專利名稱：聚乙二醇衍生化磷脂包載的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑及其制備方法。
背景技術：
長春花生物堿類抗腫瘤藥物是一類有效的廣譜的重要抗腫瘤藥物，臨床上廣泛用于治療各種癌癥，如白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、肝癌及多種其他實體瘤。這類抗腫瘤藥物主要包括長春堿(Vinbastine，VLB)、長春新堿(Vincristine，VCR)、長春地辛(Vindesine，VDS)。然而，像其他細胞毒抗腫瘤藥物一樣，缺乏對腫瘤組織的選擇性，存在著嚴重的劑量依賴性急性毒性，臨床上表現(xiàn)為惡心、嘔吐、脫發(fā)、血管刺激性。更為嚴重的是骨髓抑制和神經(jīng)毒性強，反復用藥，導致嚴重的并發(fā)癥。長春花生物堿類抗腫瘤藥物的毒副作用嚴重地限制了其長期重復用于臨床上腫瘤的治療。
改變長春花生物堿類抗腫瘤藥物的組織分布和提高其對腫瘤組織的選擇性可顯著降低毒性。長春花生物堿類抗腫瘤藥物的脂質(zhì)體制劑可降低藥物毒副作用，增加藥物在腫瘤組織的分布，從而減輕劑量依賴的急性毒性，正在進行臨床試驗，治療各種類型的癌癥，且取得了較好的臨床效果。另外，在我國已獲國家藥監(jiān)局批準的脂質(zhì)體產(chǎn)品有兩性霉素脂質(zhì)體、紫衫醇脂質(zhì)體。但是長春花生物堿類抗腫瘤藥物脂質(zhì)體也存在著諸多缺點。如藥物被包封在內(nèi)水相，藥物很快從脂質(zhì)體中釋放出來，導致制劑不穩(wěn)定；脂質(zhì)體的最小極限粒徑為50nm，脂質(zhì)體進入細胞往往是通過融合和內(nèi)吞的機制完成的，通常藥物經(jīng)脂質(zhì)體包裹后細胞毒作用較游離的藥物弱；脂質(zhì)體的制備過程復雜，需要多種脂質(zhì)成分的復合(至少兩種脂質(zhì)成分)，粒徑控制需要特殊的設備和裝置；儲存過程中易絮凝等。
在水中、當雙親性分子的濃度超過臨界膠束濃度時可自發(fā)地聚集形成膠束，利用這一性質(zhì)，將藥物包載于膠束的疏水核中。藥物的膠束制劑早已被用于臨床治療實踐中，如去氧膽酸鈉用于兩性霉素B的增溶等。Kun等發(fā)表了題為“聚合物膠束一種新型的藥物載體”的文章，綜述了膠束作為藥物載體方面的應用(Adv.Drug.Del.Rev.，21107-116，1976)。最近，聚合物膠束作為一種緩釋、靶向、長循環(huán)的藥物載體，引起了人們的極大關注，并成為給藥系統(tǒng)研究的焦點。Yokoyama et al采用能形成膠束的聚合物包載抗腫瘤藥物，研究了其抗實體瘤的的活性和細胞毒性，以及它在血液中長循環(huán)的特性(Cancerres.513229-3236(1991)。聚乙二醇-磷脂修飾的脂質(zhì)體在動物以及人體中業(yè)已證明具有長循環(huán)的特點，并被安全地用于臨床治療(Gregoriadis，G..TIBTECH，13527-537，1995)。用聚乙二醇-磷脂膠束作為難溶性藥物的載體已被研究者進行了較為詳盡的綜述(Torchilin，V.P.J.controlled Release，73137-172)。
聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)是一種在生理條件下可以穩(wěn)定存在的水溶性聚合物。由于它的空間結(jié)構(gòu)可以阻止血漿蛋白的靠近，已廣泛的應用于改變磷脂、蛋白類藥物性質(zhì)。在微粒給藥系統(tǒng)方面，PEG能夠在微粒的表面形成親水性保護層，防止微粒聚集，避免被體內(nèi)的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別、吞噬，從而延長藥物在血液循環(huán)中的保留時間，達到長循環(huán)的目的。
基于PEG衍生化磷脂制備的納米膠束不僅具有一般納米微粒的優(yōu)點粒徑小，基本在10nm～30nm之間，是一種動力學穩(wěn)定的體系，一方面避免了其他微粒給藥系統(tǒng)例如脂質(zhì)體，易于聚集成團的缺點；另一方面更易于深入病變部位，改善藥物分布，提高藥物的腫瘤組織靶向性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，它是一種動力學穩(wěn)定的體系，具有良好的穩(wěn)定性，并在體內(nèi)具有靶向作用，能增加藥物在腫瘤組織的分布，從而提高療效、降低毒性。
本發(fā)明的另一個目的是提供可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的制備方法。
本發(fā)明提供可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，其含有治療有效量的長春花生物堿類抗腫瘤藥物、聚乙二醇衍生化磷脂、以及藥學上可接受的輔劑。
