專利名稱：有效治療化療藥物引起的周圍神經(jīng)毒性的吡咯并[1,2-a]咪唑二酮的制作方法
專利說明有效治療化療藥物引起的周圍神經(jīng)毒性的吡咯并[1，2-a]咪唑二酮 發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及抗癌治療領(lǐng)域，針對(duì)降低化療藥物的神經(jīng)毒性副作用的問題。

背景技術(shù)：
用不同化療藥物如長(zhǎng)春新堿、紫杉醇和奧沙利鉑治療，在大多數(shù)情況下導(dǎo)致劑量限制性慢性神經(jīng)毒性的發(fā)生。相繼發(fā)生的神經(jīng)功能障礙，如機(jī)械性和冷誘發(fā)的異常疼痛、進(jìn)行性灼痛、肌痛、麻刺感、麻木感等使該毒性損傷變得明顯(Cavaliere R.和Schiff D.2006，Curr.Neurol.Neurosci.Rep.6218-26)。導(dǎo)致的病理狀態(tài)也被稱為化療引起的周圍神經(jīng)毒性(CIPN)。CIPN通常代表了經(jīng)歷化療的患者不適和痛苦的最重要的原因，其大大地限制了化療的實(shí)用性。對(duì)于具有CIPN癥狀的患者，停止化療不是有效的解決方法這樣會(huì)使腫瘤惡化，而神經(jīng)毒性不一定會(huì)消除，神經(jīng)毒性會(huì)在停藥后持續(xù)，甚至發(fā)展。CIPN嚴(yán)重性的程度不僅取決于藥物、使用時(shí)間和劑量，還取決于施用的總蓄積劑量。
取決于使用的物質(zhì)，純感覺綜合癥(使用順鉑、奧沙利鉑、卡鉑)或涉及或不涉及自主神經(jīng)系統(tǒng)的混合感覺運(yùn)動(dòng)神經(jīng)毒性(長(zhǎng)春新堿、紫杉醇)會(huì)相繼發(fā)生。另外，預(yù)先服用或使用兩種或多種神經(jīng)毒劑共同治療進(jìn)一步加劇了神經(jīng)毒性效應(yīng)的發(fā)生率與嚴(yán)重性。例如，順鉑單獨(dú)在49％的患者中引起神經(jīng)毒性效應(yīng)(Bacon M.等2003，Int.J.Gynecol.Cancer 13428-34)，而當(dāng)與紫杉醇同時(shí)施用時(shí)，在91％的患者中觀察到感覺神經(jīng)毒性。這些效應(yīng)會(huì)在腫瘤不發(fā)展的情況下導(dǎo)致殘疾和生命質(zhì)量惡化，這導(dǎo)致嚴(yán)重的劑量限制性副作用。
另外，神經(jīng)毒性綜合癥的發(fā)生會(huì)干擾最佳藥物劑量、延誤治療程序或迫使治療停止。
人們對(duì)CIPN發(fā)生的機(jī)理了解很少，至今沒有令人滿意的治療方法(Quasthoff S.和Hartung H.P.2002，J.Neurol.2499-17)。
已經(jīng)嘗試用對(duì)不同起因的疼痛有效的藥物治療該癥狀。例如，已知能夠有效治療不同起因的疼痛和糖尿病相關(guān)的神經(jīng)病的三環(huán)抗抑郁藥去甲替林在雙盲、安慰劑對(duì)照試驗(yàn)中測(cè)試，以驗(yàn)證其治療順鉑引起的疼痛綜合癥的能力(Hammack J.E.等2002 Pain 98195-203)。該研究包含51例病人，去甲替林的最大劑量為100mg/天。試驗(yàn)結(jié)果的全面統(tǒng)計(jì)分析表明去甲替林相對(duì)于安慰劑無效。降低神經(jīng)元興奮性過度的藥物拉莫三嗪在III期臨床試驗(yàn)中不能減輕CIPN(Renno S.I.等2006，J.Clin.Oncol.2006，ASCO Annual MeetingProceeding第I部分第24卷，第18S期8530)。所有的病人表現(xiàn)出由長(zhǎng)春花生物堿(30％)、紫杉烷(25％)、鉑類藥物(7％)、化療組合物(34％)和其他(3％)治療引起的嚴(yán)重的神經(jīng)毒性癥狀。治療10星期后，拉莫三嗪與安慰劑治療組的平均評(píng)分相似。加巴噴丁是用于多種神經(jīng)病和神經(jīng)痛的抗驚厥劑(Rowbotham M等1998，JAMA 2801837-1842；Backonja M.等1998，JAMA2801831-1836)。該化合物在具有CIPN的癌癥患者上測(cè)試(Wong G.Y.2005，J.Clin.Oncol.2005，ASCO Annual Meeting Proceeding第I部分第23卷，第16S期8001)，不能減輕疼痛強(qiáng)度(NRS評(píng)分)、感覺神經(jīng)病(ECOG等級(jí)評(píng)定)和其他不良作用。另外，用加巴噴丁治療的患者報(bào)告明顯更多的不良副作用，例如眼震和頭暈。WO2004/085438中已經(jīng)描述了具有一般益智活性的咪唑衍生物；這些化合物沒有與化療藥物聯(lián)合使用，并且沒有公開CIPN中的神經(jīng)保護(hù)作用或其他有益效果。
