專利名稱：：一種治療肝病的藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于一種中藥藥物。技術(shù)背景由于多種因素導(dǎo)致的以肝臟纖維結(jié)蒂組織彌漫性增生和肝細(xì)胞變性壞死為特征的疾病，稱肝硬化，病因反復(fù)持續(xù)存在，最終產(chǎn)生腹水或水腫，當(dāng)肝硬化患者腹腔內(nèi)液體積蓄超過(guò)正常最大液體量(200mL)時(shí)，則形成肝硬化腹水。肝硬化腹水多發(fā)生于肝硬化失代償期，是肝硬化已進(jìn)入后期的標(biāo)志。大量腹水本身常導(dǎo)致腹脹、腹痛、活動(dòng)受限、呼吸困難，甚至形成各類腹疝。腹水屬于中醫(yī)的"臌脹"，為"風(fēng)勞臌膈"四大難癥之一，臨床多見(jiàn)于肝硬化腹水，治療頗為棘手。鼓脹，在《醫(yī)門法律》中指出"脹病奕不外水裹、氣結(jié)、血凝，……"。近代中醫(yī)醫(yī)家認(rèn)為"鼓脹"的形成，肝、脾、腎功能失調(diào)是關(guān)鍵。肝氣郁結(jié)，氣滯血瘀，是形成鼓脹的基本條件；其次是脾功能受損，運(yùn)化失職，遂致水濕停滯；腎臟的氣化功能障礙，不能蒸化水液而加重水濕停滯，也是鼓脹形成的重要因素。其中氣滯、血瘀、水?；橐蚬?，是邪實(shí)的主要內(nèi)容。正虛是氣滯、血瘀、水停的必然趨勢(shì)，所涉及的臟腑主要是肝、脾、腎。中醫(yī)以特有的辨治方法，對(duì)消除腹水有較好效果，但因病機(jī)復(fù)雜，癥狀多變，辨證不易掌握，處方用藥亦甚繁復(fù)，常致消除腹水有效率不高，故尋求治療腹水的有效方藥是亟需解決的問(wèn)題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種治療肝病的中藥藥物。該藥體現(xiàn)中醫(yī)配伍理論的特點(diǎn)，舒肝健脾，益氣消濕，可改善肝病消化道癥狀，增加食欲，提高免疫力，消除肝區(qū)疼痛，促進(jìn)利尿，使肝硬化腹水消退明顯。該藥組成是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，在方中使用益氣健脾之菱角，以扶正健脾，使脾之運(yùn)化功能較好發(fā)揮，進(jìn)而三焦之清者上升，濁者下運(yùn)，清濁分明，最終肝達(dá)疏泄，三焦水化，改善氣結(jié)、水滯、血瘀，消除水凝。李時(shí)珍在《本草綱目》中記載稱靈芝"可食用，味苦平，主胸中結(jié)，益心氣，補(bǔ)中，增智慧，不忘，久食輕身不老，延年神仙"，因此用之輔助治療肝硬化，可以增補(bǔ)肝氣，疏達(dá)脾氣，健脾和胃，護(hù)肝解毒，不僅可以治肝病，還有較突出的利尿作用。薏苡仁，甘，微寒，歸脾、胃、肺經(jīng)，利水滲濕健脾，除痹清熱排膿，有利于腹水的排泄。陳皮是我國(guó)的傳統(tǒng)中草藥之一，具有行氣健脾，和胃止嘔，燥濕除脹之功效。肝硬化腹水，辨證為本虛標(biāo)實(shí)，在本多為脾虛，在標(biāo)多為肝郁氣滯水停。治則正邪兼顧，攻補(bǔ)兼施，以菱角為主藥，舒肝健脾，益氣和胃，加用靈芝、薏苡仁以增強(qiáng)健脾補(bǔ)氣之功、疏肝理氣、清熱利濕之效。諸藥合用，舒肝健脾，益氣消濕，可改善肝病消化道癥狀，增加食欲，提高免疫力，消除肝區(qū)疼痛，促進(jìn)利尿，使肝硬化腹水消退明顯。本發(fā)明藥物各組分用量也是經(jīng)發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出，各組分用量在下述重量范圍內(nèi)都具較好療效菱角150-200份，靈芝125-175份，薏苡仁75-125份，陳皮50-100份。優(yōu)選為菱角175份，靈芝150份，薏苡仁100份，陳皮75份。本發(fā)明藥物可以采用中藥制劑的常規(guī)方法制備成任何常規(guī)內(nèi)服制劑。優(yōu)選的本發(fā)明藥物活性組分的制備方法如下將以上四味中的陳皮用80%乙醇回流提取2次，每次3h，每次加80%乙醇量為藥材的6倍，合并提取液，濾過(guò)，濾液另器保存；將藥渣與菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3h，每次加水量為藥材的8倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.12(6(TC)的清膏，加入乙醇至含醇量為60%，充分?jǐn)嚢瑁o止24h，濾過(guò)，濾液與上述陳皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至無(wú)醇味，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(8(TC)的稠膏，另器保存；將靈芝加水煎煮2次，每次3h，每次加水量為藥材的IO倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(80°C)的稠膏，與上述稠膏合并，減壓干燥。