專利名稱：：一種具有糖苷酶抑制作用的桑白皮提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥提取物及其制備方法，特別涉及一種具有糖苷酶抑制作用的中藥提取物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：桑白皮(CORTEXM0RI)始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品，歷代本草均有收載。桑白皮瀉肺平喘，性甘味寒，歸肺經(jīng)，利水消腫。主治肺熱喘咳、水飲停肺、脹滿喘急、水腫、腳氣、小便不利。用桑白皮治療消渴癥在古代早有記載《千金翼》巻十九記載的桑根湯用法為桑根白皮(銼，炒)半斤，為粗末，每服三錢匕，水一盞，煎至七分，去滓，溫服，一日二次。主治卒消渴，小便多，日飲水1斛。商品為?？浦参锷?MorusalbaL.)除去栓皮的干燥根皮。桑樹秋末落葉至春發(fā)芽前采挖根部，刮去黃色栓皮，縱向剖開，剝?nèi)「?，曬干入藥。桑白皮中主要含黃酮類化合物桑根皮素、環(huán)桑根皮素、化合物A、羥基二氫桑根皮素、桑根皮醇、桑酮、桑素、桑色烯、環(huán)桑素、環(huán)桑色烯、環(huán)桑色醇、桑苷A-D、摩査爾酮A;二氫黃酮類化合物桑根酮；芳基苯呋喃衍生物；另外尚含1-脫氧野尻霉素(DNJ)及衍生物等多種生物堿類物質(zhì)。桑白皮含有DNJ等生物堿類是作用明確的a-葡萄糖苷酶抑制劑。有大量資料表明，DNJ具有很強(qiáng)的ci-葡萄糖苷酶抑制作用。體外研究結(jié)果表明，DNJ對不同動物體內(nèi)a-葡萄糖苷酶的抑制作用不同，它抑制蔗糖酶和麥芽糖酶的IC5。范圍分別是6.616X10—8M和7.463X10—8M。DNJ對a-葡萄糖苷酶表現(xiàn)為競爭性抑制，常作用于底物結(jié)合位點(diǎn)或其附近。上述結(jié)果提示，桑白皮具有降血糖的作用與其對a-葡萄糖苷酶有抑制作用相關(guān)，桑白皮降血糖的途徑之一可能是其對小腸刷狀緣膜上雙糖酶活性的抑制作用，減緩小腸對碳水化合物的消化和吸收，使外周血糖變化趨于穩(wěn)定。目前對桑白皮提取物中，有的制備工藝提取的主要是桑白皮中的黃酮類成分，而不是生物堿類成分；有的工藝過于簡單，造成有效成分含量低，必須大量服用才能起效；有的制備工藝過于復(fù)雜，造成總生物堿的收率過低、生產(chǎn)成本過高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。而目前的研究報(bào)道中均未涉及到用活性碳對桑白皮提取物進(jìn)行純化的方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種中藥提取物的制備方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的桑白皮提取物制備方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制或粉碎后，以水或10%50%的乙醇溶液作為提取溶劑，提取溫度為室溫9CTC，總?cè)軇┝繛樗幉牡?030倍，提取次數(shù)為24次，每次15小時(shí)；提取液5070。C減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱，或水提取液濃縮后醇沉，揮去乙醇后再以水溶液的形式上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量0.53倍；上柱液溫度為室溫75'C，上柱液的量為原料藥材重量份的15倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用1550%的乙醇洗脫并接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖(即Molish反應(yīng))，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液5070°C減壓濃縮后,通過常壓、減壓干燥或噴霧干燥得到桑白皮提取物。桑白皮提取物的優(yōu)選制備方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為5(TC，提取次數(shù)為3次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的8、6、6倍，提取時(shí)間分別為3、2、1小時(shí)，三次提取液合并；6(TC減壓濃縮、離心后上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份1.5倍；上柱液溫度為5(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的3倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)呈陰性時(shí)結(jié)束洗脫；15%的乙醇洗脫液601:減壓濃縮，常壓或減壓干燥得到桑白皮提取物。