專利名稱：防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗及其制法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種防治水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病的復合菌苗。
背景技術(shù)：
細菌性疾病是對蝦、魚類、海參等海水養(yǎng)殖中的常見的疾病，如對蝦紅腿病(紅肢病)病原有副溶血弧菌、鰻弧菌、溶藻弧菌；爛眼病病原有非01群霍亂弧菌；爛鰓病病原有弧菌屬、假單胞菌屬、氣單胞菌屬；褐斑病病原有弧菌、假單胞菌、螺菌、黃桿菌；氣單胞菌病病原有氣單胞菌；對蝦幼體的弧菌病病原有鰻弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌；而這些細菌也可以導致魚類、海參等養(yǎng)殖疾病的發(fā)生，如海水養(yǎng)殖魚類的潰瘍病、爛鰓病等；海參的皮膚爛邊、潰瘍等。這些細菌性疾病往往導致海水養(yǎng)殖中的大面積死亡，給水產(chǎn)養(yǎng)殖帶來重大的損失。魚蝦養(yǎng)殖過程中，魚蝦疾病一旦出現(xiàn)明顯癥狀，即已經(jīng)是病程后期，難以治療。因此對于魚蝦疾病主要是以預防為主，而目前使用的消毒劑和抗生素存在著藥物殘留、產(chǎn)生抗藥性、污染養(yǎng)殖環(huán)境等很多弊端。
因此，免疫學方法成為控制水產(chǎn)養(yǎng)殖動物暴發(fā)性流行病最佳選擇。
在現(xiàn)有的技術(shù)中，對于魚蝦疾病的防治還有不足之處，如《弧菌疫苗對斑節(jié)對蝦和日本對蝦免疫預防的作用》水產(chǎn)學報.2000.024(006).-564-569。嘗試使用免疫學的方法來防治對蝦弧菌病。將病原副溶血弧菌制成福爾馬林滅活疫苗，在實驗條件下分別以浸泡、口服和注射等方式接種于斑節(jié)對蝦和日本對蝦，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在一定的范圍內(nèi)，對蝦的免疫保護率隨疫苗濃度的增加而升高。但是存在著只能防治對蝦弧菌病，防治疾病種類單一的缺欠。2001年9月5日公開了申請?zhí)枮?0114083.3的專利《一種抗水產(chǎn)養(yǎng)殖動物弧菌病的混合疫苗及其制備方法》。該混合疫苗由創(chuàng)傷弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、細小弧菌、河弧菌、哈弧菌和鰻弧菌等二種獲二種以上混合而成，能防治多種弧菌的侵襲。但是對其他致病菌感染的防御作用較差，而海水養(yǎng)殖實踐中細菌性疾病相對復雜，如弧菌病、氣單胞菌病等，所以其實際應用受到限制。公開的申請?zhí)枮?2110261.9《一種水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的細菌疫苗制備方法》雖然涉及了多種病原細菌，但是其主要應用于魚或海豚等哺乳動物，對于對蝦等低等動物的疾病的防御效果沒有做出說明?！逗Ｋ~類病原弧菌對對蝦的致病力及其疫苗的免疫預防》熱帶海洋學報.2001.020(004).-68-73。魚類致病弧菌(溶藻弧菌，創(chuàng)傷弧菌，河弧菌生物I型，鰻弧菌和副溶血弧菌)同樣可使斑節(jié)對蝦Penaeus monodon患病，僅對斑節(jié)對蝦的致病性和免疫保護力作了研究。通過肌肉注射感染實驗，發(fā)現(xiàn)5種弧菌對斑節(jié)對蝦均有不同的致病作用。從5種弧菌中篩選出強毒株，以其制成福爾馬林滅活疫苗。通過注射、浸浴和投喂等3種方式接種的斑節(jié)對蝦，除投喂效果不明顯外，注射和浸浴接種均有一定的免疫保護力。在注射接種組中，隨著疫苗濃度的提高，其免疫力有升高的趨勢。說明在魚蝦的弧菌病中，疫苗能起到共同的防御效果，為商用魚蝦疫苗的生產(chǎn)提供了可能。雖然注射和浸浴接種有一定的免疫保護力，但是對于水產(chǎn)養(yǎng)殖來說，將患病魚蝦捉出來進行注射和浸浴接種，幾乎是不可能的事情。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種免疫多種水產(chǎn)養(yǎng)殖動物，防御多種致病菌感染的復合菌苗，以克服目前疫苗所存在的問題。
本發(fā)明是將常見的海水養(yǎng)殖中的致病菌制成復合菌苗防治水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病，其特征在于主要由下列細菌中的一種或一種以上弧菌和一種或一種以上的除弧菌外的其他細菌混合而成，所述的弧菌菌種包括溶藻弧菌(V.alginolyticus)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、鰻弧菌(V.anguillarum)；所述除弧菌外的其他細菌菌種包括嗜水氣單胞菌(A.hydrophila)、溫和氣單胞菌(A.sobria)、銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)、類志賀氏類志賀氏鄰單胞菌(P.shigelloides)。復合菌苗中各成分菌苗含量為溶藻弧菌、嗜水氣單胞菌均為10～50％；副溶血弧菌、鰻弧菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌均為0～50％，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
根據(jù)以上原則，經(jīng)過優(yōu)選復合菌苗中的配比可以分別為1、溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌含量均為10～20％。
2、溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌各為50％。
3、溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌和嗜水氣單胞菌均為10～50％。
4、溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌分別占10～50％。
具體來說，以下配方的復合菌苗防治效果相當優(yōu)異1、溶藻弧菌10％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌10％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌20％、類志賀氏鄰單胞菌20％組成的混合菌苗，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