本發(fā)明的主要內(nèi)容是利用聚乙二醇(PEG)衍生化磷脂為主要輔料，采用適當?shù)闹苿W手段制備成長春花生物堿類抗腫瘤藥物納米膠束制劑。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了一種可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，包含長春花生物堿類抗腫瘤藥物、聚乙二醇衍生化磷脂、以及藥學上可接受的輔劑。
按照本發(fā)明，其中長春花生物堿類抗腫瘤藥物和聚乙二醇衍生化磷脂的摩爾比是1∶0.5至1∶10，優(yōu)選1∶1至1∶3。
在本發(fā)明中，所述的長春花生物堿類抗腫瘤藥物為一種或多種選自下組的藥物長春堿(Vinbastine，VLB)，長春新堿(Vincristine，VCR)和長春地辛(Vindesine，VDS)。
本發(fā)明的聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇分子通過共價鍵與磷脂分子上的含氮堿基結(jié)合而形成。
用于本發(fā)明的磷脂為聚乙二醇衍生化磷脂，其結(jié)構(gòu)中磷脂部分的脂肪酸包含的碳原子數(shù)為10～24個，優(yōu)選的是12、14、16、18、20、22、24個碳原子，脂肪酸鏈可以是飽和的，也可以是部分飽和的，特別需要指出的脂肪酸為月桂酸(12碳)、肉豆蔻酸(14碳)、棕櫚酸(16碳)、硬脂酸或油酸或亞油酸(18碳)、廿酸(20碳)、山俞酸(22碳)、lignocerate(24碳)。
聚乙二醇衍生化磷脂，其磷脂部分可以是磷酯酰乙醇胺(PE)、磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰絲胺酸(PS)二磷脂酰甘油、縮酸磷脂、溶血磷脂膽堿(LPC)、溶血乙醇胺磷脂(LPE)等。
在本發(fā)明中，聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂優(yōu)選為磷酯酰乙醇胺，尤其是二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺。
聚乙二醇衍生化磷脂，其聚乙二醇分子量范圍為200～20000(與聚乙二醇長鏈上乙氧基的數(shù)量有關)，優(yōu)選聚乙二醇分子量范圍為500～10000，更優(yōu)選的范圍1000～10000(乙氧基的數(shù)量為22～220)，最優(yōu)選的聚乙二醇分子量為2000。
按照本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案，聚乙二醇衍生化磷脂是聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)。
本發(fā)明所涉及的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑根據(jù)需要可以是溶液形式，也可以是凍干形式。
在本發(fā)明的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑中，膠束的粒徑范圍為5-100nm，優(yōu)選10nm～50nm，最優(yōu)選10nm～20nm。長春花生物堿類抗腫瘤藥物的用量為1mg/ml～10mg/ml的制劑，優(yōu)選1mg/ml～3mg/ml，聚乙二醇衍生化磷脂的用量為1mg/ml～500mg/ml，優(yōu)選10mg/ml～30mg/ml。
在本發(fā)明中，所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇分子通過共價鍵與磷脂分子結(jié)合而形成。
本發(fā)明所述的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，是采用PEG衍生化磷脂作為載體，或與其他磷脂配合使用，通過一定的制劑學手段，將治療量的長春花生物堿類抗腫瘤藥物包裹于所形成的納米膠束中，根據(jù)需要添加一定抗氧劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑。
按照本發(fā)明的膠束制劑，其含有長春花生物堿類抗腫瘤藥物、雙親性分子、以及藥學上可接受的抗氧劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑。所述的雙親性分子為PEG衍生化磷脂和其他磷脂。其他磷脂材料包括、磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、心磷脂、大豆磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、氫化卵磷脂等。
