專利名稱：：一類脫氫水飛薊賓雙酯類衍生物及其制備方法和用途的制作方法一^S^K飛薊^Xi^勝物及其偉恪方柳用途技術(shù)鄉(xiāng)或本發(fā)明屬于有機(jī)化，QIIM七學(xué)領(lǐng)或，具體而言，本發(fā)明涉及一對(duì)M7K飛薊賓觀^l行生物離恪方法和用途。i^f七^(guò)Wl^^礙畔合成^"齒導(dǎo)到。本發(fā)明將i^系州七^(guò)M氧ttffi^大鼠乳f源徹干細(xì)鵬員傷體外，Ml行了肝細(xì)鵬員繊戶活敞繊。i繊七鄉(xiāng)微鵬有傲戶肝細(xì)鵬Pf娜干細(xì)胞修飾作用。本發(fā)明X^i^f七^(guò)Wm自由翻^S行了泖賦，貨JKi:有體外清Pi^氧陰離子自由基、清除^^^m荊井自由基、綱咱由基誘導(dǎo)a繊4機(jī)頓盼活性。UU:活性表明i^f七創(chuàng)勿可以予鵬朋Tf恪郷^^治療急勝慢糊干損傷^以及由氧自由基弓IM與氧自由^"關(guān)的期te理,S^的,。i^f七^(guò)M^見(jiàn)出很強(qiáng)的謝亢自由基弓起的PC12細(xì)鵬劍別乍用，即x浙^^辭轉(zhuǎn)魏胞的rci2細(xì)^Mjm俗員徹斜^乍用。而且在同一^r，其清除自由割斜戶細(xì)胞的能力比陽(yáng)tt^照槲皮親強(qiáng)。說(shuō)明其對(duì)傲戶鵬申對(duì)旗化、防治^￥十頓呆;^#積極作用。J^^活^x表明i^f七^(guò)J可以預(yù)J朋刊IJ備予鵬早老醜蘇唭他與月新峰氧化對(duì)員相關(guān)的的繊。技贈(zèng)景很^i由氧化弓起。^J5是由機(jī)體細(xì),生和青除自由基之間的失卿躬I起的，可誘發(fā)多禾嚇。ftll奶l超轉(zhuǎn)L努^i，如中風(fēng)，帕錢疏，阿爾^i滿。另夕卜它遞艮其它^^!3i徑有關(guān)，如心M、自身^M，、月橢、病毒ft^(如aids、肝炎)。因此對(duì)錄湘^m化劑戯治療由艱引起的各禾,的W^t徑，因附^1化劑柳卿各是下一鵬己的治療延長(zhǎng)生命fi，方向之一。ffii!ft^出高效低毒附j(luò)m化劑，；ra是天然j^t^t以天然/7骨架白術(shù)生物，是開^m化作用機(jī)繊藥的一斜維。自由基天然t^勿中，水飛薊是少,ja個(gè)在i^^tn2i^的i^te一。三十多年的l(繊實(shí)驗(yàn)證明i^5具新觸刀^m刺氐毒性(參閱FloraK.等人，AmJ.Gastroenterol.1998，93，139-143頁(yè)；Sailer,R.等人，Drugs,2001，61(14)，2035-2063頁(yè))。7jC飛薊中水飛薊賓^Sl多，活性iHS高。i^i作用主魏以下幾點(diǎn)。(一)抗自由翻性水飛薊就于由ca，半學(xué)IM胺、If^禾唭懶干^tit^的肝損害具有傲;^乍用。1990年Lotteron等^隨了在小f』干微粒體內(nèi)，水飛薊素能>由cafti射弓跑的體外脂^ii割級(jí)由還原型輔酶對(duì)蟲弓起的過(guò)氧化作用i^t陵明水飛薊素為鏈中斷織化劑鄉(xiāng)自由MP敘U。(二)傲戶肝細(xì)鵬莫:M^旨M^氧ft^^封糊鵬盼驗(yàn)性，鵬干細(xì)鵬。還鄉(xiāng)臃真菌歸鬼^W月細(xì)a—鵝膏W!^W細(xì)祉特異受鵬結(jié)合！撇鵬肝細(xì)胞的攻擊鵬臓！怖其肝胸盾環(huán)，從而增強(qiáng)肝細(xì)鵬謝于多禾襯員害因素附勵(lì)。(三)細(xì)干細(xì)胞的修復(fù)禾鵬水飛薊賓itA^鵬可以與此l^受體賠，荊te激活，活化的受體可鵬彌干細(xì)胞核內(nèi)薩齢酶l的活性，使RNA，曾強(qiáng)，促a^及蛋白質(zhì)的合成，并間掛足進(jìn)DNA船成，有利于肝細(xì)胞,復(fù)和再生。(四)拋橢作用各幹活瞎能氧化鳥卩，城8—^%11%誠(chéng)DNA損傷，進(jìn)而弓翻幗，水飛薊賓作為一個(gè)輸離自由繊質(zhì)腿示了予鵬和治療月働作用。水飛薊^f七激具新觸刀^m^，^騷由于其水溶性和生辦鵬肚的一些不足限制了i,的市場(chǎng)。故對(duì)辦K飛薊^f飾行生物，i媒冑鵬具有更高赫頓的離活性，以其賺取自挪爐權(quán)的新藥，實(shí)屬必要。本發(fā)明的目的鵬共一種具有織化、清除自由翻性、傲戶肝鵬MF臟器質(zhì)鵬傷、治療早老1*癥、i^的月衞Jc飛薊賓觀驗(yàn)性化她具體而言，本發(fā)明樹共了一禾?hào)騣戶際的膨ja薊賓觀徵勝物及^m用鹽式I其中，n=l-5;X^m，R、H媳、雜、環(huán)縫、刺t^l代的芳基，式I中的7'，8'的立術(shù)勾型分別是或同時(shí)是R構(gòu)型或S構(gòu)型。