桑白皮提取物的優(yōu)選制備方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以15%的乙醇溶液作為溶劑提取，提取溫度為80'C，提取次數(shù)為4次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的9、7、7、6倍，提取時(shí)間分別為3、3、2、1小時(shí)，四次提取液合并；55"C減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份的l倍；上柱液溫度4(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的4倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用45%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用l-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；45%的乙醇洗脫液55'C減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。桑白皮提取物的優(yōu)選制備方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為3(TC，提取次數(shù)為2次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的10、8倍，提取時(shí)間分別為3、2小時(shí)，兩次提取液合并，7(TC減壓濃縮后離心，上清液加34倍體積95%的乙醇進(jìn)行醇沉，放置過夜后上清液揮去乙醇，加水配成原料藥材重量份23倍體積的水溶液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份0.5倍；上柱液溫度6(TC，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用20%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液7(TC減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。本發(fā)明所得的桑白皮提取物用高效液相HPLC檢測，提取物中1-脫氧野尻霉素的含量在48mg/g90mg/g之間。本發(fā)明桑白皮提取物的制備工藝用活性碳對桑白皮提取物進(jìn)行純化，主要活性成分DNJ的含量大幅度提高。本發(fā)明桑白皮提取物具有抑制a—葡萄糖苷酶活性作用。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1不同干燥溫度對本發(fā)明桑白皮提取物DNJ含量的影響取1KG桑白皮藥材(藥材中的有效成分DNJ含量為2.15mg/g)經(jīng)過切制后，45。C攪拌提取三次，加水量為藥材重量的(10+6+6)倍，提取時(shí)間為(2+1+1)小時(shí)，三次提取液合并，60。C減壓濃縮，濃縮液3L離心后上活性碳柱(活性碳型號為GH-15，用量1.5KG，濕法裝柱)，上柱液溫度5(TC，樣品上完全后用水洗脫直至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15%的乙醇洗脫開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，15%的乙醇洗脫液60卩減壓濃縮至300ml，平均分成6份，于不同的溫度下進(jìn)行干燥，結(jié)果如下:表1不同干燥溫度對DNJ含量的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>上述實(shí)驗(yàn)說明不同的干燥溫度對桑白皮提取物中DNJ的含量有影響，隨著干燥溫度的升高，提取物中的DNJ有下降的趨勢，其中在507(TC的干燥溫度范圍內(nèi)DNJ的含量變化不大，超過7CTC則提取物中的DNJ含量則大幅下降，說明在干燥過程中對溫度過高會對DNJ的破壞。桑白皮提取物常壓或減壓干燥的溫度以不高于7(TC為佳。實(shí)驗(yàn)例2不同制備方法所得桑白皮提取物的出膏率和DNJ含量比較實(shí)驗(yàn)?zāi)壳吧０灼ぬ崛∥锏闹苽浞椒刹捎盟继崛》?、水提醇沉或醇提水沉法、提取液過陰陽離子交換樹脂法、或是水醇提取液過聚酰胺柱的方法以及本發(fā)明所使用的方法，在本實(shí)施例中比較上述幾種方法所得到的桑白皮提取物中DNJ含量的高低。結(jié)果見表2。A、100克桑白皮加18倍的水在7(TC提取兩次，提取時(shí)間2、1小時(shí)，提取液濃縮干燥。B、IOO克桑白皮加18倍的309&的乙醇在7(TC提取兩次，提取時(shí)間2、1小時(shí)，提取液濃縮干燥。C、IOO克桑白皮加18倍的水在7(TC提取兩次，提取時(shí)間2、l小時(shí)，提取液濃縮至300ml，加900ml的959&的乙醇醇沉，放置過夜，離心、上清夜?jié)饪s干燥。D、100克桑白皮加18倍的30%的乙醇回流提取兩次，提取液濃縮至150ml，加1200ml的水沉淀，放置過夜，離心、上清夜?jié)饪s干燥。E、IOO克桑白皮加18倍的水在7(TC提取兩次，提取時(shí)間2、l小時(shí)，提取液濃縮、離心，上清液200ml調(diào)PH值至3，上陽離子交換樹脂如001X7，以0.5N氨水洗脫，洗脫液濃縮干燥。