專利名稱：吡唑并[4,3－c]喹啉－3－酮化合物、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮化合物，其制備方法，含它們的藥用組合物以及作為腺苷受體拮抗劑用于制備治療或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能缺陷、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、帕金森綜合癥、抑郁癥、中風或HIV所致癡呆后遺癥，哮喘、急性呼吸窘迫癥的藥物的用途。
背景技術(shù)：
腺苷是一種重要的內(nèi)源性生理功能調(diào)節(jié)劑，涉及到腦、心臟和腎臟中的多個調(diào)控系統(tǒng)，腺苷對生理功能的調(diào)節(jié)作用通過A1、A2a、A2b和A3等四種G蛋白偶連受體亞型介導。腺苷受體的活化可引起許多生理反應(yīng)，包括腎血流量減少，腎小球過濾率減少，以及提高腎臟中鈉的重吸收。此外，腺苷受體在病理過程中同樣產(chǎn)生重要作用。腺苷受體拮抗劑在治療和預(yù)防中具有廣泛應(yīng)用，包括但不局限于，充血性心衰，心肺復蘇，出血性休克，及其心臟和循環(huán)障礙；中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，如帕金森綜合癥、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷；呼吸障礙如哮喘、急性呼吸綜合癥；許多使用傳統(tǒng)利尿劑治療的疾病，包括急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓。其它可用腺苷受體拮抗劑治療的疾病包括肝臟硬化所致腹腔積液、新生兒呼吸暫停。此外，高選擇性腺苷A1受體拮抗劑用于利尿明顯優(yōu)于傳統(tǒng)利尿劑，除具有利尿、利鈉外，對血鉀沒有影響，能減少由傳統(tǒng)利尿劑引起的腎小球過濾率下降，具有腎功能保護作用，因此適用于水腫狀態(tài)，包括心衰、肝硬化導致的水腫和腹腔積液。
文獻報道許多腺苷受體拮抗劑具有三環(huán)芳香結(jié)構(gòu)，J.Med.Chem.2000，43，1158～1164描述了1，2，4-三唑[4，3-a]喹喔啉-1-酮類化合物具有腺苷受體拮抗活性。J.Med.Chem.2000，43，3118～3124描述了2-芳基吡唑[3，4-c]喹啉類化合物具有腺苷受體拮抗活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是尋找并開發(fā)能選擇性作用于腺苷A1受體的非黃嘌呤類小分子化合物，其可用于治療和/或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、帕金森綜合癥、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷，哮喘，急性呼吸窘迫癥等病癥。
申請人合成了一系列結(jié)構(gòu)新穎的吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮類化合物，并出人意料地發(fā)現(xiàn)具有下面通式I的化合物對腺苷A1受體具有高親和力。特別地，申請人發(fā)現(xiàn)，其中吡唑環(huán)上的3位羰基能顯著提高受體親合力，而缺省3位羰基的結(jié)構(gòu)類似物幾乎沒有受體結(jié)合活性，同時2位芳基對提高化合物的溶解性有重要作用，進而影響化合物的生物活性。
因此，本發(fā)明第一個方面涉及式I化合物或其可藥用鹽 其中R1是氫，C3～C8直鏈或支鏈烷基，C3～C8直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基，C5～C10環(huán)烷基，C5～C10含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)或芳基，所述的烷基或雜環(huán)未被取代，或被選自下面的一個或多個基團所取代C1～C3直鏈烷基，C5～C6環(huán)烷基，C5～C6含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)或芐基，其中所述的直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基是指烷基的末端含有N-甲基、N，N-二甲基、N，N-二乙基或O-甲基等取代基，或烷基的直鏈或支鏈中的一個亞甲基(CH2)被氮原子或氧原子所取代；所述的含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)是指環(huán)系中含有一個氮原子或氧原子或硫原子、或同時含有兩個氮原子、一個氮原子和氧原子或一個氮原子和硫原子的飽和環(huán)烷基；各個R2相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；各個R3相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；n為1或2，當n為2時，R3為間位取代。
本發(fā)明的第二個方面涉及制備上述式I化合物的方法，其包括以鄰氨基苯甲酸類化合物為起始原料合成喹啉環(huán)后再與苯肼類化合物縮合構(gòu)建吡唑環(huán)等步驟。
本發(fā)明第三個方面涉及藥物組合物，其中包括至少一種式I化合物或其藥用鹽以及藥用載體或賦形劑。
本發(fā)明第四個方面涉及至少一種式I化合物或其藥用鹽用于制備治療或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、帕金森綜合癥、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷，哮喘、急性吸呼窘迫癥等病癥的藥物的用途。
本發(fā)明的第五個方面涉及下面通式VII所示的吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮化合物，其為合成上述式I化合物的關(guān)鍵中間產(chǎn)物 其中R2和R3的定義同式I化合物。
本發(fā)明的第六個方面涉及上述通式VII所示的吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮化合物用于制備治療或預(yù)防與腺苷受體相關(guān)疾病的藥物的用途。
本發(fā)明還涉及治療或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、帕金森綜合征、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷、哮喘、急性呼吸窘迫癥等病癥的方法，包括給予有此需要的患者治療有效劑量的式I或式VII化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明中的術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴、碘。
根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，本發(fā)明化合物為具有下式I的化合物或其可藥用鹽 其中R1是氫，C3～C8直鏈或支鏈烷基，C3～C8直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基，C5～C10環(huán)烷基，C5～C10含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)，或芳基，所述的烷基或雜環(huán)未被取代，或被選自下面的一個或多個基團所取代C1～C3直鏈烷基，C5～C6環(huán)烷基，C5～C6含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)或芐基，其中所述的直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基是指烷基的末端含有N-甲基、N，N-二甲基、N，N-二乙基或O-甲基等取代基，或烷基的直鏈或支鏈中的一個亞甲基被氮原子或氧原子所取代；所述的含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)是指環(huán)系中含有一個氮原子或氧原子或硫原子、同時含有兩個氮原子、一個氮原子和氧原子、一個氮原子和硫原子的飽和環(huán)烷基，例如哌啶基、嗎啉基、四氫呋喃基、吡咯烷基等；各個R2相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；各個R3相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；
