專利名稱：：慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷闹苽浞椒ǎ绕涫巧婕耙环N慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法。
背景技術(shù)：
：慢性肝損傷即慢性肝炎主要是指慢乙肝、慢丙肝，我國(guó)屬高發(fā)國(guó)家之一。因其具有傳染性、難治性、惡變性、家族遺傳性、經(jīng)常出現(xiàn)軀體不適等特點(diǎn)，使慢性肝炎患者長(zhǎng)期或間斷地處于心、身雙重的折磨中。所以，慢性肝炎患者長(zhǎng)期處于一種抑郁狀態(tài)，他們對(duì)生活悲觀失望，對(duì)生存失去信心。我們把這種由慢性肝炎引起的抑郁狀態(tài)稱為"慢性肝炎合并抑郁癥"。臨床除慢性肝病常見(jiàn)的癥狀體征外，還具有失眠、焦慮、抑郁、強(qiáng)迫、對(duì)疾病過(guò)渡關(guān)注等精神障礙癥，這種狀態(tài)存在于肝病發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段，并存在于每一個(gè)肝病個(gè)體，慢性肝病和抑郁癥二者互為因果，病情逐漸加重，治療難度也隨之加大，故對(duì)本病的研究越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)界的重視。目前關(guān)于本病發(fā)生的流行病學(xué)大樣本、多種心的研究尚缺乏，但是隨著本病越來(lái)越受到關(guān)注，已經(jīng)有很多學(xué)者對(duì)慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌等慢性肝病患者的抑郁狀態(tài)進(jìn)行了調(diào)查研究。有研究提示，一般肝病病人中有35%60%具有不同程度的抑郁。周愛(ài)紅對(duì)110例肝炎病人進(jìn)行了調(diào)査，其中有67例(60.9%)存在不同程度的抑郁心理。肖瓊研究發(fā)現(xiàn)，212份肝硬化患者中，92例存在抑郁癥狀，占43.8%。張武等對(duì)82例慢性乙型肝炎患者進(jìn)行測(cè)評(píng)，結(jié)果其中有抑郁者29例，患病率為35%(29/82)，抑郁自評(píng)量表標(biāo)準(zhǔn)分均值為43.16±10.05，高于正常組41.88士10.57(t=2.41，P〈0.05)。調(diào)查顯示慢性乙型肝炎癥狀嚴(yán)重、病毒復(fù)制明顯及肝功能損害嚴(yán)重患者其抑郁、焦慮情緒更明顯。慢性肝炎合并抑郁癥，祖國(guó)醫(yī)學(xué)并無(wú)此病名，但根據(jù)其臨床表現(xiàn)，可歸屬于中醫(yī)學(xué)"黃疸"、"脅痛"等合并"郁證"的范疇。許多古代醫(yī)籍中都有對(duì)"郁"的相關(guān)論述。對(duì)郁的認(rèn)識(shí)源于《內(nèi)經(jīng)》，提出外感致郁及情志致郁兩種觀點(diǎn)。宋代陳無(wú)擇，其在《三因極一病證方論》說(shuō)"七情人之常性，動(dòng)之則先自臟腑郁發(fā)，外形于肢體，為內(nèi)所因"?！毒霸廊珪?卩證》"凡五氣之郁則諸病皆有，此因病而郁也。至若情志之郁，則總由乎心，此因郁而病也"。其病機(jī)是初起七情所傷，肝失條達(dá)，氣機(jī)不暢而成氣郁，病屬實(shí)為氣病；氣有余便是火可成火郁；由氣及血可成血郁；氣滯濕阻，聚而成痰可成痰郁；氣滯水氣不行，濕氣停留可成濕郁；氣滯痰濕不化則食積難消可成食郁；此六郁互為因果又相互兼夾。由此可見(jiàn)軀體疾病伴發(fā)抑郁癥與疾病本身有一定的關(guān)系。韓毳認(rèn)為抑郁癥與中醫(yī)肝臟有諸多聯(lián)系，其從中醫(yī)肝臟的生理病理特點(diǎn)，以及中醫(yī)學(xué)和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)抑郁癥的認(rèn)識(shí)等方面進(jìn)行分析闡述，得出如下推論肝郁可能是抑郁癥的重要發(fā)病環(huán)節(jié)；神經(jīng)內(nèi)分泌功能失調(diào)是抑郁癥和肝失疏泄證共同的病理學(xué)基礎(chǔ)。導(dǎo)致心情壓抑長(zhǎng)期不能緩解，引起腦腑氣機(jī)紊亂，腦神失調(diào)而致本病。慢性乙型肝炎的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，除與病毒感染有關(guān)外，還與機(jī)體的免疫應(yīng)答失調(diào)有關(guān)。研究表明心理反應(yīng)可導(dǎo)致一系列的生理反應(yīng)，影響機(jī)體的免疫功能，從而影響疾病的治療進(jìn)程。對(duì)于肝炎合并抑郁的發(fā)生國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道，但對(duì)其機(jī)理尚無(wú)較清晰的認(rèn)識(shí)。從抑郁的發(fā)病機(jī)理看，多認(rèn)為與生物-心理-社會(huì)因素有關(guān)。目前研究表明抑郁癥是腦內(nèi)單胺類遞質(zhì)，如去甲腎上腺素(NE)、5-羥色胺(5-HT)和多巴胺(DA)等功能不足所致而成的。多種神經(jīng)肽，包括促皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)、促甲狀腺素釋放激素(TRH)、生長(zhǎng)激素(GH)、生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)等參與抑郁癥的發(fā)病過(guò)程。