綜上所述，目前對(duì)于化療引起的神經(jīng)毒性沒有有效治療方法。因此需要CIPN治療中的有效療法。特別的需要是治愈治療，即能夠治療根本的原因，因?yàn)閮H僅對(duì)癥治療到目前為止沒有獲得明顯的效果。還需要能夠改善化療治療耐受性的藥物，從而增加后者的臨床接受性。還需要合適的協(xié)同治療，其在癌癥的有效治療中能夠積極地協(xié)同，從而抑制化療藥物的神經(jīng)毒性副作用。還需要解決適于協(xié)同治療的藥物組合物，從而一種藥物抑制化療藥物的神經(jīng)毒性作用。還需要能夠阻斷甚至在化療藥物停藥后發(fā)展的CIPN神經(jīng)毒性作用的藥物。
概述 我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式(I)代表的化合物
和其溶劑化物在治療和預(yù)防化療引起的神經(jīng)毒性中是十分有效的，而當(dāng)在同樣的條件下測(cè)試時(shí)，臨床實(shí)踐中用于避免化療引起的神經(jīng)病和神經(jīng)痛的其他化合物表現(xiàn)的效力更低，或者甚至不顯示療效。
因此，本發(fā)明涉及式(I)化合物或其溶劑化物在治療和/或預(yù)防化療引起的神經(jīng)毒性中的用途。本發(fā)明還提供了式(I)化合物或其溶劑化物與化療藥物的聯(lián)合治療癌癥的用途。本發(fā)明還包括藥物組合物，其中式(I)化合物或其溶劑化物與化療藥物聯(lián)合存在。



圖1.長(zhǎng)春新堿引起的周圍神經(jīng)病，爪部壓力Nik-13317以及加巴噴丁口服給藥的效果 與長(zhǎng)春新堿/載體治療的大鼠對(duì)比*p＜0.01。每個(gè)數(shù)值代表8只大鼠的平均值。試驗(yàn)在最后一次注射長(zhǎng)春新堿后4天進(jìn)行。
圖2.長(zhǎng)春新堿引起的周圍神經(jīng)病，爪部壓力重復(fù)治療(腹腔注射，5天)。
與長(zhǎng)春新堿/載體治療的大鼠對(duì)比p＜0.05和*p＜0.01。每個(gè)數(shù)值代表8只大鼠的平均值?；衔?30mg/kg腹腔注射)在長(zhǎng)春新堿試驗(yàn)的最后五天中每日施用。試驗(yàn)在最后一次注射長(zhǎng)春新堿后4天進(jìn)行。
圖3.紫杉醇引起的周圍神經(jīng)病，爪部壓力Nik-13317以及加巴噴丁的效果 試驗(yàn)化合物以100mg/kg口服給藥A)，30mg/kg腹腔注射給藥B)或3mg/mg靜脈注射給藥C)。與紫杉醇治療的大鼠對(duì)比p＜0.05和*p＜0.01。每個(gè)數(shù)值代表8只大鼠的平均值。試驗(yàn)在最后一次注射紫杉酚后14-18天進(jìn)行。
圖4.在奧沙利鉑引起的周圍神經(jīng)病發(fā)生中加巴噴丁和Nik-13317口服給藥的效果爪部壓力試驗(yàn)。在奧沙利鉑治療前三天開始以及在化療注射相同的天數(shù)內(nèi)以100mg/kg每日一次口服給予試驗(yàn)化合物。在化合物給藥30分鐘后進(jìn)行測(cè)試。與奧沙利鉑治療的大鼠相比*p＜0.01。每個(gè)數(shù)值代表11只大鼠的平均值。
圖5.加巴噴丁A)和Nik-13317 B)口服給藥對(duì)奧沙利鉑引起的周圍神經(jīng)病的藥效爪部壓力試驗(yàn)。
試驗(yàn)在奧沙利鉑最后一次注射后的48小時(shí)進(jìn)行。在奧沙利鉑治療前三天開始以及在化療注射相同的天數(shù)內(nèi)每日一次口服給予試驗(yàn)化合物。與奧沙利鉑治療的大鼠對(duì)比*p＜0.01。每個(gè)數(shù)值代表11只大鼠的平均值。
發(fā)明詳述 本發(fā)明的第一個(gè)目的是式(I)化合物
或其溶劑化物在制備用于治療和/或預(yù)防化療引起的神經(jīng)毒性的藥物中的用途。
化合物(I)特別有效的減輕化療藥物的多種神經(jīng)毒性作用，如機(jī)械性和冷誘發(fā)的異常疼痛、進(jìn)行性灼痛、肌痛、麻刺感、麻林感等。本發(fā)明還包括治療化療引起的神經(jīng)毒性的方法，包括向有此需要的患者施用式(I)化合物。本發(fā)明進(jìn)一步的部分是所述化合物(I)，或其藥物組合物，用于治療和/或預(yù)防化療引起的神經(jīng)毒性。
