專利名稱：：一種中藥組合物在制備胰島素增敏劑類藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及到一種中藥組合物的新用途，具體的，涉及一種中藥組合物在制備胰島素增敏劑藥物中的應(yīng)用，同時(shí)，公開了這種中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用，屬于中藥應(yīng)用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展和生活方式的改變,代謝綜合征(MS)的發(fā)生率急劇升高，其診治涉及內(nèi)分泌、心血管等多個(gè)學(xué)科,已成為新的健康衛(wèi)生熱點(diǎn)問題。MS代表了一系列心血管疾病危險(xiǎn)因素的聚集狀態(tài),包括肥胖、高血壓、血糖異常、致動(dòng)脈粥樣硬化的血脂紊亂等多種代謝異常。目前認(rèn)為，代謝綜合征與胰島素分泌代謝異常有關(guān),其共同的病理生理基礎(chǔ)是胰島素抵抗。1998年世界衛(wèi)生組織(WHO)正式命名為"代謝綜合征"。高血壓作為其組成部分,與MS關(guān)系密切,值得特別關(guān)注。胰島素抵抗是代謝綜合征的共同病理生理學(xué)基礎(chǔ)，胰島素增敏劑類降糖藥可以降低血壓，降壓藥物如血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑和血管緊張素受體拮抗劑已被證明可以改善胰島素敏感性。說明高血壓和胰島素抵抗可能并不互為因果,而是有共同的病因。(高血壓與代謝綜合征.李華，徐云云，楊秋萍.云南醫(yī)藥2007年第28巻第3期)胰島素增敏劑通過提高胰島素靶組織的敏感性，促進(jìn)外周組織(月旨肪、肝臟、骨骼肌等)對(duì)葡萄糖的攝取與消除能力，抑制肝臟的糖異生的作用，從而改善胰島素抗性，增加胰島素敏感性。目前，這一類藥物中研究最多的是唾哩烷二酮類(TZDS)藥物，雖然這類藥物降低胰島素抵抗的確切機(jī)理還不清楚，但它們確定降低了胰島素抵抗病人體內(nèi)升高的脂肪酸水平，同時(shí)，它們也改變了體內(nèi)脂肪組織的分布，用TZDS類藥物治療胰島素抵抗的II型糖尿病不僅改善了血糖的控制，降低抵抗，而且使胰島素抵抗綜合征的其它部分失調(diào)狀況(包括高胰島素血癥、脂質(zhì)代謝紊亂、高尿酸血癥、微白蛋白血癥等)得到好轉(zhuǎn)，且治療時(shí)不會(huì)引起低血糖，倍受人們注目。因此，從天然藥物原料中篩選具有胰島素增敏活性的藥物，具有良好的臨床實(shí)用價(jià)值和市場(chǎng)前景。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑，是指直掛針對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶為作用靶點(diǎn)的一類新型藥物，它通過抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶而阻止血管緊張素I向血管緊張素II生成，減慢緩激肽的降解，升高緩激肽水平，促進(jìn)一氧化氮和前列腺素生成，產(chǎn)生舒血管效應(yīng)。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑在降低外周血管總阻力、降低血壓的同時(shí)，能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、改善心功能；改善腎血流量和腎小球?yàn)V過率;血管緊張素轉(zhuǎn)換酸抑制劑的應(yīng)用對(duì)葡萄糖代謝無不良影響，并可降低膽固醇和甘油三酯，還可增加胰島素敏感性;對(duì)尿酸代謝也無不良影響，利鈉、利尿、且無低鉀低鎂癥。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑不僅抑制血液循環(huán)中的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶，而且抑制組織中的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶，從而減少機(jī)體內(nèi)血管緊張素II的的過度生成，發(fā)揮控制血壓，保護(hù)靶器官的作用。鑒于血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑作用機(jī)理的上述特點(diǎn)，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑目前已作為臨床治療高血壓的一類新型降壓藥物，不僅具有降壓作用強(qiáng)、副作用小的療效特點(diǎn)，尤其對(duì)心臟、血管和腎臟等耙器官具有良好的保護(hù)作用，適用于各種程度的高血壓病的治療。同時(shí)，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑尚可作為臨床治療心力衰竭、腎功能衰竭及糖尿病腎病的重要治療藥物。因此，從傳統(tǒng)中藥中篩選研究和發(fā)現(xiàn)具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性的新藥，同樣具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值和市場(chǎng)前景。