此外，慢性應(yīng)激造成下丘腦一垂體一腎上腺軸亢進(jìn)時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)激激素對(duì)海馬神經(jīng)元的選擇性損傷是導(dǎo)致抑郁發(fā)生的關(guān)鍵原因。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族，是一類很重要的保護(hù)因子。研究發(fā)現(xiàn)慢性不可預(yù)知的應(yīng)激可致抑郁癥大鼠海馬神經(jīng)元明顯受損，BDNF陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量顯著減少。關(guān)于慢性肝炎合并抑郁癥的發(fā)病越來(lái)越受到重視，目前無(wú)有效的藥物治療，而對(duì)本病的實(shí)驗(yàn)研究尚未見(jiàn)有報(bào)道，如果可以成功復(fù)制慢性肝損傷合并慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁模型大鼠模型，不但可以研究本病發(fā)生的機(jī)理，還可以為研制治療本病有效藥物提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)，且本發(fā)明的造模方法為復(fù)合式造模方法，研究的是一種疾病長(zhǎng)期存在的狀態(tài)下，合并其他相關(guān)疾病的實(shí)驗(yàn)，為其他疾病有合并癥提供實(shí)驗(yàn)思路。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法，用于研究本病發(fā)生的機(jī)理，為研制治療本病有效藥物提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法，其特征在于包括下列步驟選用雄性Wistar大鼠，體重在180-220g之間，適應(yīng)環(huán)境1周后，進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)行為學(xué)篩選，選出積分相近的大鼠；第l-4周，5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周；第5-12周，5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周，生理鹽水灌胃，l次/日；第13周，5只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，l次/日；第14-16周，首先進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，1只/籠，正常飲食飲水，禁食禁水刺激時(shí)除外，生理鹽水灌胃，1次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每日隨機(jī)選用l種；第112天，稱體重、進(jìn)行糖水消耗及敞箱實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束即得慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型。本發(fā)明采用皮下注射40%CCL4、孤養(yǎng)、給予慢性不可預(yù)知溫和刺激造模方法制備慢性肝損傷合并孤養(yǎng)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁大鼠模型，確立慢性肝損傷合并孤養(yǎng)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁模型評(píng)價(jià)指標(biāo)，不但可為今后研究本病造模提供參考依據(jù)，為臨床診治肝病合并抑郁癥提供有效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，還可為今后研發(fā)治療本病的藥物提供實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證手段。下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的效果選用雄性Wistar大鼠，體重在180-220g之間，適應(yīng)環(huán)境1周后，進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)(Open-field)行為學(xué)篩選，將積分相近的170只大鼠分為8組空白組、慢性肝損傷模型組(簡(jiǎn)稱"肝炎模型組")、肝損傷合并慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激抑郁模型(簡(jiǎn)稱"抑郁模型組")、養(yǎng)肝解郁顆粒低劑量組(簡(jiǎn)稱"低劑量組")、養(yǎng)肝解郁顆粒中劑量組(簡(jiǎn)稱"中劑量組")、養(yǎng)肝解郁顆粒高劑量組(簡(jiǎn)稱"高劑量組")、乙肝益氣解郁顆粒組(簡(jiǎn)稱"對(duì)照1組")，鹽酸氟西汀膠囊組(簡(jiǎn)稱"對(duì)照2組")，鹽酸氟西汀膠囊組30只，其余各組為20只，實(shí)驗(yàn)周期為16周；l-4周空白組5只/籠，正常飲食飲水；肝炎模型組、抑郁模型組、對(duì)照1組、對(duì)照2組、高中低劑量組5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