專利名稱：用于分子成象和治療的靶向造影劑或靶向治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及靶向造影劑和靶向治療劑及其制備方法和用途。
在醫(yī)學(xué)診斷中具有極其重要作用的已知成象技術(shù)是正電子發(fā)射斷層掃描(PET)、計(jì)算機(jī)斷層攝影(CT)、磁共振成象(MRI)、單光子計(jì)算機(jī)斷層攝影(SPECT)和超聲(US)。盡管當(dāng)今的成象技術(shù)已被很好地開發(fā)，但是它們大多依賴于將正常組織和病理組織相區(qū)別的非特異的、肉眼可見的、物理的、生理的或代謝的改變。
靶向分子成象(MI)有可能在醫(yī)療診斷中達(dá)到新的高度。術(shù)語“靶向”涉及在體外或體內(nèi)天然或合成的配體(結(jié)合劑)與感興趣的分子(分子靶)選擇性和高特異性結(jié)合。
MI是快速興起的生物醫(yī)學(xué)研究學(xué)科，其可被定義為在完整的活生物體內(nèi)在細(xì)胞和亞細(xì)胞水平生物過程的可視呈現(xiàn)、特征描述以及定量。這是一個(gè)新的多學(xué)科領(lǐng)域，其中所產(chǎn)生的圖象反映在生理真實(shí)環(huán)境下所表現(xiàn)出的疾病的細(xì)胞和分子途徑以及體內(nèi)機(jī)制，但是它們不確定作為疾病原因的分子事件。
目前已知一些不同的造影增強(qiáng)劑，它們的非特異或非靶向形式已用于臨床常規(guī)中。以下提及的一些實(shí)例已在文獻(xiàn)中報(bào)道。
例如，根據(jù)W.Krause的“Contrast Agents I”(Springer Verlag2002，第1頁和后續(xù)頁)，Gd復(fù)合物可用作MRI的造影劑。此外，超順磁顆粒是造影增強(qiáng)劑的另一實(shí)例，其也可用作MRI的造影劑(Textbook of Contrast Media，Superparamagnetic Oxides，Dawson，Cosgrove and Grainger Isis Medical Media Ltd，1999，第373頁及后續(xù)頁)。如在W.Krause的“Contrast Agents II”(Springer Verlag 2002，第73頁及后續(xù)頁)所述，可以以類似的方式將充氣的微泡用作超聲造影劑。此外，W.Krause的“Contrast Agents II”(Springer Verlag，2002，第151頁及后續(xù)頁)報(bào)道了碘化脂質(zhì)體或脂肪酸作為X-射線成象造影劑的用途。
可用于功能成象的造影增強(qiáng)劑主要開發(fā)用于PET和SPECT。
這些造影劑的一個(gè)實(shí)例是18F-標(biāo)記的分子如脫氧葡萄糖(Beuthien-Baumann B等，(2000)，Carbohydr.Res.，327，107)。這些標(biāo)記分子作為PET造影劑的用途在W.Krause的“Contrast Agents II”(Springer Verlag，2002，第201頁及后續(xù)頁)中已描述。然而，它們僅在腫瘤組織中累積而沒有任何在先的特異性細(xì)胞相互作用。此外，99Tc-標(biāo)記的分子如抗體或肽可用作SPECT的靶向造影劑(VerbruggenA.M.，Nosco D.L.，Van Nerom CG.等，99mTc-L，L-ethylene dicysteinearenal imaging agent，Nucl.Med.1992，33，551-557)，但是這些復(fù)雜分子的標(biāo)記非常困難且費(fèi)用昂貴。
關(guān)于一些其它已存在的用于PET/SPECT的配體，可以說情況相同，所述配體例如L-DOPA(多巴胺受休，帕金森氏癥)(Luxen A.，Guillaume M，Melega WP，Pike VW，Solin O，Wagner R，(1992)Int.J.Rad.Appl.Instrum.B 19，149)；5-羥色胺類似物(5-羥色胺受體)(Dyck CH等，2000，J.Nucl.Med.，41，234)；促生長(zhǎng)素抑制素類似物(促生長(zhǎng)素抑制素，腫瘤學(xué))(Maecke，H.R.等，Eur.J.Nucl.Med.Mol.Imaging，2004，Mar.17)，整聯(lián)蛋白受體的肽(血管發(fā)生)(Wicklinde，S.A.等，Cancer Res.，2003Sep.15，63(18)，5838-43；Wicklinde，S.A.等，Circulation 2003Nov.4，108，(18)，2270-4)。
此外，Cu-催化的咪唑和芳基硼酸的反應(yīng)(例如Collman，Zhong，Organic Letters，2000，vol.2，no.9，1233-1236)也有報(bào)道。
然而，對(duì)作為疾病原因的特異性分子事件的確定在醫(yī)學(xué)中變得越來越重要。因此，具備分子識(shí)別機(jī)制以在體內(nèi)或體外在某些組織中特異性富集造影增強(qiáng)材料并能夠洞悉分子病理的靶向劑在診斷以及進(jìn)一步的治療中是必不可少的。
因此，本發(fā)明的目的是提供允許高靈敏度和特異性的早期診斷以及鑒別診斷的新一代的改進(jìn)的造影劑，以及提供更便宜且省時(shí)的制備所述改進(jìn)的造影劑的方法。在該方面，這對(duì)于提供制備方法和由此制備的靶向劑也將是有益的，其可容易地適于那些必需在短時(shí)間內(nèi)且以低成本和人力解決的實(shí)際發(fā)生的問題。除了它們用于成象診斷的可能，靶向造影劑在新治療劑的開發(fā)中也將具有重要的作用。這樣的靶向造影劑目前還不可獲得。
通過以下描述的發(fā)明內(nèi)容以及在權(quán)利要求和實(shí)施例中進(jìn)一步定義的內(nèi)容，本發(fā)明的目的被有利地解決。優(yōu)選地，非限制性變體在附圖中描述并用于解釋本發(fā)明。