本發(fā)明雌的式I化^^舌化激1-1:2-[2，3-二氫-3-(4-N，N-二Z^鍾甲酰甲離3-甲^^雜-2-羥甲蒼l,4-苯并^m^環(huán)"6-]-7-(4-N，N-二乙翻鍾甲酰甲tt"3-甲苯彰-3，5,-二I^4H-1-苯荊W^4-酮；化激I-2:2-[2，3-二氫-3-(4,賂縫甲酰甲3-甲氧基織-2-羥甲基-l，4-苯并Z^A環(huán)"6-]-7—(4-卩比咯烷基甲酰甲旨3-甲ftS^S)-3，5，-二羥H1-苯卿PH-酮；化激1-3:2-[2，3-二氫-3-(4-N-菊鍾甲酰甲旨3-甲氧基雜-2-羥甲基
發(fā)明內(nèi)容-1，4-苯并Z^C環(huán)"6-]-7-(4-^荊錢甲酰甲旨3-甲^^^)-3，5，_二羥化激1-4:2-[2，3-二氫-3-(4-N-X^i錢甲酰甲tt"3-甲織-2-羥甲基-1，4-苯并二氧六環(huán)~6-]-7-(4-^對(duì)氯苯胺基甲酰甲氧基-3-甲氧基苯蜀-3，5，-二P^"4H-l-苯荊Wl4-酮；化合物1-5:2-[2，3-二氫-3-(4-N-對(duì)甲苯胺基甲酰甲-3-甲氧基苯基)-2-羥甲H4-苯并Z^A環(huán)"6-]-7-(4;-對(duì)甲ftS荊鍾甲酰甲tt-3-甲t^雜-3，5，-二羊鑒4H-1-苯荊tbfr4-酮；化合吻Ii2-[2，3-二氫-3-(4—N-對(duì)甲基菊錢甲酰甲緣3-甲氧基雜-2-羥甲奢l，4-苯并:^A環(huán)"6-]-7-(4-N-對(duì)甲基菊錢甲酰甲旨3-甲氧基苯墨-3，5，-二夢(mèng)^"4H-l-苯荊砂i"4-酮；化合物1-7:2-[2，3-二氫-3-(4-N-2，4-二氯苯胺基甲酰甲氧蒼3-甲氧基苯基)-2-羥甲H，4-苯并Z^^環(huán)"6-]-二氫-7-(4-N-2，4-二m^i鍾甲酰甲氧3-甲^^雜-3，5，-二夢(mèng)^4H-l-苯荊砂fr4-酮；化合物1-8:2-[2，3-二氫-3-(4-乙氧甲酰甲氧基-3-甲氧基苯基)-2-羥甲基-l，4-苯并二默環(huán)~6-]-7-(4-乙氧甲酰甲緣3-甲竊苯基)-3，5，-二f幾-4H-1-苯荊砂^"4-酮；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>本發(fā)明的另一個(gè)目的^(共一禾拭i戶^的月M7ja薊賓觀^f行生物的偉恪方法。式i化溯離恪效提<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中，n=l_5;R、R媳、'藤、環(huán)縫、刺MM^代的芳基X,為卣素5^f內(nèi)，鵬內(nèi)，1化鉀，MM七鈉。^S/S溶齊偽四SP劉南，N，N-二甲基甲醐安，二甲Wl，Si^驢為室驢回流，,寸間為0.5-20小時(shí)。其中1-a^^g^然的^"合成的水飛薊賓(silybin)以及本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了式I化^t/用于防治肝M,干臟器質(zhì)性損傷及欺眹的肝ife^的用途。本發(fā)明的再一個(gè)目的^f共了一禾恰有式I化，的用于防治肝1肝臟器質(zhì)掛員傷及期眹的肝ife^的,鵬。本發(fā)明的另一個(gè)目的鵬共了一禾辦式I化溯的用鵬于織化自由凝幾審M)^、防治早老醜呆1^的用途。本發(fā)明的再4目的離共了一禾恰有式I化鑭的用脇于媳化自由掛幾制6Wi^、防治早老醜呆癥的綱0|胞勿。本發(fā)明的又一目的^if共了式I化創(chuàng)勿的用恪由氧自由基弓|^^氧自由^t關(guān)的生理^^^親隄心血管瀏畝血管^l^的用途；本發(fā)明的再一個(gè)目的^f共了一禾恰有式I化^4勿的用恪由氧自由基弓1^^與氧自由歸關(guān)的生理改變^^親提心血管&M血管病^I吻的藥辦且m為了M^W本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，Tffi分別用^M列的形式說(shuō)明化^^恪的過(guò)程，^M侈蛤出Pf樣性化溯的部^i刺七學(xué)及波i^^。必領(lǐng)說(shuō)明，本發(fā)明的^M列翻^i兌明本發(fā)明麻^t本發(fā)明的限制。tl^本發(fā)明的實(shí)頗本發(fā)明進(jìn)行繊^W屬于本發(fā)明要求傲戶的范圍。