F、100克桑白皮加18倍的3(m的乙醇在7(TC提取兩次，提取時(shí)間2、1小時(shí)，提取液上過聚酰胺柱，以70%的乙醇洗脫，洗脫濃縮干燥。G、IOO克桑白皮加18倍的水在70'C提取兩次，提取時(shí)間2、l小時(shí)，提取液按本發(fā)明提供的方法過活性碳柱，過柱洗脫液濃縮干燥。表2不同制備方法所得桑白皮提取物的出膏率和DNJ含量比較<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，不同制備方法所得桑白皮提取物出膏率和DNJ含量均有較大的差別，本發(fā)明所采用的方法與其它制備方法相比較，出膏率適中，但提取物中的DNJ含量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它制備方法。實(shí)驗(yàn)例3用反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)評價(jià)桑白皮提取物的ct-葡萄糖苷酶抑制作用(1)、原理反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)可用于研究小腸酶在溫育瓶中對底物的作用。本研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菍ι０灼ぬ崛∥锏腶-葡萄糖苷酶抑制作用進(jìn)行評價(jià)。(2)、實(shí)驗(yàn)動物Wistar大鼠，$，120—140g。(3)、實(shí)驗(yàn)方法A、底物的準(zhǔn)備與給藥將1%的淀粉溶液加熱溶解后，按一定比例加入a-淀粉酶，混均，37。C水浴鍋中反應(yīng)10min，反應(yīng)結(jié)束后與碘液無顯色反應(yīng)，說明淀粉已經(jīng)完全被分解為寡糖。每個(gè)25ml的三角瓶中加入此溶液6ml，再加入各濃度的受試藥物備用。B、腸囊的制備斷頭處死雄性大鼠，在十二指腸上端切開并取出小腸。借助不銹鋼針將小腸反轉(zhuǎn)，剪成7-8cm的小段，每段小腸的一端用手術(shù)線結(jié)扎，在另一端將lmlKrebs-Henseleit緩沖液灌入小腸后結(jié)扎，完成了此段腸囊的制備。將各腸囊置于冰冷的Krebs-Henseleit緩沖液中備用。C、酶促反應(yīng)的進(jìn)行及樣品的收集提前將搖床預(yù)熱到37'C備用。待所有的腸囊制備完畢，將它們隨機(jī)加到各三角瓶中，在搖床上以37。C的溫度，30轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速進(jìn)行反應(yīng)。2h后取出各三角瓶，每瓶加入10Wlmol/LHC1終止反應(yīng)。然后從三角瓶中取出腸囊，切開腸囊并使腸囊內(nèi)的液體與三角瓶內(nèi)的液體混合，混均后收集樣品0.5ml，4"C冰箱保存。D、樣品中葡萄糖的測定及結(jié)果評價(jià)在不同濃度的a-葡萄糖苷酶抑制劑存在的條件下,葡萄糖的釋放以無抑制劑時(shí)葡萄糖的百分比表示。(結(jié)果見表3)。表3用反轉(zhuǎn)腸囊技術(shù)評價(jià)桑白皮提取物對a-葡萄糖苷酶的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>通過用反轉(zhuǎn)腸囊實(shí)驗(yàn)評價(jià)桑白皮提取物對酶的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，通過本發(fā)明工藝制備的桑白皮提取物顯示對a-葡萄糖苷酶的強(qiáng)抑制活性作用。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例所述的效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例1:100g桑白皮藥材經(jīng)過切制后，35。C攪拌提取三次，加水量分別為藥材重量的8、6、6倍，提取時(shí)間分別為3、2、l小時(shí)，三次提取液合并，60。C減壓濃縮,濃縮液200ml離心上活性碳柱(活性碳型號為GH-15,用量100克，濕法裝柱)，上柱液溫度5(TC，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，15%的乙醇洗脫液60°0減壓濃縮，濃縮液5(TC減壓干燥，得到桑白皮提取物3.5g，用高效液相(HPLC)檢測，提取物中DNJ的含量為75mg/g。實(shí)施例2:100g桑白皮藥材經(jīng)過切制后，5(TC攪拌提取三次，加水量分別為藥材重量的7、5、5倍，提取時(shí)間分別為2、1、l小時(shí)，三次提取液合并，6(TC減壓濃縮，濃縮液300ml加入900ml959&的乙醇，室溫放置過夜，上清液揮去乙醇，調(diào)成200ml的水溶液上活性碳柱(活性碳型號為GH-15，用量50克，濕法裝柱)，上柱液溫度30。C，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用20%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，20y。