本發(fā)明涉及靶向造影劑或治療劑的制備方法，所述方法包括以下步驟a)提供核心；b)任選地向所述核心加殼；c)通過連接至少一分子的結(jié)合單元對(duì)所述核心或所述殼進(jìn)行修飾；和d)通過使用適當(dāng)?shù)拇呋瘎⒅辽僖粋€(gè)配體與修飾的核心或修飾的殼連接，所述配體具有至少一個(gè)咪唑官能團(tuán)。
在所述方法的其它實(shí)施方案中，在步驟b)中，向所述核心加多于一個(gè)殼。換言之，通過一個(gè)至若干個(gè)內(nèi)殼將外殼與核心分開。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，可通過1至100個(gè)內(nèi)殼，更優(yōu)選通過1至50個(gè)內(nèi)殼將所述核心與外殼分開。所述殼或多個(gè)殼可具有單層或多層。這些殼(在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中其可含有單層或多層適當(dāng)?shù)牟牧?中的每一個(gè)的厚度為約0.5nm至100nm。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，各殼的厚度為約0.5nm至50nm。另外，各殼或甚至若干個(gè)殼可具有相同的材料或不同的材料。
在本發(fā)明的另一變體中，所述殼或多個(gè)殼可以至少部分地覆蓋所述核心。當(dāng)例如將有機(jī)聚合物(例如聚乙二醇/PEG、聚乙烯醇/PVA、聚酰胺、聚丙烯酸酯、聚脲)、具有官能端基的有機(jī)聚合物(例如1，2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽)、生物聚合物(例如多糖如葡聚糖、木聚糖、糖原、果膠、纖維素，或者多肽如膠原、球蛋白)、半胱氨酸或半胱氨酸含量高的肽或磷脂用作殼或多個(gè)殼時(shí)，這是優(yōu)選的例子。在本發(fā)明中，向所述核心加殼的步驟是指完全包圍所述核心、僅覆蓋一些獨(dú)特的區(qū)域，并且優(yōu)選這些情況之間的所有范圍。
對(duì)本發(fā)明的制備靶向造影劑或靶向治療劑的方法的有利變體在所附的權(quán)利要求中被定義。
具體地，本發(fā)明提供一些特定的有利變體，如下所述“核心”適于用作本發(fā)明的靶向造影劑的造影增強(qiáng)部分和/或治療部分的材料。因?yàn)橛米鬟B接單元的多肽的特定結(jié)構(gòu)，所以所述核心與配體之間具有共價(jià)鍵和離子鍵。
“殼或多個(gè)殼”能夠使靶向造影劑具有好的分散性，能夠降低其毒性或能夠防止副作用的材料，其取決于用作殼的材料。如果納米微粒被用作所述核心，使用適當(dāng)?shù)臍?例如ZnS殼)可以降低納米微粒的表面缺陷的數(shù)量。這些缺陷相當(dāng)大地降低了由納米微粒所產(chǎn)生的對(duì)比。因此，缺陷的數(shù)量的減少產(chǎn)生更好的靶向造影增強(qiáng)劑。
在本發(fā)明中，“核心”和“修飾的核心”可作為同義詞使用，“修飾的核心”是由至少一個(gè)連接的結(jié)合單元修飾的核心。
在本發(fā)明中，“殼或多個(gè)殼”和“修飾的殼或多個(gè)殼”可作為同義詞使用，“修飾的殼”是由至少一個(gè)連接的結(jié)合單元修飾的殼。
在本發(fā)明中，“結(jié)合單元”理解為至少一分子的芳基硼酸、超價(jià)(hypervalent)芳基硅氧烷或碘苯。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，殼、修飾的殼和修飾的核心的組合是結(jié)合單元(例如由PEG殼部分覆蓋的修飾的核心、由PEG殼部分覆蓋以及由與芳基硼酸連接的羧酸修飾的殼部分覆蓋的核心)。
在本發(fā)明中，“配體”的表述可用作結(jié)合劑或優(yōu)選地用作生物學(xué)活性配體的同義詞。
在本發(fā)明中，“適當(dāng)?shù)拇呋瘎笔抢鏑u系催化劑。所述催化劑使得優(yōu)選在溫和的條件下通過共價(jià)地將具有至少一個(gè)組氨酸單元(例如聚-HIS標(biāo)簽)的配體與同核心或加于核心的殼或多個(gè)殼連接的芳基硼酸、超價(jià)芳基硅氧烷或碘苯連接來合成靶向造影劑。
“溫和條件”理解為指本領(lǐng)域公知的條件，在該條件下所述配體將分別保持其活性和特異性，所述條件例如為在水溶液或血液或血清樣溶液、生理pH值和室溫下。
本發(fā)明還涉及靶向造影劑和靶向治療劑及其用途。
所述靶向造影劑具有以下特征，其作為非限制性實(shí)例描述本發(fā)明。
取決于造影增強(qiáng)材料，所述靶向造影劑可以應(yīng)用于不同的成象方法例如MRI、US、SPECT、CT、PET、光學(xué)成象或多模態(tài)方法(multimodalit approach)如PET/CT中。
所述靶向造影劑含有造影增強(qiáng)核心(例如磁納米微粒)或治療核心，其可以被一個(gè)或多個(gè)殼所覆蓋以改善穩(wěn)定性和/或生物相容性和/或降低體內(nèi)毒性(例如PEG殼)。
如果將納米微粒用作所述核心，那么這些微粒的大小可以從約1nm至200nm變化。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，所述微粒的大小可從1nm至100nm變化。
如果將聚合物用作殼，那么這些聚合物的分子量可從200g/mol至200000g/mol變化。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，這些聚合物的分子量可從200g/mol至100000g/mol變化。
所述靶向造影劑含有靶向配體。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述靶向造影劑或靶向治療劑含有與配體連接的修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼。