娜!ll:化織H(2-[2，3-二氫-3-(4-N,N-二戰(zhàn)魏甲酰甲it^3-甲難^S)-2-羥甲H，4-苯并Z^A環(huán)"6-]-7_(4-N，N-二乙基甲酰甲"3-甲^S,-3，5，一二l^"4H-l一苯荊砂t"4-,TOi恪OHO2.2克化糊I-a(水飛薊賓)溶解于15新N,N-二甲基甲醐安中，力隊(duì)l^，0.15克碘化鉀，微半下力OA0.67克N,N-二Z^氯乙醐安，于室翻覺(jué)ffil夜，^Z劍至iJA30W"冰水中，析出黃包冗淀，用乙酸乙酉^^又，合取te用慨喰S;鵬，形K鵬肝燥，過(guò)濾，繊，得黃色固體經(jīng)腺附顆廣鄉(xiāng)末1.2克，收率60%。Rf(氯仿:甲醇=50:1)=0.1;'H腿(400MHz，氖4仁甲:1.02(t，J二7.0Hz，3H，鵬，1.06(t，J二7.0Hz，3H，鵬，1.17(t，J=7.0Hz，3H，CH3)，1.224(t，J=7.0Hz，3H，CH3)，3.32(q，J=7.0Hz，2H，NCH2),3.37&J二7.0Hz，2H，鵬，3.42(q，J二7.0Hz，2H，咖，3.44(q,J=7.0Hz，2H，NCH2)，3.53(叫1H,H~9'a)，3.79(r^1H,H~9'b)，3.88(s，3H，0CH3)，4.251H，H-8'),4.95(s,2H，0CH2C0)，4.96(s，2H，0CH2C0)，5.02(d，J二8.0Hz，1H，H-7')，6.34(s，1H，闊，6.73(s，1H,H-8),6.8^7.946H，Ai^H)，12.61(s，1H，5K)H);ESH707[M+l]+。豐離^l例i相同6ti^法第i搭f中^l例2-7戶;f^化，<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>各化合物理化數(shù)據(jù)化合吻I-2(2-[2，3-二氫-3-(4-P[:賂藤甲酰甲,3-甲^^-2-羥甲基-1，4-苯并:i^A環(huán)"6-]-7-(4-吡咯縫甲酰甲緣3-甲縫苯基)-3,5,-二P膝4H-1-苯荊ttPfr4-,:Rf(氯仿:甲醇二50:1)=0.10;'H證(400MHz，氖4仁甲亞卿1.53(叫12H，CH2)，3.46(叫9H，NCH2，9'a)，3.75fe1H，H~9'b),3.86(s'3H，0CH3)，4.20(i^1H'H-8')，4.93(s，2H，0CH2C0)，4.95(s，2H，0CH2C0)，5.00(d，J二8.0Hz，1H,H-7')，6.30(s，J=2.0Hz'1H,H~6)，6.32(d，J=2.0Hz，1H，H-8)，6.86-7.13(n;6H，Ar"H)，12.05(s,1H，5"0H);ESI-MS703[M+l]+。化溯1-3(2-[2，3-二氫-3-(4-N-荊鍾甲酰甲緣3-甲雜織-2-羥甲基-1，4-苯并:^A環(huán)""6-]-7-(4-N-菊錢甲酰甲,3-甲^^S)-3，5，-二，鑒4H-1-苯荊砂i"4-釃Rf(氯仿:甲醇=50:1)=0.10;'H腿(400MHz，氘4仁甲3ep):1.53(n;12H，CH2)，3.40fe1H,9'a)，3.46(t，8H，NCH2)，3.56(n;1H，H~9'b)，3.86(s，3H，0CH3)，4.20(n;1H,8')，4.93(s'2H，0CH2C0),4.95(s，2H'0CH2C0)，5.00(d，J=8.0Hz，1H'H-7'),6.30(s，J二2,0Hz，1H，H"6)，6.32(d'J二2.0Hz,1H,H-8),6.86-7.1316H,Ar^H)，12.05(s，1H，5~OH);ESI~MS747[M+l]+。化激I-4(2-[2,3-二氫-3-(4-N-Xm^錢甲酰甲■3-甲^S*S)-2_羥甲H4-苯并zmA環(huán)"6-]-7-(4-N-X^m苯胺基甲酰甲ft^3-甲M苯基)-3，5,-二夢(mèng)發(fā)4H-1-苯荊比喃-4-,:Rf(氯仿甲醇=50:1)=0.13;'H證(400MHz,気4仁甲):3.401H，9'a),3.58(a1H，H"9'b)，3.78(s，3H，0CH3)，4.26(rr^1H,8'),4.67(s，2H,0CH2C0)，4.85(s，2H，0CH2G0)，5.01(d，J二8,0Hz，1H,H—7')，6.50(s，J二2.0Hz，1H，H~6)，7.02(d，J二2,0Hz,1H,H-8)，6.80"7.77(m，14H,Ai^H)，12.05(s,1H,5~Oi);ESI~MS815[M+l]+?