專利名稱：改良的益生素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及益生素(prebiotics)，特別涉及用于促進營養(yǎng)平板上某些細菌的生長以及用于食品和飲料、飼料及衛(wèi)生保健和藥物學(xué)應(yīng)用中的改良的益生素。
根據(jù)Jones(2002)所述，功能性食品廣義定義為“提供多種營養(yǎng)素的食品；為消費者提供額外的生理學(xué)益處”。益生素是一類特殊的功能性食品，根據(jù)Jones(2002)所述，它們可以被定義為“一種不可吸收的食品成分，其通過選擇性刺激結(jié)腸中一種細菌或者有限數(shù)目的細菌的生長或者活性或者這兩者而對宿主產(chǎn)生有益影響，因此改善宿主的健康”。例子包括neosugars，菊糖，大豆水解產(chǎn)物，異麥芽寡糖(isomaltooligosaccharides)，半乳寡糖(galactooligosaccharides)，木寡糖(xylooligosaccharides)，乳果糖，棉子糖，山梨糖醇，木糖醇，palatinose和乳蔗糖。
益生菌在人體腸道中具有陽性和有益作用。益生菌例子是乳酸桿菌(Lactobacilli spp)和雙歧桿菌(Bifidobacteria spp)。更詳細的描述可見于最近的綜述(Loo et al，1999；Topping and Clifton，2001；Tomasik and Tomasik，2003)。益生素和益生菌食品可以被一起攝入以促進益生菌在腸道中的建群。
葡甘露聚糖是由許多植物產(chǎn)生的中性多糖，它們在植物中作為能量儲備，在一些情況中扮演結(jié)構(gòu)角色。在大多數(shù)情況中，所述多糖主要包含甘露糖殘基，并且以葡萄糖作為第二種糖。所述多糖含有一些乙酰化的殘基，并且可以含有一些半乳糖側(cè)鏈(Khanna，2003)。葡甘露聚糖的來源示于表1。
表1不同來源的葡甘露聚糖
從表1中顯然可以看出葡甘露聚糖可以從廣泛的不同植物來源中提取，其中分子量及甘露糖與葡萄糖的比率可以變化。
魔芋葡甘露聚糖是從魔芋(Amorphophallus konjac)植物(或者一群植物)中提取的一種多糖，該植物本身是天南星科(Araceae)屬的一個成員。魔芋球莖在亞洲作為食品已經(jīng)種植了幾個世紀，其提供了具有非常感興趣的物理特性的食品來源(Thomas，1997；Khanna，2003)。魔芋粉用作膠凝劑和增稠劑，是一種被批準的食品成分(Europe，E425)。魔芋球莖的主要多糖成分是葡甘露聚糖，當其水解時具有極高的膨脹特性。魔芋粉已經(jīng)在世界范圍內(nèi)用于口香糖中，但是最近由于有18個人由于窒息死亡而被禁用(例如歐洲)。魔芋粉的其它營養(yǎng)益處包括降低膽固醇，產(chǎn)生飽腹感而減輕體重，及降低便秘的危險(Khanna，2003)。除了食品用途之外，魔芋粉還用作成膜材料，藥物賦形劑，體療產(chǎn)品及用作層析基質(zhì)(Khanna，2003)。
魔芋粉的商業(yè)應(yīng)用需要不同純度，最高的葡甘露聚糖含量也伴隨著最高的成本。通常經(jīng)篩分程序和乙醇洗滌而不是經(jīng)酶(淀粉酶，蛋白酶和脂肪酶處理以除去非葡甘露聚糖成分)處理而進行純化(Khanna，2003)。
魔芋葡甘露聚糖是高分子量聚合物，其分子量典型超過1×106D(Khanna，2003)。所述糖排列為甘露糖與葡萄糖以β-(1-4)連接的模塊，在多糖中甘露糖與葡萄糖的比率典型為1.6∶1。這一線性結(jié)構(gòu)在大約每一第10個己糖單元的糖殘基的C3上有分支，在大約每第19個殘基有一酯化的乙酰基團(Khanna，2003)。
在人體中，一些多糖被定義為例如“淀粉樣(starchy)”、“可消化”或者“可利用”的，而另一些被定義為例如“難以消化的(indigestible)”、“不可消化的(non-digestible)”、“膳食纖維”或者“非淀粉樣”的。淀粉樣多糖如果是無定形結(jié)構(gòu)則可通過人小腸中的消化酶消化。如果淀粉樣聚合物是晶體結(jié)構(gòu)，則其可被運載到大腸中，在此被發(fā)酵，并被描述為“抗性淀粉”。非淀粉多糖在人體小腸中不能被消化，總是被運載到大腸中，在此被發(fā)酵。非淀粉多糖和抗性淀粉一起形成膳食纖維。這顯然是飲食的重要成分，因為其促進食物在腸道中運行，提供膨脹和飽腹感，并且提供在結(jié)腸中的發(fā)酵基質(zhì)。這種發(fā)酵釋放短鏈脂肪酸，其可被吸收進血液中，據(jù)報道它們對對抗腸癌具有有益作用。葡甘露聚糖多糖因此在人的大腸中發(fā)酵。關(guān)于多糖在腸道中發(fā)酵的更詳細的描述可見Topping and Clifton(2001)的綜述。
在本申請中，術(shù)語水解產(chǎn)物是指與親代多糖相比具有較低分子量的材料，包括但不限于寡糖和糖。
從多糖中產(chǎn)生水解產(chǎn)物可以通過例如酸或者酶水解而實現(xiàn)。對于甘露聚糖(包括葡甘露聚糖，特別是魔芋葡甘露聚糖)，也可以在適當條件下實現(xiàn)。酸水解趨于隨機而酶水解更針對特定的鍵。魔芋(及非魔芋)葡甘露聚糖可以被酸、甘露聚糖酶和纖維素酶水解(Kato andMatsuda，1969；Kato et al，1970；Shimahara，1975；Chiu et al，1991；Ohya et al.，1994；Behr，1998；Chiu et al，1998；Edashige and Ishii，1998；Kurakake and Komaki，2001；Cescutti et al，2002；Chiu et al，2002；Qi et al，2003)。因此，纖維素酶及其它酶在魔芋葡甘露聚糖水解中的應(yīng)用在1980年之前已經(jīng)充分確立。也許Chiu et al(1991，2002)描述的專利被授權(quán)是不同尋常的。這個專利涉及纖維素酶在水解魔芋葡甘露聚糖中的應(yīng)用及其在食品中作為潛在的不可消化的膨脹劑的應(yīng)用。
對水溶性魔芋(滲析)提取物已經(jīng)進行了研究，由Shimizu ManzoShoten KK公司(1974)和Sugiyama and Shimahara(1976)公布?；谀в蠛偷矸劢M合的凝膠系統(tǒng)已經(jīng)由Tye等(1990，1994)討論。Chiu等(1991，1998，2002)論述了纖維素酶將魔芋葡甘露聚糖轉(zhuǎn)變?yōu)楣烟堑膽?yīng)用及其作為糖代替品/膨脹劑的應(yīng)用。King等(1994)和Wheatley等(1996)使用魔芋葡甘露聚糖作為持續(xù)釋放的賦形劑。含有魔芋同時添加或不添加其它促進健康成分的保健飲料/組合物也已經(jīng)描述(Zhou，1995；Vuksan，2001；Sun，2003)。