的乙醇洗脫液6(TC減壓濃縮，濃縮液7(TC常壓干燥，得到桑白皮提取物2.1g，用高效液相(HPLC)檢測提取物中DNJ的含量為90mg/g。實(shí)施例3:100g桑白皮藥材經(jīng)過切制后，用30%的乙醇加熱回流提取三次，溶劑量分別為藥材重量的7、6、5倍，提取時(shí)間分別為2、1、l小時(shí)，三次提取液合并，6CTC減壓濃縮，濃縮液300ml離心上活性碳柱(活性碳型號為GH-1，用量100克，濕法裝柱)，上柱液溫度45X:，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用30%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，30%的乙醇洗脫液60'C減壓濃縮，濃縮液6(TC常壓干燥，得到桑白皮提取物2.0g,用高效液相(HPLC)檢測提取物中DNJ的含量為65mg/g。實(shí)施例4:500g桑白皮藥材經(jīng)過切制后，室溫浸泡提取4次，每次加水量為藥材重量7倍，提取時(shí)間每次5小時(shí)，提取液合并，6(TC減壓濃縮，濃縮液2000ml離心上活性碳柱(活性碳型號為GH-15，用量1000克，濕法裝柱)，上柱液溫度50°C，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用40%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)出消失時(shí)結(jié)束洗脫，4(m的乙醇洗脫液6(TC減壓濃縮，濃縮液60'C減壓干燥，得到桑白皮提取物19g，提取物中DNJ的含量為50mg/g。實(shí)施例5:IOKG桑白皮藥材經(jīng)過切制后，35'C攪拌提取二次，加水量分別為藥材重量的10、8倍，提取時(shí)間分別為2、1小時(shí)，二次提取液合并，6(TC減壓濃縮,濃縮液30L離心后上活性碳柱(活性碳型號為GH-15，用量15KG，濕法裝柱)，上柱液溫度45。C，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用50%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，5096的乙醇洗脫液60'C減壓濃縮，濃縮液噴霧干燥，得到桑白皮提取物0.34KG，用高效液相(HPLC)檢測提取物中DNJ的含量為56tng/g。實(shí)施例6:IOOKG桑白皮藥材經(jīng)過切制后，45r攪拌提取三次，加水量分別為藥材重量的IO、6、6倍，提取時(shí)間分別為2、1、1小時(shí)，三次提取液合并，60'C減壓濃縮，濃縮液40L離心后上活性碳柱(活性碳型號為GH-15，用量200KG，濕法裝柱)，上柱液溫度5(TC，活性碳柱用水洗脫至至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用15%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，159&的乙醇洗脫液60。C減壓濃縮，濃縮液噴霧干燥，得到桑白皮提取物2.8KG，提取物中DNJ的含量為70mg/g。實(shí)施例7:IOKG桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以15%的乙醇溶液作為溶劑加熱提取，提取溫度為40'C，提取次數(shù)為3次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的8、7、6倍，提取時(shí)間分別為3、2、l小時(shí)，三次提取液合并；6(TC減壓濃縮后離心，上原料藥材重量1.5倍的顆粒型活性碳柱；上柱液溫度為6(TC，上柱液的量為原料藥材重量的3倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)換用30%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，乙醇洗脫液6(TC減壓濃縮，噴霧干燥得到桑白皮提取物0.32KG;用高效液相HPLC檢測，提取物中DNJ的含量為50mg/g。實(shí)施例8:10KG桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，45%的乙醇溶液作為溶劑回流提取，提取次數(shù)為2次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的15、10倍，提取時(shí)間分別為3、2小時(shí)，兩次提取液合并；提取液70'C減壓濃縮后離心，上清液過原料藥材重量2倍的顆粒型活性碳柱；上柱液溫度為55°C，上柱液的量為原料藥材重量份的2倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)(茚三酮反應(yīng)為陰性)時(shí)換用10%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；用10%的乙醇洗脫液70。C減壓濃縮、噴霧干燥得到桑白皮提取物0.28KG;用高效液相HPLC檢測，提取物中DNJ的含量為48mg/g。