式(I)中符號(hào)Me表示CH3。式(I)化合物，即1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮可以以其分離的(S)或(R)對(duì)映體或其任何比例的混合物的形式使用，包括外消旋混合物，即其中兩種對(duì)映體以等量存在；所述對(duì)映體是(S)-1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮(本文也標(biāo)識(shí)為Nik-16140)，和(R)-1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮(本文也標(biāo)識(shí)為Nik-16139)；所述對(duì)映體的外消旋混合物本文標(biāo)識(shí)為Nik-13317。
化合物(I)的給藥劑量可以根據(jù)所治療神經(jīng)毒性的嚴(yán)重性、給藥途徑、使用的化療藥物的類型、病人狀況等而變化。作為非限制性的參考，pro-Kg(每Kg體重)日劑量包括0.5至50mg。
如實(shí)驗(yàn)部分證明，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物在用多種化療藥物治療而遭受CIPN癥狀的大鼠中非常有效，然而目前用于針對(duì)這些副作用的藥物如加巴噴丁，被證實(shí)效果更差，或甚至沒有活性。本文證明的化合物(I)對(duì)于不同種類抗癌藥的功效證明了本發(fā)明用途對(duì)于抗癌治療的廣泛適用性。
另外，如實(shí)驗(yàn)部分報(bào)告的，式(I)化合物不會(huì)影響抗癌治療的效果。
因此本發(fā)明在改善目前抗癌(化療)治療的實(shí)用性方面發(fā)現(xiàn)了實(shí)質(zhì)有用的方法，其降低了伴隨的CIPN副作用，改善了病人的抗癌治療的接受性。
式(I)化合物優(yōu)選與抗癌化療藥物結(jié)合施用這可以通過分別施用兩種化合物，或施用含有兩種化合物的混合物的單一劑量單元完成。
式(I)化合物也可以在抗癌化療治療前使用，從而預(yù)防CIPN的發(fā)生。在這種情況下，化合物(I)的治療在抗癌治療前開始，并且可能隨其共同繼續(xù)。
式(I)化合物在治療抗癌化療藥物治療結(jié)束后發(fā)生的可能的CIPN癥狀中也是有用的；在這種情況下，化合物(I)的治療在抗癌治療結(jié)束后開始(或繼續(xù))。
還發(fā)現(xiàn)式(I)化合物不會(huì)產(chǎn)生耐受性，當(dāng)治療干預(yù)需要持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間，其對(duì)相關(guān)病理學(xué)是至關(guān)重要的。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是前述式(I)化合物或其溶劑化物與一種或多種抗癌化療藥物的聯(lián)合在制備用于治療癌癥的藥物中的用途，所述治療是有利地，沒有周圍神經(jīng)毒性副作用。
式(I)化合物本身是已知的，可以按照WO 2004/085438所述制備，在此引入作為參考。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是含有所述式(I)化合物與一種或多種抗癌化療藥物的藥物組合物，任選存在藥學(xué)上可接受的賦形劑。對(duì)于與式(I)化合物聯(lián)合使用的抗癌化療藥物的種類沒有限制；合適地，它們可以選自醫(yī)療實(shí)踐中目前使用的種類；當(dāng)與產(chǎn)生最嚴(yán)重神經(jīng)毒性刺激的化療藥物聯(lián)合時(shí)，本發(fā)明是最有用的。與式(I)化合物聯(lián)合使用的抗癌化療藥物的例子是有機(jī)金屬化合物，如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、釕化合物等，長(zhǎng)春花生物堿，如長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿，紫杉醇衍生物，如紫杉醇。
式(I)化合物以任何適于所需治療的量存在于藥物組合物中；指示量范圍為10至2500mg，優(yōu)選50至1000mg，最優(yōu)選100至500mg。
如果抗癌化療藥物存在，以任何適于所需治療的量使用。
