專利名稱：可用于治療糖尿病和高脂血癥的旋復(fù)花提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及旋復(fù)(覆)花提取物。特別地，本發(fā)明涉及用含水溶劑提取旋復(fù)(覆)花(包括Inula japinica和Inula britannica)植物材料得到的水提取物、其制備方法、含有這種水提取物的組合物以及水提取物和組合物用于預(yù)防和治療糖尿病和高脂血癥的用途。
背景技術(shù)：
旋復(fù)(覆)花(包括Inula japinica和Inula britannica)屬菊科植物。具有消痰、下氣、軟堅和行水之功效。文獻(xiàn)報道旋復(fù)(覆)花地上部分含旋復(fù)(覆)花內(nèi)酯、天人菊內(nèi)酯、槲皮素、槲皮黃甙、咖啡酸、綠原酸等多種成分(黃泰康，常用中藥成分與藥理手冊，p1608，1994)。
有關(guān)Inula屬植物降血糖活性文獻(xiàn)報道1.西班牙約70種植物(包括柳葉旋復(fù)花，Inula salicina)用于茶飲，推測可能有降血糖作用(Pardo de S.，J Ethnopharmacol，2005，98(1-2)1-19)；2.總狀木香(Inula racemosa)根醇提取物能降低激素性糖尿病小鼠血糖(Gholap S.，Pharmazie，2004，59(11)876-8)；3.總狀木香通過調(diào)節(jié)甲狀腺激素而改善激素性糖尿病小鼠血糖(Gholap S.，Pharmazie，2003，58(6)413-5)；4.總狀木香作為保健品，具有提高胰島素敏感性作用(Kelly GS，Altern Med Rev，2000，5(2)109-32)；5.總狀木香乙醇提物能降低糖尿病小鼠血糖，增加肝糖原合成(Tripathi YB，1995，33(9)686-9)。
6.旋復(fù)花(Inula britannica)水提物能調(diào)解糖尿病小鼠細(xì)胞免疫功能(Kobayashi T.，Phytother Res，2002，16(4)377-82)；
7.“香附旋覆花湯”加味方(12味中藥)治療II型糖尿病一例報道(張秀云，山東中醫(yī)雜志，1996，15(6)255)。
本發(fā)明采用水及含有機溶劑的水溶液提取二種旋復(fù)(覆)花植物(包括Inula japinica和Inula britannica)地上部分獲得提取物。該二種提取物具有較強降血糖和降血脂作用，能顯著改善四氧嘧啶糖尿病小鼠對葡萄糖耐受能力。有關(guān)旋復(fù)花(包括Inula japinica和Inulabritannica)提取物治療糖尿病和高脂血癥方面的研究經(jīng)檢索后，未見與本研究有相同的報道，本研究屬首次發(fā)現(xiàn)該植物具有降血糖和降血脂活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明體現(xiàn)在以下編號的段落中1.一種制備旋復(fù)花的水提取物的方法，包括獲得旋復(fù)花植物材料；用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料，獲得旋復(fù)花的水提取物。
2.段落1的方法，其中用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料包括(1)在適當(dāng)條件下用含水溶劑浸泡旋復(fù)花植物材料；(2)分離液相和固相；(3)任選地，重復(fù)步驟(1)和(2)一次或多次(例如重復(fù)1-數(shù)次、1-5次、1-2次、2-5次、3次、4次)；(4)任選地，合并液相；和(5)任選地，將由步驟(2)或者步驟(4)得到的液相濃縮。
3.段落2的方法，其中步驟(1)中所述適當(dāng)條件包括溫度為大約0-100℃，例如大約0-80℃，優(yōu)選大約0-60℃，例如大約4-50℃，如大約15-40℃、大約20-30℃，方便的是大約室溫，也可以是大約60-100℃；壓力為大約0.1個大氣壓-5個大氣壓，例如大約0.5個大氣壓-3個大氣壓，例如大約1個大氣壓，方便的是大約常壓；浸泡時間是至少大約1小時，長至例如10天，例如大約6小時-5天，大約12-96小時，例如大約24、48、72小時，或者其中的任何時間，優(yōu)選不短于24小時；旋復(fù)花植物材料與含水溶劑的重量體積比為大約1∶1到大約1∶100(千克/升)，例如大約1∶1到大約1∶50、大約1∶2到大約1∶40，優(yōu)選大約1∶5到大約1∶20，更優(yōu)選大約1∶5到大約1∶15(千克/升)；優(yōu)選在浸泡時攪拌。