所述靶向造影劑含有能夠在體內(nèi)或體外特異性地識(shí)別靶分子的配體。
本發(fā)明的其中通過硼酸、超價(jià)芳基硅氧烷或碘苯與組氨酸的催化反應(yīng)而將所述修飾的核心或所述修飾的殼或多個(gè)殼與配體(結(jié)合劑)共價(jià)地鍵合的靶向造影劑的合成的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是通過該反應(yīng)形成的鍵特別穩(wěn)定，甚至在體內(nèi)也特別穩(wěn)定。因此，配體和修飾的核心在體內(nèi)保持連接，避免了不期望區(qū)域(例如組織)的對(duì)比。
所述的在修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼與配體之間的鍵可以在于水介質(zhì)中的溫和反應(yīng)條件下產(chǎn)生，所述水介質(zhì)允許配體保持其完全的生物學(xué)活性。這是可能的，因?yàn)榭梢栽谑覝叵略谒型ㄟ^銅催化劑催化該反應(yīng)，并且因?yàn)樾揎椀暮诵幕蛐揎椀臍せ蚨鄠€(gè)殼和所得的靶向造影劑是水或血液或而清溶性的。這些溫和的反應(yīng)條件使得所述配體不變性。
修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼與配體的“連接”可以通過使用合成地與所述配體連接的聚組氨酸標(biāo)簽(“HIS標(biāo)簽”一段6個(gè)組氨酸氨基酸序列)來實(shí)現(xiàn)。生物分子如肽、蛋白、酶和抗體通常常規(guī)地與組氨酸標(biāo)簽一起合成，所述組氨酸標(biāo)簽通過例如親和層析幫助純化這些生物分子。本發(fā)明可以使用這些聚組氨酸標(biāo)簽將至少一個(gè)配體與所述修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼連接。因此，不需要對(duì)所述配體加額外的標(biāo)簽。配體的合成因而得以簡(jiǎn)化。此外，在所述配體合成之后，不必在另外的純化步驟中將在合成后連接于所述配體的組氨酸標(biāo)簽消化或切掉。
可以位點(diǎn)特異性地，例如在HIS標(biāo)簽位點(diǎn)進(jìn)行修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼與所述配體的“連接”。因此，所述配體的識(shí)別中心將保持其活性。因?yàn)榭梢砸允芸睾瓦x擇性的方式將聚組氨酸標(biāo)簽固定在配體上的任意位置(例如選擇性地在氨基酸序列的任意給定氨基酸上，作為配體)，所以所述配體保持其活性，從而避免了配體的失活并由此也避免了修飾的核心或修飾的殼或多個(gè)殼與配體中不期望的位點(diǎn)的連接。
也可將所述方法轉(zhuǎn)變?yōu)榘邢蛑委焺?。本發(fā)明中所述的方法具有適用于任何配體和任何核心的可能，因?yàn)闇睾偷姆磻?yīng)條件，提供了非常多樣化且易于適用的用于制備任何類型的靶向造影劑或靶向治療劑的系統(tǒng)。


圖1中示意了本發(fā)明的靶向造影劑的最優(yōu)選的變體。
附圖簡(jiǎn)述圖1-核心(1)例如(但不限于)造影增強(qiáng)材料；或治療材料，用于-MRI例如(但不限于)鐵、反鐵、亞鐵磁或超順磁材料，例如鐵(Fe)、氧化鐵γ-Fe2O3或Fe3O4或具有尖晶石結(jié)構(gòu)MFe2O4(M＝Mn、Co、Ni、Cu、Zn、Cd)的鐵氧體或具有石榴石結(jié)構(gòu)M3Fe5O12(M＝Y(jié)、La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu)的鐵氧體或具有磁鉛石結(jié)構(gòu)MFe12O19(M＝Ca、Sr、Ba、Zn)的鐵氧體或其它六角晶系鐵氧體結(jié)構(gòu)如Ba2M2Fe12O22(M＝Mn、Fe、Co、Ni、Zn、Mg)；在所有情況中所述核心都可以摻雜額外0.01至5.00mol％的Mn、Co、Ni、Cu、Zn或F；-順磁離子(例如鑭系元素、錳、鐵、銅)系造影增強(qiáng)單元，例如釓螯合物如Gd(DTPA)、Gd(BMA-DTPA)、Gd(DOTA)、Gd(DO3A)；寡聚結(jié)構(gòu)；大分子結(jié)構(gòu)，例如白蛋白Gd(DTPA)20-35、葡聚糖Gd(DTPA)、Gd(DTPA)-24-級(jí)聯(lián)聚合物、聚賴氨酸-Gd(DTPA)、MPEG聚賴氨酸-Gd(DTPA)；樹枝狀結(jié)構(gòu)的鑭系元素系造影增強(qiáng)單元；錳系造影增強(qiáng)單元，例如Mn(DPDP)、Mn(EDTA-MEA)、聚-Mn(EED-EEA)和聚合物結(jié)構(gòu)；作為順磁離子載體的脂質(zhì)體，例如脂質(zhì)體Gd(DTPA)；非質(zhì)子顯象劑；-發(fā)光的(optical)例如(但不限于)發(fā)光材料，例如納米無機(jī)發(fā)光材料(例如摻雜YPO4或LaPO4的稀土)或半導(dǎo)體納米晶體(稱作量子點(diǎn)；例如CdS、CdSe、ZnS/CdSe、ZnS/CdS)；碳菁染料；四吡咯系染料(卟啉、二氫卟酚、酞菁及相關(guān)結(jié)構(gòu))；δ-氨基乙酰丙酸；熒光鑭系元素螯合物；熒光素或5-氨基熒光素或異硫氰酸熒光素(FITC)或其它熒光素相關(guān)的熒光體(fluorophor)如Oregon Green、萘并熒光素(naphthofluorescein)；-US例如(但不限于)殼(例如蛋白、脂質(zhì)、表面活性劑或聚合物)包封氣體(例如空氣、全氟丙烷、十二氟碳(dodecafluorocarbon)、六氟化硫、全氟化碳)泡(例如來自Amersham的Optison，來自Schering的Levovist)；殼(例如蛋白、脂質(zhì)、表面活性劑或聚合物)包封微滴；納米微粒(例如鉑、金、鉭)；-X-射線例如(但不限于)碘化造影增強(qiáng)單元，例如2，4，6-三碘苯的離子和非離子衍生物；硫酸鋇系造影增強(qiáng)單元；金屬離子螯合物，例如釓系化合物；具有高比例碘的硼簇；聚合物，例如碘化多糖，聚三碘苯(polymeric