權(quán)利要求1、一種中藥提取物，其特征在于該提取物由如下方法制成桑白皮原料藥材經(jīng)過切制或粉碎后，以水或10％～50％的乙醇溶液作為提取溶劑，提取溫度為室溫～90℃，總?cè)軇┝繛樗幉牡?0～30倍，提取次數(shù)為2～4次，每次1～5小時(shí)；提取液50～70℃減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱，或水提取液濃縮后醇沉，揮去乙醇后再以水溶液的形式上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量0.5～3倍；上柱液溫度為室溫～75℃，上柱液的量為原料藥材重量份的1～5倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性時(shí)，換用10～50％的乙醇洗脫并接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，即Molish反應(yīng)，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液50～70℃減壓濃縮后，通過常壓、減壓干燥或噴霧干燥得到桑白皮提取物。2、如權(quán)利要求1所述的中藥提取物，其特征在于該提取物由如下方法制成桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為5crc，提取次數(shù)為3次，每次加入溶劑量分別為桑白皮原料藥材的8、6、6倍，提取時(shí)間分別為3、2、1小時(shí)，三次提取液合并，60。C減壓濃縮、離心后上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份1.5倍；上柱液溫度為5(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的3倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性，換用15%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)呈陰性時(shí)結(jié)束洗脫；159&的乙醇洗脫液60'C減壓濃縮，減壓干燥得到桑白皮提取物。3、如權(quán)利要求1所述的中藥提取物，其特征在于該提取物由如下方法制成桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以15%的乙醇溶液作為溶劑提取，提取溫度為80°C，提取次數(shù)為4次，每次加入溶劑量分別為桑白皮原料藥材的9、7、7、6倍，提取時(shí)間分別為3、3、2、l小時(shí)，四次提取液合并；55'C減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份的1倍；上柱液溫度4(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的4倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性時(shí)，換用45%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；45%的乙醇洗脫液55。C減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。4、如權(quán)利要求1所述的中藥提取物，其特征在于該提取物由如下方法制成桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為35t:，提取次數(shù)為2次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的IO、8倍，提取時(shí)間分別為3、2小時(shí)，兩次提取液合并，7(TC減壓濃縮后離心，上清液加34倍體積95%的乙醇進(jìn)行醇沉，放置過夜后上清液揮去乙醇，加水配成原料藥材重量份23倍體積的水溶液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份0.5倍；上柱液溫度6(TC，活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性時(shí)，換用20%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液7(TC減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。5、如權(quán)利要求l、2、3或4所述的中藥提取物，其特征在于該桑白皮提取物用高效液相HPLC檢測，提取物中l(wèi)-脫氧野尻霉素的含量在48mg/g90mg/g之間。