4.段落2-3任一項的方法，其中步驟(2)中分離通過過濾、離心、自然沉降等來實現(xiàn)。
5.段落2-4任一項的方法，其中步驟(5)的濃縮是減壓濃縮，溫度可以在大約0℃到大約80℃，優(yōu)選不超過大約60℃，例如室溫到大約60℃，例如大約30-60℃，如大約55℃；步驟(5)的濃縮可以是冷凍干燥。
6.段落1-5任一項的方法，其中所述旋復(fù)花是Inula japinica或者Inula britannica。
7.段落1-6任一項的方法，其中所述旋復(fù)花植物材料是旋復(fù)花植物的地上部分，例如花序。
8.段落1-7任一項的方法，其中所述含水溶劑是水或者含有有機溶劑的水溶液；其中有機溶劑可以是甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮或正丁醇或它們的任何組合。
9.段落1-7任一項的方法，其中在用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料之前可以預(yù)先用有機溶劑提取。有機溶劑包括但不限于石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮或正丁醇或它們的任何組合等。
10.旋復(fù)花的水提取物。
11.段落10的水提取物，其是通過段落1-9任何一項的方法獲得的。
12.可通過段落1-9任何一項的方法獲得的旋復(fù)花的水提取物。
13.一種組合物，其含有段落10-12任何一項的旋復(fù)花水提取物。
14.段落13的組合物，它還含有賦形劑或者載體。
15.段落13或者14的組合物，它是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
16.段落10-12任何一項的旋復(fù)花水提取物或者段落13或者14的組合物在制備用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的藥物中的用途。
17.旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)用于生產(chǎn)可用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的組合物中的用途。
18.段落16的用途，其中所述組合物是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
19.一種降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的方法，包括向患者給予旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)或者含有這種提取物的組合物或者其它由旋復(fù)花植物材料加工后的產(chǎn)品。
本發(fā)明的這些方面和其它方面將在下文進(jìn)一步說明，但是它們不應(yīng)答理解為是對本發(fā)明范圍的限制。


無附圖。
具體實施例方式
本發(fā)明一個目的是獲得旋復(fù)(覆)花植物(包括Inula japinica和Inula britannica)水提物及含有機溶劑的水提物，這些提取物可用于治療糖尿病及高血脂癥的用途，尤其用于糖尿病治療。
因此，第一方面，本發(fā)明涉及一種制備旋復(fù)花的水提取物(或者浸出物)的方法，包括獲得旋復(fù)花植物材料；用含水溶劑提取(或者浸出)旋復(fù)花植物材料，獲得旋復(fù)花的水提取物。本發(fā)明的方法用于從旋復(fù)(覆)花植物材料中提取可用于降低血糖、或者降低血脂、或者治療高脂血癥、或者治療糖尿病、或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的活性成分。
可通過煎煮法、浸漬法、滲漉法、或水蒸氣蒸餾法等提取(或者浸出)旋復(fù)花植物材料。
