.49±1.216.41±0.7618.03±1.716.47±1.218.3±0,8916.74±0.418.3±0.816.74±1.218.3±0.891.344±0.170.519±0.090.856±0.345*1.156±0.6041.025±0.4351.1075±0.1461.39<0.00136.3<0.0513.9>0.0523.15>0.0517.6>0.05表5各實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長(zhǎng)曲線變化(mm3)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表6各實(shí)驗(yàn)組相對(duì)腫瘤增殖率(％)變化<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>6結(jié)論YM-J在400mg/kg劑量下對(duì)人胃癌(BGC803)荷瘤裸鼠具有抗腫瘤作用，腫瘤抑制率為36.3%(P<0.01)7參考文獻(xiàn)YasukawaT，KimuraH，TabataY,0guray.BiodegradablescleralplugsforvitreorebinaldrugdeliveryAdvDrugDelRev,52(1):25-36(2001)[2]徐叔云主編、藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，第三版。北京人民衛(wèi)生出版社。2002年；1757—1825。韓銳主編、抗癌藥物與實(shí)驗(yàn)技術(shù)，北京醫(yī)科大學(xué)北京協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997;316-—319權(quán)利要求1、一種玉米提取物的制備方法將玉米用溶劑提取數(shù)次，合并提取液，回收溶劑，干燥，得玉米提取物。2、根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，所述的溶劑是乙醇、水。3、根據(jù)權(quán)利要求2的制備方法，其特征在于，將玉米用純凈水在加壓0.01-0.lMPa的條件下煎煮提取3次，溶劑量為3-6倍，3-6倍，3-6倍，每次時(shí)間為30-60min，過濾，合并提取液，濃縮干燥，得玉米水提取物。4、根據(jù)權(quán)利要求3的制備方法，其特征在于，將殘余玉米還再加50%乙醇常壓回流提取2次，每次1小時(shí)，過濾，合并提取液，濃縮干燥，得玉米水提取物。5、一種玉米提取物的制備方法將玉米用95%乙醇或水為溶劑回流提取3次，以重量計(jì)，溶劑量分別是玉米的5倍，3.5倍，3.5倍，合并提取液，減壓回收溶劑，真空干燥，得玉米提取物。6、權(quán)利要求1一5的任一制備方法制備的玉米提取物。7、一種組合物，其含有預(yù)防、緩解和/或治療腫瘤有效量的權(quán)利要求6的玉米提取物，以及任選的藥學(xué)可接受的載體和/或輔料。8、玉米在制備預(yù)防、緩解和/或治療腫瘤產(chǎn)品中的應(yīng)用。9、權(quán)利要求6的玉米提取物在制備預(yù)防、緩解和/或治療腫瘤產(chǎn)品中的應(yīng)用。10、根據(jù)權(quán)利要求8—9中任一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的產(chǎn)品包括藥品、保健品、食品。11、根據(jù)權(quán)利要求8—9中任一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的產(chǎn)品是粉末、片劑、膠囊、口服液。12、根據(jù)權(quán)利要求8—9中任一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤包括肝癌、胃癌。全文摘要本發(fā)明公開了玉米提取物防治腫瘤的用途。具體公開了玉米提取物；提取物的制備方法，包括將玉米用溶劑提取數(shù)次，合并提取液，回收溶劑，干燥，得玉米提取物；含有這類提取物和藥學(xué)可接受的載體和/或輔料的組合物，以及、玉米、玉米提取物、含有玉米提取物的組合物在制備預(yù)防、緩解和/或治療腫瘤產(chǎn)品中的應(yīng)用，所述的產(chǎn)品包括藥品、保健品。文檔編號(hào)A61K36/899GK101439160SQ20081009362公開日2009年5月27日申請(qǐng)日期2008年4月17日優(yōu)先權(quán)日2007年11月21日發(fā)明者霞張,李志宏,梁愛華,母海成,秦海林,鄧安珺申請(qǐng)人:龍井民康生物制品廠;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所