本發(fā)明的藥物組合物可以適用多種給藥途徑，并以例如可注射溶液、輸注溶液、吸入溶液、混懸液、乳劑、糖漿劑、酏劑、滴劑、栓劑、片劑、包衣片劑、硬或軟膠囊、微囊、顆粒劑、微粒劑、丸劑、分散粉末、洗劑、乳膏、軟膏、藥貼片等形式提供。這些組合物還包括持續(xù)釋放制劑。
這些組合物中任選存在的賦形劑是藥學(xué)技術(shù)中通常使用的那些；它們可以以本領(lǐng)域?qū)＜夜姆绞胶陀昧渴褂谩?br> 固體給藥劑型，如用于口服給藥的片劑和膠囊，優(yōu)選在劑量單元中提供。
藥物組合物可以含有常規(guī)的賦形劑，如粘合劑、填充劑、稀釋劑、壓片劑、潤滑劑、清潔劑、崩解劑、著色劑和潤濕劑，并且可以根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法包衣。
填充劑包括例如纖維素、甘露醇、乳糖和類似試劑。崩解劑包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，如淀粉乙醇酸鈉；潤滑劑包括例如硬脂酸鎂；潤濕劑包括例如月桂基硫酸鈉。
這些固體口服組合物可以通過常規(guī)的混合、填充和壓片方法制備?？梢灾貜?fù)混合操作以在含有大量填充劑的組合物中分散活性劑。
液體組合物可以以液體形式提供，或者以在使用時(shí)用水或合適的液體載體重建的干燥產(chǎn)品形式提供。液體組合物可以含有常規(guī)的添加劑，如混懸劑，例如山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪，乳化劑，如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯；非水載體(其可以包括可食用油)，如杏仁油、分餾椰子油，油狀酯，如甘油酯、丙二醇或乙醇；防腐劑，如甲基或丙基對(duì)-羥基苯甲酸酯或山梨酸，并且如果需要含有常用的矯味劑或著色劑。
對(duì)于腸道外給藥，可以制備含有活性化合物和無菌載體的液體劑量單元。取決于載體和濃度，活性化合物可以被混懸或溶解。腸道外溶液通常通過在填充于合適的管形瓶或安瓿并密封前將化合物溶于載體并過濾滅菌來制備。佐劑，如局麻劑、防腐劑和緩沖劑可有利地溶于載體中。為了提高穩(wěn)定性，該組合物可以在填充管形瓶后冷凍并在真空下除去水分。腸胃外混懸劑基本上以相同的方法制備，區(qū)別在于活性物質(zhì)可以混懸而不是溶解于載體中，可以通過在混懸于無菌載體前將其暴露于環(huán)氧乙烷滅菌?？梢杂欣匕砻婊钚詣┗驖駶檮┮源偈够钚曰衔锞鶆蚍植?。對(duì)于局部給藥，組合物可以是用于活性化合物全身給藥的透皮軟膏或貼劑的形式，并且可以以常規(guī)方法制備，例如，如標(biāo)準(zhǔn)教科書如“Dermatological Formulations”-B.W.Barry(Drugs and thePharmaceutical Sciences-Dekker)或Harrys Cosmeticology(Leonard HillBooks)中所述。作為慣例，組合物一般附加有手寫或打印的說明書，在有關(guān)治療中使用。
現(xiàn)在通過以下非限制性的實(shí)施例說明本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)部分 實(shí)施例1 (S)-1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮(Nik-16140)的合成
向裝有磁力攪拌和回流冷凝器的100ml圓底燒瓶中加入10ml二甲基甲酰胺、1.2g(R)-二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮、0.456g碘化銅、1.2g碳酸鉀和4.0g 1-碘-4-甲基苯。充分?jǐn)嚢璧姆磻?yīng)混合物加熱回流4小時(shí)。冷卻后，真空除去溶劑(50℃，7毫巴)，殘余物用70ml乙酸乙酯處理，濾去不溶物。然后用20ml飽和NaCl溶液洗滌有機(jī)溶液，Na2SO4干燥，過濾，真空下蒸發(fā)。殘余物用30ml乙醚研磨，然后用20ml異丙醇結(jié)晶，獲得0.92g(收率＝47％)灰白色粉末的標(biāo)題化合物。
mp149-150℃ [α]D+138.2(c＝0.4，MeOH) IR和1H-NMR與相應(yīng)的外消旋化合物的IR和1H-NMR匹配 實(shí)施例2 (R)-1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮(Nik-16139)的合成 按照實(shí)施例1所述步驟，由(S)-二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮起始獲得標(biāo)題化合物。