本文揭示了含有甘露糖的碳水化合物、特別是甘露聚糖如葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖是細胞和微生物生長的良好促進劑和刺激劑。特別地，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)多糖水解產(chǎn)物、特別是甘露聚糖水解產(chǎn)物在促進細胞生長中具有出乎意料的優(yōu)異的效力。葡甘露聚糖水解產(chǎn)物(特別是但不限于魔芋葡甘露聚糖)是特別有效的。因此，本發(fā)明開發(fā)并描述了制備培養(yǎng)物(例如瓊脂平板)、功能性和發(fā)酵食品(例如酸奶、奶酪和意大利香腸)及保健品/藥品中的支持生物體的更商業(yè)化的方法。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了含有甘露糖的碳水化合物在促進細胞生長中的應(yīng)用。
優(yōu)選地，所述含有甘露糖的碳水化合物是多糖或者在自然界發(fā)現(xiàn)的較低分子量的材料。
更優(yōu)選地，所述含有甘露糖的碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物、衍生物或者具有低于在自然界發(fā)現(xiàn)的多糖的分子量的含有甘露糖的材料。
任選地所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
任選地所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理性水解產(chǎn)物。
優(yōu)選地所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
任選地所述甘露聚糖是葡甘露聚糖?；蛘撸龈事毒厶鞘前肴楦事毒厶?。或者所述甘露聚糖是其它類型的甘露聚糖。
所述甘露聚糖可以是天然的或者合成的。
所述甘露聚糖可以是甘露糖糖漿、粉末或者粉(flour)形式。
所述葡甘露聚糖任選地是魔芋葡甘露聚糖。
任選地其它碳水化合物也可以加入細胞中。
所述細胞優(yōu)選是微生物。
所述細胞可以是細菌如乳酸桿菌(Lactobacilli spp)和雙歧桿菌(Bifidobacteria spp)?；蛘咚黾毎梢允瞧渌毦?、酵母、霉菌或者真菌。
含有甘露糖的碳水化合物在動物和人的食品中可以用作碳源，以促進產(chǎn)物中的或者攝食后的細胞生長。
所述細胞典型是微生物。
所述細胞可以是細菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌?；蛘咚黾毎梢允墙湍浮⒚咕蛘哒婢?。
所述動物和人的食品可以是營養(yǎng)或者藥物性食品或者飲料、飼料或者產(chǎn)品。
所述食品可以是發(fā)酵中或者已經(jīng)發(fā)酵的產(chǎn)品如酸奶。所述食品可以是功能性食品。
含有甘露糖的碳水化合物促進腸道和體腔中細胞的生長。
典型地，含有甘露糖的碳水化合物以消耗病原性生物體來促進腸道有益的細胞的生長。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供了一種合生素(synbiotic)食品或者飼料，其包含一或多種益生菌和含有甘露糖的碳水化合物。
所述合生素的食品或者飼料可以是益生素(prebiotic)。
所述合生素食品或者飼料可以是益生菌(probiotic)。
所述合生素食品或者飼料可以是益生素和益生菌的混合物。
優(yōu)選地，所述含有甘露糖的碳水化合物(甘露聚糖)是在自然界發(fā)現(xiàn)的多糖或者較低分子量的材料(及其衍生物)。
最優(yōu)選地，所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物(包括衍生物)或者與在自然界發(fā)現(xiàn)的多糖相比具有較低分子量的含有甘露糖的材料。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
優(yōu)選地，所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。任選地，所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。或者所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者其它類型的甘露聚糖。
所述甘露聚糖可以是天然或者合成的。
所述甘露聚糖可以是甘露糖糖漿、粉末或者粉形式。
所述葡甘露聚糖任選地是魔芋葡甘露聚糖。
可以使用任何合適的益生菌。例子包括乳酸桿菌和雙歧桿菌。
本發(fā)明的第三方面提供了含有甘露糖的碳水化合物作為碳源在促進人和動物體內(nèi)微生物生長中的應(yīng)用。
所述碳源可以促進人和動物腸道中微生物生長。
本發(fā)明第四方面提供了含有甘露糖的碳水化合物作為益生素在促進人和動物體內(nèi)微生物生長中的應(yīng)用。
所述益生菌可以促進人和動物腸道中微生物生長。
優(yōu)選地，所述含有甘露糖的碳水化合物是在自然界中發(fā)現(xiàn)的多糖或者較低分子量的材料。
最優(yōu)選地，所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物、衍生物或者與在自然界中發(fā)現(xiàn)的多糖相比具有較低分子量的含有甘露糖的材料。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
優(yōu)選地，所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
任選地，所述甘露聚糖是葡甘露聚糖?；蛘咚龈事毒厶鞘前肴楦事毒厶腔蛘咂渌愋透事毒厶?。
所述甘露聚糖可以是天然或者合成的。
所述甘露聚糖可以是甘露糖糖漿、粉末或者粉形式。
所述葡甘露聚糖任選地是魔芋葡甘露聚糖。
根據(jù)本發(fā)明的第五方面，提供了促進人和動物體內(nèi)微生物生長的碳源；包含含有甘露糖的多糖水解產(chǎn)物或者與在自然界發(fā)現(xiàn)的含有甘露聚糖的多糖相比具有較低分子量的合成的衍生物的益生素。
所述碳源可以促進人和動物腸道中微生物的生長。
根據(jù)本發(fā)明的第六方面，提供了促進人和動物體內(nèi)微生物生長的益生素；即包含含有甘露糖的多糖水解產(chǎn)物或者與在自然界發(fā)現(xiàn)的含有甘露聚糖的多糖相比具有較低分子量的合成的衍生物的益生素。
所述碳源可以促進人和動物腸道中微生物生長。
優(yōu)選地所述含有甘露糖的碳水化合物衍生自多糖但可以是與天然發(fā)現(xiàn)的多糖相比具有較低分子量的材料。
最優(yōu)選地，所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物、衍生物或者與在自然界中發(fā)現(xiàn)的多糖相比具有較低分子量的含有甘露糖的材料。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
優(yōu)選地，所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