n為1或2，當n為2時，R3為間位取代。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明式I化合物或其藥用鹽優(yōu)選下面的化合物2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3，5-二氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氨苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-[N-(2-甲氨基)乙基氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-[N-(2-二甲氨基)乙基氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-[N-[2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-甲氧基苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；
2-(2，4-二氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；和2-(3，5-二氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括無機或有機酸鹽，其中包括但不限于鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硝酸鹽，硫酸鹽，硫氫酸鹽，磷酸鹽，磷酸氫鹽，乙酸鹽，丁酸鹽，草酸鹽，三甲基乙酸鹽，乙二酸鹽，藻酸鹽，羥乙酸鹽，乳酸鹽，丙酮酸鹽，乙醇酸鹽，檸檬酸鹽，酒石酸鹽，丙二酸鹽，琥珀酸鹽，馬來酸鹽，富馬酸鹽，三氟乙酸鹽，苦味酸鹽，天冬氨酸鹽，葡萄糖酸鹽，苯甲酸鹽，水楊酸鹽，對氨基水楊酸鹽，抗壞血酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，苯磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽等。
本發(fā)明化合物、衍生物和可藥用鹽可以形成溶劑化物，例如水合物，醇合物等。本發(fā)明化合物還可以是前藥或可以在體內(nèi)代謝變化后釋放出活性成分的形式。選擇和制備適當?shù)那八幯苌锸潜绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知的技術(shù)。
本發(fā)明的式(I)化合物或其藥用鹽可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法合成。
具體來說，通式(I)化合物有3個環(huán)，可以從苯環(huán)出發(fā)，先合成喹啉環(huán)，然后再構(gòu)建吡唑環(huán)。至于4位取代氨基，可以構(gòu)建吡唑環(huán)之前完成，也可以在合成好吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮母環(huán)后，再用硅烷化-胺化反應(yīng)在4位引入取代氨基。
例如，所述方法可以包括如下步驟(1)使具下式的鄰氨基苯甲酸 其中，R2定義同上述式I，與光氣、雙光氣或三光氣反應(yīng)，得到式II所示化合物
其中R2的定義同上述式I；(2)使式II所示的化合物與丙二酸酯類化合物反應(yīng)，得到式III所示化合物 其中R2的定義同上述式I；(3)使式III所示化合物與三氯氧磷、五氯化磷等氯化劑反應(yīng)，得到式IV所示化合物 其中R2的定義同上述式I；(4)使式IV所示化合物與其中R1定義同上述式I的通式R1NH2的胺類化合物在喹啉環(huán)2-位選擇性地進行親核取代反應(yīng)，得到式V所示化合物
其中R1和R2的定義同上述式I；(5)使式V所示化合物與其中R3定義同上述式I的具有下列通式苯肼類化合物反應(yīng)， 得到式I的化合物；或者，在上述步驟(3)的基礎(chǔ)上，(4)使式IV化合物 與叔丁胺反應(yīng)，得到式X化合物 其中R2定義同上述式I；(5)使式X所示化合物與三氟乙酸反應(yīng)，得到式XI所示化合物
其中R2的定義同上述式I；(6)使式XI所示化合物與其中R3定義同上述式I的具有下列通式的苯肼類化合物反應(yīng)， 得到上述式I的化合物。
更具體地，可以采用如下所示的合成路線1-4合成本發(fā)明的式(I)化合物以商品化的鄰氨基苯甲酸類化合物(購自歐洲ACROS公司、或FLUKA公司、或美國ALDRICH公司)為起始原料，在無水四氫呋喃、或無水二氧六環(huán)等溶劑中與光氣、雙光氣或三光氣加熱回流6～8小時，得到式(II)靛紅酐類化合物。式(II)化合物在NaH、甲醇鈉、叔丁醇鉀或氨基鈉等堿性條件下，于干燥DMF、N，N-二甲基乙酰胺(DMA)等溶劑中，與丙二酸二乙酯或丙二酸二甲酯加熱回流3～8小時進行縮合反應(yīng)，得到式(III)表示的2，4-二羥基喹啉-3-羧酸酯類化合物。然后用POCl3/PCl5處理，在100～120℃加熱1～5小時，轉(zhuǎn)化成式(IV)表示的2，4-二氯喹啉-3-羧酸酯類化合物。式(IV)化合物在N2保護下，與商品化的胺類化合物在無水甲醇或無水乙醇溶劑中加熱回流4～10小時進行取代反應(yīng)，得到式(V)所示的2-(N-烷基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸酯類化合物。最后，將式(V)化合物與各種商品化的苯肼類化合物(購自歐洲ACROS公司、或FLUKA公司、或美國ALDRICH公司)在無水乙醇、無水乙二醇單甲醚、無水乙二醇單乙醚、無水乙二醇二甲醚或無水乙二醇二乙醚等溶劑中，于N2保護下加熱回流18～30小時進行親核取代反應(yīng)，同時環(huán)合得到式(I)目標化合物。根據(jù)需要，式(I)目標化合物還可以與酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化為其可藥用鹽。見合成路線1 合成路線1也可以采用先合成吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮母環(huán)，再在母環(huán)4-位引入烷氨基取代的方法合成式(I)目標化合物。具體地，上述合成路線1中所述的式(IV)化合物2，4-二氯喹啉-3-羧酸乙酯類化合物經(jīng)醋酸鈉/醋酸加熱回流12小時水解為式(VI)所示的2-羥基-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯類化合物。式(VI)化合物與各種商品化的苯肼類化合物(購自歐洲ACROS公司、FLUKA公司或美國ALDRICH公司)在無水乙醇、無水乙二醇單甲醚、無水乙二醇單乙醚、無水乙二醇二甲醚或無水乙二醇二乙醚等溶劑中，于N2保護下加熱回流18～30小時進行親核取代反應(yīng)，同時環(huán)合得到式(VII)所示的化合物。然后，在六甲基二硅烷胺(HMDS)/對甲苯磺酸作用下，式(VII)化合物中的4位羥基硅烷化，同時與商品化的胺類化合物在無水甲醇或無水乙醇溶劑中加熱回流4～10小時進行取代反應(yīng)，生成式(I)目標化合物。見合成路線2
合成路線2或者使上述合成路線2中的式(VII)化合物經(jīng)POCl3/PCl5處理，在100～120℃加熱1～5小時，轉(zhuǎn)化成式(VIII)所示的化合物。式(VIII)化合物在N2保護下，與商品化的胺類化合物在無水甲醇或無水乙醇溶劑中加熱回流4～10小時進行取代反應(yīng)，形成式(IX)所示的化合物。式(IX)化合物在NaOH或KOH等堿性甲醇溶液中回流4～6小時轉(zhuǎn)化成式(I)目標化合物。見合成路線3