周；5-12周空白組5只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，1次/日；肝炎模型組、抑郁模型組:5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周，生理鹽水灌胃，l次/日；對(duì)照l(shuí)組5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周，乙肝益氣解郁沖劑水溶液灌胃，l次/日；對(duì)照2組5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周，鹽酸氟西汀膠囊水溶液灌胃，l次/日；高、中、低劑量組5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周，相應(yīng)濃度的養(yǎng)肝解郁顆粒水溶液灌胃，l次/日；13周空白組、肝炎模型組、抑郁模型組5只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，l次/日；對(duì)照l(shuí)組5只/籠，正常飲食飲水，乙肝益氣解郁沖劑水溶液灌胃，l次/日；對(duì)照2組5只/籠，正常飲食飲水，鹽酸氟西汀膠囊水溶液灌胃，1次/日；高、中、低劑量組5只/籠，正常飲食飲水，相應(yīng)濃度的養(yǎng)肝解郁顆粒水溶液灌胃，l次/日；在實(shí)驗(yàn)的第84天進(jìn)糖水消耗實(shí)驗(yàn)，稱量各組大鼠的體重；14-16周首先各組大鼠進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)；空白組、肝炎模型組5只/籠；正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，1次/日；抑郁模型組-1只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，l次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每天1種，具體詳見(jiàn)表l;對(duì)照l(shuí)組l只/籠，正常飲食飲水，乙肝益氣解郁沖劑水溶液灌胃，l次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每天1種，具體詳見(jiàn)表l;對(duì)照2組l只/籠，正常飲食飲水，鹽酸氟西汀膠囊水溶液灌胃，1次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每天1種，具體詳見(jiàn)表1;高、中、低劑量組1只/籠，正常飲食飲水，相應(yīng)濃度的養(yǎng)肝解郁顆粒水溶液灌胃，l次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每天1種，具體詳見(jiàn)表l;實(shí)驗(yàn)第112天各組大鼠稱體重、進(jìn)行糖水消耗及敞箱實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束24小時(shí)后麻醉大鼠取實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。應(yīng)激刺激實(shí)驗(yàn)日程表如下(表l):<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>每種刺激的操作方法如下:①禁食24h斷料，即早8:00至次日早8:00不喂食。②禁水24h斷水，即早8:00至次日早8:00不喂水。③晝夜顛倒于早7:OO將動(dòng)物放入暗室中，不開(kāi)燈使動(dòng)物處于黑暗狀態(tài)；至晚19:OO將日光燈打開(kāi)，使動(dòng)物處于光照狀態(tài)，直至次曰早7:00。④冰水游泳游泳器具為一長(zhǎng)方形硬塑料盒子，長(zhǎng)50cm寬無(wú)限制，高度30cm以上，將動(dòng)物放入盛有4。C冰水箱中，箱內(nèi)冰水的深度為15cm(大鼠的后足尖剛剛能觸及桶底)，5min后將動(dòng)物取出放回籠中。⑤熱烘烘箱溫度調(diào)至45。C恒定，將動(dòng)物放入烘箱中，5min后將動(dòng)物取出。⑥夾尾將大鼠放入固定籠中，將鼠尾從籠蓋缺口中反向拉出，即大鼠的身體在籠內(nèi)，而尾巴通過(guò)籠蓋暴露在外，使用文件夾夾在距離大鼠尾根lcm處，(用力不要過(guò)大，使大鼠發(fā)出哀叫即可)持續(xù)1min后，將大鼠取出放回籠中。⑦電擊使用大鼠電擊箱操作，利用變壓線圈將電壓控制在36v，每隔lmin—次，每次通電10s，共進(jìn)行30次。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中及實(shí)驗(yàn)結(jié)束所獲得的結(jié)果1、結(jié)果表2各組大鼠體重的變化(；±s,g)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與空白組比較，？<0.05,"P<0.01;與肝炎模型組比較，*P<0.05**P<0.01;與抑郁模型組比較，AP<0.05,A。P<0.01。P值意義以下相同。表2結(jié)果表明造模前各組大鼠體重?zé)o明顯差異(P>0.05)，隨著時(shí)間的推移各組大鼠逐漸消痩，體重明顯減輕。實(shí)驗(yàn)84天與空白組比較，模型1組、模型2組體重減少有明顯的差異(P<0.01)。在第112天與空白組比較模型1、2組體重明顯減少(P<0.01)。