任選地，所述甘露聚糖是葡甘露聚糖?；蛘?，所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它類型甘露聚糖。
所述甘露聚糖可以是天然或者合成的。
所述甘露聚糖可以是甘露糖糖漿、粉末或者粉形式。
所述葡甘露聚糖優(yōu)選是(但非絕對是)魔芋葡甘露聚糖。
所述益生素或者水解產(chǎn)物可適于局部、口服、陰道內(nèi)或者經(jīng)肛門給予。
任選地，所述益生素或者水解產(chǎn)物是任何物理形式的陰道栓劑(pessary)，如片劑、膠囊，或者液體如沖洗液。
或者，所述水解產(chǎn)物或益生素是乳液(消費品及衛(wèi)生保健品)。
或者，所述水解產(chǎn)物或益生素是栓劑(消費品及衛(wèi)生保健品)。
所述微生物典型是天然微生物菌群。
根據(jù)本發(fā)明的第七方面，提供了一種藥物組合物，該組合物可包含一或多種益生菌和碳水化合物。
所述碳水化合物優(yōu)選是含有甘露糖的碳水化合物。
優(yōu)選所述含有甘露糖的碳水化合物是在自然界中發(fā)現(xiàn)的多糖或者較低分子量的材料。
最優(yōu)選地，所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物、衍生物或者與在自然界發(fā)現(xiàn)的多糖相比具有較低分子量的含有甘露糖的材料。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
任選地，所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
優(yōu)選地，所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
任選地，所示甘露聚糖是葡甘露聚糖?；蛘咚龈事毒厶鞘前肴楦事毒厶腔蛘咂渌愋偷母事毒厶?。
所述甘露聚糖可以是天然或者合成的。
所述甘露聚糖可以是甘露糖糖漿、粉末或者粉形式。
任選地，所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
所述藥物組合物可以是陰道栓劑、栓劑或者乳液或者任何衛(wèi)生保健品。
參考下圖對本發(fā)明進行描述，其中

圖1和2示出時間、溫度和酶濃度對魔芋粉的纖維素酶水解的作用；圖3示出乳酸菌在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基(底部)和含有菊粉的培養(yǎng)基(上部)中的生長對比結(jié)果；圖4示出乳酸桿菌(上部)和雙歧桿菌(底部)在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基中(左側(cè))和在含有菊粉的培養(yǎng)基中(右側(cè))的生長對比結(jié)果；圖5示出乳酸菌在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基(上部左側(cè))、在含有MRS瓊脂的培養(yǎng)基(上部右側(cè))、在含有MRS和木糖水解產(chǎn)物(xylohydrolysate)的培養(yǎng)基(底部右側(cè))及在含有MRS和果膠水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基(底部左側(cè))中的生長對比結(jié)果。
通過下文深入討論的實驗，發(fā)現(xiàn)含有甘露糖的碳水化合物、特別是甘露聚糖如葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖是細菌生長的優(yōu)異促進劑。特別地，本申請人揭示了多糖水解產(chǎn)物包括魔芋葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖的水解產(chǎn)物是細胞和微生物生長的極佳促進劑，并且與目前已知的益生素相比在促進這種生長方面具有未預(yù)料到的優(yōu)異效力。特別地，葡甘露聚糖水解產(chǎn)物促進腸道有益的細菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌的生長，可以用于動物和人的食品和飼料中。也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)碳水化合物，包括含有甘露糖的碳水化合物，當通過非口服給予時，例如通過陰道、局部或者肛門給予時，是細胞和微生物生長的極佳益生素和促進劑。因此，預(yù)期碳水化合物如含有甘露糖的葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖及其它類型的甘露聚糖可用于消費品和衛(wèi)生保健品中，如局部乳液、栓劑、沖洗劑和陰道栓劑。
本申請人預(yù)期甘露聚糖特別是甘露聚糖水解產(chǎn)物如葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖水解產(chǎn)物具有如下潛在作用·促進細胞(特別但非限于是細菌)在營養(yǎng)平板上生長。這也可以在這些細胞的干燥期間提供冷凍保護劑優(yōu)勢。
·在飼料、食品和飲料及衛(wèi)生保健系統(tǒng)中作為佐劑，其中該材料可以提供非發(fā)酵/發(fā)酵中/已發(fā)酵的食品中生物體的碳源。
·在飼料、食品和飲料及衛(wèi)生保健系統(tǒng)中作為佐劑，其中該材料可以為運載至并位于腸道中的生物體提供碳源。
·選擇性支持飼料、飲料、食品、衛(wèi)生保健、藥物、生物學(xué)及其它相關(guān)產(chǎn)品中某些微生物優(yōu)于其它微生物的生長。
本發(fā)明提供的商業(yè)優(yōu)勢的關(guān)鍵在于所述多糖水解產(chǎn)物可以通過任何合適的方式產(chǎn)生，如化學(xué)(酸)、生物化學(xué)、酶或者物理水解產(chǎn)物，并且不管分子量或者分布如何均是有效的。
所述甘露聚糖可以是純甘露聚糖或者組合另一種材料(例如糖)。
也可以使用合成的甘露聚糖。
方法1魔芋粉的纖維素酶水解為了確定纖維素酶13P-C013P(Biocatalysts Ltd.Wales，UK)對魔芋粉(Luxara 5867，Arthur Branwell & Co.Ltd.)的水解能力，使用不同濃度的酶進行實驗。將魔芋粉溶解于具有不同濃度纖維素酶的250mlDuran玻璃螺旋頸瓶中的乙酸鹽緩沖液(200mM，pH4.5)中。將樣品在60℃水浴搖床中保溫2或4小時。該實驗也包括無魔芋但有纖維素酶的對照。通過移液管將等份(1ml)移至干凈的螺旋蓋的10ml試管中，密封，然后置于沸水中15分鐘以使酶失活。接著，在3000rpm(1500×g)離心15分鐘。通過移液管將等份(1ml)上清移至250ml量瓶中。將大約100ml去離子水及10ml硫酸鋅和6ml 1M的氫氧化鈉加入該瓶中，之后用去離子水加滿。將內(nèi)容物經(jīng)Whatman No.1濾紙(18.5cm直徑)過濾進250ml錐形瓶中。然后將每瓶的澄清過濾物的等份(1ml)通過移液管移至10ml螺旋蓋的Pyrex管中，以確定還原能力(Nelson，1944)。