mp150-151℃ [α]D-139.9(c＝0.4，MeOH) IR和1H-NMR與相應(yīng)的外消旋化合物的IR和1H-NMR匹配 實(shí)施例3 外消旋1-(4-甲基苯基)二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮(Nik-13317)的合成 按照實(shí)施例1所述步驟，由外消旋二氫-1H-吡咯并[1，2-a]咪唑-2，5(3H，6H)-二酮起始獲得標(biāo)題化合物。
mp131-132℃ 1H-NMR(300MHz，CDCl3，δppm)7.27(d，2H)；7.24(d，2H)；5.79(m，1H)；4.45(d，1H)；3.73(d，1H)；2.72(ddd，1H)；2.70(m，1H)；2.47(dd，1H)；2.38(s，3H)；2.08-1.98(m，1H)。
IR(nujol，cm-1)1722，1515，1376，1328。
實(shí)施例4 體內(nèi)藥理試驗(yàn) 為了檢測(cè)式(I)化合物對(duì)CIPN的神經(jīng)保護(hù)作用，我們使用長(zhǎng)春新堿、紫杉醇和奧沙利鉑的三種不同全身給藥方案構(gòu)建了該病理學(xué)的不同大鼠模型。為了對(duì)比，臨床用于治療CIPN的化合物-抗痛覺過敏藥物加巴噴丁按照相同的方法測(cè)試。
使用以下治療方案通過重復(fù)施用長(zhǎng)春新堿、紫杉醇和奧沙利鉑引起大鼠(成年Sprague Dawley，150-200g)的周圍神經(jīng)病。
每?jī)商祆o脈注射給予(150μg/kg)長(zhǎng)春新堿，直到蓄積劑量達(dá)到750μg/kg。最后一次注射長(zhǎng)春新堿后4天評(píng)價(jià)爪機(jī)械性超敏反應(yīng)(Marchand F.等2003，Brain Res.980117-120)。
通過在第1、3、5、8天每日一次腹腔注射給藥(0.5mg/kg)引起紫杉醇神經(jīng)病。蓄積紫杉醇劑量為2mg/kg。在最后一次注射紫杉醇后14-18天進(jìn)行藥理實(shí)驗(yàn)(Polomano R.C.等2001，Pain 94293-304)。
奧沙利鉑每周連續(xù)5天以2.4mg/kg的劑量施用三周(15腹腔注射)。奧沙利鉑的蓄積劑量為36mg/kg(Cavaletti G.等2001，Eur.J.Cancer372457-2463)。在最后一次奧沙利鉑注射后48h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
當(dāng)化療注射在行為試驗(yàn)的同一天進(jìn)行時(shí)，在進(jìn)行測(cè)試后注射大鼠。
按照Leighton G.E.等(1988，Br.J.Pharmacol 93553-560)，使用Randall&Selitto裝置以恒定的速率(32g/s)施加力來測(cè)定爪機(jī)械性超敏反應(yīng)。在藥物治療前和治療后的不同時(shí)間評(píng)價(jià)使大鼠縮爪的刺激。結(jié)果代表機(jī)械性閾值的均值，表示為克。為了避免任何對(duì)動(dòng)物爪可能的損傷，最大施用力固定為240g。獲得以下結(jié)果。
a.長(zhǎng)春新堿引起的周圍神經(jīng)病 結(jié)果概括于圖1中。如經(jīng)治療大鼠的機(jī)械性爪壓力閾值的降低所證實(shí)，長(zhǎng)春新堿治療引發(fā)顯著的和延長(zhǎng)的機(jī)械性痛覺增敏。在化合物治療后30和60分鐘口服給藥的100mg/kg實(shí)施例3的化合物(Nik-13317)引起長(zhǎng)春新堿機(jī)械性超敏反應(yīng)的明顯顯著的逆轉(zhuǎn)(圖1)。有趣的是，以相同劑量施用的加巴噴丁則沒有顯著的效果。Nik-13317和加巴噴丁對(duì)載體治療的動(dòng)物沒有任何顯著的活性。