在本發(fā)明的膠束制劑中，PEG衍生化磷脂占總的磷脂的摩爾比例范圍為20％～100％，優(yōu)選60％～100％。
膠束最終制劑可以是溶液形式，含有1mg/ml～10mg/ml的長春花生物堿類抗腫瘤藥物和1mg/ml～500mg/ml的總磷脂。其他添加劑的濃度0.01％～5％。
膠束最終制劑可以是凍干粉形式，含有0.02％～50％(重量百分比)的長春花生物堿類抗腫瘤藥物、50％～95％(重量百分比)的總磷脂和10％～90％(重量百分比)的其他添加劑。
由于長春花生物堿類抗腫瘤藥物、磷脂均易被氧化，根據(jù)需要，本發(fā)明所述的長春花生物堿類抗腫瘤藥物膠束制劑還含有抗氧劑，如水溶性抗氧劑(壞血酸、亞硫酸氫鈉、EDTA，用量范圍0.01～1.0％(重量百分比))和脂溶性抗氧劑(生育酚、BHA、沒食子酸丙酯，用量范圍0.01～1.0％(重量百分比))。
根據(jù)需要，本發(fā)明的膠束制劑可以加入pH調(diào)節(jié)劑(各類緩沖系統(tǒng)如檸檬酸—檸檬酸鈉、醋酸—醋酸鈉、磷酸鹽等)，用量范圍1mM～100mM，調(diào)節(jié)藥液pH為3.0～8.0、最佳pH值范圍是6-7.5。
根據(jù)需要，本發(fā)明的膠束制劑可以加入滲透壓調(diào)節(jié)劑(氯化鈉、葡萄糖、甘露醇)。所述的滲透壓調(diào)節(jié)劑指各類藥劑學上可接受的用于調(diào)節(jié)等滲的鹽和碳水化合物，調(diào)節(jié)滲透壓至人體等滲或偏高滲(人體液滲透壓范圍290-310mmol/L)。
本發(fā)明還提供了長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的制備方法，包括將長春花生物堿類抗腫瘤藥物包裹于聚乙二醇衍生化磷脂形成的納米膠束中，制備成可供靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑。
根據(jù)本發(fā)明的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的制備方法具體包括以下步驟(1)將長春花生物堿類抗腫瘤藥物和聚乙二醇衍生化磷脂溶于有機溶劑中；(2)除去有機溶劑，制得含長春花生物堿類抗腫瘤藥物的聚合物脂膜；(3)向上述(2)得到的聚合物脂膜中加入水或緩沖溶液，在25℃～60℃下水化；(4)渦旋振搖或超聲，得到包載長春花生物堿類抗腫瘤藥物的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束。
在本發(fā)明的方法步驟(1)中的所述有機溶劑為甲醇、乙醇、氯仿、或它們的混合物。
在本發(fā)明的方法步驟(2)中通過減壓除去有機溶劑和/或在真空條件下除去有機溶劑。
在本發(fā)明的方法步驟(3)中的緩沖溶液為檸檬酸或磷酸緩沖液。
在本發(fā)明的方法步驟(3)中在25℃-60℃、優(yōu)選35℃-45℃的水浴中水化1～2小時。
在本發(fā)明的方法步驟(4)中渦旋振搖或超聲1-5分鐘。
按照本發(fā)明的方法，進一步包括用pH調(diào)節(jié)劑將得到的膠束溶液的pH值調(diào)節(jié)至3.0-8.0、優(yōu)選6.5-7.4。
按照本發(fā)明的方法，進一步包括將得到的膠束溶液冷凍干燥，制成凍干形式的制劑。
具體地，本發(fā)明所述的膠束制劑是采用了以下制備方法制成的將長春花生物堿類抗腫瘤藥物、聚乙二醇衍生化磷脂、脂溶性添加劑溶于有機溶劑中，置于茄形瓶中，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，揮干有機溶劑，在茄形瓶表面形成薄而均勻的脂膜，將水溶性添加劑(水溶性抗氧劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑)溶于水中，將該水溶液加入到茄形瓶中，振蕩水化，過0.22um的微孔濾膜過濾除菌，制備成可供靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物膠束制劑，所形成的納米膠束的粒徑范圍10-50nm，優(yōu)選10-30nm。根據(jù)需要可采用溶液形式，也可以是凍干形式。
為了更好的理解本發(fā)明的內(nèi)容，我們對一些專業(yè)術語解釋如下。
“膠束”是指雙親性分子在水溶液中的濃度超過臨界膠團濃度時(CMC)，能夠自發(fā)地聚合形成膠束。膠束的結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)體不同，不具有脂雙層的結(jié)構(gòu)特征。一般來講，膠束的結(jié)構(gòu)為疏水部分向內(nèi)，形成疏水核，親水部分向外形成親水表面。膠束粒徑小，平均粒徑在10～20nm左右。因此，其不但是熱力學穩(wěn)定體系，而且是動力學穩(wěn)定體系。另外，膠束顆粒不易聚集分層，包載容量高，即在低濃度時可包載較高的藥量。