大部分研究顯示，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑可改善胰島素的敏感性,但各項(xiàng)研究均提示對(duì)脂代謝呈中性反應(yīng),既無降低血膽固醇和甘油三酯的作用,亦無增加作用。胰島素增敏劑目前僅用于消除胰島素抵抗,假如同時(shí)能降低血壓就能給高血壓治療提供新的方法。盡管國(guó)外小樣本試驗(yàn)中羅格列酮降低血壓的幅度己達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是血壓下降絕對(duì)值較小，這種降壓效果難以使人產(chǎn)生應(yīng)用此類藥物進(jìn)行降壓治療的興趣。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中胰島素增敏劑的降壓效果幾乎與某些鈣通道阻滯劑相當(dāng),但是還應(yīng)考慮到動(dòng)物與人的種屬差異。國(guó)內(nèi)將羅格列酮用于某些特殊類型的原發(fā)性高血壓人群的降血壓治療，僅服用羅格列酮4周后收縮壓平均降低了17mmHg,舒張壓平均降低了11mmHg,有待今后開展更多臨床研究予以驗(yàn)證。(高血壓與代謝綜合征.李華，徐云云，楊秋萍.云南醫(yī)藥2007年第28巻第3期)本發(fā)明是在第02146570.3號(hào)的基礎(chǔ)上進(jìn)行的改進(jìn)發(fā)明，在此全文引用該專利文件記載的內(nèi)容。上述專利未公開該中藥組合物在制備胰島素增敏劑藥物及這種中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明在其基礎(chǔ)上進(jìn)行了相關(guān)研究，提供了該中藥組合物在制備上述藥物中的應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種中藥組合物的新用途，具體地，涉及一種中藥組合物在制備制備胰島素增敏劑藥物中的應(yīng)用，同時(shí)，公開了這種中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述中藥可以被有相同或相似功效的中藥代替，并且這些藥材均可按照《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》或《中藥大辭典》進(jìn)行炮制。本發(fā)明涉及一種中藥組合物在制備胰島素增敏劑藥物中的應(yīng)用，同時(shí)，涉及了這種中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用，所述中藥組合物由如下重量份的原料藥制成人參42-160、黃精50-200、蒼術(shù)30-100、苦參20-60、茯苳35-100、麥冬50-200、制何首烏35-100、地黃50-120、山茱萸50-200、黃連20-60、佩蘭30-60、蔡枝核75-150、淫羊藿30-60、知母30-100、丹參35_120、葛根50-200、地骨皮30-100;優(yōu)選的，該中藥組合物由如下重量份的原料藥制成人參42、黃精200、蒼術(shù)30、苦參60、茯苳35、麥冬200、制何首烏35、地黃120、山茱萸50、黃連60、佩蘭30、為枝核150、淫羊藿30、知母IOO、丹參35、葛根200、地骨皮30。或人參102、黃精136、蒼術(shù)68、苦參56、茯苳83、麥冬136、制何首烏83、地黃102、山茱萸136、黃連56、佩蘭56、蒸枝核136、淫羊藿56、知母68、丹參89、葛根136、地骨皮83。或人參160、黃精50、蒼術(shù)IOO、苦參20、茯苳IOO、麥冬50、制何首烏IOO、地黃50、山茱萸200、黃連20、佩蘭60、蒸枝核75、淫羊藿60、知母30、丹參120、葛根50、地骨皮IOO。優(yōu)選的，所述中藥組合物所用原料藥中，蒼術(shù)為麩炒蒼術(shù)，地黃為生地黃，淫羊藿為炙淫羊藿，黃精為制黃精。本發(fā)明還提供了所述中藥組合物的活性成分由以下步驟制成a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加5-9倍量水提取揮發(fā)油，提取3-6小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用-，c、山茱萸用5-9倍量50-90%乙醇浸漬12-48小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成6(TC測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加6-10倍量50-90%乙醇，回流提取1-3次，每次卜3小時(shí)，提取液過濾，回收乙醇，濃縮成稠膏，烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加7-ll倍量水，煎煮l-2次，每次1-3小時(shí)，提取液過濾，與步驟b中佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮成清膏，加乙醇調(diào)節(jié)醇濃度為50-80%，冷藏放置，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用；步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏與步驟b所得揮發(fā)油共同構(gòu)成該中藥組合物的活性成分。本發(fā)明藥物的劑型為膠囊劑、片劑、散劑、顆粒劑、口服液、軟膠囊、丸劑、酊劑、糖漿劑、栓劑、凝膠劑、噴霧劑或注射劑。