triiodobenzene)；來自具有低水溶性的碘化化合物的顆粒；含有碘化化合物的脂質(zhì)體；碘化脂質(zhì)(iodinated lipid)如甘油三酯、脂肪酸；-PET例如(但不限于)11C、13N、15O、66/8Ga、60Cu、52Fe、55Co、61/2/4Cu、62/3Zn、70/1/4As、75/6Br、82Rb、86Y、89Zr、110In、120/4I、122Xe和18F系示蹤物，例如18F-FDG(葡萄糖代謝)；11C-甲硫氨酸、11C-酪氨酸、18F-FMT、18F-FMT或18F-FET(氨基酸)；18F-FMISO、64Cu-ATSM(低氧)；18F-FLT、11C-胸苷、18F-FMAU(增殖)；-SPECT例如(但不限于)基于放射性核素(radionucleotide)如99mTc、123/5/131I、67Cu、67Ga、111In、201Tl的造影增強(qiáng)單元；-治療材料例如(但不限于)毒素、放射性同位素和化療劑；發(fā)射UV-C的納米微粒，例如YPO4:Pr；光動(dòng)力學(xué)治療(PDT)劑，例如基于擴(kuò)展(expanded)卟啉結(jié)構(gòu)的化合物；用于放療的核素，例如157Sm、177Lu、212/3Bi、186/8Re、67Cu、90Y、131I、114mIn、At、Ra、Ho；-智能(Smart)造影增強(qiáng)單元，例如(但不限于)化學(xué)交換飽和遷移(chemical exchange saturation transfer，CEST)；熱敏MRI造影劑(例如脂質(zhì)體)；pH敏感的MRI造影劑；氧壓或酶反應(yīng)性MRI造影劑；金屬離子濃度依賴性MRI造影劑；-多模態(tài)以上的組合-殼或多個(gè)殼(2)例如(但不限于)可包括羧酸、?；u、胺、酸酐、活性酯、馬來酰亞胺、異硫氰酸酯、金、SiO2、聚磷酸鹽(例如聚磷酸鈣)、氨基酸(例如半胱氨酸)、有機(jī)聚合物(例如聚乙二醇/PEG、聚乙烯醇/PVA、聚酰胺、聚丙烯酸酯、聚脲)、有機(jī)官能聚合物(例如1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽)、生物聚合物(例如多糖如葡聚糖、木聚糖、糖原、果膠、纖維素，或者多肽如膠原、球蛋白)、半胱氨酸或半胱氨酸含量高的肽或磷脂。
-向核心加一個(gè)至若干個(gè)殼，優(yōu)選為1至100個(gè)殼(2)，更優(yōu)選為1至50個(gè)內(nèi)殼。這些殼(在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中其可具有單層或多層適當(dāng)?shù)牟牧?中的每一個(gè)的厚度為約0.5nm至100nm。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，各殼的厚度為約0.5nm至500nm且可由不同的材料或相同的材料制成。此外，所述殼能夠至少部分地覆蓋所述核心。
-結(jié)合單元或多個(gè)結(jié)合單元(3)例如(但不限于)芳基硼酸、含有芳基硼酸官能團(tuán)的殼，所述芳基硼酸官能團(tuán)介導(dǎo)與生物配體(例如抗體或抗體片段、肽、小分子)的組氨酸單元(例如聚-HIS標(biāo)簽)共價(jià)偶聯(lián)；例如(但不限于)超價(jià)芳基硅氧烷、含有超價(jià)芳基硅氧烷的殼，所述超價(jià)芳基硅氧烷介導(dǎo)與生物配體(例如抗體或抗體片段、肽、小分子)的組氨酸單元(例如聚-HIS標(biāo)簽)共價(jià)偶聯(lián)例如(但不限于)碘苯、含有碘苯的殼或至少一個(gè)與殼鍵合的碘苯，所述碘苯介導(dǎo)與生物配體(例如抗體或抗體片段、肽、小分子)的組氨酸單元(例如聚-HIS標(biāo)簽)共價(jià)偶聯(lián)。
此外，還可以加入其它生物分子例如蛋白(如HIV標(biāo)簽肽等)以使完整的裝配通過例如細(xì)胞膜，增加生物相容性或降低毒性。
-配體(4)-例如(但不限于)配體，所述配體經(jīng)其特異性識(shí)別機(jī)制(例如通過抗原抗體反應(yīng))在感興趣的不同組織或靶區(qū)誘導(dǎo)造影劑的富集-例如(但不限于)連接有聚-HIS標(biāo)簽的配體-靶向單元可以是-例如(但不限于)抗體(單克隆、多克隆、鼠、鼠-人嵌合、人、單鏈、雙功能抗體(diabody)等)，例如曲司佐單抗(乳癌)、利妥西單抗(非何杰金淋巴瘤)、阿米佐單抗(慢性淋巴細(xì)胞性白血病)；吉姆佐單抗(急性髓性白血病(acute myelogene leukemia))；依決洛單抗(結(jié)腸癌)；替依莫單抗(非何杰金淋巴瘤)；塞托西單抗(結(jié)腸癌)；托西莫單抗(非何杰金淋巴瘤)；依哌佐單抗(非何杰金淋巴瘤)；貝伐佐單抗(肺癌和結(jié)腸癌)；抗-CD33(急性髓性白血病)；Pemtumomab(卵巢癌和胃癌)；米托莫單抗(Mittumomab)(肺癌和皮膚癌)；抗-MUC1(腺癌)；抗-CEA(腺癌)；抗-CD64(斑(plaque))等。
-例如(但不限于)肽、多肽、肽模擬物，例如促生長(zhǎng)素抑制素類似物、血管活性肽類似物、神經(jīng)肽Y、RGD肽等。
-例如(但不限于)蛋白，例如Annexin V、組織纖溶酶原激活物蛋白、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等。
-例如(但不限于)大分子，例如透明質(zhì)酸(hyaluronan)、apcitide、硫酸皮膚素-例如(但不限于)核酸，例如apatamers、反義DNA/RNA/PNA，小干擾RNAs等。
-例如(但不限于)脂質(zhì)，例如磷脂等。