合成路線3當式(I)化合物中4位為氨基取代即R1＝H時，可采用以下合成路線4實現(xiàn)其合成。使合成路線2中的式(IV)化合物在N2保護下，與叔丁胺在無水甲醇或無水乙醇溶劑中加熱回流4～10小時進行取代反應(yīng)，形成式(X)所示的2-(N-叔丁基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯類化合物。式(X)化合物在三氟乙酸酸性條件下室溫反應(yīng)2～6小時脫去叔丁基，形成式(XI)所示的2-氨基-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯類化合物。最后，將式(XI)化合物與各種商品化的苯肼類化合物(購自歐洲ACROS公司、FLUKA公司或美國ALDRICH公司)在無水乙醇、無水乙二醇單甲醚、無水乙二醇單乙醚、無水乙二醇二甲醚或無水乙二醇二乙醚等溶劑中，于N2保護下加熱回流18～30小時進行親核取代反應(yīng)，同時環(huán)合得到式(I)目標化合物。根據(jù)需要，式(I)目標化合物還可以與酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化為其可藥用鹽。見合成路線4
由于本發(fā)明化合物具有腺苷A1受體選擇性親和力，其可用于治療或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、帕金森綜合征、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷、哮喘、急性呼吸窘迫癥等病癥。
本發(fā)明的活性化合物可以本身形式給藥的，或者以藥物組合物形式給藥，其中活性化合物與一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑混合。按照本發(fā)明使用的藥物組合物通常是按常規(guī)方式配制的，使用一種或多種生理學上可接受的載體，包含賦形劑和助劑，它們有利于將活性化合物加工成可以在藥學上使用的制劑。適當?shù)闹苿┤Q于所選擇的給藥途徑，可以按照本領(lǐng)域熟知的常識進行制造。
可用于本發(fā)明的可藥用載體包括但不限于離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白如人血清蛋白，緩沖物質(zhì)如磷酸鹽，甘油，山梨酸，山梨酸鈉，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠態(tài)氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蜂蠟，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物和羊毛脂。
本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的加成鹽或水合物可以利用各種給藥途徑或方式釋放至患者。適合的給藥途徑包括但不限于適皮、口服、直腸、經(jīng)粘膜、腸內(nèi)和腸胃外給藥，腸胃外給藥包括肌內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)注射。
本發(fā)明所用的術(shù)語“給藥”包括所有直接與間接釋放化合物到其預(yù)期作用部位的手段。
因此，根據(jù)給藥途徑的不同，本發(fā)明化合物可以制成任何適合于給藥的形式，其包括但不限于片劑、膠囊、氣霧劑、栓劑、用于食入或注射的液體劑型、眼或耳滴劑、舌下含片、營養(yǎng)增補劑或局部制劑。
可以口服的藥物制劑包括膠囊劑和片劑等。病人吞咽有困難時，也可以采用舌下片或者其他非吞咽的方式給藥。
本發(fā)明化合物也可以配制用于腸胃外給藥或者透皮給藥或者經(jīng)粘膜給藥?；蛘卟捎盟▌┗蛘呗裰矂┑姆绞浇o藥。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，在本發(fā)明化合物的基礎(chǔ)上，可以采用合適的藥物釋放系統(tǒng)(DDS)，以得到更有利的效果。
給藥方式以及有效劑量的選擇將根據(jù)所治療的疾病而異。給藥方式和劑量的確定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。
本發(fā)明化合物的單位劑型通常含有0.1至99重量％活性物質(zhì)，更優(yōu)選5至75重量％活性物質(zhì)。對于口服給藥，單位劑型可以含有1mg至1g本發(fā)明化合物或其可藥用鹽，更優(yōu)選為10mg至500mg，更優(yōu)選50mg與400mg之間，最優(yōu)選為100mg至200mg。對于腸胃外給藥，優(yōu)選含有0.1至25mg的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明所述的化合物或其可藥用鹽可以單獨給藥或與其他一種或多種本發(fā)明化合物聯(lián)合給藥，還可以與其它已知的腺苷A1受體拮抗劑聯(lián)合的形式給藥。
具體實施例方式
下面的實施例用來說明本發(fā)明，但對本發(fā)明不構(gòu)成任何限制。
實施例12-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮的合成1.1 靛紅酐的合成將50g(0.36mol)鄰氨基苯甲酸溶于200ml無水四氫呋喃，滴加溶有39.5g(0.12mol)三光氣的無水四氫呋喃溶液，加料完畢，室溫攪拌反應(yīng)10min后，升溫回流反應(yīng)8hr，冰水冷卻，濾集固體，無水乙醇洗滌，干燥得類白色固體，重41.8g，m.p.251℃(dec.)，收率71.2％。
1.2 2，4-二羥基喹啉-3-羧酸乙酯的合成將125g(0.78mol)丙二酸二乙酯溶于干燥250ml DMF中，室溫下分批加入9.4g(0.31mol)含量80％的氫化鈉，加料完畢，70℃反應(yīng)30min，加入溶有41.8g(0.26mol)靛紅酐的DMF溶液250ml，升溫至120℃反應(yīng)5hr，冷卻至室溫，濾集固體，加適量水溶解。另將DMF溶液減壓濃縮，加入120ml水稀釋，合并二部分水溶液，冰水冷卻下，用2mol.L-1鹽酸酸化至pH3～4，析出固體，靜置、濾集固體，水洗、干燥，乙酸乙酯重結(jié)晶，得淡黃色產(chǎn)物，重44克，m.p.206-208℃，收率72.7％。
1.3 2，4-二氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成28g(0.12mol)2，4-二羥基喹啉-3-羧酸乙酯與160ml三氯氧磷加入反應(yīng)瓶中，充分攪拌，加入5.0g五氯化磷，100℃反應(yīng)1hr，115℃反應(yīng)2hr，減壓下蒸除過量的三氯氧磷，將殘留物倒入冰水中，二氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，所得固體用乙酸乙酯重結(jié)晶，得淡黃色固體，重26.1g，m.p.100-101℃，收率80.5％。
1.4 2-(N-正丁基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將10.8g(0.04mol)2，4-二氯喹啉-3-羧酸乙酯、11.7g(0.16mol)正丁胺和120ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)8hr，減壓濃縮。柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)殘留物，得產(chǎn)物7.8g，收率63.2％。
1.5 2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮的合成將0.46g(1.5mmol)2-(N-正丁基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯溶于30ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.73g(4.5mmol)3-氟苯肼、三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.16g，m.p.204-206℃，收率30.8％。