2、溶藻弧菌15％、副溶血弧菌15％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌10％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌20％組成的混合菌苗，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
3、溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％組成的混合菌苗，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
4、溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％組成的混合菌苗，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
復合菌苗的制造方法1、分別制備弧菌和其他細菌的單一成分菌苗(1)將弧菌和其他細菌菌種接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，物理或化學滅菌。
(3)3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心，除去雜質(zhì)。
(4)用生理鹽水配制成所需濃度，即得單一成分菌苗。
2、將制得的單一成分菌苗按配方比例的濃度相混合即得所述的復合菌苗。
3、將上述復合菌苗加入適當?shù)姆栏瘎┍４鎮(zhèn)溆谩?br> 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的復合菌苗在應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖動物過程中可以更為廣泛地防治常見的細菌性疾病，特別是對海水養(yǎng)殖的蝦、魚、海參等的細菌性疾病防治，取得較滿意的效果。
下面結(jié)合實施例說明本發(fā)明。
具體實施例方式
實施例一溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌各占50％組成的混合菌苗的制取。
1.分別制備溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方各占50％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例二溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌和嗜水氣單胞菌分別占25％組成的混合菌苗的制取。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌和嗜水氣單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌和嗜水氣單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方分別占25％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例三溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌分別占20％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方分別占20％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例四溶藻弧菌10％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌10％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌20％、類志賀氏鄰單胞菌20％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方溶藻弧菌10％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌10％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌20％、類志賀氏鄰單胞菌20％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例五溶藻弧菌15％、副溶血弧菌15％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌10％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌20％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方溶藻弧菌15％、副溶血弧菌15％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌10％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌20％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例六溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例七溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，1～5％甲醛溶液滅活。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去殘存的甲醛溶液。
(4)用生理鹽水溶解最后離心所得的沉淀物，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 實施例八溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％組成的混合菌苗。
1.分別制備溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的單一成分菌苗(1)將溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌菌種分別接種于培養(yǎng)基，25～37℃培養(yǎng)24～48小時。
(2)生理鹽水洗滌培養(yǎng)物，56℃～65℃水浴滅活60～120分鐘。
(3)將滅活的培養(yǎng)物3000～5000轉(zhuǎn)/分鐘離心后用生理鹽水溶解，再離心，反復多次以除去雜質(zhì)。
(4)用生理鹽水溶解配制成所需濃度，即得單一成分菌苗。
2.將制得的單一成分菌苗按配方溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％的比例濃度相混合，細菌總量為1×107～1×1010個/ml，即得所述的混合菌苗。