對上清級分(～0.25ml)還針對標準糖和水解產(chǎn)物通過薄層層析(TLC)進行分離，以確定鏈長度。用于TLC(Whatman KS silica gel 150°A，Thickness 250um)的標準糖是葡萄糖(ACROSOrganics-410955000)、甘露糖(Sigma-M-4625)、纖維二糖(Fluka-22150)、multotriose(ACROS Organics-225940010)及multohexaose(Sigma-M9153)。用于TLC板的移動相由丙-2-醇、丙酮和1M乳酸(分別為4∶4∶2)組成。使用二苯胺(苯胺、二苯胺和85％正磷酸，比例分別為5∶5∶1)觀測不同的糖。
這種方法的結(jié)果示于圖1。酶水解通過增加酶濃度、溫度和時間而增加。隨著酶濃度、溫度或時間的增加，低分子量材料的比例正如所期望地增加。為了達到最佳的水解產(chǎn)物產(chǎn)生，優(yōu)化如下條件并選擇用于大部分工作(盡管非限于此)15mg纖維素酶/ml緩沖液在60℃水解2小時，固體與緩沖液的比率為1∶10，如圖2所示。
方法2魔芋水解產(chǎn)物的提取魔芋水解產(chǎn)物在希望的條件下以兩種不同方式提取(a)沒有糖，其中將上清通過90％無水乙醇沉淀；或者(b)有糖，其中將上清凍干。對比這兩種魔芋水解產(chǎn)物制備級分的功能性(特別是用于微生物生長的底物)。如下是這種對比結(jié)果。
一些乳酸菌得自不同來源。這些乳酸菌包括干酪乳桿菌干酪亞種(Lactobacillus casei ssp casei)NCFB161德氏乳桿菌保加利亞亞種(Lactobacillus delbruckiissp bulgaricus)NCFB1489嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus) NCFB1748加氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri) NCFB2233植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)DSM12028Lactococcus lactis ssp lactis NCIMB6681青春雙歧桿菌(Bifidobacterium adolescentis) NCIMB702204短雙歧桿菌(Bifidobacterium breve) NCIMB702258雙歧雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum) NCIMB700795
這些細菌菌株的生長使用所述兩種魔芋水解產(chǎn)物制備級分檢測。這種檢測通過使用Bactometer(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)進行，其中在無菌去離子水中制備每種生物體的系列稀釋液，將1ml改良的MRS肉湯移至一次性Bactometer組件的每個孔中。將Bactometer組件中的每個孔接種0.1ml每種稀釋液等份，然后用無菌礦物質(zhì)油覆蓋以獲得厭氧條件。然后將該組件在由Tektronix 4205軟件(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)驅(qū)動的Bactometer 128微生物監(jiān)測系統(tǒng)(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)中在37℃保溫48小時。乳酸菌的生長也通過將菌株在改良的MRS瓊脂平板中生長而檢測。
結(jié)果示出所有使用的乳酸菌菌株在兩種魔芋水解產(chǎn)物制備級分中均能生長。在Bactometer中，生長通過在Bactometer組件中示出的檢測時間(微生物的初始濃度達到Bactometer閾值水平需要的時間)證實。也示出了這兩種水解產(chǎn)物級分之間無顯著差異，因此出于經(jīng)濟方面的原因決定在本應(yīng)用中使用含有糖的魔芋水解產(chǎn)物，但是也可以在有或無糖的條件下進行應(yīng)用。
實施例1葡甘露聚糖/魔芋水解產(chǎn)物支持細菌在培養(yǎng)基上生長的應(yīng)用魔芋水解產(chǎn)物在Bactometer中產(chǎn)生的魔芋水解產(chǎn)物用作碳源以提供Bactometer中一系列乳酸菌的生長。根據(jù)原始配方制備De Man，Rogosa and Sharpe(MRS)肉湯，MRS改良的肉湯通過將原始配方中的葡萄糖(20mg/ml葡萄糖)用100％甘露糖與葡萄糖(1.6∶1)、100％的含有糖的可溶的水解產(chǎn)物及100％的無糖的可溶水解產(chǎn)物替代。在無菌去離子水中制備每種生物體的系列稀釋液。為了保溫生物體及在微生物監(jiān)測系統(tǒng)中確定生長速度，將1ml肉湯移至一次性Bactometer組件(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)的每個孔中。組件中的每個孔均接種0.1ml每種稀釋液等份，然后用無菌礦物質(zhì)油覆蓋以獲得厭氧條件。然后將該組件在由Tektronix 4205軟件(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)驅(qū)動的Bactometer 128微生物監(jiān)測系統(tǒng)(bioMerieux，Basingstoke，Hampshire)中在37℃保溫48小時。
結(jié)果示出檢測的所有乳酸菌包括乳酸桿菌和雙歧桿菌在所有使用的碳源上均生長。這個結(jié)果通過Bactometer組件上示出的檢測時間(微生物初始濃度達到Bactometer閾值水平需要的時間)而證實。
實施例2魔芋水解產(chǎn)物及菊粉在MRS瓊脂中在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基與含有菊粉(一種確定的益生素)的培養(yǎng)基之間進行乳酸菌生長對比。在這種情況中，將所述碳源混和在MRS培養(yǎng)基中，代替原始配方中的葡萄糖(20mg/ml葡萄糖)。制備無碳源、具有魔芋水解產(chǎn)物和具有菊粉的MRS培養(yǎng)基。用最大回收稀釋劑制備系列稀釋液，使用平板涂布培養(yǎng)技術(shù)將每種生物體的每種稀釋液的0.1ml等份鋪板。然后將平板在5％CO2條件下在37℃保溫48小時，之后獲得菌落形成單位(C.F.U.)。
在兩種碳源情況中，菌落數(shù)目在相同范圍(107-108)。然而，非常大的菌落(5mm)在含有魔芋水解產(chǎn)物的MRS平板上生長。另一方面，在含有菊粉作為碳源的MRS平板上獲得非常小的菌落(0.5-1mm)。結(jié)果示于圖3和4。