；衔?-5(2-[2，3-二氫-3-(4-N-對(duì)甲錢苯胺基甲酰甲ftS-3-甲苯基)-2-羥甲奢l，4-苯并Z^A環(huán)+]-7-(4廿對(duì)甲ftS荊鎮(zhèn)甲酰甲驗(yàn)3-甲^^雜_3，5,-二蘿銀4H-l-苯荊砂fr4-醐Rf(氯仿:甲醇=50:1)=0.16;'H證(400MHz，気4仁甲3W):3.40(叫1H，9'a)，3.59(n^1H，F(xiàn)P9'b)，3.75(s，6H，0CH3)，3.77(s，6H，0CH3),4.27"1H，H-8')，4.62(s，2H，0CH2C0)，4.80(s，2H,0CH2C0)，4.95(d,J二8.0Hz，1H,H-7')，6.51(s，J=2.0Hz，1H，H~6),7.02(d'J=2.0Hz,1H,H-8)，6.86-7.13(n;14H，Arfl)，12.38(s'1H，5~0H);ESI~MS809[M+l]+?；衔荋(2-[2，3-二氫-3-(4-N-對(duì)甲基菊鍾甲酰甲,3-甲氧基-2-羥甲蒼l,4-苯并I^A環(huán)"6-]-7-(4-N-對(duì)甲基莉錢甲酰甲敏3-甲^苯基)-3,5，-二蘿^4H-l-苯并妣喃-4-,Rf(氯仿甲醇=50:1)=0.13;'H賺(400MHz，氖4仁甲3EP):2.27(s，6H，CH3)，3.40fe1H,H"9'a),3.59fe1H，H~9'b)，3.78(s，3H，0CH3)，4.28fe1H,H-8')，4.65(s，2H，0CH2C0)，4.83(s，2H，0CH2C0)，4.96(d，J二8.0Hz,1H'H-7')，6.52(s,J=2.0Hz,1H，H~6)，7.03(d，J二2.0Hz，1H，H-8),6.86-7.13fe14H'Arfl)，12.40(s，1H，5~0H);ESI^MS775[M+l]+?；衔?-7:(2-[2，3-二氫-3-(4-N-2,4-二氯苯胺基甲酰甲,3-甲苯基)-2-羥甲蒼l，4-苯并^A環(huán)"6-]-二氫-7-(4-N-2,4-二fM鍾甲酰甲氧基-3-甲氧基苯基)-3，5，-二羥基-4H-1-苯并吡喃-4-酮)Rf(氯仿甲醇=50:1)=0.21;1H薩(400MHz,氖4仁甲亞,3.40(m,1H,Fh9'a)，3.60(m，1H，H"9'b),3.79(s，3H，0CH3)，4.29(n;1H,H-8')，4.75(s，2H，0CH2C0)，4.95(s，2H,謂C0)，4.97(d，J=8.0Hz,1H,H-7')，6.53(d，J=2.0Hz，1H，H~6)，7.03(d，J=2.0Hz,1H，H-8)，6.86-7.13(it;12H,Ai^H)，12.36(s，1H,5~0H);ESH885[M+l]+。^'J8:化鋤1-8([2-[2，3-二氫-3-(4-瑰甲酰甲驗(yàn)3-甲^^越-2-羥甲ll，4-苯并^ftA環(huán)^-]-2，3-二氫-7_(4-乙氧甲酰甲~3-甲錢苯基-3，5，-二P鑒4H-1-苯荊Wfr4-翻)離恪OH0木離敘包例i相同ati^法，用原1職乙酸乙酉默替N,N-二z^氯乙醐安，^穀l]f七溯I-8:Rf(氯仿:乙酸乙酯:甲,25:1:0.25)=0.10;'H腿(400MHz,彌仁甲鵬1.23(t,J二7.2Hz,3H,鵬，1.31(t，J二7.2Hz，3H，鵬，3.58一1H，9'a)，3.86fe1H，H^9'b)，4.13(m，1H,H-8')，4.20(q，J=7.2Hz，2H，CH2CH3)，4.28(q，J二7.2Hz,2H，CH2CH3)，4.28(m,1H，H-8'),4.67(s，2H'Hl，4.82(s，2H，0CH2C0),5.99(d,J=8.0Hz，1H,0CH2C0)，6.35(s'1H，H-6)，6.41(s，1H，H-8)，6.96-8.01(n;6H，Ai^H)，12.50(s，1H，5~0H);ESI~MS653[M+l]+。式I化^^有多禾,的生性，本發(fā)明將it系歹i批^^t過(guò)氧ttaE大i!Lf源f^F細(xì)鵬員傷體外tMi4行了肝細(xì)鵬員倒^^活掛離，i^f七溯繊鵬有傲戶肝細(xì)鵬nf娜干細(xì)胞修復(fù)的作用;本發(fā)明觀繊七^(guò)^自由翻鵬亍了觀賦，發(fā)王jTOr有體外清^W月離子自由基、清除v^M識(shí)苯肼自由基、，聯(lián)咱由基誘導(dǎo):tl敏割^bt的活性，以上活性表明i^f七合物可以風(fēng)期用^U備予鄖M治療急性優(yōu)性肝損傷^^以及由氧自由基弓IM與氧自由^t關(guān)的期tl^aM^^的,;i^f七^(guò)艦彭見(jiàn)出很強(qiáng)的X^t自由基弓胞的pci2細(xì)鵬員傷作用，即)(#對(duì)訓(xùn)新瞎魏胞的rci2細(xì)^m^俗員傲斜a乍用，而且在同一^tr，紫鄯余自由謝斜戶細(xì)胞的能力比附f敘寸照槲皮素更為^m，說(shuō)明i^s^7jc飛薊賓^i^i行生頓寸傲戶臓轉(zhuǎn)S)m化、防治老年醜呆蹄只極作用。