桑椹α-糖苷酶抑制活性提取物及其組合物的醫(yī)藥用途和制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種桑椹α -糖苷酶抑制活性提取物及其組合 物的制備方法以及它在降血糖、減肥、降血脂、治療糖尿病等方面的醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 桑椹Fructus Mori是桑科桑屬多年生木本植物桑樹的果實(shí)橢圓形長1 一3厘米表 面不平滑。未成熟時為綠色逐漸成長變?yōu)榘咨⒓t色成熟后為紫紅色或紫黑色味酸甜。《本 草新編》有"紫者為第一紅者次之青則不可用"的記載。
[0003] 桑椹中含有多種功能性成分如蘆丁、花青素、白黎蘆醇等具有良好的防癌、抗衰 老、抗?jié)儭⒖共《镜茸饔?。桑椹具有生津止渴、促進(jìn)消化、幫助排便等作用，適量食用能促 進(jìn)胃液分泌，刺激腸蠕動及解除燥熱。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為，桑椹性味甘寒，具有補(bǔ)肝益腎、生津潤 腸、烏發(fā)明目等功效。
[0004] 本發(fā)明通過大規(guī)模、系統(tǒng)地活性篩選，意外地發(fā)現(xiàn)維吾爾藥桑椹提取物及其部分 化學(xué)組分，具有顯著地α -糖苷酶抑制活性，該活性提取物及其組合物有望應(yīng)用于降血糖、 減肥、降血脂、糖尿病等方面。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種桑椹提取物。
[0006] 本發(fā)明還提供了以桑椹提取物為主要活性成分的組合物。
[0007] 本發(fā)明同時提供了桑椹提取物及其組合物的制備和應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 維吾爾藥桑椹經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅膠柱， 用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑梯度洗脫(石油醚-乙酸乙酯，比例見表1)，各石油醚-乙酸 乙酯比例混合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外篩選體系測試其α-糖苷酶抑制活性， 意外地發(fā)現(xiàn)先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100: 5,體積比)洗脫，繼用 石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:8,體積比)洗脫得到的石油醚-乙酸乙 酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，1〇〇: 8,體積比）洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為α -糖 苷酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脫部位，沒有α-糖苷酶抑制活性的作用。特別地， 優(yōu)選為先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，1〇〇: 5,體積比)洗脫10倍柱體 積，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:8,體積比)洗脫20倍柱體積， 洗脫液干燥后即為本發(fā)明α-糖苷酶抑制活性的提取物。α-糖苷酶抑制活性的提取物可 以通過以上方法得到富集，從而與其他雜質(zhì)類成分分離開。該桑椹α-糖苷酶抑制活性提 取物從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其薄層譜色譜（TLC)分析表征如圖1，TLC分析條件：GF254硅膠板， 展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0009] 維吾爾藥桑椹經(jīng)水超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅膠 柱，用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑梯度洗脫(石油醚-乙酸乙酯，比例見表1 )，各石油醚-乙 酸乙酯比例混合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外篩選體系測試其α -糖苷酶抑制活 性，意外地發(fā)現(xiàn)先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:10,體積比）洗 脫，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比）洗脫得到的石油 醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比)洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥， 即為α-糖苷酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脫部位，沒有α-糖苷酶抑制活性的作 用。以上條件最優(yōu)為先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:10,體積比） 洗脫10倍柱體積，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比)洗 脫20倍柱體積，洗脫液干燥后即為本發(fā)明α-糖苷酶抑制活性的提取物。α-糖苷酶抑制 活性的提取物可以通過以上方法得到富集，從而與其他雜質(zhì)類成分分離開。該桑椹α-糖 苷酶抑制活性提取物從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其薄層譜色譜（TLC)分析表征如圖2，TLC分析條件： GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1: 1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0010] 具體，發(fā)現(xiàn)過程如下： 1、桑椹經(jīng)水超聲提取物的制備 取維吾爾藥桑椹20 g，經(jīng)100 mL水超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0149B，樣品0. 1918 g，留樣0. 0099g，上樣量0. 1819g，拌樣硅膠0. 5 g，空白硅膠5 g，石 油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)洗脫。
[0011] 2、石油醚-乙酸乙酯混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果 取維吾爾藥桑椹20 g，經(jīng)100 mL甲醇超聲提取15 min，提取液濃縮后，得提取物 SN0149B，0. 1918 g，上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅膠柱色譜，拌樣硅膠0. 5 g，空 白硅膠5 g，玻璃柱內(nèi)徑1.5 cm，石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)梯度洗脫(條件見表1)，柱體積11 mL，每個梯度洗脫lOOmL，得到，各個濃度提取洗脫液的洗脫物，回收溶劑，即得，石油醚：乙 酸乙酯梯度洗脫提取物，TLC分析結(jié)果見圖3,圖4, TLC分析條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)： 石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1)，石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1)，顯色方法：香草醛-硫 酸顯色。