“磷脂”，磷脂的分子結(jié)構(gòu)和脂肪相似，不同的是在甘油分子上只連有兩個脂肪酸，第三個羥基與磷酸結(jié)合成脂。磷脂的這一結(jié)構(gòu)使它成為一種雙親性分子，它的磷酸或磷酸酯一端是極性的，易與水相吸，構(gòu)成磷脂分子的親水性頭部，而它的脂肪酸一端是非極性的，不與水相吸，構(gòu)成磷脂分子的疏水性尾部。本發(fā)明所涉及的磷脂主要為聚乙二醇衍生化磷脂。在本發(fā)明中，聚乙二醇衍生化磷脂也可以與其他磷脂配合使用。
“治療有效量”是指長春花生物堿類抗腫瘤藥物產(chǎn)生治療效果的用量。根據(jù)本發(fā)明，長春花生物堿類抗腫瘤藥物的單位劑量為5～100mg，優(yōu)選單位劑量10～20mg，最優(yōu)單位劑量為20mg，劑量將根據(jù)每個特殊個體的需要而調(diào)整。
本發(fā)明的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑以聚乙二醇(PEG)衍生化磷脂為主要基質(zhì)，可以保護納米膠束不被體內(nèi)的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，延長納米膠束在血液循環(huán)中的保留時間，同時改變藥物在體內(nèi)分布的動力學性質(zhì)，進而增強療效、降低毒性。
如前面所述，長春花生物堿類抗腫瘤藥物存在著嚴重的劑量依賴性急性毒性，且缺乏對腫瘤組織的選擇性。普通的長春花生物堿類抗腫瘤藥物注射液注入體內(nèi)后，藥物蓄積在心臟組織導致嚴重的不可逆的心臟損傷。長春花生物堿類抗腫瘤藥物的毒副作用嚴重地限制了其長期重復用于臨床上腫瘤的治療。雖然，長春花生物堿類抗腫瘤藥物脂質(zhì)體可減少藥物在心臟的蓄積，增加藥物在腫瘤組織的分布，從而減輕劑量依賴的急性毒性，并獲準用于治療臨床上的各種類型的癌癥，且取得了較好的治療效果。但是長春花生物堿類抗腫瘤藥物脂質(zhì)體也存在著諸多缺點。如藥物被包封在內(nèi)水相，藥物只有從脂質(zhì)體中釋放出來才能發(fā)揮效果；脂質(zhì)體的最小極限粒徑為50nm，脂質(zhì)體進入細胞往往是通過融合和內(nèi)吞的機制完成的，因此藥物經(jīng)脂質(zhì)體包裹后細胞毒作用較游離的藥物弱；脂質(zhì)體的制備過程復雜，需要多種脂質(zhì)成分的復合(至少兩種脂質(zhì)成分)，粒徑控制需要特殊的設備和裝置；儲存過程中易絮凝等。
為了克服上述制劑的缺點，本發(fā)明采用聚乙二醇衍生化磷脂為主要載體，或輔以其他磷脂，制備長春花生物堿類抗腫瘤藥物膠束制劑，藥物的包封率達到90％以上。本發(fā)明的主要技術優(yōu)勢在于利用聚乙二醇衍生化磷脂在水溶液中可自動形成粒徑非常均一的納米膠束。納米膠束的粒徑范圍達到10-30nm。
膠束中，聚乙二醇分子在包載藥物的疏水核外形成親水性保護層，避免藥物與血液中的酶等蛋白分子接觸和被體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別、吞噬，延長膠束在體內(nèi)的循環(huán)時間；藥物包載于膠束中的疏水核中，可以使藥物免受外界因素(水、氧、光)的破壞，大大提高藥物在儲存過程中的穩(wěn)定性，除此以外，膠束制劑可以改變藥物在體內(nèi)分布的動力學性質(zhì)，增加藥物在腫瘤組織的分布，進而提高療效、降低毒性。
以下實施例主要是用于進一步說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
附圖簡述

圖1為VCR-PEG2000-DSPE膠束的釋放試驗。
圖2為長春新堿膠束制劑的體外細胞毒試驗。
具體實施例方式
實施例1長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的制備處方見表1表1長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑處方

制備工藝按上述處方比例稱取長春堿、長春新堿、長春地辛溶于乙醇中(1-5mg/ml)。另稱取聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)，溶于適量的氯仿中，置于100ml茄形瓶中，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，揮干有機溶劑，在茄形瓶表面形成薄而均勻的磷脂膜。將檸檬酸緩沖液，pH 7.0加入到茄形瓶中，37℃振蕩水化1小時，氮氣保護，0.22um的微孔濾膜過濾除菌，制得成可供靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物膠束制劑。所得樣品外觀為無色澄明的溶液，平均粒徑15nm，粒徑分布10nm～20nm之間，包封率大于90％。