在亞慢性試驗(yàn)中，加巴噴丁或Nik-13317(均以30mg/kg；腹腔注射)在長(zhǎng)春新堿治療的最后五天每日施用。爪壓力測(cè)試在化合物最后一次注射之前1小時(shí)和之后1和12小時(shí)進(jìn)行。在重復(fù)治療后，加巴噴丁在任何測(cè)試時(shí)間對(duì)機(jī)械性痛覺增敏沒有顯著的效果。Nik-13317在最后一次給藥后的1小時(shí)和12小時(shí)顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(P＜0.01)抗機(jī)械性痛覺增敏作用，沒有發(fā)生耐受性(圖2)。有趣的是，Nik-13317在第4次給藥后的23小時(shí)也產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的效果(P＜0.05)。
b.紫杉醇引起的周圍神經(jīng)病 與長(zhǎng)春新堿類似，紫杉醇治療也會(huì)產(chǎn)生顯著的機(jī)械性痛覺增敏。在該模型中，Nik-13317(100mg/kg口服給藥)在治療后30和60分鐘顯著地增加鼠爪壓力閾值。相反地，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加巴噴丁在相同的試驗(yàn)條件下不能產(chǎn)生任何抗痛覺增敏作用(圖3A)。這種沒有作用與之前使用長(zhǎng)春新堿痛覺增敏模型獲得的數(shù)據(jù)一致。Nik-13317在腹腔注射(30mg/kg)和靜脈注射(3mg/kg)后在給藥30-90分鐘時(shí)也是有效的。腹腔注射和靜脈注射的加巴噴丁沒有任何顯著的作用(圖3B和C，分別的) C.奧沙利鉑引起的周圍神經(jīng)病 重復(fù)施用奧沙利鉑從治療的第一個(gè)星期開始明顯導(dǎo)致爪壓力閾值降低(圖4)。治療兩周后獲得最大痛覺增敏。在奧沙利鉑治療前三天開始每日一次重復(fù)口服給藥(100mg/kg)Nik-13317和加巴噴丁。化合物施用在化療注射的同時(shí)進(jìn)行。每周在Nik-13317施用后30分鐘和奧沙利鉑注射前測(cè)試大鼠的機(jī)械性痛覺增敏。
在這些條件下，Nik-13317在所有測(cè)試的時(shí)間完全地預(yù)防奧沙利鉑引起的機(jī)械性閾值的降低。以相同的治療方案給藥的加巴噴丁在第三周僅顯示中度的抗痛覺增敏作用(圖4)。
在奧沙利鉑治療三周后進(jìn)行的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，顯示出口服給藥的Nik-13317在化合物給藥后30分鐘和4小時(shí)是有效的。在100mg/kg下，在治療后8小時(shí)化合物仍然是有效的(圖5B)。有趣的是，在治療30分鐘后加巴噴丁僅顯示中度的效果(圖5A)。Nik-13317或加巴噴丁對(duì)載體治療的動(dòng)物均不會(huì)引起顯著的作用。
在使用式(I)化合物的(S)和(R)對(duì)映體的試驗(yàn)中獲得相似的結(jié)果。
實(shí)施例5 與紫杉醇、奧沙利鉑和長(zhǎng)春新堿的體外聯(lián)合研究 為了證實(shí)使用Nik-13317治療CIPN是否不會(huì)影響抗癌治療的功效，在體外使用HT29人克隆癌細(xì)胞株檢測(cè)Nik-13317對(duì)已知抗癌藥物細(xì)胞毒性的影響。
HT29細(xì)胞置于(4000細(xì)胞/孔)96-孔組織培養(yǎng)板，24小時(shí)后，用固定濃度的抗癌藥物(紫杉醇、奧沙利鉑和長(zhǎng)春新堿)單獨(dú)或與漸增濃度的Nik-13317(從1至1000μM)聯(lián)合處理。72小時(shí)后，溶解細(xì)胞，用ATPlite試劑盒(PerkinElmer Life Science)按照生產(chǎn)者的建議定量細(xì)胞代謝活性。存在于所有代謝活性細(xì)胞中的ATP通過熒光素酶催化D-熒光素的轉(zhuǎn)化反應(yīng)，產(chǎn)生用VICTOR3TM多標(biāo)記檢測(cè)儀(Perkin Elmer)檢測(cè)的熒光信號(hào)。結(jié)果表示為產(chǎn)生的發(fā)光(即產(chǎn)生的ATP)相對(duì)于對(duì)照的百分比。構(gòu)建抗癌藥物的完整的濃度-響應(yīng)曲線以鑒定產(chǎn)生次于最大的和最大的細(xì)胞毒性效應(yīng)的濃度，用于聯(lián)合試驗(yàn)。
紫杉醇、長(zhǎng)春新堿和奧沙利鉑產(chǎn)生濃度相關(guān)的細(xì)胞毒性效應(yīng)，IC50值分別為8nM、7nM和36μM，紫杉醇和長(zhǎng)春新堿在100nM觀察到最大效應(yīng)，奧沙利鉑在100μM觀察到，和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)一致(Perego P等2001，Cancer Res.616034-7；Raymond E等2002，Mol.Cancer Ther.1227-35；Fogler WE等1995，J.Natl.Cancer Inst.8794-104)。