實施例3魔芋水解產(chǎn)物和菊粉水解產(chǎn)物在MRS瓊脂中在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基與含有菊粉水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基之間對比乳酸菌的生長。分別使用合適濃度的纖維素酶和菊粉酶水解魔芋粉和菊粉。將產(chǎn)生的魔芋水解產(chǎn)物和菊粉水解產(chǎn)物加入MRS瓊脂中，代替原始配方中的葡萄糖(20mg/ml葡萄糖)。用最大回收稀釋劑制備系列稀釋液，將包括3種乳酸桿菌和3種雙歧桿菌的乳酸菌傳代培養(yǎng)并在5％CO2條件下在37℃保溫48小時。
表2含有魔芋水解產(chǎn)物(KOS)和菊粉水解產(chǎn)物(IOS)的培養(yǎng)基上乳酸菌的菌落形成單位和菌落大小
如表2所示，這兩種碳源的C.F.U.均在2.4-4.4×108范圍，雙歧雙歧桿菌NCIMB(700795)除外，其C.F.U.為8×107。然而，含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上菌落的大小(5mm)比含有菊粉水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上生長的菌落(1mm)大。這提示魔芋水解產(chǎn)物支持乳酸菌的生長，并因此傳代時間快于在含有菊粉水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上生長的那些乳酸菌。
實施例4魔芋水解產(chǎn)物及果膠水解產(chǎn)物和木聚糖水解產(chǎn)物在MRS瓊脂中還在含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基和其它含有果膠水解產(chǎn)物和木聚糖水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上對比了乳酸菌的生長，果膠水解產(chǎn)物和木聚糖水解產(chǎn)物是已確定的益生素。分別使用合適濃度的纖維素酶、果膠酶和木聚糖酶水解魔芋粉、果膠和木聚糖。將產(chǎn)生的水解產(chǎn)物加入MRS瓊脂中，代替原始配方中的葡萄糖。用最大回收稀釋劑制備系列稀釋液，將乳酸菌傳代培養(yǎng)并在5％CO2條件下在37℃保溫40小時。
表3在MRS瓊脂、具有魔芋水解產(chǎn)物(KOS)的MRS、具有果膠水解產(chǎn)物(POS)的MRS、及具有木聚糖水解產(chǎn)物(XOS)的MRS上生長的乳酸桿菌和雙歧桿菌的菌落形成單位和菌落大小(mm)
如表3所示，所有碳源的C.F.U.均相似，除短雙歧桿菌NCIMB(702258)之外，其在利用魔芋和果膠水解產(chǎn)物的情況中示出較高計數(shù)(1.0×108)。然而，含有魔芋水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上菌落的大小大于在MRS瓊脂、含有果膠水解產(chǎn)物和木聚糖水解產(chǎn)物的培養(yǎng)基上生長的菌落大小，如圖5所示。
實施例5葡甘露聚糖/魔芋水解產(chǎn)物在未發(fā)酵的/將要發(fā)酵的/已發(fā)酵的食品中的應(yīng)用魔芋水解產(chǎn)物和菊粉在UHT乳中對乳酸菌在魔芋水解產(chǎn)物和作為商業(yè)水解物的菊粉上的生長進行了對比。購買UHT乳并使用摻入的水解產(chǎn)物作為碳源檢測乳酸菌的生長。將乳(對照)、具有2％魔芋水解產(chǎn)物的乳和具有作為2％菊粉的乳的樣品在5％CO2條件下在37℃保溫24小時。用最大回收稀釋劑制備系列稀釋液，使用平板涂布培養(yǎng)技術(shù)將每種生物體的每種稀釋液的0.1ml等份鋪板。然后將平板在5％CO2條件下在37℃保溫48小時，之后獲得菌落形成單位(C.F.U.)。
表4在MRS瓊脂上傳代培養(yǎng)的乳、具有菊粉的乳和具有魔芋水解產(chǎn)物(KOS)的乳的菌落形成單位(C.F.U.)/ml的差異
表4和圖6的結(jié)果示出在含有魔芋水解產(chǎn)物的乳中菌落形成單位(4.3×108-1.6×109)高于具有菊粉的乳中的菌落形成單位(3.7×107-7.6×108)，這與僅有乳的結(jié)果非常相似。另外，雙歧桿菌的菌落形成單位在所有樣品中均高于乳酸桿菌的菌落形成單位。
魔芋水解產(chǎn)物和天然酸奶魔芋水解產(chǎn)物對乳酸菌生長的作用通過將該產(chǎn)品應(yīng)用于酸奶而進一步測試。確定天然酸奶的菌群，隨后立即加入0、1％、2％和5％魔芋水解產(chǎn)物，將其在37℃保溫48小時。用最大回收稀釋劑制備系列稀釋液，將每種稀釋液的0.1ml等份使用平板涂布培養(yǎng)技術(shù)鋪板。然后將平板在5％CO2條件下在37℃保溫48小時，之后獲得菌落形成單位(C.F.U.)。
表5菌落形成單位(C.F.U.)/g含有不同濃度的魔芋水解產(chǎn)物的酸奶
表5所示的結(jié)果示出隨著魔芋水解產(chǎn)物濃度的提高菌落的數(shù)目略有增加(1.3×107，1.8×107和2.0×107)，例外的是所述水解產(chǎn)物增加5％，這種情況下形成太多的酸以致于生長受到限制。
實施例6葡甘露聚糖/魔芋水解產(chǎn)物促進微生物在飼料/食品及腸道和體內(nèi)生長的潛力進行了一項研究以檢測葡甘露聚糖/魔芋水解產(chǎn)物在促進微生物在飼料/食品中生長的潛在作用，及通過抑制其它微生物包括腸道中的病原菌的生長而對人體健康產(chǎn)生有益影響。
如本領(lǐng)域所熟知，雞肉通常被病原菌如彎曲桿菌和李斯特氏菌所破壞，因此將25g雞胸肉使用stomacher勻漿，并將200μl接種于在50ml錐形瓶中的20ml Mueller Hinton肉湯(oxoid)中。將其在軌道搖床中在37℃保溫過夜。在同一天通過將一環(huán)過夜保溫的益生菌(干酪乳桿菌、嗜酸乳桿菌和青春雙歧桿菌)培養(yǎng)物接種于MRS瓊脂的中心而產(chǎn)生生長點，所述MRS培養(yǎng)基中具有魔芋水解產(chǎn)物作為碳源，代替原始配方中的葡萄糖(20mg/ml葡萄糖)。將平板在5％CO2條件下在37℃保溫過夜。對于每種生物體，將含有雞肉混合物的200μl過夜保溫的Mueller Hinton肉湯加入15ml的MH瓊脂中。將加入的培養(yǎng)物與熔化的瓊脂輕輕混和，然后倒入皮氏培養(yǎng)皿中，使其凝固。然后通過輕輕將其提起將瓊脂從平板中無菌除下，并緩慢將其下降于在其它瓊脂平板上的益生菌生長點上。將具有夾心瓊脂的平板在需氧條件下在37℃保溫。在過夜保溫后，測定在益生菌生長點上無細菌生長的抑制圈，從該圖中減去每個菌株的益生菌生長點的直徑。將這項實驗重復(fù)3次，獲得一致的結(jié)果。