其中顆粒劑的制備方法，是由以下步驟制成a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)合并，力Q5-9倍量水，水蒸汽法提取揮發(fā)油，提取3-6小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用；c、山茱萸用5-9倍量50-90%乙醇浸漬12-48小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60。C測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加6-10倍量50-90%乙醇，回流提取l-3次，每次l-3小時(shí)，提取液過濾，回收乙醇，濃縮成稠膏，烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加7-ll倍量水，煎煮l-2次，每次l-3小時(shí),提取液過濾，與步驟b中佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮成清膏，加乙醇調(diào)節(jié)醇濃度為50-80%，冷藏放置，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎，加入適當(dāng)藥學(xué)上可接受的輔料制粒；g、步驟b所得揮發(fā)油加入乙醇溶解，噴入步驟伊萬得的顆粒，混勻，密閉，分裝，即得。本發(fā)明藥物顆粒劑制備方法優(yōu)選為a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加6倍量水，提取揮發(fā)油，提油時(shí)間為5小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用，殘?jiān)鼦壢ィ籧、山茱萸用7倍量75%乙醇浸漬24小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成6(TC測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—70。C烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，力服倍量70%乙醇，回流提取3次，每次2小時(shí)。提取液過濾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(6(TC熱測(cè))的稠膏，65—7(TC烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，力n9倍量水，煎煮2次，每次2小時(shí)，提取液過濾，與佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.10-1.15的清膏，加95%乙醇調(diào)解醇濃度為60%，冷藏放置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，并濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—7(TC烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎；g、將干步驟f所得干膏粉與乳糖粉、糊精按4:5:l混合均勻，用60%乙醇為黏合劑，制軟材，14目篩網(wǎng)制顆粒，55—60。C烘干，12-60目篩網(wǎng)整粒，篩出部分細(xì)粉，噴入步驟b所得的揮發(fā)油，混勻，密閉半小時(shí)，分裝，即得。本發(fā)明藥物的其他劑型按比例稱取原料藥后，采用常規(guī)的制備方法制備，例如，范碧亭《中藥藥劑學(xué)》(上?？茖W(xué)出版社1997年12月第1版)記載的制備工藝，制成藥劑學(xué)可接受的常規(guī)劑型。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的輔料，例如填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂、十二垸基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括甜味劑及各種香精；防腐劑包括尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)中藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑學(xué)》，上?？茖W(xué)出版社1997年12月第1版中各劑型記載的輔料)。本發(fā)明藥物組合物具有良好的胰島素增敏作用和對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制作用。不僅能有效地改善和治療n型糖尿病的胰島素抵抗，適用于II型糖尿病的治療;同時(shí)能有效地抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性，可用于高血壓的治療，具有療效顯著、使用安全方便等優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本思想的前提下，還可以作出其他多種形式的修改、替換與變更。