-例如(但不限于)凝集素，例如白細(xì)胞刺激凝集素-例如(但不限于)糖類-催化劑-例如(但不限于)催化芳基硼酸官能團(tuán)與咪唑官能團(tuán)反應(yīng)并使具有反應(yīng)窗，在該反應(yīng)窗中生物配體在偶聯(lián)反應(yīng)中不被破壞(例如水溶液，pH＝7，室溫)，例如[Cu(OH)TMEDA]2Cl2；(TMEDA＝四甲基乙二胺)，參見例如Collman，Zhong，Zeng，Costanza，J.Org.Chem.，2001，66，1528-1531。
-例如(但不限于)催化超價(jià)芳基硅氧烷與咪唑官能團(tuán)反應(yīng)并使具有反應(yīng)窗，在該反應(yīng)窗中生物配體在偶聯(lián)反應(yīng)中不被破壞，例如Cu(AcO)2，參見例如Lam，Deudon，Averill，Li，He，DeShong，Clark，J.Am.Chem.Soc，2000，122，7600-7601。
-例如(但不限于)催化碘苯與咪唑官能團(tuán)反應(yīng)，例如[Cu(OH)TMEDA]2Cl2，參見例如Lam，Deudon，Averill，Li，He，DeShong，Clark，J.Am.Chem.Soc，2000，122，7600-7601。
-靶向造影劑或治療劑(5)-例如(但不限于)由造影增強(qiáng)或治療核心、具有不同官能團(tuán)的殼、偶聯(lián)單元(苯基咪唑)和特異性靶向配體組成。
圖2用苯基硼酸對(duì)造影增強(qiáng)單元(COOH包覆的CdSe/ZnS量子點(diǎn))進(jìn)行表面修飾的反應(yīng)路線，通過羧酸的一鍋法反應(yīng)，將1-乙基-3(二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸(EDC)與核心連接，形成o-?；愲?o-acylisourea)中間體(室溫，pH≈5)。該中間體與N-羥基硫代琥珀酰亞胺(sulfo-NHS)反應(yīng)，得到N-羥基硫代琥珀酰亞胺酯中間體。通過加入2-巰基乙醇終止過量的EDC反應(yīng)。最后，與3-氨基苯基硼酸反應(yīng)，得到所期望的酰胺鍵(r.t.，pH≈7)。
圖3根據(jù)Collmann等(J.Org.Chem.，2001，66，1528-1531)進(jìn)行的對(duì)甲苯硼酸與咪唑的偶聯(lián)反應(yīng)路線。
圖4咪唑、對(duì)甲苯硼酸和偶聯(lián)產(chǎn)物的吸光度作為250-500nm入射輻射波長(zhǎng)(納米)的函數(shù)進(jìn)行測(cè)定(以任意單元)。所觀察到的兩種起始產(chǎn)物(咪唑和對(duì)甲苯硼酸)的UV/可見光譜與反應(yīng)之后所得的偶聯(lián)產(chǎn)物的光譜的差異證明在所期望的條件下發(fā)生了偶聯(lián)。
圖5氯仿、咪唑、對(duì)甲苯硼酸以及偶聯(lián)產(chǎn)物的透射作為0cm-1-4000cm-1和1000cm-1-1500cm-1入射輻射波數(shù)(cm-1)的函數(shù)進(jìn)行測(cè)定(以任意單元)。所觀察到的溶劑(氯仿)、兩種起始產(chǎn)物(咪唑和對(duì)甲苯硼酸)的FTIR光譜與反應(yīng)之后所得的偶聯(lián)產(chǎn)物的光譜的差異證明在所期望的條件下發(fā)生了偶聯(lián)。
圖6通過氣相色譜分離1-(4-甲苯基)咪唑(由偶聯(lián)反應(yīng)獲得)之后，通過質(zhì)譜對(duì)咪唑、對(duì)甲苯硼酸和偶聯(lián)產(chǎn)物所記錄的信號(hào)強(qiáng)度作為質(zhì)量的函數(shù)(m/z單元)進(jìn)行測(cè)定(以任意單元)。對(duì)甲苯硼酸與咪唑在期望條件下偶聯(lián)獲得的1-(4-甲苯基)咪唑的GC/MS譜與波譜文庫(kù)中存在的1-(3-甲苯基)咪唑的GC/MS譜類似，證明獲得了所期望的偶聯(lián)產(chǎn)物。
圖7通過NMR對(duì)咪唑、對(duì)甲苯硼酸和偶聯(lián)產(chǎn)物的信號(hào)強(qiáng)度作為化學(xué)位移(ppm)的函數(shù)進(jìn)行測(cè)定。所觀察到的溶劑(氯仿)、兩種起始產(chǎn)物(咪唑和對(duì)甲苯硼酸)的NMR譜與反應(yīng)之后所得的偶聯(lián)產(chǎn)物的光譜的差異證明在期望的條件下發(fā)生了偶聯(lián)。
圖8對(duì)甲苯硼酸與(His)6-Ahx-FITC偶聯(lián)的反應(yīng)路線，在室溫下通過Cu(OH)TMEDA]2Cl2催化過夜，經(jīng)對(duì)甲苯硼酸與(His)6-Ahx-FITC標(biāo)簽的組氨酸單元反應(yīng)進(jìn)行。
圖9通過MALDI-TOF(基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間)質(zhì)譜對(duì)反應(yīng)后所得產(chǎn)物記錄的信號(hào)強(qiáng)度作為質(zhì)量的函數(shù)(m/z單元)進(jìn)行測(cè)定(以任意單元)。對(duì)甲苯硼酸與(His)6-Ahx-FITC偶聯(lián)反應(yīng)之后所得產(chǎn)物的MALDI-TOF譜證明了在期望的條件下發(fā)生了偶聯(lián)。相應(yīng)于所期望的偶聯(lián)產(chǎn)物(對(duì)甲苯基-His6-Ahx-FITC)的m/z＝1433處的峰證明了該產(chǎn)物的形成。
圖10苯硼酸對(duì)核心(18F-標(biāo)記分子)進(jìn)行修飾的反應(yīng)路線，通過羧酸的一鍋法反應(yīng)，將1-乙基-3(二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸(EDC)與造影增強(qiáng)單元連接，形成o-?；愲逯虚g體(r.t.，pH≈5)。該中間體與N-羥基硫代琥珀酰亞胺反應(yīng)，得到N-羥基硫代琥珀酰亞胺酯中間體。通過加入2-巰基乙醇終止過量的EDC反應(yīng)。最后，與3-氨基苯硼酸反應(yīng)，得到所期望的酰胺鍵(r.t.，pH≈7)。