實施例2 VCR-PEG2000-DSPE膠束的包封效率處方見表2表2 VCR-PEG2000-DSPE膠束的包封效率

制備工藝按上述處方中藥脂比，稱取VCR溶于乙醇中(2mg/ml)，稱取PEG2000-DSPE，溶于適量的氯仿中，置于100ml茄形瓶中。置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，除盡有機溶劑，在茄形瓶表面形成薄而均勻的磷脂膜。將檸檬酸緩沖液，pH 7.0加入到茄形瓶中，37℃振蕩水化1小時，氮氣保護，0.22um的微孔濾膜過濾除菌，制得成可供靜脈注射的長春新堿膠束制劑。所得樣品外觀為無色澄明的溶液，平均粒徑15nm，粒徑分布10nm～20nm之間。
實施例3 VCR-PEG2000-DSPE膠束的釋放方法取VCR-PEG2000-DSPE膠束0.5ml(1mg/1ml)，置透析袋中(12-14kD)，于體積為40ml釋放介質(zhì)中(磷酸生理鹽水緩沖液)，37℃恒溫搖床振蕩(100rpm)，定時取樣用高效液測定釋放介質(zhì)中VCR的含量，計算釋放百分率，釋放曲線見圖1。
通過樣品在兩種介質(zhì)(磷酸鹽緩沖液pH 5.0、pH 7.4)釋放性質(zhì)的研究，結(jié)果表明，VCR緩慢釋放(48小時，釋放的藥物量小于70％)且無突釋效應。
實施例4 VCR-PEG2000-DSPE膠束的穩(wěn)定性取以上制備的VCR-PEG2000-DSPE膠束1ml(1mg/1ml)置250ml燒瓶中，加入100ml pH7.4磷酸鹽緩沖液，于37℃恒溫水浴中2h。取樣品300ul置離心過濾管中(分子篩30kD)，10000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，高效液相測定濾液中長春新堿的含量，計算膠束稀釋的包封率。膠束制備后于4℃放置30天分別測定總的長春新堿和游離長春新堿的含量，考察穩(wěn)定性。結(jié)果見表3。
表3 VCR-PEG2000-DSPE膠束的穩(wěn)定性

實施例5 長春新堿膠束制劑的體外細胞毒試驗用體外細胞毒試驗來檢驗本發(fā)明制備的長春新堿納米膠束制劑的抗腫瘤效果。
人乳腺癌細胞株MCF-7細胞(ATCC，HTB-22)按3.0×103個/孔接種96孔板中，培養(yǎng)過夜，洗去培養(yǎng)基，分別加入不同長春新堿濃度的下列樣品各10μl游離長春新堿和聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺膠束包載的長春新堿，每一樣品三復孔。每孔中加入100μl含10％胎牛血清的培養(yǎng)基，于37℃、5％CO2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)72h。于各設定時間點取出細胞，每孔加入MTT 20μl(5mg/ml)，再培養(yǎng)4h后，每孔加入150μl DMSO溶解，置于酶標儀，在590nm處檢測其最大吸收，繪制各濃度組的生長曲線(見圖2)。
權(quán)利要求
1.一種可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，包含長春花生物堿類抗腫瘤藥物、聚乙二醇衍生化磷脂、以及藥學上可接受的輔劑。
2.按照權(quán)利要求1的膠束制劑，其中長春花生物堿類抗腫瘤藥物和聚乙二醇衍生化磷脂的摩爾比是1∶0.5至1∶10，優(yōu)選1∶1至1∶3。
3.按照權(quán)利要求1的膠束制劑，其中所述長春花生物堿類抗腫瘤藥物為一種或多種選自下組的藥物長春堿(Vinbastine，VLB)，長春新堿(Vincristine，VCR)和長春地辛(Vindesine，VDS)。
4.按照權(quán)利要求1-3中任何一項的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇分子通過共價鍵與磷脂分子上的含氮堿基結(jié)合而形成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂中磷脂部分的脂肪酸包含10-24個碳原子，脂肪酸鏈是飽和的或部分飽和的，優(yōu)選月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸或油酸或亞油酸、廿酸、山俞酸、或lignocerate。