以下通過具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:原料藥配方為人參102g、黃精136g、蒼術(shù)68g、苦參56g、茯苓83g、麥冬136g、制何首烏83g、地黃102g、山茱萸136g、黃連56g、佩蘭56g、惹枝核136g、淫羊藿56g、知母68g、丹參89g、葛根136g、地骨皮83g。10制備方法為a、按照處方量稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加6倍量水，提取揮發(fā)油，提油時(shí)間為5小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用，殘?jiān)鼦壢?；c、山茱萸用7倍量75。/。乙醇浸漬24小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60。C測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—70。C烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，力P8倍量70。/。乙醇，回流提取3次，每次2小時(shí)。提取液過濾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(6(TC熱測(cè))的稠膏，65—7(TC烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，力Q9倍量水，煎煮2次，每次2小時(shí)，提取液過濾，與佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.10-1.15的清膏，加95%乙醇調(diào)解醇濃度為60%，冷藏放置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，并濃縮至60。C時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—7(TC烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎；g、將步驟f所得干膏粉與乳糖粉、糊精按4:5:l混合均勻，用60%乙醇為黏合劑，制軟材，14目篩網(wǎng)制顆粒，55—60。C烘干，12-60目篩網(wǎng)整粒，篩出部分細(xì)粉，噴入步驟b所得揮發(fā)油，混勻，密閉半小時(shí)，即得556克顆粒(以下簡(jiǎn)稱KL)。實(shí)施例2:原料藥配方為人參42g、黃精200g、蒼術(shù)30g、苦參60g、茯苓35g、麥冬200g、制何首烏35g、地黃120g、山茱萸50g、黃連60g、佩蘭30g、荔枝核150g、淫羊藿30g、知母IOOg、丹參35g、葛根200g、地骨皮30g。制備方法為a、按處方量稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加5倍量水，提取揮發(fā)油，提油時(shí)間為3小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用，殘?jiān)鼦壢ィ籆、山茱萸用5倍量50。/。乙醇浸漬12小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60'C測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—70'C烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，力n6倍量5。/。乙醇，回流提取2次，每次1小時(shí)。提取液過濾，回收乙醇，并濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—7(TC烘千，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，力B7倍量水，煎煮1小時(shí)，提取液過濾，與佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.10-1.15的清膏，加95%乙醇調(diào)解醇濃度為50%，冷藏放置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，并濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—70。C烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎，制成顆粒；g、將步驟b所得揮發(fā)油加入乙醇溶解，噴入步驟伊萬得顆粒，按常規(guī)制劑方法制成1000片片劑(以下簡(jiǎn)稱PJ)。實(shí)施例3:原料藥配方為人參160g、黃精50g、蒼術(shù)100g、苦參20g、茯苓100g、麥冬50g、制何首烏100g、地黃50g、山茱萸200g、黃連20g、佩蘭60g、荔枝核75g、淫羊藿60g、知母30g、丹參120g、葛根50g、地骨皮100g。制備方法為a、按處方量稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加9倍量水，提取揮發(fā)油，提油時(shí)間為6小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用，殘?jiān)鼦壢?；c、山茱萸用9倍量卯％乙醇浸漬48小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60。