[0012] 表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種桑椹提取物，其特征為桑椹經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離， 上樣后的硅膠柱，先用體積比為100:5的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，繼用體積比為 100:8的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，用體積比為100:8的石油醚-乙酸乙酯混合溶 劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該提取物；或先用體積比為100:10石油醚-乙酸乙 酯混合溶劑洗脫，繼用體積比為100:14的石油醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫，用100:14石油 醚-乙酸乙酯混合溶劑洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該提取物。
2. 如權(quán)利要求1所述桑椹提取物，其特征為，提取所用溶劑可以為甲醇、石油醚、水、丙 酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，最優(yōu)條件為甲醇或95%乙醇。
3. 如權(quán)利要求1所述桑椹提取物，其特征為桑椹經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮后，用硅 膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:5,體 積比）洗脫，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:8,體積比）洗脫，，用 石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:8,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī) 溶劑，干燥，即為該提取物；或先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:10， 體積比）洗脫，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比）洗脫， 用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比)洗脫的洗脫液經(jīng)回收有 機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。
4. 如權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的一種維吾爾藥桑椹提取物，其特征為，用于洗脫的 石油醚-乙酸乙酯混合溶劑的洗脫體積為2-50倍柱體積。
5. 如權(quán)利要求1所述提取物的制備方法，其特征為：桑椹經(jīng)溶劑超聲提取，提取液濃縮 后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯， 100:5,體積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯， 100:8,體積比）洗脫2-50倍柱體積，用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯， 100:8,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物；以上條件最優(yōu)為先用 石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:5,體積比）洗脫10倍柱體積，繼用石 油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:8,體積比）洗脫20倍柱體積；或先用石 油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:10,體積比)洗脫2-50倍柱體積，繼用石 油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比）洗脫2-50倍柱體積，用石 油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙酯，100:14,體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收有機(jī) 溶劑，干燥，即為該提取物；以上條件最優(yōu)為先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸 乙酯，100:10,體積比)洗脫10倍柱體積，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑(石油醚-乙酸乙 酯，100:14,體積比）洗脫20倍柱體積。
6. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的維吾爾藥桑椹提 取物和藥學(xué)上可接受的載體。
7. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的桑椹提取物或權(quán)利 要求6所述的藥物組合物。
8. 如權(quán)利要求7所述的藥物制劑，其特征在于，所述的制劑為固體分散體、環(huán)糊精包合 物、分散片。
9. 如權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述提取物或權(quán)利要求6所述的組合物或權(quán)利要求7所述 的藥物制劑在制備葡萄糖苷酶抑制活性藥物中的應(yīng)用。
10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的α-葡萄糖苷酶抑制活性，可用于降 血糖、減肥、降血脂、治療糖尿病等方面的醫(yī)藥用途。
11. 如權(quán)利要求1-5任何一項(xiàng)所述的桑椹提取物，其特征在于，用TLC法檢測，其色譜 條件為=GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：石油醚：乙酸乙酯：丙酮=6:1:1，石油醚：乙酸乙酯：丙酮 =，1:1:1，顯色方法：香草醛濃硫酸顯色。
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種桑椹α-糖苷酶抑制活性提取物及其組合物的制備方法以及它在降血糖、減肥、降血脂、治療糖尿病等方面的醫(yī)藥用途。所述的提取物通過如下方法獲得：先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:5，體積比）洗脫，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:8，體積比）洗脫，用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:8，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該α-糖苷酶抑制活性提取物，或先用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:10，體積比）洗脫，繼用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:14，體積比）洗脫，用石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（石油醚-乙酸乙酯，100:14，體積比）洗脫的洗脫液經(jīng)回收溶劑，干燥，即為該α-糖苷酶抑制活性提取物。
【IPC分類】A61P3-10, A61K36-605, A61P3-06, A61P3-04
【公開號】CN104644752
【申請?zhí)枴緾N201510058736
【發(fā)明人】王金輝, 熱娜·卡斯木, 李國玉, 黃健, 張瑾, 胡君萍, 曹苑, 張珂, 毛曉峰, 竇雪
【申請人】新疆醫(yī)科大學(xué)
【公開日】2015年5月27日
【申請日】2015年2月4日