在一個具體實施方案中，用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料包括(1)在適當(dāng)條件下用含水溶劑浸泡旋復(fù)花植物材料；(2)分離液相和固相；(3)任選地，重復(fù)步驟(1)和(2)一次或多次(例如重復(fù)1-數(shù)次、1-5次、1-2次、2-5次、3次、4次)；(4)任選地，合并液相；和(5)任選地，將由步驟(2)或者步驟(4)得到的液相濃縮。
在步驟(1)中，所述適當(dāng)條件可通過試驗確定。溫度通常為大約0-100℃，例如大約0-80℃，優(yōu)選大約0-60℃，例如大約4-50℃，如大約15-40℃、大約20-30℃，方便的是大約室溫，也可以是大約60-100℃。壓力通常為大約0.1個大氣壓-5個大氣壓，例如大約0.5個大氣壓-3個大氣壓，例如大約1個大氣壓，方便的是大約常壓。浸泡時間通常是至少大約1小時，長至例如10天，例如大約6小時-5天，大約12-96小時，例如大約24、48、72小時，或者其中的任何時間，優(yōu)選不短于24小時。旋復(fù)花植物材料與含水溶劑的重量體積比通常為大約1∶1到大約1∶100(千克/升)，例如大約1∶1到大約1∶50、大約1∶2到大約1∶40，優(yōu)選大約1∶5到大約1∶20，更優(yōu)選大約1∶5到大約1∶15(千克/升)。優(yōu)選在浸泡時攪拌，例如多次攪拌或者連續(xù)攪拌。
步驟(2)中的分離可通過本領(lǐng)域已知的任何方法來實現(xiàn)，包括但不限于，過濾、離心、自然沉降等。
步驟(5)的濃縮可通過本領(lǐng)域已知的任何方法來實現(xiàn)。這種濃縮沒有特別的限制，前提是不破壞活性成分。例如，該濃縮可以是減壓濃縮。溫度可以在大約0℃到大約80℃，例如大約室溫到大約80℃，優(yōu)選不超過大約60℃，例如大約0℃到大約60℃，例如大約50-60℃，如大約55℃。步驟(5)的濃縮也可以是冷凍干燥。
一種常見的濃縮方法是蒸發(fā)，例如常壓蒸發(fā)、減壓蒸發(fā)、薄膜蒸發(fā)等。
濃縮之后可以進(jìn)行干燥，例如，常壓干燥、減壓干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等。干燥不是必需的步驟，但在某些實施方案中是優(yōu)選的。
在有些實施方案中，濃縮步驟也可以省略。例如，可以直接使用浸出液，例如直接給患者服用，或者直接作為原料制備含有旋復(fù)花提取物的組合物。
本發(fā)明的水提取物(如浸出液或者濃縮、干燥之后的浸膏)還可以進(jìn)一步進(jìn)行純化。這可采用本領(lǐng)域已知許多純化方法中的任何一種或者幾種來進(jìn)行。在純化過程中，最好監(jiān)測活性成分的存在。例如通過降低血糖、或者降低血脂、或者治療高脂血癥、或者治療糖尿病、或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力等性質(zhì)來監(jiān)測活性成分。
在本發(fā)明方法中，所述旋復(fù)花植物可以是Inula japinica或者Inula britannica或者它們的組合。
在本發(fā)明方法中，所述旋復(fù)花植物材料可以是旋復(fù)花植物全株或其任何部分，例如其器官、組織、或細(xì)胞，包括花、果實、種子、莖、葉、根，優(yōu)選是旋復(fù)花植物的地上部分，例如花序。旋復(fù)花植物材料可以是藥材，也可以是生藥。旋復(fù)花植物材料可以是組織培養(yǎng)物、細(xì)胞培養(yǎng)物。旋復(fù)花植物可以是天然的或者轉(zhuǎn)基因的。旋復(fù)花植物材料可以是干燥的或者新鮮的。
在本發(fā)明的提取方法中，所述旋復(fù)花植物材料可以是經(jīng)過預(yù)先處理的。這些處理包括物理處理、化學(xué)處理、生物處理等。例如，旋復(fù)花植物材料可以預(yù)先進(jìn)行簡單洗滌、粉碎。在一個實施方案中，在用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料之前可以預(yù)先用有機溶劑提取(例如簡單地提取)。有機溶劑包括但不限于石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丙酮或正丁醇或它們的任何組合等，如乙醇如95％的乙醇。