表3各組大鼠糖水偏愛(ài)百分比比較(S±s,%)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表3結(jié)果表明應(yīng)激刺激前，即第84天，與空白組比較，各組大鼠糖水偏愛(ài)百分比無(wú)明顯差異(P>0.05);實(shí)驗(yàn)結(jié)東后，與空白組比較模型2組及對(duì)照1組糖水偏愛(ài)百分比明顯減少(P<0.01);與模型2組比較，模型1組大鼠對(duì)糖水偏愛(ài)百分比明顯增高(P<0.01)。表4各組大鼠Open-Field法行為測(cè)定水平運(yùn)動(dòng)比較(；±s，運(yùn)動(dòng)次數(shù)，次/3min)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表5各組大鼠Open-Field法行為測(cè)定垂直運(yùn)動(dòng)比較(；±s,運(yùn)動(dòng)次數(shù)，次/3min)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4分無(wú)差異(P〉0.05);實(shí)驗(yàn)結(jié)束后與空白組比較，模型2組大鼠水平運(yùn)動(dòng)評(píng)分明顯下降(P<0.01)，與模型2組比較，模型1組大鼠水平運(yùn)動(dòng)評(píng)分明顯升高(P<0.01)。表5垂直運(yùn)動(dòng)結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)第1天及第92天，與空白組比較各組大鼠垂直運(yùn)動(dòng)評(píng)分無(wú)差異(P>0.05);實(shí)驗(yàn)結(jié)東后與空白組比較，模型2組大鼠垂直運(yùn)動(dòng)評(píng)分明顯下降(P<0.01),與模型2組比較，模型l組大鼠垂直運(yùn)動(dòng)評(píng)分明顯升高(P<0.01)。表6各組慢性肝損傷合并孤養(yǎng)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁模型各組大鼠血清膽紅素及蛋白含量的比較(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>TBIL:與空白組比較模1組、模型2組大鼠血清TBIL含量明顯升高(P<0.01)。TP:與空白組比較模型1組、模型2組大鼠血清TP含量明顯下降(P復(fù)01)。ALB:與空白組比較模型1組、模型2組大鼠血清ALB含量明顯下降(P復(fù)01)。表7各組慢性肝損傷合并孤養(yǎng)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁模型各組大鼠血清酶含量的比較(X±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>ALT:與空白比較模型1組、模型2組大鼠血清ALT含量明顯升高(P〈0.01);AST:與空白比較模型l組、模型2組大鼠血清ALT含量明顯升高(P<0.01)。表8各組大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化G土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>5-HT:與空白組比較，模型2組大鼠大腦下丘腦內(nèi)5-HT的含量均明顯降低(P<0.01);DA:與空白組比較，模型2組大鼠大腦下丘腦內(nèi)DA的含量均明顯降低(P<0.01);;NE:與空白組比較，模型2組大鼠大腦下丘腦內(nèi)NE的含量均明顯降低(P<0.01)。2、結(jié)論(1)通過(guò)對(duì)上述表格中正常對(duì)照組、肝炎模型組、肝炎合并抑郁模型組的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)的分析，可得出如下的結(jié)論在行為學(xué)上肝炎合并抑郁模型組在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)明顯出現(xiàn)抑郁的表現(xiàn)；在體重上三者間均有著差異性，且肝炎合并抑郁模型組大鼠的體重下降最明顯；在糖水消耗試驗(yàn)上，在實(shí)驗(yàn)到第13周末時(shí)，三組大鼠對(duì)糖水的偏愛(ài)沒(méi)有顯著性的差異，而在實(shí)驗(yàn)第16周末時(shí)，正常對(duì)照組、肝炎模型組大鼠對(duì)糖水的偏愛(ài)沒(méi)有顯著差異，而肝炎合并抑郁模型組大鼠對(duì)糖水的偏愛(ài)明顯的降低，說(shuō)明抑郁模型造模成功；在敞箱實(shí)驗(yàn)上，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)三組大鼠均無(wú)明顯差異，試驗(yàn)結(jié)束的時(shí)候，肝炎合并抑郁模型組的大鼠在水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)與正常對(duì)照組和肝炎模型組有顯著性差異，說(shuō)明抑郁模型造模成功；在肝功改變上，正常對(duì)照組與肝炎模型組、肝炎合并抑郁模型組大鼠肝功能的變化上有顯著性的差異，說(shuō)明慢性肝損傷的模型復(fù)制成功；在神經(jīng)遞改變上，肝炎合并抑郁模型組均比正常對(duì)照組及肝炎模型組大鼠偏低，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，通過(guò)下丘腦神經(jīng)遞質(zhì)的變化，說(shuō)明慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激抑郁模型照模成功。