實(shí)施例實(shí)施例1通過使用在一個(gè)末端具有羧酸官能團(tuán)并在另一個(gè)末端具有1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺官能團(tuán)的水溶性聚合物通過酸用羧酸官能團(tuán)對(duì)CdSe/ZnS量子點(diǎn)(核心)進(jìn)行表面修飾。
COOH-包覆的量子點(diǎn)通過將以下混合(在50℃下，4小時(shí))來獲得-100μl CdSe/ZnS(在氯仿中，1w/v％)-100μl氯仿-200μl DPPC(5mM)-DPPC＝1，2-二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿-200μl DSPE-PEG2000-COOH(5mM)-DSPE-PEG2000-COOH1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽，最后通過真空去除氯仿，并通過超聲處理來分散于水中的COOH-包覆的量子點(diǎn)。
通過1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺端基經(jīng)疏水相互作用(或吸附)，1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽與納米微粒的表面結(jié)合。此外，1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽還提供羧基官能團(tuán)，其在酸性pH下質(zhì)子化，獲得羧酸。
DPPC可用作假劑(dummy)(或間隔物(spacer))以在固定于納米微粒上的COOH官能團(tuán)之間留有間隔。實(shí)際上，僅通過COOH官能團(tuán)對(duì)整個(gè)納米微粒表面進(jìn)行覆蓋由于產(chǎn)生相互作用而可能具有不利的效果，因而在不期望的機(jī)體組織或不期望的機(jī)體區(qū)產(chǎn)生對(duì)比。
1)使用苯硼酸對(duì)殼進(jìn)行表面修飾可經(jīng)羧酸通過偶聯(lián)用硼酸官能團(tuán)對(duì)造影增強(qiáng)單元進(jìn)行表面修飾。
其它的實(shí)例可以是，例如通過活性酯、通過馬來酰亞胺或通過異硫氰酸酯進(jìn)行偶聯(lián)。
這通過對(duì)水溶性CdSe/ZnS量子點(diǎn)進(jìn)行修飾而實(shí)驗(yàn)地完成-55μl水-40μl 10x PBS溶液(PBS＝磷酸緩沖鹽水∶0.01M磷酸緩沖液，0.0027M氯化鉀，0.137M氯化鈉，pH7.4)-100μl 0.1M EDC溶液(EDC＝1-乙基-3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸)-5μl 20mM N-羥基硫代琥珀酰亞胺溶液(N-羥基硫代琥珀酸亞安鈉鹽)-200μl 2μM CdSe/ZnS(端COOH)溶液-室溫溫育(30min)-10μl 2-巰基乙醇-混合15分鐘-50μl 20mM 3-氨基苯丙酸溶液-室溫混合(2小時(shí))-通過離心分離QDs。
反應(yīng)路線，參見圖2。
1)對(duì)甲苯硼酸與咪唑的偶聯(lián)作為起始步驟，成功地重復(fù)了文獻(xiàn)中所述的甲苯硼酸與咪唑的反應(yīng)。根據(jù)Collmann等(J.Org.Chem.，2001，66，1528-1531)進(jìn)行進(jìn)行合成。
反應(yīng)路線，參見圖3。
2)對(duì)甲苯硼酸與(His)6-Ahx-FITC的偶聯(lián)可采用苯硼酸與咪唑的催化反應(yīng)用于進(jìn)行苯硼酸與具聚-HIS標(biāo)簽的肽的反應(yīng)，其可通過實(shí)驗(yàn)證明合成-19μl 100μM[Cu(OH)TMEDA]2Cl2溶液-38μl 1mM對(duì)甲苯硼酸溶液-31.9μl His6-Ahx-FITC(0.8mg/ml)(His6＝寡聚組氨酸；Ahx＝6-氨基己酸(6-amino hexacarbonic acid)；FITC＝異硫氰酸熒光素(IsomerIK)-1911.1μl水-在氧氣氛下溫育(室溫過夜)反應(yīng)路線，參見圖4。
實(shí)施例2通過硼酸修飾的18F-標(biāo)記的分子這通過實(shí)驗(yàn)完成-55μl水-40μl 10x PBS溶液(PBS＝磷酸緩沖鹽水∶0.01M磷酸緩沖液，0.0027M氯化鉀，0.137M氯化鈉，pH 7.4)-100μl 0.1M EDC溶液(EDC＝1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸)-5μl 20mM N-羥基硫代琥珀酰亞胺溶液(N-羥基硫代琥珀酰亞胺鈉鹽)-200μl 2μM F-18-L-DOPA溶液-室溫溫育(30分鐘)-10μl 2-巰基乙醇-混合15分鐘
-50μl 20mM m-氨基苯硼酸-室溫混合(2小時(shí))-通過離心去除副產(chǎn)物。
權(quán)利要求
1.靶向造影劑或治療劑的制備方法，所述方法包括以下步驟a)提供核心；b)任選地向所述核心加殼；c)通過連接至少一分子的結(jié)合單元對(duì)所述核心或所述殼進(jìn)行修飾；和d)通過使用適當(dāng)?shù)拇呋瘎⒅辽僖粋€(gè)配體與修飾的核心或修飾的殼連接，所述配體具有至少一個(gè)咪唑官能團(tuán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中在步驟b)中向所述核心加多于一個(gè)殼。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述殼或多個(gè)殼具有單層或多層。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之任一項(xiàng)的方法，其中各殼具有相同的材料或不同的材料。