本發(fā)明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時(shí)所需的各種常規(guī)輔料，如崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等，以常規(guī)的中藥制劑方法制備成任何一種常用口服劑型，如顆粒劑、丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液等。本發(fā)明的積極效果是本藥物發(fā)明是根據(jù)中醫(yī)理論組方，通過(guò)現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法充分證明該藥在每日每千克體重0.8g生藥的劑量下，對(duì)肝硬化腹水大鼠的腹水消退作用明顯，治療效果顯著。本藥物發(fā)明能舒肝健脾，益氣消濕，可改善肝病消化道癥狀，增加食欲，提高免疫力，消除肝區(qū)疼痛，促進(jìn)利尿，使肝硬化腹水消退明顯。本發(fā)明藥物用法用量，口服劑量以生藥量計(jì)算為每日10g-30g。以下通過(guò)試驗(yàn)例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明藥物的有益效果，這些試驗(yàn)例包括了本發(fā)明藥物(以下簡(jiǎn)稱扶正肝康顆粒)的藥效學(xué)試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)例l:扶正肝康治療大鼠肝硬化腹水1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物ICR小鼠，清潔級(jí)，20只，雌雄各半，體重19.6g-22.0g;純系Wistar大鼠，清潔級(jí)，110只，雄性，體重250g-300g。2.藥物扶正肝康顆粒，實(shí)驗(yàn)室自制，熱水溶解，配制為濃度0.16g'L"溶液；戊巴比妥鈉，德國(guó)進(jìn)口分裝；四氯化碳CCL4，天津光復(fù)精細(xì)化工研究所；無(wú)水乙醇，北京化工廠；氫氯噻嗪，山西省臨汾云鵬藥業(yè)有限公司。3.肝硬化腹水模型建立IIO只Wistar大鼠，于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)喂養(yǎng)一周，以適應(yīng)環(huán)境。隨機(jī)取出10只作為空白對(duì)照組，其余進(jìn)行肝硬化腹水模型復(fù)制。采用四氯化碳復(fù)合灌胃方法，進(jìn)行大鼠肝硬化腹水模型的復(fù)制。以350mg'L"戊巴比妥鈉水溶液作為唯一飲用水對(duì)所有造模大鼠進(jìn)行誘導(dǎo)，共10d。然后用10。/。CCL4大豆油溶液給予灌胃，給藥劑量為每100g體重0.2mL。前12w，每5d—次；第12w至14wCCL4濃度提高至15%，每4d—次；18w改為每3d—次，同時(shí)將飲水換為5%乙醇，直至形成腹水為止。4.實(shí)驗(yàn)流程將所有模型鼠隨機(jī)分為模型組；氫氯噻嗪陽(yáng)性藥組，給藥量為每100g體重0.25g;扶正肝康顆粒給藥組，給藥量為每100g體重0.8g。每組10只動(dòng)物。按分組情況給藥，各處理組大鼠稱體重并量腹圍，然后置于大鼠代謝籠內(nèi)，正常飲食，次日留尿，并稱量體重及腹圍后開始灌胃給藥，連續(xù)4w。各組給藥劑量如下模型組正常飲食；陽(yáng)性藥組每100g體重0.25g;扶正肝康顆粒復(fù)方藥組每100g體重0.8g。在給藥后的第4w末處死動(dòng)物，處死前一天，將各處理組大鼠重新放置在代謝籠內(nèi)，再次收集并記錄24h尿量，同時(shí)稱體重、測(cè)腹圍。然后在0.3%戊巴比妥鈉麻醉下解剖，無(wú)菌條件下快速取所有腹水，記錄腹水量，然后立即進(jìn)行腹主動(dòng)脈采血，于室溫條件下放置lh后，3000r'min"離心10min，取血清，置于-20。C冰箱密封凍存?zhèn)溆?，用以檢測(cè)ALT、AST、ALP、LDH、TP、ALB、TBIL、DBIL和腎功能CRE、BUN等指標(biāo)。取肝脾腎臟器，稱重量，統(tǒng)一留取肝葉大部分、左腎和部分脾臟，置于10%福爾馬林溶液中，用以HE染色和免疫組化研究。5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.1各組大鼠癥狀學(xué)觀察和腹水消退情況正常組10只大鼠，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，毛色光潤(rùn)，精神狀態(tài)活動(dòng)度正常，體重增加，無(wú)一只死亡，存活率為100%。所有造模鼠與對(duì)照組相比，體重增長(zhǎng)緩慢，后期體重明顯減輕，皮毛蓬亂無(wú)光澤，活動(dòng)少，嗜睡，飲食較少，出現(xiàn)腹水者較嚴(yán)重，且腹部膨隆明顯。除了出現(xiàn)疾病和不適應(yīng)生存而死亡者，至第24w經(jīng)檢測(cè)有40只出現(xiàn)了腹水，其絕對(duì)成模率為40%(存在腹水大鼠數(shù)/參與造模的大鼠數(shù))，相對(duì)成模率為66.7%(存在腹水大鼠數(shù)/存活大鼠數(shù))。