MS(m/z，C20H19FN4O)351(M+1，ESI)；1H NMR(DMSO-d6，δ)11.54(s，1H，NNH)，8.48(寬峰，1H，NH)，6.85-8.20(m，8H，ArH)，4.37(m，2H，NCH2)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例22-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氟苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.55(s，1H，NNH)，8.52(寬峰，1H，NH)，6.83-8.21(m，8H，ArH)，4.39(m，2H，NCH2)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例32-(3-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氯苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.34(s，1H，NNH)，8.46(寬峰，1H，NH)，6.82-8.18(m，8H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例42-(4-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氯苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.42(s，1H，NNH)，8.48(寬峰，1H，NH)，6.85-8.26(m，8H，ArH)，4.36(m，2H，NCH2)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例52-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.36(s，1H，NNH)，8.46(寬峰，1H，NH)，6.79-8.12(m，8H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，0.89-1.65(m，7H，C3H7)。
實施例62-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.34(s，1H，NNH)，8.45(寬峰，1H，NH)，6.82-8.19(m，8H，ArH)，4.35(m，2H，NCH2)，0.89-1.63(m，7H，C3H7)。
實施例72-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮
7.1 2-(N-環(huán)戊基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將9.5g(0.035mol)2，4-二氯喹啉-3-羧酸乙酯、11.9g(0.14mol)環(huán)戊胺和120ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)8hr，減壓濃縮。柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)殘留物，得產(chǎn)物8.1g，收率72.8％。
7.2 2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮的合成將0.61g(1.9mmol)2-環(huán)戊氨基-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯溶于50ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.95g(5.7mmol)3-氟苯肼、0.58g(5.7mmol)三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.14g，m.p.232-4℃，收率28.7％。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.61(s，1H，NNH)，6.88-8.31(m，8H，ArH)，5.87(寬峰，1H，NH)，4.37(m，1H，NCH)，1.61-1.77(m，8H，CH2)。
實施例82-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例7中7.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氟苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.59(s，1H，NNH)，6.85-8.30(m，8H，ArH)，5.86(寬峰，1H，NH)，4.35(m，1H，NCH)，1.60-1.77(m，8H，CH2)。
實施例92-(3-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例7中7.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氯苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.56(s，1H，NNH)，6.80-8.28(m，8H，ArH)，5.85(寬峰，1H，NH)，4.36(m，1H，NCH)，1.59-1.75(m，8H，CH2)。
實施例102-(4-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例7中7.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氯苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.57(s，1H，NNH)，6.81-8.28(m，8H，ArH)，5.85(寬峰，1H，NH)，4.33(m，1H，NCH)，1.59-1.75(m，8H，CH2)。
實施例112-(3-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例7中7.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.53(s，1H，NNH)，6.79-8.26(m，8H，ArH)，5.83(寬峰，1H，NH)，4.35(m，1H，NCH)，1.60-1.75(m，8H，4×CH2)。
實施例122-(4-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例7中7.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.54(s，1H，NNH)，6.80-8.27(m，8H，ArH)，5.83(寬峰，1H，NH)，4.36(m，1H，NCH)，1.61-1.76(m，8H，4×CH2)。
實施例132-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮13.1 6，7-二甲氧基靛紅酐的合成將23g(0.12mol)2-氨基-4，5二甲氧基苯甲酸溶于100ml無水四氫呋喃，滴加溶有12.8g(0.043mol)三光氣的無水四氫呋喃溶液，加料完畢，室溫攪拌反應(yīng)10min后，升溫回流反應(yīng)8hr，冰水冷卻，濾集固體，無水乙醇洗滌，干燥得粉紅色固體，重23.6g，m.p.256℃(dec.)，收率88.6％。
13.2 2，4-二羥基-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯的合成將31g(0.2mol)丙二酸二乙酯溶于干燥120ml DMF中，室溫下分批加入2.2g(0.073mol)含量80％的氫化鈉，加料完畢，70℃反應(yīng)30min，加入溶有14.6g(0.066mol)6，7-二甲氧基靛紅酐的DMF溶液120ml，升溫至120℃反應(yīng)5hr，冷卻至室溫，濾集固體，加適量水溶解。另將DMF溶液減壓濃縮，加入120ml水稀釋，合并二部分水溶液，冰水冷卻下，用2mol.L-1鹽酸酸化至pH 3～4，析出固體，靜置、濾集固體，水洗、干燥，乙酸乙酯重結(jié)晶，得淡黃色產(chǎn)物，重10.2克，m.p.251℃(dec.)，收率52.7％。
13.3 2，4-二氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯的合成16.2g(0.055mol)2，4-二羥基-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯與50ml三氯氧磷加入反應(yīng)瓶中，充分攪拌，加入3.0g五氯化磷，100℃反應(yīng)1hr，115℃反應(yīng)2hr，減壓下蒸除過量的三氯氧磷，將殘留物倒入冰水中，二氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，所得固體用乙酸乙酯重結(jié)晶，得淡黃色固體，重13.8g，收率76.2％。