將上述程序也用于病原性單核細胞增生李斯特氏菌的兩種純培養(yǎng)物，一種大腸桿菌培養(yǎng)物及一種金黃色葡萄球菌培養(yǎng)物。最初將來自乳的單核細胞增生李斯特氏菌L85和來自人的單核細胞增生李斯特氏菌Scott A在TSB中傳代培養(yǎng)，然后研究用益生菌嗜酸性乳酸桿菌NCFB 1748、植物乳桿菌DSM 12028、干酪乳桿菌干酪亞種NCFB161和乳酸乳球菌乳酸亞種(Lactococcus lactis ssp lactis)NCIMB 6681(Hannah Research Institute，Ayr，Scotland)對其的抑制作用。
在Luria肉湯中生長大腸桿菌，之后測試益生菌干酪乳桿菌干酪亞種NCFB 161和嗜酸性乳酸桿菌NCFB 1748在MRS和補加葡甘露聚糖的MRS上對大腸桿菌的抑制。將金黃色葡萄球菌在MuellerHinton肉湯中生長，之后研究其被嗜酸性乳酸桿菌NCFB 178、干酪乳桿菌干酪亞種NCFB 161、加氏乳桿菌(L.gasseri)NCFB 2233和乳酸乳球菌乳酸亞種NCIMB 6681的抑制情況。
由于本發(fā)明的益生素具有獨特的特征譜，使其在眾多技術(shù)中均頗有價值，包括在食品、飼料和衛(wèi)生保健/藥物的應(yīng)用中，這種益生素作為生物治療劑，特別是用于控制和治療念珠菌病和陰道炎，具有極佳益處。因此，使用酵母白色假絲酵母(Candida albicans)進行初步研究。
通過將一環(huán)益生菌(嗜酸性乳酸桿菌NCFB1748，干酪乳桿菌NCFB 161，加氏乳桿菌NCFB2233，植物乳桿菌DSM 12028和乳酸乳球菌乳酸亞種NCIMB 6681)的過夜保溫培養(yǎng)物接種于MRS瓊脂和補加了魔芋水解產(chǎn)物的MRS瓊脂的中心，產(chǎn)生生長點。將該平板在5％CO2條件下在37℃保溫過夜。在保持在50℃的10ml Sabouraud右旋糖瓊脂Oxoid(軟瓊脂，0.7％)中接種100μl在30℃生長過夜的白色假絲酵母。將加入的量與熔化的瓊脂充分混和，然后覆蓋在含有益生菌生長點的凝固的瓊脂上。將該平板在需氧條件下在30℃保溫，使得酵母生長。在過夜保溫之后，測定在益生菌生長點上無酵母生長的抑制圈，從該圖中減去每個菌株的益生菌生長點的直徑。
結(jié)果示出當接種在MRS瓊脂或者含有魔芋水解產(chǎn)物的改良的MRS瓊脂上時，乳酸菌對來自雞肉提取物中的混和培養(yǎng)物產(chǎn)生一個抑制圈。這通過在改良的MRS瓊脂上，特別是菌株嗜酸性乳酸桿菌示出一個18mm的抑制圈而充分證實。其它兩個菌株((干酪乳桿菌和青春雙歧桿菌)示出15mm的抑制圈。然而，在MRS瓊脂上接種的菌株株僅示出11mm的抑制圈。
表6在MRA培養(yǎng)基上乳酸菌對單核細胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色假絲酵母的抑菌圈KOS＝魔芋水解產(chǎn)物
結(jié)果(表6)還示出單核細胞增生李斯特氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色假絲酵母在存在葡甘露聚糖水解產(chǎn)物的條件下，以抑菌圈形式被乳酸菌抑制(分別見圖9、10、11和12)?？雌饋磉@種抑制是益生菌菌株和碳源依賴性的。在存在葡甘露聚糖(益生素)的條件下乳酸菌對病原體的抑制是非常重要的。特別對于白色假絲酵母，這是發(fā)現(xiàn)陰道癥狀(episodes)治療方法和重建健康陰道微生物群的重要方法。這種方法使得本發(fā)明人可以擴展生物治療劑的含義及通過給予任何形式的益生素和/或益生菌(如陰道栓劑、乳液或者凝膠)以控制和治療陰道感染的進一步應(yīng)用。
本申請人進行的研究揭示了葡甘露聚糖水解產(chǎn)物、特別是魔芋葡甘露聚糖水解產(chǎn)物是優(yōu)異的益生菌物質(zhì)，并且在促進細胞生長中具有未預(yù)料到的更大的效力。一般地，發(fā)現(xiàn)在存在葡甘露聚糖水解產(chǎn)物的條件下比在存在其它已確定的益生菌物質(zhì)的條件下，細胞具有更短的傳代時間和更迅速的增殖。
在本發(fā)明所述范圍內(nèi)可以對本發(fā)明進行進一步修改和變化。
參考文獻Behr，W.(1998)Dietetic and pharmaceutical raw material。www.behrbonn.com/literat/konjacmb.htmBrandt，L.A.(2001)Prebiotics enhance gut health。www.findarticles.com/cf～dls/m3289/9～170/78576180/print.jh tmlBurrington，K.J.(1999)Inside cookies and crackers。www.foodproductdesign.com/archive/1999/0799de.htmlCescutti，P.，Campa，C.，Delben，F(xiàn).and Rizzo，R.(2002)Carbohydrate Research337，2505-2511。
Chiu，C-W，Jeffcoat，R.，Zallie，J.P.and Henley，M.(1991)EP0457098。
Chiu，C-W，Jeffcoat，R.，Zallie，J.P.and Henley，M.(1998)US5811148。
Chiu，C-W，Jeffcoat，R.，Zallie，J.P.and Henley，M.(2002)US2002051841。
Edasnige，Y.and Ishii，T.(1998)Phytochemistry 49，1675-1682。
Jones，P.J.(2002)Clinical nutrition7.Functional foods-more than justnutrition.Canadian Medical Association Journal 166(12)，1555-1563。
Kato，K.and Matsuda，K.(1969) Agricultural and Biological Chemistry33，1446-1453。
Kato，K.，Watanabe，T.and Matsuda，K.(1970)Agricultural and BiologicalChemistry 34，532-539。
Khanna，S.(2003)The Chemical，Physical and Nutritional Properties of the PlantPolysaccharide Konjac Glucomannan.PhD Thesis，Glasgow Caledonian University，Glasgow，UK。
King，L.V.，Erkoboni，F(xiàn).D.and Wheatley，O.T.(1994)W09415643。
Kurakake，M.and Komaki，T.(2001)Current Microbiology 42，377-380。
Ohya，Y.，Ihara，K.，Murata，J.，Sugitou，T.and Ouchi，T.(1994)CarbohydratePolymers 25，123-130。