治療組開始治療后，攝食增加，體重亦增加，毛色逐漸光潤(rùn)，活動(dòng)趨于正常。用藥4w后，經(jīng)解剖，模型組10只大鼠腹水均未消除；扶正肝康顆粒組10只大鼠有8只腹水消除，其余僅有少量腹水，腹水消除率為80%;氫氯噻嗪組10只大鼠有6只腹水消除，消除率為60%。運(yùn)用精確卡方檢驗(yàn)，扶正肝康顆粒組對(duì)腹水清除率與模型組相比具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸O.Ol)，與陽(yáng)性藥組比較差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0.05)。見(jiàn)表l。表l治療組治療4w后各組大鼠腹水消除率(n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>**P<0.05vs模型組5.2肝功能比較扶正肝康顆粒與陽(yáng)性藥組比較，各指標(biāo)值均相當(dāng)，差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0.05)。肝硬化腹水大鼠給予扶正肝康顆粒后，其肝功能明顯改善，反映肝臟功能的血清酶學(xué)指標(biāo)ALT、AST、LDH和ALP等水平變化如表2所示；反映蛋白質(zhì)合成功能的指標(biāo)如ALB、GLO和TP，見(jiàn)表3;反映膽紅素代謝功能的血清TBIL和DBIL水平，見(jiàn)表4。表2反映肝臟功能的血清酶學(xué)指標(biāo)變化比較(n=10,5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*尸<0.05vs正常組，**P<0.01正常組，aa尸O.01vs模型組表3反映肝臟細(xì)胞蛋白質(zhì)合成功能的指標(biāo)變化比較(n=10，5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表4反映膽紅素代謝功能的血清學(xué)指標(biāo)變化比較(n=10,3f士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5反映腎臟功能的血清學(xué)指標(biāo)變化比較(n=10，3f±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>總之，肝硬化腹水大鼠模型組除了TP和GLO之外，血清ALT、AST、ALP、LDH、TBIL、DBIL較正常組均有明顯升高(PO.Ol)，其中以LDH升高最為明顯(PO.Ol)，ALB較正常組明顯下降(PO.Ol)。說(shuō)明該方法對(duì)大鼠造成了明顯的肝損傷，結(jié)合后面的肝組織病理切片染色可以說(shuō)明已經(jīng)形成了肝硬化腹水模型。而扶正肝康顆粒組使肝硬化腹水大鼠血清AST、ALT、LDH、ALP和ALB水平較模型組有一定的改變(P<0.05)，提示扶正肝康顆粒對(duì)肝功能有所改善，能夠降低血清中反映肝臟功能的相關(guān)酶水平，提升肝臟ALB的合成。5.3血清ALD、Na+、K+、SOD、MDA和NO水平比較與正常組比較，三處理組ALD水平皆升高；模型組K+水平降低，兩治療組K+有所升高；模型組Na+升高，兩治療組Na+降低。陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組和扶正肝康組分別與正常組比較，ALD水平均無(wú)顯著性差別(P>0.05);而K+水平差異皆有顯著性(PO.Ol)。陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組和扶正肝康組分別與模型組比較，ALD水平均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(PO.01);K+水平增高具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO.05);Na+水平降低具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。扶正肝康顆?？山档透斡不顾笫笱錋LD和Na+水平，而對(duì)K+水平有增加作用。各處理組除了陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組血清NO水平較正常組升高不明顯外，其余皆明顯升高，以模型組的NO最顯著，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO.05);陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組和扶正肝康組，分別與模型組比較，NO均明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO.01),提示復(fù)方藥可使肝硬化腹水大鼠血清NO水平明顯降低。