13.4 2-(N-環(huán)戊基氨基)-4-氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯的合成將7.8g(0.024mol)2，4-二氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯、6.2g(0.073mol)環(huán)戊胺和150ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)8hr，減壓濃縮。粗品用乙酸乙酯重結(jié)晶，得產(chǎn)物6.2g，收率67.0％。
13.5 2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮將0.40g(1.0mmol)2-(N-環(huán)戊基氨基)-4-氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯溶于40ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.65g(4.0mmol)3-氟苯肼、0.41g(4.0mmol)三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.16g，m.p.275℃(dec.)，收率38.1％。
MS(m/z，C23H23FN4O3)423(M+1，ESI)；1H NMR(DMSO-d6，δ)11.42(s，1H，NNH)，6.81-8.10(m，6H，ArH)，7.96(寬峰，1H，NH)，5.60-5.71(寬嶧，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.76-2.10(m，8H，CH2)。
實施例142-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氟苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.46(s，1H，NNH)，6.80-8.17(m，6H，ArH)，7.95(寬峰，1H，NH)，5.75(寬峰，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.73-2.10(m，8H，CH2)。
實施例152-(3-氯苯基)-4-N-(環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.39(s，1H，NNH)，6.82-8.10(m，6H，ArH)，7.95(寬峰，1H，NH)，5.60-5.70(寬峰，1H，CH)，3.84(s，6H，OCH3)，1.73-2.10(m，8H，CH2)。
實施例162-(4-氯苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.40(s，1H，NNH)，6.79-8.09(m，6H，ArH)，7.95(寬峰，1H，NH)，5.61-5.73(寬峰，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.70-2.11(m，8H，CH2)。
實施例172-(3-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.48(s，1H，NNH)，6.80-8.22(m，6H，ArH)，8.08(寬峰，1H，NH)，5.61-5.72(寬峰，1H，CH)，3.86(s，6H，OCH3)，1.63-2.09(m，8H，CH2)。
實施例182-(4-溴苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.42(s，1H，NNH)，6.81-8.10(m，6H，ArH)，7.96(寬峰，1H，NH)，5.60-5.71(寬峰，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.76-2.10(m，8H，CH2)。
實施例192-(3，5-二氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例13中13.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3，5-二氟苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.52(s，1H，NNH)，8.07(寬峰，1H，NH)，6.81-7.89(m，5H，ArH)，3.86(s，6H，OCH3)，1.66-2.10(m，8H，CH2)。
實施例202-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮20.1 2-(N-正丁基氨基)-4-氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯的合成將6.3g(0.019m0l)2，4-二氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯、4.2g(0.057mol)正丁胺和100ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)8hr，減壓濃縮。柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝30∶1)殘留物，4.3g，收率61.4％。
20.2 2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮將0.37g(1.0mmol)2-(N-正丁基氨基)-4-氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯溶于40ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.49g(4.0mmol)3-氟苯肼、0.41g(4.0mmol)三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.19g，m.p.281℃(dec.)，收率46.3％。MS(m/z，C22H23FN4O3)411(M+1，ESI)；1H NMR(DMSO-d6，δ)11.34(s，1H，NNH)，8.46(寬峰，1H，NH)，6.82-8.18(m，6H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，3.85(s，6H，OCH3)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例212-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例20中20.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氟苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.29(s，1H，NNH)，8.50(寬峰，1H，NH)，6.82-8.22(m，6H，ArH)，4.31(m，2H，NCH2)，3.85(s，6H，OCH3)，0.91-1.68(m，7H，C3H7)。
實施例222-(3-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例20中20.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.28(s，1H，NNH)，8.44(寬峰，1H，NH)，6.80-8.18(m，6H，ArH)，4.30(m，2H，NCH2)，3.85(s，6H，OCH3)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例232-(4-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例20中20.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.30(s，1H，NNH)，8.46(寬峰，1H，NH)，6.82-8.18(m，6H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，3.86(s，6H，OCH3)，0.87-1.65(m，7H，C3H7)。