C測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—70。C烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加10倍量90%乙醇，回流提取3次，每次3小時(shí)。提取液過濾，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(60。C熱測(cè))的稠膏，65—70。C烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加11倍量水，煎煮2次，每次3小時(shí)，提取液過濾，與佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.10-1.15的清膏，加95%乙醇調(diào)解醇濃度為80%，冷藏放置24小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇，并濃縮至6(TC時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，65—7(TC烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎；g、將步驟b所得揮發(fā)油加入乙醇溶解，噴入步驟f所得粉碎粉，按常規(guī)制劑方法制成1000粒丸劑(以下簡(jiǎn)稱WJ)。實(shí)施例4:本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ改善胰島素抵抗作用的體外實(shí)驗(yàn)1、3T3-L1細(xì)胞胰島素抵抗模型的建立3T3-L1細(xì)胞用高糖DMEM(含1096FBS)培養(yǎng)于6孔板上，待細(xì)胞長(zhǎng)滿達(dá)到一定的密度以后，換成含有一定濃度的胰島素、地塞米松與IBMX的增養(yǎng)基培養(yǎng)，待細(xì)胞分化達(dá)80-90%以后，將細(xì)胞接種于24孔板用正常培養(yǎng)基培養(yǎng)兩天，兩天后開始誘導(dǎo)抵抗，留兩孔作為空白對(duì)照，其余用含有胰島素與地塞米松的培養(yǎng)基培養(yǎng)，誘導(dǎo)四天以后，檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基中葡萄糖濃度，當(dāng)誘導(dǎo)抵抗孔的葡萄糖濃度達(dá)到空白對(duì)照孔葡萄糖濃度的0.5-l倍以后，即可確認(rèn)抵抗成立。②本發(fā)明中藥組合物KL、PJ、WJ對(duì)3T3-LI細(xì)胞胰島素抵抗模型改善作用測(cè)定將本發(fā)明中藥組合物KL、PJ、WJ用磷酸緩沖液配成濃度為10mg/ml的無菌溶液，以馬來酸羅格列酮(ROG,葛蘭素史克天津有限公司，批號(hào)-.05010038)為陽性藥物，配成濃度為2X10—31/1的無菌溶液。設(shè)空白對(duì)照孑L、模型對(duì)照孑L、陽性對(duì)照孔與藥物孔，加藥，各藥物終濃度分別為:ROG:2X10—5M,KL、PJ、WJ均為100"g/ml。加藥后兩天檢測(cè)各孔葡萄糖濃度變化，同時(shí)用RT-PCR方法檢測(cè)藥物對(duì)3T3-L1細(xì)胞葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子GLUT4的mRNA表達(dá)水平的影響。結(jié)果見表l表l葡萄糖濃度測(cè)定(mM)13<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由表l結(jié)果可以看出，給藥以后的ROG組，KL、PJ、WJ組葡萄糖濃度雖然沒有恢復(fù)到正常水平，但均較模型組明顯降低，由此可以看出本發(fā)明藥物組合物對(duì)3T3-L1細(xì)胞胰島素抵抗模型具有改善作用。實(shí)施例5:本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ對(duì)胰島素抵抗大鼠的影響造模方法Wistar大鼠，雌雄各半，體重300-380g，由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)10只作為空白對(duì)照組，其余則給予肌肉注射地塞米松磷酸鈉注射劑(西南藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)批號(hào)0510020)lmg/kg，隔一天一次，共21天。造模一周后將造模大鼠隨機(jī)分成5組，即模型組、陽性藥物組(灌胃以羅格列酮3mg/kg.day)、本發(fā)明藥物組合物KL高劑量組(120mg/kg.day灌胃)、本發(fā)明藥物組合物KL中劑量組(90mg/kg.day灌胃)、本發(fā)明藥物組合物KL低劑量組(60mg/kg.day灌胃)，空白對(duì)照組每日灌胃以相應(yīng)的生理鹽水，連續(xù)兩周，分別于給藥前、給藥后測(cè)定空腹血糖與血清胰島素濃度。給藥兩周后測(cè)定結(jié)果見表2:表2本發(fā)明中藥組合物KL對(duì)胰島素抵抗大鼠的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注與模型組比較承P〈0.05由表2結(jié)果可見給藥2周后，各給藥組(R0G、本發(fā)明中藥組合物KL高、中、低劑量)空腹血糖與模型組相比，無顯著差異，血清胰島素水平與模型組相比，本發(fā)明中藥組合物KL高、中、低劑量胰島素水平均降低，其中高中劑量組有顯著差異(P<0.05);胰島素敏感指數(shù)與模型組相比，本發(fā)明中藥組合物KL高、中、低劑量組均升高，其中中劑量組有顯著差異(P<0.05);胰島素抵抗指數(shù)與模型組相比，本發(fā)明中藥組合物KL高、中、低劑量組均明顯降低，其中中劑量組有顯著差異(P<0.05)。