表6各組血清ALD、K+、Na+、NO、NOS水平比較(n=10,5±s)組別ALD(pgU1)K+(mmolL-1)Na十(mmolL-1)NO(,lL")正常組204.393±57.7696.35±1.54136.59±1.6035.58±6.63模型組687.995±152.117"3.87±2.92238.71±8.1960.45±18.26"氫氯噻嗪262.473±89.452"5.08±0.59"A140.59土2.36"36.68±12.29"扶正肝康241.993±37.539"5.67±2.36*"140.98土6.04"40.23±11.25*"*尸<0.05,**P<0.01,*/"<0.05，**尸<0.015.4尿量比較三處理組初始尿量經(jīng)兩兩比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氫氯噻嗪、扶正肝康兩給藥組各自進(jìn)行組內(nèi)比較，終末尿量與初始尿量均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(PO.Ol)，顯示復(fù)方藥和陽(yáng)性藥可以使肝硬化腹水大鼠尿量增加。氫氯噻嗪和扶正肝康，分別與模型組比較，終末尿量、以及終末尿量與起始尿量差值，都具統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(PO.Ol)。扶正肝康、氫氯噻嗪兩組比較，終末尿量具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(PO.Ol)。見(jiàn)表7。表7三處理組尿量比較(n=10,i±s)組別初始尿量(mL)終末尿量(mL)終末-初始(mL)模型組4.94±2.605.81±2,100.88土2.88氫氯噻嗪4.81±2.5513.44士6,98""8.63士6.20"扶正肝康7.81±5.0420.50±5.38**""12.69±3.36""**P<0.01vs組內(nèi)比較，ApO.05vs氫氯噻嗪，"P〈0.01vs氫氯噻嗪，"PO.05vs模型組，'"PO.01vs模型組5.5肝臟病理組織形態(tài)觀察5.5.1大體標(biāo)本觀察正常鼠，大體標(biāo)本外觀無(wú)明顯異常，各肝葉色澤均勻暗紅，表面光滑無(wú)結(jié)節(jié)，肝臟大小在正常范圍內(nèi)。模型組大體標(biāo)本外形可見(jiàn)明顯縮小，色澤呈黃褐色或土黃色且不均勻，質(zhì)硬而脆，邊緣鈍，外表凹凸不平，布滿大小不一的顆粒狀結(jié)節(jié)，或者分布全葉，或者分布某一葉或多葉。肝臟與網(wǎng)膜之間、肝葉與葉之間有粘連，且均有腹水，平均腹水量為16.67mL。切面包膜外翻，可見(jiàn)大塊壞死灶，壞死灶周圍有血塊。陽(yáng)性藥組和扶正肝康顆粒組的肝臟病理組織觀察與模型組比較，大體標(biāo)本可見(jiàn)大小形態(tài)接近正常，表面光滑，邊緣較齊，顏色紅潤(rùn)，質(zhì)地韌而軟，結(jié)節(jié)明顯減少。肝葉之間、肝臟與腹膜之間少量粘連，腹水明顯減少，陽(yáng)性藥組平均約為6mL，而扶正肝康顆粒組平均約為4mL。5.5.2光學(xué)顯微鏡觀察正常組大鼠，肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，肝小葉清晰，中央靜脈位置、數(shù)量正常，匯管區(qū)正常。而模型組大鼠鏡下可見(jiàn)正常肝小葉結(jié)構(gòu)已不存在，肝細(xì)胞脂肪變性較明顯，排列較亂，有的成單層板狀，有的為雙層或多層，纖維結(jié)蒂組織彌漫增生形成纖維條索，增生的結(jié)締組織包繞肝細(xì)胞再生結(jié)節(jié)，構(gòu)成假小葉，多無(wú)中央靜脈和匯管區(qū)，炎細(xì)胞侵潤(rùn)。扶正肝康顆粒組肝細(xì)胞索圍繞中央靜脈呈近似放射狀排列，肝細(xì)胞變性壞死較少，肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)幾乎正常，排列較整齊，假小葉數(shù)量減少，匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)少見(jiàn)。肝臟大體標(biāo)本和光鏡觀察，顯示模型組大鼠較正常組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)有明顯改變，符合肝硬化腹水大鼠肝臟病理組織學(xué)，造模成功。而扶正肝康顆粒組大鼠雖說(shuō)比正常組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)稍差，但與模型組相比其改善還是較明顯的。5.6扶正肝康顆粒干預(yù)肝組織NOS、NF—KB表達(dá)的免疫組化分析正常組肝臟NOS免疫組化結(jié)果為陰性；模型組、陽(yáng)性藥組為陽(yáng)性，而復(fù)方藥組大鼠NOS則為陰性。NF—KB陽(yáng)性細(xì)胞為胞核染成棕黃色。