實施例242-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例20中20.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.36(s，1H，NNH)，8.44(寬峰，1H，NH)，6.75-8.06(m，6H，ArH)，5.64-5.73(寬峰，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.76-2.11(m，7H，CH2)。
實施例252-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例20中20.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.32(s，1H，NNH)，8.14(寬峰，1H，NH)，6.78-8.09(m，6H，ArH)，5.62-5.71(寬峰，1H，CH)，3.85(s，6H，OCH3)，1.78-2.11(m，7H，CH2)。
實施例262-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮26.1 6-氯靛紅酐的合成將43g(0.25mol)2-氨基-5-氯苯甲酸溶于180ml無水四氫呋喃，滴加溶有25.5g(0.086mol)三光氣的無水四氫呋喃溶液，加料完畢，室溫攪拌反應(yīng)10min后，升溫回流反應(yīng)8hr，冰水泠卻，濾集固體，無水乙醇洗滌，干燥得類白色固體，重41.5g，m.p.284-286℃(dec.)，收率84.3％。
26.2 2，4-二羥基-6-氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將86g(0.2mol)丙二酸二乙酯溶于干燥200ml DMF中，室溫下分批加入6.0g(0.20mol)含量80％的氫化鈉，加料完畢，70℃反應(yīng)30min，加入溶有35g(0.18mol)6-氯靛紅酐的DMF溶液200ml，升溫至120℃反應(yīng)5hr，冷卻至室溫，濾集固體，加適量水溶解。另將DMF溶液減壓濃縮，加入220ml水稀釋，合并二部分水溶液，冰水冷卻下，用2mol.L-1鹽酸酸化至pH3～4，析出固體，靜置、濾集固體，水洗、干燥，乙酸乙酯重結(jié)晶，得淡黃色產(chǎn)物，重33克，m.p.234-6℃，收率68.7％。
26.3 2，4，6-三氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成26.8g(0.1mol)2，4-二羥基-6-氯喹啉-3-羧酸乙酯與130ml三氯氧磷加入反應(yīng)瓶中，充分攪拌，加入4.0g五氯化磷，100℃反應(yīng)1hr，115℃反應(yīng)2hr，減壓下蒸除過量的三氯氧磷，將殘留物倒入冰水中，二氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，所得固體用無水乙醇重結(jié)晶，得產(chǎn)物15.2g，收率50.2％。
26.4 2-正丁氨基-4，6-二氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將10.1g(0.033mol)2，4，6-三氯喹啉-3-羧酸乙酯、7.3g(0.10mol)正丁胺和150ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)8hr，減壓濃縮。柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)殘留物，得產(chǎn)物6.5g，收率57.8％。
26.5 2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮將0.34g(1.0mmol)2-(N-正丁基氨基)-4，6-二氯喹啉-3-羧酸乙酯溶于40ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.49g(3.0mmol)3-氟苯肼、0.31g(3.0mmol)三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.15g，m.p.271(dec.)℃，收率38.9％。MS(m/z，C20H18ClFN4O)385(M+1，ESI)。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.44(s，1H，NNH)，8.46(寬峰，1H，NH)，6.87-8.21(m，7H，ArH)，4.35(m，2H，NCH2)，0.89-1.69(m，7H，C3H7)。
實施例272-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例26中26.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氟苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.54(s，1H，NNH)，8.48(寬峰，1H，NH)，6.85-8.20(m，8H，ArH)，4.37(m，2H，NCH2)，0.89-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例282-(3-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例26中26.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.42(s，1H，NNH)，8.45(寬峰，1H，NH)，6.85-8.21(m，7H，ArH)，4.37(m，2H，NCH2)，0.88-1.67(m，7H，C3H7)。
實施例292-(4-氯苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例26中26.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-氯苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.43(s，1H，NNH)，8.44(寬峰，1H，NH)，6.86-8.20(m，7H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，0.89-1.68(m，7H，C3H7)。
實施例302-(3-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例26中26.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.53(s，1H，NNH)，8.49(寬峰，1H，NH)，6.96-8.20(m，7H，ArH)，4.33(m，2H，NCH2)，0.89-1.68(m，7H，C3H7)。
實施例312-(4-溴苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例26中26.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.64(s，1H，NNH)，8.49-8.45(寬峰，1H，NH)，6.89-8.35(m，7H，ArH)，4.36(m，2H，NCH2)，0.89-1.65(m，7H，C3H7)。
實施例322-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼。
1H NMR(DMSO-d6，δ)11.68(s，1H，NNH)，6.88-8.45(m，7H，ArH)，7.95(寬峰，1H，NH)，5.90(寬峰，1H，CH)，1.59-2.07(m，8H，CH2)。
實施例332-(3-氟苯基)-4-[N-(2-甲氨基)乙基氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼，而所用胺為2-甲氨基乙胺。MS(m/z，C19H18FN5O)351(M+1，ESI)。1HNMR(DMSO-d6，δ)11.79(s，1H，NNH)，8.64-8.73(寬峰，1H，NH)，6.96-8.28(m，8H，ArH)，4.61(m，2H，NCH2)，3.30(d，2H，NCH2)，2.65(s，3H，CH3)。