Loo，J.V.，Cummings，J.，Delzenne，N.，Englyst，H.，F(xiàn)ranck，A.，Hopkins，M.，Kok，N.，Macfarlane，G.，Newton，D.，Quigley，M.，Roberfroid，M.，van Vliet，T.and van den Heuvel，E.(1999) British Journal of Nutrition 81，121-132。
Nelson，N.(1944)Journal of Biological Chemistry 153，375。
Platzman，A.(2000)www.foodproductdesign.com/archive/2000/0100nn.htmlQi，L.，Li，G.J.andZong，-M.H.(200.3)ACTA Polymerica Sinica 5，650-654。
Shimahara，H.，Suzuki，H.，Sugiyama，N.and Nizakawa，K.(1975)Agriculturaland Biological Chemistry 39，293-299。
Sugiyama，N.and Shimahara，H.(1976)US3973008。
Shimizu Manzo Shoten KK(1974)GB1351006。
Sun，G.(2003)US2003138545。
Thomas，W.R.(1997)In Thickening and Gelling Agents for Foods(A.Imeson，Ed)，pp169-179.BlackieLondon。
Tomasik，P.J.and Tomasik，P.(2003)Cereal Chemistry 80，113-117。
Topping，D.L.and Clifton，P.M.(2001)Physiological Reviews 81，1031-1064。
Tye，J.R.，Bullens，C.W.and Llanto，M.G.(1990)WO9015544。
Tye，J.R.，Bullens，C.W.and Llanto，M.G.(1994)US5308636。
Vuksan，V.(2001)CA2410556。
Wheatley，O.T.，King，L.V.and Erkoboni，F(xiàn).D.(1996)US5486364。
Zhou，W.(1995)CN1097114。
權(quán)利要求
1.含有甘露糖的碳水化合物在促進細胞生長中的應(yīng)用。
2.權(quán)利要求1的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述含有甘露糖的碳水化合物是多糖。
3.權(quán)利要求1的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物。
4.權(quán)利要求3的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
5.權(quán)利要求3的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
6.權(quán)利要求3-5中任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
7.權(quán)利要求6的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。
8.權(quán)利要求7的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
9.權(quán)利要求6的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它類型的甘露聚糖。
10.權(quán)利要求6-9任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是由活的生物體合成的。
11.權(quán)利要求6-9任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是合成的。
12.權(quán)利要求6-11任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是甘露糖糖漿、粉末或者粉形式。
13.前述權(quán)利要求任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中加入葡萄糖或者任何其它碳水化合物。
14.前述權(quán)利要求任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述細胞是微生物。
15.前述權(quán)利要求任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述細胞是細菌。
16.權(quán)利要求15的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述細菌是乳酸細菌。
17.前述權(quán)利要求任一項的含有甘露糖的碳水化合物在人和動物消化道中的應(yīng)用。
18.權(quán)利要求1-16任一項的含有甘露糖的碳水化合物在人和動物體腔中的應(yīng)用。
19.權(quán)利要求1-16任一項的含有甘露糖的碳水化合物在人和動物皮膚上的應(yīng)用。
20.權(quán)利要求1-16任一項的含有甘露糖的碳水化合物在陰道中的應(yīng)用。
21.權(quán)利要求1-17任一項的含有甘露糖的碳水化合物在動物和人食品中的應(yīng)用。
22.權(quán)利要求21的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述食品是功能性食品。
23.權(quán)利要求21或22的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述食品是發(fā)酵中或者已經(jīng)發(fā)酵的產(chǎn)物，如酸奶。
24.權(quán)利要求21-23任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述食品/材料促進腸道和體腔中細胞的生長。
25.權(quán)利要求21-24任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述食品/材料以消耗病原性生物體來促進消化道有益細胞的生長。
26.一種包含一或多種益生菌及含有甘露糖的碳水化合物的合生素食品或飼料。
27.權(quán)利要求26的合生素食品或飼料，其是益生素。
28.權(quán)利要求26的合生素食品或飼料，其是益生菌。
29.權(quán)利要求26的合生素食品或飼料，其是益生素和益生菌的混合物。
30.權(quán)利要求26-29任一項的合生素食品或者飼料，其中含有甘露糖的碳水化合物是多糖。