以上結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥組合物在一定劑量條件下對(duì)糖尿病胰島素抵抗大鼠有顯著的改善胰島素抵抗的作用。實(shí)施例6:本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性試驗(yàn)1、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的制備取大鼠肺組織，用10mmol/l冰磷酸鉀緩沖液，清洗，切成小塊，用勻槳器打成勻漿。勻漿在4°C，5000g離心10分鐘，棄沉淀。上清液用上述冰磷酸鉀緩沖液低溫下透析過夜，每次2升，換液4次。然后于4i:，40，000g離心40分鐘，棄沉淀，上清液即為酶提取物，分裝，保存于零下20。C備用。2、本發(fā)明藥物組合物KUPJ、WJ對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性影響的測(cè)定分別稱取卡托普利(油頭金石制藥總廠，批號(hào):050701)、本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ，卡托普利配制成濃度為50ug/inl的溶液，本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ均配制成濃度為10mg/ml溶液，以卡托普利為陽性對(duì)照藥物，分別取各樣品溶液lOtU與酶提取液lOw1(約含總蛋白lOiig)，37。C反應(yīng)30分鐘，設(shè)空白對(duì)照為20ul緩沖液，陰性對(duì)照為10ul緩沖液與酶提取液10ul。酶與藥物充分反應(yīng)后，加入o-phthaldialdehyde，Hippuryl-histidyl-leucine(HHL)(令P苯二醛，馬尿酸一組胺酞一亮氨酸)反應(yīng)液120u1(以25mmol/LNaOH配制成25mmol/L貯液，1.25X硼酸鈉緩沖液0.5mol/L，含NaCl375腿ol/L，PH8.3，反應(yīng)液為HHL貯液與l.25X硼酸鈉緩沖液l:4混合)，37。C反應(yīng)15分鐘，加入lNNaOH40ul終止反應(yīng)。以自動(dòng)進(jìn)樣器避光加入20mg/ml0-phthaldialdehyde(鄰苯二醛)(DMSO配制)10ul，室溫避光反應(yīng)10分鐘，自動(dòng)進(jìn)樣器加入3NH鹽酸20ul終止反應(yīng)，30分鐘內(nèi)用熒光檢測(cè)儀測(cè)定熒光強(qiáng)度F，激發(fā)波長(zhǎng)405nm，發(fā)射波長(zhǎng)535nm，以下列公式計(jì)算抑制15率。抑制率二(陰性對(duì)照一待測(cè))/(陰性對(duì)照一空白對(duì)照)X100%結(jié)果見表3。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>從表3可見，本發(fā)明藥物組合物KL組對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性具有顯著的抑制作用，其抑制率為96。/。;本發(fā)明藥物組合物PJ、WJ組對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性有一定的抑制作用，其抑制率分別為77%和64%，通過上述的體外試驗(yàn)和藥效學(xué)試驗(yàn)，證明本發(fā)明藥物組合物KL、PJ、WJ具有胰島素增敏性及血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，提供一種新的用藥選擇，不僅能有效地改善和治療II型糖尿病的胰島素抵抗，適用于II型糖尿病的治療；同時(shí)能有效地抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性，可用于高血壓的治療，具有療效顯著、使用安全方便的特點(diǎn)。權(quán)利要求1、一種中藥組合物在制備胰島素增敏劑類藥物中的應(yīng)用，其特征在于由下列重量份的原料藥制成人參42-160、黃精50-200、蒼術(shù)30-100、苦參20-60、茯苓35-100、麥冬50-200、制何首烏35-100、地黃50-120、山茱萸50-200、黃連20-60、佩蘭30-60、荔枝核75-150、淫羊藿30-60、知母30-100、丹參35-120、葛根50-200、地骨皮30-100。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于由下列重量份的原料藥制成人參42、黃精200、蒼術(shù)30、苦參60、茯零35、麥冬200、制何首烏35、地黃120、山茱萸50、黃連60、佩蘭30、荔枝核150、淫羊藿30、知母IOO、丹參35、葛根200、地骨皮30。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于由下列重量份的原料藥制成人參102、黃精136、蒼術(shù)68、苦參56、茯茶83、麥冬136、制何首烏83、地黃102、山茱萸136、黃連56、佩蘭56、荔枝核136、淫羊藿56、知母68、丹參89、葛根136、地骨皮83。