在本發(fā)明中，所述“含水溶劑”是任何含水的溶劑，它可以是水或者含有有機溶劑的水溶液；其中有機溶劑可以是甲醇、乙醇、丙醇、丙酮或正丁醇或它們的任何組合。水可以是例如蒸餾水、離子交換水、或者自來水。含水溶劑還可以是添加適當(dāng)其它物質(zhì)的提取用水。其它物質(zhì)可以是例如有機溶劑、緩沖劑等。優(yōu)選地，所述含水溶劑是水或者含有有機溶劑的水溶液。含水溶劑中水的含量(體積比)可以是例如至少大約5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或者更高，優(yōu)選至少大約10％，更優(yōu)選至少大約20％、50％或者更多。
在一個具體實施方案中，本發(fā)明旋復(fù)(覆)花植物提取物的制備方法是將旋復(fù)(覆)花植物的地上部分在常溫、常壓下，用水或含有機溶劑的水溶液浸提獲得旋復(fù)(覆)花提取浸膏。生藥旋復(fù)(覆)花與浸泡用水或含有機溶劑的水溶液的重量體積比推薦為1∶5-15(千克/升)。浸泡時間推薦大于24小時，浸泡溫度推薦0℃-60℃。所用有機溶劑包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、丙酮及正丁醇。濃縮可以是將萃取液減壓濃縮，溫度推薦等于或低于60℃進(jìn)行。
另一方面，本發(fā)明涉及旋復(fù)花的水提取物(或者水浸出物)。
本發(fā)明的旋復(fù)花的“水提取物(或者水浸出物)”是指通過用含水溶劑(如水或者含有有機溶劑的水)從旋復(fù)花植物材料中提取的旋復(fù)花提取物，該旋復(fù)花提取物含有可降低血糖、或者降低血脂、或者治療高脂血癥、或者治療糖尿病、或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的活性成分。
本發(fā)明的水提取物可通過以上定義的本發(fā)明提取方法獲得的。
在一方面，本發(fā)明涉及可通過任何一種本發(fā)明的方法獲得的旋復(fù)花的水提取物。
例如，可通過煎煮法、浸漬法、滲漉法、或水蒸氣蒸餾法等提取(或者浸出)旋復(fù)花植物材料，得到浸出液。然后，任選地進(jìn)行濃縮、干燥、或者純化、或者它們的任何組合。
所得浸出物或純化產(chǎn)物可以進(jìn)一步配制成目的組合物，如藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
本發(fā)明的提取物中主要含有生物堿、黃酮苷、肽和糖類成分。
本發(fā)明的提取物具有降血糖和降血脂功能，其可用于制備治療糖尿病和高血脂的藥品，包括口服藥和注射劑，也可制備為降血糖、降血脂的保健品。
在另一方面，本發(fā)明涉及含有本發(fā)明旋復(fù)花水提取物的組合物。優(yōu)選地，該組合物還含有賦形劑或者載體。
在具體實施方案中，所述組合物是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
將本發(fā)明旋復(fù)花水提取物配制成目的組合物的方法是本領(lǐng)域已知的。根據(jù)不同的需要，本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可以選擇適當(dāng)?shù)奶砑游?、配制方法、劑型、單位劑量等?br> 當(dāng)本發(fā)明組合物是藥物組合物時，可以含有適當(dāng)?shù)乃幱觅x形劑、載體或者稀釋劑?？梢圆捎弥扑庮I(lǐng)域公知的技術(shù)進(jìn)行制劑。
本發(fā)明藥物組合物可以采用多種劑型，這往往取決于給藥途徑。例如，本發(fā)明旋復(fù)花水提取物可用于制備治療糖尿病和高血脂的藥品，包括口服藥和腸胃外給藥用的制劑，如注射劑。
本發(fā)明藥物組合物可以通過多種途徑給藥，例如口服、腸胃外給藥等。給藥方案和劑量取決于多種因素，如給藥途徑、患者健康狀況等，并且可由醫(yī)生確定。劑量范圍可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過常規(guī)實驗確定。