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之任一項(xiàng)的方法，其中所述殼或多個(gè)殼至少部分地覆蓋所述核心。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自鐵、反鐵、亞鐵磁或超順磁材料，例如鐵(Fe)、氧化鐵γ-Fe2O3或Fe3O4或具有尖晶石結(jié)構(gòu)MFe2O4(M＝Mn、Co、Ni、Cu、Zn、Cd)的鐵氧體或具有石榴石結(jié)構(gòu)M3Fe5O12(M＝Y(jié)、La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu)的鐵氧體或具有磁鉛石結(jié)構(gòu)MFe12O19(M＝Ca、Sr、Ba、Zn)的鐵氧體或其它六角晶系鐵氧體結(jié)構(gòu)如Ba2M2Fe12O22(M＝Mn、Fe、Co、Ni、Zn、Mg)；其中在所有情況中所述核心都可以摻雜額外0.01至5.00mol％的Mn、Co、Ni、Cu、Zn或F；順磁離子(例如鑭系元素、錳、鐵、銅)系造影增強(qiáng)單元，例如釓螯合物如Gd(DTPA)、Gd(BMA-DTPA)、Gd(DOTA)、Gd(DO3A)；寡聚結(jié)構(gòu)；大分子結(jié)構(gòu)，例如白蛋白Gd(DTPA)20-35、葡聚糖Gd(DTPA)、Gd(DTPA)-24-級(jí)聯(lián)聚合物、聚賴氨酸-Gd(DTPA)、MPEG聚賴氨酸-Gd(DTPA)；樹枝狀結(jié)構(gòu)的鑭系元素系造影增強(qiáng)單元；錳系造影增強(qiáng)單元，例如Mn(DPDP)、Mn(EDTA-MEA)、聚-Mn(EED-EEA)和聚合物結(jié)構(gòu)；作為順磁離子載體的脂質(zhì)體，例如脂質(zhì)體Gd(DTPA)；非質(zhì)子顯象劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自發(fā)光材料，例如納米無機(jī)發(fā)光材料(例如摻雜YPO4或LaPO4的稀土)或半導(dǎo)體納米晶體(稱作量子點(diǎn)；例如CdS、CdSe、ZnS/CdSe、ZnS/CdS)；碳菁染料；四吡咯系染料(卟啉、二氫卟酚、酞菁及相關(guān)結(jié)構(gòu))；δ-氨基乙酰丙酸；熒光鑭系元素螯合物；熒光素或5-氨基熒光素或異硫氰酸熒光素(FITC)或其它熒光素相關(guān)的熒光體如OregonGreen、萘并熒光素。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自包封氣體(例如空氣、全氟丙烷、十二氟碳、六氟化硫、全氟化碳)泡(例如來自Amersham的Optison、來自Schering的Levovist)；包封微滴；納米微粒(例如鉑、金、鉭)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自碘化造影增強(qiáng)單元，例如2，4，6-三碘苯的離子和非離子衍生物；硫酸鋇系造影增強(qiáng)單元；金屬離子螯合物，例如釓系化合物；具有高比例碘的硼簇；聚合物，例如碘化多糖、聚三碘苯；來自具有低水溶性的碘化化合物的顆粒；含有碘化化合物的脂質(zhì)體；碘化脂質(zhì)如甘油三酯、脂肪酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自11C、13N、15O、66/8Ga、60Cu、52Fe、55Co、61/2/4Cu、62/3Zn、70/1/4As、75/6Br、82Rb、86Y、89Zr、110In、120/4I、122Xe和18F系示蹤物，例如18F-FDG(葡萄糖代謝)；11C-甲硫氨酸、11C-酪氨酸、18F-FMT、18F-FMT或18F-FET(氨基酸)；18F-FMISO、64Cu-ATSM(低氧)；18F-FLT、11C-胸苷、18F-FMAU(增殖)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自基于放射性核素如99mTc、123/5/131I、67Cu、67Ga、111In、201Tl的造影增強(qiáng)單元。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自毒素、放射性同位素和化療劑；發(fā)射UV-C的納米微粒，例如YPO4:Pr；光動(dòng)力學(xué)治療(PDT)劑，例如基于擴(kuò)展卟啉結(jié)構(gòu)的化合物；用于放療的核素，例如157Sm、177Lu、212/3Bi、186/8Re、67Cu、90Y、131I、114mIn、At、Ra、Ho。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料選自化學(xué)交換飽和遷移(CEST)；熱敏MRI造影劑(例如脂質(zhì)體)；pH敏感的MRI造影劑；氧壓或酶反應(yīng)性MRI造影劑；金屬離子濃度依賴性MRI造影劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述核心的材料是兩種或多種材料的組合。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-14之任一項(xiàng)的方法，其中用作所述殼或多個(gè)殼的材料選自羧酸、?；u、胺、酸酐、活性酯、馬來酰亞胺、異硫氰酸酯、金、SiO2、脂質(zhì)、表面活性劑、聚磷酸鹽(例如聚磷酸鈣)、氨基酸(例如半胱氨酸)、有機(jī)聚合物(例如聚乙二醇/PEG、聚乙烯醇/PVA、聚酰胺、聚丙烯酸酯、聚脲)、具有官能端基的有機(jī)聚合物(例如1，2-二硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-[羧基(聚乙二醇)2000]銨鹽)、生物聚合物(例如多糖如葡聚糖、木聚糖、糖原、果膠、纖維素，或者多肽如膠原、球蛋白)、半胱氨酸或半胱氨酸含量高的肽或磷脂。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-15之任一項(xiàng)的方法，其中可將其它成分加入所述殼或多個(gè)殼中。