6、如權(quán)利要求1所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于該方法為:桑白皮原料藥材經(jīng)過切制或粉碎后，以水或10%50%的乙醇溶液作為溶劑提取，提取溫度為室溫9(TC，總?cè)軇┝繛樗幉牡?030倍，提取次數(shù)為24次，每次15小時(shí)；提取液50-7CTC減壓濃縮后離心或醇沉后上清液以水溶液的形式上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量0.53倍；上柱液溫度為室溫75-C，上柱液的量為原料藥材重量份的15倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)換用1550%的乙醇洗脫，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)出現(xiàn)時(shí)開始接收，Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液50-7(TC減壓濃縮后，通過常壓、減壓干燥或噴霧干燥得到桑白皮提取物；用高效液相HPLC檢測，提取物中1-脫氧野尻霉素的含量在48mg/g90mg/g之間。7、如權(quán)利要求6所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于該方法為:桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為50'C，提取次數(shù)為3次，每次加入溶劑量分別為桑白皮原料藥材的8、6、6倍，提取時(shí)間分別為3、2、1小時(shí)，三次提取液合并，60。C減壓濃縮、離心后上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份1.5倍；上柱液溫度為5(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的3倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性時(shí)，換用15%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)呈陰性時(shí)結(jié)束洗脫；15%的乙醇洗脫液60°〇減壓濃縮，常壓或減壓干燥得到桑白皮提取物。8、如權(quán)利要求6所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于該方法為:桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以15%的乙醇溶液作為溶劑提取，提取溫度為80'C，提取次數(shù)為4次，每次加入溶劑量分別為桑白皮原料藥材的9、7、7、6倍，提取時(shí)間分別為3、3、2、l小時(shí)，四次提取液合并；55r減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份的1倍；上柱液溫度4(TC，上柱液的量為原料藥材重量份的4倍；活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，即茚三酮反應(yīng)為陰性時(shí)，換用45%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；45%的乙醇洗脫液55'C減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。9、如權(quán)利要求6所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于該方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制后，以水作為溶劑提取，提取溫度為35'C，提取次數(shù)為2次，溶劑量分別為桑白皮原料藥材的IO、8倍，提取時(shí)間分別為3、2小時(shí)，兩次提取液合并，7CTC減壓濃縮后離心，上清液加34倍體積95%的乙醇進(jìn)行醇沉，放置過夜后上清液揮去乙醇，加水配成原料藥材重量份23倍體積的水溶液上活性碳柱，活性碳的用量為原料藥材重量份0.5倍；上柱液溫度6(TC,活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)，茚三酮反應(yīng)為陰性，換用20%的乙醇洗脫并開始接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫；乙醇洗脫液7(TC減壓濃縮后，噴霧干燥得到桑白皮提取物。10、如權(quán)利要求l、2、3或4所述的中藥提取物在制備具有a-葡萄糖苷酶抑制作用的藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明公開一種具有糖苷酶抑制作用的中藥提取物的制備方法。該方法為桑白皮原料藥材經(jīng)過切制或粉碎后，以水或乙醇溶液作為提取溶劑，提取液減壓濃縮后離心，上清液上活性碳柱；或水提取液濃縮后醇沉，揮去乙醇后以水溶液的形式上活性碳柱。活性碳柱用水洗脫至水洗液澄清時(shí)換用乙醇洗脫并接收洗脫液，用1-萘酚試劑定性檢測總糖，當(dāng)Molish反應(yīng)消失時(shí)結(jié)束洗脫，乙醇洗脫液減壓濃縮后，干燥得到桑白皮提取物。文檔編號A61P11/06GK101108206SQ200610099049公開日2008年1月23日申請日期2006年7月17日優(yōu)先權(quán)日2006年7月17日發(fā)明者何大林,樊利青,段震文,郭樹仁申請人:北京北大維信生物科技有限公司