本發(fā)明的式I化^^鵬用繊|鵬可以與藥學(xué)上常用,斗;體^，帝J^穀懼剤斜戶肝細(xì)胞急性和優(yōu)附員傷甜4A人]fiM以用Tf鄖方以及治療肝U^的li^且^Kt^il品。J^^^且^MtMI品可以翻激劑、片劑、繊IJ、氣翻、栓劑、翻、滴細(xì)、夕閱翻、軟膏劑輸Mm本發(fā)明的式I化^^]^用l^皿ijtt^j以與現(xiàn)ej;:市的肝臟f^^戶湖干病治^ti^敏口聯(lián)^x通旨、水飛薊素、水飛薊賓葡甲胺、布|、二氯乙酸二異丙月安、原卟啉鈉(protopo卬hyrindisodium)、馬洛替酯(raalotilate)、熊去韌MW^娜，鵬穀懼有傲戶肝臟活性的組她研鵬朋于治療急優(yōu)醜毒斷炎、慢斷炎、##朋邗對(duì)七、月旨肪肝及中毒糊干損傷^口赫纖品。i^^W&^^維品可lMffi糊劑、片齊U、！^PJ、氣，iJ、檢劑、月MU、滴Mi，USM^，^SM!J見(jiàn)已公認(rèn)的藥齊lj^t識(shí)徵鵬恪而得的各彬邀畢、，^^型避,嚌IJ。本發(fā)明的式l化^tl^]l5用aS^fM措勿可以與現(xiàn)eJ:市附亢自由^f七齊lJW鵬割^/樹機(jī)(SOD)^^糊，帶J^穀懼郁方御自由基弓跑附員害活性e^mi^i^且^wt傲建品，用于治療超氧陰離子自由基或期鵬自由基引^^自由基異常相關(guān)的期ti^理^^M舌縦、自身頓^i、月檷、心鵬她、心卿醇、鼓、變態(tài)鵬、動(dòng)脈離衝七敏病。i^^!W且^tKt纖品可l^糊劑、片劑、月働J、氣翻、栓劑、月餅j、滴M,Mim艦?zāi)纫?jiàn)已公認(rèn)的歸麟識(shí)獄鵬恪而得的各禾嚼畢、賺劑鵬,厠。本發(fā)明的式I化^t^鵬用艦^fiJfW3SST以與現(xiàn)eJ:市離早老1^1^及^^1哋可林、多劍鬼齊、船也哥明、力攔他敏、黃頗劃安、石粉咸甲^^f頓，帝J^穀懼郁方御自由基引起附員害、傲戶臓瞎5活性的臓^t^^t傲建品，用于防治群'醜呆癥以及欺眹的智力障石嫉病?！繼^且^^繊品可以翻齒糊、片劑、it^吸柳占片莉直翻、伊働j、氣翻、栓劑、翻、滴細(xì)、夕卜用翻、軟膏齊翻^im包括OT現(xiàn)已公認(rèn)的藥劑^m只常規(guī)制備而得的各種緩釋、控釋劑型游內(nèi)^u劑。艱是由機(jī)體細(xì),生和清除自由基之間的失調(diào)所弓胞的，可誘發(fā)多禾嫉病。tt!OT^I超轉(zhuǎn)S^^,如中風(fēng)，巾繊疏，阿爾^^満。另夕卜它還跟其它鵬at^Si徑有關(guān)，如心鵬、自身嫩fe^、月幗、病毒fe^(如AIDS、肝炎)。因此幫錄加Wim化齊lM^治療由ftJl弓跑的各禾嚇的^^燧徑。本發(fā)明用體外清除陰離^S氧化自由基的活性逸驗(yàn)；體外清除:i^^m苯肼自由基(1，卜diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH)的活性i力驗(yàn)；測(cè)定化激對(duì)雙敦JC肌戶膽PC12(大鼠腎上Pf^細(xì)贓)細(xì)鵬員傷附尉戶作用；化娜卬制自由基誘導(dǎo):tlia氧化物^W等逸險(xiǎn)i兌明本發(fā)明權(quán)利要求中化^勿的i/im化活性。為了更好膨翻鉢發(fā)明的實(shí)質(zhì)和本發(fā)明戶;M化^tt藥物開^i:的應(yīng)用前景，預(yù)以歸里勢(shì)敏'折M^別用本發(fā)明中制搭出的化^(寸過(guò)氧ttaa大鼠乳鼠原徹干細(xì)鵬員傷體外t難的肝細(xì)胞損傷傲戶活性、體外清除超氧陰離子自由基繊dpph自由繊性、撇咱由基誘導(dǎo)卿敏莉^性以湖由雙勤k肌戶撤pci2(大鼠腎上pf^細(xì)贓)細(xì)鵬員傷附尉;^乍用的離實(shí)i^g果，說(shuō)明^s制i^頁(yè)域中的新用途。離刻奄例給出了4餓性化^的部分活臓據(jù)。必領(lǐng)說(shuō)明，本發(fā)明的l5S^i列朋;f翻的藥效對(duì)M^fi兌明本發(fā)明而不^x^:發(fā)明的限制。