經(jīng)分析說(shuō)明采用皮下注射40%CCL4、孤養(yǎng)、給予慢性不可預(yù)知溫和刺激造模方法可成功制備慢性肝損傷合并孤養(yǎng)慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁大鼠模型。養(yǎng)肝解郁顆粒方來(lái)源于丹梔逍遙散，丹梔逍遙散出自明代醫(yī)家薛己《內(nèi)科摘要》，為古代經(jīng)典名方的中藥復(fù)方制劑，療效確切，今用于治療慢性肝病合并抑郁癥，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)疾病與中醫(yī)證候相結(jié)合(病證結(jié)合)，體現(xiàn)中藥復(fù)方制劑的傳統(tǒng)繼承觀與現(xiàn)代應(yīng)用之發(fā)展觀，組成丹皮、梔子、白術(shù)、茯苓、甘草、柴胡、當(dāng)歸、白芍、生姜、薄荷。實(shí)施例選用雄性Wistar大鼠，體重在200g，適應(yīng)環(huán)境1周后，進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)行為學(xué)篩選，選出積分相近的大鼠；第l-4周，5只/籠，正常飲食飲水，40%CCL4lml/kg，皮下注射2次/周；第5-12周，5只/籠，正常飲食飲水，40%CCUlml/kg，皮下注射2次/周，生理鹽水灌胃，l次/日；第13周，5只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，l次/日；第14-16周，首先進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，1只/籠，正常飲食飲水，禁食禁水刺激時(shí)除外，生理鹽水灌胃，1次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每日隨機(jī)選用l種；第112天，稱體重、進(jìn)行糖水消耗及敞箱實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束24小時(shí)后麻醉大鼠即得慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型。權(quán)利要求1.一種慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法，其特征在于包括下列步驟選用雄性Wistar大鼠，體重在180-220g之間，適應(yīng)環(huán)境1周后，進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)行為學(xué)篩選，選出積分相近的大鼠；第1-4周，5只/籠，正常飲食飲水，40％CCL41ml/kg，皮下注射2次/周；第5-12周，5只/籠，正常飲食飲水，40％CCL41ml/kg，皮下注射2次/周，生理鹽水灌胃，1次/日；第13周，5只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，1次/日；第14-16周，首先進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，1只/籠，正常飲食飲水，禁食禁水刺激時(shí)除外，生理鹽水灌胃，1次/日，給予慢性應(yīng)激刺激，每日隨機(jī)選用1種；第112天，稱體重、進(jìn)行糖水消耗及敞箱實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束即得慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型。全文摘要一種慢性肝損傷合并應(yīng)激抑郁大鼠模型的制備方法，選用雄性Wistar大鼠，體重在180-220g之間，適應(yīng)環(huán)境1周后，進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)行為學(xué)篩選，選出積分相近的大鼠；第1-4周，正常飲食飲水，40％CCL₄1ml/kg，皮下注射2次/周；5-12周，正常飲食飲水，40％CCL₄1ml/kg，皮下注射2次/周，生理鹽水灌胃，1次/日；第13周，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，1次/日；第14-16周，首先進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，1只/籠，正常飲食飲水，生理鹽水灌胃，1次/日，給予慢性應(yīng)激刺激；第112天，稱體重、進(jìn)行糖水消耗及敞箱實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明研究本病造模提供參考依據(jù)，為臨床診治肝病合并抑郁癥提供有效的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，還可為今后研發(fā)治療本病的藥物提供實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證手段。文檔編號(hào)A61K49/00GK101284138SQ20081005078公開(kāi)日2008年10月15日申請(qǐng)日期2008年6月4日優(yōu)先權(quán)日2008年6月4日發(fā)明者劉鐵軍申請(qǐng)人:劉鐵軍