聯(lián)合試驗(yàn)中獲得的結(jié)果清楚地表明Nik-13317(從1至1000μM)不會(huì)改變所有試驗(yàn)抗癌藥物產(chǎn)生的細(xì)胞毒性效應(yīng)。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物
或其溶劑化物的用途，用于制備治療和/或預(yù)防化療引起的周圍神經(jīng)毒性的藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中式(I)化合物是分離的(S)或(R)對(duì)映體，或其混合物的形式。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2的用途，其中所述神經(jīng)毒性由選自有機(jī)金屬化合物、長(zhǎng)春花生物堿、紫杉醇和其衍生物的抗癌化療藥物引起。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的用途，其中抗癌化療藥物選自順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、釕化合物、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、紫杉醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4的用途，其中藥物適于施用pro-Kg量的含有0.5至50mg的式(I)化合物。
6.式(I)化合物
或其溶劑化物與一種或多種抗癌化療藥物的聯(lián)合的用途，用于制備用于治療癌癥的藥物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其中式(I)化合物是分離的(S)或(R)對(duì)映體，或其混合物的形式。
8.根據(jù)權(quán)利要求6-7的用途，其中抗癌化療藥物選自有機(jī)金屬化合物、長(zhǎng)春花生物堿、紫杉醇和其衍生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中抗癌化療藥物選自順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、釕化合物、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、紫杉醇。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9的用途，其中藥物適于施用pro-Kg量的含有0.5至50mg的式(I)化合物。
11.含有式(I)化合物
或其溶劑化物與一種或多種抗癌化療藥物和任選的藥物賦形劑的藥物組合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的藥物組合物，為劑量單元形式，其中式(I)化合物以10至2500mg的量存在。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的藥物組合物，其中式(I)化合物以50至1000mg的量存在。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的藥物組合物，其中式(I)化合物以100至500mg的量存在。
15.式(I)化合物
或其溶劑化物，用于治療和/或預(yù)防化療引起的周圍神經(jīng)毒性。
16.式(I)化合物
或其溶劑化物，與一種或多種化療藥物聯(lián)合，用于治療癌癥。
全文摘要
本發(fā)明公開了式(I)化合物治療和/或預(yù)防5化療引起的周圍神經(jīng)毒性(CIPN)的用途。本發(fā)明包括藥物組合物，其中式(I)化合物存在于含有抗癌藥的混合物中。本發(fā)明還提供了降低CIPN相關(guān)副作用的改進(jìn)抗癌療法。
文檔編號(hào)A61P25/02GK101605541SQ200780042441
公開日2009年12月16日 申請(qǐng)日期2007年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月15日
發(fā)明者C·法里納, C·戈赫拉迪尼, P·派特里洛 申請(qǐng)人:紐羅圖恩股份公司