3.將上述復合菌苗加入1％苯甲醇作為防腐劑保存?zhèn)溆谩?br> 本復合菌苗主要應用于防治水產(chǎn)養(yǎng)殖疾病，特別是對蝦、魚類等海水養(yǎng)殖中的常見細菌性疾病。這些細菌性疾病往往導致海水養(yǎng)殖中的大面積死亡，應用本復合菌苗后取得了較滿意的效果，舉例如下1、于1997年9月27日，從普蘭店養(yǎng)殖海區(qū)取回平均5cm長的對蝦16只，喂養(yǎng)于實驗室玻璃缸內(nèi)。取回的對蝦均患有不同程度的褐斑病，經(jīng)每天投喂實施例五菌苗2～3次，除兩只于當年11月自然死亡外，其余14只經(jīng)多次褪皮，存活至1998年8月，蝦體長16cm左右。
2、1999年7月5日，發(fā)現(xiàn)4只雌性對蝦附肢變紅色，游動緩慢，不愿進食。遂調(diào)整使用實施例二菌苗每天2次為3～4次，經(jīng)4天治療，病態(tài)消失，存活至2000年1月自然死亡，體長達18cm。
3、1999年6月開始，在普蘭店市某蝦場一個100畝的蝦池進行本產(chǎn)品的田間應用試驗。從6月底發(fā)現(xiàn)部分蝦患病后，開始使用實施例七菌苗按每周2次用藥，一直用至9月末對蝦出池，未再發(fā)病。而臨近對照池的蝦則發(fā)病不斷，產(chǎn)量為110斤/百畝。因1999年對蝦病害嚴重，當年試驗池產(chǎn)量70～80斤/畝，且蝦體健壯。無論從對蝦個體身長、重量、還是畝產(chǎn)量，經(jīng)使用菌苗后，療效均優(yōu)于對照組。
4、本試驗于2003年5月至2003年9月在遼寧省普蘭店市石河鎮(zhèn)長店鋪村沿海蝦場進行，該處共有12個蝦池，選取愿意應用實施例八復合菌苗的4個蝦池作為試驗組，其余8個蝦池為對照組。投苗前蝦池用茶籽餅消毒處理。投放日本對蝦蝦苗，入池蝦苗規(guī)格為0.9～1.0cm，養(yǎng)殖面積50～100畝，投放蝦苗40～80萬尾。試驗組對蝦外殼整潔、光亮，平均存活102天，比對照組多生長40.75天，對蝦更加成熟，因此，試驗組對蝦平均身長比對照組長4.0cm。
5、2003～2004年先后多次使用近100只觀賞用金魚研究魚類抗感染能力，近50天不換水，使養(yǎng)殖環(huán)境惡化，達到有金魚死亡，然后換水，同時使用實施例六復合菌苗，經(jīng)過搶救，有86只金魚生存下來。
6、魚類養(yǎng)殖實驗購買患潰瘍病鯽魚15只，經(jīng)過使用實施例三復合菌苗，有12只潰瘍病痊愈。
7、海參的實驗室養(yǎng)殖實驗組與對照組各100只稚參，使用實施例二菌苗經(jīng)過一年養(yǎng)殖，實驗組成活76只，而對照組僅成活36只。對海參的潰瘍也顯示出了一定的防治效果。
權(quán)利要求
1.一種防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于主要由一種或一種以上弧菌和一種或一種以上的除弧菌外的其他細菌混合而成，所述的弧菌菌種包括溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌；所述除弧菌以外的其他細菌菌種包括嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌；復合菌苗中各成分菌苗含量為溶藻弧菌、嗜水氣單胞菌均為10～50％；副溶血弧菌、鰻弧菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌均為0～50％，細菌總量為1×107～1×1010個/ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述復合菌苗中溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌的含量均為10～20％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌各占50％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌和嗜水氣單胞菌分別占10～50％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中溶藻弧菌和嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌分別占10～50％。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中各菌苗含量分別為溶藻弧菌10％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌10％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌20％、類志賀氏鄰單胞菌20％。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中各菌苗含量分別為溶藻弧菌15％、副溶血弧菌15％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌10％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌20％。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中各菌苗含量分別為溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌20％、溫和氣單胞菌10％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其特征在于所述的復合菌苗中各菌苗含量分別為溶藻弧菌15％、副溶血弧菌10％、鰻弧菌15％、嗜水氣單胞菌15％、溫和氣單胞菌15％、銅綠假單胞菌15％、類志賀氏鄰單胞菌15％。
10.一種防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗的制法，其特征在于工藝步驟為(1)各菌種進行單一菌種經(jīng)接種，25～37℃、24～48小時培養(yǎng)、生理鹽水洗滌、滅活、離心、生理鹽水配制而成單一菌苗；(2)根據(jù)需要按配方比例將各單一菌苗混合進行復配而成復合菌苗；(3)加入防腐劑保存。
全文摘要
一種防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的復合菌苗，其主要由溶藻弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌、嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌、銅綠假單胞菌、類志賀氏鄰單胞菌組成。復合菌苗中各菌種含量為溶藻弧菌、嗜水氣單胞菌均為10～50％，其他菌種均為0～50，細菌總量為1×10
文檔編號A61P31/04GK1762387SQ20051009581
公開日2006年4月26日 申請日期2005年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月15日
發(fā)明者劉為國 申請人:大連大學