正常組大鼠肝組織有微弱表達(dá)；模型組陽(yáng)性細(xì)胞多分布于匯管區(qū)、炎癥壞死區(qū)及纖維間隔區(qū)，且陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量高于正常對(duì)照組(PO.01);而復(fù)方藥組NF-KB陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量顯著低于模型組(PO.Ol)?？梢?jiàn)扶正肝康顆粒對(duì)肝硬化腹水大鼠的肝臟NF—KB表達(dá)具有一定的抑制作用。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:本發(fā)明膠囊劑的制備菱角175克，靈芝150克，薏苡仁100克，陳皮75克。以上四味中的陳皮用80%乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，加醇量為6倍，合并提取液，濾過(guò)，濾液另器保存；藥渣與菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3小時(shí)，每次加水量為藥材的8倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.12(60°C)的清膏，加入乙醇至含醇量為60%，充分?jǐn)嚢?，靜止24小時(shí)，濾過(guò)，濾液與上述陳皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至無(wú)醇味，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(80°C)的稠膏，另器保存；將靈芝加水煎煮2次，每次3小時(shí)，每次加水量為藥材的10倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(80°C)的稠膏，與上述稠膏合并，減壓干燥；粉碎成細(xì)粉，加入淀粉，混勻，用乙醇制粒，干燥，裝膠囊，制成IOOO粒。實(shí)施例2:本發(fā)明片劑的制備菱角200克，靈芝175克，薏苡仁125克，陳皮100克。按實(shí)施例1制得活性成份后，加入制備片劑的常規(guī)輔料，壓片。實(shí)施例3:本發(fā)明顆粒劑的制備菱角150克，靈芝125克，薏苡仁75克，陳皮50克。按實(shí)施例l制得活性成份后，加入淀粉，混勻，用乙醇制粒，干燥。權(quán)利要求1.一種治療肝病的藥物，其特征在于它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的菱角150-200份，靈芝125-175份，薏苡仁75-125份，陳皮50-100份。2、一種一種治療肝病的藥物，其特征在于它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的菱角175份，靈芝150份，薏苡仁100份，陳皮75份。3、如權(quán)利要求1或2所述的治療肝病的藥物的制備方法，包括下列步驟取四味原料藥中的陳皮用80%乙醇回流提取2次，每次3小時(shí)，加醇量為6倍，合并提取液，濾過(guò)，濾液另器保存；藥渣與菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3小時(shí)，每次加水量為藥材的8倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.12(60°C)的清膏，加入乙醇至含醇量為60%，充分?jǐn)嚢?，靜止24小時(shí)，濾過(guò)，濾液與上述陳皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至無(wú)醇味，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(80°C)的稠膏，另器保存；將靈芝加水煎煮2次，每次3小時(shí)，每次加水量為藥材的IO倍，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35(80°C)的稠膏，與上述稠膏合并，減壓干燥。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療肝病的藥物，屬于中藥藥物。它是由下列重量份數(shù)比的原料藥制成的菱角150-200份，靈芝125-175份，薏苡仁75-125份，陳皮50-100份。本發(fā)明的積極效果是本藥物發(fā)明是根據(jù)中醫(yī)理論組方，通過(guò)現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法充分證明該藥能舒肝健脾，益氣消濕，可改善肝病消化道癥狀，增加食欲，提高免疫力，消除肝區(qū)疼痛，促進(jìn)利尿，使肝硬化腹水消退明顯。文檔編號(hào)A61K36/8994GK101264257SQ200810050669公開日2008年9月17日申請(qǐng)日期2008年4月29日優(yōu)先權(quán)日2008年4月29日發(fā)明者牛鳳蘭申請(qǐng)人:吉林大學(xué)