31.權(quán)利要求26-29任一項的合生素食品或者飼料，其中所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物。
32.權(quán)利要求31的合生素食品或者飼料，其中所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
33.權(quán)利要求31的合生素食品或者飼料，其中所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
34.權(quán)利要求31-33任一項的合生素食品或者飼料，其中所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
35.權(quán)利要求34的合生素食品或者飼料，其中所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。
36.權(quán)利要求35的合生素食品或者飼料，其中所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
37.權(quán)利要求34的合生素食品或者飼料，其中所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它類型甘露聚糖。
38.權(quán)利要求26-37任一項的合生素食品或者飼料，其中所述細胞是微生物。
39.權(quán)利要求38的合生素食品或者飼料，其中所述微生物是乳酸細菌。
40.含有甘露糖的碳水化合物作為碳源在促進人和動物中微生物生長中的應(yīng)用。
41.含有甘露糖的碳水化合物作為益生素在促進人和動物中微生物生長中的應(yīng)用。
42.權(quán)利要求40或41的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述含有甘露糖的碳水化合物是多糖。
43.權(quán)利要求40或41的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中它們是任何多糖水解產(chǎn)物。
44.權(quán)利要求43的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
45.權(quán)利要求43的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
46.權(quán)利要求43-45任一項的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
47.權(quán)利要求46的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。
48.權(quán)利要求47的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
49.權(quán)利要求46的含有甘露糖的碳水化合物的應(yīng)用，其中所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它類型甘露聚糖。
50.促進人和動物中微生物生長的益生素，所述益生素包含碳水化合物。
51.權(quán)利要求50的益生素，其中所述碳水化合物是含有甘露糖的碳水化合物。
52.權(quán)利要求50或51的益生素，其中所述碳水化合物是多糖。
53.權(quán)利要求50或51的益生素，其中所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物。
54.權(quán)利要求53的益生素，其中所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
55.權(quán)利要求53的益生素，其中所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
56.權(quán)利要求53-55任一項的益生素，其中所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
57.權(quán)利要求56的益生素，其中所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。
58.權(quán)利要求57的益生素，其中所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
59.權(quán)利要求56的益生素，其中所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它類型甘露聚糖。
60.權(quán)利要求50-59任一項的益生素，其是任何物理形式的陰道栓劑形式。
61.權(quán)利要求50-59任一項的益生素，其是乳液形式。
62.權(quán)利要求50-59任一項的益生素，其是栓劑形式。
63.一種包含一或多種益生菌和碳水化合物的藥物組合物。
64.權(quán)利要求63的藥物組合物，其中所述碳水化合物是含有甘露糖的碳水化合物。
65.權(quán)利要求63或64的藥物組合物，其中所述碳水化合物是多糖。
66.權(quán)利要求63或64的藥物組合物，其中所述碳水化合物是多糖水解產(chǎn)物。
67.權(quán)利要求66的藥物組合物，其中所述多糖水解產(chǎn)物是酶水解產(chǎn)物。
68.權(quán)利要求66的藥物組合物，其中所述多糖水解產(chǎn)物是化學(xué)或者物理水解產(chǎn)物。
69.權(quán)利要求66或67的藥物組合物，其中所述多糖水解產(chǎn)物是甘露聚糖。
70.權(quán)利要求69的藥物組合物，其中所述甘露聚糖是葡甘露聚糖。
71.權(quán)利要求70的藥物組合物，其中所述葡甘露聚糖是魔芋葡甘露聚糖。
72.權(quán)利要求69的藥物組合物，其中所述甘露聚糖是半乳甘露聚糖或者任何其它形式的甘露聚糖。
73.權(quán)利要求63-72任一項的藥物組合物，其是任何物理形式的陰道栓劑形式。
74.權(quán)利要求63-72任一項的藥物組合物，其是栓劑形式。
75.權(quán)利要求63-72任一項的藥物組合物，其是乳液形式。
全文摘要
碳水化合物、特別是含有甘露糖的碳水化合物，用作細胞生長的促進劑。特別地，多糖水解產(chǎn)物示出在促進細胞生長、合生素食品(synbiotic foods)、益生素(prebiotics)和含有含甘露糖的碳水化合物和所述多糖水解產(chǎn)物的藥物組合物中具有良好作用。
文檔編號A61K31/715GK1984990SQ200580023506
公開日2007年6月20日 申請日期2005年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月14日
發(fā)明者法拉杰·阿爾－加扎維, 理查德·特斯特 申請人:格萊克勞吉克有限公司