實施例342-(3-氟苯基)-4-[N-(2-二甲氨基)乙基氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼，而所用胺為2-二甲氨基乙胺。MS(m/z，C20H20FN5O)365(M+1，ESI)。1HNMR(DMSO-d6，δ)11.63(s，1H，NNH)，8.60-8.71(寬峰，1H，NH)，6.86-8.26(m，8H，ArH)，4.57(m，2H，NCH2)，2.65(d，2H，NCH2)，2.21(s，6H，CH3)。
實施例352-(3-氟苯基)-4-[N-[2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基]吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼，而所用胺為2-(1-吡咯烷基)乙胺。MS(m/z，C22H22FN5O)392(M+1，ESI)。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.63(s，1H，NNH)，8.70-8.71(寬峰，1H，NH)，6.93-8.35(m，8H，ArH)，4.72(m，2H，NCH2)，3.52-3.69(m，4H，CH2)，3.10(m，2H，NCH2)，1.89-2.01(m，4H，CH2)。
實施例362-(3-氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮36.1 2-(N-叔丁基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將5.8g(0.022mol)2，4-二氯喹啉-3-羧酸乙酯、6.4g(0.088mol)叔丁胺和80ml無水甲醇加熱回流反應(yīng)6hr，減壓濃縮。加入100ml冰水，乙酸乙酯提取三次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，得油狀殘留物，5.3g，m.p.118-120℃，收率83.1％。
36.2 2-氨基-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯的合成將5.3g(0.017mol)2-(N-叔丁基氨基)-4-氯喹啉-3-羧酸乙酯、100ml三氟乙酸和120ml二氯甲烷室溫反應(yīng)4hr，傾入400ml冰水中，分出二氯甲烷，水液用5mol.L-1堿化至pH10，二氯甲烷提取三次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮，粗品產(chǎn)物用乙酸乙酯重結(jié)晶，得類白色固體3.6g，收率79.1％。
36.3 2-(3-氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例1中1.5方法制備該化合物，MS(m/z，C16H11FN4O)294(M，EI)。1H NMR(DMSO-d6，δ)11.00(s，1H，NNH)，6.90-8.25(m，8H，ArH)，8.80(寬峰，NH2)。
實施例372-(4-甲氧基苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例36方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-甲氧基苯肼。1H NMR(DMSO-d6，δ)12.32(s，1H，NNH)，6.95-8.20(m，8H，ArH)，8.50(寬峰，NH2)，3.80(s，3H，OCH3)。
實施例382-(2，4-二氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例36方法制備該化合物，所用取代苯肼為2，4-二氟苯肼。1HNMR(DMSO-d6，δ)11.70(s，1H，NNH)，8.09(寬峰，1H，NH)，7.84(寬峰，1H，NH)，6.89-8.28(m，7H，ArH)。
實施例392-(3，5-二氟苯基)-4-氨基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮按實施例36方法制備該化合物，所用取代苯肼為3，5-二氟苯肼。1HNMR(DMSO-d6，δ)11.69(s，1H，NNH)，8.07(寬峰，1H，NH)，7.82(寬峰，1H，NH)，6.87-8.26(m，7H，ArH)。
實施例402-(3-氟苯基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮及2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮的合成40.1 4-氯-3-乙氧羰基-6，7-二甲氧基喹啉-2(1H)-酮將6.6g(0.02mol)2，4-二氯-6，7-二甲氧基喹啉-3-羧酸乙酯，1.7g(0.02mol)無水乙酸鈉，40ml冰乙酸，加熱回流反應(yīng)10hr，反應(yīng)畢，傾入冰水中，析出白色固體，濾集，干燥，乙酸乙酯重結(jié)晶，得產(chǎn)物5.1g，m.p.176-178℃(dec.)，收率82.3％。
40.2 2-(3-氟苯基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮將0.46g(1.5mmol)4-氯-3-乙氧羰基-6，7-二甲氧基喹啉-2(1H)-酮溶于40ml無水乙醇，通N2保護，滴加溶有0.55g(4.5mmol)3-氟苯肼、0.46g(4.5mmol)三乙胺的無水乙醇溶液20ml，回流反應(yīng)24hr。減壓濃縮，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.17g，m.p.220℃(dec.)，收率46.6％。MS(m/z，C18H14FN3O3)356(M+1，ESI)；1H NMR(DMSO-d6，δ)12.32(s，1H，NNH)，7.84-6.72(m，6H，ArH)，5.50-5.30(寬峰，1H，CONH)，3.83-3.80(s，6H，OCH3)。
40.3 2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮將0.71g(2.0mmol)2-(3-氟苯基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮，5ml(21.7mmol)六甲基硅烷二胺(HMDS)，0.06g(0.32mmol)對甲苯磺酸和6ml正丁胺混合，通N2保護，攪拌，外溫120℃反應(yīng)60hr。減壓濃縮，向殘留物中加入20ml二氯甲烷，攪拌30min，濾除不溶物。減壓濃縮濾液，柱層層析分離(200-300目硅膠，洗脫劑二氯甲烷∶甲醇＝50∶1)殘留物，得產(chǎn)物0.31g，m.p.281℃，收率38％。
實施例412-(4-溴苯基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-溴苯肼。
MS(m/z，C18H14BrN3O3)401(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)12.12(s，1H，NNH)，7.90-6.81(m，6H，ArH)，3.85-3.81(s，6H，OCH3)，5.40-5.20(寬峰，1H，CONH)。
實施例422-(3-氟苯基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼。
MS(m/z，C16H10FN3O2)296(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)11.50(s，1H，NNH)，8.04-7.23(m，9H，ArH，CONH)。
實施例432-(3-溴苯基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。
MS(m/z，C16H10BrN3O2)357(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)11.31(s，1H，NNH)，8.02-7.13(m，9H，ArH，CONH)。
實施例442-(3-氟苯基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-氟苯肼。
MS(m/z，C16H9ClFN3O2)330(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)11.20(s，1H，NNH)，8.04-7.23(m，7H，ArH)，3.75-3.60(寬峰，1H，CONH)。