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于由下列重量份的原料藥制成人參160、黃精50、蒼術(shù)IOO、苦參20、茯苓IOO、麥冬50、制何首烏100、地黃50、山茱萸200、黃連20、佩蘭60、荔枝核75、淫羊藿60、知母30、丹參120、葛根50、地骨皮100。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物所用原料藥中，蒼術(shù)為炒蒼術(shù)，地黃為生地黃，淫羊藿為炙淫羊藿，黃精為制黃精°6、根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物的活性成分由以下步驟制成a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)加5-9倍量水提取揮發(fā)油，提取3-6小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用；2c、山茱萸用5-9倍量50-90%乙醇做溶劑，浸漬12-48小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成60。C測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加6-10倍量50-90%乙醇，回流提取l-3次，每次1-3小時(shí)，提取液過濾，回收乙醇，濃縮成稠膏，烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加7-ll倍量水，煎煮1-2次，每次1-3小時(shí)，提取液過濾，與步驟b中佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮成清膏，加乙醇調(diào)節(jié)醇濃度為50-80%，冷藏放置，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用；步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏與步驟b所得揮發(fā)油共同構(gòu)成該中藥組合物的活性成分。7、根據(jù)權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物劑型為膠囊劑、片劑、散劑、顆粒劑、口服液、軟膠囊、丸劑、酊劑、糖漿劑、栓劑、凝膠劑、噴霧劑或注射劑。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述藥物顆粒劑的制備方法，其特征在于是由以下步驟組成a、按照原料藥重量比例稱取中藥材，凈選、碎斷；b、佩蘭、蒼術(shù)合并，加5-9倍量水，水蒸汽法提取揮發(fā)油，提取3-6小時(shí)，揮發(fā)油另器收集，水溶液過濾后備用；c、山茱萸用5-9倍量50-90%乙醇做溶劑，浸漬12-48小時(shí)后，進(jìn)行滲漉，收集滲漉液，回收乙醇，并濃縮成6CTC測(cè)定相對(duì)密度為1.30-1.35的稠膏，烘干，備用；d、人參、麥冬、淫羊藿、知母、葛根，加6-10倍量50-90%乙醇，回流提取l-3次，每次1-3小時(shí)，提取液過濾，回收乙醇，濃縮成稠膏，烘干，備用；e、黃精、苦參、生地、制何首烏、茯苓、黃連、丹參、荔枝核、地骨皮，加7-ll倍量水，煎煮1-2次，每次1-3小時(shí)。提取液過濾，與步驟b中佩蘭、蒼術(shù)提油后的水溶液合并，濃縮成清膏，加乙醇調(diào)節(jié)醇濃度為50-80%，冷藏放置，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏，烘干，備用；f、將步驟c所得山茱萸干膏、步驟d所得醇提干膏、步驟e所得水提醇沉干膏混合均勻，粉碎，加入加入適當(dāng)藥學(xué)上可接受的輔料制粒；g、步驟b所得揮發(fā)油加入乙醇溶解，噴入步驟f所得的顆粒，混勻，密閉，分裝，即得。9、根據(jù)權(quán)利要求l-4任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用。10、根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于該中藥組合物在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開了一種中藥組合物在制備胰島素增敏劑類藥物中的應(yīng)用及在制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明中藥組合物由人參、黃精、蒼術(shù)、苦參等17味中藥組成，通過益氣養(yǎng)陰、健脾運(yùn)津，不僅能有效地改善和治療II型糖尿病的胰島素抵抗，適用于II型糖尿病的治療；同時(shí)能有效地抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的活性，可用于高血壓的治療，療效顯著。文檔編號(hào)A61K36/88GK101584807SQ20081005511公開日2009年11月25日申請(qǐng)日期2008年5月22日優(yōu)先權(quán)日2008年5月22日發(fā)明者安軍永,李向軍,超王,鄭立發(fā)申請(qǐng)人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司