另一方面，本發(fā)明涉及旋復(fù)花水提取物或者含有旋復(fù)花水提取物的組合物在制備用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的藥物中的用途。
另一方面，本發(fā)明涉及旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)用于生產(chǎn)可用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的組合物中的用途。所述組合物優(yōu)選是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
另一方面，本發(fā)明涉及一種降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的方法，包括向患者給予旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)或者含有這種提取物的組合物或者其它由旋復(fù)花植物材料加工后的產(chǎn)品。
“患者”包括任何動物，優(yōu)選哺乳動物，特別是寵物、飼養(yǎng)動物。在一個優(yōu)選實施方案這，患者是人?！盎颊摺笨梢允腔加谢蛘邞岩苫加懈咧Y或者糖尿病或者相關(guān)疾病的個體，也可以是有患高脂血癥或者糖尿病危險或者相關(guān)疾病的個體，或者是正常個體。因此，本發(fā)明的旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)或者含有這種提取物的組合物或者其它由旋復(fù)花植物材料加工后的產(chǎn)品的用途不僅包括治療，也包括預(yù)防高脂血癥或者糖尿病或者相關(guān)疾病。
實施例實施例1旋復(fù)(覆)花(Inula japinic)花序1kg，加入95％乙醇8L室溫浸泡48小時，不斷攪拌。四層紗布過濾，殘渣繼續(xù)用95％乙醇4L浸泡48小時，過濾。合并濾液，離心，上清液45℃減壓濃縮得到乙醇提取浸膏55.6克，得率為5.56％。乙醇提取后的殘渣1kg用蒸餾水8L室溫浸泡72h，不斷攪拌。浸泡液過濾，殘渣用蒸餾水4L再繼續(xù)浸泡24h，過濾，合并濾液，減壓濃縮，55℃烘干得水提浸膏114.2g，得率為11.42％。
旋復(fù)花(Inula britannica)花序1kg采用同樣方法提取，醇提物得率為5.04％，水提物得率為13.01％。
實施例2取按實施例1方法提取的二種旋復(fù)花的水提浸膏少許，溶于水中，進(jìn)行薄層層析比較。
層析板GF254硅膠板展開劑條件1 正丁醇∶甲醇∶水∶氨水＝3∶1∶1∶0.22 正丁醇∶甲醇∶水∶氨水＝2∶2∶1∶0.53 正丁醇∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝2∶1∶1∶2顯色條件熒光顯色法，λ＝254nm，365nm.
碘熏法(I2)層析結(jié)果
方法1的Rf值(采用條件1)Inula japinic水提物Inula britannica水提物Rf 1＝0.66±0.1(365nm) Rf 1＝0.66±0.1(365nm)Rf 2＝0.58±0.1(365，254nm，I2) Rf 2＝0.58±0.1(365，254nm，I2)Rf 3＝0.52±0.1(365nm)Rf 3＝0.49±0.1(254nm，I2) Rf 4＝0.49±0.1(254nm，I2)Rf 4＝0.48±0.1(365nm) Rf 5＝0.48±0.1(365nm)Rf 5＝0.37±0.1(I2) Rf 6＝0.37±0.1(I2)Rf 6＝0.27±0.1(I2) Rf 7＝0.27±0.1(I2)Rf 7＝0.20±0.1(I2) Rf 8＝0.20±0.1(I2)Rf 8＝0.12±0.1(365nm) Rf 9＝0.12±0.1(365nm)Rf 9＝0.04±0.02(254nm，I2) Rf 10＝0.04±0.02(254nm，I2)Rf 10＝0.00(254nm，I2) Rf 11＝0.00(254nm，I2)方法2的Rf值(采用條件2)Inula japinic水提物Inula britannica水提物Rf 1＝0.80±0.1(365nm) Rf 1＝0.80±0.1(365nm)Rf 2＝0.70±0.1(365nm，I2) Rf 2＝0.70±0.1(365nm，I2)Rf 3＝0.65±0.1(365nm) Rf 3＝0.65±0.1(365nm)Rf 4＝0.52±0.1(I2) Rf 4＝0.52±0.1(I2)Rf 5＝0.40±0.1(I2) Rf 5＝0.40±0.1(I2)Rf 6＝0.05±0.02(I2) Rf 6＝0.05±0.02(I2)Rf 7＝0.00(254nm，I2)Rf 7＝0.00(254nm，I2)