實施例452-(3-溴苯基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為3-溴苯肼。
MS(m/z，C16H9ClBrN3O2)392(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)11.21(s，1H，NNH)，8.05-7.23(m，7H，ArH)，3.70-3.50(寬峰，1H，CONH)。
實施例462-(2，4-二氟苯基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為2，4-二氟苯肼。
MS(m/z，C16H8ClF2N3O2)348(M+1，ESI)，1H NMR(DMSO-d6，δ)11.04(s，1H，NNH)，7.98-7.19(m，6H，ArH)，3.50-3.60(寬峰，1H，CONH)。
實施例472-(4-甲氧基苯基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮按實施例40.2方法制備該化合物，所用取代苯肼為4-甲氧基苯肼。
MS(m/z，C17H12ClN3O3)342(M+1，ESI)；1H NMR(DMSO-d6，δ)11.01(s，1H，NNH)，7.98-7.09(m，7H，ArH)，3.82(s，3H，OCH3)，3.8-3.60(寬峰，1H，CONH)。
實施例48本發(fā)明化合物的對腺苷A1受體的親和力體外受體競爭性結(jié)合實驗?zāi)さ鞍椎奶崛istar大鼠斷頭取腦，在冰浴中將全腦按1∶10(w/v)勻漿液在1000g、4℃條件下離心10分鐘。取上清液在13000g離心20分鐘。取沉淀用反應(yīng)液10ml重新懸浮，37℃水浴保溫30分鐘。在4℃條件下20000g離心10分鐘。取沉淀再用適量反應(yīng)液重懸。用考馬亮藍法測定蛋白濃度。將蛋白液稀釋至所需濃度(2mg/ml)備用。
放射配體競爭結(jié)合率實驗使用DMSO溶解被測藥物，并用pH7.4的Tris.HCl稀釋所需濃度；膜蛋白濃度為30μg/管；非標配體R-PIA溶液濃度30μmol.L-1?？偡磻?yīng)體積為300μL?？偨Y(jié)合管中加入反應(yīng)液100μL、同位素[3H]-DPCPX溶液100μL和膜蛋白100μL；非特異管中加入非標配體R-PIA溶液100μL、同位素[3H]-DPCPX溶液100μL和膜蛋白100μL；藥物管中加入藥物100μL、同位素[3H]-DPCPX溶液100μL和膜蛋白100μL。測定化合物的抑制百分率(IP)，然后對其中抑制百分率在90％以上的化合物使用非線性曲線法測定IC50值，然后根據(jù)Cheng-Prusoff方程計算出Ki值。如表1所示。
表1.部分化合物與腺苷A1受體結(jié)合的Ki值

由上述實驗結(jié)果可見，本發(fā)明化合物對腺苷A1受體表現(xiàn)出較強的親合力，受體親和力最高的化合物的Ki值能達到10-2nM的水平。
權(quán)利要求
1.通式I所示的吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮化合物及其可藥用的鹽 其中R1是氫，C3～C8直鏈或支鏈烷基，C3～C8直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基，C5～C10環(huán)烷基，C5～C10含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)，或芳基，所述的烷基或雜環(huán)未被取代，或被選自下面的一個或多個基團所取代C1～C3直鏈烷基，C5～C6環(huán)烷基，C5～C6含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)或芐基，其中所述的直鏈或支鏈含氮原子或氧原子烷基是指烷基的末端含有N-甲基、N，N-二甲基、N，N-二乙基或O-甲基取代基，或烷基的直鏈或支鏈中的一個亞甲基被氮原子或氧原子所取代；所述的含氮原子或氧原子或硫原子雜環(huán)是指環(huán)系中含有一個氮原子或氧原子或硫原子、同時含有兩個氮原子、一個氮原子和氧原子、一個氮原子和硫原子的飽和環(huán)烷基。各個R2相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；各個R3相同或不同，各自獨立地是氫、鹵素、甲基、甲氧基、三氟甲基；n為1或2，當n為2時，R3為間位取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-7，8-二甲氧基吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(3-氟苯基)-4-N-(環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；2-(4-氟苯基)-4-(N-正丁基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮；和2-(4-氟苯基)-4-(N-環(huán)戊基氨基)-8-氯吡唑并[4，3-c]喹啉-3-酮。
3.制備權(quán)利要求1式I的化合物的方法， 其中，R1，R2和R3的定義同權(quán)利要求1，該方法包括以下步驟(1)使具下式的鄰氨基苯甲酸 其中，R2定義同權(quán)利要求1，與光氣、雙光氣或三光氣反應(yīng)，得到式II所示化合物 其中R2的定義同權(quán)利要求1；(2)使式II所示的化合物與丙二酸酯類化合物反應(yīng)，得到式III所示化合物 其中R2的定義同權(quán)利要求1；(3)使式III所示化合物與三氯氧磷、五氯化磷等氯化劑反應(yīng)，得到式IV所示化合物 其中R2的定義同權(quán)利要求1；(4)使式IV所示化合物與其中R1定義同權(quán)利要求1的通式R1NH2的胺類化合物在喹啉環(huán)2-位選擇性地進行親核取代反應(yīng)，得到式V所示化合物 其中R1和R2的定義同權(quán)利要求1；(5)使式V所示化合物與其中R3定義同權(quán)利要求1的具有下列通式苯肼類化合物反應(yīng)， 得到式I的化合物；或者，在上述步驟(3)的基礎(chǔ)上，(4)使式IV化合物 與叔丁胺反應(yīng)，得到式X化合物 其中R2定義同權(quán)利要求1；(5)使式X所示化合物與三氟乙酸反應(yīng)，得到式XI所示化合物 其中R2的定義同權(quán)利要求1；(6)使式XI所示化合物與其中R3定義同權(quán)利要求1的具有下列通式的苯肼類化合物反應(yīng)， 得到上述式I的化合物。
4.藥物組合物，包括治療有效劑量的一種或多種權(quán)利要求1或2的化合物和可藥用載體或賦形劑。
5.權(quán)利要求1的化合物用于制備治療和/或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病、抑郁癥、中風或艾滋病引起的認知缺陷、呼吸障礙的藥物的用途。
6.權(quán)利要求5所述的用途，其中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病為帕金森綜合征。
7.權(quán)利要求5所述的用途，其中的呼吸障礙為哮喘或急性呼吸窘迫癥。
8.通式VII所示的吡唑并[4，3-c]喹啉-3，4-二酮化合物 其中，R2和R3的定義同權(quán)利要求1。
9.權(quán)利要求8的化合物用于制備治療或預(yù)防與腺苷受體相關(guān)痰病的藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I的吡唑并[4，3－c]喹啉－3－酮化合物或其可藥用鹽，式中各基團的限定如說明書所述，含有式I化合物的藥物組合物，其制備方法及其作為腺苷受體拮抗劑用于制備治療或預(yù)防急性和慢性腎衰竭、腎機能不全、高血壓、肝臟硬化所致腹腔積液、帕金森綜合征、抑郁癥、中風或HIV病毒所致癡呆，哮喘、急性呼吸窘迫癥的藥物的用途。
文檔編號A61P25/24GK1830978SQ200510051460
公開日2006年9月13日 申請日期2005年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月7日
發(fā)明者李偉章, 王好山, 王勃, 張城, 惲榴紅, 李錦 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院毒物藥物研究所