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂為磷酯酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲胺酸、二磷脂酰甘油、縮酸磷脂、溶血膽堿磷脂、或溶血乙醇胺磷脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂為二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂結(jié)構(gòu)中的聚乙二醇分子量范圍為200～20000，優(yōu)選500～10000，更優(yōu)選1000～10000，最優(yōu)選的聚乙二醇分子量為2000。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠束制劑，其中所述聚乙二醇衍生化磷脂是聚乙二醇2000二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束制劑，其中所述膠束制劑是溶液形式或凍干形式。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束制劑，其中所述藥學上可接受的輔劑為藥學上可接受的抗氧劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑、pH值調(diào)節(jié)劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的膠束制劑，其中所述pH值調(diào)節(jié)劑為檸檬酸-檸檬酸鈉、醋酸-醋酸鈉、或磷酸鹽、或其組合。
13.一種制備按照權(quán)利要求1的可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑的方法，包括將長春花生物堿類抗腫瘤藥物包裹于聚乙二醇衍生化磷脂形成的納米膠束中，制成可供靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，包括以下步驟(1)將長春花生物堿類抗腫瘤藥物和聚乙二醇衍生化磷脂溶于有機溶劑中；(2)除去有機溶劑，制得長春花生物堿類抗腫瘤藥物的聚合物脂膜；(3)向上述(2)得到的聚合物脂膜中加入水或緩沖溶液，在25℃～60℃下水化；(4)渦旋振搖或超聲，得到包載長春花生物堿類抗腫瘤藥物的聚乙二醇衍生化磷脂納米膠束。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的方法，其中長春花生物堿類抗腫瘤藥物在所述膠束中的包封率至少為90％。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中該方法另外包括以下特征之一在步驟(1)中的所述有機溶劑為甲醇、乙醇、氯仿、或它們的混合物；在步驟(2)中通過減壓除去有機溶劑和/或在真空條件下除去有機溶劑；在步驟(3)中的緩沖溶液為檸檬酸或磷酸緩沖液；在步驟(3)中在25℃-60℃、優(yōu)選35℃-45℃的水浴中水化1～2小時；和在步驟(4)中渦旋振搖或超聲1-5分鐘。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，進一步包括用pH調(diào)節(jié)劑將得到的膠束溶液的pH值調(diào)節(jié)至3.0-8.0、優(yōu)選6.5-7.4。
18.根據(jù)權(quán)利要求13或14的方法，進一步包括將得到的膠束溶液冷凍干燥，制成凍干形式的制劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了可靜脈注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑，其含有治療有效量的長春花生物堿類抗腫瘤藥物(長春堿，長春新堿或長春地辛)、聚乙二醇衍生化磷脂、以及藥學上可接受的輔劑。其制備是將藥物包裹于形成的納米膠束中，制備成可供注射的長春花生物堿類抗腫瘤藥物的納米膠束制劑。長春花生物堿類抗腫瘤藥物與聚乙二醇衍生化磷脂形成粒徑非常均一的納米膠束。在膠束中，聚乙二醇分子于包載藥物的疏水核周圍形成親水性保護層，避免藥物與血液中的酶等蛋白分子接觸和被體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識別、吞噬，延長膠束在體內(nèi)的循環(huán)時間。另外，膠束還提高了藥物的儲存穩(wěn)定性和對腫瘤的療效，并降低了藥物毒性。
文檔編號A61P35/00GK1927203SQ20051009838
公開日2007年3月14日 申請日期2005年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月9日
發(fā)明者梁偉 申請人:梁偉