方法3的Rf值(采用條件3)Inula japinic水提物Inula britannica水提物Rf 1＝0.89±0.1(365nm)Rf 1＝0.87±0.1(365nm) Rf 2＝0.87±0.1(365nm)Rf 2＝0.76±0.1(365nm) Rf 3＝0.76±0.1(365nm)Rf 3＝0.73±0.1(254nm，I2) Rf 4＝0.73±0.1(254nm，I2)Rf 4＝0.61±0.1(365nm，I2) Rf 5＝0.61±0.1(365nm，I2)Rf 5＝0.42±0.1(I2) Rf 6＝0.42±0.1(I2)Rf 6＝0.28±0.1(I2) Rf 7＝0.28±0.1(I2)Rf7＝0.09±0.02(I2) Rf 8＝0.09±0.02(I2)Rf 8＝0.01(254nm，I2)Rf 9＝0.00(254nm，I2)層析結(jié)果表明二種旋復(fù)花植物水提物組成成分基本相同。另取標(biāo)準(zhǔn)旋復(fù)花藥材1g按實施例1方法制成對照藥材溶液，分別點在同一硅膠G254薄層板上展開。與對照藥材相比，呈相同斑點。
實施例3對二種旋復(fù)花的水提物進(jìn)行定性檢驗，分析結(jié)果如下Inula japinic水提物Inula britannica水提物1 碘化鉍鉀沉淀反應(yīng)(生物堿)陽性 陽性2 茚三酮顯色反應(yīng)(肽、氨基酸) 陽性 陽性3 三氧化鋁熒光顯色反應(yīng)(黃酮類)陽性 陽性4 α-萘酚顯色反應(yīng)(糖類) 陽性 陽性5 溴酚蘭顯色反應(yīng)(有機酸) 陽性 陽性6 三氯化鐵反應(yīng)(多酚和鞣質(zhì))陽性 陽性定性檢驗結(jié)果表明這二種旋復(fù)花水提物中均含有生物堿、肽、黃酮苷和糖類化合物，另外還含有機酸和鞣質(zhì)等多酚類化合物。
實施例450只昆明小鼠隨機分為正常對照組(10只)和待造模組(40只)。待造模組小鼠禁食24小時后(不禁水)，尾靜脈快速注射四氧嘧啶生理鹽水溶液，劑量為60mg·kg-1。72h后尾尖取血測定小鼠血糖，血糖值＞20.0mmol·L-1的小鼠被選為糖尿病小鼠，分成模型組(10只)(模型組和正常對照組給水)，旋復(fù)花(Inula japinic)水提物組(1g.kg-1，10只)(水提物的量按實施例1的水提物浸膏的量計算)，和gliclazide陽性藥組(40mg/kg，10只)。連續(xù)灌胃給藥18天，第7天測定血糖，第18天測定血糖。數(shù)據(jù)以X±SD表示，二組均數(shù)間差異用t檢驗進(jìn)行分析。結(jié)果表明旋復(fù)花水提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠具有明顯降血糖作用。
表1 旋復(fù)花水提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影響

數(shù)值＝平均值±S.D.，與模型組比較，*p＜0.05，***p＜0.001以上糖尿病小鼠給予旋復(fù)花水提物18天后，測定血糖，眼眶取血，處死。測定小鼠血清中總膽固醇、甘油三脂和糖基化白蛋白水平。數(shù)據(jù)以X±SD表示，二組均數(shù)間差異用t檢驗進(jìn)行分析。實驗結(jié)果表明該水提物具有顯著降低血漿中甘油三酯作用。
表2 旋復(fù)花水提物對四氧嘧啶糖尿病小鼠血漿中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和糖基化白蛋白(Fruc)水平的影響

數(shù)值＝平均值±SD.，與正常組相比，△p＜0.05，△△p＜0.01，△△△p＜0.001；與模型組相比，*p＜0.05.