17.根據(jù)權(quán)利要求1-16之任一項(xiàng)的方法，其中所述結(jié)合單元是芳基硼酸、含有芳基硼酸官能團(tuán)的殼或至少一個(gè)鍵合于殼的、與配體的組氨酸單元共價(jià)偶聯(lián)的芳基硼酸。
18.根據(jù)權(quán)利要求1-16之任一項(xiàng)的方法，其中所述結(jié)合單元是超價(jià)芳基硅氧烷、含有超價(jià)芳基硅氧烷酸官能團(tuán)的殼或至少一個(gè)鍵合于殼的、與配體的組氨酸單元共價(jià)偶聯(lián)的超價(jià)芳基硅氧烷。
19.根據(jù)權(quán)利要求1-16之任一項(xiàng)的方法，其中所述結(jié)合單元是碘苯、含有碘苯官能團(tuán)的殼或至少一個(gè)鍵合于殼的、與配體的組氨酸單元共價(jià)偶聯(lián)的碘苯。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-17之任一項(xiàng)的方法，其中所述核心或所述殼或多個(gè)殼和至少一個(gè)配體通過芳基硼酸和組氨酸單元之間的共價(jià)偶聯(lián)相連接。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-16和18之任一項(xiàng)的方法，其中所述核心或所述殼或多個(gè)殼和至少一個(gè)配體通過超價(jià)芳基硅氧烷和組氨酸單元之間的共價(jià)偶聯(lián)相連接。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-16和19之任一項(xiàng)的方法，其中所述核心或所述殼或多個(gè)殼和至少一個(gè)配體通過碘苯和組氨酸單元之間的共價(jià)偶聯(lián)相連接。
23.根據(jù)權(quán)利要求1-22之任一項(xiàng)的方法，其中用作配體的材料選自抗體(單克隆、多克隆、鼠、鼠-人嵌合、人、單鏈、雙功能抗體等)，例如曲司佐單抗(乳癌)、利妥西單抗(非何杰金淋巴瘤)、阿米佐單抗(慢性淋巴細(xì)胞性白血病)；吉姆佐單抗(急性髓性白血病)；依決洛單抗(結(jié)腸癌)；替依莫單抗(非何杰金淋巴瘤)；塞托西單抗(結(jié)腸癌)；托西莫單抗(非何杰金淋巴瘤)；依哌佐單抗(非何杰金淋巴瘤)；貝伐佐單抗(肺癌和結(jié)腸癌)；抗-CD33(急性髓性白血病)；Pemtumomab(卵巢癌和胃癌)；米托莫單抗(肺癌和皮膚癌)；抗-MUC 1(腺癌)；抗-CEA(腺癌)；抗-CD64(斑)；肽、多肽、肽模擬物，例如促生長(zhǎng)素抑制素類似物、血管活性肽類似物、神經(jīng)肽Y、RGD肽；蛋白，例如Annexin V、組織纖溶酶原激活物蛋白、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白；大分子，例如透明質(zhì)酸、apcitide、硫酸皮膚素；核酸，例如apatamers、反義DNA/RNA/PNA、小干擾RNAs；脂質(zhì)，例如磷脂；凝集素，例如白細(xì)胞刺激凝集素以及糖類。
24.根據(jù)權(quán)利要求1-23之任一項(xiàng)的方法，其中用于連接至少一個(gè)配體與所述修飾的核心或所述修飾的殼的催化劑是[Cu(OH)TMEDA]2Cl2或Cu(AcO)2。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-17、19、20、22-24之任一項(xiàng)的方法，其中用于催化芳基硼酸官能團(tuán)或碘苯官能團(tuán)與咪唑官能團(tuán)反應(yīng)的催化劑是[Cu(OH)TMEDA]2Cl2。
26.根據(jù)權(quán)利要求1-16、18、21、23和24之任一項(xiàng)的方法，其中用于催化超價(jià)芳基硅氧烷和咪唑官能團(tuán)反應(yīng)的催化劑是Cu(AcO)2。
27.靶向造影劑，其包含核心、至少一個(gè)殼和至少一個(gè)配體。
28.靶向造影劑或靶向治療劑，其通過權(quán)利要求1-26之任一項(xiàng)的方法制備。
29.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑或靶向治療劑，其用于診斷或治療。
30.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑或靶向治療劑，其用于靶向分子成象。
31.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑，其用于CT、MRI、PET、SPECT或US。
32.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑或靶向治療劑用于制備適于診斷或治療的化合物的用途。
33.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑或靶向治療劑用于制備適于靶向分子成象的化合物的用途。
34.權(quán)利要求27和28的靶向造影劑用于制備適于CT、MRI、PET、SPECT或US的化合物的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了用于分子成象以及靶向診斷和治療的靶向造影劑的合成方法，本發(fā)明還公開了靶向造影劑和靶向治療劑及它們的用途。
文檔編號(hào)A61K51/00GK101080240SQ200580043039
公開日2007年11月28日 申請(qǐng)日期2005年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月17日
發(fā)明者H·胡梅爾, V·U·魏勒, R·霍夫曼 申請(qǐng)人:皇家飛利浦電子股份有限公司