t^g本發(fā)明的實(shí)^i"本發(fā)明謝亍繊^a，以及在本發(fā)明勢(shì)包例所涵蓋的病因凝rh的簡(jiǎn)易r^的期tii3t^癥都屬于本發(fā)明要刺斜戶的范圍。離娜列l(wèi):化鑭I-1體外瀞纖陰離子自由基的活性微化嫩-itffi^^陰離子自由基會(huì)幼,則7m頓鵬-N甲^應(yīng)(phenazinemethosulfate-NADH)^^充，用四P^M^(nitrobluetetrazolium)還原效M^。用3S^有78iiM的NADH、5(M四f^E^和10yM甲^&在pFHI^8.0的16nMTris-HC1緩沖液中產(chǎn)生出超氧陰離子自由基，在不同鵬的化溯H繊腳生。超氧陰離子自由凝曬^5的彥翻^^t計(jì)在560nm波長(zhǎng)下監(jiān)測(cè)，槲艘鵬乍陽(yáng)'斷照繊。i鵬果M二。表~樣品泖誠(chéng)被(yg/ni)對(duì)超氧陰離子自由繊余率化溯H4029.48%槲錢4063.24%i繊果表明，化溯I-1具有一定的超氧陰離子自由難除作用，腿在同一^r,紫鄯餘娜有槲據(jù)高。結(jié)論i繊衞ja薊賓觀劇^i屬于具有一窓,氧陰離子自由基育幼^m雄質(zhì)。藥理實(shí)施例2:化合物1-2體外清除二苯基苦基苯肼自由基(1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)的活性i力驗(yàn)DPPH的甲ll^磁517nm有強(qiáng)吸收值，Kl財(cái)j^im化斗艦原時(shí)，吸收值下降，吸^i低，其iJ^化作用趨雖。在250yLg體系中含有25"L盼^^J40pg/ni斷七激1-2，DPPH(0.4mg/mL)的甲酉^#液40uL及甲l^^液185uL，37。C水浴鵬30分鐘后，在517nm奶則定吸光度。DPPH的甲,財(cái)目同濃度的槲分另^乍為陰性、陽(yáng)f^t照。i^^吉果MH。転_樣品觀頓皴(卩g/mL)對(duì)超氧"j^子自由鶴除率化，1-24044.18%槲錢_^_87.42%_i^^果表明，化激I-2具有一定的DPPH自由鶴除作用，fS^在同一難除育幼沒(méi)有槲歸高。結(jié)論鄉(xiāng)衞K飛薊賓觀徵七激屬于具有一定清除DPPH自由基斷fiwim働質(zhì)。艦?zāi)攘?:化，I-l對(duì)賺JC肌臓PC12細(xì)鵬員傷,排用活性i微肌^^種主要盼活性自由基Wttr體，它剛起中敏瞎S^ffl胞的Mt:，PC12細(xì)胞(大鼠腎上Hf^細(xì)鵬)可樹,申纟魏胞，因此常用它刺乍為石欣^轉(zhuǎn)魏1^間^^附難，用mr測(cè)細(xì)胞的存活率，如菊糊他^W清除由肌引起的自由基ffif對(duì)辨瞎魏胞的作用，0Df歸，細(xì)胞存活率就高，fet就低。對(duì)/§#]#屑隨^"法(XiaoqiuXiao等，NeurosciLett.1999，275:73-76)力似gfcffi則定化激飾斜戶作用。PC12細(xì)鵬■Ji^掛歸，培養(yǎng)基中含10%胎牛血清，100U/mL青霉穀口100U/mL||§素。細(xì)胞以每孔6000個(gè)的密戯倒96孑版中，在37。C，50P/oCa激lS氣的i^^l中i:薪36小時(shí)。細(xì)胞存活率用使ffiMI敫傲B鵬n改良的,法。細(xì)鵬圣36小時(shí)的孵育后，分另叻瞎廂己附七溯i-i的二甲3Mt液以^S梯戯nAJl船L中。作用2小時(shí)后力DAfi己的恥2(終IM^500umol/L)作用3小時(shí)，屈辦獻(xiàn)J)^i碌，棄去原:fe^i，力DAf附^^100uL,然后力nA臘10uL，3小時(shí)后，小匸吸去培鎌，力PA150卩LDMS0溶解甲臜，于570nm姐鎩；用槲^^作陽(yáng)ttXt照，試麟果賺四。表四<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>逸麟果表明,化溯I-1具有很強(qiáng)的X^il逮自由基弓起的PC12細(xì)鵬員傷作用，即贈(zèng)對(duì)湖新糊胞的PC12細(xì)鵬織俗員臓?wèi)糇饔谩６以谕籢TF，紫鄯余自由謝斜戶細(xì)胞的能力比P日ti^照槲^^高。結(jié)論i^K水飛薊賓觀駒七激屬于具有翻辦對(duì)鵬轉(zhuǎn)魏胞的PC12細(xì)胞作用鵬割機(jī)質(zhì)。