實施例5正常昆明小鼠和糖尿病小鼠(四氧嘧啶模型)(均為雄性)禁食16小時后，正常鼠分為三組對照組；旋復(fù)花水提物組(1.0g/kg，po)；和二甲雙胍組(175mg/kg，po)。糖尿病小鼠同樣分為三組模型組；旋復(fù)花水提物(Inula japinic)組(1.0g/kg，po)(水提物的量按實施例1的水提浸膏的量計算)；和二甲雙胍組(175mg/kg，po)。每組小鼠為5只。給藥組分別預(yù)先1.0h給予水提物和二甲雙胍，然后測定各組小鼠血糖(0min)。每組小鼠口服葡萄糖水溶液(2g/kg)，測定給予后30min，60min，90min，150min及270min時血糖。結(jié)果表明旋復(fù)花水提物能明顯提高糖尿病小鼠對葡萄糖的耐受能力。
表3 旋復(fù)花水提物對糖尿病小鼠葡萄糖耐受能力的影響

與正常組相比，△p＜0.05，△△p＜0.01；與模型組相比，*p＜0.05。正＝正常鼠，旋＝旋復(fù)花水提物，二＝二甲雙胍，糖＝糖尿病鼠。
權(quán)利要求
1.一種制備旋復(fù)花(包括Inula japinica或者Inula britannica或者其組合)的水提取物的方法，包括獲得旋復(fù)花植物材料；用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料，獲得旋復(fù)花的水提取物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料包括(1)在適當(dāng)條件下用含水溶劑浸泡旋復(fù)花植物材料；(2)分離液相和固相；(3)任選地，重復(fù)步驟(1)和(2)一次或多次(例如重復(fù)1-數(shù)次、1-5次、1-2次、2-5次、3次、4次)；(4)任選地，合并液相；和(5)任選地，將由步驟(2)或者步驟(4)得到的液相濃縮。
3.權(quán)利要求1-2任一項的方法，其中所述旋復(fù)花植物材料是旋復(fù)花植物的地上部分，優(yōu)選花序。
4.權(quán)利要求1-3任一項的方法，其中所述含水溶劑是水或者含有有機溶劑的水溶液；其中有機溶劑可以是甲醇、乙醇、丙醇、丙酮或正丁醇或它們的任何組合。
5.權(quán)利要求1-4任一項的方法，其中在用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料之前用有機溶劑如乙醇如95％的乙醇提取該旋復(fù)花植物材料。
6.用含水溶劑提取旋復(fù)花植物材料獲得的旋復(fù)花水提取物。
7.可用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的旋復(fù)花水提取物。
8.一種組合物，其含有權(quán)利要求6-7任何一項的旋復(fù)花水提取物，任選地，還含有賦形劑或者載體；優(yōu)選地，所述組合物是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
9.權(quán)利要求6-7任何一項的旋復(fù)花水提取物或者權(quán)利要求8的組合物在制備用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的藥物中的用途。
10.旋復(fù)花植物材料或者其提取物(優(yōu)選水提取物)用于生產(chǎn)可用于降低血糖或者降低血脂或者治療高脂血癥或者治療糖尿病或者提高糖尿病患者對葡萄糖的耐受能力的組合物中的用途，其中優(yōu)選的是，所述組合物是藥物組合物、保健組合物、食品組合物、或者飲料組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用含水溶劑提取旋復(fù)(覆)花(包括Inula japinica和Inula britannica)植物得到的水提取物、其制備方法、含有這種水提取物的組合物以及水提取物和組合物用于預(yù)防和治療糖尿病和高脂血癥的用途。水提物包含生物堿、黃酮苷、肽和糖類。實驗表明提取物無毒，具有明顯的降血糖和降血脂功效，能提高對葡萄糖的耐受能力。
文檔編號A61P3/00GK1861104SQ20051006954
公開日2006年11月15日 申請日期2005年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月13日
發(fā)明者單俊杰, 趙毅民, 楊明, 任晉瑋 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所