測(cè)定化^M肌戶傲PC12細(xì)鵬員傷的傲戶作用可作為初^fi寸其傲戶中鵬瞎魏鵬作用鵬故微七^(guò)t^見(jiàn)出對(duì)賺Jc損傷臓PC12細(xì)酺傲M乍用，說(shuō)明^1^^^:證的治^1R極作用。艦?zāi)然?化錄1-2鄉(xiāng)ij自由基誘導(dǎo);tl敏割機(jī)頓的活性i微1.實(shí)^lf應(yīng)月旨J^m化是自由超乍用于多不t魅胡旨IM的，，^4與自由基的ME相關(guān)，由于機(jī)^^mft化的酶系i輛每系飾斜戶作用，使自由基不斷產(chǎn)4X不斷被蕭余。隨^妳脹，體內(nèi)附j(luò)m化齊杯斷下降，清除自由翻育幼邀斬繊l，脂Mil氧化作用卯贈(zèng)強(qiáng)，月旨Mil氧ttJ^曾多。因此，測(cè)定樣品棚繊氧化作用，是fti^S化，i^繊^W斷之一。2.化嫩-2卿咱由基誘導(dǎo):tl敏氧似teOTi31勵(lì)干微粒腳J:(i)冊(cè)敫粒體的偉恪實(shí)驗(yàn)大鼠斷頭處死，aai取出肝臟，用^i^'i:祛審恪肝微粒體。(2)樣蹄動(dòng)刊EMft化國(guó),在含F(xiàn)eSft(4ymol/L)與會(huì)鵬CVc(50umol/L)的1^f^沖液中力隊(duì)200ug/ni微粒舯，以誘導(dǎo)產(chǎn)勉M:氧化，同日幼nA不l^t的i-2樣品，力隊(duì)iS^Hid讖中ihSi^力隊(duì)1.5^f^代巴比魏100。C沸7jC浴20^4中，離C、，在532nm波長(zhǎng)下測(cè)定<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>i5^果表明，化糊1-2具有很強(qiáng),ij自由基誘導(dǎo)a敏氧俗勿械g九即x糊M"ifim俗員制斜戶作用。而且在同一^T，M^fflWim俗員傷旨幼比陽(yáng)傲寸照槲i^S雖。結(jié)論i^^M;Ja薊賓^i^i^,屬于具招雖謝斜戶細(xì)機(jī)風(fēng)提示欺有織化、1^^以及預(yù)鵬衞旗艦鼓^i的作用。離敘綱5:化激I-8對(duì)SD新生大f鵬干細(xì)鵬働損傷觀白嫩刊乍用i微取SD大fv新生乳翩干臟，審i鵬干細(xì)Mr液，離心3次，以ig^fS懸，即麗賴汰部分為肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞^^夜。將適干細(xì)胞懸働隊(duì)96孔(每孔0.1毫升):t^t反中，置5%Cai^f腫，在37。C下;t薪12小時(shí)后，吸棄上清，加入0.6imDl/L的lia。作用1小時(shí)后，分別力0A高、中、低3種不度的1-8樣品i^!5液，同時(shí)設(shè)凝訴鵬^^照i且。i"g^^束后，吸棄上清，,干細(xì)胞樣品，570nm波長(zhǎng)下用辦示儀i"m:傲戶率，結(jié)果JK^。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>i鵬果表明化條-8具有一定的傲戶SD新生大f源概細(xì)鵬魏敦Jc損傷的育幼，艮附SD新狄Ui徹干細(xì)i^i)m俗員銜斜刊乍用。但在同一7，M^Mim俗員銜對(duì)戶能力比附^t照槲^M氏；結(jié)論i^W水飛薊賓觀離激屬于具輸娜戶新狄,概細(xì)Wim俗員働質(zhì)。提示^c新WF護(hù)肝以及風(fēng)期用^恪柳M治療急性慢幽干損傷^i的作用。權(quán)利要求1.一種式I所示的脫氫水飛薊賓雙酯類衍生物及其可藥用鹽或其溶劑化物。式I其中，n＝1-5；X為氮或氧，R1、R2為氫、烷基、環(huán)烷基、取代或未取代的芳基，式I中的7′，8′的立體構(gòu)型分別是或同時(shí)是R構(gòu)型或S構(gòu)型。2.職權(quán)禾腰求1的式I化鋤，他們是化激I-l:2-[2，3-二氫-3-(4,，N-二Z^錢甲酰甲維3-甲雜雜-2-羥甲H，4-苯并:i^A環(huán)^-]-7-(4-N，N-二乙勘錢甲酰甲旨3-甲氧基苯基-3，5，-二夢(mèng)膝4H-l-苯荊砂i"4-酮；化激1-2:2-[2,3_二氫-3-(4-Pt略藤甲酰甲,3-甲^-2-羥甲基-1,4-苯并Z^^環(huán)"6-]-7-(4-吡咯麟甲酰甲緣3-甲^S^)-3，5，-二羥糾-1-苯荊險(xiǎn)4-酮；化鋤I-3:2-[2，3-二氫-3-(4-N-^^甲酰甲敏3-甲織雜-2-羥甲基-l，4-苯并:^A環(huán)"6-]-7-(4-N-菊鎮(zhèn)甲酰甲敏3-甲^繊-3，5，-二羥Hl-苯荊險(xiǎn)4-鵬化，_4:2-[2，3-二氫-3-(4-N-X^^甲酰甲驗(yàn)3-甲雜糊-2-羥甲基-1，4-苯并二氧六環(huán)~6-]-7-(4-1^對(duì)氯苯胺基甲酰甲氧基-3-甲氧基苯敏-3,5,-二夢(mèng)^"4H-l-苯荊砂i"4-酮；化合物1-5:2-[2，3-二氫-3-(4-N-對(duì)甲苯胺基甲酰甲旨3-甲M苯基)-2-羥甲|1，4-苯并I^A環(huán)+]+(4廿對(duì)甲^S荊錢甲酰甲緣3-甲^^^)一3，5,_二夢(mèng)"朋一1一苯荊砂14一酮；化合吻P6:2—[2，3-二氫-3-(4-N—對(duì)甲基菊鍾甲酰甲,3—甲氧基趣一2-羥甲l，4-苯并:^A環(huán)"6-]-7-(4-N-對(duì)甲基菊安基甲酰甲旨3,氧基苯基-3,5,-二,^"4H-l-苯荊ttPfr4-酮；化合物1-7:2-[2，3-二氫-3-(4-N-2，4-二氯苯胺基甲酰甲氧^"3-甲氧基苯敏-2-羥甲H，4-苯并Z^A環(huán)"6-]-二氫-7-(4-R"2，4-二m^^甲酰甲氧好甲織雜-3，5，-二緣4H-1-苯荊,4-酮；化合物1-8:2-[2，3-二氫-3-(4-乙氧甲酰甲ft^3-甲氧基苯基)-2-羥甲基-1，4-苯并Z^環(huán)^-]-7-(4-乙氧甲酰甲3-甲fl^苯基)-3，5，-二夢(mèng)淺普1-苯荊險(xiǎn)4-酮；3.權(quán)禾腰求1中式1化^#恪方法，頓刮每式I-a和式I-b纟鄉(xiāng)眺《驟J<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中n，R,，H,X的定義^t又禾IJ^求l中的式I;X,為卣素，船《1^^，Mft化鉀，MM化鈉；MiS歸偽四割劉南，N，N-二甲基甲二甲1，SMj^暫M5蹄荒，自寸間為0.5-20小時(shí)；I-a中2，3位和7'，8'的立鵬型分別題同時(shí)是R構(gòu)鵬S構(gòu)型。4.鵬又禾鵬12mtl衞K飛薊娜激I化^艦糊性，其特點(diǎn)鉍舌對(duì)過(guò)氧ttSIl大鼠乳鼠劇tff細(xì)鵬員傷體外fMM示出的肝細(xì)鵬員傷傲W乍用、體外陰離子自由基清除^:^^^荊井自由基、卿咱由基誘導(dǎo)a隨雄頓的作用以賊I化^#亢自由基弓胞的PC12細(xì)鵬員傷作用i^熟新轉(zhuǎn)^fflW]pci2細(xì)EM示出em^tt^劍劃默作用。5.職權(quán)禾鵬i2戶;Ma&K飛薊賓觀激I化溯用恪挪繊療急性漫l^^劍^^、^fF護(hù)肝^tl的用途;用1]治由自由基引起敬目^14^^^紘自身嫩(Wi、月檷、心um、心胍醇、就、麟破、動(dòng)脈,靴^i!W^用途；販微七彌用銜默鵬峰、防治群1^癥的繊用途。6.繊權(quán)禾麟5的用鵬銜穀,鵬戶臓、防離^,、治療心血管鵬血管;^imifeS^繊、和/綱11且她7.—種用刊恪離自由基、據(jù)化、微肝細(xì)鵬員傷及急慢鵬飾、傲戶腦彬魏鵬員傷的繊且鋤，其含有作為活^^的治柳爐,鵬i2戶mt化，l或它們自七^(guò)^^用4^MW^:們的混，口鵬用辦斗。8.鵬權(quán)禾腰求57的^纖，刺以新劑、繊IJ、激劑、輸U(kuò)、栓劑、翻、滴細(xì)、貼片劑、皮下植翻、夕卜用翻、口服劑，M^OTJ見(jiàn)代審,界所么^n^^^^^iM^鵬臍iJ。全文摘要本發(fā)明涉及一種具有抗自由基氧化、保肝護(hù)肝、防治老年性癡呆癥、抗衰老活性的脫氫水飛薊賓雙酯類衍生物及其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明還涉及制備式I化合物的方法及其藥物組合物和醫(yī)藥用途。本發(fā)明的化合物對(duì)大鼠肝細(xì)胞損傷體外模型具有保護(hù)肝細(xì)胞的作用，可以預(yù)期作為防止肝臟損傷類藥物用途；本發(fā)明的化合物具有體外清除超氧陰離子自由基和二苯基苦基苯肼自由基、抑制自由基誘導(dǎo)之脂過(guò)氧化物生成等生物活性，該類化合物還表現(xiàn)出很強(qiáng)的對(duì)抗自由基引起的PC12細(xì)胞損傷作用，因此可以預(yù)期成為防治由自由基引起的各種疾病之藥物。文檔編號(hào)A61K31/357GK101104616SQ20061009901公開日2008年1月16日申請(qǐng)日期2006年7月14日優(yōu)先權(quán)日2006年7月14日發(fā)明者馮玉冰,峰汪,驊白,昱趙,龔景旭申請(qǐng)人:浙江大學(xué)